脱细胞真皮基质体内转归的研究进展.

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异种(猪)脱细胞真皮基质与自体皮复合移植的临床应用

ｓｅｔｏｒｍＪｎ．２０ｏＦｂ．２０ｔｐｍｅｈｄｆａｏ００ｔｅ０２．Ｒｅｕｔ３ａｅｆａｉｎｓａｈｅｅｏｌｔａｅ７１１）ａｄｓｌｓ７ｃｓｓｏｔｔｃｉｖｄｃｍｐｅｅｔｋ（．％ｐｅｎ
【键词】异种皮关
脱细胞真皮基质
复合移植
Ｔｈｌｉａｐｌａｉｎｏｅｏｅｉ（ｏｃｎ）ａｅｌａｅｍａｔｉｒｆｉｇｗｉｈｎａｔｇｎｃｓｉｅｃｉｃｌａｐｉｔｆｘｎｇｎｃｐｒｉｅｃｌｒｄｒｌｍａｒｇａｔｔｔｉｕｏｅｉｋｎｎｃｏｌｕｘｎｈ
ｃｏｌｇａｌＣｌｅ，Ｗｅｚｏ３５０，ｉａｅｎｈｕ２２０Ｃｈｎ
【ｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｂｅｖｅｅｅｔｅｅｓｆｅｏｅｉ（ｏｃｎ）ｃｌｌｅａｍｔｘｇａ－Ａｓｃ】ｒｊｃｉｏｏｓｒｔｆｃｉｎｓｎｇｎｐｒｉｅａｅｌａｄｒｌａｉｒｔｖｅｈｆｖｏｘｃｕｒｍｒｆ
床疗效。方法２０００年１～２０月０２年２月用异种（）皮基质与自体薄皮片复合移植（步法）猪真二修
复基底良好的深度创面５２例。结果３７例（１１）皮完全成活，５例（８９）皮９％以上成７．％植１２．％植５
异种（）细胞真皮基质与自体皮复合猪脱移植的临床应用

脱细胞真皮基质预制人工皮瓣的血管化研究

ＬＵＯＸｕｓｏｎｇ，ＷＡＮＧ
ＹＡＮＧＱｕａ，ＹＡＮＧＪｕ地ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｌａｓｔｉｃａｎｄＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅＳｕｒｇｅｒｙ，ＳｈｎｇａｈａｉＪｉａ・
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉｎｅｅｉｎｒｇａｎｄＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅＳｕｒｇｅｒｙ，Ａｐｉｌｒ２０１３，Ｖｏ１．９Ｎｏ２
【中图分类号】Ｒ６２２【文献标识码】Ａ【文章编号】１６７３ — ０３６４（２０１３）０２ — ００７２ — ０４
ＶａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＡｒｔｉｉｆｃｉａｌＳｋｉｎＦｌａｐＦａｂｒｉｃａｔｅｄｂｙＡｃｅｌｌｕｌａｒＤｅｒｍａｌＭａｔｒｉｘＺＨＯＵＸｉａｎｙｕ，ＬＩＵＦｅｉ，ＧＵＣｈｕａｎ，
ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｓａｎｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｔｉｍｅｏｆｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｉｎａｔｉｒｉｆｃｉａ１ｓｋｉｎｌｆａｐ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｒｔｉｉｆｅｉａｌｓｋｉｎｌｆａｐｍｏｄｅｌｓｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｉｔｈＦｉｓｈｅｒ３４４ｍａｌｅｒａｔｓ．ＴｈｅａｒｔｉｉｆｃｉａｌｓｋｉｎｆｌａｐｓｗｅｒｅｈａｒｖｅｓｔｅｄｆｏｒＨＥｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＣＤ３１ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｅｈｅｍｉｓｔｒｙｏｎ３，７，１４，２１，２８ｄａｙｓａｆｔｅｒｏｐｅｒａｔｉｏｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｉｃｒｏａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙｆｏｒａｔｒｉｉｃｆｉａｌｓｋｉｎｌｆａｐｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔ７ｄａｙｓａｔｆｅｒｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｓｈｏｒｔｅｓｔｔｉｍｅｔｏｃｏｍｐｌｅｔｅｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｍｏｄｅｌｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｌｌａｔｉｒｉｆｃｉａｌｓｋｉｎｌｆａｐｓｐｒｅｓｅｎｔｅｄａｇｏｏｄｖｉａｂｉｌｉｔｙｗｉｔｈｏｕｔａｎｙｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｉｎｇｒｏｓｓｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ．ＡｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＨＥｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＣＤ３１ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｏｔａｌｎｕｍｂｅｒｏｆｖｅｓｓｅｌｓｉｎｃｒｅａｓｅｗｈｅｎｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｔｉｍｅａｎｄ

反复冻融配合超声振荡洗涤制备猪脱细胞真皮基质_张国安

ｄｂｓｚｎｍ＠ｔｓｉｎｇｈｕａ．
ｅｄｕ．ｃｎ
Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙ：ｔｈｅ
Ｔｓｉｎｇｈｕａ－Ｙｕｙｕａｎ
Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅ
ＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＰｒｏｇｒａｍ＊
Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２００７－０７－１０Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２００７－０８－０８
Ｓｗｉｎｅａｃｅｌｌｕｌａｒｄｅｒｍａｌｍａｔｒｉｘｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｒｅｐｅａｔｅｄｆｒｅｅｚｉｎｇａｎｄｔｈａｗｉｎｇｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓｕｒｇｅ
１清华大学医学院生物科学与技术系，北京市１０００８４；２北京积水潭医院，北京市１０００３５
张国安，男，１９５３年出生，河北省滦县人，汉族，１９８３年北京医学院毕业，主任医师，教授，主要从事严重烧伤治疗、组织工程皮肤研究。ｙｕｄｏｎｇｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
ａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
ＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，
ＴｓｉｎｇｈｕａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８４，
Ｃｈｉｎａ；ＢｅｉｊｉｎｇＪｉＳｈｕｉＴａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ
１０００３５，
Ｃｈｉｎａ
ｙｕｄｏｎｇｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
收稿日期：２００７－０７－１０修回日期：２００７－０８－０８（０７－５０－７－３７６７／ＧＷ·Ｑ）
摘要目的：改进猪脱细胞真皮基质制备方法，并与传统制备方法进行比较，为临床大面积烧伤患者治疗提供更安全、更廉价的异体皮源。方法：实验于２００３－１０／２００７－０３在北京积水潭医院烧伤研究所完成。①实验材料：实验动物为３月龄清洁中华香猪，由北京积水潭医院动物室提供。实验符合动物伦理学标准。②实验方法：取２５ｋｇ实验室环境养殖的健康中华香猪，麻醉处死去毛后取躯干部位全层皮肤，仔细剃除毛发，去除脂肪。采用反复冻融，配合超声振荡和化学去污剂处理的复合方法，获得脱细胞猪真皮基质。③实验评估：利用常规病理检查和电子显微镜检查其有无明显细胞碎片残留，测试其机械强度、亲水性和细胞毒性，通过动物埋藏实验确定其组织相容性，并以戊二醛交联的脱细胞异体皮，戊二醛交联的脱细胞猪皮，以及新鲜人皮作对照，结果： ①常规病理检查可见真皮结构完整，无明显破坏；上皮细胞清除彻底，无明显细胞碎片残留，电子显微镜检查见脱细胞猪皮的胶原结构完整，未发现破坏痕迹，无明显细胞残留。②各组中脱细胞猪皮基质的极限应力强度和新鲜人皮接近，无明显统计学差别（Ｐ＞０．０５）；戊二醛交联的脱细胞猪皮强度最低，戊二醛交联的脱细胞异体皮的强度最高，且与新鲜人皮相比也有明显统计学差别（Ｐ＜０．０１）。③戊二醛交联的脱细胞异体皮亲水性最强，其余三者相似。④脱细胞猪皮基质浸提液中细胞生长旺盛，７ｄ后脱细胞猪皮基质两次测试相对增殖度值分别为：１８２，１６９。按照６级分级标准，脱细胞猪皮基质毒性级别为０级，在国家标准允许范围内。⑤脱细胞猪皮基质植入１，３周，边界不清，炎性反应与吸收均不明显，新生血管与成纤维细胞长入，植入１２周，植入物与组织融为一体，新生血管与成纤维细胞填充真皮支架。结论：所制备的猪脱细胞真皮基质产品真皮基质完整，细胞毒性低，物理性能与人皮接近。关键词：猪；脱细胞真皮基质；制备

磷酸锌改性异种脱细胞真皮基质的理化性能

中国口腔种植学杂志2012年第17卷第l期专题研究磷酸锌改性异种脱细胞真皮基质的理化性能刘颖华陈卓辉李婧陈卓凡．1．瞒要】目的：观察异种脱细胞真皮基质(xeno—A D M)与不同浓度磷酸锌化学交联后的理化性能改变。

方法：选择商用xeno—A D M为材料，分成实验组和对照组，实验组浸泡磷酸锌矿化液，选择不同浓度和时间梯度；对照组浸泡双蒸水和不做处理。

两组样本均进行相同的表面性能检测，评估改性的效果和探讨样本制备方法是否合理可靠。

结果：通过I cP检测确定磷酸锌交联反应的最佳浓度是1．89／100m l。

通过扫描电镜和能谱仪观察到磷酸锌晶体覆盖xe no—A D M全层。

膜的表面亲水性能在交联后明显提高，拉伸实验显示力学性能有所改善。

结论：磷酸锌与异种脱细胞真皮基质交联可形成稳定的化学结合，这种改性方法能提高膜的表面理化性能。

【关键酋皿异种脱细胞真皮基质；磷酸锌；表面改性中图分类号：R781文章标识码：A文章编号：l007—3957f2012)01-01—05Physi cal and chem i cal pr oper t i es of xenogene i c ac eU ul ar der m al m at r i x m odi f i ed by zi nc phos phat eU U Y i nghua，C H EN Zhuohui，U J ing，et alG M彻曲№CbZ如伊&日唧如以矿＆o，脚￡D Z嘞S配n y越哪en踟妇e船i机G M锄铲^D％5JD D’”A bst r actO bj ect i V e：To m odi f y t he xe nogenei c acel l ul ar de珊al m a t r i x。

(eno—A D M)w i t l l sur f ace pr ope ny by cr os s—l i nke d w i t h zi nc phospha t e i n di f玷r ent concent m t i on．M et hods：O ne of t he cu n-en t c om m e r ci al X e no—A D M w as us ed．The y w e r e cu t and di V i ded i n t o bl a nk gr oup bei ng i nc ubat ed i n doubl e—di st i U ed w a t e r and exper i m e nt a l gr oup us i ng t he pr eci pi t at i o n m et hod w i t l l zi nc phosphat e．B ot h gr oups w e r e cha r act e I i zed by t he s a m e t es t w a y．Resul t s：I nduct i V e c oupl ed pl a s m a da t a s how ed t}le pr ope r prec i pi—t at ed concent r a t i on of zi nc phospha t e f or m odi f i cat i on．Sca nni ng el ect r on m i cr oscopy and ener g)r di s per-s i vesys t emi dent i f i ed zi nc phosph砒e i n t he m odi f i e d m e m br ane s．7r ens i l e st r en班h and hydm phi l i c i t yw er e bot h i m pr oved aft er bei ng m odi f i ed．C oncl usi on：R es ul t s of t hi s st udy s ugg es t t hat t he m odi f i ca—t i on of X e no—A D Mus i ng a chem i ca l cr os s—l i nke d m et hod by zi nc phos phat e can i m pr ove t he phys i cal and c hem i cal prope rt i e s．K ey w or ds：xenogene i c acel l ul arde珊aLl m at r i x；zi nc phospha t e；s ur f如e m odi f i cat i on种植体周围牙槽骨骨量不足不仅是影响牙种植成功的关键因素之一川，而且也不同程度地限制了种植治疗在临床的应用。

VEGF_165对脱细胞真皮基质血管化影响的研究

第31卷第1期2009年2月　大连医科大学学报Journa l of Da l i a n M ed i ca l U n iver sityVol .31No .1Feb.2009VEGF 165对脱细胞真皮基质血管化影响的研究3李菲菲1,米立国2(1.大连医科大学人体解剖学教研室,辽宁大连116044;2.河北医科大学人体解剖学教研室,河北石家庄050000)摘要:[目的]观察十二烷基硫酸钠(sodiu m dodecyl sulfa te,S DS )和NaOH 复合消蚀法制备的胎儿脱细胞真皮基质(AD M )的组织相容性,以及血管内皮生长因子(VEGF)对AD M 血管化的影响。

[方法]将足月胎儿皮肤用S DS 和NaOH 复合消蚀,制备AD M (厚0.3mm )。

用重约300g 的S D 雄性大鼠45只,随机分为AD M 、AD M +r AAV /LacZ 和AD M +r AA V /VEGF 1653组进行真皮片皮下包埋实验。

术后的2、4、6周分别取材,经HE 染色或以V EGF 165、基质金属蛋白酶-1(MM P -1)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TI M P -1)的单克隆抗体进行免疫组织化学染色,检测3种蛋白质在移植后的皮肤中的表达情况。

观察并比较各组中AD M 血管密度,进行图像处理和统计学分析。

[结果]AD M 无细胞成分,胶原纤维结构规整;术后2周包埋AD M 组织中可见到新生血管,及VEGF 阳性细胞;无明显的炎性细胞浸润。

AD M 临近组织中MMP -1和TI M P -1均明显表达,MMP -1的表达高于TI M P -1;术后4周各组细胞数量和新生血管均高于2周。

此时MMP -1的表达高于TI M P -1,但TI M P -1的表达较2周时有所增强;术后6周r AAV /VEG F 165实验组中VEG F 阳性细胞和血管密度明显高于AD M 空白组和r AAV /LacZ 对照组(P <0.05)。

脱细胞异体真皮基质填塞与切开挂线术治疗肛瘘的对比研究

ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ，ａｎｄｎａａｌｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｂｅｔｗｅｅｎｈｅｔｔｗｏｒｏｇｕｐｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｎｏｔｓｔａｉｓｔｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｉｎｈｅｌｉａｎｇｒａｔｅ，ｒｅｃｕｒｅｎｃｅｒａｔｅ，ｆｅｃｌａｉｎｃｏｎｉｔｎｅｎｃｅｒａｔｅ，ｏｒａｎｌａｄｅｆｏｍａｒｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｎａｌｉｓｆｔｕｌａ
ＬＩＮａ — ｗｅｉ，Ｕｔｔｏｎｇ — ｇｅｎ，ＨＵＡＮＧＳｈｕｎ — ｒｏｎｇ，ＦＥＮＧห้องสมุดไป่ตู้ Ｚｅ — ｒｏｎｇ，ＤＥＮＧＩｔｏｎｇ — ｑｉａｎｇ，ＰＡ Ⅳ Ｙｕｎ，ＬＩＵＹａｎｇ — ｈｕａ
开挂线术组（对照组），比较两组术后伤口疼痛时间、愈合时间、愈合率、复发率、大便失禁、肛门畸形的情况。结果治疗组与对照组在愈合率、复发率、大便失禁率、肛门畸形率的比较，差异无统计学意义；
两组在术后疼痛时间、愈合时间的比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），治疗组优于对照组。结论
林家威吴鸿根黄顺荣冯泽荣邓洪强潘云刘杨桦

异种脱细胞真皮基质材料治疗糖尿病足创面的应用研究

异种脱细胞真皮基质材料治疗糖尿病足创面的应用研究【摘要】目的：分析研究糖尿病足采用异种脱细胞真皮基质材料治疗效果。

方法：选择糖尿病足患者(入选要求：踝肱指数大于0.6，Wagner分级Ⅱ-Ⅲ级)作为分析对象，分析时间2018.3-2021.3，选择100例，应用数字表法分组，研究组采取异种脱细胞真皮基质材料实施创面覆盖，一般组采用湿性敷料换药，评价分析指标：两组治疗前后溃疡面积、疼痛评分，观察时间为2个月。

结果：治疗前，研究组溃疡面积、疼痛评分对比一般组，无统计学意义（P＞0.05），治疗后，研究组溃疡面积与一般组对照更小，疼痛评分与一般组对照更低（P＜0.05）。

结论：应用异种脱细胞真皮基质材料治疗糖尿病足创面效果显著，可帮助患者溃疡部位快速愈合。

【关键词】糖尿病足；异种脱细胞真皮基质；溃疡面积异种脱细胞真皮属于具备生物活性的数量，应用于烧伤创面及烧伤后整形有较好的效果。

目前，国外许多研究中已经将异种脱细胞真皮应用在糖尿病足溃疡创面的治疗当中，并取得理想的效果，但此种治疗方法在国内研究中较为少见。

为对异种脱细胞真皮对于糖尿病足溃疡愈合的应用效果进行分析，本次将我院符合入选标准的糖尿病足患者作为分析目标，探究临床应用价值，报道如下。

1.资料与方法1.1一般资料在2018.3-2021.3期间共计选择符合入选条件的糖尿病足患者100例。

纳入标准：患者符合糖尿病足诊断标准，存在慢性病理性足部溃疡，踝肱指数大于0.6，Wagner分级Ⅱ-Ⅲ级，患者及家属自愿参与本次研究。

排除标准：溃疡部位存在恶性病变。

患者采用数字表法分组，一般组入组患者最大年龄66岁，最小年龄45岁，平均50.84±0.06岁，其中男患22例、女患为28例；研究组入组患者最大年龄67岁，最小年龄43岁，平均50.92±0.11岁，其中男患23例、女患为27例。

对于患者的基础资料进行分析，统计学软件对比为P＞0.05，则为成功分组。

脱细胞真皮基质在耳鼻咽喉科的应用现状

主机体内。ＡＭ作为一种异体真皮，Ｄ细胞成分、汗腺皮脂腺组织移植所产生的特异性细胞免疫反应（即排异反应）亦不，会诱发非特异性异物反应ｊ。面，真皮有利于ＡＭ的快速血管化，底膜面可为上皮细胞Ｄ基
质结构完整，可为组织细胞提供一个良好的传达生物信息的支架，细胞外基质蛋白可促进表皮细胞的附着和增生。自创
工程技术，用特定的方法将皮肤中的细胞成分去除，仅保留真面基底部移入ＡＭ中的成纤维细胞具有产生成熟基质的能Ｄ
的皮肤。
稳定的体积。影响这一动态平衡的因素有血管化过程、受区局部运动度、力、压炎症反应和组织内因素等。
２在耳鼻咽喉一头颈外科的临床应用
２１鼓膜穿孔的修补鼓膜穿孔修复通常采用自体颞肌筋．膜，而对于鼓膜穿孔的修正手术，往往很难得到适宜的颞肌筋膜。ＡＭ可作为鼓膜穿孔修补术和修正手术的移植材料。Ｄ型，６周后进行鼓膜穿孔修补术，实验分ＡＭ实验组和自体筋Ｄ膜对照组，结果显示在时间上ＡＭ组（７ｍｎ和自体筋膜组Ｄ４ｉ）
殷海
（广西贵港市人民医院耳鼻咽喉科，贵港市
【关键词】真皮；耳鼻咽喉科；；穿孔修复【中图分类号】Ｒ７６【文献标识码】Ｂ
５７０）３１０
【文章编号】１７－７（０８０－２－６３５５２０）３２６２６００

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脱细胞真皮基质体内转归的研究进展发布时间:[1970-01-01] 滨州医学院学报2008年2月第31卷第1期脱细胞真皮基质体内转归的研究进展刘道峰(综述,左金华(审校 (滨州医学院附属医院口腔外科,滨州市,256603 关键词脱细胞真皮基质;组织再生;成纤维细胞脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM是最近几年兴起的一种天然生物材料,最初用作真皮替代物,已有ADM在神经外科、耳鼻咽喉、烧伤整形、牙周等学科领域的研究和应用报道[1~4],但对于ADM异体移植后的最终生物学转归,存在较大争议。本文着重就其异体移植后的生物学转归及其机制的研究进展作一综述。

一、ADM 的结构与特性 ADM在制备过程中去除了表皮和真皮中的细胞成分,仅保留真皮的不溶性基质成分,具有低抗原性、快速血管化和一定的稳定性。ADM[5]为规则的三维网状支架,Ⅰ型胶原纤维占主要地位,构成ADM的基本骨架;Ⅲ型胶原纤维减少至原来的一半;Ⅳ型胶原纤维和Ⅶ型胶原纤维几乎消失。弹力蛋白明显减少,层粘连蛋白损失较多,硫酸软骨素消失殆尽,纤维连接素明显减少,糖蛋白几乎完整保存。

二、ADM 的转归研究 ADM 是无细胞的组织支架,植入受区给创面提供了足够的真皮组织,即形成了一个理想的生物支架,引导新生血管长入和上皮爬行,又大大减轻愈后疤痕形成和创面挛缩的程度。伴随血管长入和成纤维细胞迁移其中,宿主机体对ADM 逐步进行改建。关于ADM 的体内结局,学术界持有两种观点:①部分学者报道大约在4~6周时ADM的降解与成纤维细胞分泌的基质量达到动态平衡,新生胶原纤维与ADM原有胶原网架并存, ADM被视为自体组织。Cummings等[6]观察到术后6个月发现新生成纤维细胞、血管和胶原纤维贯穿ADM中,原有的弹性纤维仍有保留。Sclafani等[7]观察ADM移植后1年,初始6个月ADM不断被改建,面积不断缩小,余下的6个月保持一个稳定的量,不再有明显变化。②多数学者认为ADM在体内逐渐被降解替代,最终完全替换为自体组织或相似组织,这一过程时间长短不一。

Chaplin等[1]应用ADM修复硬脑膜缺损,术后1个月时ADM已完全血管化,3个月时ADM 与周围硬脑膜不易区分,达到临床修复目的。Thakker等[8]采用ADM包裹羟磷灰石(HA或多聚乙稀(PP作眶内植入物,1.5个月时HA组胶原纤维和血管大部分长入,PP组有少部分长入(主要在AD附近;3个月时两组胶原纤维与血管完全长入,ADM与眶内植入物密贴牢不可分,并与周围组织融合,实现植入物的固位,这比单纯采用眶内植入物的固定要早和牢固。

Tark等[9]采用ADM复合角质形成细胞修复猪全层皮肤缺损,6个月时创面组织学观察揭示成纤维细胞侵入支架中,血管网明显,ADM上出现复层角化细胞,透明层形成,与正常皮肤在构造上基本一致。Wei等[10]采用ADM增加附着龈高度,术后个月ADM与游离龈及根部牙槽粘膜的分界不甚清楚,上皮层厚度中等,有角化,上皮与固有层交界面平坦,结缔组织中包含浓密的胶原纤维和分散的弹性纤维,形态与层次基本等同于正常粘膜。谢卫国等[11]观察到6个月时发现ADM原有的疏松海绵状结构已逐步转变为与正常真皮类似的结构。Pahari等[12]应用ADM延长大鼠肠粘膜的长度,取得满意效果,术后6个月ADM皮片延伸为完整而坚实的肠粘膜,二者在组织学上难以鉴别。Buinewicz等[13]使用ADM修复腹壁缺损观察到术后8个月,ADM转化为筋膜样组织,与原先的筋膜发挥同样的生理功能。Witt等[14]使用ADM修复大疱性表皮松解症,1年后观察胶原和弹性纤维成熟并按照正常皮肤形式排列,实现临床愈合。Gaspar等[3]将ADM直接置于重度烧伤后暴露的骨面,表面再覆盖半厚皮片,术后2年组织学观察,上皮显示正常的结构和角化;在上皮与真皮连接处有中等数量的疏松胶原纤维;真皮深层为弹性结缔组织,下方有成熟的薄片状骨小梁,这表明此时ADM已完全转化为致密的具有良好形态和功能的自体真皮组织。

Harper对应用AlloDerm(商品化的ADM修复腹壁和乳腺缺损的转归做了基础性研究。①修复腹壁缺损:术后8个月(HE切片 ADM区域细胞和血管密度等同于腹壁筋膜,其与周围筋膜的分界已不清楚,组织中胶原依然紧密和粗壮;V erhoeff’s染色显示ADM中有弹性蛋白。术后12个月(HE切片ADM具有粗壮的胶原基质,排列整齐,细胞与血管分布等同于正常筋膜而有别于瘢痕; V erhoeff’s染色显示弹性蛋白网被重塑,形态与分布如同周边筋膜。术后24个月,ADM与周围组织完全融合(其辨认通过手术标记的永久性缝线,胶原纤维自然延伸向周围筋膜的纤维网,弹性蛋白已无法观察到。②修复乳腺缺损:术后1年,ADM基

底表现为真皮结缔组织,细胞分布和血管网与正常结缔组织相同;V erhoeff’s染色显示弹性蛋白,ADM 支架与结缔组织具有一致性。术后2.5 年,HE染色与V e rhoeff’s染色都显示ADM已成为包含有正常量细胞与血管的粗壮的结缔组织,胶原纤维束按线性紧密排列。

三、ADM 转归机制探讨组织再生需有三个关键因素:具有合适生物活性的致密支架以支持再生愈合过程;支架内适量的生长因子以促进细胞分化、成熟和迁移;细胞对生长因子和生物学刺激的反应能力。ADM内含有大量精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列(Arg-Gly-Asp,RGD,该序列是许多细胞膜的粘附蛋白共同的识别标志,在介导细胞与基质、细胞与细胞之间粘附方面起着非常重要的作用。ADM支架植入后,通过止血作用使血小板激活系统触发生长因子和其他形态生成素的释放,使其浸透沉积于胶原纤维间。RGD引导特殊的细胞粘附蛋白(可被成纤维细胞表面的整合素受体识别进入支架。通过粘附位点和蛋白酶活性相互作用,成纤维细胞向支架迁移。进入支架内,成纤维细胞一方面合成细胞外基质(主要是胶原纤维和细胞因子增加支架活性,另一方面释放胶原酶等分解基质。在微环境的多种因素作用下,成纤维细胞重塑支架,使其转变为与受损前原始组织具有同样功能和生理的组织。Buinewicz等[14]均观察到ADM并不是仅停留于基质状态,而是随应用部位不同被改建为适宜的组织。

成纤维细胞(fibroblast,FB是创伤修复的工程师、建筑者和管理员,除组织改建外,FB 对ADM还有多重作用。FB的快速移入,使ADM具有细胞活性,更加接近生理状态,可对移植环境作出反应;FB分泌的细胞因子可修饰ADM表面,提高ADM诱导创周血管内皮细胞向内移行的能力,促进快速血管化;FB还可间接促进表皮细胞的生长、分化和基底膜形成,提高ADM的成活率。

基质金属蛋白酶(MMPs是细胞外基质改建的基础酶家族。间质胶原酶(MMP-1是降解Ⅰ型胶原的主要酶。成纤维细胞迁移入ADM支架,在胶原纤维上爬行,受到Ⅰ型胶原的刺激释放出MMP-1。MMP-1裂解Ⅰ型胶原为明胶(可被进一步降解,直接参与ADM支架结构蛋白的再塑形。MMPs的重要功能还在于分解细胞迁移的胞外基质障碍物。通过裂解Ⅰ型胶原等,MMPs提供利于细胞迁移的物质,增加细胞与基质的亲和力,使支架周边的角质细胞眼胶原纤维向中央爬行,实现再上皮化覆盖创面。推测MMP-2在这一过程中有更明显的作用。Lindman等[15]将天然组鼠成纤维细胞和MMP-2缺乏组成纤维细胞分别置于ADM基底膜面适度孵育20d,发现天然组浸透和降解ADM的能力显著优于MMP-2缺乏组(P<0.001。

ADM真皮面可引导新生血管长入,短时间内形成血管网。血管化是ADM组织改建的基础和前提,也是ADM转归的重要组成部分。ADM的毛细血管为成纤维细胞的运动提供动力,促进了旧胶原的吸收,并转运胶原降解后的组织废物;血管内皮细胞也可产生胶原。这样,血管网参与了胶原代谢的动态平衡。成纤维细胞分泌多种细胞因子、生长因子,可促进血管化。Novaes等[16]观察到复合成纤维细胞的ADM组移植2周时血管数量显著高于单纯ADM 组(P<0.05,表明成纤维细胞可明显促进ADM的血管化,改良皮片功能。

四、问题与展望外伤、烧伤和肿瘤术后造成的组织缺损是外科系统常见病症,组织缺损的修复是许多学者致力研究的课题,ADM的出现为组织缺损的修复提供了新的治疗途径。 ADM遵循组织再生规律的转归是个漫长的过程,受到诸多干扰。体内复杂的微环境中何种因子或因素起主导作用尚不清楚;成纤维细胞是转归的基础性细胞,如何提高维持其作用尚需要解决,如何保证组织再生的彻底性也需要进一步努力。相信随着研究的深入,上述问题会逐渐得以解决。

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