《中华人民共和国药典(2015年版)》(四部)通则中有关生物测定

《中华人民共和国药典（2015年版）》（四部）通则中有关生物测定部分的增、修订情况介绍作者：唐黎明陈桂良来源：《上海医药》2016年第07期摘要《中华人民共和国药典（2015年版）》将前版药典一、二、三部分别收载的附录整合归为四部，作为药典的通用要求。

四部中有关生物测定部分除整合了热原检查法、异常毒性检查法等原附录外，还新增了组胺物质检查法等，同时对部分原附录进行了修订。

本文介绍相关情况。

关键词《中华人民共和国药典（2015年版）》生物测定通则增、修订中图分类号：R921.2 文献标识码：C 文章编号：1006-1533（2016）07-0009-02Introduction of the revised information about the biologic test in general principle（volume IV）of the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （2015 version）TANG Liming*， CHEN Guiliang（Division of Pharmacology and Toxicology， Shanghai Institute for Food and Drug Control，Shanghai 201203， China）ABSTRACT The appendices in the Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （ChP）（2010 version） volume I， II and III were integrated into volume IV in ChP （2015 version），which can be served as the common requirement for pharmacopoeia standards. The histamine test and so on were added in the biological test of volume IV besides the intergradation of pyrogens test and abnormal toxicity test and meanwhile some appendices on bioassay were revised as well. In this paper， the relevant information is introduced for reference.KEY WORDS Pharmacopoeia of the People’s Republic of China （2015 version）； biologic test； general principle； revision《中华人民共和国药典（2015年版）》（以下简称为“2015年版《中国药典》”）已自2015年12月1日起正式实施。

本版药典在各方面都有较大的变化，其中一、二、三和四部的总体变化都已有介绍[1-4]，四部中有关理化检验方法部分的总体变化也已有介绍[5]，但有关生物测定部分的增、修订情况却尚未见有介绍。

本文就2015年版《中国药典》（四部）通则中有关生物测定部分的增、修订情况作一简要介绍，主要包括体例变化、整合情况和增、修订内容，供同仁参考。

1 体例变化本版药典最大的变化是新增了通则部分，即将前版药典一、二、三部中的附录整合归为四部中的通则，并对所有检查方法和指导原则都按统一的原则进行数字编号。

通则中有关生物测定的部分主要包括——①1100系列：为生物检查法，主要包括原药典一、二、三部附录中的无菌检查法、热原检查法、细菌内毒素检查法等涉及安全性的检查方法；②1200系列：为生物活性测定法，主要包括原药典二部附录中用于药品的抗生素微生物检定法、肝素生物测定法、降钙素生物测定法等涉及药品有效性的测定方法，以及与生物测定法相关的生物检定统计法等；③3400系列：为生物测定法，主要包括原药典三部附录中用于生物制品的免疫印迹法、抗（补）体活性测定法等涉及体外免疫的测定方法；④3500系列：为生物活性（效价）测定法，主要包括原药典三部附录中用于生物制品的人用狂犬病疫苗效价测定法、干扰素生物活性测定法等涉及动物和细胞的测定方法。

通则中有关指导原则的部分包括“中药生物活性测定指导原则”和“注射剂安全性检查法应用指导原则”。

2 整合情况本版药典将分散在原药典一、二、三部中的附录整合归为了四部中的通则。

其中，原药典二、三部中的生物活性测定法被直接归为四部。

不过，对生物检查法，尽管原药典一、二、三部中都有此附录，但内容并不完全一致，需予统一。

如热原检查法，原药典一、二部附录热原检查法中的家兔体重为1.7 kg以上，没有上限，而三部附录热原检查法中的家兔体重有上限（3.0 kg）。

因此，经研究，本版药典通则热原检查法中的家兔体重被统一并修订为“用于生物制品（热原）检查用的家兔体重为1.7 ～3.0 kg”。

又如异常毒性检查法，原药典一、二部和三部中的此附录内容有较大差异：一、二部附录的异常毒性检查法仅做小鼠试验，而三部附录的异常毒性检查法须做小鼠和豚鼠两种动物试验，且要设同批动物的空白对照；结果判断依据也不一样，其中三部附录的异常毒性检查法强调动物必须无异常反应、体重应增加等。

考虑到生物制品的特殊性，经反复讨论，最后本版药典通则中的异常毒性检查法被整合为前言、供试品溶液的制备和试验用动物条目统一，但具体试验方法分为非生物制品和生物制品试验两部分。

指导原则部分，原药典一部附录中的“中药生物活性测定指导原则”被直接归为本版药典四部；原药典一部附录中的“中药注射剂安全性检查法应用指导原则”和二部附录中的“化学药品注射剂安全性检查法应用指导原则”被整合、修订为本版药典四部通则中的“注射剂安全性检查法应用指导原则”。

3 增订情况本版药典生物测定部分新增了“组胺类物质检查法”和“肝素生物测定法”中的第三法“活化部分凝血活酶时间法”。

组胺类物质检查法的原理是，组胺类物质可直接引起豚鼠回肠的收缩，豚鼠回肠对组胺的灵敏度与猫血压反应相当，故可作为后者的补充或替代检查方法。

与降压物质检查法相比，组胺类物质检查法的优点包括：豚鼠属于质量稳定、可控的实验动物；对于既含有降压物质、又对血管有作用的药品，降压物质检查法可能出现假阳性结果，而组胺类物质检查法可减少假阳性的发生率；在对许多中药注射剂进行降压物质检查时，常见一过性降压现象（如清开灵注射液等），但临床使用时却不存在降压现象，而一些活血化瘀类中药注射剂如红花注射液等本身就具有扩张血管的作用，这些药品都不适合使用降压物质检查法。

2011年版《英国药典》和2011年版《欧洲药典》都由降压物质检查法和组胺类物质检查法这两种方法组成。

因此，本版药典经专项研究后，增订了组胺类物质检查法。

活化部分凝血活酶时间法以凝血因子分析仪替代人工计时测定凝血时间，有益于保证凝固点判断的客观性，减少了原有两种方法的主观差异，同时简化了实验操作。

4 修订情况本版药典的生物检查法和生物活性测定法部分没有大的原则性修订，修订内容主要是明确一些概念和定义、规范和统一一些表述、进一步完善实验细节等。

4.1 概念和定义的明确本版药典对其通则中多种检查法项下的一些基本术语解释作了修订，使之更为明确。

例如，异常毒性检查法中明确了“异常毒性有别于药品本身所具有的毒性特征，是指由生产过程中引入或其他原因所致的毒性”、“检查供试品中是否污染了外源性毒性物质以及是否存在意外的不安全因素”；热原检查法中明确了“对用于血液制品、抗毒素和其他同一抗原性供试品检测的家兔可在5天内重复使用1次”；细菌内毒素检查法中明确了“按凝胶法中凝胶限度试验作为仲裁法”，并对国家标准品和工作标准品的用途作了进一步的规定；肝素生物测定法中血浆制备项下明确了“制备好的血浆可以用于试验，也可以冻结后使用”。

4.2 表述的规范和统一本版药典对其通则中多种检查法项下的一些表述作了更新。

其中，细菌内毒素检查法中的表述变化较多：干扰试验项下对系列溶液B的表述、凝胶半定量试验项下对结果判断的表述都作了较大的更新；升压物质检查法和升压素生物测定法中将垂体后叶标准品改为了赖氨酸升压素标准品；缩宫素生物测定法中删除了垂体后叶标准品；溶血与凝聚检查法中将蒸馏水改为了纯化水等。

在“注射剂安全性检查法应用指导原则”中，将降压物质检查法和组胺类物质检查法这两段合并了。

4.3 实验方法的进一步完善本版药典还对生物检查法和生物活性测定法中的一些细节作了更新，主要根据已有的实验经验进行修订，涉及溶液配制、动物数量及体重等要求，目的是加强实验方法的适用性和可操作性。

例如，异常毒性检查法中的小鼠体重被统一为18 ～ 22 g，复试时为19 ～ 21 g；热原检查法中家兔升温总和的复试温度由1.4 ℃修订为1.3℃；细菌内毒素检查法中干扰试验的系列溶液C的平行管数由4管改为2管；溶血与凝聚检查法中增加了复试内容：“若有一支供试品管的溶液在3小时内发生溶血和（或）凝聚，应设4支供试品管进行复试”；绒促性素、卵泡刺激素和黄体生成素等生物测定法中的溶液保存温度、动物体重和动物数都作了修订；降钙素生物测定法中增加了溶剂制备方法和皮下注射方法等。

5 结语综上所述，2015年版《中国药典》（四部）通则中的生物检查法和生物活性测定法部分在体例、内容和实验方法上都作了一定的增、修订，因此在进行有关实验前应仔细阅读通则中相应的检查和测定方法，以符合其要求。

参考文献[1] 石上梅. 逐步完善中药质量标准体系和质量控制模式——解读2015年版《中国药典》（一部）[J]. 中国药学杂志， 2015， 50（20）： 1752-1753.[2] 李慧义，姜典卓，王志军，等. 2015年版《中国药典》二部主要增修订内容介绍[J]. 中国药学杂志， 2015， 50（20）： 1757-1760.[3] 郭中平，王晓娟，曹琰，等. 2015年版《中国药典》三部增修订概况[J]. 中国药学杂志， 2015， 50（20）： 1773-1775.[4] 洪小栩，许华玉，尚悦，等. 2015年版《中国药典》四部增修订概况[J]. 中国药学杂志， 2015， 50（20）： 1782-1786.[5] 钱琛，陈佳，陈桂良. 《中国药典》2015年版通则理化检验方法的修订与浅析[J]. 中国医药工业杂志， 2014， 45（12）： 1195-1198.。