15种植物果胶含量及其甲氧基的测定
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法目的建立植物油中15种多环芳烃的中性氧化铝小柱固相萃取—高效液相色谱检测方法。
方法植物油经正己烷溶解后过中性氧化铝固相萃取小柱净化，Waters PAH 4.6×250mm色谱柱进行分离，乙腈-水梯度洗脱，流速1.5ml/min，进样量10ul，柱温30，荧光检测器检测，外标法定量。
结果15种多环芳烃混合标准溶液在浓度为0.01-0.50ug/mL的范围内，在荧光检测器下呈良好的线性关系，该方法的检出限为0.1-1.5ug/kg之间，样品的加标回收率在62.14%-120.35%之间，RSD在0.91%-4.32%之间。
结论本实验所用方法具有样品前处理简单，检测方法高效快速，灵敏度高，准确性好等优点，能够满足植物油中多种多环芳烃含量的检测。
标签：多环芳烃；植物油；高效液相色谱法；食品安全Abstract：Objective To establish a method for simultaneous determination of 15 PAHs in plant oil by SPE-HPLC.Methods The edible vegetable oil was dissolved in n-hexaneand，cleaned up with neutral alumina SPE cartridges. The 15 PAHs was carried out by waters-PAHs column （4. 6 mm ×250 mm）with a gradient elution using acetonitrile-water as mobile phase at a flow rate of 1. 5 ml /min，the column temperature was 30 ℃，and the injection volume was 10 μl. Detection was carried out by a fluorescence detector with external standard.Results The 15 PAHs solution was a good linear relationship at a concentration within a range of 0.01-0.50ug / mL，The LOD was in the range of 0. 1 ～1.5 μg /kg with average recovery ranging from 62.14% to 120.35%. The RSD was in the range of 0. 91% ～4.32 0%.Conclusions The method had the advantages of simple pretreatment，high sensitivity and accuracy，which could be applied to the determination of the 15 PAHs in plant oil.Keywords：PAHs ；Edible vegetable oil ；HPLC；Food safety多环芳烃是一组由两个或两个以上苯环和稠环链接在一起的芳香族化合物及其衍生物，来源于工业生产、有机物热解或不完全燃烧等，为持久性有机污染物[1]。
《园艺产品贮藏与保鲜》课件——1.2.3园艺产品果胶物质含量的测定
优点 方法稳定可靠。
缺点 操作较繁琐费时，果胶酸钙沉淀中易夹杂其他胶态物质，使本法选择性差。
仪器 布氏漏斗、G2垂融坩埚、抽滤瓶、真空泵。
测定方法 测 定 方 法
样品处理 提取果胶
干燥样品 新鲜样品 水溶性果胶的提取 总果胶的提取
测定
测定方法
样 新鲜 样品
品
称取试样 30-50g
热过滤和热洗涤沉淀
加501mml，ol放／置LC5Hm3CinO是度O为，H 了加降快低过加L溶滤C1a液和mCl的洗o22l黏涤／5ml
速度，并增大杂质的
趁热恒 溶解度，使其易洗去
重滤纸 过滤
加热煮沸5min
（m1-m2）×0.9233
结果计算：X=
×100
m×（25 250）×1
式中：X——果胶物质（以果胶酸计）的含量，g/100g m1——果胶酸钙和滤纸或垂融坩埚质量，g m2——滤纸或垂熔坩埚的质量，g m——样品质量，g 0.9233——由果胶酸钙换算为果胶酸的系数
来源的试样得到的果胶酸钙中钙所占的比例并不相同，从而测得的钙量不能准确 计算出果胶物质的含量，用法受到一定限制。
蒸馏滴定法 蒸馏时有一部分糖醛分解了，使回收率较低，故此法也不常用。
测定方法
重量法
原理 将果胶物质从样品中提取出来，加入氯化钙生成不溶于水的果胶酸钙，测其果胶酸钙质 量或换算成果胶酸的质量。
充分混合，室温 放置30min
流动水冷却至室温
在530nm下
以0号为空白 测定吸光度
果胶提取液
稀释
沸水浴加热 10min
混合，冷却
绘制标准工作曲线
含半乳糖醛 酸约 10-70ug ml
高甲氧基果胶和低甲氧基果胶
高甲氧基果胶和低甲氧基果胶
高甲氧基果胶是一种由植物淀粉与葡萄糖缩合而成的特殊分子结构，具有高分子量、晶态稳定、渗透性好、易水溶性、高稠度的特点，具有良好的保湿特性和乳状稳定性能，因而在水性护肤品中被普遍用于抗衰老、润肤等皮肤照顾几方面的活性作用。
而低甲氧基果胶是一种由植物醣体经过有机合成来衍生出来的多糖单元，具有分子量更小、吸湿性和渗透性更强的特点，它优异的渗透性能使其能够透过皮肤表层，被皮肤内部所吸收，更能弥补肌肤营养不足。
这种成分在保湿方面也有很大作用，能够抑制皮肤水分流失，增加肌肤保湿度。
果胶提取和检测
图2 微波辐射功率对果胶产率的影响
（酶失活） ↓ 橘皮洗净→加蒸馏水→加热（90℃，10min）→清水冲洗→切成3～5mm 的 颗粒 ↑ （钝化酶活性、去除苦涩、色素及糖酸等） （加活性炭）
↓ →热水漂洗3～5 次→果胶提取→提取液过滤→滤液脱色→滤液过滤→ 冷却→醇析 ↑↑ （一定料液比、pH 值等条件下进行微波辐射） （加入乙醇） →过滤得沉淀物→干燥→果胶产品[19-29]（酸提取步骤）
2.阳离子交换树脂通过吸附阳离子加速了原果胶的溶解, 提高了果胶的 质量和提取率。与单纯酸提取法相比, 此法提取率高, 产品质量好, 生 产周期短, 工艺简单, 成本低, 是经济上可行的提取方法[ 16 3.采用微生物发酵法提取的果胶相对分子质量大, 果胶的胶凝度高, 质 量稳定, 很有发 展潜力。 4.。微波法提取果胶选择性强, 操作时间短, 与传统的酸提取法相比, 提 取时间由1~ 2h缩短为几十秒钟; 溶剂用量小, 受热均匀,目标组分得率 高, 而且不会破坏果胶的长链结 构, 收率和质量都有提高, 是一种可行的方法。
思考：1.萃取次数可以改变？ 2.酸的使用（（酒石酸）酒石酸pH 2.0，料液比1∶10 g/mL，浸提微波 功率为280 W， 浸提级数为3 级的条件下， 结果显示：微波辐射时间 为5 min 时，橘皮果胶的得率最高。）可以改变？ 3.可否改变其他时间？ 4.什么酸什么PH值？有些实验表明强酸提取率高？ 问题：1.酸提过程中果胶分子容易发生解聚， 会降解果胶的分子质量、 影响胶凝特性，（酸停留时间不宜太长）。 2.不同柑橘皮微波功率和时间都是不一样的
原子吸收间接法：利用果胶在碱性Na2CO3条件下水解成果胶酸, 再与CaCl2 生成果胶酸钙沉淀。利用原子吸收光谱法( AAS法) 测定果胶酸钙中Ca 的 含量, 乘以换算系数12. 072, 从而间接测定果胶含量,
中国果胶行业分析
中国果胶行业分析黄山三生缘生物科技有限公司2012年8月目录一、果胶概况 (3)1.1果胶的分类及来源 (3)1.2果胶的用途价值 (5)二、国内外市场竞争状况与发展趋势 (7)2.1国内外市场需求 (7)2.2果胶行业发展状况 (8)2.3果胶行业发展前景 (10)三、行业的产业链分析 (11)3.1产业链上游行业分析 (11)3.2产业链下游需求分析 (12)四、行业政策法规分析 (13)4.1国内： (13)4.2国际： (13)五、行业领先企业信息 (14)5.1烟台安德利果胶有限公司 (14)5.2安徽金枫果胶有限公司 (16)5.3上饶富达果胶有限公司 (16)5.4衢州果胶有限公司 (17)六、果胶的生产流程及技术方向 (17)一、果胶概况果胶是一种极其复杂且结构上多样的高分子多糖，其分子主干是以α-1,4糖苷键连接半乳糖醛酸组成的线性链，通常以部分甲酯化状态存在,分子量高达130000g/mol。
除半乳糖醛酸外，果胶分子中还含有10%-15%的中性糖残基，如鼠李糖、阿拉伯糖等，但各种中性糖在果胶分子链上的数量和分布取决于植物的种类，所以由不同原料提取的果胶其性质有一定的差异。
酯基是半乳糖醛酸主链上最主要的成分，此外还有乙酰基、酰胺基。
1.1果胶的分类及来源酯化度是果胶分类的最基本指标，也是与果胶的各种应用性质密切相关的指标，比如胶凝性、增稠性、蛋白稳定性等。
果胶的酯化度的定义是果胶分子中酯化的半乳糖醛酸单体占全体半乳糖醛酸单体的百分比称之为果胶的酯化度，即DE值。
酰胺化果胶的酰化度（DA）则表示酰化的半乳糖醛酸单体占全部半乳糖醛酸的百分比。
一般果胶的最大酰化度不超过25％。
果胶的分类分类酯化度（DE值）甲氧基含量高甲氧基果胶（HM）〉50% 7%～16.3% 低甲氧基果胶（LMC）〈50% 〈7%酰胺化果胶（LMA）分子链中部分半乳糖醛酸被酰胺化－果胶一般可分为高甲氧基果胶（HM）、低甲氧基果胶（LMC）和酰胺化果胶（LMA）三大类型。
现代农业分析与测试15纤维素和果胶的测定
一是利用稀酸稀碱处理样品，除去杂质后用称量法测定。 二是利用纤维素与浓酸共热水解为葡萄糖，然后按还原糖 法测定，再折算×0.9，后者操作复杂不常用。
一、粗纤维的测定
（一）称量法* 1、原理
GB/T5009.10
在热的稀H2SO4作用下，样品中的糖、淀粉、果胶、部 分半纤维素等经水解而除去，再用热的KOH处理，使蛋白
二、不溶性膳食纤维的测定
定义:食品中不溶于水的纤维素、半纤维素、木质素。 方法：用热的中性洗涤剂溶液浸煮样品，可除去糖
分、蛋白质、淀粉、果胶等物质。再经α—淀粉酶 分解除去结合态淀粉，最后用水、丙酮洗涤除去残 存的脂肪、色素，所残存的干物质即定义为不溶性 膳食纤维（中性洗涤纤维 ）。
中性洗涤剂：十二烷基硫酸钠和乙二醇-乙醚等 此法：泡沫严重，过滤困难。
膳食纤维 ——它是指食品中不能被人体消化酶 所消化的多糖类和木质素的总和。它包括纤维 素、半纤维素、戊聚糖、木质素、果胶、树胶 等。至于是否应包括作为添加剂添加的某些多 糖（羧甲基纤维素等）还无定论。
膳食纤维比粗纤维更能客观、准确地反映食物
的可利用率，有逐渐取代粗纤维指标的趋势。
纤维素不溶于水，也不溶于有机溶剂，对稀酸稀碱相 当稳定，只有与浓酸共热才水解为葡萄糖。
稳定作用 果胶具有润滑、吸水、持水功能。 果胶可与许多金属离子生成沉淀。 果胶分子中含有甲氧基，在酶的作用下（酵母）可
生成甲醇（劣质果酒）。
测定方法：
一、称量法 原理：果胶不溶于70%乙醇，除去杂质后可被皂化
生成果胶酸钠，再酸化生成果胶酸，再与钙盐生成 果胶酸钙，经烘干后称量，换算为果胶酸的含量。 二、咔唑比色法 原理：果胶经水解生成半乳糖醛酸，在强酸中与咔 唑试剂发生缩合反应，生成紫红色化合物，用比色 法测定，结果以半乳糖醛酸计表示果胶物质的含量。
果胶的检测技术
3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3.1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。
所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法——离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0.05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B.M. Yapo等[2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i.d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测表3：检测果胶含量的离子交换色谱法3.2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。
果胶中含甲氧基的最大理论值为16.3％，若该值以酯化度来表示是100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是：酯化度= 甲氧基含量/16.3%。
果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。
而近几年，拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导。
Synytya等[4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。
果胶的检测技术
果胶的检测技术编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（果胶的检测技术）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
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3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3。
1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。
所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法-—离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0。
05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量,由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B。
M. Yapo等［2]以高效阴离子色谱—脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器,离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i。
d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和 0。
17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测定半乳3。
2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。