检验科项目说明书

一、梅毒螺旋体抗体（TP-Ab ）

检验原理

本检测试剂采用胶体金标记技术，应用免疫层析法来检测全血、血清、血浆中的梅毒螺旋体抗体。该试剂检测线（T）上包被梅毒螺旋体抗体重组抗原，质控线（C）包被抗鼠IgG 多克隆抗体，金标结合物伟胶体金标记的梅毒螺旋体重组抗原和胶体金标记的鼠IgG 。检测时，

在试剂加样区中滴加样本，当样本中含有TP 抗体浓度等于或高于最低检出限时，则TP 抗体与标记抗原蛋白反应形成复合物，在毛细效应下沿着硝酸纤维膜向前移动至检测区，被预先包被在膜上的梅毒螺旋体重组抗原捕获，在检测区（T ）内形成一条红色反应线，表示阳性结果。当样本中含有TP 抗体浓度低于最低检出限时，则在检测区（T ）内未形成红色的反应线，表示阴性结果。无论TP 抗体是否存在于样本中，胶体金标记的鼠IgG 抗体都会在层析作用下到达质控区（C）与预包被的鼠IgG 多克隆抗体反应形成一条红色反应线。检验方法

1）沿铝箔袋切口部位撕开，取出试卡平放在台面上，并做好标记。

2）用吸管吸取全血、血清、血浆标本，然后垂直加入3-4 滴（80ul-100ul ）于加样孔中.若样

本量少于80ul 或血液粘稠爬不上膜，可在加样孔加一滴稀释液。

3）10-15min 观察显示结果，15min 后显示的结果无效。

检验结果的解释

阳性：检测区及质控区均出现一条红色反应线，表示样本中含有TP 抗体且含量高于或等于最低检出限。建议确诊后积极对症治疗。

阴性：仅在质控区出现一条红色反应线，表示样本中TP 抗体含量低于最低检出限或者含量

为零，建议有高危行为者不定期检测。

无效：质控区无红色反应线出现，表示检测无效，建议此时用新试卡重测，尤其注意加样量是否足够。

二、人类免疫缺陷病毒（HIV）

检验原理本品利用胶体金免疫层析技术，采用双抗体夹心法检测HIV1/2 抗体。当待测样本中含有HIV1/2 抗体等于或高于最低检出限时，HIV1/2 抗体先和金标抗原（Ag-Au ）形成反应复合物Ab- Ag-Au 。由于层析作用反应复合物沿着硝酸纤维膜向前移动。当遇到检测区包被

HIV1/2 重组抗原时，形成Ag-Ab- Ag-Au 复合物，在检测区上最终形成一条红色反应线，此时结果为阳性；相反，当样本中不含HIV1/2 抗体或者抗体浓度低于最低检出限时，则检测区无红色反应线，此时结果为阴性。质控区包被鼠IgG 多克隆抗体，与胶体金标记的鼠IgG 抗体反应形成红色反应线作为质控。

检验方法

1）沿铝箔袋切口部位撕开，取出试卡平放在台面上，并做好标记

2）用吸管吸取血清、血浆标本，然后垂直加入3-4 滴（80ul-100ul ）于加样孔中.若样本量

少于80ul 或血液粘稠爬不上膜，可在加样孔加一滴稀释液；若为全血标本，则用吸管吸取标本，垂直加入2 滴（约50ul ）于加样孔中，同时滴加1-2 滴稀释液

3）10-15min 观察显示结果；30min 后显示的结果无临床意义。

检验结果的解释

阳性：两条红色反应线，检测区及质控区各出现一条红色反应线

阴性：仅在质控区出现一条红色反应线。

无效：质控区无红色反应线出现，表示检测无效，建议此时用新试卡重测。

三、乙肝五项检测

[检验原理]

乙肝五项检测卡（胶体金法）采用胶体金免疫层析技术，将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起。同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用

HBSAG 金标试条利用双抗本夹心法原理，在玻璃纤维膜上预包被金标鼠抗HBSAg 单抗（Au'-sAb1），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗HBSAg 单抗（sAb2）和羊

抗鼠1gG。检测阳性样本时，样本中HBSAG 与胶体金标记抗体结合形成复合物，在层析作用

下复合物沿膜带向前移动，经过检测线时与预包被的抗体结合形成“ A-usBb1-HBSAG-

sAb2 ”夹心物而凝聚显色，游离金标抗体则在对照线处与羊抗鼠1gG 结

合而富集显色。阴性样本则仅在对照线处显色。

抗一HBS 金标试条利用双抗原夹心法原理，在玻璃纤维纸上预包被金标表面抗原（纯化抗原）（AU 一SAg），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包装（纯化抗原）HBSAG 和羊抗HBSAG 。检测阳性样本时，样本中的HBSAB 与胶体金标记表岵面抗原结合形成复合钩，在层析作用下复合物沿膜带向前移动，经过检测线时与预包被的表面抗原结合形成“ A-usAg-HBSAb-sAg ”夹心物而凝聚显色，游离金标抗原则在对照线处与羊抗HBSAg 结合

而富集显色。阴性样本则仅在对照线处显色。

HBEAG 金标条利用双抗体夹心法原理，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗HBeAg 单抗（Au'eAb1），在硝酸纤维素膜上的检测线和对照线处分别包被鼠抗e单抗（eAb2）和羊抗鼠1gG。检测时，样本中的eAg 可与胶体金标记抗体结合形成免疫复合物，在层析作用下复合

物沿膜带移动，经过检测线时与预包被的抗体形成“eAb2-eAg-eAb1-Au ”夹心物而凝聚显色；阴性样本仅在对照线处显色。

抗-HBe 金标试条是采用竞争法，在破璃纤维素膜上预包被e 抗原（大肠杆菌表达）

及金标鼠抗一eAb2-AU ，在硝酸纤维素膜上的检测线包被鼠抗e 单抗（eAb1），在对照

线包被羊抗鼠IgG 。检测时，样本中的eAb 可与e 抗原及金标抗体一eAb2-Au 结合，形

成免疫复合物，在层析作用下复合物沿膜带移动，经过检测线时，金标记的eAb2-Au 不能与检测线结合，则只在对照线处形成一条色带。如为阴性样本，则在检测线处形成夹心物“ eAb-

1eAg-eAb2- Au ”而凝聚显色。

抗-HBC 金标试条是采用竞争法，在玻璃纤维素膜上预包被金标记重组核心抗原（大肠杆菌表达）（cAg），在硝酸纤维素膜上的检测线和对照线处分别包被鼠抗核心单抗

（cAb1）和羊抗重组核心抗原。检测时，样本中的cAb 与检测线处鼠抗cAb1 竞争的结

合金标记核心抗原cAg 。如果为阳性标本金标记的cAg 不能与检测线处鼠抗cAb1 结合，则检测线处不出现任何可见条带，如为阴性样本，则金标记的cAg 与检测线处抗cAb1 结合形

成一条色带，金标记的cAg 可以照线处被羊抗重组核心抗原捕获而形成一条色带，检验方法

在使用前请仔细阅读本说明书，并严格按照说明书执行，以保任测试结果的准确性。

1）将待测样品从储存条件下取出，平衡至室温18 一25“C并编号；

2）将所需数量的试卡从包装盒子中取出，打开铝箔包装袋将试卡取出平放于台面，编号（与样品相对应）

3）用加样枪在试卡的五个加祥孔中分别加入60ul 血清（浆），或用所配吸管在每个加样孔

中滴入三滴

4）加样20分钟后最终观察并判断结果，30 分钟后试验结果无效。[检验结果]

HBSAG 、抗抗-HBS 、HBEAG 阳性：在检测线及对照线各出现一条紫红色反应线。阴性：仅在对照线出现一条紫红包反应线。

无效：试卡无紫红色反应线出现，或仅在检测线出现一条反应线，表明买验失败或测试卡失效，请用新的检测卡重新测试。如果问题仍然存在请停止使用本批产品，并与当地经销商联系。

抗-HBE 、抗-HBC 阳性：1 、仅在对照线出现一条紫红色反应线。

2、若对照线出现一条紫红色带，在检测非常弱的紫红色带出现，应判为弱阳性阴性：

在检测线及对照线各出现一条紫红色反应线

无效：试卡无紫红色反应线出现，或仅在检测线出现一条反应线，表明买验失败或检测卡失效，请用新的检测卡重新测试。如果问题仍然存在请停止使用本批产品，并与当地经

销商联系。

[检验结果的解释] 乙肝病毒五项标志物常见临床模式对照表

五项指标的检验结果可与乙肝常见模式进行比较，若出现非常见模式的情况，原因可能是标本溶血、病毒变异或标志物滴度过低造成，此时需对可疑指标采用酶联试剂或其它试剂进行确

认

四、丙型肝炎病毒抗体检测

本品采用胶体金免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清（浆）中HCV 抗体。在玻璃纤维素膜上预包被金标小鼠抗人1gG 抗体（anti-IgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被重组丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5 ，源自大肠杆菌）和人IgG 抗体（丙种球蛋白）。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab 与胶体金标记小鼠抗人IgG 抗体结合形成复台物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-IgG Ab - HCV Ab - HCV Ag” 夹心物而凝聚显色，游离金标小鼠抗人

IgG 抗体则在对照线处与人IgG 抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。15

分钟内观察结果即可。

检测方法

1）将待测标本从储存条件下取出平衡至室温并编号。

2）将胶体金试纸条从包装盒中取出打开铝箔包装袋，平置于台面上。

3）用塑料滴管加一滴（10ul）血清或血浆样本，加到试纸条指示箭头下端的加样处

4）随机滴加两滴样本稀释液（约100ul ）

5）加样后，阳性标本可在1-15 分钟内检出，建议15 分钟后再最终观察并已录实验结果检

验结果的解释）

阳性：试纸卡在检测线（ T ）和对照线（ c ）位置出现两条紫红色条带。

阴性：试纸卡只在对照线（ c ）位置出现一条紫红色条带。

失效：对照线（c）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，井与当地供应商联系。

五、甲型肝炎病毒IgM 抗体检测

检验原理本试剂盒应用免疫层析式抗体捕获法原理，在硝酸纤维膜上包被抗人-IgMu 链抗体和抗鼠IgG 抗体。若标本中含有HAV IgM 抗体时，能与抗人-IgMu 链抗体及胶体金标记HAV 抗原的复合物相结合，在反应区形成肉眼可见的两条红色反应线，反之则只在对照线位置（C）出现一条红色反应线。

检验方法

1）待测样本，检测试剂及其他检测用材料等均平衡至室温后，取出测试卡。

2）去待测样本，按照1：1000 倍稀释，例如取待测样本4ul 加入到4ml 的样本稀释液中，将稀释后的样本混合液混合均匀。

3）将稀释后的样本混合液80-120ul （约2-3滴）滴于测试卡的加样孔中，20 分钟观察显示结果。30 分钟后的显示结果无临床意义。

检验结果解释

阳性：在检测线（ T ）和对照线（ c ）位置各出现两条一条红色反应线。

阴性：只在对照线（ c ）位置出现一条红色反应线

无效：无红色反应线出现，或仅在检测线（ T ）位置出现一条红色反应线，。表示检测无效，建议此时用新试卡重测。

六、HBsAg（胶体金法）

检验原理：采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗乙型肝炎病毒表面抗原单

抗（Au-sAb1）,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗乙型肝炎病毒表面抗原单抗（sAb2）和羊抗鼠IgG 。当检测阳性血清或血浆样本时，样本中乙型肝炎病毒表面抗原与胶体金抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与包被的抗体结合形成Au-sAb1 –HbsAg- sAb2 夹心物而凝聚显色，游离金标抗体则在对照线处与羊抗鼠IgG 结合而富集显色。阴性标本则仅在对照相处显色。

样本要求：

1.可采用全血、血清、血浆进行检测，其中，全血是指末梢血（指血或耳血）。临床常用抗

凝剂（EDTA 、肝素、枸橼酸钠）对血浆样本不影响检测结果。

2.采集静脉的血清、血浆应在无菌条件下，并避免样本溶血。

3.如果血清或血浆样品收集后7 天内检测，样品须放在2-8°C 保存，如果大于7 天则须

冷冻保存。

4.全血样本建议在3 天内检测，样品放在2-8° C 保存，不得冻存。

检测方法：

1.将试纸取出，粘于不干胶记录纸上相应位置，水平放置并做好标记。

2.用加样器或一次性采血管吸取60ul 新鲜全血（或血清、血浆）缓慢滴加于试纸箭头下方

的垫片上或试卡的加样孔。

3.为防止弱阳标本的漏检，于加样后10 分钟观察并记录结果。

检测结果的解释：

1.阳性：试纸在检测线和对照线位置出现两条紫红色。

2.阴性：试纸只在对照线位置出现一条紫红色。

3.失效：试纸未出现紫红色线或仅在检测线出现一条紫红色。

七、甲胎蛋白（AFP）

[检验原理] 试剂盒采用胶体金免疫层析技术，利用双抗体夹心法原理，定量测定血清（血浆）中

AFP 。用胶体金标记鼠抗AFP 单克隆抗体制体制备结合垫，用鼠AFP 单克隆抗体和羊抗鼠lgG 抗体分别包被检测线和质控线。检测阳性样本时，样本中AFP 与结合垫中胶体金标记记的鼠抗AFP 单克隆抗体结合形成抗原抗体复合物，复合物移动至检测线时，与鼠抗AFP 单克隆抗体结合形成双抗体夹心物，在检测线凝集并显示红色，检测阴性样本时，检测线不显色。

阳性样本检测线显色的强度与AFP 的含量成正相关关系，用金标免疫层析试条智能测陀仪读取检测线的光密度值，通过计算机软件中的剂晕-反应曲线方程进行计算即可得出样

本中的AFP 浓度值

【检测方法]

1.冷藏的试剂或标本从冰箱中取出，室温放置20 分钟，平衡至室温。。

2.将相应批次试剂的剂量-反应曲线载入计算机的计算软件，设置好待测标本信息。

3.打开铝箔袋包装，取出检测卡，置于水平桌面。

4 在加样区加入9ul 样品，计时。

5.10-12 分钟时将试验结果有效的检测卡放入金标免疫层析试条智能测试仪读数。

6.如果检测卡的质控线未出现红色，则结果无效，需重新进行试验。检验结果的解释阳性：

在检测线（ T ）和对照线（ c ）位置各出现两条一条红色反应线。阴性：只在对照线（ c ）位置出现一条红色反应线无效：无红色反应线出现，或仅在检测线（ T ）位置出现一条红色反应线，。表示检测无效，建议此时用新试卡重测。

八、胃幽门螺杆菌抗体测定（HP-Ab）

检验原理：采用双抗原夹心和胶体金免疫技术，利用hp 重组抗原（嵌合了hp 细胞毒素相关基因（caga）和细胞空泡毒素基因（vaca）抗原片段）进行包被和标记，及其他实际制成的胶体金免疫诊断试剂。当进行检测时，如为阳性样本，样本中的hp 抗体能与胶体金标记的hp抗原所结合，由于层析作用沿试纸条向前移动，与包被的硝酸纤维素膜上的另一hp 抗原结合形成金标抗原~抗hp抗体~抗原复合物而凝集显色。

样本要求：血清（血浆）样本按常规方法由静脉采集，抗凝剂可以为肝素、edta 或枸橼酸钠，采集后静

置离心获取样本。7 天内测定的样本可放置2~8°c 保存。样本放置在-20° c 至少可保存3 个月样本尽可能避免溶血或反复冻溶。浑浊或有沉淀的样本应离心或过滤后再检测。

检侧方法：

1. 将检测试剂平衡至室温，撕开铝箔袋，取出检测剂。

2. 在检测试剂的加样端加入 2~3 滴（ 100~150ul ）血清或血浆，平放在实验台上。

3.20 分钟内观察结果。超过观察时间结果无效。 检测结果的解释：

1. 阴性结果：仅出现一条红色质控线，实验结果为阴性。

2. 阳性结果：出现质控线和反应线两条红线，实验结果为阳性。

3. 无效 ;不出现红线或仅出现一条反应红线，实验结果为无效结果，应重试。

九、结核分枝杆菌 IgG 抗体检测（ TB-Ab ）

检测原理：

加在检测卡的 nc 膜的中间位置，样本在 nc 膜上扩散流动并经过 t 线，若样本中含有 38kd 、

16kd 特异性抗体，将和 t 线上的抗原结合并被固定在 t 线位置；随后在加样孔加入稀释液， 稀释液溶解胶体金并带动其在 nc 膜上流动，同时洗涤掉 nc 膜上非特异性的人 IgG ；当标记 胶体金层析到 t 线时，若存在被 t 线结合的人 IgG 抗体，将和胶体金结合，形成小鼠抗人标 记的胶体金 -结核特异性人 IgG-结核特异性抗原复合物，并在 t 线呈现红色胶体金条带；若 t 线上不存在结合的人 IgG 抗体，则不能形成复合物， t 线不显色； 当标记胶体金经过 c 线时， 将和羊抗小鼠 IgG 结合，形成小鼠抗人标记的胶体金 -羊抗小鼠 IgG 复合物，并在 c 线呈现 出红色胶体金条带。检测若 c 线不显色，说明检测存在问题，结果无效。

样本要求 ： 血清（血浆）样本按常规方法由静脉采集，抗凝剂可以为肝素、 edta 或枸橼酸钠，采集后静

置离心获取样本。 5 天内测定的样本可放置 2~8°c 保存。样本放置在 -20° c 至少可保存 3 个月 .样本尽可能避免溶血或反复冻溶。浑浊或有沉淀的样本应离心或过滤后再检测。需保 存血清或血将在采集时、保存过程中应注意无菌操作，有细菌污染的样本亦不能用于检测。 检测方法：

1. 将检测卡和待检样本平衡至室温， 撕开铝箔袋， 取出检测卡， 平放于桌子

上。

2. 用移液枪调节加样量为 4ul ，从样品中取出 4ul 血清或血浆，加入检测卡的

nc 膜区中间位置，待样品完全吸收后，在加样孔加入 2 滴（ 50~80ul ）稀

释

液，使胶体金层析。同时计时。

3. 15 分钟内观察结果（强阳性样本几分钟内可显示结果） 检验结果的解释：

1. 阴性结果：仅出现一条红色质控线，实验结果为阴性。

2. 阳性结果：出现质控线和反应线两条红线，实验结果为阳性。

3. 无效 ;不出现红线或仅出现一条反应红线，实验结果为无效结果，应重试。

D-二聚体检测（免疫层析法）

.检验原理：

采用免疫荧光双抗体夹心法检测全血、血浆中 d 二聚体浓度。将待测样本加入缓冲液 中混匀，缓冲液中的荧光标记抗 d 二聚体单抗和样本中的 d 二聚体抗原结合，形成复合物。 将混合后样本滴加至测试卡的加样孔中， 在层析作用下反应复合物沿着硝酸纤维素膜向前移 采用间接法免疫胶体金技术检测样品中的结核 （IgG1 亚型）单克隆抗体标记的胶体金粒子， 菌 38kd 、 16kd 抗原， c 线上包IgG 抗体，试剂胶体金垫上含有小鼠抗人 IgG

nc 膜的 t 线上包被了重组表达的结核分枝杆 IgG 多克隆抗体。检测时，先将少量样本 4ul