实验3环境微生物的检测
实验三--食品中微生物菌落总数的测定
5、及时将已冷却到46℃的培养基倾入到平皿中，并转动
平皿使其混合均匀
6、37℃倒置培养2天
7、按照计数Biblioteka 则计数五、菌落计数方法 选取菌落数在30~300cfu之间，无蔓延生长的平板 计数 低于30的记录具体菌落数，大于300的可记录为多 不可计，每个稀释度采用2个平行的均数 有较大片状菌落生长者不宜采用， 若片状小于平板一半时且余部均 匀分布，则以半个平板菌落数2 倍报告 无明显界限链状菌落每条单链视 为一个菌落
1、计数结果的表述
若只有一个稀释度平板在30~300CFU，则计算两平行平 板的均数，再乘以稀释倍数报告之 若有连续两个稀释度符合计数要求则按下公式：
所有符合计数要求 的平板菌落数之和
菌落总数
例：10-2=232，244 10-3=33，35 N= (232+244+33+35) (2+2×0.1)×10-2 = 24727
灭菌生理盐水当中，充分振荡，混合均匀，制成
10-1稀释度样品
2、梯度稀释法依次稀释样品到10-4
菌落总数操作流程图
3、选择10-2、10-3、10-4三个稀释度的样品均液，用无菌 移液管分别吸取1mL到无菌平皿中，每个稀释度做2个 平皿；同时，吸取1mL无菌生理盐水到1个平皿中作为
空白对照
4、熔化培养基
标准平皿活菌计数法（SPC法）是最常用的活菌计
数法
将微生物细胞充分稀释到单个分散，把这些单个分
散的细胞通过混菌法或涂布法使其均匀分布在平皿
培养基上，培养后长出的菌落肉眼可见，每个菌落
都由原液中单个细胞发育而来。
反映食品被细菌污染的程度
由于倾注平板法的局限，会有一部分细菌在该实验
实验室土壤培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解土壤培养实验的基本原理和方法。
2. 掌握土壤微生物的分离、纯化和培养技术。
3. 分析土壤微生物数量和种类变化，了解土壤微生物在土壤环境中的作用。
二、实验原理土壤微生物是土壤生态系统中重要组成部分，它们在土壤形成、物质循环、养分转化等方面发挥着关键作用。
土壤培养实验是一种常用的研究土壤微生物的方法，通过在实验室条件下模拟土壤环境，观察微生物的生长和繁殖，分析微生物的种类和数量变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、培养基、接种环、培养皿、移液器、显微镜、计数板等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 土壤样品采集：从不同土壤类型地点采集土壤样品，带回实验室备用。
2. 土壤样品处理：将土壤样品过筛，去除杂质，备用。
3. 制备培养基：根据实验需求，配制相应培养基，高压蒸汽灭菌后备用。
4. 分离纯化：采用平板划线法、稀释涂布平板法等方法，分离纯化土壤微生物。
5. 培养与观察：将分离纯化的微生物接种于培养基上，放入恒温培养箱培养，观察微生物生长情况。
6. 微生物计数：采用显微镜计数法，对培养皿上的微生物进行计数。
7. 数据处理与分析：统计不同土壤样品中微生物数量和种类变化，分析土壤微生物在土壤环境中的作用。
五、实验结果与分析1. 不同土壤样品中微生物数量和种类变化：实验结果显示，不同土壤样品中微生物数量和种类存在差异。
例如，有机质含量较高的土壤样品中，微生物数量和种类较多；而有机质含量较低的土壤样品中，微生物数量和种类较少。
2. 土壤微生物在土壤环境中的作用：土壤微生物在土壤环境中具有以下作用：（1）土壤形成：土壤微生物参与土壤有机质的分解和转化，促进土壤有机质的形成；（2）物质循环：土壤微生物能够将土壤中的无机物质转化为植物可吸收的形式，促进养分循环；（3）养分转化：土壤微生物能够将土壤中的养分进行转化，提高土壤肥力；（4）抗逆性：土壤微生物具有抗逆性，能够适应不同的土壤环境，维持土壤生态系统的稳定。
实验三细菌的分布与消毒灭菌
实验三细菌的分布与消毒灭菌实验三细菌的分布与消毒灭菌【⽬的】①了解细菌⼴泛分布于⾃然界及正常⼈体，树⽴“有菌观念”，从⽽认识⽆菌操作对于微⽣物学及医学实践的重要性。
②了解正常⼈体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起⼈类疾病，称为正常菌群。
③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常⽤的消毒灭菌⽅法。
④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗⼒。
⼀、细菌的分布检查（⼀）空⽓中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【⽅法】①取普通琼脂平板⼀只开启⽫盖，培养基⾯向上放于实验桌上，暴露5～30min后盖好。
②置37℃培养18～24⼩时后观察结果。
【结果】（填表10-1）平板培养基表⾯或多或少有菌落⽣长。
（⼆）地⾯⽔中的细菌检查【材料】地⾯⽔(河⽔、井⽔或池⽔)、⾼层琼脂培养基、1ml⽆菌吸管、灭菌培养⽫。
【⽅法】①以⽆菌吸管吸取1ml地⾯⽔，加⼊灭菌平⽫中。
②将已溶化且冷⾄45℃左右的⾼层琼脂倾注⼈上述平⽫中，加盖后轻轻摇动，使⽔与琼脂充分混匀，静凝。
③37℃ 24⼩时后取出观察，计数菌落。
【结果】（填表10-1）（三）⾐服、票证、头发、⼿指⽪肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【⽅法】取普通平板⼀个，⽤蜡笔在平板背⾯玻璃上划成四等分，并贴上标签(图10-1)。
然后以⽆菌操作法，⽤⾐袖⾓、票证、头发及⼿指或指甲污物，在平板培养基表⾯相应部位轻轻涂抹，置37℃培养24【结果】填表培养基表⾯涂抹处有菌落⽣长。
⾐服、票证、头发、⼿指⽪肤上的细（四）正常⼈体咽喉部的细菌检查【材料】⾎液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。
【⽅法】取灭菌棉拭⼀⽀，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于⾎液琼脂培养基—侧，然后改⽤灭菌接种环作分离划线接种。
盖上⽫盖，37℃孵育24⼩时（或者采⽤咳喋法）。
【结果】（填表10-1）琼脂平板表⾯有菌落⽣长。
其中占优势的是⼀种细⼩菌落，其周围有草绿⾊的不完全溶⾎环。
此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。
土壤菌株筛选实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握土壤中微生物的分离与纯化方法。
2. 了解不同微生物的形态特征和生理特性。
3. 筛选具有特定生理功能的菌株。
二、实验原理土壤中存在着大量的微生物，包括细菌、真菌、放线菌等。
通过选择合适的培养基和分离方法，可以从土壤中分离出具有特定生理功能的菌株。
本实验采用平板划线法、涂布分离法等方法，对土壤样品进行分离纯化，并对筛选出的菌株进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖、无菌水、无菌平板、无菌试管、接种环、显微镜等。
2. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理：取一定量的土壤样品，用无菌水进行稀释，制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的土壤悬液。
2. 分离纯化：（1）平板划线法：将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，用接种环进行划线分离，培养24小时后观察菌落形态。
（2）涂布分离法：将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，用无菌玻璃棒轻轻涂布，培养24小时后观察菌落形态。
3. 菌落鉴定：（1）形态特征观察：观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征，记录下来。
（2）生理生化试验：对筛选出的疑似菌株进行生理生化试验，如革兰氏染色、氧化酶试验、过氧化氢酶试验等，以确定菌株的属种。
4. 结果分析：根据形态特征和生理生化试验结果，对筛选出的菌株进行鉴定，并统计不同生理功能菌株的筛选数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态特征观察：在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，观察到不同形态的菌落，如圆形、卵圆形、长条形等，颜色有白色、黄色、红色等。
2. 生理生化试验结果：（1）革兰氏染色：部分菌株为革兰氏阳性菌，部分菌株为革兰氏阴性菌。
（2）氧化酶试验：部分菌株产生氧化酶，部分菌株不产生氧化酶。
（3）过氧化氢酶试验：部分菌株产生过氧化氢酶，部分菌株不产生过氧化氢酶。
3. 结果分析：根据形态特征和生理生化试验结果，筛选出以下具有特定生理功能的菌株：（1）革兰氏阳性菌：可能为葡萄球菌、链球菌等。
细菌菌落观察实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习细菌菌落的观察方法。
2. 了解不同细菌菌落的形态特征。
3. 培养微生物学实验操作技能。
二、实验原理菌落是指在一定条件下，由一个微生物细胞或其无性繁殖细胞繁殖后形成的肉眼可见的子细胞群体。
细菌菌落是细菌在一定条件下繁殖形成的肉眼可见的子细胞群体。
通过观察细菌菌落的形态特征，可以初步鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：牛肉膏蛋白胨培养基、无菌棉签、无菌培养皿、接种环、显微镜、酒精灯、试管夹等。
2. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、电子天平、无菌操作台等。
四、实验方法1. 制备培养基：将牛肉膏蛋白胨培养基按照实验要求进行配制，高压蒸汽灭菌后备用。
2. 接种：将无菌棉签蘸取待观察的细菌样品，在培养基上均匀涂抹。
3. 培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养24-48小时。
4. 观察与记录：用肉眼和显微镜观察菌落的形态、大小、颜色、表面特征等，并做好记录。
五、实验结果与分析1. 菌落形态观察（1）大小：菌落大小不一，有的直径在1-2mm，有的在2-3mm，有的甚至更大。
（2）形状：菌落形状多样，有圆形、椭圆形、长形、放射状等。
（3）颜色：菌落颜色各异，有白色、黄色、绿色、红色等。
（4）表面特征：菌落表面光滑、粗糙、湿润、干燥等。
2. 细菌菌落特征分析根据实验观察结果，可以初步判断以下细菌菌落特征：（1）白色菌落：可能是大肠杆菌、葡萄球菌等。
（2）黄色菌落：可能是金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
（3）绿色菌落：可能是铜绿假单胞菌等。
（4）红色菌落：可能是链球菌等。
六、实验结论通过本次实验，我们学习了细菌菌落的观察方法，了解了不同细菌菌落的形态特征。
在实验过程中，我们掌握了无菌操作技术，提高了微生物学实验操作技能。
七、实验注意事项1. 在进行无菌操作时，应注意操作台、实验器材和操作者的清洁，避免污染。
2. 接种时，应尽量减少接种环与培养基的接触面积，以避免过度接种。
生物调查小实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景随着城市化进程的加快，生物多样性受到严重影响，为了了解我们所在地区生物的种类和数量，提高我们对生态环境的认识和保护意识，我们小组开展了本次生物调查小实验。
二、实验目的1. 了解我们所在地区生物的种类和数量。
2. 掌握生物调查的基本方法。
3. 提高对生态环境的认识和保护意识。
三、实验材料1. 生物调查工具：望远镜、放大镜、记录本、相机等。
2. 生物样本：昆虫、鸟类、植物等。
3. 实验地点：公园、树林、河流等。
四、实验方法1. 制定调查计划：确定调查时间、地点、对象等。
2. 观察与记录：通过望远镜、放大镜等工具观察生物，并记录种类、数量、生活习性等。
3. 样本采集：对感兴趣的生物进行采集，以便后续研究。
4. 数据分析：对收集到的数据进行整理和分析。
五、实验过程1. 实验时间：2021年10月15日2. 实验地点：某公园（1）调查准备：提前了解公园内的植物、昆虫、鸟类等生物种类，准备好调查工具。
（2）观察与记录：在公园内观察各种生物，并记录其种类、数量、生活习性等。
（3）样本采集：对感兴趣的昆虫、鸟类等进行采集，并做好标记。
（4）数据整理：将观察到的数据整理成表格，并进行分析。
六、实验结果与分析1. 生物种类：在本次调查中，共观察到植物、昆虫、鸟类等生物30余种。
2. 生物数量：昆虫数量最多，达数百只；其次是鸟类，有数十只；植物种类较多，但数量相对较少。
3. 生活习性：昆虫多在早晨和傍晚活动，鸟类多在清晨和傍晚鸣叫，植物则在阳光下生长茂盛。
七、实验结论1. 我们所在地区的生物多样性较为丰富，植物、昆虫、鸟类等生物种类繁多。
2. 生物调查方法简单易行，有助于我们了解生态环境，提高保护意识。
八、实验心得1. 通过本次实验，我们了解了生物调查的基本方法，提高了对生态环境的认识和保护意识。
2. 在调查过程中，我们要注意保护生物，尊重生命，遵守相关规定。
3. 实验过程中，我们发现许多生物受到人类活动的影响，如环境污染、栖息地破坏等，这给我们敲响了警钟，提醒我们要关注生态环境，保护生物多样性。
微生物生化鉴定3篇
微生物生化鉴定【微生物生化鉴定】微生物生化鉴定是一种鉴定微生物种类和特性的方法，它通过检测微生物代谢产物和酶的活性等生化特性来对微生物进行鉴定。
在微生物的研究、诊断和治疗等方面都有着广泛的应用。
下面我们将分别介绍鉴定细菌、真菌和病毒的微生物生化鉴定方法。
一、细菌的微生物生化鉴定1. 常规生化试验：包括氧化-发酵试验、铁锰试验、利用光对紫杆菌的鉴别、胶原酶酶切试验等。
2. 抗生素敏感试验：对于致病菌的抗生素敏感试验是非常重要的生化鉴定方法。
在临床上，通过检测微生物对各种抗生素的敏感性来确定选用哪种抗生素进行治疗。
3. 酸碱度试验：对于肠道菌等产生乳酸的菌株，可以通过酸碱度试验来鉴定其种类。
4. 糖代谢试验：细菌不同的糖代谢方式也是一种微生物生化鉴定方法。
二、真菌的微生物生化鉴定1. 吸附凝集实验：可用于白色念珠菌的鉴定。
2. 纸片扩散法：可用于真菌药物敏感性试验。
3. 不同培养基的试验：对于不同种类的真菌，它们对不同培养基有不同的适应性，可以通过这种方法来进行鉴定。
4. 营养需求试验：真菌的营养需求也不同，通过对真菌在培养基上的生长情况进行观察，可以对其种类进行初步鉴定。
三、病毒的微生物生化鉴定1. 免疫荧光试验：通过对病毒进行免疫染色等手段来进行鉴定。
2. 基于PCR技术的鉴定：包括标准PCR、荧光PCR和荧光定量PCR等方法。
3. 细胞培养法：将病毒在细胞培养基上培养，观察病毒在细胞上的生长和变化，以进行鉴定。
总之，微生物生化鉴定方法是一种基础的、重要的微生物鉴定方法，对于微生物的研究、诊断和治疗等方面都具有重要的意义。
不同类型的微生物鉴定方法不同，需要根据具体的情况进行选择和操作。
通过合理地运用微生物生化鉴定方法，可以更准确地鉴定不同类型的微生物，为其应用提供有力的支持。
探索细菌小实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的通过本次实验，我们旨在了解细菌的基本特征，探究细菌的生长条件，以及观察细菌在不同环境下的生长情况。
通过实验，提高我们对微生物学知识的理解和实践能力。
二、实验材料1. 实验器材：培养皿、酒精灯、接种环、接种针、无菌水、细菌培养液、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。
2. 实验试剂：牛肉膏、酵母膏、琼脂、葡萄糖、氯化钠、蒸馏水等。
3. 实验样品：土壤、空气、水体等。
三、实验方法1. 细菌分离：取适量土壤、空气、水体等样品，分别进行稀释，用无菌水将样品稀释至10^-5倍。
取适量稀释液涂布于牛肉膏酵母膏琼脂平板上，37℃恒温培养24小时。
2. 细菌观察：将培养皿中的细菌用接种环挑取少量，滴加于载玻片上，用盖玻片覆盖。
在显微镜下观察细菌的形态、大小、颜色等特征。
3. 细菌培养条件探究：将细菌培养液分别置于不同的温度（25℃、37℃、50℃）、pH值（5、7、9）、含糖量（0%、5%、10%）条件下培养，观察细菌的生长情况。
四、实验结果与分析1. 细菌分离结果：实验成功分离出多种细菌，包括球菌、杆菌、螺旋菌等。
通过显微镜观察，细菌的形态、大小、颜色等特征各异。
2. 细菌观察结果：通过显微镜观察，我们发现细菌具有以下特征：（1）形态：细菌呈球形、杆形、螺旋形等，其中以球菌和杆菌为主。
（2）大小：细菌大小不一，一般在0.5-5微米之间。
（3）颜色：细菌颜色有红色、黄色、绿色、蓝色等，可能与细菌产生的色素有关。
3. 细菌培养条件探究结果：（1）温度：细菌在不同温度下的生长情况不同。
在37℃条件下，细菌生长速度最快；在25℃条件下，细菌生长速度较慢；在50℃条件下，细菌几乎不生长。
（2）pH值：细菌在不同pH值条件下的生长情况不同。
在pH值为7时，细菌生长速度最快；在pH值为5和9时，细菌生长速度较慢。
（3）含糖量：细菌在不同含糖量条件下的生长情况不同。
在含糖量为10%时，细菌生长速度最快；在含糖量为5%时，细菌生长速度较慢；在含糖量为0%时，细菌几乎不生长。
医学微生物学实验三
• 盖上平板的盖子，做好标记，放置培养箱内孵育16~18h。
• 下次实验课找到自己的药敏结果，量取抑菌环直径，根据 CLSI（clinical and laboratory standards institute ）标准， 报告细菌对该抗生素敏感(susceptible,S)、耐药(resistant,R) 、中介(intermediate,I)。
MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间 间隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
抑菌环
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物效果越好，抑菌环直径越大；效果越差，抑菌环直径越小。
操作方法
• 无菌挑取孵育16～24h的血平板上4个菌落,沿4个方向均匀抹 无菌M-H琼脂表面，使菌液均匀分布，最后再取一个菌落沿 平板内缘环形涂抹均匀。
直接
涂片镜检 （革兰染色）
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
革兰染色
药敏试验 诊断报告
一、脓汁标本中化脓性球菌的鉴定
直接涂片镜检
• 取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干 燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色葡萄球菌
革兰染色镜检
─────────
形态
排列 染色性
乙型溶血性链球菌
细菌分离培养
• 取一号和二号脓标本，分别接种于血琼脂 平板上，划线分离，37℃培养18~24h后， 观察菌落特征，取单个菌落进行再次革兰 染色镜检。
– 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 – 抵抗吞噬细胞的吞噬和消化 – 使感染局限化和形成血栓
游离血浆凝固酶
医院环境微生物采样方法及注意事项概要
医院环境微生物采样方法及注意事项概要一、采样方法：1.选择采样位置：根据医院的不同区域，选择采样位置。
通常包括手术室、病房、走廊、洗手间等。
2.准备采样工具：准备好采样所需的工具，如支持培养基、无菌刷子、无菌容器等。
3.采样方式：根据采样位置的不同，采用不同的采样方式。
(1)空气采样：通常使用空气采样器采集空气中的微生物。
将空气采样器放置在所需采样的位置，进行一定时间的采样，然后将采样器送往实验室进行分析。
(2)表面采样：借助无菌刷子或无菌棉签，在需要采样的表面轻轻擦拭，将采样物放入无菌容器中。
(3)液体采样：如水样、洗手液等，将液体放入无菌容器中。
4.样品处理：将采集到的样品送往实验室进行分析。
二、注意事项：1.严格遵循无菌操作规范：采样时要注意无菌操作，避免污染样品。
2.选择合适的采样工具：采样工具要选择合适，能够有效采集到微生物。
每次采样时要更换新的刷子或棉签。
3.采样时间和距离：采样时间不宜过短或过长，通常为15-30分钟。
空气采样器与采样位置之间的距离不宜过远或过近，一般为1-2米。
4.避免交叉污染：采样时应注意避免与周围环境接触，避免交叉污染。
5.采样点位选择：采样点位的选择要代表该区域的整体情况。
通常选择在易污染、难清洁的区域进行采样。
6.标注样品信息：每个样品都应有详细的标注，包括采样位置、时间、采样者等信息，方便后续分析和比对。
7.采样频率：根据需要确定采样频率。
不同区域的采样频率可以有所不同，一般为每1-3个月进行一次。
总之，医院环境微生物采样是一项重要的工作，可以为医院提供科学依据，制定有效的污染控制策略。
采样时要严格遵守操作规范，选择合适的采样工具和采样方法，并注意采样时间、距离、点位选择等因素。
采样后要及时送往实验室进行分析，并进行详细的标注信息，确保采样结果的准确性和可靠性。
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实验三 环境微生物的检测
一、实验目的
1.了解周围环境中微生物的分布情况。
2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性。
3.了解四大类微生物的菌落特征。
二、实验原理
在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物。土壤、江
河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消
化道等都存在着各种微生物。由于它们体积微小，人们用肉眼无法观察到它
们个体的存在。但是只要稍加留意，我们就可以在发霉的面包、朽木上看到
某些微生物群体。这些现象表明，自然界只要有微生物可以利用的物质和环
境条件，微生物就可以在其上生长繁殖。据此，我们在实验室里就可以用培
养基来培养微生物。
培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合
养料。其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长
因子、气体和水分。此外，根据不同的微生物的要求，在配制培养基时还需
用酸液或碱液调节至适宜的pH。配制好的培养基必须进行灭菌。所谓灭菌
是指采用各类的物理或化学因素，使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖
能力的措施。经过灭菌后的物体是无菌的。消毒是与灭菌完全不同的概念，
它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫
生措施。
灭菌的方法较多，广泛使用的是高温灭菌，其中最常用的是高压蒸汽灭
菌法。此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。
在1.05kg/cm2的蒸汽压力下，温度可达121℃。一般只要维持15~20min，就
可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子。
微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术。为了确保
纯种不被杂菌污染，在整个接种过程中，必须进行严格的无菌操作。在实验
过程中必须牢固树立无菌概念，经常保持实验台及周围环境的清洁，严格无
菌操作，避免杂菌的污染，这是保证实验成功的必要条件。
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如将微生物接种到适合其生长的固体培养基表面，在适宜的温度下(一般
细菌37℃：霉菌等28℃)，培养一段时间(一般24~48h)后，少量分散的菌体或
孢子就可生长繁殖成肉眼可见的细胞群体，此即菌落。如平板上的菌落是由
单个细胞(或单个孢子)生长繁殖而成的，就是一个纯种细胞群或克隆；若培
养后大量菌落聚集在一起形成的为菌苔。不同种的微生物可形成大小、形态
各异的菌落，根据微生物菌落形态的不同，可初步鉴别出四大类微生物：细
菌、放线菌、酵母菌和霉菌。
细菌的菌落呈圆形、较小而薄、透明或不透明、质地“细腻”，有的具有
色泽，有的边缘不整齐，有的表面湿润、光滑，有的表面干燥有褶皱。此外
，细菌常因分解含氮化合物而产生臭味。
酵母菌的菌落通常比细菌菌落大，圆形、厚、不透明、色素单一，多为
乳白，少数为橙或红色。酵母菌因普遍能发酵含碳有机物产醇，故菌落多伴
有酒香味。
防线菌菌落小而致密，或坚硬、或呈粉状。不少放线菌还产生特殊的土
腥味。
霉菌菌落大而疏松、或大而紧密。气生菌丝会发育形成一定形状、构造
和色泽的子实器官，所以菌落表面往往有肉眼可见的构造和颜色。
三、实验材料
人体表和空气中的微生物。
四、实验器材与试剂
1.器材
恒温培养箱、无菌平皿、电炉、酒精灯、火柴、无菌棉签和记号笔。
2.试剂
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、酵母膏葡萄糖培养基(简称YPD)、高氏一号
培养基和查氏培养基。
五、 实验操作
I.融化培养基
将装有无菌培养基的三角瓶置水浴中煮沸，待培养基融化后取出，当冷
至50~60℃左右时，进行下一步。
II、倒平板
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有持皿法和叠皿法，操作要点如下：
1.持皿法
(1)将无菌培养皿叠放在酒精灯左侧，以便拿取。
(2)点燃酒精灯。
(3)酒精灯旁，左手握三角瓶底部，倾斜三角瓶，右手旋松棉塞，用右手
小指与小尾鱼际(即小指边缘)夹住棉塞并将其拔出(切勿将棉塞放在桌上)，
随之将瓶口在火焰上过一下(不可灼烧，以防爆裂)，以杀死可能沾在瓶口的
杂菌。然后将三角瓶从左手换至右手(用拇指、食指和中指拿住三角瓶的底
部)。操作中瓶口应保持在火焰2~3cm，瓶口始终向着火焰，以防空气中微生
物的污染。左手拿起一套平皿，用无名指和小指托住皿底，用中指和拇指夹
住皿盖，食指于皿盖上为支点，在火焰旁，打开皿盖，让三角瓶伸入，随后
倒入培养基。一般倒入15ml左右培养基即可铺满整个皿底。盖上皿盖，置水
平位置待凝。然后将三角瓶移至左手，瓶口在次过火并塞紧瓶盖。
2. 叠皿法
此法适于在超干净台上操作，基本步骤同持皿法。不同之处是左手不必
持皿，而是将瓶皿叠放在酒精灯的左侧并靠近火焰。按上述方法用右手拿三
角瓶，左手打开最上面的皿盖，倒入培养基，盖上皿盖后即移至水平位置待
凝。再依次倒下面的平皿。操作中瓶口始终向着火焰，以防空气中微生物的
污染。
III、贴标签
待培养基完全凝固后，在皿底帖上标签，注明检测类型，组别及日期(
也可用记号笔书写在皿底)
IV、检测方法
环境中微生物种类多样，检测方法也各异，先选几种列举如下：
1.空气
检测实验室空气中的微生物时，只要打开无菌平板的皿盖，让其暴露在空气
中一段时间(5~10min)然后将皿盖盖上即可。
2.桌面 检测实验台桌面微生物是，可用一根无菌棉签，先在无菌平板的
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图4-1 含菌棉签平板划线示意图
左：开启皿盖法 右：划线示意图
一个区域内湿润和试划几下，然后用其擦抹桌面等物体表面，在以此棉签在
平板的另一区域作来回划线接种(如图4-
1)。本操作应以无菌操作要求进行，即在火焰旁用左手拿起平板，用中指
无名指和小指托住皿底部，用食指和大拇指夹住皿盖并开成一缝，右手持棉
签在培养基表面划线接种，无菌棉签湿润和试剂区可作为无菌对照。
3.头发
移去放在桌面上的无菌平板的皿盖，是头发部位位于平板的上方，并用手指
拨动头发数次，在盖上皿盖即可。
4.手指
可用未洗的手指先在无菌平板的培养基一侧(约一半的面积)作划线接种，并
在皿底作好标记。然后用肥皂、流水洗手，用洗净的手指于平板培养基的另
一侧作同样的划线接种，盖好皿盖。待培养后比较两杂菌生长的情况。
5.口腔
打开无菌平板培养基的皿盖，使口对着平板培养基的表面，以咳嗽或打喷嚏
的方式接种，然后盖上皿盖。
V、培养
将以上各种检测平板倒置于28℃
培养箱中培养，至下周实验时观察并计数各平板上的菌落数。
VI、观察
注意观察不同类型菌落的大小、外形和颜色等特征，将观察结果记录在
实验报告上。
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VII、清洗
观察记录完毕后，将含菌平板放在沸水中煮30min以上，杀死培养基表
面生长的各种微生物，然后清洗并晾干培养皿。
六、思考题
1.通过本实验后，谈谈你对微生物的分布以及数量的认识。
2.本实验中那些步骤属无菌操作？为什么？
3.如何描述菌落的形态特征？