SDS-PAGE分离胶配方表-及其原理之令狐采学创编之欧阳家百创编
SDS-PAGE试剂配方
SDS—PAGE电泳所用溶液：30 ％聚丙烯酰胺溶液（100 mL)丙烯酰胺（Arc）29 gN,N’—亚甲双丙烯酰胺(Bis） 1 g用双蒸水定容至100mL，过滤备用,4℃存放丙稀酰胺29。
2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。
5×Tris-甘氨酸缓冲液(1 L)Tris碱15。
1 g甘氨酸（电泳级) 94 g10 %SDS 50 mL使用时稀释5倍使用2×SDS凝胶加样缓冲液（10mL）0.5 mol/L Tris—Cl (pH 6。
8) 2 mL10%（W/V）SDS 4 mL甘油 2 mLβ—巯基乙醇 1.0 mL（DTT（二硫苏糖醇）0。
31g）溴酚兰0。
02g双蒸水0。
5 mL室温存放备用考马斯亮蓝染色液考马斯亮蓝R—250 （G—250）1。
0 g甲醇450 mL冰醋酸100 mLddH2O 450 mL0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95%乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用考马斯亮蓝脱色液（甲醇脱色液效果好,但有毒性）甲醇100 mL冰醋酸100 mLddH2O 800 mL医用酒精：冰醋酸：水=4.5：0。
5：5（V：V：V）SDS—PAGE所需溶液:A液-—30％丙稀酰胺（W/V）：丙稀酰胺29.2g，N—N-甲叉双丙稀酰胺0。
8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7。
0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。
B液——1.5mol/L Tris·HCl，pH8。
8:18.17g（9。
09g)Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约3mL(1。
5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8。
8,定容至100mL（50mL）。
C液-—1.5mol/L Tris·HCl，pH6.8:12。
1g（6.05g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约7mL （3。
sds page 原理
sds page 原理宝子，今天咱们来唠唠SDS - PAGE这个超有趣的东西的原理哈。
SDS - PAGE呢，全称是十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳。
你可以把它想象成一场超级有趣的赛跑比赛。
咱先来说说这个聚丙烯酰胺凝胶。
这凝胶就像是跑道一样，它有好多小孔洞，就像跑道上有不同的赛道一样。
这个凝胶的制作可讲究啦，是通过丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合而成的。
这些小孔洞的大小是很关键的呢，它能够对不同大小的蛋白质起到筛分的作用。
就好像在跑道上，不同的赛道适合不同速度和体型的选手一样。
大的蛋白质分子在凝胶里跑起来就比较费劲，因为它不容易穿过那些小孔，就像体型大的运动员在狭窄的赛道上不好施展一样；而小的蛋白质分子呢，就可以比较轻松地在凝胶里穿梭，就像小巧灵活的运动员可以在赛道上快速奔跑。
然后再来说说这个SDS，也就是十二烷基硫酸钠。
这可是个很厉害的小助手呢。
SDS是一种阴离子去污剂，它就像一个超级热心肠的小魔法师。
当蛋白质遇到SDS的时候，SDS就会紧紧地抱住蛋白质，给蛋白质披上一层带负电的“小外套”。
不管这个蛋白质原来带多少电荷，在SDS的作用下，每个蛋白质分子所带的电荷密度基本上就变得一样啦。
这样一来，蛋白质在电场中的移动速度就只和它的分子量大小有关了，就像在赛跑比赛里，大家都有了相同的起跑条件，就看谁的“身材”大小来决定跑的快慢了。
当我们把混合的蛋白质样品放到这个SDS - PAGE的体系里，然后加上电场。
那些被SDS包裹的蛋白质就开始跑起来啦。
在电场的作用下，带负电的蛋白质就朝着正极的方向移动。
就像一群小动物听到了某种召唤，朝着一个方向奔去。
因为不同大小的蛋白质在凝胶里移动的速度不一样，所以跑着跑着，它们就会被分开啦。
小的蛋白质跑得快，就会跑到前面去，大的蛋白质跑得慢，就会落在后面。
最后呢，我们就可以根据蛋白质在凝胶上的位置来判断它的分子量大小了。
你看，整个SDS - PAGE的过程是不是就像一场充满趣味的生物分子大冒险呢？科学家们就像这场冒险的观察者，通过这个方法来探索蛋白质这个神秘的小世界。
SDS-PAGE试剂配方
SDS-PAGE试剂配方SDS-PAGE电泳所用溶液:30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL)丙烯酰胺 (Arc) 29 gN,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis) 1 g用双蒸水定容至100mL，过滤备用，4?存放丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH 值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4?贮存。
5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L)Tris碱 15.1 g甘氨酸(电泳级) 94 g10 %SDS 50 mL使用时稀释5倍使用2×SDS凝胶加样缓冲液(10mL)0.5 mol/L Tris-Cl (pH 6.8) 2 mL10,(W/V)SDS 4 mL甘油 2 mLβ-巯基乙醇 1.0 mL(DTT(二硫苏糖醇) 0.31g)溴酚兰 0.02g双蒸水 0.5 mL室温存放备用考马斯亮蓝染色液考马斯亮蓝R-250 (G-250) 1.0 g甲醇 450 mL冰醋酸 100 mLddHO 450 mL 20.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95,乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用考马斯亮蓝脱色液(甲醇脱色液效果好，但有毒性)甲醇 100 mL冰醋酸 100 mLddHO 800 mL 2医用酒精:冰醋酸:水=4.5:0.5:5(V:V:V)SDS-PAGE所需溶液:A液——30,丙稀酰胺(W/V):丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4?贮存。
B液——1.5mol/L Tris?HCl，pH8.8:18.17g(9.09g)Tirs碱，溶于80mL(40mL)去离子水中，加入约3mL(1.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8.8，定容至100mL(50mL)。
C液——1.5mol/L Tris?HCl，pH6.8:12.1g(6.05g)Tirs碱，溶于80mL(40mL)去离子水中，加入约7mL(3.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至6.8，定容至100mL(50mL)。
sds-page分离蛋白的原理
sds-page分离蛋白的原理SDS-PAGE（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种在实验室中常用的生物化学技术。
SDS-PAGE可以用来分离蛋白质，使研究者能够研究它们的结构和功能。
SDS-PAGE的基本原理是利用电泳现象将复杂的混合物分离成单一的组分。
电泳是一种根据物质的电荷、大小和形状利用电场作用通过凝胶进行分离的方法。
SDS-PAGE是利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离蛋白质的一种方法。
蛋白质分子因其分子量和分子结构不同，在SDS-PAGE中将被分离为单独的、清晰的带状带。
这些带状带每个代表一个不同的蛋白质。
通过观察这些蛋白质带状带，可以获得蛋白质分子的相关信息，如分子量（MW）和含量。
在SDS-PAGE中，聚丙烯酰胺凝胶被用作固定相。
凝胶是通过将聚丙烯酰胺单体和交联剂混合后形成的。
这种凝胶可以形成微孔和孔径，使凝胶能够分离不同大小的蛋白质分子。
在准备样品时，蛋白质分子通常会在缓冲液中添加SDS (十二烷基硫酸钠）。
SDS是一种表面活性剂，可以使蛋白质分子带有负电荷并具有等电点（pI）价值。
当SDS蛋白质混合物被加入聚丙烯酰胺凝胶电泳电场中时，它们会在电泳作用下向负极移动。
这是因为凝胶的孔径大小使得分子量大的蛋白质分子移动缓慢，分子量小的蛋白质分子移动较快。
SDS-PAGE还需要在样品上和凝胶中加入还原剂和染色剂。
还原剂可以断裂蛋白质分子的二硫键，并使氨基酸带上负电，而染色剂则通过与蛋白质分子中的某些氨基酸或特定结构相互作用来着色。
这些特殊的化学试剂可以使蛋白质更容易在凝胶上定位，并且可以观察到蛋白质分子的相对含量。
总的来说，SDS-PAGE是一种有效的蛋白质分离技术，可以帮助生物学家了解蛋白质分子的研究方向。
任何要研究或描绘蛋白质质量、酸碱平衡、多肽结构或寻找抗原、肽链或酶活性的科学家都需要使用这种技术。
sds-page的分离原理
sds-page的分离原理
SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种常用的蛋白质分离技术，其分离原理主要基于蛋白质的大小和电荷差异。
具体而言，SDS-PAGE包括以下几个步骤：
准备样品：将待分离的蛋白质样品加入含有SDS（十二烷基硫酸钠）和还原剂（如2-巯基乙醇）的缓冲液中。
SDS可以使蛋白质带负电荷，并且通过断裂蛋白质的二级和三级结构，使其获得线性结构以便于分离。
加载样品：将经过处理的样品加载到聚丙烯酰胺凝胶的样品孔中。
电泳：应用电场使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中迁移，通常正极位于凝胶底部，负极位于顶部。
由于SDS提供了负电荷，蛋白质在电场作用下向阳极迁移。
同时，凝胶的孔径大小可以根据需要进行调整，以便不同大小的蛋白质能够得到有效分离。
分离：由于蛋白质的迁移速度与其分子量呈反比关系，较小的蛋白质在电泳过程中移动得更快，而较大的蛋白质则移动得较慢。
这样，在电泳过程中，蛋白质会被分离成一个个带状区域，形成所
谓的蛋白质条带。
可视化：完成电泳后，可以使用染色剂（如Coomassie蓝染剂）对凝胶进行染色，使蛋白质条带可见。
通过测量蛋白质条带的迁移距离和参考标准物质的迁移距离，可以计算出待分离蛋白质的相对分子量。
总之，SDS-PAGE利用SDS和电泳技术，根据蛋白质的大小和电荷差异，实现了对蛋白质的分离与分子量的估计。
sds-page的分离原理
sds-page的分离原理标题：SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）的分离原理SDS-PAGE，全称为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是一种广泛应用在生物化学和分子生物学领域中，用于分离、测定蛋白质分子量的重要技术手段。
其主要依据的是蛋白质在电场中的迁移率与它们的相对分子质量之间的关系进行分离。
**一、SDS的作用**SDS，即十二烷基硫酸钠，是一种阴离子表面活性剂，它能与蛋白质结合形成SDS-蛋白质复合物。
在这种复合物中，SDS的疏水尾部包裹住蛋白质分子，使得蛋白质原有的空间构象被破坏，所有的蛋白质都被线性化，并且每分子SDS覆盖大约两个氨基酸残基。
这样，蛋白质的净电荷就被SDS的负电荷所掩盖，因此，所有SDS-蛋白质复合物都带有相同密度的负电荷，且其电荷密度与蛋白质分子大小无关，这就消除了蛋白质本身电荷和形状对迁移速率的影响，使蛋白质的迁移速率仅取决于其分子量大小。
**二、聚丙烯酰胺凝胶的选择性分离**聚丙烯酰胺凝胶具有网络结构，孔径大小可通过改变单体浓度和交联度来调控。
在SDS-PAGE中，小分子量的蛋白质由于更容易进入凝胶的微孔结构中，迁移路程较长，而大分子量的蛋白质则因体积较大，不能深入微孔结构内部，从而迁移路程较短。
因此，在恒定电场的作用下，蛋白质按照分子量大小实现从上到下的有序分离。
**三、电泳过程及结果解读**在SDS-PAGE过程中，蛋白质样品在电场作用下向正极移动，经过一定时间后，根据迁移距离的不同，会在凝胶上形成一系列清晰的条带。
条带的位置与对应的蛋白质分子量之间存在一定的数学关系，通过已知分子量的标准蛋白质参照系统，可以精确地计算出未知蛋白质的分子量。
综上所述，SDS-PAGE的分离原理主要基于SDS对蛋白质进行变性及电荷标准化处理，以及聚丙烯酰胺凝胶对不同分子量蛋白的选择性滞留作用，实现了对复杂蛋白质混合物的高效、准确分离和定量分析。
sds page原理
sds page原理
SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质分离和分析技术。
它的原理基于蛋白质的电荷和分子质量差异。
SDS-PAGE的原理如下：
1. 蛋白质样品：将待分析的蛋白质样品在含有SDS（十二烷基硫酸钠）的缓冲液中加热处理，使蛋白质变性为线性形式，并与SDS以1:1的比例结合。
SDS 能够给蛋白质提供一个负电荷，使蛋白质呈均一的负电荷比例。
2. 准备Gel：制备一个由聚丙烯酰胺和交联剂组成的Gel胶。
在聚丙烯酰胺中添加过氧化物，使其发生聚合反应。
这样形成了一系列大小孔隙的网状结构。
3. Gel电泳：将含有SDS的蛋白质样品通过吸附在Gel上的孔隙中。
加上直流电压，在电场作用下，蛋白质会随着电泳迁移。
负电荷较多的蛋白质迁移较快，负电荷较少的蛋白质迁移较慢，从而实现了蛋白质的分离。
4. 染色和可视化：经过电泳分离后，使用染色剂（如Coomassie蓝）对蛋白质进行染色，目的是使蛋白质能够在胶上可视化。
通过比较样品和标记的分子量标准品的黑色条带，可以测量和估算待测蛋白质的分子量。
总结：SDS-PAGE通过对蛋白质样品中的蛋白质进行处理和分离，使其呈现出
电荷和分子质量的差异性。
这一方法在蛋白质的分子量分析、鉴定和纯化过程中被广泛应用。
SDSPAGE所有详细试剂配方
SDSPAGE所有详细试剂配方SDS-（聚丙烯酰胺凝胶电泳）是一种常用于蛋白质分析的实验技术。
该技术通常涉及到几种试剂，如胶溶液、缓冲液、电泳缓冲液、染色溶液等。
下面是SDS-常见的试剂配方及其详细说明。
一、胶溶液配方：1. 30%（w/v）丙烯酰胺（acrylamide）溶液- 在称量瓶中称取30g丙烯酰胺，并用蒸馏水调至100ml。
搅拌溶解直至均匀。
-这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。
2. 响应稀释液（Response diluent）-用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。
-可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应稀释液。
二、缓冲液配方：1. 离子化追踪剂（Tris-Glycine running buffer）-用于凝胶电泳盒中电解质的运行。
-配方为：3g Tris base （pH 8.8）14.4g glycine将固体溶解于1L蒸馏水中，并调整pH至8.8三、电泳缓冲液配方：1. 离子化追踪剂（Tris-Glycine SDS running buffer）-用于在电泳过程中提供离子追踪剂。
-配方为：30g Tris base144g glycine10gSDS将固体溶解于1L蒸馏水中。
2. 加速剂（stacking gel buffer）- 用于形成凝胶中的聚集堆积层（stacking layer）。
-配方为：30g Tris base （pH 6.8）144g glycine1gSDS将固体溶解于1L蒸馏水中，并调整pH至6.8四、样品处理缓冲液配方：1. 样品加载缓冲液（sample loading buffer）-用于处理蛋白样品，以便在凝胶上获得良好的分离效果。
-配方为：0.5M Tris-HCl（pH 6.8）20%（v/v）甘油10%（w/v）SDS0.05%（w/v）溴酚蓝（bromophenol blue）旋转混合并加入蛋白样品。
五、凝胶染色溶液配方：1. 吸附性染色剂（Coomassie blue staining solution）-用于染色聚丙烯酰胺凝胶上分离的蛋白质。
sds-page凝胶分离蛋白原理
sds-page凝胶分离蛋白原理
SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质电泳分离技术。
其原理主要包括以下几个步骤：
1. 凝胶制备：通过混合聚丙烯酰胺（Polyacrylamide）单体和交联剂，形成一个可控制孔径的三维网状结构的凝胶。
2. 样品处理：将待测蛋白样品加入含有SDS和还原剂（通常是β-巯基乙醇）的缓冲液中，在高温条件下进行蛋白变性和解聚，使蛋白质的二级结构和三级结构解开，同时在蛋白质上附加负电荷。
3. 装载样品：将变性的蛋白样品通过吸附或卷筒法装载到预先形成的凝胶中。
4. 电泳：将装载样品的凝胶置于一个带正电极和负电极的电泳槽中，施加电场使蛋白质在凝胶内移动。
由于SDS在蛋白质中均匀包裹，使所有蛋白质表面均负电荷，蛋白质在电场中的迁移速率只与电场强度和蛋白质的分子量成反比。
5. 可视化：经过一段时间的电泳后，各个蛋白质按照其分子量的大小被分离在凝胶上。
可以通过染色方法（例如银染或荧光染色）将蛋白质可视化，从而得到蛋白质的分离图谱。
通过SDS-PAGE可以分离不同分子量的蛋白质，借此可以定量和比较不同样品中蛋白质的含量以及分子量等特性。
SDSPAGE试剂配方
SDS-PAGE电泳所用溶液：30 %聚丙烯酰胺溶液(100 mL)丙烯酰胺(Arc) 29 gN,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis) 1 g用双蒸水定容至100mL，过滤备用，4℃存放丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。
5×Tris-甘氨酸缓冲液(1 L)Tris碱15.1 g甘氨酸(电泳级) 94 g10 %SDS 50 mL使用时稀释5倍使用2×SDS凝胶加样缓冲液(10mL)0.5 mol/L Tris-Cl (pH 6.8) 2 mL10％(W/V)SDS 4 mL甘油 2 mLβ-巯基乙醇 1.0 mL(DTT（二硫苏糖醇）0.31g)溴酚兰0.02g双蒸水0.5 mL室温存放备用考马斯亮蓝染色液考马斯亮蓝R-250 （G-250） 1.0 g甲醇450 mL冰醋酸100 mLddH2O 450 mL0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95％乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用考马斯亮蓝脱色液（甲醇脱色液效果好，但有毒性）甲醇100 mL冰醋酸100 mLddH2O 800 mL医用酒精：冰醋酸：水=4.5：0.5：5(V：V：V)SDS-PAGE所需溶液:A液——30％丙稀酰胺（W/V）：丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。
B液——1.5mol/L Tris·HCl，pH8.8：18.17g（9.09g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约3mL(1.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8.8，定容至100mL（50mL）。
C液——1.5mol/L Tris·HCl，pH6.8：12.1g（6.05g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约7mL(3.5mL)以上的浓盐酸调节pH 值至6.8，定容至100mL（50mL）。
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欧阳家百创编
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SDSPAGE电泳原理：
欧阳家百（2021.03.07）
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N，N’—
亚甲基双丙烯酰胺（简称Bis）在催化剂作用下，聚合交联而成的
具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰
胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的
不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离
纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只
分离出一条区带。
SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水
键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负
电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天
然的电荷差异。因此，各种蛋白质SDS 复合物在电泳时的迁移
率，不再受原有电荷和分子形状的影响，而只是棒长的函数。这
种电泳方法称为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（简称SDS—
PAGE）。由于SDSPAGE 可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因
素除去或减小到可以略而不计的程度，因此常用来鉴定蛋白质分
离样品的纯化程度，如果被鉴定的蛋白质样品很纯，只含有一种
具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白
质，那么SDS—PAGE 后，就只出现一条蛋白质区带。
TEMED：通过催化过硫酸铵形成自由基而加速丙烯酰胺与双
丙烯酰胺的聚合。
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过硫酸铵（AP）：提供驱动丙烯酰胺与双丙烯酰胺所必须的
自由基。
SDS—PAGE 可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系
统。本实验采用垂直板状不连续系统。所谓“不连续”是指电泳体系
由两种或两种以上的缓冲液、pH 和凝胶孔径等所组成。
1.蛋白样品浓缩效应
在不连续电泳系统中，含有上、下槽缓冲液(Tris—Gly，
pH8.3)、浓缩胶缓冲液(Tris—HCl，pH6.8)、分离胶缓冲液(Tris—
HCl，pH8.8)，两种凝胶的浓度(即孔径)也不相同。在这种条件
下，缓冲系统中的HCl 几乎全部解离成Cl－，两槽中的Gly (pI＝
6.0，pK a=9.7)只有很少部分解离成Gly 的负离子，而酸性蛋白质
也可解离出负离子。这些离子在电泳时都向正极移动。C1—速度
最快(先导离子)，其次为蛋白质，Gly 负离子最慢(尾随离子)。由
于C1—很快超过蛋白离子，因此在其后面形成一个电导较低、电
位梯度较陡的区域，该区电位梯度最高，这是在电泳过程中形成
的电位梯度的不连续性，导致蛋白质和Gly 离子加快移动，结果
使蛋白质在进入分离胶之前，快、慢离子之间浓缩成一薄层，有
利于提高电泳的分辨率。
2.分子筛效应
蛋白质离子进入分离胶后，条件有很大变化。由于其pH 升高
(电泳进行时常超过9.0)，使Gly 解离成负离子的效应增加；同时
因凝胶的浓度升高，蛋白质的泳动受到影响，迁移率急剧下降。
此两项变化，使Gly 的移动超过蛋白质，上述的高电压梯度不复
欧阳家百创编
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存在，蛋白质便在一个较均一的pH 和电压梯度环境中，按其分子
的大小移动。分离胶的孔径有一定的大小，对不同相对分子质量
的蛋白质来说，通过时受到的阻滞程度不同，即使净电荷相等的
颗粒，也会由于这种分子筛的效应，把不同大小的蛋白质相互分
开。
SDSPAGE电泳胶配制：
分离胶（12%）
4ml 8ml 10ml
H2O 1.32ml 2.64 ml 3.3ml
Acr/Bis(30% ) 1.6ml 3.2 ml 4.0ml
1.5M TrisHCl(pH8.8) 1.0ml 2.0ml 2.5ml
SDS(30%) 40μl 80μl 100μl
AP(10%) 40μl 80μl 100μl
TEMED 1.6μl 3.2μl 100μl
水封30分钟
浓缩胶（5%）
2 ml 4 ml 5 ml
H2O 1.36 ml 2.72 ml 3.4 ml
Acr/Bis(30% ) 0.33ml 0.66 ml 0.83ml
1.0M TrisHCl(pH6.8) 0.25 ml 0.5 ml 6.3ml
SDS(30%) 20μl 40μl 50μl
AP(10%) 20μl 40μl 50μl
TEMED 2.0μl 4.0μl 5.0μl
SDSPAGE试剂配制：
试剂名称 配制方法 备注
30% Acr/Bis
29%（w/v）丙烯酰胺、1%（w/v）N,N亚甲双丙烯酰胺、一般配置100ml，称重Acr 29g，Bis 1g，加温热的去离子水100ml，溶解 室温，藏于棕色瓶子，几个月需要
重新配制。具有强神经毒性，易吸
附于皮肤，配置是应带面具和手
套。
1.5M TrisHCl(pH8.8)
1.5M/L,一般配置100ml，称重
23.6g，加去离子水100毫升，溶解
须用Ttis碱，用HCl调节pH
1.0M TrisHCl(pH6.8)
1.0M/L,一般配置100ml，称重
15.8g，加去离子水100毫升，溶解
须用Ttis碱，用HCl调节pH
10% SDS
10%（w/v），一般配置100ml，称重10g，加去离子水100ml，溶解 不同厂家的SDS相差较大，建议用
同一家的统一级别的试剂
10% 过硫酸铵(AP)
10%（w/v），称重10g，加去离子水100ml，溶解 过硫酸铵容易分解，建议隔周配置
存于4℃冰箱或者分装200μl，存
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于20℃
TEMED
Tris甘氨酸电泳缓冲
液
5×缓冲液：25mmol/L Ttis碱，
250mmol/L甘氨酸（电泳级，
pH8.3），0.1%SDS 配置：900ml去离子水，加15.1g Ttis碱，94g甘氨酸，50ml的10%（w/v）SDS溶液，补去离子水至1000ml 5×缓冲液：去离子水以1:4稀释后
为1×的缓冲液，可以重复使用3
次左右