植物生理学实验-小篮子法
小篮子法
[实验原理]利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2，实验结束后，用草酸溶液滴定残留的Ba(OH)2,从空白和样品两者消耗草酸溶液之差，即可计算出呼吸过程中释放CO2的量。
[器材与试剂]
实验仪器广口瓶，温度计，酸式滴定管，干燥管，尼龙网制小蓝。
实验试剂 0.05mol/L Ba(OH)2, 指示剂：0.1%麝香草酚酞酒精溶液，1/44mol/L草酸溶液：准确称取重结晶的草酸 H2C2O4·2H2O 2.8652g,溶于蒸馏水，配成1000mL,每mL溶液相当于1mg的CO2。
实验材料萌发的小麦或水稻种子
[实验步骤]
1.取500mL广口瓶一个，装配一只三孔橡皮塞，一孔插入盛碱石灰的干燥管，以吸收空气中的CO2，
保证进入呼吸瓶的空气无CO2，一孔插入温度计，另一孔直径约1 cm左右供滴定用，滴定前用小橡皮塞塞紧。
瓶塞下面挂一尼龙网制小蓝，用以盛实验材料，整个装置如图所示。
2.称取萌发的小麦或水稻种子15g，装于小蓝内，将小蓝挂在广口瓶内，同时加0.05mol/L Ba(OH)2
溶液25mL于广口瓶内，立即塞紧瓶塞，并用熔化的石蜡封瓶口，防止漏气。
每10min左右，轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3薄膜，以利对CO2的吸收。
3.1h后，小心打开瓶塞，迅速取出小蓝，加入2滴指示剂，立即重新塞紧瓶塞。
然后拨出小橡皮塞，
将滴定管插入小孔中，用1/44mol/L的草酸滴定，直到蓝绿色转变成无色为止。
记录滴定所消耗的草酸溶液的体积(mL)数。
4.另取用沸水煮死的种子为材料，作同样测定，以此作为对照。
5.计算
呼吸强度(CO2，mg/gh)=(V1-V0)/种子鲜重(g)×时间(h)
式中：V0为煮死的种子所耗用草酸的体积(mL)；
V1为发芽的种子所耗用草酸的体积(mL)。
[注意事项]
装置不能漏气。
[实验作业]
比较不同类型种子的呼吸强度。
小篮子法测定植物呼吸速率
小篮子法测定植物呼吸速率生命科学学院09生科基摘要：植物进行呼吸时放出二氧化碳，计算一定的植物样品在单位时间内放出二氧化碳的数量，即为该样品的呼吸速率。
呼吸放出的二氧化碳可用氢氧化钡溶液吸收，然后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余氢氧化钡，从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差即可计算处呼吸过程中释放的二氧化碳量。
关键词：小篮子法呼吸速率实验材料：萌发的青稞种子实验仪器：1.呼吸测定装置（广口瓶一只，加一只三孔橡皮塞，一孔插入装有碱石灰的漏斗，漏斗口塞棉花，将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上，能吸收进入瓶中的CO2，另一小孔供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧；第三孔插入温度计，记录测定时的温度。
瓶盖下面装一小钩，以悬挂小筐，供装植物材料用。
）；2.天平；4.酸式滴定管；5.温度计试剂：Ba(OH)2溶液；1/44 mol/L草酸溶液；0.05 mol/L-1Ba (OH)2溶液(密封保存) ；酚酞指示剂；1、选取2份萌发中的青稞种子每份约10g，一份放入沸水中煮10分钟；另选取一洁净干燥广口瓶，通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml，加入2滴酚酞试剂。
塞紧小橡皮塞，摇动广口瓶几分钟，使瓶内CO2 充分吸收。
待瓶内CO2吸收后，拔出小橡皮塞，把酸式滴定管插入小孔中，用草酸滴定，至红色刚刚消失为止。
记下草酸溶液用量的毫升数，即为空白滴定值。
2、洁净干燥广口瓶一个，瓶口瓶用打有三孔的橡皮塞塞紧，一孔插一盛碱石灰的干燥管（下端用棉花堵口），使呼吸过程中能进入无CO2的空气，一孔插温度计，另一孔直径约1cm，供滴定用，。
平时用一小橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝纱小篮，以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。
3.、加Ba（OH）2溶液20ml，同时将第一份未煮过的10g种子装入小篮子中，挂于橡皮塞下，塞紧瓶塞，开始记录时间，经过1h，其间轻轻摇动数次，使溶液表面的BaCO3薄膜破坏，有利于充分吸收CO2。
植物生理学实验
叶绿素的卟啉环
叶绿素分子头部的金属卟啉环中心均为Mg2+。 在弱酸作用下，叶绿素分子中的镁可被H + 取
代而形成褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则可形 成绿色的铜代叶绿素。 铜代叶绿素很稳定，在光下不易被破坏，故常 用此法制做植物的原色标本。
（三）叶绿素的光学性质
叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定 的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。
二、植物生理学实验的目录
实验一 种子生活力的快速测定--------------------------4学时 实验二 小蓝子法测定植物的呼吸速率-------------------4学时 实验三 叶绿素a、b含量的测定---------------------------4学时 实验四 植物抗逆性的鉴定（电导仪法、丙二醛含量的测定、植物
实验一 植物种子生活力的快速测定 (TTC法、染料染色法)
[实验步骤]
一、氯化三苯四氮唑法（TTC法） 1、原理
凡是生活细胞，就有新陈代谢。渗入生活细胞的无色的TTC能被脱氢辅酶（NADH2或NADPH2）上 的氢还原成红色产物（TTF），肉眼可辨。 2、材料：玉米、小麦（吸胀种子） 3、方法：100粒种子，沿中心线纵切为二，做如下处理： 100半粒
4、叶绿素提取液荧光现象观察
➢ 取试管3： ➢ 从与入射光垂直的方向观
察； ➢ 再在透射光方向观察叶绿
体色素溶液的颜色； ➢ 记录叶绿素体色素溶液颜
色有何不同 ，分析原因。
5、铜代叶绿素反应
向试管4中逐滴加入浓盐酸，并不断摇匀，至颜色变化， 观察并记录现象；
向变色后的叶绿素溶液中加入少量醋酸铜，并在酒精灯上 缓缓加热，观察并记录颜色的变化。
[实验结果分析]
试验四植物呼吸速率的测定
实验五、植物呼吸速率 的测定——小篮子法
南京师范大学生命科学学院
一、实验目的与要求
• 掌握小篮子法测定植物种子呼吸速率的原 理与步骤； • 比较不同萌发阶段绿豆种子的呼吸速率。
二、实验原理
1、植物的呼吸作用 • 定义：是植物体吸收氧气，将有机物
转化成二氧化碳和水并释放能量的过 程。
• 葡萄糖+6O2 6CO2 +6H2O+能量 • 意义： 代谢的中心 有机物转化的枢纽 能量的主要供应渠道
2、测定呼吸速率的常用方法
• 红外线CO2气体分析仪(IRGA) CO2可以吸收特定波段的红外辐射。当被检 CO2气体通过IRGA的气室时，可使红外辐射减少 或增加，且变化幅度取决于CO2的浓度。这种变化 可被IRGA的检测器所检定，且以电讯号的形式输 出，由记录仪所记录。
•氧电极法Leabharlann 3、小篮子法密闭容器中加入一定 量碱液 [ 一般用 Ba(OH)2] ， 并悬挂植物材料，则植 物材料呼吸放出的 CO2 可为容器中Ba(OH)2所吸 收，然后用草酸滴定剩 余的Ba(OH)2，从空白和 样品二者消耗的草酸溶 液之差，可计算出呼吸 释放的CO2量，
具体反应式：
Ba(OH)2+CO2 Ba(OH)2+H2C2O4
• 以酚酞指示滴定终点。
BaCO3 +H2O BaC2O4 +2H2O
• 1mL的1/44mol/L草酸溶液中的草酸与1mg的CO2等摩尔 数。 • 空白和样品二者消耗的草酸溶液的mL数差值 = Ba(OH)2溶液吸收的CO2 mg数 = 种子呼吸作用释放的CO2 mg数
三、实验材料与试剂
•材料 浸种和催芽不同时间的小麦或绿豆种子； •试剂 0.05mol/L的Ba(OH)2； 1/44mol/L的草酸； 酚酞指示剂。
植物呼吸强度的测定
中国海洋大学实验报告2015年11月17号姓名：白洁专业年级： 2014级生物科学学号： 14050011001同组者：高远高学雨课程：植物生理学实验题目：呼吸酶的简易测定法一、实验目的学习植物呼吸作用的另一种测定方法,掌握用小篮子法测定植物的呼吸作用速率. 二、实验原理植物进行呼吸时放出CO2 ，测定一定的植物材料在单位时间内放出的的量CO2 ，即可测知该植物材料的呼吸强度。
测定植物释放CO2的量，可利用Ba(OH) 2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2 ，然后再用草酸溶液滴定剩余的Ba(OH)2 ，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，既可算出呼吸过程释放的CO2量。
三、仪器试剂1.器材：广口瓶呼吸测定装置、托盘天平、碱式滴定管、温度计。
2. 试剂：1）草酸溶液2）饱和氢氧化钡溶液3）酚酞指示剂3. 实验材料：刚萌发的小麦种子四、实验步骤1、取250mL广口瓶4个，用橡皮塞密封，塞下挂一尼龙窗纱制作的小篮，用于盛实验材料。
装置如右图：2、称取刚萌发的小麦种子5克两份，分别装入小篮内，将小篮子分别挂在已加有饱和Ba（OH）2溶液10mL的广口瓶内，立即塞紧瓶塞，防止漏气。
每隔10分钟轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3 薄膜，以利于CO2 的吸收，反应半小时。
小心打开瓶塞迅速取出小篮,加入1～2滴酚酞指示剂,用草酸溶液滴定.直到红色消失为止,记录滴定用去的草酸溶液的体积。
3、另称取刚萌发的小麦5g两份，分别装入小篮内，放入加有一定体积水的250mL烧杯中，在电炉上加热煮沸10分钟，冷却后，将小篮子分别挂在已加有饱和的Ba（OH）2 溶液10mL的广口瓶内，按上述步骤进行测定，以此作为空白对照。
五、数据处理六、思考题1.为什么要用煮死的幼苗来做空白试验用煮死的种子做空白对照试验是为了减小环境误差2.请列举出其他的植物呼吸速率的测定方法并评价它们的优缺点水生植物可利用溶解氧浓度测定判断呼吸速率，这是因为水中CO2浓度测定不易，而水中氧浓度测定较简单。
植物生理学实验考试试题 (1)
植物生理学实验考试试题一、名词解释：1、标准曲线：用标准溶液制成的曲线。
先配制一系列不同浓度的标准溶液, 在溶液吸收最大波长下, 逐一测定吸光度,然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标作图, 若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律, 必然得到一条通过原点的直线, 即标准曲线。
4、氮素代谢：氮素及含氮的活体物质的同化异化和排泄，总称为氮素代谢。
5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶类总称。
6、真空渗入：指将叶片打孔放入注射器中，加水浸没，排出空气后用手指堵住前端小孔，同时把活塞向外抽拉，即可造成减压而排出组织中的空气，轻放活塞，水液即进入组织的方法。
7、离心技术：是根据物质颗粒在一个离心场中的沉降行为而发展起来的。
它是分离细胞器和生物分子大分子物质必备的手段之一，也是测定某些纯品物质的部分性质的一种方法。
8、电泳：各种生物大分子在一定pH 条件下，可以解离成带电荷的颗粒，这种带电颗粒在电场的作用下向相反电极移动的现象称为电泳。
9、同工酶：凡能催化同一种化学反应但其分子结构和带电性质不同的一组酶称为同工酶10、迁移率：指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。
11、聚丙烯酰胺凝胶：是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。
20、超氧化物歧化酶（SOD）：普遍存在动植物体内的一种清除超氧阴离子自由基Ｏ2 的酶。
21、硝酸还原还原酶：是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸。
22、诱导酶：又称适应酶，指植物体内本来不含有，但在特定外来物质的诱导下诱导生成的酶。
如硝酸还原酶可为NO3-所诱导生成。
二、填空：1、测定植物可溶性蛋白质含量时，绘制标准曲线是标准蛋白质浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标。
2、常用的测定植物可溶性蛋白质含量的方法有：Folin-酚试剂法(Lowry 法) 、双缩脲法、考马斯亮蓝法和紫外吸收法。
实验五、植物呼吸速率的测定
具体反应式：
Ba(OH)2+CO2 Ba(OH)2+H2C2O4
• 以酚酞指示滴定终点。
BaCO3 +H2O BaC2O4 +2H2O
• 1mL的1/44mol/L草酸溶液中的草酸与1mg的CO2等摩尔 数。
• 空白和样品二者消耗的草酸溶液的mL数差值
= Ba(OH)2溶液吸收的CO2 mg数 = 种子呼吸作用释放的CO2 mg数
=(V1-V2)/(W× t)
六、思考题
1. 在本实验呼吸测定怎样排除不应有的干扰因素？ 2. 在实验过程中为什么要轻摇广口瓶数次？
3. 就计算公式而言，为什么草酸的用量可代表种子呼 吸放出的CO2的量？
4. 草酸（1/44 mol/L）滴定Ba(OH)2 (0.05 mol/L)，酚 酞作指示剂，溶液由紫色变成无色，滴定至终点后， 马上颜色又由无色变成紫色，原因是什么？
三、实验材料与试剂
•材料 浸种和催芽不同时间的小麦或绿豆种子；
•试剂 0.05mol/L的Ba(OH)2； 1/44mol/L的草酸； 酚酞指示剂。
四、实验步骤
1. 取具玻璃塞和橡皮塞的500mL广口瓶各1只，分别编 号1#、2#；
种子
1#
2#
•实验装置图
2. 称取10g不同萌发阶段的种子，以纱布包 裹，悬挂在橡皮塞下方；
5. 白天在实验室测定植物茎叶的呼吸速率会受到什么 影响？如何解决？
6. 如果实验材料选择的是不同萌发阶段的小麦种子及 幼芽，哪一阶段的呼吸速率最大？
• 葡萄糖+6O2
6CO2 +6H2O+能量
• 意义： 代谢的中心
有机物转化的枢纽
能量的主要供应渠道
植物呼吸强度的测定
中国海洋大学实验报告2015年11月17号姓名：白洁专业年级： 2014级生物科学学号： 14050011001同组者：高远高学雨课程：植物生理学实验题目：呼吸酶的简易测定法一、实验目的学习植物呼吸作用的另一种测定方法,掌握用小篮子法测定植物的呼吸作用速率. 二、实验原理植物进行呼吸时放出CO2 ，测定一定的植物材料在单位时间内放出的的量CO2 ，即可测知该植物材料的呼吸强度。
测定植物释放CO2的量，可利用Ba(OH) 2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2 ，然后再用草酸溶液滴定剩余的Ba(OH)2 ，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，既可算出呼吸过程释放的CO2量。
三、仪器试剂1.器材：广口瓶呼吸测定装置、托盘天平、碱式滴定管、温度计。
2. 试剂：1）草酸溶液2）饱和氢氧化钡溶液3）酚酞指示剂3. 实验材料：刚萌发的小麦种子四、实验步骤1、取250mL广口瓶4个，用橡皮塞密封，塞下挂一尼龙窗纱制作的小篮，用于盛实验材料。
装置如右图：2、称取刚萌发的小麦种子5克两份，分别装入小篮内，将小篮子分别挂在已加有饱和Ba（OH）2溶液10mL的广口瓶内，立即塞紧瓶塞，防止漏气。
每隔10分钟轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3 薄膜，以利于CO2 的吸收，反应半小时。
小心打开瓶塞迅速取出小篮,加入1～2滴酚酞指示剂,用草酸溶液滴定.直到红色消失为止,记录滴定用去的草酸溶液的体积。
3、另称取刚萌发的小麦5g两份，分别装入小篮内，放入加有一定体积水的250mL烧杯中，在电炉上加热煮沸10分钟，冷却后，将小篮子分别挂在已加有饱和的Ba（OH）2 溶液10mL的广口瓶内，按上述步骤进行测定，以此作为空白对照。
五、数据处理六、思考题1.为什么要用煮死的幼苗来做空白试验用煮死的种子做空白对照试验是为了减小环境误差2.请列举出其他的植物呼吸速率的测定方法并评价它们的优缺点水生植物可利用溶解氧浓度测定判断呼吸速率，这是因为水中CO2浓度测定不易，而水中氧浓度测定较简单。
呼吸
三、实验器材
材料：蕃茄幼苗。
仪器：培养瓶（500ml黑色塑料瓶）、脱脂棉、烧杯 、刻度吸管、量筒。
试剂：各种无机盐（硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、 硫酸钾、硫酸钠、磷酸二氢钠、硝酸钠、硝酸钙、氯 化钙、硫酸亚铁、硼酸、氯化锰、硫酸铜、硫酸锌、 钼酸、盐酸；乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）。
植物呼吸速率的测定 ---小篮子法
验证性实验 （3学时）
一、实验目的
了解植物呼吸速率的大小因植物类型、组织种类、 生育期的差异而不同，也受着外界环境的影响。 掌握测定呼吸作用的酸碱滴定法。
二、实验原理
呼吸强度可用单位重量的植物材料在单位时间内所 释放的CO2mg数来表示。呼吸放出的CO2被Ba（OH）2 吸收生成BaCO3沉淀，用草酸滴定剩余的Ba（OH）2， 并与空白滴定相比，根据草酸实际用量之差即可求 出被测物的呼吸强度。
了解溶液培养技术（水培法）在理论、生产上的实 际应用。 理解水培法的原理。
证明氮、磷、钾、钙、镁、铁等元素对植物生长发 育的重要性。
二、实验原理
植物必须吸收某些必要的矿质元素才能保证其正常 的生长发育。若缺少某一必要元素，便表现出特异 的缺素症状。将这些必要元素用适当的无机盐配成 溶液供给植物就能使植物正常生长发育，这种方法 称为溶液培养。利用这种方法，所用元素的种类及 用量都可以人为地控制。若要了解某些元素缺乏所 引起的生理病症，就可以从培养液中减去该元素， 然后培养植物，并在其生长发育过程中进行观察。
四、实验步骤
1. 配制大量元素和微量元素贮备液：使用蒸馏水 按表1和表2配制。
表1 大量素配制表 表2 微量素配制表
小篮子法测定呼吸速率
小篮子法测定呼吸速率【实验目的】1.呼吸作用是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。
常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。
2.有氧呼吸的方程式: C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O3.测定CO2 释放量的方法: 滴定法、红外线CO2分析仪法4.测定O2吸收量的方法: 氧电极法【实验原理】在广口瓶中，放入一定量的Ba(OH)2溶液，用其吸收植物材料呼吸过程中释放的CO2。
然后用草酸溶液滴定剩余碱量，由空白和样品二者消耗草酸溶液之差，计算出呼吸过程中释放的CO2量。
反应如下：Ba(OH)2 + CO2BaCO3＋H2O（1）Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 BaC2O4＋2H2O（2）(空白滴定值-样品滴定值)×mg CO2 呼吸速率=植物组织鲜重×时间呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2) · g-1 FW · h-1，mg CO2·ml-1草酸＝1【实验材料】萌发的小麦和大麦种子实验仪器：1、广口瓶测呼吸装置：广口瓶一只，加一只三孔橡皮塞，一孔插入装有碱石灰的漏斗，漏斗口塞棉花，将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上，能吸收进入瓶中的CO2，另一小孔供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧；第三孔插入温度计，记录测定时的温度。
瓶盖下面装一小钩，以悬挂小筐，供装植物材料用。
2. 酸式滴定管：装草酸实验试剂：1.Ba(OH)2溶液2.1/44 mol/L草酸溶液：每ml溶液相当于1mg的CO23.0.05 mol/L-1Ba (OH)2溶液(密封保存) ，溶液配好后先过滤到试剂瓶中，塞紧试剂瓶，尽量减少溶液曝露在空气中的时间，以减少BaCO3 沉淀的产生4.酚酞指示剂：1g 酚酞溶于100 ml 95%乙醇中【实验步骤】1、空白滴定：a．通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml，加入2滴酚酞试剂。
b．塞紧小橡皮塞，摇动广口瓶几分钟，使瓶内CO2 充分吸收。
植物生理学实验：实验三 呼吸强度的测定(小篮子法)
实验步骤
1、装配“广口瓶呼吸测定装置”：取500ml广口瓶一个， 瓶口用橡皮塞塞紧，三孔分别插入盛放石灰的干燥管、 温度计和小橡皮塞。瓶塞下面挂一纱布小篮。
2、空白滴定：在瓶中准确加入Ba(OH)2溶液20mL，立即塞 紧橡皮塞（不带小篮子）。充分摇动瓶子2分钟，待瓶 中CO2全部被吸收后，拔出小橡皮塞加入酚酞2滴，把滴 定管插入孔中，用草酸溶液进行空白滴定，直至红色刚 刚消失为止。记录消耗的草酸量（mL)。
实验目的；实验材料、仪器设备与试剂
目的：掌握小篮子法测定呼吸强度的原理与方法。 仪器：广口瓶、橡皮瓶塞、温度计、酸式滴定管、干
燥棒、纱布（小篮子）。 试剂：0.05mol/L Ba(OH)2，1/44mol/L草酸溶液（每毫
升草酸相当于1mg CO2），酚酞指示液 ；凡士林。 材料：萌发的水稻种子。
实验结果计算与分析
呼吸强度（CO2，mg/g.h）=
空白滴定值（mL）-正式滴定值(mL) 种子鲜重（克）×时间（小时）
注意事项
1. 注意不要让溶液沾到小篮子上 2. 塞紧瓶塞动作要快 3. 防止口中呼出的气体进入瓶内
作业
计算水稻种子萌发后的呼吸强度
实验步骤
3、呼吸作用CO2滴定： 倒出废液，冲洗后倒入Ba(OH)2溶液20mL，同时称取水
稻种子10克，装入小篮子，挂于橡皮塞下，并塞紧塞子 ，开始记录时间。 经过30分钟（期间轻轻摇动数次，使溶液表面的BaCO3 薄膜被破坏，以利于CO2充分的吸收）。到预定时间， 轻轻开塞，把小篮子迅速取下，立即重新塞紧。 充分摇动2分钟，使瓶中CO2全被吸收，然后拨出橡皮塞 ，加入酚酞2滴，用草酸滴定。记录消耗的草酸溶液量 （mL）。
植物生理学实验 实验三 呼吸强出CO2，计算一定的植物样品在单位 时间内放出的CO2的数量，即为该样品的呼吸速率。