ELISA方法检测含油食品中氟喹诺：酮类药物残留
氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展
氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展189氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展刘荣利韩宁娟李亮(西安培华学院医学院陕西西安710125)摘要：氟喹诺酮是一种人工合成的广谱抗生素，在防治动物及人类的感染性疾病中具有重要应用。
由于抗 生素药物的不合理使用，导致在动物源性食品中残留超标，长期食用将严重危害人体健康，因此，对于动物源 性食品中氟喹诺酮残留检测具有重要的意义。
有关氟喹诺酮残留的检测方法大致可分为微生物法、免疫法、色谱法和光谱法等。
关键词：氟喹诺酮药物检测方法研究进展中图分类号：S859文献标识码：A文章编号：1009-5349 (2017) 09-0189-02一、 前言氟喹诺酮（fluoroquinolones，F Q S)是一系列由人工合 成的含有4-喹诺酮母核结构，母核6位C上被氟取代的一 类广谱抗菌药物，抗菌作用强，对革兰氏阳性菌与阴性菌 均有作用。
具有吸收快，体内分布广，血药浓度高，血浆 半衰期长，合成简便，药品价格低廉等特点，常用于动物 及人感染性疾病的治疗。
F Q S药物在家畜、家禽的饲养中应用广泛，抗生素的 不合理使用，导致其在动物性食品中的残留超标，如果人 体长时间摄人该类食物，不仅会引起人体对F Q S药物产生 耐药性，而且药物残留通过食物对人的中枢神经系统，胃肠道等器官危害较大，严重威胁人类健康。
关于乳、肉制 品中F Q S抗生素的残留全球都有严格规定。
因此，对于动 物源性食品中F Q S药物残留检测具有重要的意义。
现将F Q S药物残留的检测方法进行综述。
二、FQS药物的检测方法(一） 微生物法微生物检测利用F Q S药物对微生物生理代谢的抑制作 用，进行F Q S药物残留的测定。
该方法经济方便，但灵敏 度和特异性较低，难以进行药物残留的准确定性定量分析，适用于大量样品的筛选，可对药物残留进行初步检测。
邢 应寿[|]等建立了环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种药物 在肉鸡组织中残留的微生物检测法，结果发现24h后，环 丙沙星残留量较大。
浅析氟喹诺酮类兽药残留检测方法
３ 氟喹诺酮 类药物残 留的检测方法
目前 ，常用 于氟 喹诺酮 类药 物残 留 的检 测方 法 可分 为４ 液相色 谱法对 猪 肉组织 中恩诺沙 星和环 丙沙 星残 留量 进行 检 大类 ：微 生物法 、仪器分 析法 、化学发 光与 电化学发光 分析 测 ，结 果 环丙 沙星 、恩 诺沙 星 的质量 浓度 在 ２ｇＬ～１ ０ ｇＬ ／ ０ ／ ｇｋ 。 法及免疫分析法。其中仪器分析法常见的有高效液相色谱法 范 围内呈线性关 系 ，它们 的最低定量限均为２／ｇ （ＰＣ Ｈ Ｌ ）、液一 质联用分析法 （ ＣＭ ）、高效毛细管电泳法 ３ ２ ２ 高效液相 色谱 一 Ｌ／Ｓ ．． 质谱联 用法 （ ｃ Ｍ ） 随着研究 的深 Ｌ— Ｓ （ Ｐ Ｅ）等 ；免疫 分析检测法包括 间接竞 争Ｅｉ 测定法 、免 入 和对食 品安全越 来越 高 的重 视 ，定 性准 确 ，灵 敏度更 高 的 ＨＣ ｌａ ｓ 疫传感器分析法 、免疫亲和色谱 （ＡＣ）分析法等【 。 Ｉ ｌ 液质联 用技 术渐渐 被人 们采纳 ，这种 技术不 仅可 以更精 确 的
兽 药 应 用
中国畜牧兽 医文摘
２ １年 ０１
２卷 ７
第３ 期
浅析氟喹诺酮 类兽药残 留检测方法
将 ，、 Ｊ武 ・
（ 南大 学荣昌校 区，重庆 西
４ ２６ ） ０ ４ ０
［ 要］ 解决兽 药残留监 控 问题是提 高动物源性食 品质 量，保障食品安全 的关键 性环节之一 ，因此在食 品检 验 中建立 一 摘 些 方便 快捷 的检测方 法显得 尤为重要 。本 丈以兽 药氟喹诺酮类为例 ，系统 阐述 了目前在临床检测 中 已经建立的有关 氟喹诺酮类 药物 残留的检 测技 术 ，以期能为其他药物残 留检测提供参考方 向。
动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测研究
性、 生殖 毒 性 、 跟腱 炎 和局 部 刺激 症 状 等［ ， 动物 及 人类 健 康造 成 一 定 危害 。随着 Ｆ 药 物在 兽 医临 １对 ］ Ｑｓ 床和水 产养 殖应 用 的增 加 ， 副作 用 以及 耐药 菌 株逐 渐增 加 ， 毒 其残 留问题 已引起 广泛 的关 注 。 Ｆ Ｑｓ残 留除 了其 副 作用 直 接 危害 人类 外 ， 严重 的 问题是 食 品中残 留低浓 度 的药 物 可 能使 人 的致 更 病 菌 产生 耐 药性 ， 而 使 Ｆ 从 Ｑｓ对 人类 疾 病 的疗 效 降低 甚 至 失效 ， 开 发 的 Ｆ 新 Ｑｓ药 品 的市 场周 期大 大 缩 短 。因此 ， 必须 十分 重视 Ｆ Ｑｓ在 动物 性食 品 中 的残 留问题 。 为了监 控 Ｆ Ｑｓ在 动 物性 食 品中 的残 留 ， 联合 国粮 农 组织 （ ＡＯ） 世 界卫 生 组织 （ Ｆ ／ ＷＨＯ） 食 品添加 和 剂 联合 专家 委 员会 （Ｃ Ｆ 制 定 了单 诺 沙星 在 牛 、 、 的最 高残 留限量 ， 、 Ｊ Ｅ Ａ） 猪 禽 牛 家禽 的 肝 、 ４ ０￣ ／ ｇ 肾 ０ ｇｋ ，
Ｖｏ ． ５ Ｎｏ ３ １２ ．
Ｍ ａ Ｏ７ ｙ ２Ｏ
文 章 编 号 ：０ ８０ ７ （０ ７ ０ —０ ９０ １ ０ — １ １ ２ ０ ） ３ ０ ５ ～４
动物性食 品中氟 喹诺 酮类药物残 留检测研 究
廖 洁 丹
（ 山科学技术 学院 动 物 医学系， 东 佛 山 ５８０） 佛 广 ２ ０ ０
肌 肉 ２ Ｏ￣ ／ ｇ 脂 肪 及 鸡 的 皮 肤 １ ０￣ ／ ｇ 猪 的 肾 脏 ２ Ｏ￣ ／ ｇ 肌 肉 、 肪 １ ０￣ ／ ｇ 肝 脏 Ｏ ｇｋ ， ０ ｇｋ ； Ｏ ｇｋ ； 脂 ０ ｇｋ ，
鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进
鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进崔惠娟【摘要】对《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》进行改进,经试验验证,洗脱液改用含30％乙腈的流动相时,能提高方法的回收率.添加10μg/kg、100 μg/kg、200 μg/kg浓度水平时,测得的回收率为77.6％～95.2％,精密度＜10％,该方法检测环丙沙星的线性范围是5 ～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.7 μg/kg;达氟沙星的线性范围是1～40 μg/kg,检出限是0.11 μg/kg、定量限是3.4 μg/kg;恩诺沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.6 μg/kg;沙拉沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是16.7μg/kg.说明改进后的方法能够满足鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的检测.【期刊名称】《云南畜牧兽医》【年(卷),期】2017(000)002【总页数】3页(P17-19)【关键词】鸡肉;高效液相色谱法;氟喹诺酮类药物【作者】崔惠娟【作者单位】红河州动物疫病预防控制中心,云南蒙自 661199【正文语种】中文【中图分类】S859.84禽业科技氟喹诺酮类属化学合成抗菌药，因其抗菌谱广、抗菌活性高、毒副作用小、组织分布广等特点被广泛用于畜禽和水生动物疾病的防治[1]。
临床上常用的氟喹诺酮类药物主要有环丙沙星、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星等。
随着氟喹诺酮类药物的广泛应用，各类细菌对其产生的耐药率已达到60%～70%[2]。
目前，氟喹诺酮类药物的滥用及残留问题已经引起人们的广泛关注。
在动物性食品中，氟喹诺酮类药物残留检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)等[3]。
目前，用HPLC法检测鸡肉产品中的氟喹诺酮类药物残留，主要用到的国家标准方法是《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》(农业部1025号公告-14-2008)[4]。
氟喹诺酮类药物残留免疫学检测方法的研究_魏东
收稿日期:2008-08-27基金项目:吉林省科委基金资助项目(2000500) 作者简介:魏 东(1971-),男,助理研究员,硕士。
*通讯作者氟喹诺酮类药物残留免疫学检测方法的研究魏 东1,2,杨正涛1,李 颖1,郭昌明1,刘 辉1,张乃生1* (11吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062;21河北北方学院,河北张家口075000)摘要:以沙拉沙星(SAL X)为半抗原,牛血清白蛋白(BSA )偶联后免疫兔,获得对多种氟喹酮类(F QN S)药物有特异性的广谱性抗体。
以SA LX 与卵清白蛋白(O V A)的偶联物作包被原,建立并优化了间接竞争EL ISA 检测方法,对SAL X 最低检出限达191319L g/L ,且对诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星均有特异性识别,最低检测限分别是221646、261181和191054L g/L 。
结果表明,该抗体可用于多种氟喹诺酮类药物残留筛选检测。
关键词:氟喹诺酮;残留;检测;酶免疫分析方法中图分类号:S85917 文献标识码:A 文章编号:1005-4545(2009)12-1593-06Immunoassay method of detecting the residues of fluoroquinolonesWEN Dong 1,2,YA NG Zheng -tao 1,LI Ying 1,GU O Chang -m ing 1,LIU H ui 1,ZH ANG N a-i sheng 1*(1.College of A nimal S cience and Veterinary Med icine ,J ilin Univ er sity ,Changchun 130062,China;2.H ebei N or th Univ er sity ,Zhangj iakou,H ebei 075000,China)Abstract :Saraflox acin(SA LX )w as used as hapten coupling w ith bovine serum album in to generate broad spec-i ficity antibody ag ainst f luoro quinolones(FQ N S).Assay perfo rmance w as impro ved by use of a co ating ant igen,w hich co njuag ated betw een the SAL X and carr ier protein(OV A ).T y pical detection limits fo r SA LX w as 19.319L g /L.Dif -fer ent cro ss -reactions w ith the closely related F QN S,including NF LX ,CPL X and EF LX ,w ere det ected with the de -tectio n limits of 22.646,26.181and 19.054L g /L ,respect ively.T he r esult indicated that the antibody developed in this study w as pr act icable to screen the r esidues of F QN S. Key words :f luor oquinolones(FQ N S);residue;detectio n;ELI SA *Cor r esp onding author氟喹诺酮类(fluoro quinolones,FQNS 或FQS)药物是一类广谱高效抗菌药,几乎适用于临床常用的各种细菌感染性疾病,但其在动物源食品中的残留引起的危害也极大,可引起人体各系统不良反应、/三致0、中毒、过敏瓜及耐药性等一系列问题[1],其对人类造成的潜在危害是长久的,一些国家、地区或组织对FQNS 的最高残留限量(M RL)都做了规定,因此,建立一种高效、快速、灵敏度高的检测方法对FQNS 残留进行检测与监控,是当前FQNS 残留研究的主要趋势。
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物是一类广泛应用于人类及动物医药领域的抗菌药物，包括诸如氟苯尼考、氟哌酸、氟氧氟嗪等。
在兽药的使用中，为了保证食品中不残留过多的药物，国家制定了一系列的标准和方法来检测氟喹诺酮类药物的残留。
国标是指国家发布的关于特定物品或行为的规范和标准，是行业内进行质量控制和监督的重要依据。
对于氟喹诺酮类药物残留检测而言，国标主要涉及以下几个方面的内容：1. 检测方法：国标要求制定适用于氟喹诺酮类药物残留检测的方法，包括样品的采集、处理、提取、分离和定量等方面的技术要求。
这些方法通常采用高效液相色谱仪（HPLC）或质谱仪（MS）等仪器设备进行分析，以确保准确度和可靠性。
2. 检测限值：国标规定了氟喹诺酮类药物在食品中的残留限值，即食品中允许存在的最大药物残留浓度。
这些限值根据食品的种类、人们对该食品的摄入量以及药物的毒性等因素来确定，旨在保证食品的安全性和合规性。
3. 样品类型：国标规定了适用于氟喹诺酮类药物残留检测的样品类型，包括肉类、乳制品、水产品、蔬菜等。
针对不同的样品类型，可能需要不同的样品处理和预处理方法，以确保药物残留的有效提取和准确测定。
4. 检测设备和操作要求：国标还规定了氟喹诺酮类药物残留检测所需的设备和操作要求，包括仪器的性能指标、试剂的选择和使用、流程的标准化等。
这些要求有助于确保检测结果的准确性和可比性。
氟喹诺酮类药物残留的检测国标的制定和执行，对保障食品安全、合规经营和消费者权益具有重要意义。
遵循国标的要求进行药物残留检测，可以有效监控食品中的氟喹诺酮类药物残留情况，减少潜在的食品安全风险，保障公众健康。
同时，对于相关行业从业人员而言，了解并遵守国标的要求也是履行职责、提升专业素养的必要条件。
酶标抗原直接竞争ELISA检测食品中氟喹诺酮类药物多残留
酶标抗原直接竞争ELISA检测食品中氟喹诺酮类药物多残留樊晓博;谢兰心
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2015(036)024
【摘要】固相包被恩诺沙星抗体,辣根过氧化物酶标记的抗原与标准品(或样品)中氟喹诺酮药物竞争结合抗体,建立了高效、高灵敏的氟喹诺酮药物直接竞争酶联免疫吸附分析检测方法.优化反应条件后,得到方法的IC50为2.04 μg/L,灵敏度为0.15 μg/L,线性范围0.3～15 μg/L;方法可以检测12种氟喹诺酮药物,在生乳、鸡肉、鱼肉和虾肉4种样品中12种药物的回收率为70％～121.5％.
【总页数】5页(P265-269)
【作者】樊晓博;谢兰心
【作者单位】渭南职业技术学院渭南市农产品食品检验检测研究中心,陕西渭南714000;渭南职业技术学院渭南市农产品食品检验检测研究中心,陕西渭南 714000【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.对直接酶标HBV DNA探针检测乙肝患者血清中HBV DNA方法的改进 [J], 佟惠春;李冬田
2.动物性食品中氟喹诺酮类药物多残留检测研究进展 [J], 李新朋;姜金庆;钱爱东;丁菡;李艺
3.直接竞争ELISA法快速检测动物源性食品中磺胺嘧啶残留 [J], 刘百红;熊宁;王喜
亮;石德时;李晓云;彭大鹏;毕丁仁
4.直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留 [J], 刘卫华;沙芳芳;李润磊;王鑫伟;王向红
5.玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较[J], 刘媛;刘贤进;余向阳;张存政;张晓;刘蓉蓉;龚振明
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ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留
ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2011(032)010【摘要】建立宠物食品及油炸食品中4种氟喹诺酮类药物(诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星)ELISA检测方法,采用氟喹诺酮类检测试剂盒,样品用乙腈-NaOH(84+16)溶液提取,再用二氯甲烷反提取目标物.并根据日常检测中积累的一些经验,对宠物食品及油炸食品中的杂质和脂类物质进行适当的去除,取得了满意的结果.检测波长450 nm,回收率平均为90.95％,相对标准偏差小于6.07％.该方法快速,操作简单,灵敏度高,特异性强,检测限可达0.03 mg/kg,能够满足欧盟及日本、美国等地区和国家氟喹诺酮类药物筛选检测的要求.【总页数】3页(P122-124)【作者】于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛【作者单位】潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041【正文语种】中文【相关文献】1.SPE-HPLC检测动物源性食品中3种氟喹诺酮类药物残留 [J], 池永红;云雅光2.对食品中氟喹诺酮类药物残留色谱检测方法的思考 [J], 岳鹏;王安3.动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留色谱\r质谱检测技术研究进展 [J], 郭亚文;卜晓娜;刘楚君;王雅娟;赵霞;王波;谢恺舟4.动物性食品中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱检测方法的研究进展 [J], 焦安祥; 袁瑷金; 崔凌峰; 司闯; 舒利贤; 许翔翀5.动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留的色谱质谱检测技术 [J], 杨彩梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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（ ｉｎ ｎ ｙ Ｅ ｉＩｓｅｔ ｎａｄＱ ａａｔ ｅ ｕｅｕｏＣ ｉａ Ｗｅａ ｇ ６ ０ １ Ｓ ａ ｄｎ ， ｈｎ ） Ｗｅ ａｇ ｔ — ｘ ｐ ｃ ｏ ｕ ｒ ｉ ｒａ ｈｎ ， ｉ ｎ １ ， ｈ ｎｏ ｇ Ｃ ｉａ ｆ Ｅ ｒ ｔｎ ｉ ｎ ｎｎ Ｂ ｆ ｆ ２ ４ Ａｂｔａｔ ｅ ｏ ａ ｅｅ ｐｄ ｆ ｅ ｒ ｉａ ｏ ｆＱ ｉ ｌ ｅ ｅｉ ｅ （ ｏｆ ｘｃ ，Ｃｐｏ ｏａｉ ｓ ｃ：Ａ ｍ ｔ ｄ ｗ ｓｄ ｖｌ ｅ ｒｄｔ ｍ ｎｔ ｎ ｏ ｕ ｏｏ ｓｒｓ ｕ ｓ Ｎ ｒｏａｉ ｒ ｈ ｏ ｏ ｅ ｉ ｎ ｎ ｄ ｌ ｎ ｉｒ ｘｃｎ ｌ ｆ
Ｋ ｙ ｒｓ Ｅ ＩＡ； ｅ ｏ ｓ ｄｅ － ｉ ｏ ｓ Ｑ ｉ ｌ ｅ ； ｅ ｃｉ ｍ ｔ ｅ ｄ ： ＬＳ ｐｔｆ ｄ ； ｅｐ ｆｅ ｆ ｄ ； ｕ ｏｏ ｓ ｄｔ ｔ ｎ ｉ ｉ ｗｏ ｓｏ ｌ ｄｏ ｎ ｎ ｅ ｏｌ
氟喹诺 酮类药物 又叫沙星类 药物 ，是近３ 年来迅 ０ 速 发展起来 的新一代高效 、 广谱 抗菌药物 ， 它可以抑制 细菌Ｄ Ａ Ｎ 旋转酶 ， 组织穿 透力强 ， 用来预 防和治疗 主要
ｈ ｄｏ ｈｏｉｅ Ｄａ ｏｌｘ ｃｎｍｅｙａｅ Ｅ ｒｆ ｘ ｃｎ） ｅｓ ｏ ｄ ｎ ｅ ｐ ｆｉｄｆｏ ｓ ｙＥＬＳ Ｔ ｅｓｍｐｅ ｙ ｒｃ ｌｒｄ ， ｎ ｆ ａ ｉ ｓ ｌｔ ， ｎｏ ｏ ａ ｉ ｉ ｐ ｔ ｆｏ ｓａ ｄｄ ｅ － ｅ ｄ ＩＡ． ｈ ａ ｌ ｏ ｌ ｎ ｌ ｏ ｂ ｗａ ｘｒｃｅ ｉ ｃ ｔｎｔ ｌ— ａ Ｈ （ ４ ６ ａ ｄｂ ｃ — ｘｒｃｅ ｔ ｃ ｌｒｍｅｈ ｎ ． ｏ ｋａｓ ｔｆ ｄ ｓｅ ｔ ｔｄｗ ｔ ａ ｅｏ ｉｉ Ｎ Ｏ ａ ｈ ｒｅ ８ ＋１ ）ｎ ａ ｋ ｅ ｔ ｔｄｗｉ Ｄｉｈｏｏ ｔａ ｅ Ｗｅｔｏ ａｉ ｅ ａ ｈ ｓ ｉ
１ 氟 喹诺酮类检测试剂盒 ． ２ 空包装微孔板 （ｘ ２ ． ；瓶诺氟沙星标准液１ Ｌ ８ １￣ ）６ ， ｍ
以标 准品百分 吸光度值为纵 坐标 ， 氟沙 星标准 诺
品浓度 （ 、 、 、 、７ ８ ｇ ｇ 的半对数 为横坐标绘制 ０ １３ ９ ２ 、１ｘ／ ） ｔ ｋ 标准 曲线 。
动物疾病 ， 在兽 医临床方 面被广泛使用 ， 些 已经成为 有
较高 ， 可作 为确证 方法与本方法结合使用 。 应用此方 法 可对样 品进 行大规模筛选检测 ，不 必担心复杂基 质对 仪 器的污染 ， 而且 其操作 简单 ， 灵敏度 高 ， 异性强 的 特
特点 ， 使样 品检测 周期缩 短 ， 测 限降低 ， 而更好 地 检 从 保证 出 口的需要 。 １ 材料与方法
１ 材 料 ． １
畜禽水产 专用 的抗菌 药 ， 恩诺沙 星 、 丙沙星 、 如 环 达氟 沙星和诺氟沙 星。由于此类 药物在动物体 内的残 留消 除缓慢 ， 部分经 肝脏代 谢 ， 大部分 以原形 经 肾脏 排泄 ， 对肝 、 肾有一定损 害 ， 虽然 这种药物在 动物体 中残 留较
少， 但人们如果长 时间地食用含抗生 素的食品 ， 会抑制
Ｅ ｐｎ ｏ ；Ｂ ０ 一 ｐ ｅｄ ｆ Ｐ ４ ３ Ｓ电 子 天 平 ： Ｅ Ｉ Ｅ Ｔ ＬＤ Ｍ Ｔ ＇ Ｒ，Ｏ Ｉ Ｏ； Ｌ
多， 大多利用 比较先进 的仪器 ， 如高效液 相色谱质谱 串
联 法 （ ＣＭＳＭＳ ， 质联 用法 （ ＣＭＳ ， Ｌ／ ／ ） 气 Ｇ／ ） 这类方 法 检测 灵 敏度高 ， 检测周期较长 ， 对检测人员 的专业知识要求
和杀灭体 内的细胞 ， 对人体健康引起损 害 。 因此人们越 来 越关注食 品中氟喹诺 酮类药物 的残 留安全 问题 。 目前 ，对氟喹诺酮 酶标 仪 （ ｏ ｅ ６ ０ ４ ０ｎ Ｍ ｄｌ ８ ，５ ｍ滤 光 片 ） 日本伯 乐 公 ： 司 ；２ 均 质 机 ：德 国 ；８０ Ｔ５ ５ １Ｒ高 速 冷 冻 离 心 机 ：
氢 氧 化 钠 加 去 离 子 水 溶 解 定 容 到 １０ ｍ ； ０ Ｌ） 乙腈 一
０ １ｍ ｌ 氢氧 化钠溶液 （ ． ｏＬ ／ 量取 ８ Ｌ ４ｍ 无水 乙腈加 入到
１ ．ｍ ｌ 氢氧化钠溶液 中混合均匀 ） ６ ０１ ｏ Ｌ ｍＬ ／ ；诺 氟沙星
标准 品（ 浓度 为 １０￣ ／ Ｌ 准确称取０叭 ｇ ０ ｇ ， ｍ ． 诺氟沙 星标 准品用 乙腈溶解 ， 定容到 １０ Ｌ ０ 容量瓶 中 ， ｍ 振荡均匀 ） 。
百分 吸光率Ｉ ＢＢｘ Ｏ ％＝ Ｉ ｏ１０
式中： 为标 准品或样 品 的百 分吸光度 值 ；。 Ｂ为零 标准 的百分 吸光度值 。 １ ． 标准 曲线 的绘制 ．２ ４
水定容 到１ ０ ）０１ ｏ Ｌ 氧化钠溶液 （ ０ ０ ｍＬ ；． ｍ ｌ 氢 ／ 称取 ０ ．ｇ ４
关键词 ： ＬＳ 宠物食品 ； Ｅ ＩＡ； 油炸食品 ； 氟喹诺 酮类药物 ； 测限 检
Ｄｅｅ ｔ ｇＱｕｎ ｌｎ ｓＲｅ ｉｕ ｓｉ ｅｓ ｏ ｓａ ｄＤｅ ｐ Ｆ ｉｄＦｏ ｄ ｔｃｉ ｉ ｏｏ ｅ ｓ ｅ ｎ Ｐ ｔ ｄ ｎ ｅ － ｒｅ ｏ ｓ ｎ ｄ Ｆｏ
ＹＵ Ｊｎ ｌ ｇ ＧＯＮ ａ － ｎ ， ＯＮＧ Ｊ ｇ ＤＩ ｕ — ｉ ｇ Ｗ Ａ ｎ — ａ ｉ－ ｉ ， ｎ Ｇ Ｘｉｏ ｍｉ ｇ Ｄ ｉ ， ＮＧ Ｋ ｉｙ ｎ ， ｎ ＮＧ Ｈｏ ｇ ｔｏ
下层５ Ｌ Ｏ 进行分析 。 １ － 免疫测定过程 ．２ ３
氟 喹诺 酮类 药物 是 两性 有 机 化 合物 ， 同时 含有
１ 个氨基 和１ 个羧基 ， 能够溶 于酸性 和碱性溶剂 中。 本实 验 以 乙Ｎ ＋ ． ｍ ｌ ａ Ｈ（４ １ ， 积 比 ） Ｏ１ ｏ ＬＮ Ｏ ８ ＋ ６ 体 ／ 为溶 剂 ， 因
收率平均 为９ ．５ 相 对标准偏 差小于６ ７ 该 方法快速 ， ０ ％， ９ ． ％。 ０ 操作 简单 ， 灵敏度 高， 异性强 ， 测限可达０ ３ｍ ／ｇ 特 检 ． ｇ ， ０ ｋ
能 够 满足 欧盟 及 日本 、 国 等地 区和 国 家 氟喹 诺 酮 类 药 物 筛选检 测 的要 求 。 美
摘 要： 建立宠物食 品及 油炸食 品 中４ 氟喹 诺酮 类药物（ 氟沙星、 丙沙 星、 氟沙星 、 种 诺 环 达 恩诺 沙星 ）ＬＳ Ｅ ＩＡ检测方
法 ， 用 氟喹 诺 酮 类检 测 试 剂 盒 ， 品 用 乙腈 一 ａ Ｈ（４ １ ） 液提 取 ， 用二 氯 甲烷 反 提 取 目标 物 。 根 据 日常 检 测 采 样 Ｎ Ｏ ８＋６ 溶 再 并 中积 累的一 些经验 ， 宠物食 品及 油 炸食 品 中的杂质 和 脂 类物质 进行 适 ＂ 对 ３的去 除 ， － 取得 了满意 的 结果 。 测 波长４ ０ ｍ， 检 ５ ｎ 回
１ ． 结果 计算 ．３ ４ 将样 品的百分 吸光 率代入标 准曲线 中 ， 从标 准 曲
浓度 分别为０ １３ ９ ２ 、１ ／；瓶７ｍ 酶标 二抗 工 、 、 、、７ ８ ｇＬ ｌ Ｌ 作液 和 １ ７ｍ 抗体工 作液 ；瓶７ｍ 的底 物 Ａ 和底 瓶 Ｌ １ Ｌ 液 物Ｂ ；瓶７ 的反应停止液 。 液 １ ｍＬ
ｒｓ ｌ ｂ ｃ ｕ ｕａ ｉｇ ｅ ｐ ｒｅ ｃ ｔｒ ｕ ｉ ｅ ｗｏ ｋ ａ ｄ ｗｉ ｅ ｆ ｍｐ ｒｔ ｎ ａ ｕ ｓａ ｃ ｒｐ ｒｙ ｉ ｅｓ ｅ ｕ ｔ ｙ ａ ｃ ｍ ｌｔ ｘ ｅ ｉ ｎ ｅ ａ ｏ ｔｎ ｒ ｎ ｐ ｄ ｏ ｉ ｕ ｉ ａ ｄ ｆｔｓ ｂ ｔ ｎ ｅ ｐ ｏ ｅ ｌ ｎ ｐ ｔ ｎ ｙ ｆ ｏ ｓａ ｄ ｄ ｅ ｆｉｄ ｆｏ ｓ Ｔ ｅ ｗａ ｅｅ ｇｈ ｏ ｅｅ ｔ ｎｗａ ５ ｍ ． ｅ ａ ｅ ａ ｅｒ ｃ ｖ ｒ ｓ９ ．５ ％ ，ａ ｄ ｏ ｄ ｎ ｅ ｐ—ｒｅ ｏ ｄ ． ｈ ｖ ｌｎ ｔ ｆｄ ｔｃｉ ｓ４ ０ ｎ Ｔ ｖ ｒ ｇ ｅ ｏ ｅ ｗａ ０９ ｏ ｈ ｙ ｎ ｔｅ ｒ ｌｔ ｅ ｓａ ｄ ｒ ｅ ｉｔｏ ｓｌ ｓ ｈ ｎ ６．７ ％ ．Ｔ ｉ ｔ ｏ ｓ ｆｓ ． ｅ ｓ ｈｇ ｅ ｓｔ ｉ ｎ ｔｏ ｈ ｅａ ｉ ｔｎ ａ ｄ ｄ ｖａｉｎ ｗａ ｅ ｓｔ ａ ０ ｖ ｈ ｓ ｍｅｈ ｄ ｉ ａ ｔ ａ ｙ． ｉｈ ｓ ｎ ｉ ｖｔ ａ ｄ ｓｒｎｇ ｉ ｙ ｓ ｅ ｉ ｃｔ ． ｅｄ ｔｃ ｉｎｌｍｉｗａ ｖ ｎ０．３ｍ ｇ ｇ，ａ ｄ ｉｃ ｎｂ ａｉｆｅ ｔ ｘ ｏ ｄ ｍａ ｄ ． ｐ ｃｆ ｉｙ Ｔｈ ｅ ｅ ｔ ｉ ｔ ｓｅ ｅ ０ ＆ ｉ ｏ ｎ ａ ｅｓ ｔｓ ｄ ｗｉ ｅ ｐ ￣ ｅ ｎ ｓ ｔ ｉ ｈ
在使用本 方法 的过程 中 ， 根据 日常检测 积 累的经 验， 对前处理方法进行了多种优化检测 ， 降低 了假阳性 率， 得到了满意的结果。
２１ 前处理条件 的优化 ． ２１ 提取试剂 的优化选择 ．１ ．
心 １ ｉ ，取４ｍ 上清液Ｎ５ Ｌ ０ ｎ ｍ Ｌ ｏｍ 聚苯 乙烯离 心管 中 ， 加入４ｍ ．２ ｏ Ｌ 酸盐缓 冲液 ， 加入８ｍ －氯 甲 Ｌ０ ｌ 磷 ０ｍ ／ 再 Ｌ 烷 ，用振 荡器振 荡 １ ｉ， ０ ｍ ｎ ０ｍ ｎ ３０ ０ｒ ｉ以上 ，５℃离心 ／ １ １ ｎ 去上层 液取下层有机相 至 １ 干净 的玻璃管 ０ｍｉ， ０ ｍＬ 中 ， ０℃用 氮气 吹干 ， ５ 再用 １ Ｌ 的复溶 工作液溶解 ， ｍ 加 入 ２ｍＬ 己烷 ，涡旋仪 涡动 ２ｍ ｎ ３０ ０ｒ ｉ以上 ， 正 ｉ ， ０ ｍ ｎ ／ １ 离心５ｍ ｎ ５ｃ Ｃ ｉ振荡 ５ ｉ， ｎ 吸掉 上层及 中间层 杂质 ， ｍ 取
作 者简介 ： 于金玲 （９ ３ ）女（ ）工程 师 ， １７ 一 ， 汉 ， 大专 ， 主要从事兽 药残
留检 测 工 作 。
ＭＳ １ 一 涡流混 匀器 ： 国 ； — Ｖ Ｐ １氮 吹仪 ： 国 ； 中 Ｎ Ｅ Ａ １１ 美 多
道微量加样器 ：ｐ ｅ ｄｒ Ｅ ｐ ｎｏｆ 。
１１ 试 剂 ．． ２
２１ ０ １年 １ ０月
＝＝ １ ＝ ２２
第３ ２卷第 １ ０期