AM AM FS Is 肉类和肉制品 L 谷氨酸含量的测定 参考方法
食物中氨基酸的测定方法
食物中氨基酸的测定方法（1）一、氨基酸自动分析仪法1. 原理食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。
一份水解液可同时测定天冬，苏，丝，谷，脯，甘，丙，缬，蛋，异亮，亮，酪，苯丙，组，赖和精氨酸等16种氨基酸，其最低检出限为10pmol。
2. 适用范围GB/T14965-1994食物中氨基酸的测定方法。
本法适用于食物中的16种氨基酸的测定。
其最低检出限为10pmol。
本方法不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的测定3. 仪器和设备3.1 真空泵3.2 恒温干燥箱3.3 水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20～30ml。
用去离子水冲洗干净并烘干。
3.4 真空干燥器（温度可调节）3.5 氨基酸自动分析仪。
4. 试剂全部试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。
4.1 浓盐酸：优级纯4.2 6mol/L盐酸：浓盐酸与水1：1混合而成。
4.3 苯酚：需重蒸馏。
4.4 混合氨基酸标准液（仪器制造公司出售）：0.0025mol/L4.5 缓冲液：4.5.1 pH2.2的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠（Na3C6H5O7.2H2O）和16.5ml浓盐酸加水稀释到1 000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至2.24.5.2 pH3.3的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和12ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节至pH至3.3。
4.5.3 pH4.0的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和9ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至4.0。
4.5.4 pH6.4的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和46.8g氯化钠（优级纯）加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至6.4。
4.6 茚三酮溶液4.6.1 pH5.2的乙酸锂溶液：称取氢氧化锂（LiOH.H2O）168g，加入冰乙酸（优级纯）279ml，加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠调节pH至5.2。
肉与肉制品中氯霉素含量测定—气相色谱法和酶联免疫法参考资料
肉与肉制品氯霉素含量的测定——科标检测肉类食品是最富有营养的食品之一，含有大量的全钾蛋白质、脂肪、糖类、矿物质和维生素，而且味道鲜美，吸收率高，所以深受人们的喜爱。
但是肉类食品在生产过程中，污染源复杂，途径多。
2014年7月17日，国家食品药品监督管理总局发布《关于深入开展肉及肉制品检查执法工作的通知》，要求各地要将保障肉及肉制品质量安全作为食品安全工作重点。
科标检测可依据各项国家标准，针对冷、鲜鸡肉、牛肉、猪肉等各类肉及肉制品，提供专业检测服务，以下介绍两种肉与肉制品氯霉素含量的测定方法：一、气相色谱-质谱法1、原理样品中氯霉素用乙酸乙酯提取，脂肪用正己烷去除，经C18净化，BSTFA+TMCS(99+1)衍生后，用NCI源选择m/z为466的特征离子为目标离子，在SIM模式下进行GC-MS测定。
2、试剂和材料若无特别说明，所用试剂均为分析纯，所用水应符合GB/T6682的要求。
2.1氯霉素：标准品，纯度≥99%。
2.2甲醇：色谱纯。
2.3三氯甲烷。
2.4正己烷：色谱纯。
2.5乙酸乙酯。
2.6无水硫酸钠。
2.7氯化钠。
2.8 N、O-双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)。
2.9三甲基氯硅烷(TMCS)。
2.10丙酮：色谱纯。
2.ll甲苯。
2.12甲醇溶液：甲醇+水=2+8。
2.13氯化钠溶液(40g/L)：称取4.00g氯化钠（2.7），用水溶解，定容至100mL。
2.14甲醇一氯化钠溶液：量取甲醇溶液(2.12)20mL、氯化钠溶液(2.13)80mL，混匀。
2.15混合衍生剂：N、O-双三甲基硅烷二氟乙酰胺+三甲基氯硅烷=99+1。
2.16氯霉素标准储备溶液(c=0.1mg/mL)：称取氯霉素标准品0.01g(精确至0.0001g)，用丙酮溶解并定容至100mL。
储备液贮存在4℃冰箱中，可使用两个月。
2.17氯霉素标准工作溶液：根据试验需要，用丙酮(2.2.10)稀释标准储备溶液(2.2.17)，配成适当浓度的标准工作溶液。
氨基酸含量的测定
氨基酸含量的测定标准曲线绘制准确吸取200ug/ml的氨基酸标准溶液0.0，0.6，0.8，1.0,1.2，1.5，2.0 ml，分别置于25ml容量瓶或比色管中，各加水补充至溶剂为4.0ml，然后加入茚三酮和磷酸缓冲溶液各1ml，混合均匀，于水浴上加热15min，取出迅速冷至室温，再摇匀，加水至标线25ml，摇匀。
静置15min后，在570nm波长下，以试剂空白为参比液夨订其余各溶液的吸光度A。
以氨基酸的微克数为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。
样品的测定：将虾研磨冷却过滤后稀释10倍，吸取澄清的样品溶液1.5ml，平行三次，按标准曲线制作步骤，在相同条件下测定吸光度A 值，用测得的A值在标准曲线上即可查得氨基酸的微克数。
公式：氨基酸总量（ug/100g）=(c/m*1000)*100*10式中c是指从标准曲线上查得的氨基酸的ug数；M是指测定的样品溶液相当于样品的质量g；PH计酸度计测量ph的方法：(1)拿下笔帽(2)按on/off键，机器显示运作(3)将ph计放入待测液中(4)轻轻晃动ph计，保证内气泡逸出，使之于溶液充分接触，勿碰撞杯壁(5)ph计会立即显示数值，将笔置入待测液待数值稳定，30秒内将显示正确数值，(特：ph计数值上下浮动或不稳定是正常现象)(6)按hold键锁定数值，可在待测溶液外记录读取，继续按hold键解除锁定(7)按on/off键关闭ph计(8)轻甩PH计测试笔上多于的水，用蒸馏水或脱离子水冲洗，盖上笔帽测量温度方法在测试模式下，温度数值与ph数值同步显示在液晶面板上，但在校准模式下不显示，数值默认为摄氏温度。
（一）挥发性盐基氮（TVB-N）的测定半微量定氮法（1）原理：蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质，有氨、伯胺、仲胺等，此类物质具有挥发性，可在碱性溶液中被蒸馏出来，用标准酸滴定，计算含量。
（2）试剂①氧化镁混悬液(10g/L) 称取1.0g氧化镁，加100ml水，振摇成混悬液。
食品中L谷氨酸的测定酶电极法行业标准征求意见稿
ICS点击此处添加中国标准文献分类号中华人民共和国行业标准XX/T XXXXX—XXXX食品中L-谷氨酸的测定—酶电极法Determination of L-glutamate in food—Enzyme-electrode method点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（工作组讨论稿）（本稿完成日期：）XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施前言本标准按照GB/T1.1-2009 给出的规则起草。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准起草单位：菱花集团有限公司、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、武汉远大宏元股份有限公司、天津科技大学、山东省科学院生物研究所、中国生物发酵产业协会。
本标准主要起草人：xxx、食品中L-谷氨酸的测定-酶电极法1 范围本标准规定了酶-电极法测定各类食品中L -谷氨酸的分析步骤。
本标准适用于各类食品中L-谷氨酸的测定，亦适用于食品中其他组分转化为L-谷氨酸的测定。
本标准的最低检出限量为10.0mg/L 。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 方法提要谷氨酸氧化酶在有氧条件下催化L-谷氨酸（谷氨酸水溶液状态）氧化，生成α-酮戊二酸和过氧化氢，过氧化氢与过氧化氢型电极接触产生电流，该电流值与L-谷氨酸的浓度呈线性比例，在酶电极L-谷氨酸分析仪上直接显示L-谷氨酸含量。
2257522495O H NO H C O O H NO H C -L +−−−−→−++谷氨酸氧化酶4 试剂和溶液本试验方法中，所用试剂除特殊注明外均为分析纯；用水应符合GB/T 6682中三级(含三级）以上的水规格。
4.1 组合试剂盒4.1.1 Ｌ-谷氨酸氧化酶酶膜圈含有谷氨酸氧化酶0.1U （活力单位）；应在0℃~4℃左右保存，有效期12个月。
食品中生物胺含量的测定
中华人民共和国国家标准GB xxxx —xxxx中华人民共和国卫生部 发布食品安全国家标准 食品中生物胺含量的测定（征求意见稿）前言本标准代替GB/T 5009.208—2008《食品中生物胺含量的测定》。
本标准中附录A为资料性附录。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——GB/T 5009.208—2008食品安全国家标准食品中生物胺含量的测定1范围本标准规定了食品中色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺含量的测定方法。
本标准适用于酒类（葡萄酒、啤酒、黄酒等）、调味品（醋酱油等）、水产品（鱼类及其制品、虾类及其制品）、肉类及乳制品中生物胺的测定。
2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
3原理以1,7-二氨基庚烷为内标，以5%三氯乙酸为提取溶液，振摇提取，以正已烷去除脂肪，经过三氯甲烷-正丁醇（1+1）液液萃取净化后，以丹磺酰氯为衍生剂，60℃衍生30min, 采用高效液相色谱的C18柱分离，紫外检测器检测，内标法定量。
4试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为超纯水。
4.1 甲醇（CH3OH）:色谱纯。
4.2 丙酮（C3H6O）:色谱纯。
4.3 乙醚（C4H10O）:重蒸。
4.4 正丁醇（C4H10O）。
4.5 三氯甲烷(CHCl3)。
4.6 正已烷（C6H14）:色谱纯。
4.7 谷氨酸钠（C5H8NNaO4）。
4.8 碳酸氢钠（NaHCO3）。
4.9 氯化钠（NaCl）。
4.10 氢氧化钠（NaOH）。
4.11 浓盐酸（HCl，37%）。
4.12 三氯乙酸（C2HCl3O2）。
4.13 组胺盐酸盐（histamine dihydrochloride,C5H9N3·2HCl，CAS号：51-45-6）标准品（纯度>99%,计算时应折算掉盐酸盐，C5H9N3/C5H9N3·2HCl=155/184）。
食品中谷氨酸钠含量测定操作规程
食品中谷氨酸钠含量测定操作规程食品中谷氨酸钠含量测定操作规程1 目的对公司产品味精中谷氨酸钠含量测定制定标准操作规程，检验室操作人员按本规程操作，保证公司产品谷氨酸钠含量检测结果准确。
2 范围本操作规范第一法（旋光法）适用于纯品（谷氨酸钠）味精中谷氨酸钠含量的测定。
第二法（酸度计法）适用于鸡精调味料以及其他调味料中谷氨酸钠含量的测定。
3 依据5009.43-2016 食品安全国家标准味精中麸氨酸钠( 谷氨酸钠) 的测定第一法旋光法4 原理谷氨酸钠分子结构中含有一个不对称碳原子，具有光学活性，能使偏振光面旋转一定角度，因此可用旋光仪测定旋光度，根据旋光度换算谷氨酸钠的含量。
5 试剂除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。
盐酸（HCl）。
6 仪器和设备10.1 旋光仪（精度±0.010°）备有钠光灯（钠光谱D线589.3nm）。
10.2 分析天平：感量0.1mg。
7 分析步骤7.1 试样制备称取试样10g（精确至0.0001g），加少量水溶解并转移至100mL容量瓶中，加盐酸20mL，混匀并冷却至20℃，定容并摇匀。
7.2 试样溶液的测定于20℃，用标准旋光角校正仪器；将11.1试液置于旋光管中（不得有气泡），观测其旋光度，同时记录旋光管中试样液的温度。
8 分析结果的表述样品中谷氨酸钠含量按式（3）计算：X2 =α／（L ×c）／（25.16+0.047（20-t））×100 (3)式中：X 2 ———样品中谷氨酸钠含量（含1分子结晶水），单位为克每百克（g/100g ）；α ———实测试样液的旋光度，单位为度（°）；L ———旋光管长度（液层厚度），单位为分米（dm ）；c ———1mL 试样液中含谷氨酸钠的质量，单位为克每毫升（g/mL ）；25.16———谷氨酸钠的比旋光度α][20D ，单位为度（°）；t ———测定试液的温度，单位为摄氏度（℃）；0.047———温度校正系数；100 ———换算系数。
l-焦谷氨酸国标检测方法
l-焦谷氨酸国标检测方法l-焦谷氨酸是一种重要的氨基酸，对人体健康具有重要作用。
为了确保食品和药品中l-焦谷氨酸的质量和安全性，国家制定了一套严格的检测方法。
本文将介绍l-焦谷氨酸的国标检测方法及其应用。
一、l-焦谷氨酸的国标检测方法l-焦谷氨酸的国标检测方法是根据国际标准和国内实际情况制定的。
该方法主要包括样品的制备、仪器设备的选择和检测步骤等内容。
1. 样品的制备样品的制备是l-焦谷氨酸检测的第一步。
通常情况下，样品是从食品或药品中提取出来的。
提取方法可以根据实际情况选择，一般是通过溶解、过滤和浓缩等步骤来获得样品。
2. 仪器设备的选择l-焦谷氨酸国标检测方法需要使用一些专用的仪器设备，以确保检测结果的准确性和可靠性。
常用的仪器设备包括高效液相色谱仪（HPLC）和气相色谱仪（GC）等。
3. 检测步骤l-焦谷氨酸国标检测方法包括一系列的检测步骤，主要包括样品准备、色谱条件设置、峰面积测定、标准曲线绘制和结果计算等。
具体步骤可以根据实际情况进行调整，以确保检测结果的准确性和可靠性。
l-焦谷氨酸国标检测方法主要应用于食品和药品等领域。
具体应用包括以下几个方面：1. 食品安全监测l-焦谷氨酸是一种常见的食品添加剂，用于提高食品的风味和营养价值。
然而，过量的l-焦谷氨酸可能对人体健康造成潜在风险。
因此，通过国标检测方法对食品中的l-焦谷氨酸含量进行监测，可以保证食品的质量和安全性。
2. 药品质量控制l-焦谷氨酸在药品中的应用也较为广泛。
通过国标检测方法对药品中l-焦谷氨酸的含量进行监测，可以确保药品的质量和疗效。
同时，对于一些特殊群体，如婴幼儿和孕妇等，需要对药品中的l-焦谷氨酸含量进行限制，以避免潜在的风险。
3. 新产品研发l-焦谷氨酸在食品和药品领域的应用不断创新。
通过国标检测方法，可以对新产品中的l-焦谷氨酸含量进行准确测定，为新产品的研发提供科学依据和技术支持。
总结：l-焦谷氨酸的国标检测方法是保障食品和药品安全的重要手段。
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒说明书
货号: QS1906 规格：50管/48样谷氨酸(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：Gu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。
此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理：利用专用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂仍4℃避光保存。
谷氨酸提取：1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.2mL血清（浆）或者细胞培养液加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
测定操作1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
测定管-A对照管。
对照管只要做一管。
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AMAMFSIs0307 肉类 肉制品 L-(+)-谷氨酸含量的测定比色法
AM-AM-FS-Is-0307
肉类和肉制品——L-(+)-谷氨酸含量的测定——参考方法
1.适用范围：
本方法是一个参考方法，适用于肉类和肉制品，包括家禽L-(+)-谷氨酸含量的测定。
2.原理概要：
在0℃，用高氯酸萃取出试样中的L-(+)-谷氨酸。
萃取产物经离心分离、转移和过滤后，将pH调至10.0。
在谷氨酸酯脱氢酶存在下，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)被L-(+)-谷氨酸还原(方程1)。
在硫辛酰胺脱氢酶存在下，得到的还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)和氯化碘代硝基四唑反应(方程2)，测定生成的(formazane)在492nm处的吸收，从而计算出L-(+)-谷氨酸的含量。
谷氨酸酯脱氢酶
L-(+)-谷氨酸＋NAD＋＋H2O α-酮戊二酸单酰胺＋NADH＋NH3＋H＋(1)
硫辛酰胺脱氢酶
NADH ＋氯化碘代硝基四唑＋H＋NAD＋＋ formazane (2) 3.主要仪器和试剂：
3.1.仪器
常规实验室仪器，主要有：机械磨或电磨、实验室混合器、带离心管的实验室离心机、pH计、槽形滤纸、单刻度容量瓶(100ml和250ml，满足ISO 1042 B类要求)、单刻度移液管(100ml、50ml和25ml，满足ISO 648 B类要求)、带刻度的移液管(有2.50ml、0.50ml、0.20ml 和0.05ml等分度，满足ISO 835-2 A类要求)、小塑料压舌板、光电比色计或光谱仪、比色管(10mm光程)、分析天平(可精确至0.1mg)。
3.2.试剂
除非另做说明，所有试剂要用分析纯，水用二次蒸馏水或矿蒸馏水。
主要试剂有：1.0 mol/l稀高氯酸溶液、2 mol/l氢氧化钾溶液、pH 8.6三乙醇胺磷酸盐缓冲溶液、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)溶液、氯化碘代硝基四唑(INT)溶液、硫辛酰胺脱氢酶溶液、10mg/ml谷氨酸酯脱氢酶(GLDH)溶液、L-(+)-谷氨酸标准溶液(50.0g L-(+)-谷氨酸溶于25ml水中，用氢氧化钾溶液将pH调至7.0，溶液稀释到50ml，并混合均匀)。
4.过程简述：
4.1 采样
采样可参照ISO 3100-1。
重要的一点是取样应具有代表性，样品在运输或储存时未被破
坏或发生改变。
初始有代表性的试样至少200g。
4.2 样品制备
试样用合适的设备进行均化，这一过程需小心操作，试样温度不能升高到超过25℃。
制好的试样要装在合适的密闭的容器中。
4.3 测试
称取约50g试样，精确至0.01g，放入实验室混合器瓶中。
在0℃下，向试样中加入100ml 稀的高氯酸，并混合均匀。
然后将试样移入离心管中，离心分离10min。
小心移掉脂肪层，通过滤纸把顶层的液体滤至200ml锥形瓶中，抛掉前10ml滤液。
用移液管移取50ml滤液，加入到100ml烧杯中，用氢氧化钾溶液并通过pH计测定，将溶液pH值调节7.0。
然后将烧杯中液体全部转移到100ml容量瓶中，用水稀释至刻度线，并混合均匀。
溶液在冰中冷却10min后，通过槽形滤纸进行过滤，抛弃前10ml滤液。
用移液管移取25ml或适量体积的滤液，加入到250ml容量瓶中，用水稀释至刻度线。
使缓冲溶液和滤液温度为20℃～25℃。
用移液管向两个比色管中，各加入2.50ml缓冲溶液，0.20ml NAD溶液，0.20ml INT溶液和0.05ml硫辛酰胺脱氢酶。
加入INT后，使反应产物尽可能避光。
向一个比色管中加入0.5ml滤液，得到的溶液作为测试液；另一个比色管中加入0.5ml水，得到的溶液作空白。
用压舌板混匀溶液，在波长492nm处读出每个比色管中溶液对水的吸收，溶液温度应在20℃～25℃。
移取0.05ml GLDH溶液加入到每个比色管中，混匀,10~15min后，在492nm处读取每个玻璃管中溶液对水的吸收值，随后，每2min读一次数，直到吸收值的增量为常数为止，画出吸收值对时间的曲线，求出反应开始时的吸收值。
重复上述操作，只是在第一个比色管中用0.5ml L-(+)-谷氨酸标准溶液替代0.5ml滤液。
按ISO 1442标准测定试样的含水量。
5.精确度：
重复性：相同试验者使用相同设备在短时间间隔内，采用相同试验方法对同一试验材料进行分析，L-(+)-谷氨酸含量高达0.14%时，得到的两个独立的实验结果的绝对偏差不超过5%，含量偏差最大不超过0.02%。
再现性：不同试验者使用不同设备，采用相同试验方法对同一的试验材料进行分析，L-(+)-谷氨酸含量高达0.14%时，得到的两个独立的实验结果的绝对偏差不超过5%，含量偏差最大不超过0.04%。
6.来源：
国际标准化组织，ISO 4134：1999(E)。