中和试验步骤
实验七胃舒平药片中铝和镁的测定

实验七胃舒平药片中铝和镁的测定实验七胃舒平药片中铝和镁的测定一、实验目的1.培养学生查阅读有关资料的能力,运用所学知识及有关参考资料对实际试样写出实验方案设计。
2.在教师指导下,培养学生在实验中解决实际问题的能力,并通过实践加深对理论课程的理解。
3.在以下提供的备选题目中,学生自选一个项目,通过查阅有关资料拟定分析方案,写出详细实验报告。
二、实验原理胃舒平是一种中和胃酸的胃药,主要用于胃酸过多及胃和十二指肠溃疡,它的主要成分为氢氧化铝、三硅酸镁及少量颠茄流浸膏,在加工过程中,为了使药片成形,加了大量的糊精。
药片中铝和镁的含量可用EDTA络合滴定法测定。
先将药片用酸溶解,分离除去不溶于水的物质。
然后取试液加入过量EDTA,调节pH=4左右,煮沸数分钟,使铝离子与EDTA充分络合,用返滴定法测定铝。
另取试液,调节pH=8~9,将铝离子沉淀分离,在pH=10的条件下,以铬黑T为指示剂,用EDTA滴定滤液中的镁离子。
三、仪器与试剂(参考)0.02 mol·LEDTA,锌标准溶液0.02 mol·L,20%六次甲基四溶液水溶液,氨水1︰1,盐酸1︰1,乙醇胺溶液1︰2水溶液,氨—氯化铵缓冲溶液,0.2%二甲酚橙指示剂,甲基红指示剂:0.2%乙醇溶液,K-B指示剂,氯化铵固体。
四、实验步骤(参考)1.样品处理称取胃舒平药片10片,研细后,称取药粉2g左右,加入1︰1HCl20mL,加蒸镏水至100mL,煮沸。
冷却后过滤,并以水洗涤沉淀.收集滤液及洗涤液于250mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀.2.铝的测定-1-1准确吸取上述试液5.00mL,加水至25mL左右.滴加1︰1NH水至刚出现浑浊,再加1:13HCl至沉淀恰好溶解。
准确加入0. 02 mol·LEDTA溶液25.00mL 左右,再加入20%六次甲基四铵溶液10mL,煮沸1min并冷却后,加入二甲酚橙指示剂2—3滴,以标准锌溶液滴定至溶液由黄色转变为红色为终点,平行3次。
实验四醋酸溶液的浓度测定

第四章滴定分析法应用实例实验一醋酸溶液的浓度测定一、目的要求1、掌握氢氧化钠标准溶液测定醋酸溶液浓度的反应原理。
2、明确判定滴定终点的方法.3、掌握用标准溶液测定未知样品浓度减少测定误差的方法。
二、原理=1。
8×10—5,因此可用标准碱溶液直醋酸为一元弱酸,其离解常数Ka接滴定.等当点时反应产物是NaAc,在水溶液中显弱碱性,可用酚酞作指示剂.反应如下:HAc十NaOH= NaAc 十H2O三、试剂(1)0。
1mo1·L—1NaOH标准溶液(配制与标定见实验二、实验三);(2)0.1%酚酞指示剂。
四、步骤用清洁移液管吸取少许试液洗移液管内壁,重复三次.然后吸取试液一份①置于250mL容量瓶中,用蒸馏水稀释到刻度,塞上瓶塞摇匀(移液管和容量瓶的使用操作参阅§2—2”容量器皿的准备和使用”)。
用清洁的25mL移液管吸取稀释后的试液,淋洗内壁三次,然后吸取稀释后的试液置于250mL锥形瓶中,加入酚酞指示剂2~3滴,用NaOH标准溶液滴定,直到加入半滴NaOH标准溶液,所呈现的红色在摇匀后半分钟之内不再褪去即为终点.根据NaOH 标准溶液的浓度C NaOH和滴定时消耗的体积V,可以计算所取醋酸试样中醋酸的总含量(以克表示)。
NaOH三次平行测定的结果与平均值的相对偏差不得大于0。
2%,否则应重做。
若时间许可,再以甲基橙为指示剂,滴定醋酸溶液,并与以酚酞为指示剂的实验结果进行比较,将得出什么结论?思考题1.测定醋酸为什么要用酚酞作为指示剂?用甲基橙或中性红是否可以?试说明理由。
2。
应如何正确地使用移液管?若移液管中的溶液放出后,在管的尖端尚残留一滴溶液,应怎样处理?3.草酸、拧橡酸、酒石酸等多元有机酸能否用NaOH溶液分步滴定?4。
滴定管、移液管和容量瓶是滴定分析中量取溶液体积的三种准确量器,记录时应记准几位有效数字?____________________①试液的取用量应根据试液的大致浓度来决定,一般滴定每份稀释后的试液,约耗用标准溶液20~30mL。
实验报告——精选推荐

实验报告细胞培养实验写报告内容1⽬的2 原理3材料与⽅法(操作步骤)4实验结果5结论或结果分析实验⼀鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养实验⼆滤泡性⼝炎病毒(VSV)的增殖(纯培养)实验三 Hep-2细胞的传代培养实验四 VSV TCID50滴定实验五⼲扰素活性(效价)的测定实验六 VSV中和试验(稀释⾎清固定病毒法)实验⼆鸡胚原代成纤维细胞的制备与培养⼀、⽬的1、掌握鸡胚原代成纤维细胞的制备及培养的基本步骤;2、掌握活细胞的显微镜下观察;3熟悉病毒在细胞内增殖的基本判断⽅法。
⼆、原理离体动物组织通过温和的⼿段(机械和酶消化)形成单个细胞后,在适宜的外界环境中,包括温度、酸碱度和⽓相环境,并给予充⾜合适的营养条件,能⽣存、⽣长形成单层细胞,这种原代培养的细胞具有原来体内所具备的基本特性,⽐如肌⾁细胞的收缩功能;上⽪细胞的分泌功能等。
通常把这种从体内取出组织细胞开始培养到第⼀次进⾏传代之前的这⼀段时期称为原(初)代培养。
原代细胞最接近体内细胞的特性,因⽽对外界环境的变化也最敏感,因此⽐较适合病毒的增殖,药物的作⽤机制等的研究。
三、材料(按2⼈/组的量发放)四、操作步骤1、在DMEM和Hank’s 液中分别⽆菌操作以1%的量加⼊双抗,吸出10~15mlHank’s 液⾄⽆菌平⽫中备⽤;2、碘酒和酒精棉球分别拭擦鸡胚⽓室外卵壳;3、取出两只⽆菌平⽫,并标记①和②,待⽤。
4、⼤镊⼦轻敲卵壳顶部然后⼩⼼去掉⽓室外卵壳;5、消毒镊⼦后⼩⼼撕破卵膜,两⼈互相配合取出鸡胚置于盛有Hank’s 液的平⽫①中,⼩⼼去头、内脏、⽖和粘液及⾎球,洗涤后置于盛有Hank’s 液的平⽫②中,再充分洗涤;6、取出洗净的组织块置于⼤青霉素瓶中,在⽕焰附近⽤⽆菌眼科剪⼑将其剪成约0.5~1mm3的⼩块(约250次),此时体积约0.5ml;⽤Hank s’液洗涤两次。
7、按照10倍量加⼊0.25%胰蛋⽩酶,调节pH⾄约7.3~8.0(⾁眼观为⾁红⾊)盖上瓶塞,写好标记;8、将上述细胞瓶置于37℃⽔浴中,开始计时,约15~30min,其间缓慢摇匀以充分消化。
新能源汽车VCU整车控制器实验要求DVP

试验步骤:
1、根据 ISO 16750-2-单线中断规定的方法进行试验。该步骤适用于所有的I/O。对于电源线和地线,中断时长应为15min。
2、连接并运行DUT。断开DUT的连接,然后恢复连接。观察装置断路期间和其后的情况。在DUT系统接口的每条电路分别重复进行。实
验条件如下:
17
开路-单线断线
断开时间:10s±1s
试验名称
试验条件/判断标准
Test Name
试验步骤:
Test conditions / Acceptance Criteria
1、对部件施加Umin
2、相对于部件功率,对典型的I/O模拟装置的电源线施加+1.0 V偏移。
3、对下一个合适的I/O模拟装置重复步骤(2)。
电源偏移
代码丢失。不应出现永久失效的代码。
试验步骤:
1、设置如图11所示的蓄电池电压降曲线。
2、浸润未通电的部件,直至其温度稳定在Tmin。
11
蓄电池电压降
3、部件上电,按照表20变量‘A’的参数绘制蓄电池电压降试验曲线。 4、按照B、C和D,另外重复步骤(3)三次。
5、在Tmax下重复步骤(2)-(4)。参数见附页A11
7
状态变化波形特征
2、在状态变化前、中和后,记录所有输出波形。采用示波器验证输出信号是否完整和部件性能是否正常。 3、对所有可能会发生其他状态变化的部件重复步骤(1)和(2)。
试验标准:
功能状态分类应为Fsc_A。状态瞬变不应损坏下游部件。分析波形时,应考虑意外输出行为和浮动输入。
试验步骤:
1、将部件接在LoadBox上,系统供电电压为12Vdc,将5µH 电感器置于台架试验装置的接地线路上。
滴定操作实验报告

滴定操作实验报告氢氧化钠溶液的标定及盐酸溶液对氢氧化钠溶液的滴定一.实验目的:1.培养同学们“通过实验手段用已知测”的实验思想。
2.学习相关仪器的使用方法,掌握酸碱滴定的原理及操作步骤.3.实现学习与实践相结合。
二.实验仪器及药品:仪器:滴定台一台,25mL酸(碱)滴定管各一支,10mL移液管一支,250mL锥形瓶两个。
药品:0.1mol/L NaOH溶液,0.1mol/L盐酸,0.05mol/L草酸(二水草酸),酚酞试剂,甲基橙试剂。
三.实验原理:中和滴定是酸与碱相互作用生成盐和水的反应,通过实验手段,用已知测。
即用已知浓度的酸(碱)溶液完全中和浓度的碱(酸)溶液,测定出二者的体积,然后根据化学方程式中二者的化学计量数,求出溶液的浓度。
酸碱滴定通常用盐酸溶液和氢氧化钠溶液做标准溶液,但是,由于浓盐酸易挥发,氢氧化钠易吸收空气中的水和二氧化碳,故不能直接配制成准确浓度的溶液,一般先配制成近似浓度溶液,再用基准物标定。
本实验用草酸(二水草酸)作基准物。
⑴氢氧化钠溶液标定:H2C2O4+2NaOH=Na2C2O4+2H2O 反应达到终点时,溶液呈弱碱性,用酚酞作指示剂。
(平行滴定两次)⑵盐酸溶液标定:HCl+NaOH=NaCl+H2O反应达到终点时,溶液呈弱酸性,用甲基橙作指示剂。
(平行滴定两次)四.实验内容及步骤:1.仪器检漏:对酸(碱)滴定管进行检漏2.仪器洗涤:按要求洗涤滴定管及锥形瓶,并对滴定管进行润洗3.用移液管向两个锥形瓶中分别加入10.00mL草酸(二水草酸),再分别滴入两滴酚酞.向碱式滴定管中加入药品至零刻线以上,排尽气泡,调整液面至零刻线,记录读数。
4.用氢氧化钠溶液滴定草酸(二水草酸)溶液,沿同一个方向按圆周摇动锥形瓶,待溶液由无色变成粉红色,保持30秒不褪色,即可认为达到终点,记录读数。
5.用移液管分别向清洗过的两个锥形瓶中加入10.00 mL氢氧化钠溶液,再分别滴入两滴甲基橙。
酸度酸值——精选推荐

实验十一轻质石油产品酸度测定[参考GB/T258-2016]一、实验目的1、熟悉并了解轻质石油产品酸度测定的意义;2、学习并掌握轻质石油产品酸度的原理和测定方法。
二、实验原理中和100mL 轻质石油产品所需氢氧化钾的毫克数称为酸度,以mg/100mL 表示;中和1克石油产品所需的氢氧化钾毫克数称为酸值。
本方法系用沸腾的乙醇将轻质石油产品中的酸性物抽出,在有颜色指示剂条件下,用氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液进行滴定。
本方法适用于测定汽油、石脑油、煤油、柴油及喷气燃料的酸度测定。
根据油品颜色不同选择酚酞(浅色油品)、碱性蓝6B(深色油品)、甲酚红、溴麝香草酚蓝(含乙基液汽油)等不同指示剂。
油品的酸值主要是环烷酸类,油品因储存氧化而生成的酸性产物,有的油品还含有少量脂肪酸和无机酸。
酸度和酸值的大小可以大致判断油品精制的深度和油品的腐蚀性。
对于润滑油可以从酸值变化来判断其变质的程度。
三、仪器上海昌吉地质仪器有限公司生产的SYD-264型石油产品酸度、酸值测定试验器,如图1所示。
主要设备的规格如下,锥形烧瓶:250mL ,磨口为24;球形回流冷凝管:300/240×2球型;移液管:25mL 、50mL 和100mL ;微量滴定管:座式,2mL ,分度值为0.02mL ;5mL ,分度值为0.05mL ;天平:可精确称量至0.001g 。
图1SYD-264型石油产品酸度、酸值测定试验器1-夹持器;2-冷凝器;3-支架杆;4-锥形瓶;5-加热炉;6-电压表;7-功率调节旋钮;8-电源开关注:将加热器调整旋钮逆时针调到底,接通电源,顺时针转动旋柄,逐渐加大电热器功率到适合程度(如果调小功率后,仍感到电热板温度过度,可在烧瓶与电热板间垫薄石棉网)。
四、试剂123456781.95%乙醇:分析纯精制乙醇:用硝酸银和氢氧化钾溶液处理后,再经沉淀和蒸馏。
2.氢氧化钾:分析纯,配成0.05moL/L氢氧化钾-乙醇溶液。
环境实验_氨氮的测定
实验二氨氮的测定(一)纳氏试剂比色法(标准法)一.实验目的1.掌握絮凝沉淀法和蒸馏法进行水样预处理的操作技能。
2.掌握用纳氏试剂比色法(标准法)测定氨氮的原理和技术。
二.实验原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应,生成淡红棕色胶态化合物,其颜色深浅与氨氮含量成正比,通常可在波长410-425nm范围内测其吸光度,计算其含量。
本法最低检出浓度为0.025mg/L,测定上限为2mg/L。
水样作适当的预处理后,本法可适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中氨氮的测定。
三.实验仪器、设备1.氨氮蒸馏装置。
2.分光光度计。
3.pH计。
4.50mL比色管。
5. 1mL、5mL和10mL吸管。
四.实验试剂1.无氨水:每升蒸馏水中加0.1mL硫酸,在全玻璃蒸馏器中重蒸馏,弃去50mL初馏液,接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中,密塞保存。
2.1 mol/L HCl。
3.1 mol/L NaOH。
4.轻质MgO:将MgO在500℃下加热,以除去碳酸盐。
5.0.05%溴百里酚蓝指示剂。
6.硼酸吸收液:称取20g硼酸溶于无氨水,稀释至1L。
7.10% ZnSO4:称取10g ZnSO4溶于无氨水,稀释至100mL。
8.25%NaOH:称取25g氢氧化钠溶于无氨水,稀释至100mL,贮于聚乙烯瓶中。
9.纳氏试剂:可选择下列方法之一制备:①称取碘化钾5g,溶于10mL无氨水中,边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgCl2)粉末2.5g,直至出现微量朱红色沉淀溶解缓慢时,充分搅拌混合,并改为滴加二氯化汞饱和溶液,当出现少量朱红色沉淀不再溶解时,停止滴加。
将上述溶液徐徐注入氢氧化钾溶液中(15g氢氧化钾溶于50mL无氨水中,冷却至室温),以无氨水稀释至100mL,混匀。
于暗处静置过夜,将上清液移入聚乙烯瓶中,密塞保存。
此试剂至少可稳定一个月。
②称取16g氢氧化钠,溶于50mL无氨水中,冷却至室温。
另称取7g碘化钾和10 g碘化汞(HgI2)分别用少量无氨水溶解,再混合,然后将此混合液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中,用无氨水稀释至100mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞于暗处保存,有效期可达一年。
JMP试验设计范文
JMP试验设计范文JMP是一种强大的统计软件,用于进行数据分析和试验设计。
在实验设计中,JMP可以帮助研究人员确定实验因素、优化实验条件,并分析结果以得出准确的结论。
本文将介绍JMP试验设计,包括试验设计的基本概念、步骤和应用示例。
试验设计是科学研究中的重要工具,用于确定实验因素对响应变量的影响,同时考虑到模拟误差的影响。
试验设计可以提高实验效率,减少实验代价,同时可以通过最小化误差方差来产生可靠和精确的结果。
试验设计包括以下几个基本概念:1.实验因素:试验设计的关键要素,是研究人员能够操纵的变量。
例如,在药物研发中,实验因素可以是药物剂量、给药时间等。
2.响应变量:试验设计的主要结果变量,用于观察和度量实验因素的效果。
例如,在药物研发中,响应变量可以是患者的治疗效果。
3.水平:每个实验因素可以分为不同的水平,表示该因素在试验中的不同取值。
例如,药物剂量可以有低、中和高三个水平。
4.交互效应:当两个或多个实验因素同时影响响应变量时,实验因素之间可能存在交互效应。
例如,在药物研发中,药物剂量和给药时间可能会相互影响。
进行试验设计的步骤如下:1.确定试验目标:明确试验的目的和要解答的科学问题。
2.选择试验因素和水平:确定对响应变量有影响的实验因素和它们的水平。
3.设计试验方案:选择合适的试验设计方法,例如完全随机设计、随机区组设计等。
4.进行试验:根据试验设计方案进行实际试验,并记录响应变量的数据。
5.数据分析:使用JMP进行数据分析,包括方差分析、回归分析等。
6.结果解释:根据分析结果解释实验因素对响应变量的影响。
JMP在试验设计中的应用非常广泛。
以下是一个示例:假设一家制造商想要确定影响产品质量的因素,并优化生产条件。
他们选择了温度、湿度和压力作为实验因素,并分别选取了三个水平:低、中、高。
他们使用JMP进行试验设计和数据分析。
首先,他们选择了一种完全随机设计,其中每个实验因素的每个水平都重复3次。
药品微生物限度检查方法验证步骤及示教
药品微生物限度检查方法验证一般步骤1.样品及确定验证项目样品要求:不含菌或少量菌验证项目:根据药品用药途径、处方、制法确定。
细菌、霉菌及酵母菌计数验证(一般必作);控制菌检查如为中药制剂必须查标准,根据用药途径、处方、制法确定控制菌检查项目。
特殊的如滴眼剂、用于烧伤、严重创伤等应根据制剂通则项下要求及微生物限度标准来确定。
2. 确定供试液制备方法3. 方法选择预试验(1)目的:确定样品对试验菌有无抑菌活性及计数验证各试验菌的回收试验方法。
(2)查资料,根据样品的功能、主治及所含成分等确定方法选择预试验方案。
(3)根据预试验结果确定各试验菌计数验证方法控制菌验证方法4. 验证试验:选择3个批号样品进行3次独立实验,证明方法的有效性;5. 据验证结果优化试验条件,建立微生物限度检查方法SOP。
6. 写出验证资料。
示教内容11.5.上午:菌液制备方法:一. 新鲜浓菌液制备(要求学员练习操作的内容)新鲜浓菌液接种:细菌大肠埃希菌[CMCC(B)44102]金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]生孢梭菌[CMCC(B)64941](厌氧梭菌)铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]培养基:营养肉汤3-5ml、硫乙醇酸盐流体培养基3-5ml接种及培养:1.分别取各试验菌半个--1个菌落分别接种营养肉汤(充分研匀、摇匀),36±1℃培养16-18小时。
2.生孢梭菌新鲜培养物取0.1ml接种硫乙醇酸盐流体培养基(临用前排氧)36±1℃培养18-24小时。
霉菌及酵母菌白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]培养基:改良马丁培养基3-5ml;改良马丁琼脂培养基斜面1.取白色念珠菌的菌落接种改良马丁培养基23-28℃培养24小时(可用36±1℃培养18-24)。
2.黑曲霉孢子悬液的制备:沾取黑曲霉孢子接种改良马丁琼脂培养(红字为示教内容基,培养5-7天待培养物黑色孢子生长(全部变黑,已制备好斜面培养物示教)加入5-10ml0.9%氯化钠溶液,小心振挡洗脱表面的黑色孢子1-2次,吸出洗脱液(注意不要触到菌丝体)即为孢子悬液。
高中化学20个常考实验
中学化学教材常考试验总结一、配制肯定物质的量浓度的溶液以配制100mL1.00mol/L的NaOH溶液为例:1、步骤:(1)计算(2)称量:4.0g(保留一位小数)(3)溶解(4)转移:待烧杯中溶液冷却至室温后转移(5)洗涤(6)定容:将蒸馏水注入容量瓶,当液面离刻度线1—2cm时,改用胶头滴管滴加蒸馏水至凹液面最低点与刻度线在同一水平线上(7)摇匀:盖好瓶塞,上下颠倒、摇匀(8)装瓶贴标签:标签上注明药品的名称、浓度。
2、所用仪器:(由步骤写仪器)托盘天平、药匙、烧杯、玻璃棒、(量筒)、100mL容量瓶、胶头滴管3、留意事项:(1) 容量瓶:只有一个刻度线且标有运用温度和量程规格,只能配制瓶上规定容积的溶液。
(另外运用温度和量程规格还有滴定管、量筒(2) 常见的容量瓶:50 mL、100mL、250mL、500mL、1000mL。
若配制480mL与240mL溶液,应分别用500mL 容量瓶和250mL容量瓶。
写所用仪器时,容量瓶必需注明规格,托盘天平不能写成托盘天秤!(3) 容量瓶运用之前必需查漏。
方法:向容量瓶内加少量水,塞好瓶塞,用食指顶住瓶塞,用另一只手的五指托住瓶底,把瓶倒立过来,如不漏水,正立,把瓶塞旋转1800后塞紧,再倒立若不漏水,方可运用。
(分液漏斗与滴定管运用前也要查漏)(4)命题角度:一计算所需的固体和液体的量,二是仪器的缺失与选择,三是试验误差分析。
二、Fe(OH)3胶体的制备:1、步骤:向沸水中加入FeCl3的饱和溶液,接着煮沸至溶液呈红褐色,停止加热。
操作要点:四步曲:①先煮沸,②加入饱和的FeCl3溶液,③再煮沸至红褐色,④停止加热2、涉及的化学方程式:Fe3++3H2O Fe(OH)3(胶体)+3H+强调之一是用等号,强调之二是标明胶体而不是沉淀,强调之三是加热。
3、命题角度:配制步骤及对应离子方程式的书写三、焰色反应:1、步骤:洗—烧—蘸—烧—洗—烧2 、该试验用铂丝或铁丝3 、焰色反应可以是单质,也可以是化合物,是物理性质4 、Na ,K 的焰色:黄色,紫色(透过蓝色的钴玻璃)5 、某物质作焰色反应,有黄色火焰肯定有Na ,可能有K6、命题角度:试验操作步骤及Na ,K 的焰色四、Fe(OH)2的制备:1、试验现象:白色沉淀马上转化灰绿色,最终变成红褐色沉淀。
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中和试验步骤
1、测定病毒TCID50/100l
2、 制备细胞悬液,使细胞浓度约为1105个/mL,加到96孔
细胞培养板中,每孔100l。置37℃ CO2培养箱中,直至细胞长至
单层。
3、 血清灭活:将待检测的血清放到56℃水浴30min(此时
血清中的病原菌都已被灭活)。
4、100TCID50/50l病毒液或者200TCID50/25l病毒液的制
备, 这两者是等价的。100TCID50/50l病毒液制备方法:计算已
测定了TCID50/100l的病毒原液稀释至100TCID50/50l的稀释倍
数:lg100TCID50/50l=-log100-log(100/50)=-2、30103得
100TCID50/50l=10-2、30103,假设病毒TCID50/100l=10-6、3,
则稀释倍数=(100TCID50/50l)(TCID50/100l)=106、3102、
30103≈9976倍。
5、 取一块新的96孔板,1-10列每孔加50l待检血清原液,
再用8道孔排枪加每孔100TCID50/50l病毒液50l,稍微吹打使血
清与病毒液混均。11列先每孔加50l维持液,再于11列的第一孔
加50l标准阳性血清,将标准阳性血清往下作1:
2、1:22至1:28倍稀释。12列第1孔加标准阴性血清原液
50l,再加100TCID50/50l病毒液50l。用维持液将
100TCID50/50l的病毒液作4次连续10倍稀释,稀释成
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10TCID50/50l、1TCID50/50l、0、1TCID50/50l,依次加到第12列
的3到6孔,每孔加50l,再每孔加50l维持液。将培养板置
37℃ CO2培养箱中和1h。
6、 将细胞长至单层的培养板中的维持液倒掉,然后将上一
步已中和1h的血清病毒液转移到长了单层细胞的培养板中,转移
的时候要小心,以免加的液体把细胞吹掉了。
7、 再每孔加150l维持液,微量振荡器上震荡30s,混均。
将培养板置37℃ CO2培养箱中,96h后开始观察记录结果。
(注:在第5步中,加血清和抗原的时候,加的体积最好大于
50l,不然第6步将中和的血清病毒液转移到单层细胞上的总体肯
定是小于100l的。加了维持液后,最后的总体积是250l。)