Interlab G26碱性血红蛋白电泳
碱性血红蛋白电泳操作规程(美国)

Mean 36.01 23.43 21.54 2.00 19.02
血红蛋白组分 A1 F S A2 C
Mean 34.22 23.97 22.45 2.57 19.35
SRE157K SD 0.57 0.64 0.71 0.11 0.48
SRE205K SD
1.24 0.64 0.63 0.09 0.53
6. 启动运行。运行仪器的更多信息,查阅操作者手册。
结果解释
• HbA1 是红细胞中最丰富的血红蛋白类型,因此,HbA1 是电泳图上最普通的 条带。HbA1 容易识别,它有一个规则的图形,负极侧轮廓一致,而正极侧稍显模 糊。
• HbA2 条是典型的窄而集中的,尽管染色较淡。
4
2013/2/20~23 译
吸取溶血液样品 溶血液可能出现二种不同的外观: a) 管中液体上层部分呈透明红色,而底层部分呈浓稠、不透明、凝胶样。
3
2013/2/20~23 译
透明红色层液体才是吸取用于分析的样品。 注意:不要吸取浓稠、不透明、凝胶样液体,从管中吸取样品时要避免混合
这二层液体。 b)管中液体呈均匀透明红色,吸样时仅吸取上半部或最上层液体。
碱性 pH 醋酸纤维素电泳对分离正常与变异血红蛋白是简单、有效的方法, 这种电泳方法也用于不同类型血红蛋白异常(Hemoglobin anomalies)的定性鉴定 和定量测定。
已鉴定的人类变异血红蛋白已达 400 多种,这些异常血红蛋白大约 1/4 可以 通过诸如碱性或酸性缓冲液电泳的分类分析方法予以鉴别,其他类型血红蛋白的 研究需要高精细的实验室技术。血红蛋白病(Hemoglobinopathies)和地中海贫血 (thalassemia)包含大量导致不同类型血红蛋白正常浓度显著失衡的血红蛋白结构 定性改变(modificative)或定量变异(variations)的遗传性疾病。
血红蛋白电泳实验报告

实验汇报实验名称:血红蛋白电泳项目名称:两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间:2018年9月17日实验室:龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员:杨松报告单位:成都温伦科技有限公司一、实验目的:1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理:血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术,在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。
三、实验方法:琼脂糖电泳法四、实验器械:样品:10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂:0.9%生理盐水500ml,四氯化碳500ml,界面液250ml,美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材:移液枪,一次性移液枪头若干,EDTA抗凝管10个,玻璃试管10个设备:美国Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤:1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个,编号为1,2,3......10。
2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中,编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。
3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理,处理方法如下:-用0.9%生理盐水混匀,3500 rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。
-以上步骤连续进行三次。
-完全吸走弃去上清液。
-20ul制作后的样本+80ul溶血素,混匀。
-取溶血后的样本17ul加入样品孔。
4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理,处理方法如下:-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。
-3000rpm离心5分钟。
-弃去上清液,只留下红细胞。
-加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。
-加入300ul 的四氯化碳,混合均匀,3000rpm离心5分钟。
Interlab G26碱性血红蛋白电泳

Microgel与Interlab G26碱性血红蛋白电泳程序(试剂盒:SRE604K)█ 用途Microgel/Interlab G26碱性血红蛋白电泳试验试剂盒用于采用琼脂糖凝胶(agarose gel)分离正常血红蛋白(A1、A2及F)与某些异常或变异血红蛋白(S或D和C或E)的体外诊断。
为了区分血红蛋白S与D或C与E,必需一种相互确证试验,如酸性血红蛋白电泳。
本电泳试验在碱性p H条件下进行,并提供有价值的血红蛋白电泳图扫描方法。
电泳图的光密度测量可对血红蛋白条带的相对定量。
试剂盒SRE604K设计用于全自动仪器Microgel/Interlab G26。
█ 概述血红蛋白(Hb)是在红细胞中发现的一种蛋白质,其作为氧气(O2)载体而扮演重要角色,氧气在肺部与血红蛋白结合,并释放到组织和器官中以维持细胞的生命力。
血红蛋白分子是一种含有2种不同类型蛋白质(称为珠蛋白)成对组配而成的四聚体。
α型珠蛋白总是存在于各种正常血红蛋白中,其他类型的珠蛋白(称为β、δ、γ等)决定不同的血红蛋白分子,并决定其生物学功能。
每条珠蛋白链中含有一个亚铁血红素(其中有1个铁原子)。
正常成人红细胞中存在3种不同类型的血红蛋白,HbA是主要类型,同时还在少量的HbA2及HbF。
这些血红蛋白是由以下珠蛋白链组合成分的1、2:血红蛋白的合成受基因控制。
α珠蛋白链有4个编码基因,而β珠蛋白链只有2个编码基因。
在胎儿期,有2个附加基因负责γ链的合成。
尽管基因数不同,但α和β链的蛋白质合成产生等数量的多肽链,这些肽链在成熟中的红细胞中装配成血红蛋白。
这些基因的核苷酸顺序可能由于经历一个称为突变的过程而发生偶然性改变,突变最终导致多肽链上的氨基酸替代,产生一种修改的血红蛋白分子。
这些突变血红蛋白(mutant hemoglobin)也称为变异血红蛋白(variant hemoglobin),其分子结构可能显示最终引起病理状况的质变,这些病理状况称为血红蛋白病1、2、5。
血红蛋白电泳操作规程

血红蛋白电泳操作规程一.项目名称血红蛋白电泳(HYDRAGEL HEMOGLOBIN)二.检验方法名称琼脂糖凝胶区带电泳三.方法学原理血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面电荷不同,在电场中的泳动率不同,这还与pH、电泳缓冲液的离子强度等有关。
血红蛋白异常有二种类型:血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。
实验使用洗涤过红细胞的溶血液来进行,在碱性的凝胶片上进行电泳来分离血红蛋白,分离出来的片段通过氨基黑染色剂来显色,烘干后的凝胶片就可以用来解释结果了。
四.方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳(moving boundary eectrophoresis),而后,这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳(zone elecrrophoresis)所克服,区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五.仪器(一)型号:SEBIA HYDRASYS (PN1210)(二)分析和计算参数:1.处理量:约45个样本/小时2.所需样本量:10ul3.检验时间:约半小时4.重复性:有良好的批内和批间重复性5.电泳参数:电压0-300V(可选至3000V)电流0-500mA功率0-100W六.试剂及配套品(一)试剂1.HYDRAGEL 7 HEMOGLOBIN(E)试剂盒HYDRAGEL 15 HEMOGLOBIN(E)试剂盒(1)商标:SEBIA(2)包装规格:70测试/150测试(3)货号:PN4106/ PN41262.脱色液(1)商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 10×100ml(3)货号:PN4540(4) 成分:柠檬酸3.洗涤液(1)商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 10×80ml(3)货号:PN4541(4)成分:叠氮钠4.生理盐水(二)配套品血红蛋白质控(1)商标:SEBIA(2) 包装规格:Pack for 1×1ml(3) 货号:PN4791七.操作步骤㈠开机,启动电泳仪。
血红蛋白电泳说明书-new

碱性血红蛋白电泳说明书意大利Interlab公司Via Rina Manti,26-00155 Roma +39-06-227.54.350用途:此碱性血红蛋白电泳试剂的包装是用于696PC系统的电泳试剂,此试剂可对人类的正常血红蛋白如H-A,H-A2和H-F通过琼脂糖凝胶的方法进行定性和定量的分离,以及可检测出异常的血红蛋白如S,C,D,E等概述血红蛋白合成受遗传基因的控制,并且异常血红蛋白的出现会引起红细胞形态和功能的变性。
血红蛋白是由珠蛋白肽链和含有铁的原卟啉组成。
正常的血红蛋白结构相似,分子量在67000道尔顿左右,由两对珠蛋白肽链和1个亚铁血红素组成。
HbA: 多肽链 2α和2βHbA2: 多肽链 2α和2δHbF: 多肽链 2α和2γ正常成人血红蛋白中,HbA占总蛋白浓度的98%,HbA2和HbF相对数量少些。
珠蛋白肽链中某一氨基酸被其他氨基酸所取代会导致Hb变异即可出现血红蛋白病。
目前可鉴定出600多种变异的血红蛋白即结构变异的血红蛋白(S 、C、 E、 D、G、 H、 I 、Lepore等)。
在异常的血红蛋白中约有60%血红蛋白会有电荷差异,这样可用电泳的方法对这些血红蛋白进行鉴定。
HbC和HbS是两种常见的变异的血红蛋白。
HbA伴随有S,C,E等变异的血红蛋白出现称为杂合子血红蛋白病如AS或AC等。
只有一种变异的血红蛋白的出现称其为纯合子血红蛋白病如HbS病、HbC病等。
这些变异的血红蛋白一般可导致地中海贫血。
纯合子型血红蛋白病可引起一系列的临床症状。
碱性血红蛋白电泳主要用于分离正常血红蛋白如HbA、HbA2和异常或变异的血红蛋白(HbS、“快速”血红蛋白和D、C、E)。
然而,在碱性Hb电泳中,一些正常的和异常的血红蛋白有相同的迁移率即这些蛋白质在同一位点(如HbA2与HbC,HbS与HbD)琼脂糖酸性血红蛋白电泳可确定HbS或HbC。
原理:根据蛋白质亚结构的电荷分布,在一定的PH值条件下,蛋白质分子可表现出有极性或非极性。
血红蛋白电泳的原理

血红蛋白电泳的原理血红蛋白电泳是一种常用的实验方法,用于研究血红蛋白的组成和性质。
它基于电泳原理,通过将血红蛋白样品置于电场中,并利用血红蛋白的电荷和大小差异,将其分离成不同的带状图谱。
血红蛋白是红细胞中的重要成分,负责携带氧气和二氧化碳。
血红蛋白由四个亚基组成,每个亚基都含有一个被铁离子结合的血红素分子。
不同类型的血红蛋白亚基组合形成了不同种类的血红蛋白。
血红蛋白电泳通过分离这些不同种类的血红蛋白,可以提供有关血红蛋白结构和功能的重要信息。
血红蛋白电泳的原理是利用电场对血红蛋白的电荷和大小进行分离。
在电泳过程中,血红蛋白样品被置于一个凝胶或纸张上,然后通过施加电场,使血红蛋白在凝胶或纸张中移动。
由于血红蛋白的电荷和大小不同,它们在电场中以不同的速率移动,从而分离开来。
血红蛋白电泳有两种常用的方法:直接测定和间接测定。
直接测定是将血红蛋白样品与凝胶或纸张直接接触,然后施加电场进行分离。
间接测定则是将血红蛋白样品与某种荧光标记物结合,再将其与凝胶或纸张接触,通过荧光信号来分析血红蛋白的分离情况。
血红蛋白电泳可以根据血红蛋白的电荷和大小差异,将其分离成不同的带状图谱。
这些图谱可以通过染色或荧光标记等方法进行可视化,以便进一步分析和研究。
通过观察这些图谱,可以确定不同类型的血红蛋白的存在,并评估它们在某些疾病或异常情况下的变化。
血红蛋白电泳在临床诊断和研究中具有广泛的应用。
它可以用于检测血红蛋白病和其他血液疾病,如地中海贫血和镰状细胞贫血。
通过分析血红蛋白的分离情况,可以确定疾病的类型和严重程度,并指导治疗方案的选择。
血红蛋白电泳还可以用于研究血红蛋白的结构和功能。
通过比较不同血红蛋白的分离图谱,可以揭示其结构差异和功能特性。
这对于深入了解血红蛋白的生物学过程和疾病机制非常重要。
血红蛋白电泳是一种重要的实验技术,通过利用电泳原理,将血红蛋白样品分离成不同的带状图谱。
它在临床诊断和研究中具有广泛的应用,可以提供有关血红蛋白结构和功能的重要信息。
什么是血红蛋白电泳检查

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢什么是血红蛋白电泳检查
导语:也许有一些朋友会听说过血红蛋白电泳检查,但是真正了解血红蛋白电泳检查的人肯定是不多的,毕竟血红蛋白电泳检查并不是常规的一种检查,但
也许有一些朋友会听说过血红蛋白电泳检查,但是真正了解血红蛋白电泳检查的人肯定是不多的,毕竟血红蛋白电泳检查并不是常规的一种检查,但是由于血红蛋白电泳检查在临床上面有着非常重大的意义,所以我们还是有必要多了解一些关于血红蛋白电泳检查的知识,下文我们给大家介绍一下什么是血红蛋白电泳检查。
血红蛋白电泳珠蛋白生成障碍性贫血是世界上最常见和发病率最高的一种单基因遗传病,常见有两类,即α和β海洋性贫血(以往称地中海贫血),是由于基因突变引起存在于红细胞内的几种血红蛋白(Hb)合成异常。
此项化验可用于检验异常Hb,进一步诊断一些相关疾病。
HbA:96%-98%HbA2:1%--3%HbF:1%~2%
(1)HbA2增高是轻型β—海洋性贫血最重要的诊断依据;
(2)HbS病、β链异常的不稳定Hb病及某些巨幼细胞性贫血患者HbA2也可增高;
(3)缺铁性贫血时,HbA2常降低,可与轻型β—海洋性贫血鉴别;
(4)正常人Hb电泳后,一般只见两条区带(HbA和HbA2),若出现新的区带,则可能为异常Hb,应进一步检查。
用肝素或EDTA抗凝血。
在上面的文章里面我们介绍了临床意义非常大的一种检查方式,那就是血红蛋白电泳检查了,血红蛋白电泳检查是用来检查贫血的,相信大家现在都已经了解了什么是血红蛋白电泳检查了吧。
预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏。
双向电泳操作步骤

3.1 全菌蛋白的制备将细菌接种于DMEM培养基,置于28℃培养箱培养18h。
参照Coelho 等(Coelho et al. 2004)的方法,略有改动。
用Wash buffer(10mmol/L TrisCl pH8.0,5mmol/L 醋酸镁)清洗细胞3次。
离心,细胞沉淀在Lysis Buffer( 7mol/L 尿素,2mol/L硫尿,1% IPG Buffer pH3-10或pH4-7,4% CHAPS,1% DTT,1%蛋白酶抑制剂,1%核酶抑制剂)中悬浮,使其浓度范围在5~10mg/mL。
置于冰上裂解2h。
13000r/min离心1h取上清,-80℃保存。
用2-D clean-up Kit 纯化蛋白,再用2-D Quant Kit测定样本中蛋白浓度。
3. 2 2-D Clean-Up Kit的使用方法(全程小心)蛋白质样本在1.5mL微型离心管中处理,所有步骤均在冰上进行。
1)将体积100μL的蛋白质样本(含1~100μg蛋白质)置于1.5mL微型离心管中。
加入300μL沉淀剂。
振荡或倒置搅匀。
冰浴中(4~5℃)培育15min。
2)加入300μL共沉淀剂,简单振荡混合一下,12000r/min离心5min。
3)将上清液尽量多地倾析或吸出,不要搅散沉淀。
保持沉淀不变,在其上面加入一层40μL共沉淀剂,冰上培育5min。
后离心5min,去上清。
4)往沉淀加入25μL蒸馏水或去离子水。
将管振荡5~10s,这时沉淀应散开,但并未溶解于水中。
在管中加入1mL洗涤缓冲液(在-20℃下至少预冷1h)和5μL洗涤添加剂,振荡直至沉淀完全散开。
-20℃下培育至少30min,每10min振荡20~30s。
5)将离心管以最大速度(至少12000r/min)离心5min。
小心地将上清液移走弃去。
此时应可见白色沉淀,将沉淀简单风干一下(不要超过5min)。
6)用裂解液溶解沉淀,以备第一向IEF电泳。
振荡管子至少30s,在室温下孵育,振荡或用移液管抽吸使之完全溶解。
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Microgel与Interlab G26碱性血红蛋白电泳程序(试剂盒:SRE604K)█ 用途Microgel/Interlab G26碱性血红蛋白电泳试验试剂盒用于采用琼脂糖凝胶(agarose gel)分离正常血红蛋白(A1、A2及F)与某些异常或变异血红蛋白(S或D和C或E)的体外诊断。
为了区分血红蛋白S与D或C与E,必需一种相互确证试验,如酸性血红蛋白电泳。
本电泳试验在碱性p H条件下进行,并提供有价值的血红蛋白电泳图扫描方法。
电泳图的光密度测量可对血红蛋白条带的相对定量。
试剂盒SRE604K设计用于全自动仪器Microgel/Interlab G26。
█ 概述血红蛋白(Hb)是在红细胞中发现的一种蛋白质,其作为氧气(O2)载体而扮演重要角色,氧气在肺部与血红蛋白结合,并释放到组织和器官中以维持细胞的生命力。
血红蛋白分子是一种含有2种不同类型蛋白质(称为珠蛋白)成对组配而成的四聚体。
α型珠蛋白总是存在于各种正常血红蛋白中,其他类型的珠蛋白(称为β、δ、γ等)决定不同的血红蛋白分子,并决定其生物学功能。
每条珠蛋白链中含有一个亚铁血红素(其中有1个铁原子)。
正常成人红细胞中存在3种不同类型的血红蛋白,HbA是主要类型,同时还在少量的HbA2及HbF。
这些血红蛋白是由以下珠蛋白链组合成分的1、2:血红蛋白的合成受基因控制。
α珠蛋白链有4个编码基因,而β珠蛋白链只有2个编码基因。
在胎儿期,有2个附加基因负责γ链的合成。
尽管基因数不同,但α和β链的蛋白质合成产生等数量的多肽链,这些肽链在成熟中的红细胞中装配成血红蛋白。
这些基因的核苷酸顺序可能由于经历一个称为突变的过程而发生偶然性改变,突变最终导致多肽链上的氨基酸替代,产生一种修改的血红蛋白分子。
这些突变血红蛋白(mutant hemoglobin)也称为变异血红蛋白(variant hemoglobin),其分子结构可能显示最终引起病理状况的质变,这些病理状况称为血红蛋白病1、2、5。
2种最常见的突变血红蛋白是HbS和HbC6,其他变异血红蛋白,如Hb Lepore、HbE、HbG-Philadelphia、HbE-Los Angeles及HbO-Arab也可检出4。
某种血红蛋白肽链合成比率的降低或改变,导致血液血红蛋白浓度的量变,所引发的疾病称为“地中海贫血”5。
目前已鉴定600种人类血红蛋白变异体,其中大约1/4具有足够改变的净蛋白质电荷,使其在碱性pH条件下的凝胶电泳能够检出6;其他类型血红蛋白的研究通常需要不同的或高度精细的实验室技术。
在碱性pH条件下,一些变异血红蛋白显示相同或相似的电泳迁移率,在电泳图上表现为相同位置上的条带叠加。
一起迁移血红蛋白的典型例子包括HbC 与HbE(它们迁移到与HbA2相同的位置),HbG与HbS位置叠加。
确证试验通过酸性pH条件下的电泳来进行,因为在此不同的化学环境中,这些变异血红蛋白在电泳图上占据不同的位置3、4。
█ 原理正常血红蛋白和多数变异血红蛋白有不同的电泳迁移率,可以通过琼脂糖凝胶在碱性缓冲液电泳,根据其净电荷来加以分开。
条带电泳分离完成后,琼脂糖凝胶经变性、酸性蓝染色、脱色、干燥,然后电泳图扫描,各条带光密度结果一起以图形表示。
试剂盒提供的材料试剂盒:SRE604K130个测试,13个标本/琼脂糖凝胶板说明数量SFE166M 琼脂糖凝胶板 10SCE149M 缓冲液海绵条(10) 2SRE140B 溶血剂(60ml) 1SRE601A 酸性蓝染液(100ml) 1SRE150M 点样器洗液(80ml) 1SAE605M 一次性样品盘(10块) 1SCE602C 吸水纸(10张) 1PK111 碱性血红蛋白电泳程序 1 译注:1.本室Interlab G26没有清洗槽(washing bar),因而SRE150M用不上。
2.本室所用SRE604K试剂盒的染色液为SRE 633L (500ml),可直接接使用(瓶签未标示成分),而非需用前稀释的SRE601A。
告示:本试剂盒仅用于体外诊断!为了确保最佳性能,所用试剂必须来自同一试剂盒,并遵循程序说明。
必需,但没有提供的材料说明数量SRE201M 脱色液包装6×100mlSCE129E Interlab血红蛋白质控液AFSA2 1ml/瓶SCE130E Interlab血红蛋白质控液AFSC 1ml/瓶• 微量吸管:100μl、1000μl;吸管:10ml。
• 生理盐水(0.9% w/v NaCl)• 台式离心机█ 说明书1. 琼脂糖凝胶板(Agarose gel plates)成分:含Tris-硼酸缓冲液的琼脂糖,添加防腐剂和稳定剂。
R:22 吞服有害。
R:36/38 对眼睛和皮肤有刺激性。
S:26 眼睛接触时,立即用大量流水冲洗。
S:28 皮肤接触时,立即用大量流水冲洗。
S:46 如果吞服了,就医诊治。
译注:原文sick medical advice应为seek medical advice,参见p.3 Lysing solution的S: 46。
备用:包装盒中的板可直接使用。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存。
不能冷藏或冰冻凝胶板!重要:水平放置保存凝胶板!凝胶板在标签上的有效期内是稳定的。
凝胶板超出有效期不能使用。
变质征兆:• 凝胶包装盒中出现液体或水份。
• 凝胶厚薄不一。
• 由于污染,出现细菌或霉菌生长。
2.缓冲液海绵(Buffered Sponges)缓冲液成分:碱性缓冲液含Tris-巴比妥盐,加稳定剂和防腐剂。
R:25 吞服有毒。
R:36/38 对眼睛和皮肤有刺激性。
R:52 对水生生物有害。
S:26 眼睛接触时,立即用大量流水冲洗。
S:46 如果吞服了,就医诊治。
备用:浸透的海绵可直接使用。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存。
缓冲液海绵在标签上的有效期内是稳定的。
缓冲液海绵超出有效期不能使用。
变质征兆:包装袋破裂或海绵变干,丢弃。
注意(N.B.):海绵上有时可能出现黑色或褐色斑点,这不影响结果质量。
3.溶血剂(Lysing solution)成分:氰化钾(Potassium Cyanide)水溶液,含防腐剂。
译注:1)2013/2/15测得Lysing solution 中K+为7.76mmol/L;2) HiCN试剂中KCN的浓度为0.76mmol/L;3)成人Hb参考值:男性7.45~9.94 mmol/L,女性6.83~9.32 mmol/L。
R:25 吞服有毒。
R:36/38 对眼睛和皮肤有刺激性。
R:52 对水生生物有害。
S:26 眼睛接触时,立即用大量流水冲洗。
S:46 如果吞服了,就医诊治,并出示容器标签。
备用:溶血剂可直接使用。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存。
变质征兆:出现混浊、沉淀。
重要:使用前检查溶血剂是否清澈。
4.酸性蓝染液(Acid Blue Stain Solution)成分:酸性蓝29的浓缩醋酸溶液。
译注:酸性兰29分子式:C22H16N6O9S2•Na2,分子量616.49,CAS No.5850-35-1。
R:10 易燃。
R:35 引起重度烧伤。
R:36/37/38 对眼睛、呼吸道及皮肤有刺激性。
S:23 不能呼吸蒸气。
S:26 眼睛接触时,立即用大量流水冲洗。
S:37/39 穿戴适合的防护手套和护目用具。
备用:用蒸馏水稀释浓缩染液至1L,混匀10分钟直至染料完全溶解。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存。
浓缩液在标签上的有效期内是稳定的。
稀释后的染色液拧紧瓶盖,室温(15~30℃)可稳定约6个月。
该染液的使用不能超过10个染色周期(10个凝胶板)!对于Interlab G26,该染液的使用不能超过5个染色周期(5个凝胶板)!变质征兆:无5.点样器洗液(Washing solution for applicators)成分:表面活性剂的水溶液,含防腐剂。
备用:洗液可直接使用。
变质征兆:出现混浊、沉淀。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存,在有效期内是稳定的。
6.一次性样品盘(Disposable sample plate)成分:一次性塑料板,上有样品小凹孔。
备用:一次性塑料板可以直接使用。
保存:室温(15~30℃)保存。
7.吸水纸(Blotters)成分:吸水纸片用于吸去琼脂糖凝胶板上过量的缓冲液。
备用:吸水纸可以直接使用。
保存:室温(15~30℃)保存。
8.脱色液(Destain solution)(SRE201M,不包含在本试剂盒中)成分:浓缩柠檬酸水溶液。
R:36/38 对眼睛和皮肤有刺激性。
R:41 对眼睛有严重损害的危险。
S:37/39 穿戴适合的防护手套和护目/脸用具。
备用:用蒸馏水稀释1ml SRE201M溶液至1L。
保存与稳定性:室温(15~30℃)保存至标签上的有效期。
稀释后室温下稳定2周。
变质征兆:出现混浊、沉淀,及黑色氧化斑点。
█ 操作注意事项与异常风险按当地法规进行安全的废弃物处理操作。
有关全部安全废弃物处理的信息,请查阅从供应商技术支持部门获得的试剂安全资料(Safety Sheet)。
采取措施防范与装置使用或处理相关的、不乐见的特殊或异常风险,包括保护措施,请查阅从供应商技术支持部门获得的试剂安全资料。
█ 标本采集、处理与保存按实验室程序采集全血样品,并符合优良实验室规范(GLP)指南。
选择EDTA管采集全血样品。
全血在2~8℃可保存1周。
不能使用溶血的全血样品。
在电泳的当天制备溶血液。
样品准备红细胞的洗涤1.全血在5000rpm离心5分钟。
2.吸去上层液体。
3.在试管中加2ml生理盐水,倾斜试管,使红细胞轻轻再悬浮。
4. 5000rpm离心5分钟,吸去上层液体。
5.重复步骤2和3,直至上层液体清澈、无色。
红细胞的溶解1.150μl溶血剂(SRE14OB)加50μl洗涤红细胞,混匀。
2.点样前,充分混匀溶血液,室温(15~30℃)放置5分钟。
重要:样品准备完后,如果放置2~8℃,溶血液可稳定12小时。
█ 如何启动分析Microgel/Interlab G26自动执行全部分析程序步骤:琼脂糖凝胶板上的点样、电泳、凝胶变性、凝胶染色与脱色、最后凝胶烘干与光密度扫描。
采用Elfolab/Microgel或Elfolab/Interlab G26软件启动分析。
Microgel注意:确保,如选定凝胶支架“左侧”位置用于装载凝胶板,“左侧”也用作清洗槽、样品槽的样品分发及电泳室插槽。
启动电泳分析前,先阅读Microgel/Interlab G26安装手册。
Ⅰ.电泳分析设置1.按说明书用恰当的溶液和体积充满容器。
容器 溶液 体积(L)脱色 脱色工作液 5染色1(Microgel) 稀释的酸性蓝染色液 1染色1(Interlab G26) 稀释的酸性蓝染色液0.21L2.打开Microgel/Interlab G26电源开关。