腺苷 A1受体敲除小鼠戊四氮点燃后脑组织病理形态学变化
HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响
HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响闫焕利;阴怀清;杜洪;范泽卫【摘要】目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 及其抑制剂2-甲氧基雌二醇(2ME2)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响.方法将120只新生7 d龄Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=8)、缺氧缺血模型组(HIBD组,n=56)、2ME2干预组(2ME2组,n=56),后两组采用Rice法建立模型后,根据断头取脑的时间不同又分为3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h和7 d7个亚组.应用HE染色观察脑组织的病理变化,免疫组化技术检测HIF-1α、Bax、Bcl-2的表达,TUNEL法计数脑细胞凋亡.结果 HE染色显示2ME2干预后脑组织的损伤减轻;免疫组化显示:HIF-1α在HIBD组于模型制备后3 h升高,12 h达高峰,之后下降,2ME2组表达趋势和HIBD组相同,表达水平显著下降.与HIBD组比较,2ME2组各时间点的Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低,TUNEL标记的阳性细胞数明显减少.结论在新生大鼠缺氧缺血急性期使用2ME2抑制HIF-1α的表达,引起Bax/ Bcl-2表达量比值降低,凋亡细胞数目减少,改善脑损伤.【期刊名称】《中西医结合心脑血管病杂志》【年(卷),期】2012(010)008【总页数】4页(P977-980)【关键词】缺氧缺血性脑损伤;缺氧诱导因子-1α;2-甲氧基雌二醇;Bax;Bcl-2;细胞凋亡【作者】闫焕利;阴怀清;杜洪;范泽卫【作者单位】山西医科大学,030001;山西医科大学第一医院,030001;山西医科大学第一医院,030001;山西医科大学第一医院,030001【正文语种】中文【中图分类】R651缺氧／缺血性脑损伤（hypoxia－ischemia brain damage，HIBD）是新生儿时期最常见且严重的神经系统损伤，其发病机制至今不明，目前缺乏有效的治疗方法。
丁苯酞通过下调NF-κB_信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-_再灌注损伤
第14卷 第4期2023年7月Vol. 14 No.4Jul. 2023器官移植Organ Transplantation ·论著·丁苯酞通过下调NF-κB 信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤张瑞波 申开文 王强 袁强 沈俊【摘要】 目的 探讨丁苯酞对大鼠肾缺血-再灌注损伤（IRI ）的作用机制。
方法 将40只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、模型组（IRI 组）、NF-κB 抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC ）组、丁苯酞低剂量组（NBP-L 组）及丁苯酞高剂量组（NBP-H 组），每组8只。
检测各组大鼠血清肌酐（Scr ）、血清胱抑素C （Cys-C ）、血尿素氮（BUN ）和血清白细胞介素（IL ）-1β、IL-18水平，苏木素-伊红（HE ）染色观察各组肾组织病理损伤情况，采用蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测肾组织中炎症因子、核因子（NF ）-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白表达水平。
结果 与Sham 组比较，IRI 组肾组织损伤较为严重，Scr 、Cys-C 、BUN 和血清IL-1β、IL-18水平均升高，蛋白质印迹法结果显示NOD 样受体蛋白（NLRP3）、Gasdermin D （GSDMD ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase ）-1、IL-18、IL-1β、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白相对表达量均增加，免疫组织化学染色结果显示NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18和NLRP3 蛋白表达均增多。
与IRI 组比较，PDTC 组、NBP-L 组和NBP-H 组肾组织的损伤程度均减轻，Scr 、Cys-C 、BUN 和血清IL-18、IL-1β水平均下降，蛋白质印迹法结果显示NLRP3、GSDMD 、Caspase-1、IL-1β、IL-18、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2023.04.010基金项目：贵州省卫生健康委科学技术基金（gzwkj2021-220）；国家自然科学基金培育项目 [gyfynsfc （2020）-30]；贵州医科大学附属医院2022年博士科研启动基金（gyfybsky-2022-31）作者单位：550004 贵阳，贵州医科大学附属医院泌尿外科作者简介：张瑞波（ORCID: 0009-0009-3056-7298），硕士研究生，肾移植相关缺血-再灌注损伤与保护，Email:****************通信作者：沈俊（ORCID: 0000-0003-1208-5833），博士，副主任医师，肾移植相关缺血-再灌注损伤与保护，Email:***************.cn结构式摘要HE 染色观察肾组织病理学改变免疫组化染色检测炎症因子、 NF-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白IRISham 组IRI 组PDTC 组NBP-H 组丁苯酞或PTDC 或0.9%氯化钠注射液NBP-L 组蛋白质印迹法检测炎症因子、 NF-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白Scr 、BUN 、Cys-C 水平检测IL-1β、IL-18水平检测·540·第14卷器官移植肾脏缺血-再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury ，IRI ）通常由器官移植、肾部分切除手术、败血症等引起，如不及时采取有效措施加以预防，很容易发展为急性肾损伤，导致病死率上升[1-6]。
四川大学病理学试题
一、名词解释（每题1.5分，共15分）再生出血性梗死细胞异型性趋化因子疣状心内膜炎急性重型肝炎镜影细胞肾病综合征流行性脑脊髓膜炎肺肉质变二、判断题（对选A，错选B，每题0.5分共10分）1．动脉粥样硬化主要累及弹力肌型动脉和小动脉B2．心肌纤维化时，心壁厚度必有增加。
3．慢性支气管炎、肺气肿是气道阻塞引起的，与吸烟无关B。
4．消化性溃疡病的穿孔以十二指肠溃疡病比胃溃疡病常见。
5．肝硬化门脉高压的发生主要是由于假小叶形成及肝实质纤维化压迫了小叶下静脉、中央静脉及肝窦，同时伴门静脉与肝静脉的吻合支开放所致。
6．恶性淋巴瘤与淋巴细胞白血病存在重叠，组成一个连续的谱系。
7．急性弥漫性增生性肾小球肾炎的电镜下病变特点是肾小球毛细血管基膜上皮侧有驼峰状致密物。
8．轻微病变性肾小球肾炎与免疫复合物无关。
9．子宫内膜异位症可见于子宫直肠陷窝、腹部手术瘢痕、盆腔淋巴结等。
10．葡萄胎是一种妊娠滋养叶细胞肿瘤，而绒毛膜癌不是滋养叶细胞肿瘤。
B11．由胰岛b细胞发生的胰岛细胞瘤，患者在临床上可有低血糖症状。
12．原发性肺结核的原发灶通常出现在肺尖部和通气较差的部位。
13．伤寒杆菌引起全身单核-吞噬细胞系统的巨噬细胞急性增生，同时伴大量中性粒细胞浸润。
14．组织或细胞培养的结果与其体内过程完全一致。
15．一般而言，幼稚组织比高分化组织的再生能力强。
16．透明血栓又称微血栓，主要由血小板构成。
(主要由嗜酸性同性质纤维蛋白组成)B17．末梢血白细胞计数增加是炎症反应的常见表现，临床上可借此诊断炎症，但在有些炎症末梢血白细胞计数反而减少。
18．脓肿比蜂窝织炎更易扩散。
B19．肿瘤大多数表现为局部肿块，局部肿块并非一定是肿瘤。
B20．阻塞性肺气肿发生的关键环节是小气道（主要是细支气管）炎和肺泡间隔的断裂。
A三、选择题（每题1分，共50分）A型题（请选择1个最佳答案）21．恶性淋巴瘤是CA.原发于单核巨噬细胞系统的肿瘤B.原发于淋巴结内所有细胞的肿瘤C.原发于淋巴结和结外淋巴组织的肿瘤D.原发于淋巴结窦组织细胞的肿瘤E.淋巴结的转移性肿瘤22．引起巨脾的白血病是BA.急性淋巴细胞白血病B.慢性粒细胞白血病C.急性单核细胞白血病D.急性粒细胞白血病E.急性红白血病23．下列因素中哪项与动脉粥样硬化的发生关系最密切？AA.高脂血症B.高血压C.吸烟D.病毒感染E.遗传因素24．脂肪变性的细胞内的脂肪可被下列哪种染色染成红色？BA.刚果红染色B.苏丹Ⅲ染色C.甲基紫染色D.PAS染色E.锇酸染色25．与肝细胞性肝癌的发生关系密切的致癌物是AA.黄曲霉毒素B. 9，10-二甲基苯蒽C.乙萘胺D.联苯胺E. 3，4-苯并芘26．下列哪个疾病属假膜性炎？CA.大叶性肺炎B.小叶性肺炎C.气管白喉D.间质性肺炎E.病毒性肺炎27．支气管扩张症引起肺源性心脏病的原因主要是EA.支气管腺体肥大、增生，黏膜上皮杯状细胞增多B.急、慢性细支气管炎及细支气管周围炎C.支气管壁因炎症而遭破坏D.慢性阻塞性细支气管炎E.肺组织高度纤维化28．淀粉样变性是指间质内有EA.蛋白质蓄积B.黏多糖蓄积C.黏多糖和蛋白质的蓄积D.糖原蓄积E.蛋白质-黏多糖复合物蓄积29．结缔组织、血管壁及细胞内透明变性的共同点是EA.发病机制相似B.肉眼观察形态相似C.组织学形态相似D.后果相似E.全部都是蛋白质蓄积所致30．下列哪项病变能反映小叶性肺炎的本质？CA.浆液性炎B.纤维蛋白性炎C.化脓性炎D.出血性炎E.卡他性炎31．溃疡病穿孔后最严重的后果是DA.穿孔后引起小网膜急性炎B.穿孔后引起胃和十二指肠周围脓肿形成C.穿孔后不与腹壁相通而进入邻近器官D.穿孔后引起急性弥漫性腹膜炎E.穿孔后引起肠粘连32．慢性萎缩性胃炎与慢性浅表性胃炎最确切的区别是DA.黏膜变厚B.病变部位C.炎细胞浸润的深度D.胃固有腺是否出现减少、消失，肠上皮化生等E.以上都不是33．下列哪种肠疾病最可能发生癌变？CA.出血坏死性肠炎B.局限性肠炎C.慢性溃疡性结肠炎D.肠结核E.肠阿米巴病34．急性重型肝炎的病变性质是BA.以门管区渗出为主的炎B.以肝细胞坏死为主的炎C.以肝细胞变性为主的炎D.以肝细胞增生为主的炎E.以门管区间质增生为主的炎35．关于风湿性肉芽肿的叙述，下列哪项是错误的？AA.中心部位多有纤维蛋白B.多发生于心肌间质血管旁C.特征性细胞是Aschoff细胞D.常伴有淋巴细胞、浆细胞浸润E.是风湿病的特征性病变，具有诊断意义36．引起亚急性细菌性心内膜炎的最常见病原体是EA.肠球菌B.铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）C.b溶血性链球菌D.金黄色葡萄球菌E.草绿色链球菌37．慢性支气管炎最常见并发症是DA.肺炎B.肺脓肿C.支气管扩张症和肺源性心脏病D.肺气肿和肺源性心脏病E.肺结核和肺源性心脏病38．大脑中动脉分支血栓形成可导致脑组织发生BA.凝固性坏死B.液化性坏死C.干酪样坏死D.脂肪坏死E.干性坏疽39．容易发生出血性梗死的器官是DA.心B.肾C.脑D.肠E.脾40．肝硬化时蜘蛛状血管痣发生的主要原因是EA.门脉压增高，侧支循环形成B.肝功能不全，凝血机制障碍C.低蛋白血症D.血管内压增高E.雌激素增多41．下列哪项是肿瘤？BA.夹层动脉瘤B.血管瘤C.动脉瘤D.创伤性动脉瘤E.室壁瘤42．关于大肠癌的叙述，下列哪项是错误的？A.患者多为老年人，但中青年人发病率在逐渐上升B.患者常有贫血、消瘦、大便习惯改变C.在我国其发病率在消化道癌中仅次于胃癌D.梗阻常见于盲肠及升结肠癌，而降结肠癌及直肠癌往往不发生梗阻症状E.有时出现腹部肿块及肠梗阻症状43．头皮血肿被肉芽组织所取代，这种现象称为BA.肉芽组织形成B.机化C.肉芽肿形成D.结缔组织透明变性E.纤维化44．新月体性肾小球肾炎的主要病变是EA.肾球囊脏层上皮细胞增生B.毛细血管壁纤维蛋白样坏死C.单核细胞渗出于肾球囊内D.中性粒细胞渗出于肾球囊内E.肾球囊壁层上皮细胞增生45．肾盂积水的病变属于A.肾囊肿B.失用性萎缩C.营养不良性萎缩D.压迫性肾萎缩E.以上都是46．乳腺橘皮样外观最常见于DA.小叶原位癌B.典型髓样癌C.管内原位癌D.浸润性导管癌E.浸润性小叶癌47．关于良性畸胎瘤的叙述，下列哪项是错误的？DA.肉眼可见毛发、牙齿等B.囊壁上可见头节C.镜下可有三个胚层的成分D.肿瘤易发生恶性变E.恶变常发生于囊内头节附近48．脓细胞是指变性、坏死的A.淋巴细胞B.浆细胞C.中性粒细胞D.嗜酸粒细胞E.单核-吞噬细胞49．下列哪项没有全身中毒症状？A.迁徙性脓肿B.菌血症C.脓血症（脓毒血症）D.败血症E.毒血症50．下列哪种肿瘤易发生腹腔和盆腔种植？A.子宫绒毛膜癌B.子宫颈癌C.子宫内膜癌D.卵巢胚胎性癌E.卵巢黏液性囊腺癌51．绿色瘤是CA.胆管上皮癌因淤胆所致B.原发性肝细胞癌转移到皮下，分泌胆汁所致C.原始粒细胞在骨组织、骨膜下或软组织中浸润，聚集成肿块D.绒毛膜癌阴道转移性结节E.血管肉瘤出血，产生胆绿蛋白所致52．急性肾小球肾炎是一种A.化脓性炎B.以出血为主的炎C.以变质为主的炎D.以渗出为主的炎E.以增生为主的炎53．关于肾小球肾炎的发病机制，目前认为主要是A.感染直接损伤B.过敏反应C.体液免疫反应D.自身免疫反应E.细胞免疫反应54．下列哪项不是阴茎癌的特点A.常发生于40岁以上的男性B.患者大多有包皮过长C.肉眼常呈菜花状或溃疡状D.组织学上以低分化鳞状细胞癌最多见E.转移发生较早，远处转移少见55．在甲状腺癌中，以哪种类型的发病最多、恶性度最低、5年生存率最高？A.滤泡性癌B.乳头状癌C.髓样癌D.未分化癌E.嗜酸细胞腺癌56．关于毒性甲状腺肿的发病机制，目前认为最可能是A.细菌引起的化脓性炎B.食物中含有致甲状腺肿的物质C.自身免疫反应D.甲状腺异常增生形成的新生物E.土壤和水中缺碘57．克汀病的主要病因是A.缺碘B.发育异常C.免疫异常D.遗传因素E.垂体或下丘脑病变58．以下哪一项不是结核转向愈合时的改变？A.吸收、消散B.钙化C.纤维包裹D.纤维化E.病灶周围出现渗出、继发坏死以及溶解液化59．下列哪项描述符合膜性肾小球肾炎A.肾小球有较多单核细胞及淋巴细胞浸润B.此型与免疫复合物无关C.上皮细胞内有粗大的沉积物D.银染色见基膜形成钉状突起，钉状突起与基膜垂直相连形如梳状E.皮质激素治疗效果较明显60．尿毒症时贫血的主要原因是A.大量血尿B.铁蛋白从尿中丢失C.细胞因子抑制骨髓D.大量蛋白尿E.促红细胞生成素不足61．临床上称为开放性肺结核的是A.原发性肺结核病B.浸润型肺结核病C.局灶型肺结核病D.慢性纤维空洞型肺结核E.肺结核球62．下列哪项关于流行性乙型脑炎的叙述是正确的？A.乙型脑炎病毒为DNA病毒B.多在冬、春季流行C.病变广泛累及整个中枢神经系统灰质D.成人感染乙型脑炎病毒多为显性感染E.神经细胞胞质中常见包涵体形成63．一病人患病已3周，有持续性高热，心率过缓，腹胀，腹泻。
湖北医药学院生理学期末考试重点
湖北医药学院生理学期末考试重点第二章、细胞的基本功能1、简述钠泵的作用和生理意义。
作用：在胞内侧泵与3个Na+结合,在胞外侧与2个K+结合,分解ATP释放能量,能量促泵变构,将3Na+转运出胞,将2K+转运入胞.以维持细胞内高K+和细胞外高Na+钠泵活动的意义：建立势能贮备，是生物电产生的条件，是继发性主动转运的动力。
2、何谓第二信使，第二信使物质包括那些？激素、递质等信号分子作用于细胞膜后细胞内产生的信号因子，间接地把细胞外信号转入细胞内。
cAMP, IP3, DG, cGMP, Ca2+等.3、试述G蛋白耦联受体介导的信号转导过程神经递质、激素等作用于Gs或Gi蛋白偶联的受体，激活Gs或Gi蛋白，激活或抑制AC，ATP生成cAMP过程增强或减弱，至cAMP增加或减少，激活或抑制PKA，细胞内生物效应。
神经递质、激素等作用于Gq 偶联受体，激活Gq蛋白，PLC，使PIP2生成IP3和DG，IP3作用于内质网上受体，内质网释放Ca2+，DG激活PKC，引起细胞内出现生物效应4、试述静息电位和动作电位产生的机制。
改变细胞膜内外各种离子的浓度，RP和AP幅度如何变化？为什么？RP：静息时细胞膜对K+通透，K+顺浓度梯度内流。
升高细胞外K+浓度，静息电位差值降低，推动K+外流的动力降低，外流的K+减少。
AP：去极化，细胞受刺激，膜对Na+通透性增大，Na+顺浓度梯度和电位梯度内流，膜内电位升高。
2．复极化细胞膜的Na+通道迅速关闭，而对K+的通透性增大，于是细胞内的K+便顺其浓度梯度向细胞外扩散，导致膜内负电位增大。
升高细胞外Na+浓度，AP幅度增加，推动Na+内流的动力增加，内流的Na+增多。
5、试述动作电位在神经纤维上传导的原理。
试说明应用于何种药物可阻断AP的传导无髓神经纤维：膜外正电荷由未兴奋段移向兴奋段，膜内正电荷由已兴奋段移向未兴奋段—局部电流，使未兴奋段膜去极化达阈电位水平，引起未兴奋段Na+通道大量开放，Na+内流，而产生AP。
组胺H1受体激动剂通过Akt
网络出版时间：２０２４－０１－３０１６：０２：０４ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２４０１２９．１１１２．０３６组胺Ｈ１受体激动剂通过Ａｋｔ／ＮＦ κＢ通路抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症反应徐佳雯，沈佳红，温雨欣，孙建良（杭州市第一人民医院麻醉科，浙江杭州 ３１００００）收稿日期：２０２３－１０－２８，修回日期：２０２３－１２－２７基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１９０１０８７）作者简介：徐佳雯（１９９２－），女，硕士，医师，研究方向：中枢炎症性疾病，Ｅ ｍａｉｌ：ｊｉａｗｅｎ＿ｘｕ＿ｊａｎｅ＠１２６．ｃｏｍ；孙建良（１９６８－），男，博士，教授，博士生导师，研究方向：神经退行性疾病，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｊｌ６８０５＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２３１００３８文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２４）０２－０３１７－０７中国图书分类号：Ｒ３２２ ８；Ｒ３２９ ２４；Ｒ３４３ ９；Ｒ３６４ ５；Ｒ３９２ １１；Ｒ９７６摘要：目的 探讨组胺Ｈ１受体（ｈｉｓｔａｍｉｎｅＨ１ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｈ１Ｒ）对脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）诱导的星形胶质细胞炎症反应的影响及其调控机制。
方法 采用ＬＰＳ建立体外星形胶质细胞炎症模型，随机将大鼠原代星形胶质细胞分为对照组、ＬＰＳ组、ＬＰＳ＋Ｈ１Ｒ激动剂组（２ ｐｙｒｉｄｙｌｅｔｈｌａｍｉｎｅ，Ｐｙｒｉ）和Ｈ１Ｒ激动剂组。
对照组仅加入培养液，ＬＰＳ＋Ｈ１Ｒ激动剂组提前在培养液中加入１００μｍｏｌ·Ｌ－１的Ｐｙｒｉ，１ｈ后再加入终浓度为１００μｇ·Ｌ－１的ＬＰＳ。
ＣＣＫ ８法检测细胞活性；免疫荧光法检测活化标记物ＧＦＡＰ和Ｈ１Ｒ的表达；倒置相差显微镜下观察星形胶质细胞的形态变化；ＥＬＩＳＡ法检测细胞上清中炎症因子ＴＮＦ α和ＩＬ ６水平；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ｐ Ａｋｔ、Ａｋｔ、ｐ ＮＦ κＢｐ６５、ＮＦ κＢｐ６５的蛋白表达。
心血管生理学习题集
心血管生理复习题集1大鼠呼吸面罩死腔问题的解决方法。
答：单管连接法:通过控制以下压力差来解决大鼠呼吸面罩死腔问题：进气早期：肺内压>面罩内压>出气管内压进气中末期：面罩内压>肺内压<出气管内压通气过量也不易造成肺泡的损伤。
2简述如何获得存活率高、纯度高的乳鼠心肌细胞。
（PPT2）答：一、材料：1.乳鼠：出生1-3d；2.液体：培养基、小牛血清、消化酶、缓冲液及75%酒精。
3.物品（均需严格消毒）：眼科剪、眼科镊（4套↑）、培养皿（2套↑）、烧杯、离心管、滴管、烧瓶及搅拌子等4超净台5台面：磁力搅拌器6培养箱7其它：离心机、血细胞计数板.二：分离和培养：1.取出心脏放入4℃PBS(磷酸盐缓冲液)内2冲洗和减碎心脏：将心脏剪为0.5-1mm大小，放入盛有胶原酶、胰酶、透明质酸酶的器皿中；3心肌消化及细胞收集：放入烧瓶60-80rmp，约5分钟后清离，第二次离心约10分钟，上清吸入含培养基和血清的离心管内，收集心肌细胞离心，1000rmp、10分钟，去除上清，加入新的培养基和血清。
4细胞接种：放入培养皿、培养板。
三、纯化：①差速贴壁法②化学试剂抑制法③密度梯度离心法：Percoll ④流式细胞仪法⑤免疫磁珠四：鉴定：1细胞形态：倒置显微镜：细胞形态：未贴壁呈圆形；贴壁后呈梭形、多角形，胞核1～2个、呈圆形、具有1～2清晰的核仁，细胞大小均匀生长迅速。
搏动：频率130～150次/分。
单个细胞自行蠕动；当生长成片后可见呈岛屿状搏动当生长成片后可见呈岛屿状搏动。
透射电镜：细胞完整胞膜皱褶整齐细胞中肌丝线粒体清晰、分布均匀，细胞核完整。
2.心肌细胞纯度；3. 心肌细胞成活率测定：0.4%台盼蓝染色（1：9），免疫细胞化学肌动蛋白胞浆阳性表达等。
四、注意事项：1培养基pH值：7.0～7.4，大部分培养基应放在-20℃保存，少部分在4℃。
2消化时搅拌速度很重要，千万要越慢越好，所有操作尽量轻柔。
【医学考研】专业课西医模拟题2020年(125)
专业课西医模拟题2020年(125)(总分：100分，做题时间：180分钟)A型题(总题数：50，score:0分)1. AMPA受体激活时，允许通过突触后膜的离子是______【score:2分】【A】K+和Cl-，主要是K+【B】Cl-和Ca2+，主要是Cl-【C】K+和Ca2+，主要是Ca2+【D】Na+和K+，主要是Na+【此项为本题正确答案】本题思路：2. GABA B受体激活后可______【score:2分】【A】直接增加突触后膜的K+电导【B】通过G-蛋白介导增加后膜的Na+电导【C】通过G-蛋白介导增加后膜的K+电导【此项为本题正确答案】【D】通过G-蛋白介导增加后膜的Cl-电导本题思路：3. NMDA受体激活时，允许通过突触后膜的离子是______【score:2分】【A】K+、Cl-和Ca2+，主要是K+和Cl-【B】Na+、Cl-和Ca2+，主要是Cl-和Ca2+【C】Na+、K+和Ca2+，主要是Na+和Ca2+【此项为本题正确答案】【D】Cl-和Ca2+，主要是Cl-本题思路：4. P物质属于下列哪类递质______【score:2分】【A】阿片肽【B】下丘脑调节肽【C】单胺类【D】速激肽【此项为本题正确答案】本题思路：5. α1受体激活后引起的离子跨膜流动改变为______【score:2分】【A】K+外流增加【B】Na+内流增加【C】Na+内流减少【D】K+外流减少【此项为本题正确答案】本题思路：6. α2受体激活后引起的跨膜离子流动改变为______【score:2分】【A】K+外流减少，Na+内流增加【B】K+外流增加，Ca2+内流减少【此项为本题正确答案】【C】K+外流减少，Ca2+内流增加【D】Na+内流增加，Ca2+内流减少本题思路：7. β3受体______【score:2分】【A】分布于心肌，激活后引起收缩力增强【B】分布于肾球旁细胞，激活后引起肾素分泌【C】分布于肝，激活后引起糖原分解【D】分布于脂肪组织，激活后引起脂肪分解【此项为本题正确答案】本题思路：8. γ运动神经元发出的γ传出纤维属于______【score:2分】【A】Aβ类纤维【B】Aγ类纤维【此项为本题正确答案】【C】Aδ类纤维【D】C类纤维本题思路：9. γ运动神经元轴突末梢释放的递质是______【score:2分】【A】去甲肾上腺素【B】甘氨酸【C】谷氨酸【D】乙酰胆碱【此项为本题正确答案】本题思路：10. 病变较局限的脊髓空洞症患者常可出现节段性______【score:2分】【A】痛觉、温度觉缺失或减退，而触-压觉仍保留【此项为本题正确答案】【B】痛觉缺失或减退，而温度觉和触-压觉仍保留【C】温度觉和触-压觉缺失或减退，而痛觉仍保留【D】触-压觉缺失或减退，而痛觉和温度觉仍保留本题思路：11. 产生突触前抑制的机制是______【score:2分】【A】进入突触前末梢内的Ca2+减少【此项为本题正确答案】【B】突触前末梢释放抑制性递质【C】通过抑制性中间神经元中介【D】突触后膜产生IPSP本题思路：12. 成年人脑电图α波在______【score:2分】【A】糖皮质激素血浓度高时频率减慢【B】高血糖时频率减慢【C】发热时频率减慢【D】动脉血PO2高时频率减慢【此项为本题正确答案】本题思路：13. 出现去大脑僵直现象是由于______【score:2分】【A】切除了大部分脑干网状结构易化区【B】切断了网状结构和皮层运动区及纹状体之间的联系【此项为本题正确答案】【C】切断了网状结构和小脑之间的联系【D】切断了网状结构和前庭核之间的联系本题思路：14. 刺激动物中脑网状结构可使动物______【score:2分】【A】被唤醒，脑电呈去同步快波【此项为本题正确答案】【B】出现类似睡眠现象，脑电呈去同步快波【C】被唤醒，脑电呈同步化慢波【D】保持原来睡眠或觉醒状态，脑电无明显改变本题思路：15. 大多数谷氨酸促代谢型受体激活后可使______【score:2分】【A】cAMP升高，或cGMP降低【B】cGMP升高，或IP3和DG降低【C】cAMP降低，或IP3和DG升高【此项为本题正确答案】【D】cGMP降低，或IP3和DG升高本题思路：16. 大脑皮层功能一侧优势的产生主要是由于______【score:2分】【A】两半球功能差异【B】胼胝体联合纤维差异【C】先天性遗传因素【D】习惯于右手劳动【此项为本题正确答案】本题思路：17. 大脑优势半球在下列何种功能或能力上占优势______【score:2分】【A】深度知觉【B】语言活动【此项为本题正确答案】【C】触觉认识【D】音乐欣赏本题思路：18. 当γ运动神经元的传出冲动增加时，可______【score:2分】【A】直接引起梭内肌舒张【B】使肌梭感受装置敏感性增加【此项为本题正确答案】【C】使Ⅰα类纤维传入冲动减少【D】使α运动神经元传出冲动减少本题思路：19. 当去甲肾上腺素与α受体结合时，下列哪一种肌肉舒张______【score:2分】【A】子宫平滑肌【B】虹膜辐射状肌【C】胃肠括约肌【D】小肠平滑肌【此项为本题正确答案】本题思路：20. 当去甲肾上腺素与β受体结合时，下列哪一种肌肉收缩或收缩加强______【score:2分】【A】子宫平滑肌【B】小肠平滑肌【C】血管平滑肌【D】心房心室肌【此项为本题正确答案】本题思路：21. 当神经胶质细胞受损而过度增生时，可因下列哪项功能减弱而形成局部癫痫病灶______【score:2分】【A】绝缘作用【B】屏障作用【C】泵K+能力【此项为本题正确答案】【D】支持作用本题思路：22. 毒蕈碱受体分布于______【score:2分】【A】骨骼肌细胞膜上的运动终板【B】多数受副交感神经支配的组织【此项为本题正确答案】【C】多数受交感神经支配的组织【D】所有中枢胆碱能敏感神经元本题思路：23. 对心绞痛伴有肺通气不畅的病人进行治疗，应选用______【score:2分】【A】育亨宾【B】普萘洛尔【C】阿替洛尔【此项为本题正确答案】【D】丁氧胺本题思路：24. 非特异投射系统不能引起特定感觉的原因是______【score:2分】【A】与丘脑第二类细胞群无纤维联系【B】进入大脑皮层各层【C】通路失去各特定感觉的专一性【此项为本题正确答案】【D】易受环境因素和药物的影响本题思路：25. 非特异性感觉投射系统的功能是______【score:2分】【A】维持和改变大脑皮层的兴奋状态【此项为本题正确答案】【B】抑制大脑皮层的活动【C】激发大脑皮层发出传出神经冲动【D】建立丘脑和大脑皮层之间的反馈联系本题思路：26. 分布于眼虹膜辐射状肌，激活时可引起该肌收缩的受体是______【score:2分】【A】N1受体【B】N2受体【C】α受体【此项为本题正确答案】【D】β受体本题思路：27. 副交感神经兴奋时，可引起______【score:2分】【A】汗腺分泌【B】胰岛素分泌【此项为本题正确答案】【C】糖原分解增加【D】骨骼肌血管舒张本题思路：28. 甘氨酸______【score:2分】【A】受体有促离子型和促代谢型受体两类【B】参与突触前和突触后抑制的形成【C】受体激活后可增加Cl-电导而产生IPSP 【此项为本题正确答案】【D】能与NMDA受体结合而抑制其功能本题思路：29. 甘氨酸受体的阻断剂是______【score:2分】【A】氯胺酮【B】荷包牡丹碱【C】士的宁【此项为本题正确答案】【D】印防己毒素本题思路：30. 各种躯体感觉的感知取决于______【score:2分】【A】参与反应的感受器数目【B】感觉神经纤维动作电位的频率【C】参与的传入神经纤维数目【D】大脑皮层兴奋的特定部位【此项为本题正确答案】本题思路：31. 根据测定，兴奋通过一个突触所需时间为______【score:2分】【A】0.3～0.5ms 【此项为本题正确答案】【B】0.7～1.0ms【C】1.5～2.5ms【D】3.0～5.0ms本题思路：32. 关于Ca2+在突触前末梢内触发递质释放的过程，下列哪项描述错误______【score:2分】【A】Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ被激活【B】突触蛋白Ⅰ发生磷酸化并从突触小泡表面解离【C】突触小泡在Ca2+降低轴浆黏度的作用下移向激活区【此项为本题正确答案】【D】突触小泡以出胞的形式释放其所含的递质本题思路：33. 关于大脑皮层中央后回感觉投射规律的叙述，正确的是______【score:2分】【A】投射区大小与躯体各部位大小一致【B】躯体和头而部内部均为倒置性安排【C】肌肉牵张感觉在前，慢快适应感觉居中，关节等感觉在后【此项为本题正确答案】【D】下肢在顶部，头面部居中，上肢在底部本题思路：34. 关于非特异感觉投射系统的描述，正确的是______【score:2分】【A】自大脑皮层返回丘脑的纤维也可归入此系统【B】是各种不同感觉的共同上传通路【此项为本题正确答案】【C】主要与大脑皮层第四层的神经元构成突触联系【D】电刺激该系统可引起皮层感觉区持续放电本题思路：35. 关于脊髓闰绍细胞构成的抑制，下列哪一描述是正确的______【score:2分】【A】通过串联性突触而起抑制作用【B】闰绍细胞内有兴奋性和抑制性递质共存【C】能使支配同一肌肉的许多运动神经元同步活动【此项为本题正确答案】【D】能使同一关节活动的伸肌收缩而屈肌舒张本题思路：36. 关于牵涉痛的描述，正确的是______【score:2分】【A】体腔壁痛是牵涉痛的一利，表现【B】牵涉痛的放射部位具有确定性【此项为本题正确答案】【C】所有内脏痛都有牵涉痛的表现【D】牵涉痛是疾病预后不良的征兆本题思路：37. 关于人类记忆过程的描述，正确的是______ 【score:2分】【A】第一、二级记忆均为短时程记忆【B】第一级记忆的保留时间不超过1秒钟【C】第二级记忆的形成与突触的可塑性有关【D】第三级记忆的形成与建立新突触有关【此项为本题正确答案】本题思路：38. 关于神经纤维轴浆运输的描述，正确的是______【score:2分】【A】顺向和逆向轴浆运输的速度相等【B】狂犬病病毒可经顺向轴浆运输而扩散【C】与神经的功能性和营养性作用有关【此项为本题正确答案】【D】与维持神经结构和功能的完整性无关本题思路：39. 关于特异感觉投射系统的描述，正确的是______【score:2分】【A】感觉接替核存所有感觉传导通路中都是第三级神经元【B】与大脑皮层有点对点的投射关系【此项为本题正确答案】【C】主要与大脑皮层第二层的神经元形成突触联系【D】主要作用在于诱发大脑皮层小锥体细胞兴奋本题思路：40. 关于突触前易化的产生，下列哪一描述是正确的______【score:2分】【A】到达突触前末梢的动作电位频率高【B】有多个兴奋同时到达突触前末梢【C】进入突触前末梢内的Ca2+增多【此项为本题正确答案】【D】突触后膜有多个EPSP发生总和本题思路：41. 关于未成年人脑电图安静时的主要波形变化，正确的描述是______【score:2分】【A】幼儿一般常见δ波【B】儿童期常见α波【C】儿童期脑电波逐渐增快【此项为本题正确答案】【D】自青春期开始出现β波本题思路：42. 关于遗忘的描述，正确的是______【score:2分】【A】有生理性遗忘，也有病理性遗忘【此项为本题正确答案】【B】遗忘的发生规律是先慢后快【C】逆行性遗忘多见于酒精中毒【D】顺行性遗忘多见于脑震荡本题思路：43. 关于中枢内组胺及其受体的描述，正确的是______【score:2分】【A】组胺能纤维投射到中枢几乎所有部位【此项为本题正确答案】【B】大多数H3受体为突触前受体且为离子通道【C】H，受体激活后能抑制磷脂酶C【D】H2受体激活后可抑制腺苷酸环化酶本题思路：44. 激活不同亚型的毒蕈碱受体后，第二信使的变化为______【score:2分】【A】cAMP升高，或cGMP降低【B】cGMP升高，或IP3和DG降低【C】cAMP降低，或IP3和DG升高【此项为本题正确答案】【D】cGMP降低，或IP3和DG升高本题思路：45. 激活后能使cAMP水平升高的多巴胺受体是______【score:2分】【A】D3和D4受体【B】D5和D1受体【此项为本题正确答案】【C】D2和D3受体【D】D4和D5受体本题思路：46. 激活中枢内奖赏系统和惩罚系统的生理意义在于______【score:2分】【A】产生愉快和痛苦的情绪【B】调节情绪生理反应【C】激发和抑制产生行为的动机【此项为本题正确答案】【D】调节生理功能活动的稳态本题思路：47. 脊髓高位离断的病人，在脊休克过去后的表现为______【score:2分】【A】离断面下屈肌反射减弱【B】离断面下感觉和随意运动能力永久丧失【此项为本题正确答案】【C】排便、排尿能力恢复正常【D】血压回升至正常水平并保持稳定本题思路：48. 脊髓灰质炎患者发生肢体肌肉萎缩的主要原因是______【score:2分】【A】患肢肌肉血液供应明显减少【B】失去支配神经的营养性作用【此项为本题正确答案】【C】失去高位中枢对脊髓的控制【D】运动神经元受损而患肢长期废用本题思路：49. 脊髓损伤时，下列哪一种感觉最不易被完全阻断______【score:2分】【A】本体感觉【B】温度觉【C】痛觉【D】触-压觉【此项为本题正确答案】本题思路：50. 脊休克现象的产生和恢复，说明______【score:2分】【A】脊髓本身无任何功能，仅为中枢传出的最后通路【B】切断时脊髓功能全部丧失，以后的恢复由高位中枢代偿所致【C】脊髓可完成某些简单反射，但正常时受高位中枢调控【此项为本题正确答案】【D】高位中枢对脊髓反射活动有易化作用，而无抑制作用本题思路：。
Atoh1基因在耳聋康复中的研究进展
-./0% 的负调控因子。!"$ % 的缺失可引起内毛细胞的增加， 而 SO 家族的另一个成员 !"$ , 的缺失可导致外毛细胞的增
［ ’+ ］ ［ ’, ］ 加 。H8=6. 等 提出， -./0% 与 !"$ , 启动子相结合共同发
。机械感受器， 包括毛细胞， 它们的分化
［ %, ］ 依赖于 )!*! 基因 。)!*! 转录因子 -./0% 的表达是毛细 ［(］ 胞发生所必需的 。对体外培养未成年鼠耳蜗进行 -./0% 过
【 参考文献】
［% ］ T 9-HUV-4- D， M!SWN9- S， !-S-9UV-4- X， ". 8IY D/I"$ /G )!*! H"#"$ 6# Q">J8I W."; Z"II [6GG"J"#.68.6/# ［ X］ Y U\] Z"II D"$ （ W&&%+ E +@’7 ） ， ’&&, ， (&1 （’） ： (+( E (+@Y ［’］ T ^-QH _V， !-WW-Q C-， CU**UQ !X， ". 8IY [J/$/]06I8 -./#8I O>II5 D"$K>"$ .0" F0"#/.5]" /G 48.0% Q>II 46K"： Q": O>#K.6/#$ UA ［ X］ Y Z>JJ C6/I （ W&L1& E L@’’ ） ， ‘/I‘" 6# Q": Z"II>I8J Z/#."J.$ ’&&’ ， %’ （ %@ ） ： %1%% E %1%1Y ［(］ T CUD4<QH!-4 Q-，!-WW-Q C-，FD<ZU W[，". 8IY 48.0% ：-# ［ X］ Y WK6A U$$"#.68I H"#" G/J .0" H"#"J8.6/# /G <##"J U8J !86J Z"II$ "#K" （ W&&(1 E @&7, ） ， %LLL ， ’@+ ： %@(7 E %@+%Y ［+］ T 4-SU< _， F-N*UV W，9-<QH W， ". 8IY W;8II"J <##"J U8J W"#$/J5 U]6.0"I68 6# Q">J/3 % Q>II 46K" 8J" D"I8."B ./ U8JI6"J !86J Z"II Z5A KI" U\6. ［ X］ Y ["‘"I/];"#.8I [5#8;6K$ （ W%&,@ E @(@@ ） ， ’&&, ， ’(+ （(） ： 1(( E 1,&Y ［,］ T V-4-4MSM Q， S-Q<H-9< 9， SWNX< 4， ". 8IY <#06)6.6/# /G Q/.K0 R DCFAX W63#8I6#3 <#B>K"$ !86J Z"II O/J;8.6/# 6# Q"/#8." 4/>$" Z/K0I"8$ ［ X］ Y X 4/I"K>I8J 4"B6K6#" （ W&(77 E &+1P ） ，’&&1 ， @+ （%） ： (7 E +,Y ［1］ T ^MM[W Z，4MQSZMNaN<M** 4，9U**UV 4^Y 48.0% D"3>A I8."$ ["‘"I/];"#. /G .0" W"#$/J5 U]6.0"I6>; 6# .0" 48;;8I68# Z/K0I"8 ［ X］ Y Q8.>J" Q">J/$K6"#K" （ W%&L7 E 1’,1 ） ，’&&+ ，7 （ %’ ） ： %(%& E %(%@Y ［7］ T Z!UQ F， XM!QWMQ XU，2MH!C< !V， ". 8IY S0" D/I" /G 48.0% 6# <##"J U8J ["‘"I/];"#.： N#K/>]I6#3 .0" U$.8)I6$0;"#. /G .0" W"#"$/A J5 FJ6#/JB6>; OJ/; !86J Z"II O8." ["."J;6#8.6/# ［ X］ Y ["‘"I/];"#. （ W&L,& E %LL% ） ， ’&&’ ， %’L ： ’+L, E ’,&,Y
心肺复苏后鼠大脑皮层NgR1的表达变化
论著・
心肺 复苏后 鼠大脑 皮层 Ｎ ｇ Ｒ １的表达变化
李慧 荆小莉 李欣 胡春林 曾小云 魏红艳 詹红 廖 晓星
【 摘要】 目的 变化 。 方法
研究 Ｎ ｏ ｇ ｏ ． ６ ６受体 （ Ｎ ｇ Ｒ１ ） 在心肺 复苏 （ Ｃ Ｐ Ｒ ） 后大 鼠大脑组织皮层 中的表 达
将５ ０只 Ｓ Ｄ大 鼠分为实验组 （ ４ ０只） 、 假手术组 （ ５只） 及空 白对照组 （ ５只） 。实验
Ｃｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｎｇ Ｒ１ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｒ ｅ ｂ ｒ ａ ｌ ｃ ｏ ｒ ｔ ｅ ｘ ｏ ｆ ｒ ａ ｔ ｓ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｃ ａ ｒ ｄ ｉ ｏ ｐ ｌ ｍｏ ｕ ｎ ａ ｒ ｙ
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中华危重疰医 杂志 （ 电壬 ２ ３ 年 ８ 月簋 鲞簋 期 Ｃ ｈ ｉ 』
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APO诱导6-OHDA所致PD模型大鼠的旋转行为及其形态学改变
APO诱导6-OHDA所致PD模型大鼠的旋转行为及其形态学改变安徽医科大学ActaUniveitatisMedicinalisAnhui2006Jun;41(3)’247? APO诱导6-OHDA所致PD模型大鼠的旋转行为及其形态学改变徐蓉,李光武,姚玉芹摘要目的探讨不同时间点阿朴吗啡(APO)腹腔注射6一OHDA所致帕金森病模型大鼠的行为学及中脑腹侧被盖区(vTA)形态学变化.方法6-OHDA单侧一点注射大鼠右侧SNc,特异性毁损DA能神经元;术后1,7,14,21d腹腔注射APO,观察旋转行为;利用Nissl染色,免疫组织化学ABC法,观察各时间点VTADA能神经元形态学变化和TH表达情况.结果APO诱发PD大鼠模型异常旋转行为,Nissl染色见PD大鼠左侧中脑VTA有神经细胞肿胀,坏死等变化,VTA TH神经元数量减少.结论APO能诱导6-OHDAPD模型大鼠的旋转行为,其强弱可能与TH神经元数量直接相关.主题词多巴胺;阿朴吗啡;腹侧被盖区;酪氨酸羟化酶中图分类号R749.16;R971.5;R977.3;R975.4文献标识码A文章编号1000—1492(2006)03—0247—036一羟基多巴胺(6一hydroxydopamine,6一OHDA)是一种亲神经毒性物质,可特异性破坏含多巴胺(do—pamine,DA)的神经细胞,能使中脑腹侧被盖区(ventraltegmentalarea,VTA)DA能神经元变性死亡,导致帕金森病(Parkinsonsdisease,PD)样改变,所以常被用作制备PD模型¨J.阿朴吗啡(apo—morphine,APO)是最早发现的外源性DA受体激动剂之一,能诱导PD模型大鼠的旋转行为J,其诱导旋转行为能力强弱与VTA的DA神经元存活数目具有明显的相关性,但其诱导旋转行为的时相性及其机制还有待深入研究.本实验利用6一OHDA大鼠单侧黑质内注射制作PD模型,在不同时间点观察腹腔注射APO后大鼠的行为学变化,VTADA能神经元内酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)的表达,以观察所致PD模型鼠后不同时间注射APO诱导旋转行为的强弱以及旋转行为与VTA区TH神经元数目与活性之间的关系.2006—02—24接收基金项目:安徽省教育厅自然基金(编号:2003kj226)作者单位:安徽医科大学神经生物学研究所,合肥230032作者简介:徐蓉,女,38岁,硕士研究生,现在安徽医学高等专科学校工作;李光武,男,45岁,副教授,硕士生导师,责任作者,E. mail:*******************1材料与方法1.1主要试剂6一OHDA,APO,TH抗体(1:lOOO)均购自Sigma公司,SABC,DAB购自北京中衫金桥生物有限公司.1.2实验动物选用健康6纯种Wistar大鼠,体重220～250g,普通级,安徽省药研所动物房提供.1.3方法1.3.1动物分组Wistar大鼠适应环境1周,经反复测试无旋转行为的动物选为实验对象.随机分为6一OHDA对照组(8例),生理盐水组(NS,8例)和APO组(40例,先用6一OHDA注射SNc制作PD模型),根据APO注射时间不同随机分为1,7,14,21d组(10例).1.3.26一OHDA毁损3%水合氯醛(0.6ml/lO0g)腹腔注射麻醉Wistar大鼠,头颅水平位固定于SN-2型脑立体定位仪(TokyoNarishige,Japan).去毛,消毒,切开皮肤筋膜,确定前卤坐标;参照Paxi—nosWaston大鼠脑立体定位图谱确定右侧SNc坐标:前卤后4.8mm,中缝右旁开1.0mm,硬膜下7.5mm.用牙钻钻开相应部位及硬膜外水平用10l微量注射器抽取0.3%6-OHDA4l缓慢注射于SNc,NS组只向SNc内注射0.9%生理盐水,注射完毕,停针5min,缓慢拔针,明胶海绵填塞颅骨孔,缝合皮肤,筋膜,伤口涂消炎膏,置笼喂养.1.3.3APO诱导旋转实验6一OHDA毁损后1,7, 14,21d8:00AM点进行旋转行为测试.上述各组均腹腔注射0.5mg/kg质量体积分数0.1%新鲜配置APO,在40cm的不锈钢盆中观察大鼠的旋转行为,时间为30min,用钟式测转仪测量头尾相接向健侧旋转的圈数.1.3.4形态学观察在每次行为学测试完毕2h,3%水合氯醛腹腔注射(350mg/kg)麻醉能产生旋转的试验大鼠,置于冰盘上,打开胸腔,暴露心脏,先用生理盐水100ml经心脏冲洗,然后300ml4%多聚甲醛灌注固定,取出脑组织,4%多聚甲醛后固定24h,在针道旁冠状面切开,石蜡包埋,于耳间线2.7～3.3mm(以A2.7～A3.3表示)范围内继续切248?暂桃科≮学”“,”¨,imdisI.hr”2006Jur.;41(3片.隔I取,厚6¨llii常批Nissl染色,记瞍织化学AB(I法.通过I’1I’神经元的丛舰察V’I’A眨映DA能神经元埘坏变起明娃.核l歪渍染形态夫/J,转斯致( I)6-OHI)A注射SNc后小同ll寸川点毁{_5i侧巾腑VTA与对照组比较,Nissl染包褪I一1有分冲经兀肿胀,空泡化,7t州十胀加剧I4一l肿呲变Yt!Jq;北¨J】J川*u(1剥2).2I?I细憾变性艟～严I碴爵时间的逛K.神经元肿胀,H,死,榱变尢.胞质碱少.审旭化等化越米越』挝.拟竹J愈,14tl毁抒!速艇放慢.但尢修班象r免疫I化染色艋殚盐水自【人艉VTArl1’神经J懈柴数较多.多角肜.突起叫显(1剥3);而坝凡鼠vlrAI’H经元嘲雌.见宠世IdlJ{珊部分冲经J[肿胀.突起碱少,7dVTA TII冲贽儿数醚诫圳艟.I4tI川神经¨[均桁度较对JIf{鲥下降6(12—80eh(图4).2l1神经JL胞件忡胀,突衄消先雠为明皿(51Vr¨利绛元段随符延k而减少.减少的谴度I4t{Jj放慢;VqA…并兀形.突起减少{jlj,大的现象随着II’JMK越求越川3讨论TIt是旋多递质合成的瞅制瞬,是钮艘合.:.一:,,-.复的现象,动物的健康状况也无恶化的表现,结果稳定.通过注射6-OHDA制备PD模型,成功率高,用APO能诱导PD模型鼠的旋转行为在14d时达到明显水平.通过免疫组织化学观察显示PD模型大鼠中脑VTA TH免疫反应阳性神经元,6-OHDA损毁1,7,14,21d后,TH染色阳性细胞逐渐减少,部分神经元形态异常,变性死亡,在神经元数目下降达到70%～75%时旋转行为最为明显.Freemanetal对PD患者死后DA神经元TH活性测定,发现其活性量下降至正常值的30%,与TH蛋白减少的结论相一致¨.本研究结果可知,6-OHDA毁损可以制作PD模型,APO可诱导PD模型鼠产生旋转行为,大约在14～21d达到高峰,并维持一个较高水平,TH神经元的数目可作为DA能神经元活性强弱及死亡数目的重要标志.参考文献[1]RuxandraI,PaulM1.PatrikB.Behavioralcharacterizationofa unilateral6-OHDA—lesionmodelofParkinsonsdiseaseinmice [J].BehavioralBrainResearch,2005,162(2):l—lO.[2]DeumensR,BloklandA,PrickaertsJ.ModelingParkinsonsdis- easeinrat:.皿evaluationof6-OHDAlesionsofthenigrestriatalpathway[J].ExpNeurol,2002,175(2):303—17.[3]HauberW,KochM.AdenosineA2areceptorsinthenucleusac- cumbensmodulateprepulseinhibitionofthestartleresponse[J]. Neumreport,1997,8(6):1515—8.[4]CaiG,WangHY,FriedmanE.Increaseddopaminereceptorsig- natinganddopaminereceptor-Gproteincouplingindenervated striatum[J].JPharmacolExpTher,2002,302(3):l105—12.[5]刘红艳,孙中武,周江宁.帕金森病和原发性震颤患者运动和静息-活动节律的变化[J].安徽医科大学,2005,40(1):8O一4.[6JHenryB,CrossmanAR.BrotchieJM.Characterizationofen. haocedbehavioralresponsestoL-dopafollowingrepeatedadminis- trationinthe6-hydroxydopaminelesionedratmodelofParkinsens disease[J].ExpNeurol,1998,151(2):334—42.[7]余国璋.脑内多巴胺的生物医学[M].3版.上海:上海科技教育出版社,1998:181—9.[8]姜宏,陈文芳,谢俊霞.帕金森病模型大鼠脑内多巴胺与铁含量的关系[J].生理,2001,53(5):334—8.[9]FreemanTB,OlanowCW,HauserRA,eta1.Bilatemalfetalni. graltransplantationintothepostcomndssuralputameninParkinson sdisease[JJ.AnnNeural,1995,38(3):379—88.[1O]彭湘闵,蒋雨平.酪氨酸羟化酶与帕金森病[J].中国临床神经科学,2002,10(1):105—8. Apomorphinecausedmorphologicalchangesinventral tagmentalareaandabnormalrotationsinratswith Parkinsondiseaseinducedby6-hydroxydopamineXuRong,LiGuangwu,Y aoY uqin(DeptofBiology,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230032) AbstractObjectiveToobserveapomorphine(APO)causedmorphologicalch angesinventraltagmentalarea(VTA)andabnormalrotationsinratswithParkinsondiseaseinducedby6-hyd roxydopamine.Methods6一OHDA wasinjectedintofightSNcofrats.TheabnormalrotationsinducedbyAPOwe reobservedon1,7,14and21d.Nisslsbodystaining,andimmunohistochemicalavidin—biotinylatedperox idasecomp1exmethod(ABC)wereused toobserveDAneuronchangesinVTAandtyrosinehydroxylase(TH)express ion.ResultsApomorphinecausedabnormalrotations,neuronalcellularswelling,necrosisalterationintheleftm esencephalicVTA.anddecreasesinquantitiesofVTA THpositiveneuron.ConclusionApomorphinecausesabno rmalrotati0nsinratswithParkins0ndiseaseinducedby6-hydroxydopamine,andextentofthechangesiscorrelatedwithquantityofTHpositiveneuron.MeSHdopamine;apomorphine;ventraltagmentalarea:tyrosine3-monooxy genlase。
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基础研究・
作者单位
１．武汉市第一医院
急诊科，ｂ神经内科
武汉４３００２２
２．华中科技大学同
济医学院附属同济
医院神经内科
武汉４３００３０
收稿日期 ２０１５．Ｏ７．０６ 通讯作者 朱遂强 ｚｈｕｓｕｉｑｉａｎｇ＠１６３． Ｃ０ｍ Ｎｅｕｒａｌ Ｉｎ｛ｕｒ、，Ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ．Ｓｅｏｔｅｍｂｅｒ ２０ ｌ ５．Ｖｏ１．１ ０。Ｎｏ．５ 腺苷Ａ １受体敲除小鼠戊四氮点燃后脑组织病理 形态学变化 张继龙ｈ，单萍 ｂ，２，康慧聪 ，朱遂强 摘要目的：通过观察腺苷Ａ１受体敲除小鼠戊四氮点燃后脑组织病理形态学变化，探讨腺苷Ａ１受体的神经 保护作用。方法：腺苷Ａ１受体基因敲除纯合型（．／－）小鼠２０只纳入敲除鼠组，腺苷Ａ１受体基因敲除野生型 小鼠２０只纳入野生型组，Ｃ５７ＢＬ／６小鼠１Ｏ只纳入对照组。敲除鼠组和野生型组小鼠制作戊四氮点燃癫痫模 型，于点燃成功后２４ ｈ、３０ ｄ采用尼氏染色观察各组小鼠海马及皮质神经元的形态结构变化。结果：野生型组 小鼠点燃后皮质和海马神经元损伤较敲除鼠组出现晚、范围小，损伤程度轻。结论：腺苷Ａ１受体对癫痫发作 小鼠具有神经保护作用。 关键词腺苷Ａ１受体；癫痫；神经保护 中图分类号Ｒ７４１；Ｒ７４１．０２文献标识码Ａ ＤＯＩ １０．３８７０／ｓｊｓｓｃｊ．２０１５．０５．０３１ 腺苷是一种广泛存在的细胞活动调制物质，通 过激活腺苷受体（主要是Ａ１受体）后调节多种神经 递质的释放并抑制神经元发放，减少神经元的兴奋 性，抑制神经传导。本实验通过戊四氮点燃小鼠模 型，评估腺苷Ａ１受体对癫痫小鼠的神经保护作用。 ｌ材料和方法 １．１材料 １．１．１实验动物腺苷Ａ１受体基因敲除小鼠种鼠 由美国国立糖尿病消化病与肾病研究所Ｓｃｈｎｅｒ． ｍａｎｎ教授赠送；交配后获得野生型（＋，十）、杂合型 （＋，．）和纯合型（．／－）小鼠。Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，６～８周龄， 体质量２０￣３０ ｇ，由华中科技大学同济医学院实验 动物中心提供。 １．１．２主要试剂和仪器戊四氮购于美国Ｓｉｇｍａ公 司（临用前使用生理盐水配成１ ｒａｇ／ｍＥ溶液）；引物 设计及合成由上海ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ生物工程公司完成；２ｘ Ｔａｑ ＰＣＲ ＭａｓｔｅｒＭｉｘ购于天根生化科技（北京）有限 公司。 １．２方法 １．２．１戊四氮点燃模型的制备及小鼠腺苷Ａ１受体 基因基因型鉴定参考文献［１】。 １．２．２分组选择纯合型敲除小鼠２０只纳入敲除鼠 组，野生型２０只纳入野生型组，Ｃ５７ＢＬ／６小鼠１０只 纳入对照组。敲除鼠组和野生型组小鼠均每日腹腔 注射戊四氮（３０ｍｇ／ｋｇ），对照组小鼠每日腹腔注射 等量生理盐水。戊四氮点燃成功后２４ ｈ、３０ ｄ时处死 的各组小鼠， １．２．３小鼠皮质和海马的形态结构变化造模成功 ３０ ｄ后，尼氏染色法观察各组小鼠皮质和海马的形 态结构变化。 １．３统计学处理 采用ＳＰＳＳ １３．０软件处理数据，计量资料以（ ± Ｓ）表示，方差分析，计数资料以率表示，组间比较采 用 检验，Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。
２结果
对照组小鼠尼氏染色结果显示：海马神经元胞
浆内尼氏小体分布正常，门区神经元排列整齐，形态
完整，见大量紧密排列的锥体细胞及颗粒细胞，见图
１Ａ１；皮质神经元胞浆内富含尼氏小体，神经元形态
结构正常，见图１Ｂ１。
与对照组相比，野生型组点燃后２４ ｈ小鼠海马
及皮质神经元变化不明显，未见胞浆尼氏小体减少，
见图１Ａ２、Ｂ２。点燃后３０ ｄ小鼠海马及皮质神经元
损伤程度较敲除鼠组点燃后３０ ｄ轻微，细胞形态基
本完整、排列尚紧密，胶质细胞增生不明显，细胞空
泡样变性不明显，见图１Ａ３、Ｂ３。
与对照组相比，敲除鼠组点燃后２４ ｈ小鼠海马
胞浆尼氏小体有所减少，可见部分细胞肿胀、轮廓模
糊、形态不完整，见图１Ａ４；皮质胞浆尼氏小体亦有
所减少，细胞轮廓模糊、轻度肿胀，见图１Ｂ４。敲除鼠
组点燃后３０ ｄ小鼠海马胞浆尼氏小体明显减少，细
胞明显肿胀甚至破裂，细胞排列紊乱，形态不完整，
齿状回颗粒细胞排列紊乱，见图１Ａ５；皮质神经元胞
浆尼氏小体亦明显减少，亦可见部分细胞肿胀甚至
破裂，细胞轮摩 模糊，见图ＩＢ５。
３讨论
生理情况下，兴奋性神经递质与抑制性神经递
质保持一种平衡状态，维持神经元细胞膜的稳定，当
这种平衡被破坏时，出现神经元细胞膜不稳定，产生
痫性放电，细胞内ｃａ２＋的稳态失衡在痫性放电中的
作用最为重要［２，３１。李家速等ｔ４］认为钙波传递的关键是
星形胶质细胞释放作用于突触前膜和后膜的腺嘌呤
核苷三磷酸（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＡＴＰ）。ＡＴＰ可诱
发施万细胞产生生物学作用，在动作电位后伴随细
胞内钙离子的升高，促进癫痫的发生发展。ＡＴＰ通过