糖精钠的检测
测定白酒中总糖精钠[整理后]
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受到“勾兑门”影响， 古井贡酒近期股价连 续下跌，相比8月22日 股价该股股价已跌去 13%。
项目一 测定白酒中总酸、酒精 度、糖精钠、甲醇、锰
任务要求
五个工作日内完成所有检测项目，检测报告做 出结果判定。
任务
了解相关检测项目的检测意义 查找白酒的卫生标准和相关检测项目的检测标准 初步制定白酒中总酸、酒精度、糖精钠、甲醇、锰的检 测方案。列出需要的仪器和试剂。 编写实验原始记录和检测报告 制作ppt，以备下节课讲解
白酒中总酸、酒精度、糖精钠、甲醇、 锰的测定意义
甲醇：在白酒酿造过程中，常常有少量甲醇生成。 有毒，误饮5～10毫升能双目失明，大量饮用会 导致死亡。 总酸：是指白酒中含有的有机酸，其绝大部分为 挥发酸，总酸具有香气，是白酒中的呈香、呈味 物质，起到调味作用。己酸乙酯是浓香型白酒的 主体香气成分，其含量高低影响白酒的风格。优 质浓香型白酒的特点是己酸乙酯香气突出，而且 口味纯正，绵甜干净。
≤0.15g/kg以糖精计算 ≤0.04g/100mL ≤2mg/L
分析方法的选择
分析要求的准确度和精密度 分析方法的难易和速度 样品的特性 实验室是否具备相关的试剂、仪器 分析成本
查资料时间到了， 开始行动吧！
总酸的测定方法
GB/T10345-2007，7总酸，有两个方法：7.1 指示剂法和7.2电位滴定法。 7.1需要用到的试剂和仪器有：酚酞指示剂、氢 氧化钠、滴定管、锥形瓶 7.2需要用到的试剂和仪器有：氢氧化钠、电位 滴定仪
色谱柱
检测器
色谱分析基本知识
定性方法：保留值 定量方法：峰面积与样品中待测组分的含量成 正比 色谱法中所用试剂均为色谱纯。色谱纯一般是 指色谱专用溶剂或者试剂，在低波长处的透光 率比较好.色谱分析中必须要用色谱纯试剂，以 确保在色谱条件下只出现指定化合物的峰，不 出现杂质峰。
高效液相色谱法测定灵芝中苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量
88 I FOOD INDUSTRY I理论THEORY高效液相色谱法测定灵芝中苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量文 冯凯 宋纯艳 付彤济宁市食品药品检验检测中心经催化氧化、精制提纯得到的；山梨酸是用丁烯醛、乙酸反应制得的；糖精钠是以苯二甲酸酐为原料化学合成的。
苯甲酸、山梨酸是防腐剂，能够抑制微生物生长，可用来杀菌保鲜，延长保存时间；糖精钠是甜味剂，甜度是蔗糖的300-500倍，可用来改善口感。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是食品生产中常用的防腐剂和甜味剂。
但是过量使用会产生毒副作用，引发癌症，对人体造成危害，影响食品安全。
灵芝是对人体有益的真菌，既可以用于临床治疗，也可用于预防疾病，检测灵芝中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量具有重要意义。
目前，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的主要检测方法有离子色谱法、液相色谱法、气相色谱法和超高效液相色谱-串联质谱法。
液相色谱法是利用流动相与固定相对待测组分亲和力的差建立高效液相色谱法测定灵芝中苯甲酸、山梨酸、糖精钠含量的测定方法。
采用高效液相色谱法，色谱柱为C 18柱（4.6mm ×250mm ，5μm ），流速为1.0mL/min ，波长为230nm ，流动相为0.02moL/L 乙酸铵：甲醇（95：5），样品经粉碎后，沉淀蛋白质，加水超声并提取，离心后经滤膜过滤注入液相色谱仪。
结果表明，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的分离度较大，加标回收率范围在92.4%-101.2%之间；相关系数（r ）大于0.9999，具有良好的线性关系；检出限是0.168mg/kg-0.555mg/kg ，定量限是0.560mg/kg-1.850mg/kg 。
由此可以得出结论，该方法处理快速，分离效果好，适用于真菌类食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的检测。
灵芝是多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum （Leyss.ex Fr.）Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao ，Xu et Zhang 的干燥子实体。
重要1--冷饮中的糖精钠_亚甲蓝快速测定法
冷饮与速冻食品工业 1997( 2)
冷 饮 中 斯市卫生防疫站 ,佳木斯 154002)
0 前言
食品中糖精钠的测定方法较多 ,目前已有气相、液 相、紫外等特异性较强的分析方法 ,但上述仪器基层大 多不具备 ,加之这些方法繁琐、费时、损失多、耗用大量 有机溶剂 ,而原有比色法回收率又低。为此 ,作者根据糖 精钠含有磺酰基团这一特性 ,摸索出一种简单、快速、适 宜的测定方法。
8) 糖精钠标准溶液 准确称取纯糖精钠 1. 000 g , 溶解后加水至 1 000 ml ,摇匀备用 ,则 1. 00 m l= 1. 00 m g 糖精钠。临用时用水稀释成 1. 00 ml= 0. 10 mg 糖精 钠的标准使用液 ;
9) 氯仿 分析纯。 1. 2 分析方法
1) 样品前处理:
水磷酸氢二钠 14. 20 g ,溶解后加水至 500 ml; b液: 0. 1 mol / L 柠檬酸溶液 称取分析纯柠檬酸
10. 51 g ,溶解后加水至 500 ml; 将上述 a. b两液 1∶ 1混合即可 , p H= 4. 5～ 5.
7 ) 0. 01% 亚甲 蓝溶液 准确 称取亚 甲蓝指 示剂 0. 01 g ,溶解后加水至 100 m l;
不含蛋白质的冷饮 (如汽水等 ) ,根据检体适当取量
1～ 10 m l,除去二氧化碳、酒精 ,于 50 m l分液漏斗中备 用。
2) 另取标准溶液 0, 0. 5, 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0 m l
( 相 当于 糖 精 钠 0, 0. 05, 0. 10, 0. 20, 0. 30, 0. 40
b= 1. 4857 a= - 0. 00845 Y = Y ±δ( xo )为直线回归的区间预报方程 Sxy = 0. 00989
调味面制品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸检测方法的探索
甲醇 为 色 谱 纯 ，其 它 试 剂 均 为 分 析 纯 ．试 验 用 水 电导 率 ≤
Ｓ ｓ ／ ｃ ｍ。
经过反复实验该方法选用甲醇和０ ． ０ ２ ｍｏ ｌ ／ Ｌ 乙酸铵溶液 的比 例为 ７ ： ９ ３ 的溶液作流动相 和２ ３ ０ ｎ ｍ的波长为条件 ，分离效果较 好 ，在１ ５ ｍｉ ｎ 内可使５ 种组分完全分离 。
三 、样 品检 测 （ 下 转６ ３ 页） Biblioteka （ 二 ）色谱 条件 。
流 动 相 为（ ） ． ０ ２ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 的 乙酸 铵 一 甲 醇 （９ ３ ： ７） ， 流 速 ！ ． Ｏ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ； 柱 温 ：２ ｓ ℃ ；进 样 量 ２ ｓ Ｌ ； 紫 外 波 长 扫 描 范 围
方法 只能测 定上述物质 中的一种或 少数几种 。本文探索了同时
检 测 上述 五 种 物质 的方 法 、
一
称 取 粉 碎 均 匀样 品２ — ５ ｇ 于２ ５ ｍｌ 容 量 瓶 中 ，加 入 约 ｌ Ｏ ｍｌ 水、 ５ ｍ ｌ 硫酸 锌溶 液 ．用２ ０ ｇ ／ Ｌ 氢 氧化 钠溶 液 调ｐ Ｈ 至７ — ８ ，加 水定 容至 刻度 ．超 声 提取 ｌ Ｏ ｍ ｉ ｎ ．转 移到 分 液漏 斗 中 ，加 入 ｌ Ｏ ｍｌ 正 己烷 ， 振摇 ｌ ｍｉ ｎ ，静 置分 层 ，弃 去 正 已烷 层 ，再 加 入 １ Ｏ ｍｌ 正 己烷 重复
：
：
一
０ ． ０ ２ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 的乙酸铵一甲醇 （ ９ ３ ： ７）为流动相 ，柱 温 ：２ ５ ｃ ｃ ，紫外检测器在 波长２ ３ ０ ｎ ｍ 处
进行检 测，整个分 离检 测过程ｌ ５ 分钟 完成 。以上５ 种 物质的 回收率为９ ６ ． ６ ％ － １ ０ ４ ． ５ 名 ，相 对标准偏 差小于等于１ ． １ ９ ％ 。
检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解
检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解(转自仪器信息网色谱论坛)苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-1996使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1m ol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
高效液相色谱法测定枣中糖精钠含量
高效液相色谱法测定枣中糖精钠含量 作者：张建洲,张艳 来源：《现代食品》 2019年第8期
◎ 张建洲1,张?艳2 (1.重庆市万州粮油质量监督检验站,重庆?404000; 2.重庆三峡职业学院,重庆?404155) Zhang Jianzhou1, Zhang?Yan2 (1.Chongqing Wanzhou Grain and Oil Quality Supervision and Inspection Station, Chongqing?404000, China;
2. Chongqing Three Gorges Vocational College, Chongqing?404155, China) 摘?要:采用高效液相色谱法测定枣中糖精钠的含量。实验结果表明:采用高效液相色谱法测定大枣中糖精钠,分离效果好,标准曲线的线性相关系数为1.000 0,通过对青枣和冬枣样品进行糖精钠测定,两组样品均为阴性样品。以两组样品为基质进行糖精钠加标回收实验,回收率分别为94.8%、92.4%,相对标准偏差分别为1.10%、0.85%。因此,该方法对大枣中糖精钠含量的测定具有较好的准确度和精密度。
关键词:糖精钠;冬枣;青枣;高效液相色谱仪 Abstract:The high performance liquid chromatography determined the content of saccharin sodium in jujube. The results indicated that the separation effect of saccharin sodium in jujube by high performance liquid chromatography was good. The linear correlation coefficient of standard curve was 1.000 0. Saccharin sodium was determined in two groups of jujube and winter jujube. The experimental results showed that both groups of samples were negative. Two groups of samples were used as matrix for recovery of saccharin sodium. The recovery rates of saccharin sodium in two groups were 94.8% and 92.4% respectively, and the relative standard deviations were 1.10% and 0.85% respectively. So this method was accurate and precise for the determination of saccharin sodium in Chinese jujube.
DM-P-078 烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测
烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测序列号：DM-P-078 1 序言迪马科技推出烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜检测的解决方案，该方案适用于烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测。
2 样品准备(1) 取2 g样品，加入20 mL甲醇，充分混匀，超声提取15 min；(2) 取出上层清液，再向残渣中加入20 mL甲醇，充分混匀，超声提取15 min，合并上清液；(3) 向上清液中加入1 mL水，在35℃条件下减压蒸馏至近干，加入2 mL水，待净化。
3 SPE柱净化——ProElut C18 500 mg/6 mL(Cat.#：63105)(1)活化：依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；(2)上样：再将待净化液加入柱中，收集流出液；(3)淋洗：向柱中加入5 mL水，收集流出液。
(4)定容：合并上述步骤(2)和(3)收集的流出液，用水定容至10 mL，供HPLC分析。
4 分析条件色谱柱：Suprsil C18-EP，250 mm×4.6 mm，5μm（Cat# 82106）流速： 1.0mL/min检测器：UV：214 nm柱温：30℃进样量：20 μL流动相：乙酸铵*：乙腈=85:15乙酸铵*：20mmol/L乙酸铵水溶液5 添加回收结果薯片中安赛蜜、糖精钠和阿巴斯甜添加回收结果饼干中安赛蜜、糖精钠和阿巴斯甜添加回收结果Time (m in)V o l t s 三种甜味剂标准溶液色谱图(安赛蜜、糖精钠为5.0 mg/L ，阿斯巴甜为25 mg/L)Tim e (m in)V o l t s 饼干中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜(添加水平安赛蜜、糖精钠为25 mg/kg ，阿斯巴甜为125mg/kg)色谱图2468101214Tim e (m in)0.000.020.04V o l t s 饼干中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜(空白)色谱图Tim e (m in)V o l t s 薯片中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜(添加水平安赛蜜、糖精钠为25 mg/kg ，阿斯巴甜为125mg/kg)色谱图2468101214Tim e (m in)0.000.020.04V o l t s 薯片中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜 (空白)色谱图。
新版食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定
一、编制目的为规范食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定方法，编制本指导书。
二、适用范围本指导书适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定。
三、编制依据GB 5009.28-2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》四、实验原理样品经水提取，高脂肪样品经正己烷脱脂、高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白，采用液相色谱分离、紫外检测器检测，外标法定量。
五、试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 试剂5.1.1 氨水（NH3˙H2O）。
5.1.2 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6˙3H2O]。
5.1.3 乙酸锌[Zn(CH3COON)2˙2H2O]。
5.1.4 无水乙醇（CH3CH2OH）。
5.1.5 正已烷（C6H14）。
5.1.6 甲醇（CH3OH）。
5.1.7 乙酸铵（CH3 C00NH4）：色谱纯。
5.1.8 甲酸（HCOOH）：色谱纯。
5.2 试剂配制5.2.1 氨水溶液（1+99）：取氨水1ml，加到99ml水中，混匀。
5.2.2 亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取106g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000ml。
5.2.3 乙酸锌溶液（183g/L）：称取220g乙酸锌溶于少量水中，加入30ml 冰乙酸，用水定容至1000ml。
5.2.4 乙酸锌溶液（20mmol/L）：称取1.54g乙酸锌，加入适量水溶解，用水定容至1000ml，经0.22um水相微孔滤膜过滤后备用。
5.2.5 甲酸-乙酸铵溶液（2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸铵）：称取1.54g 乙酸铵，加入适量水溶解，再加入75.2ul甲酸，用水定容至1000ml，经0.22um水相微孔过滤后备用。
5.3 标准品5.3.1 苯甲酸钠（C6H5COONa，CAS号：532-32-1），纯度≥99.0%；苯甲酸（C6H5COOH,CAS号：65-85-0），纯度≥99.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
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苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB /T5009.29-2003，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-2003使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液，9.5 0mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比气相色谱仪要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。
原因如下：3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比气相色谱法简单，且不需使用有机试剂。
尤其对于高油脂样品（如月饼）若采用碱化－排油－酸化－提取－挥干－溶解等步骤，再上气相色谱仪检测，工作量大，试剂毒性也大，且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。
3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测，而气相色谱法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。
3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比气相色谱仪的氢火焰检测器灵敏，可进行更低含量的检测。
如用二极管阵列检测器，还可辅助定性，这更是气相色谱氢火焰检测器不可比拟的。
4 选用气相色谱仪时的注意事项GB/T5009.29所用的气相色谱柱为5％DEGS＋1％磷酸固定液的60－80目Chromosorb W AW，。
这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点，但同时也有稳定时间较长的缺点。
该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚，如果用甲醇或乙醇，则溶剂峰拖尾效应较大，对山梨酸的测定有影响。
如用毛细管柱，能取得更好的峰形和灵敏度，但其稳定性及特异性不如填充柱。
一般可用非极性毛细管柱，0.530mm内径，10－15m长度。
色谱条件可能需用程序升温。
在气相色谱仪上的出峰次序为先出山梨酸，后出苯甲酸。
糖精钠不能直接用气相色谱进行检测，必须衍生化后才能汽化进样。
5 选用液相色谱仪的注意事项按照GB/T5009.29，流动相应为5：95的甲醇：0.02M醋酸铵溶液，但是这个比例仅是个参考值，我们在工作中应根据实际情况进行调节。
为什么用甲醇溶液？甲醇有两个作用，（1）防腐，液相色谱柱最怕流动相长菌，尤其霉菌。
甲醇可使蛋白质变性，有杀菌作用。
（2）调节流动相极性，这是最重要的一点。
甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变，因此可以通过改变流动相中甲醇含量，以调节这几个组分的出峰和分离，以得到较理想的色谱图。
5：95是一个通用的比例，如减少甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢，扩散效应增大，峰形较差，但这三组分的分离情况较好。
如增加甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前，扩散效应较小，峰形尖锐，但这三组分的分离情况可能受影响，产生重叠。
在选择条件时，只能通过实验手段，如配制3：97，4：96，5：95，6：96，7：9 3的流动相，综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。
不同柱的最适比例不同，举例来说，色谱科公司的液相柱最适比例为4：96，而岛津公司液相柱的最佳比例为7：93。
就是同一根柱，一年前和一年后的极性也会有变化，需调节溶液配比。
为什么使用0.02M醋酸铵溶液？加入醋酸铵是为了调节离子强度，使待测物的峰形不致于变坏。
如果单独检测苯甲酸和糖精钠，加不加醋酸铵没有什么关系，都可以得到较好的峰形；但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵，否则得不到一个完整的色谱峰，峰形呈破裂状。
醋酸铵溶液浓度不需严格控制，0.01M、0.02M、0.04M均可。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠在液相上的出峰次序很有特点。
在流动相5：95及以下比例时，次序是苯甲酸、山梨酸、糖精钠（注意一下气相的出峰次序），逐步增大甲醇含量，苯甲酸、山梨酸的出峰时间逐步提前，而糖精钠是出峰时间迅速提前，随着甲醇比例的逐步增大（1 5％－30％），原先在最后出峰的糖精钠集次和前面的山梨酸、山梨酸重叠，并位于最前面，其次序变为糖精钠、苯甲酸、山梨酸。
再提高甲醇浓度，次序不变。
用高甲醇比例条件（甲醇15％以上）做出的三种标准物质色谱图峰形较好，出峰时间也较快，但做实际样品时干扰较大；因此建议尽量使用低甲醇比例条件（甲醇5％左右）。
6 苯甲酸、山梨酸超标时的判断苯甲酸、山梨酸超标的样品较多，由于它们往往牵涉到一批货物是否合格，因此责任重大。
由于该方法定量较准确，因此遇到超标样品时应将精力集中于定性方面。
如同时有气相色谱仪和液相色谱仪，建议用这两种性质相差较大的仪器进行对照，如定量结果差不多，即可确认。
如只有气相色谱仪，应利用其在填充柱保留时间稳定的特性，同时进五针标准液和五针样品液（注：峰面积应差不多，否则需对一方按比例稀释），如标准和样品液的保留时间相差时间超过1 秒，可认为不是。
（如进针的技术不过关，请不要做此实验）如用液相色谱仪，当检测器为二极管阵列检测器时，根据保留时间和紫外吸收图结合定性，当只有紫外检测器时，改检测波长为220nm，230nm，250nm，重复进标准和样品液，由标准和样品在不同波长的峰高比值看是否吻合。
如有微生物检测手段，可加样品于有菌培养基中，观察有无抑菌现象，如无抑菌现象则无防腐剂。
不是很推荐用双柱法，因为有时柱极性相差不大，反而会影响最终判断。
7 糖精钠超标时的判断当检测糖精钠超标时，除了采用二极管阵列检测器或波长验证，还可以利用糖精钠的荧光特性，用荧光检测器进行验证。
荧光条件是激发波长为277nm，荧光波长为410nm。
只有当用荧光检测器和用紫外检测器做出的定量结果相差不多，才可以判断为是。
还有一个简单粗糙、却也行之有效的验证方法，即感官法。
糖精钠是一种甜味剂，用舌头可以感觉到它的甜味，如果含量超标，一定能尝出来。
8 标准溶液的配制贮存问题苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准溶液如用水、乙醇作基体，一般几个月后会严重降解，。
如用甲醇溶解再放于冰箱冷冻层，可保持稳定一两年。
因此推荐用甲醇作溶剂。
在配制标准溶液时，初学者常犯的错误多为用甲醇溶解苯甲酸钠，用水溶解苯甲酸，晃了半天才发现怎么也不没溶解。
应该用弱碱性水溶解苯甲酸钠、山梨酸钾，用甲醇溶解苯甲酸、山梨酸。
9 苯甲酸、山梨酸的应用范围首先应注意到，并不是所有食品都需要加入防腐剂，只有那些富含营养物质，且需要长时间暴露于空气的才有这样的需要，否则对厂家来说会增加不必要的成本。
酱油、酱料、咸菜、浓缩果汁等由于开封后不可能短期内吃完，月饼等需在货架上摆放，如不加防腐剂很快会发霉变质，有添加防腐剂的必要。
而利乐装或易拉罐装的饮料由于很快可以食用完毕，即在细菌大量繁殖前己被消化了，因而没有添加的必要。
苯甲酸、山梨酸如果要起到防腐的作用，含量就不能太低。
如果我们检测样品时只有几个p pm的浓度，有可能是从原料中带来的或由其它添加剂转化来的，而不是厂家出于防腐目的加入的。
苯甲酸、山梨酸也只是防腐剂中的两种。
并不是所有需要加入防腐剂的食品都会添加苯甲酸、山梨酸，有可能使用防霉剂或其它种类的防腐剂，或自行规定需冷藏（如某些月饼）。
因此有些食品检测不出也属正常。
另外，我们应该比较清楚地理解苯甲酸与苯甲酸钠、山梨酸与山梨酸钾之间的关系。
在食品中添加防腐剂通常以苯甲酸钠、山梨酸钾形式加入，它们不易汽化，易溶于水，但不溶于甲醇等有机试剂；而苯甲酸、山梨酸易汽化，易溶于有机试剂，但是几乎不溶于水。
检测时要注意有机酸及其盐类之间的转换。
GB/T16345-1996前言本标准非等效采用国外标准。
本标准的附录A是提示的附录。
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准负责起草单位：卫生部食品卫生监督检验所负责起草；参加起草单位：北京市卫生防疫站，中国预防医学科学院环境卫生监测所。
本标准主要起草人:杨祖英、张平伟、孙淳、姚孝元、郑兰波。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
中华人民共和国国家标准饮料中乙酰磺胺酸钾(安赛蜜)的测定GB/T 16345-1996Deternination of Acesulfame K in Beverage------------------------ ------ ----------------------------------------------------------------------------1范围本标准规定了饮料中乙酰磺胺酸钾的测定方法。
本标准适用于汽水、可乐型饮料、果汁、果茶等食品中乙酰磺胺酸钾的测定。
也适用于糖精钠的测定。
本法取样量为2.5g时，最低检出限为乙酰磺胺酸钾、糖精钠各50mg/kg(L)。
2原理样品中乙酰磺胺酸钾、糖精钠经高效液相反相柱C18分离后，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。
3试剂有机溶剂需重蒸3.1甲醇:分析纯3.2乙腈:分析纯3.30.02mol/L硫酸铵溶液:称取硫酸铵2.642g，加水溶解至1000mL。
3.4硫酸溶液:10%。
3.5中性氧化铝:层析用，100～200目。
3.6乙酰磺胺酸钾，糖精钠标准储备液:精密称取乙酰磺胺酸钾、糖精钠各0.1000g，用移动相溶解后移入100mL容量瓶中，并用移动相稀释至刻度，即含乙酰磺胺酸钾、糖精钠各1mg/mL的溶液。
3.7乙酰磺胺酸钾、糖精钠标准使用液:吸取乙酰磺胺酸钾、糖精钠标准储备液2mL 于50mL容量瓶，加移动相至刻然后分别吸取此液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于10mL容量瓶中，各加移动相至刻度，即得各含乙酰磺胺酸钾，糖精钠0.004mg/mL、0.008mg/mL、0.012mg/mL、0.016mg/mL、0.020mg/mL的混合标准液系列。