癫痫持续发作时间与大鼠海马苔藓纤维发芽程度及自发性痫性发作的关系
海马苔藓纤维出芽与癫痫_吴彬
海马苔藓纤维出芽与癫痫Mossy fiber sprouting and epilepsy吴彬1综述，孙红斌2△审校WU Bin，SUN Hong-bin（1.泸州医学院，四川泸州646000；2.四川省医学院科学院·四川省人民医院神经内科，四川成都610072）【摘要】海马苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting，MFS）是指齿状回颗粒细胞轴突异常出芽，与内分子层颗粒细胞形成突触。
它由海马神经元丢失及癫痫发作的兴奋毒性导致，牵涉导向分子、神经营养因子及神经递质等多种分子，可增高癫痫发作的敏感性，被认为与癫痫反复自发性发作（spontaneous recurrent seizures，SRS）密切相关。
【关键词】癫痫；苔藓纤维出芽；突触重塑【中图分类号】R742.102【文献标识码】B【文章编号】1672-6170（2012）01-0133-03癫痫的病理表现包括神经细胞脱失、胶质细胞增生和突触重塑，其中突触重塑是癫痫形成的主要病理基础。
海马苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting，MFS）在癫痫的突触重塑中研究较多。
本文就海马MFS的形态学特征、诱发因素、出芽机理及其与癫痫发作之间的关系作一综述。
1MFS的形态学特征海马苔藓纤维是齿状回颗粒细胞发出的轴突，它们至门区中间神经元及CA3区锥体细胞，与其树突建立突触联系，而CA3区锥体细胞和门区神经元（主要是苔藓细胞）的连合-联络纤维投射至齿状回内分子层。
正常情况下，苔藓纤维的投射具有方向性，即只向同一片层的门区及CA3区投射，既不折返回齿状回分子层，也不向邻近的片层纵向延伸。
但在颞叶癫痫患者的脑组织及多种颞叶癫痫动物模型中却发现，CA3区锥体细胞和门区神经元受到损伤后，内分子层失神经传入，苔藓纤维的突触断裂，转而异常出芽形成侧枝回返入内分子层并与该层颗粒细胞近侧树突形成异位突触联系［1］。
这些突触大部分呈非对称性，多终止于树突棘，为兴奋性突触，从而形成海马内回返兴奋性环路，导致癫痫的长期自发性发作（SRS）。
丙戊酸对癫痫后ERK12介导的苔藓纤维出芽干预的实验研究的开题报告
丙戊酸对癫痫后ERK12介导的苔藓纤维出芽干预的
实验研究的开题报告
一、研究背景和意义
癫痫是一种神经系统疾病，其症状表现为反复发生的脑电活动异常引起的癫痫发作。
苔藓纤维出芽是癫痫后脑组织异常重铸的一个过程，其过程涉及到多种信号通路的调控。
ERK1/2信号通路在癫痫后的苔藓纤维出芽中发挥了重要作用，因此该信号通路被认为是苔藓纤维出芽的一个重要调控分子。
丙戊酸是一种抗癫痫药物，其通过抑制谷氨酸的神经递质作用来治疗癫痫。
目前已有文献报道丙戊酸可以通过抑制ERK1/2信号通路来抑制苔藓纤维出芽的形成。
因此，本研究旨在探究丙戊酸对癫痫后ERK1/2介导的苔藓纤维出芽的干预作用，为临床治疗癫痫提供新的思路和方法。
二、研究内容和方法
1. 建立癫痫模型：使用电刺激法建立大鼠癫痫模型。
2. 观察苔藓纤维出芽：HE染色方法观察癫痫后大鼠海马区苔藓纤维出芽的形态学变化。
3. 检测ERK1/2信号通路活性：Western blotting方法检测癫痫后大鼠海马区ERK1/2信号通路的活性。
4. 丙戊酸干预：将大鼠分为癫痫组和丙戊酸组。
癫痫组注射等量生理盐水，丙戊酸组注射相应剂量的丙戊酸。
比较两组大鼠海马区苔藓纤维出芽的数量及其形态学变化，并检测ERK1/2信号通路的活性差异。
三、预期结果和意义
预计丙戊酸可以干预癫痫后ERK1/2介导的苔藓纤维出芽过程，并通过抑制ERK1/2信号通路来发挥治疗作用，从而减轻癫痫引起的海马区神经元损伤和认知功能障碍等不良症状。
本研究的成果有助于深入了解癫
痫后苔藓纤维出芽的分子机制，为研发新的抗癫痫药物提供了新的思路和方法。
Semaphorin-3A与苔藓纤维出芽在毛果芸香碱致痫大鼠中的改变及意义
杜春玲 ， 学军 。 邓 王 芳 ， 熊兰彩 ， 圣刚 孙
（ 中科 技 大 学 同济 医 学 院 附 属协 和 院 神 经 内科 ，湖 北 武 汉 ４ ０２ ） 华 ３０ ２
摘要 ： 目的
探讨 海 马 Ｓ ｍａ ｈ ｒ Ａ（ｅ ３ 与 苔 藓 纤维 出 芽 （ Ｓ 在 癫 痫 发 病 机 制 中 的作 用 。 方 法 通 ｅ ｐ ｏｉ ３ Ｓｍａ Ａ） ｎ ＭＦ ）
ｄａ ｓ． ７ ｄ ｓ，３ ｗ ｅ ｋｓａ ｅ ｋｓ Ｔｈｅｅ ｒ ｃ ｉ ｓｆ ｏ ｈ ｐ ｃ ｍ ｐ ｌｔｓ ｕｅ ｅ ｅｕｓ ｄ ｔ ｅ ｅ ｔ＊ ｘｐｒ ｓ ｉ ｙ ａｙ ｅ ｎｄ ４ ｗ ｅ ． ｘｔａ ｔｏｎ ｒ ｍ ｉ ｐｏ ａ ａ ｉｓ ｓｗ ｒ ｅ ｏ ｄ ｔ ｃ ｈｅｅ ｅ ｓｏｎ ｏｆＳｅ ａ ｍ ３Ａ ｅ ｔ ｎ ｂ ｏ ｔｎｇ Ｍ ｅ ｎｗ ｈ ｌ ｎ ｏ Ｔ ｉ ｍ ｉｖ ｒ ｓ ａｎｉ ｈｅ ｈｉ ｏｃ ｍ ｐｕｓ ｂｙ ｗ ｓｅｒ ｌ ｔｉ ． ａ ｉｅ， ｅ ｍ ｓｌ ｅ ｔ ｉ ｎｇ ｏｆｔ ｐｐ ａ ｗａ ｕ ｅ ｔ ｓ ｒ ｓ ｓ ｄ ｏ ｏｂ ｅ ｖｅ Ｍ ＦＳ． Ｒｅ ｕ ｔ Ｃｏ ｐ ｉ ｗｉｈ ａ ａ ｆ ｏ ｓ ｌｓ ｍ ａｒｎｇ ｔ ｄ ｔ ｓ ｒ ｍ ｔ ｃ ｎｔｏｌ ｒ ｈｅ ｏ ｒ ｇ ｏｕｐ， ｔ ｐｒ ｔ ｉ ｌｖ ｌ ｏ Ｓ ｍ ａ ｈｅ ｏ ｅ ｎ ｅ ｅ ｓ ｆ ｅ ３Ａ ｗｅ ｅ ｎ ｒ ａｓ ｄ ｒ ｉｃ ｅ ｅ ｓｇｎｉｉａ ｌ ｙ ｎ ｓ ｉｕｒ ｏｕ ｉ ｆｃ ｎｔｙ ａｔ７ ｄａ ｓｉ ｅｚ ｅｇｒ ｐ． Ｈ ｏｗｅ ｅ ｔ１ ａ ５ ｄａ ｓ．３ ｗｅ ｋｓａ ｅ ｋ ｖ ｒａ ｄ ｙ ｙ ｅ ｎｄ４ ｗ ｅ ｓ，ｔ ｒ ａ ｘ ｅ ｓｏｎ ｈｅ ｅｗ ｓｎｏ ｅ ｐｒ ｓ ｉ ｏｆＳｅ ａ ｍ ３Ａ． Ｉ ｈ ｅｚ ｒ ｏｕ ｎ ｔ ｅ ｓ ｉｕ ｅｇｒ ｐ，ｔ ｒ ａ ＦＳ ａ ｙ ａ ｙ ． Ａ ｍ ａｌａ ｏｕ ｆＭ ＦＳ ａ ｂｓ ｒ ｅ ｈｅ ｅ ｗ ｓｎｏ Ｍ ｔ１ ｄａ ｎｄ ５ ｄａ ｓ ｓ ｌ ｍ ｎｔｏ ｗ ｓｏ ｅ ｖ ｄ ｉ ｈｅ ｉ ｅ ｏｅ ｕｌｒ ｌｙ ｒｏｆｔ ｅ ｔ ｔ ｎ ｔ ｎｎ ｒ ｍ ｌｃ ａ ａ ｅ ｈｅ ｄ ｎ ａ ｅｇｙｒ ｔ７ ａ ． Ｍ ＦＳ ｗａ ｎ ｔ ｅ ｍ ｏｌｃ ｌ ｒｌ ｙ ｒｏｆｔ ｅ ａ ｅ ｇ ｕｓ ｕｓａ ｄ ｙｓ ｓ ｉ ｈ ｅ ｕ ａ ａ ｅ ｈｅ ｄ ｎｔ ｔ ｙｒ ａ ｔ ｒ３ ｗ ｅ ｋｓｉ ｅｚ ｅ ｇ ｏ ． Ｔ ｉ ｍ ｃ ｒ ｓ ｏ ｈ ｅｚ ｒ ｒ ｕｐ ｗｅｒ ｇｈ ｒｔ ｎ ｃ ｎｔｏｌｇ ｏ ｆｅ ｅ ｎ ｓ ｉｕｒ ｒ ｕｐ ｍ ｓ ｏ ｅ ｆｔ ｅ ｓ ｉｕ ｅｇ ｏ ｅｈｉ ｅ ｈａ ｏ ｒ ｒ ｕｐ （ 一 １ ６７ Ｙ ２． ５． Ｐ 一 ０． ３）． Ｃｏ ｃｕｓｏｎ Ｃｈａ ｇｅ Ｓｅ ａ Ａ ｗｉｈ ０１ ｎｌ ｉ ｓ ｎ ｏｆ ｍ ３ ｔ Ｍ ＦＳ ｍ ａ ｂ ａ ｉ ｐｏ ｔｎｔ ａ ｔ ｉ ｔ ｅ ａ ｈｏ ｎ ｓｓ ｙ ｅ ｎ ｍ ｒａ ｆ ｃｏｒ ｎ ｈ ｐ ｔ ｇｅ ｅ ｉ ｏｆ ｅ ｌｐｓ ｐｉ ｅ ｙ．
中国癫痫诊疗指南癫痫持续状态
结合新型科技手段，如基因组学、蛋白质 组学、神经影像学等，将有助于更深入地 揭示癫痫持续状态的发生机制。
针对癫痫持续状态患者的认知、行 为和社会适应能力等方面的干预措 施和治疗手段需要进一步探索和实 践。
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与其他神经系统疾病的鉴别诊断
癫痫持续状态还需要与其他神经系统疾病进行鉴别诊断，如脑血管疾病、颅内感 染等。同样需要根据患者的病史、临床表现和辅助检查结果进行鉴别。
04
癫痫持续状态的治疗与护理
药物治疗
01
药物治疗是癫痫持续状态的首选治疗手段，目的是尽快终止癫痫发作，减少神 经元损伤和死亡。
02
常用药物包括抗癫痫药物和促代谢药物。抗癫痫药物通过抑制神经元异常放电 达到控制癫痫发作的目的，而促代谢药物则通过促进代谢、保护神经元等作用 减轻癫痫症状。
护理与康复
癫痫持续状态患者需要得到良好的护理和康复，以减轻症状、 提高生活质量。
护理方面包括安全护理、心理护理等。安全护理需防止患者因 发作导致的意外伤害，如摔伤、咬伤等；心理护理则需关注患 者的心理健康，给予支持和鼓励。
康复方面包括认知功能训练、生活技能训练等。认知功能训练 可帮助患者提高记忆、注意等认知能力；生活技能训练则可帮 助患者掌握日常生活技能，提高生活质量。
发病率
约为18.1/10万，患病率约为7‰。
危险因素
包括原发性癫痫、未接受正规抗癫痫药物治疗、女性、青少年等。
02
癫痫持续状态的病因与病理生理
病因
原发性癫痫
大脑神经元异常放电，导致癫 痫发作。
继发性癫痫
由其他疾病或脑损伤引起的癫痫 发作，如脑炎、脑外伤、脑肿瘤 等。
癫痫发作的昼夜节律分布规
癫痫发作的昼夜节律分布规发表时间：2014-08-18T09:43:10.233Z 来源：《医药前沿》2014年第17期供稿作者：钟金花1 2 廖建湘2 [导读] 全球约有5千万癫痫患者，目前即使有抗癫痫药的治疗，但仍有1/3的癫痫病人发作未能得到控制。
钟金花1 2 廖建湘2（1遵义医学院遵义贵州 563000；2深圳市儿童医院广东深圳 518035）【摘要】癫痫的发病机制仍未明确，是否与人体生物钟节律以及人体激素分泌的规律有关，需进一步探讨。
癫痫发作有24小时节律性，主要决定于病灶起源定位。
婴儿痉挛症，其痉挛发作多发生在觉醒状态和白天，时间主要集中在6:00-9:00，9:00-12:00及15:00-18:00；局灶性癫痫发作，如颞叶癫痫发作集中于21:00-9:00，额叶癫痫发作集中于24:00-6:00，顶叶癫痫发作于6:00-9:00，枕叶癫痫发作于9:00-12:00及15:00-18:00；痴笑性、失张力、肌阵挛性癫痫发作多发生在觉醒期或白天，而自动症及过度运动癫痫发作多发生在睡眠期或夜间。
全面性癫痫发作，如强直发作和强直阵挛性发作多发生在睡眠期，失神癫痫多发作于清醒期，而其它全面性症状性发作类型多发生在觉醒期。
机制与体内深部体温、褪黑激素及皮质醇分泌有关。
【关键词】癫痫婴儿痉挛症昼夜节律褪黑激素诊断治疗【中图分类号】R742.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）17-0383-03 据报道，全球约有5千万癫痫患者，目前即使有抗癫痫药的治疗，但仍有1/3的癫痫病人发作未能得到控制[1]。
我国癫痫的患病率约为3.6～7.0‰[2]，而癫痫发作并不是完全没有规律的，其昼夜节律早在3000多年前就有人认识到了，1885年Gowers[3]首次描述癫痫发作的时间分布规律，并将癫痫患者分类：白天发作型，夜间发作型，无规律型。
Wytske等[4]研究结果显示某些类型的癫痫发作确实有昼夜节律的趋势。
癫痫的规范化诊治-2019年华医网继续教育答案
2019年华医网继续教育答案-128-癫痫的规范化诊治备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项
(一)脑电图基本知识
1、（）对于癫痫失神发作是最为有效的诱发试验，可诱发出典型的3Hz棘慢波
A、睁闭眼试验
B、过度换气诱发试验[正确答案]
C、闪光刺激诱发试验
D、睡眠诱发试验
E、减停抗癫痫药物诱发试验
2、3CPS是一个具有重要意义的脑电图诊断依据，3CPS发放频率提示（）
A、L-G综合征
B、肌阵挛癫痫
C、大田原综合征
D、失神癫痫[正确答案]
E、West综合征
3、清醒期EEG主要由（）构成
A、α波和快波[正确答案]
B、θ波
C、δ波
D、θ波和δ波
E、纺锤波
4、下述哪个频带不在人类脑电活动的频率之内（）
A、δ频带
B、β频带
C、γ频带[正确答案]
D、α频带
E、θ频带
5、下述检查方法可用于诊断脑功能的是（）。
癫痫动物模型
癫痫的动物模型一、简介癫痫症是最常见的神经系统疾病之一，其患病率在一般人口中每1000人约有5人。
根据世界卫生组织的定义，癫痫症是由先天或后天不同因素所引起的慢性脑疾病，其特征是反复性惊厥发作，伴随不同的临床和脑电图的表现。
因此，癫痫症(epilepsy)是一反复发作的临床症候群，而因一过性异常的一次脑细胞放电所引起的神经系统功能失常称为惊厥(Seizure)，惊厥是临床的行为活动，一次惊厥发作不一定表示有癫痫症。
目前，国内所用的癫痫分类方法是以国际抗癫痫联盟(ILAE)1981年和1985年的分类法。
但为了兼顾临床和实验室研究，本章所讨论的癫痫现象主要根据1981年的分类，此分类法主要以临床表现及EEG为依据将癫痫分为：全身性和部分性癫痫。
迄今研究人类癫痫的发病机理仍主要依靠动物实验，癫痫产生机制的探讨及最新进展亦多直接或间接来于动物模型研究。
目前已有数十种动物模型应用于癫痫研究，选择适宜的实验模型取决于所需解决的问题、所需的癫痫类型，与临床发作的一致性以及是否简单可靠。
因此，选择适当、有价值的癫痫动物模型是有效研究癫痫机制及治疗的捷径。
现已发展并建立了类似临床癫痫类型的多种癫痫模型(表I)，包括整体与离体、脑片与细胞模型，为探讨癫痫形成的机制及观察药物治疗疗效提供了有利的工具。
然而，如何合理、适当地应用这些动物模型是我们进行研究时首先应当考虑的，否则既浪费时间、精力与钱财，又不能得到可靠的结果。
以下分别介绍各种类型癫痫动物模型的利与弊。
表I：癫痫的动物模型1. 急性简单部分性 3. 复杂部分性 6. 脑组织表面致惊剂卡因酸海马脑片青霉素Tetanus toxin 原代分离细胞培养荷包牡丹碱点燃人类神经组织印防已毒 4. 全身强直－阵挛7. 癫痫持续状态士的宁遗传性胆碱能药物光敏狒狒急性电刺激听源性惊厥小鼠去除GABA Totterer 和E1 小鼠新皮层脑片遗传性癫痫易感大鼠2. 慢性简单部分性蒙古沙土鼠皮层埋置金属最大电休克氢氧化铝化学致惊剂钴代谢性derangements钨铁 5. 全身性失神冷冻损伤神经节苷脂抗体注射静脉注射致痫剂二、急性简单部分性癫痫模型这类模型是一组急性皮层损伤所致的惊厥放电。
癫痫大鼠海马组织髓鞘相关蛋白MBP、MAG表达变化及意义
癫痫是神经系统常见疾病 ，我 国约有 １ ０００万 癫 痫 患 者 ，其 中 约 ３０％ 为 难 治 性 癫 痫 ¨Ｊ。研 究 显 示 ，脱髓 鞘或 脱髓 鞘 再 生 障碍 在 癫 痫 的 发病 中具 有 关键作用 。我们的前期研究显示 ，由少突胶 质细胞 （ＯＬ）产 生 的髓 鞘 碱性 蛋 白 （ＭＢＰ）和髓 鞘 相 关 糖 蛋 白（ＭＡＧ）介导的脱髓鞘 或髓鞘再生 障碍与癫痫发 作存 在 一 定 相 关 性 ｌ２ｊ。 但 前 期 研 究 仅 局 限 于 癫 痫 发病后一个时间点的观察 而对髓鞘相关蛋 白在癫 痫发作不 同时期的具体表达情况未进行深入研究。 我们 以癫 痫 大 鼠模 型 为研 究 对 象 ，探 讨髓 鞘 相 关 蛋 白 ＭＢＰ、ＭＡＧ在 癫痫 发 作 不 同 时期 的变化 情 况 ，以 期 为 临床诊 疗提供 理论 依 据 。 １ 材 料与 方法 １．１ 材 料 ＳＰＦ级健康 雄性 １２周龄 ｓＤ大 鼠 ４０只 ， 体质量 ２００－２２０ ｇ，购 自贵州医科大学动物实验 中心。 在温度控制室 内饲养 大 鼠，昼夜各 １２ ｈ，自由进食 、水 。 ＢＬ．４２０Ｓ型生物 多媒体计算机刺激记 录系统 （成都 泰盟 科技有 限公司 ），微型颅骨钻 、大鼠脑立体定位仪 ６８５０５ （深圳瑞 沃德 生命科 技有 限公 司 ），双极漆包镍 铬 电极 （直径 ０．１ ｈｉｍ、尖距 ０．０２５ ｍ／ｎ，上海鼎皋公 司）。ＲＮＡｉ－
（大连 ＴａＫａＲａ公 司）。
．
１．２ 动物分 组 与模 型 制备 采用 随机 数 字 表法 将
大 鼠分 成 正常组 、实验 １组 、实 验 ２组 、假 手 术组 各
１０只。正常组正常饲养。实验 １组 、实验 ２组大鼠
腹腔注 射 １０％ 水合 氯醛麻 醉 ，固定 于 大 鼠脑 立体 定
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·论 著·癫痫持续发作时间与大鼠海马苔藓纤维发芽程度及自发性痫性发作的关系王艺蓉 欧阳青蓉 余巨明 张小东【摘要】 目的 探讨癫痫持续状态（SE）发作时间与致痫大鼠海马苔藓纤维发芽（MFS）程度及自发性痫性发作的关系。
方法 104只雄性成年SD大鼠，随机分为对照组和3个SE实验组，建立氯化锂－重复低剂量匹罗卡品致痫大鼠模型；诱发SE30min（A组）、60min（B组）、90min（C组）后注射水合氯醛终止发作。
各组大鼠自SE终止发作后于相同实验条件下普通饲养45d，观察大鼠行为及脑电图（EEG）的变化，记录自发性痫性发作的发生率。
通过苏木精-伊红染色、Nissl染色和Timm硫化银组织化学染色方法观察各实验组海马MFS情况。
结果 氯化锂－重复低剂量匹罗卡品成功诱导大鼠SE的发生，发作程度均达Ⅳ级以上，EEG类似人类颞叶癫痫。
80%的大鼠癫痫持续状态均发展为自发痫性发作，与SE时间无关。
与对照组相比，实验A、B、C三组双侧海马CA3区均表现MFS（P<0.05）。
实验B组与A、C组相比，CA3区MFS明显增加（P<0.05）。
结论 氯化锂-重复低剂量匹罗卡品可诱导SE，癫痫持续发作60min后终止的大鼠海马CA3区MFS明显增加，SE发作时间与海马MFS程度并不一定呈正相关。
【关键词】 癫痫持续状态；苔藓纤维发芽；自发性痫性发作中图分类号：R742.1 文献标识码：A 文章编号：1006-351X（2019）04-0203-04Relationship between duration of epileptic seizures and mossy fiber sprouting of hippocampal and spontaneous seizures in rats with epilepsy Wang Yirong, Ouyang Qingrong, Yu Juming, Zhang Xiaodong. Department of Neurology , the Affiliated Hospital of North Chuanbei Medical College, Sichuang 637000, ChinaCorresponding author:Zhang Xiaodong, Email: zhangxiaod163@【Abstract】Objective To investigate the relationship between the onset time of status epilepticus （SE） andthe degree of mossy fiber sprouting （MFS） in hippocampal and spontaneous seizures in rats with epilepsy . Method Totally 104 male adult healthy Sprague-Dawley（SD） rats were randomly divided into control group and epilepsycontinuous state model groups to establish epilepsy rat model with lithium chloride-repeated low-dose pilocarpine. Inthe experimental group, the onset of status epilepticus 30 minutes （group A）, 60 minutes （group B） and 90 minutes（group C） was terminated by hydrated chloral injection. The rats in each group were raised for 45 days under the sameexperimental conditions after status epilepticus termination, and the changes of behavior and electroencephalogram（EEG） were observed and the incidence of spontaneous seizures was recorded. The hippocampal mossy fiber sproutingof each experimental group were observed by Hematoxylin-eosin staining, Nissl staining and Timm's silver sulfidehistochemistry staining. Results Lithium chloride-repeated low-dose pirocapine can induce status epilepticus, theextent of Ⅳ level or above, and electroencephalogram is similar to human temporal lobe epilepsy. Eighty percent of therats developed spontaneous epileptic seizures, regardless of the onset time of status epilepticus. Mossy fiber sprouting inCA3 area of bilateral hippocampus in the three groups of experiment A, B and C compared to the control group （P<0.05）.Compared with group A and group B, the mossy fiber sprouting in CA3 area was significantly increased of experimentB （P<0.05）. Conclusion Lithium chloride-repeated low-dose pilocarpine can induce status epilepticus,mossy fiber sprouting in the hippocampal CA3 area of rats terminated after 60 minutes of epileptic seizures increased基金项目：四川省教育厅科研项目重点项目（2005A085）作者单位：637000 四川，川北医学院附属医院神经内科通信作者：张小东，Email：zhangxiaod163@significantly, and the onset time of status epilepticus was not necessarily positively correlated with hippocampal mossy fiber sprouting .【Key words】Status epilepticus; Mossy fiber sprouting; Spontaneous epileptic seizures癫痫是神经系统疾病中的常见疾病。
其中，难治性癫痫约占20%~30%，以颞叶癫痫最常见［1］。
氯化锂-重复低剂量匹鲁卡品大鼠癫痫模型于2001年首次报道［2］，因其明显降低动物的死亡率，是目前国际上公认的研究癫痫持续状态（status epileptieus，SE）和颞叶癫痫的理想模型。
近年，人们发现皮质兴奋性突触环路和苔藓纤维突触重组可能与癫痫发生密切相关［3］。
本研究旨在探讨癫痫发作持续时间与海马苔藓纤维发芽（mossy fiber sprouting，MFS）、自发性痫性发作的关系，为进一步阐明SE相关病理生理机制提供实验依据。
资料与方法1.实验动物及分组选取雄性健康SD大鼠104只，体质量190~260g，由川北医学院实验动物中心提供。
随机分为四组（每组26只）：对照组，癫痫组A、B、C 组（分别在诱发SE30、60、90min后注射水合氯醛终止发作）。
2.实验动物癫痫发作抽搐行为评价Racine分级［4］0级：无反应；Ⅰ级:耳面部抽搐；Ⅱ级：肌阵挛，但无直立位；Ⅲ级：肌阵挛，伴直立位；Ⅳ级：全身强直阵挛发作；Ⅴ级：全身强直阵挛发作，并失去体位控制。
3.氯化锂-重复低剂量匹罗卡品致痫大鼠模型制作A、B、C各组均先腹腔注射氯化锂3mEq·kg-1，19h后再给予腹腔注射匹罗卡品10mg·kg-1，不发作则重复2~4次，每隔30min 1次直至达到发作标准，终止发作均为腹腔注射3.5％水合氯醛（100g·1mL-1鼠重）。
A组大鼠匹鲁卡品急性致痫达Ⅲ级以上并持续30min及以上时终止；B组大鼠在相同标准60min 时终止；C组大鼠在相同标准90min时终止；对照组大鼠腹腔注射相同剂量的生理盐水代替匹鲁卡品。
记录实验组癫痫诱发情况及死亡数。
4.行为学观察急性致痫模型制作成功后，每天于固定时间在行为学观察箱中对实验组大鼠行全天行为学视频录像，观察自发性痫性发作情况及发作的严重程度，时间终点为首次SE发作终止后45d。
5.脑电图（electroencephalogram，EEG）描记分为急性期和慢性期颅内EEG。
1％戊巴比妥（45mg·kg-1）麻醉后，分别在左右两侧颅内额叶皮质下及海马各安放一根电极，鼻根额窦处插入一根为参考电极。
在二道生理记录议上描记脑电活动，每只大鼠持续1h，累计记录时间不少于12h，白天和晚间不同时间点均记录。
6.免疫组织化学染色所有大鼠于45d观察期后全部处死。
行水合氯醛麻醉后经心脏灌注液氯化钠缓冲液，然后灌注4%多聚甲醛磷酸缓冲液。
取含海马结构的2~3mm厚脑块，后固定于4%多聚甲醛磷酸缓冲液中24h，置于30%蔗糖溶液中，沉底后予以包埋剂包埋并以海马为中心行冠状冷冻切片。
行常规苏木精-伊红染色、Nissl染色。
Timm's组化染色［5］染色后于黑暗处孵育60~70min后，经蒸馏水洗、梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固后光镜下观察MFS的情况。
海马CA3区和齿状回锥体层或起层MFS半定量评分标准［6］：0分，无颗粒；1分，偶见稀疏分散的颗粒；2分，少量至中等程度的颗粒；3分，突出的颗粒；4分，有突出的颗粒，且几乎沿CA3区呈连续分布；5分，整个CA3区有连续或近乎连续的稠密的呈层带状的颗粒。