根系测定方法
植物根系活力的测定方法
实验 5 植物根系活力的测定（ TTC 法）植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。
本实验练习测定根系活力的方法，为植物营养研究提供依据。
一、原理氯化三苯基四氮唑（ TTC ）是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲（ TTF ），生成的三苯甲（ TTF ）比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以 TTC 被广泛用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的 TTC 还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。
所以 TTC 还原量能表示脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
（二）试剂1. 乙酸乙酯（分析纯）。
2. 次硫酸钠（ Na 2 S 2 O 4 ，分析纯），粉末。
3. 1 ％ TTC 溶液：准确称取 TTC g ，溶于少量水中，定容到 100 mL 。
用时稀释至需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液（ 1/15 mol/L ，）。
5. 1 mol/L 硫酸：用量筒取比重的浓硫酸 55 mL ，边搅拌边加入盛有 500 mL 蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至 1000 mL 。
6. 0.4 mol/L 琥珀酸：称取琥珀酸 g ，溶于水中，定容至 100 mL 即成。
（三）仪器设备小烧杯 3 个，研钵 1 个，移液管： mL 1 支、 10 mL 1 支、 5 mL 3 支，刻度试管 6 支，分光光度计，分析天平（感量 mg ），电子顶载天平（感量 g ），温箱，试管架，药勺，石英砂适量，滤纸。
三、实验步骤1. 定性测定（ 1 ）配制反应液把 1 ％ TTC 溶液、 mol ／ L 的琥珀酸和磷酸缓冲液按1:5:4 比例混合。
（ 2 ）把根仔细洗净，把地上部分从茎基部切除。
将根放入三角瓶中，倒入反应液，以浸没根为度，置 37 ℃左右暗处放 1 ～ 3 h ，以观察着色情况，新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色，表明该处有脱氢酶存在。
试验一植物根系活力的测定
植物生理学实验指导书指导老师马红亮福建师范大学地理科学学院生态系实验一植物根系活力的测定（α-萘胺氧化法）植物根系的作用，主要有(1)对地上部的支持和固定；(2)物质的贮藏；(3)对水分和盐类的吸收；(4)合成氨基酸、激素等物质。
因此根系的活力是植物生长的重要生理指标之一。
一、实验目的通过实验，掌握用α－萘胺法测定植物根系活力的原理和技术。
二、实验原理植物的根系能氧化吸附在根表面的α─萘胺，生成红色的α—羟基—1—萘胺，沉淀于有氧化力的根表面，使这部分根染成红色，其反应如下：根对α-萘胺的氧化能力与其呼吸强度有密切关系。
日本人相见、松中等认为α-萘胺氧化的本质就是过氧化物酶的催化作用，该酶的活力愈强，对α—萘胺的氧化力也愈强，染色也愈深。
所以，可根据染色深浅定性地判断根的活力；也可测定溶液中未被氧化的α-萘胺量，计算已被氧化的α-萘胺量确定根系活力的大小。
在酸性环境中对氨基苯磺酸与亚硝酸盐先反应，再和α-萘胺作用生成红色的偶氮染料，可在510nm比色测定α-萘胺含量。
其反应如上。
三、实验仪器药品分光光度计，分析天平，烘箱，三角烧瓶，量筒，移液管，刻度试管Α-萘胺溶液：称10mg α-萘胺，先用2ml左右的95%酒精溶解，然后加水到200ml，成50μg/ml的溶液。
0.1mol/L磷酸缓冲液，pH7.0（见附表2）A液：0.2mol/L磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O 27. 8g配成1000ml）。
B液：0.2mol/L磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O53.65g或Na2HPO4·12H2O71.7g 配成1000ml）。
用时取A液39ml，B液61ml混合，稀释至200ml即成。
1%对氨基苯磺酸：将1g对氨基苯磺酸溶解于100ml 30%的醋酸溶液中。
亚硝酸钠溶液：称10mg亚硝酸钠溶于100ml水中。
四、实验操作步骤定量测定(1) 挖出水稻植株，并用水洗净根系上的泥土，剪下它的根系，再用水洗，待洗净后用滤纸吸去根表面的水分，称根称2g根放在100ml三角烧瓶中。
植物根系的测定实验报告
一、实验目的1. 了解植物根系的基本结构和功能。
2. 掌握植物根系活力的测定方法。
3. 分析不同环境因素对植物根系活力的影响。
二、实验原理植物根系是植物的重要组成部分，其主要功能是吸收水分和养分，固定植物体，同时还有合成和运输营养物质的作用。
植物根系活力是指根系对外界环境变化的适应能力和吸收、合成、运输等功能的表现。
本实验采用氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定植物根系活力，通过观察根系在TTC溶液中的还原反应，来评估根系的活力。
三、实验材料与方法1. 实验材料：小麦、玉米、大豆种子；TTC溶液；蒸馏水；培养皿；剪刀；镊子；电子天平；显微镜等。
2. 实验方法：（1）种子萌发：将小麦、玉米、大豆种子分别浸泡在蒸馏水中，置于培养皿中，保持适宜的温度和湿度，待种子萌发。
（2）根系活力测定：将萌发的植物幼苗取出，用剪刀剪去地上部分，用蒸馏水清洗根系，去除泥土。
（3）TTC染色：将清洗干净的根系浸泡在TTC溶液中，置于黑暗处，恒温培养箱中培养24小时。
（4）根系活力测定：将染色后的根系取出，用蒸馏水清洗，去除多余的TTC溶液。
（5）显微镜观察：将清洗干净的根系置于显微镜下，观察根系活力。
四、实验结果与分析1. 小麦根系活力测定结果：小麦根系在TTC溶液中染色后，呈现出明显的红色，说明小麦根系具有较强的活力。
2. 玉米根系活力测定结果：玉米根系在TTC溶液中染色后，呈现出淡红色，说明玉米根系活力较弱。
3. 大豆根系活力测定结果：大豆根系在TTC溶液中染色后，呈现出暗红色，说明大豆根系活力较强。
4. 不同环境因素对根系活力的影响：通过比较不同处理条件下植物根系活力，发现低温、干旱等逆境条件下，植物根系活力明显降低，说明植物根系对环境变化具有一定的适应性。
五、实验结论1. 植物根系活力是植物对外界环境变化适应能力的重要体现。
2. 小麦、大豆根系活力较强，玉米根系活力较弱。
3. 植物根系对低温、干旱等逆境具有一定的适应性。
实验四 根系活力的测定
实验四根系活力的测定一、意义根系是植物对水分和矿质营养的主要吸收器官，同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官，因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等具有重要的实际意义。
在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代还量（CEC）、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。
二、测定原理TTC（2，3，5－氯化三苯基四氮唑）的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲月朁（TTF）。
具有活力的组织和细胞在呼吸作用中，脱氢酶催化底物氧化脱氢产生NADH、NADPH 等还原性物质，当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF（红色），组织或细胞被染成红色。
死细胞无呼吸，不发生这样的氧化还原反应。
应用这一原理，可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉、根系等的活力。
植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强；而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。
还原强度（即根系活力强弱）可用TTF的生成量来表示。
TTF在485 nm 处有吸收峰，用乙酸乙酯提取后测定OD485，通过标准曲线计算TTF的生成量，用单位时间内单位根重产生的TTF表示根系的活力。
三、仪器设备1.分光光度计；2.分析天平（感量0.1mg）；3.托盘天平（感量0.1 g）；4.温箱；5.研钵：1套；6．4 cm漏斗：2 个；7.量筒10 mL：1 个；8.刻度移液管：0.5 mL、2 mL、5 mL；9．10 mL容量瓶（或10 mL具塞刻度试管）：8个；10．试管架：1 个；11.石英砂适量；12.高型称量瓶（30×60 mm）：2 个。
四、试剂1.乙酸乙酯（分析纯）；2.连二亚硫酸钠（Na2S2O4），分析纯，粉末；3．1 %TTC溶液：准确称取TTC 1.0000 g，溶于少量水中，定容到100 mL，用时稀释至需要浓度；4．0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液；5．1 mol ·L -1 硫酸：用量筒取比重1.84的浓硫酸55 mL，边搅拌边加入盛有500 mL蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至1000 mL；6．0.4 mol ·L -1琥珀酸：称取琥珀酸4.72 g，溶于水中，定容至100 mL。
实验植物根系活力的测定
实验植物根系活力的测定植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。
本实验学习测定根系吸收面积和活力的方法。
、根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定【原理】根据植物矿质吸收的理论，植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性，并假定这时在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层，因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。
常用甲烯蓝作为被吸附物质，它的被吸附量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。
已知1mg甲烯蓝成单分子层时所占面积为 1.1m2,据此即可求出根系的总吸收面积。
当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而继续吸附甲烯蓝。
从后一吸附量求出活跃吸收面积，可作为根系活力指标。
【仪器与用具】分光光度计1台；100ml烧杯3只；50或100ml量筒1个(依根系大小而定)；吸量管1ml 1支，10ml 1支；试管(15 X150mm) 10支；容量瓶1000ml 1个，100ml 1个；吸水纸适量；试管架1个。
【试剂】0.0002mol/L甲烯蓝溶液：精确称取74.8mg甲烯蓝(C16H18N3SCI • 3H2O),加水溶解，定容至1000ml。
此溶液每ml含甲烯蓝0.0748mg。
0.010mg/ml的甲烯蓝溶液：用刻度吸管吸取0.0002mol/L甲烯蓝13.37ml定容至100ml, 摇匀即成。
【方法】1.植物材料的准备本实验最好采用水培玉米根或砂培植物，以获得完整而无损伤的根系。
系发达，是较好的材料。
如无水培、砂培试材，也可用盆栽植物，用水将盆土仔细冲净后使用。
田间栽培的材料因不可能无损地挖出全部根系，最好避免在正式试验中使用。
2.甲烯蓝溶液标准曲线的制作取试管7支编号，按表14-1次序加入各溶液，即成甲烯蓝系列标准液。
以第1管(水)为参比在分光光度计下比色，取波长660nm,读出光密度，以甲烯蓝浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘成标准曲线。
2014 根系活力测定(4种)
2. TTC又名红氮四唑，标准氧化还原电位为-80mv。 3. 三苯基甲腙（TTF triphenyl formazan）红色 4. TTC是用HCl配制的，当它溶于水中，pH为3~5，因此要
加入等体积的0.1M pH7.5的磷酸缓冲液（该实验用的为 1/15）。这样反应液的pH为6.8左右。如不用，TTC反应 液过酸，会杀死根。另外TTC加磷酸缓冲液后要避光，最 好临时配制使用，在暗处保存时间要短。否则见光会变红， 影响反应的准确性。
在试管中加入95%乙醇至5 mL刻度线 ，沸水水浴抽提10 min，冷却后用95%乙醇定容至5mL刻度线 （如果颜色深可 以增加体积，以便比色，两个处理定容体积一致），溶液混 匀后，在530 nm处测定吸光值（水为空白比色）。根据OD 值计算根系相对活力（B÷A) ×100%。
2. Evans blue ： A、B两组分别0.3 g根尖段放入15ml试管中 （标号为EA、EB），加入6 mL0.125％ Evans blue 染色液 染色，15min后将Evans blue染色液倾倒回公用烧杯（回 收！！），随后用水充分洗净根系表面色素（冲洗3-5次）。
实验原理
1. TTC法：
氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准的氧化还原色素， 其氧化态无色并溶于水，还原态则是不溶于水的三苯 基甲腙（TTF）红色物质，它在空气中不会自动氧化、 相当稳定。根系细胞中脱氢酶（如琥珀酸脱氢酶） （或活细胞的NADH，NADPH）可பைடு நூலகம்为TTC的氢供体， 从而将TTC还原为TTF。外加琥珀酸可增强TTC的还原。
3. FDA方法※
FDA ：二乙酸荧光素（Fluoresencein diacetate，母液为 5 mg/mL的FDA DMSO溶液，储存在0℃） FDA是一种非极性酯类物质，可以通过质膜进入细胞质， 在细胞内酯酶的作用下水解脱去酯基团后在490-500 nm 激发光下产生绿色荧光。 FDA （2µg/mL）被普遍用于细胞活力的测定 活力低的细胞具有较低的酯酶活性，因此绿色荧光较弱
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告一、引言根系是植物的重要组成部分，对植物的生长和发育起着重要的影响。
因此，准确测定根系活力对于研究和监测植物生长状态、生理代谢以及适应环境的能力具有重要意义。
TTC法是一种常用且经典的根系活力测定方法，可以通过测定细胞色素酶的活性来反映细胞线粒体的代谢能力。
本综述将详细介绍TTC法的原理、实验步骤、结果分析以及存在的局限性，旨在为相关科研人员提供参考和指导。
二、原理TTC法通过将三氯化四氯化三苯巴比妥酸（TTC）还原为有色产物，间接测定细胞线粒体氧化还原酶活性，从而反映细胞的代谢能力。
在活力高的细胞中，细胞色素酶能将TTC迅速还原为甲基砌和氯化苯胺，溶液呈现出红色。
而在活力低或死亡的细胞中，由于细胞色素酶活性降低或丧失，不能将TTC完全还原，溶液呈现淡红色或无色。
三、实验步骤1. 实验前准备：准备好所需材料和试剂，如TTC、缓冲液、植物根系样品等。
2. 根系样品处理：将根系样品取出，并进行清洗和去皮处理。
3. 根系活力测定：将处理后的根系样品放入含有TTC和缓冲液的培养皿中，然后放入恒温培养箱中，在适宜的温度下进行静置培养。
4. 反应终止：在适当时间后，将培养皿取出，加入适量酸性水溶液终止反应。
5. 读取吸光度：使用分光光度计读取反应溶液的吸光度值，得到各组的吸光度数据。
6. 结果分析：根据吸光度数据，计算出样品的根系活力值。
四、结果分析通过TTC法测定的根系活力实验结果，可以从吸光度值得出根系活力的信息。
活力高的根系样品，其吸光度值较高，溶液呈现出深红色；活力低或死亡的根系样品，吸光度值较低，溶液呈现淡红色或无色。
同时，根据根系活力值的大小可以进行不同样品之间的比较，从而判断不同处理或条件对根系活力的影响。
五、存在的局限性尽管TTC法是一种常用的根系活力测定方法，但其也存在一些局限性。
首先，TTC法只能反映细胞线粒体氧化还原酶活性，对其他代谢能力不能进行直接测定。
ttc法测定根系活力实验报告
ttc法测定根系活力实验报告实验报告：TTC法测定根系活力一、实验目的通过TTC法测定根系的活力，了解植物根系对外界条件的适应能力以及对不同环境因素的响应。
二、实验原理TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)法可用于测定细胞线粒体等颗粒物质的活力。
根在呼吸作用下，产生的CO2可以和TTC反应生成甲烷基红色染色物质，反应方程式如下：TTC + 2e- + 2H+ → 染色物质染色物质色深程度与细胞活力成正比，因此可以用染色物质的颜色来评估样品的活力。
三、实验步骤1. 准备材料：TTC试剂、木瓢、淀粉液、滴定管、97%乙醇、植物根系样品。
2. 切取根系样品，在温水中清洗后，将样品放置于淀粉液中进行苏木素染色。
清洗样品的目的是除去外表的污垢和细胞内的胶质物，以避免影响反应的准确性。
在样品染色前，淀粉液要先煮沸，以破坏淀粉酶。
3. 若样品过大，可以在放入淀粉液前用刀片切成较小片段。
4. 取出染色后的样品，用纸巾吸干淀粉液。
避免在植物根系上留下过多的染料，以免干扰实验结果。
5. 将植物根系样品放入烟花瓶内，并加入0.1%TTC试剂，再加入适量的滴定水保持水位2cm左右。
盖住烟花瓶口，避免空气进入。
6. 放置到37℃恒温实验箱中培养30分钟后，加入5～10mL的1N HCl，使混合液呈现明显的色泽变化。
7. 用滴定管加入97%乙醇混合液，振荡均匀。
8. 在另一试管中取相同量的HCl和TTC，作为对照。
9. 用比色计或分光光度计测定样品和对照试管的吸光度值，计算出样品的活力。
四、实验结果本次实验得出了样品的活力，数据如下表所示（数据为典型数据，仅供参考）：根系样品过氧化氢消耗量（mg）活力（%）样品1 3.2 68样品2 2.5 57样品3 3.8 76五、结论通过TTC法测定根系活力，我们可以对植物根系对外界条件的适应能力以及对不同环境因素的响应有一个更加全面的了解。
本次实验得出的活力数据，说明样品的抗逆能力较强，在不同环境下能够保持一定的生命活力。
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根系氧化还原力的测定
根系氧化还原力与呼吸作用有着密切的关系，它是根系活力的重要表现。
α-萘胺能被根系所氧化，当根系的氧化力增大时，有氧呼吸旺盛，吸收养分的能力也增强，所以对α-萘胺的氧化力可作为根系活力的重要指标。
1．方法原理
吸附在根表面的α-萘胺会被根系所氧化，生成红色的2-羟基-1-萘胺而沉淀于有氧化力的根的表面，使这部分根染成红色。
据认为该反应是在过氧化物酶的催化下进行的，该酶的活力愈强，对α-萘胺的氧化力也愈强，染色也愈深。
故可根据根表面染色的深浅，定性的判断根的活力。
定量测定是根据α-萘胺与根系接触一定时间后α-萘胺量的减少量来确定。
α-萘胺在酸性环境中与对氨基苯磺酸和亚硝酸盐作用生成红色的偶氮燃料，就可以用比色法来测量α-萘胺含量。
2．仪器药品
分光光度计；天平（1/万）；烧杯（500ml）；移液管（10ml,2ml,1ml）；刻度试管（20ml）；试剂瓶（60ml或100ml）；试管架；容量瓶（100和1000ml）；量筒；三角瓶（100ml）；黑蜡光纸；滤纸；棕色瓶。
1)40ppmα-萘胺：准确称取0.1gα-萘胺溶于50ml水，微微加热溶解后定容至100ml，成
1000ppm母液贮于棕色瓶中暗处保存。
用前稀释25倍。
2)1%对氨基苯磺酸溶液：称1g对氨基苯磺酸溶于100ml30%乙酸中。
3)100ppm亚硝酸钠溶液：称0.1g亚硝酸钠溶于1000ml蒸馏水中。
4)067mol.L-1的磷酸缓冲液（pH7）：称取分析纯磷酸氢二钠11.864g溶于1000ml蒸馏水
中，为A液。
称取磷酸二氢钾9.073g溶于1000ml蒸馏水中为B液，用时A液60ml,B 液40ml混合而成。
3．测定方法
定性观察：取20ppmα-萘胺α-萘胺溶液500ml加入烧杯，把带有地上部的根（离体根染色程度降低）浸入其中，并在烧杯周围用黑纸包住，在室温下静置24-26小时后观察染色程度。
新根和稍老的侧根都能染成分红色。
变黑根及烂根不染色。
定量测定：
（1）绘制α-萘胺标准曲线：用40ppmα-萘胺溶液配成5、10、20、30、40ppm的系列溶液，取6支20ml的刻度试管编号，1号加1ml水和1ml磷酸缓冲液为对照。
2-6号分别加入不同浓度的α-萘胺溶液各1ml，磷酸缓冲液1ml。
然后再向各管加入10ml蒸馏水、1%对氨基苯磺酸1ml和100ppm亚硝酸钠溶液1ml，混匀置室温（20-25℃）下5分钟使之显色。
最后加蒸馏水使整个容积为20ml。
摇匀后20-60分钟内在510nm波长下测定光密度，以α-萘胺含量（ppm即ug.ml-1）为横坐标，以光密度为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）将待测根系洗净吸干附着水称取1g放入100ml三角瓶中，加40ppmα-萘胺溶液和磷酸缓冲液各25ml混匀。
（3）静置5-10分钟后（根的迅速吸附已经完毕），从瓶中取出2ml 溶液放入20ml刻度试管。
将其余的溶液塞好瓶塞后，放在振荡器上，在25℃下振荡3-6小时（如无振荡器时要
在反应期间，定时的摇动）。
反应时间完毕后再取2 ml溶液放入另一刻度试管。
因为α-萘胺溶液会自动氧化，同时要同时做无限的同样操作的空白实验（根样最好是用整根；用切碎的根，α-萘胺的氧化量会意外增加）。
（4）在上述两次及空白试验所吸取的2ml测定液中，各加入10ml蒸馏水，混匀后再加入1%对氨基苯磺酸1ml和100ppm的亚硝酸钠溶液1ml混匀，置于室温下5分钟使之显色，然后加入蒸馏水，使整个容积为20ml，在20-60分钟内用510nm波长下进行比色，读取光密度，由标准曲线查出α-萘胺含量。
（5）结果计算
根系对α-萘胺的生物氧化量Y（ug.g-1.hr-1）按下式进行计算
Y=【（A-B）-（C-D）】×E/t.w
式中：
A------第一次取液测定值（ug.ml-1），作为开始值，这是根表面氧化物质的氧化作用而不是根的酶促反应；
B------第二次取液测定值，是根的酶促反应后（如3小时）剩余的α-萘胺浓度（ug.ml-1）。
A-B---即α-萘胺氧化总量；
C------第一次空白测定值（ug.ml-1）；
D------第二次空白测定值；
C-D---即α-萘胺自发氧化量；
E------稀释倍数24（48÷2）；
t-------3小时
w------1g样品
根系表面积的测定
测定根系表面积的方法很多，可归纳为直接测量法和间接测量法两类。
直接测量法是测定大量的单根的平均直径以及测量每个样品的总根长，按s=∏RL（R：直径；L：总长）公式来估算根系表面积。
此法工作量大，精度差。
间接测量法有染色液蘸根法、重量法、滴定法和叶面积仪法。
重量法是将洗净风干根浸入浓硝酸钙溶液中10秒钟后捞出，由浸根前后硝酸钙溶液的重量差做为相对值来表示根系的表面积。
滴定法是将洗净风干的根系浸入3mol.L-1的HCl溶液中（500ml）15秒钟后捞出，将根悬吊放置5分钟，除去多余的盐酸后再浸入蒸馏水（250ml）漂洗10分钟以上，取浸过根系的盐酸和水各100ml，用0.3mol.L-1的NaOH进行滴定（以酚酞为指示剂），以NaOH的滴定值（ml单位）相对表示根系的面积。
如果选用完整而已知面积的根系，即可作出标准曲线进行绝对测定。
叶面积仪法是将洗净吸干附着水的根系，浸入到0.2 mmol.L-1的甲烯蓝溶液中1.5分钟，捞出用吸水纸吸干附着溶液，将根散铺在透明塑料薄膜上成长条形注意不能重叠，再把多余的塑料薄膜折盖并夹住根系，用光电叶面积仪（如用L1-3000型叶面积仪）象测叶面积一样测定，所的测定值再乘以∏值（假定根为圆拄形），即为根系总面积。
据此认为此法对于根直径小于1mm是误差较大。
如果根系不透明时不必染色。
应用比较普遍的是染色液蘸根法，这种方法不仅可以测定总吸收面积还可以区分活跃吸收面积。
1．方法原理
根据沙比宁等的理论，认为植物根系对物质的吸收最初具有吸附的特性，并假定此时被吸附物质是以单分子层形式均匀的覆盖在根系表面。
之后在根系的活跃部分把原来吸附着的物质解吸到细胞中去，根系又可以继续吸附。
因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。
一般用甲烯蓝作为被吸附物质，其被吸附的数量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确的测出。
据沙比宁测定1mg甲烯蓝成单分子层时可覆盖1.1平方米的面积，据此可以求出根系的总吸收面积。
当根系在甲烯蓝溶液中已经达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而可以继续吸附甲烯蓝。
从后一个吸附量可求出活跃吸收面积，可作为根系活力的指标。
2．仪器药品
分光光度计；小烧杯；量筒（50ml）;移液管；容量瓶；试管；试管架；吸水纸；剪刀；镊子；0.0002mol.L-1甲烯蓝溶液：75mg甲烯蓝溶解定容至1000ml(0.075mg.ml-1)；0.01mg.ml-1甲烯蓝溶液：取0.0002 mol.L-1的甲烯蓝溶液13.4ml加水定容至100ml。
3．测定方法
（1）绘制甲烯蓝溶液标准曲线。
取7支试管编号，按下表配成甲烯蓝系列标准液：试管号 1 2 3 4 5 6 7
0.01mg.ml-1甲烯蓝液加入量（ml）0 1 2 3 4 5 6
加蒸馏水量（ml）10 9 8 7 6 5 4 甲烯蓝液浓度（mg.ml-1）0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 把各管混匀后，用分光光度计在660nm下测定光密度并绘制浓度光密度曲线。
（2）将根系洗净用吸水纸吸干表面附着水，将根浸在盛水的量筒中测定根系的体积（或用根系体积测定装置）。
（3）把0.0002mol.L-1的甲烯蓝溶液，分别倒入3个编号的烧杯中，每杯中溶液的量约10倍于根系体积，准确记下每杯的溶液用量。
（4）从量筒中取出根系，用吸水纸把水吸干，注意勿伤根系。
然后放入第一个盛有甲烯蓝溶液的小烧杯中，浸1.5分钟后立即取出，使根系上多余的甲烯蓝溶液流回到原烧杯中去。
再放入第二个小烧杯中浸1.5分钟，取出后同样使根系上多余的甲烯蓝溶液流回到原烧杯中去。
最后再浸入第三个小烧杯中1.5分钟，取出后使根系上多余液体流回到烧杯中去。
（5）从上述三个烧杯中各取出1ml甲烯蓝溶液，分别加入三个试管各稀释1-10倍，摇匀后在660nm下测定光密度，并在标准曲线上查出相应的浓度（mg.ml-1）。
再乘以稀释倍数，即为浸根后溶液的甲烯蓝浓度，如浸根后溶液浓度降低很多，也可不经稀释直接测定光密度。
（6）结果计算
总吸收面积（m2）=【（C0-C1）×V1＋（C0-C2）×V2】×1.1
活跃吸收面积（m2）=【（C0-C3）×V3】×1.1
活跃吸收面积（%）=活跃吸收面积（m2）/总吸收面积（m2）×100
比表面积=根系总吸收面积（cm2）/根的体积（cm3）
式中：C0---------------甲烯蓝溶液原浓度（0.075mg.ml-1）
C1、C2、C3---分别为1、2、3烧杯浸根后溶液的浓度（mg.ml-1）
V1、V2、V3----分别为1、2、3烧杯中加入的0.0002mol.L-1甲烯蓝溶液的体积（ml）。