生物技术大实验考试复习题
生物技术实验技能考核
C.蛋白质工程
D.细菌转化
11.下列哪种方法通常用于细胞的原代培养？()
A.细胞扩散
B.细胞裂解
C.细胞传代
D.细胞冷冻
12.下列哪种技术常用于检测细胞内的蛋白质？()
A. ELISA
B. PCR
C.流式细胞术
D. X射线晶体学
13.下列哪个步骤不是凝胶电泳实验的一部分？()
A.制胶
2.在分子克隆过程中，质粒是最常用的运载体。（）
3. CRISPR-Cas9技术可以精确地对基因进行编辑，而不会产生非特异性效应。（）
4.细胞培养时，所有细胞都必须在相同的培养条件下生长。（）
5. Northern blot和Southern blot是用于检测DNA的相同技术。（）
6.流式细胞术可以用于分析细胞的大小、形状和表面标记。（）
B. TALEN
C. CRISPR-Cas9
D. RNAi
5.以下哪些是蛋白质工程的应用？()
A.生产胰岛素
B.抗体工程
C.酶的改造
D.药物设计
6.以下哪些是分子生物学中常用的标记技术？()
A.免疫荧光
B.同位素标记
C.绿色荧光蛋白
D.生物素标记
7.以下哪些是DNA提取过程中使用的试剂？()
A.蛋白酶K
5.下列哪个过程不是真核细胞基因表达的一部分？()
A.转录
B.翻译
C.转导
D.纺锤体形成
6.哪个实验室技术通常用于基因的定性和定量分析？()
A. Southern blot
B. Western blot
C. Northern blot
D. Eastern blot
生物实验复习题集及答案
生物实验复习题集及答案实验一：细胞的构造与功能题目1：细胞器的结构和功能答案：细胞器是细胞内的各种结构和器官，它们具有不同的形态和功能。
以下是一些常见细胞器的结构和功能：1. 线粒体：呼吸作用的场所，提供细胞所需的能量。
2. 内质网：合成、包装和运输细胞内物质的重要通道。
3. 高尔基体：负责合成和包装细胞分泌物或膜蛋白。
4. 核糖体：参与蛋白质的合成。
5. 溶酶体：消化和分解细胞内外的废物。
6. 核膜：包裹和保护细胞核。
题目2：光合作用与呼吸作用的比较答案：光合作用和呼吸作用是细胞内重要的代谢过程，二者有以下区别：1. 光合作用利用光能将二氧化碳和水合成有机物质，产生氧气。
呼吸作用利用有机物质分解产生能量，产生二氧化碳和水。
2. 光合作用发生在叶绿体中，呼吸作用发生在线粒体中。
3. 光合作用是一种兴奋性过程，需要光能参与。
呼吸作用属于一种有氧过程，需要氧气参与。
实验二：遗传与变异题目1：DNA复制的过程答案：DNA复制是细胞分裂过程中的重要步骤，具体包括以下几个步骤：1. 脱氧核苷酸的解旋：DNA双链解旋成两条单链。
2. 模板链的合成：DNA聚合酶从3'端向5'端在模板链上合成新的DNA链。
3. 拉链酶的作用：拉链酶通过连接互补的碱基对，将新合成的DNA链与模板链连接起来。
4. 终止：新合成的DNA链与模板链下游的DNA分子连接完成。
题目2：染色体变异的种类和影响答案：染色体变异是指染色体结构和数量发生异常的现象，种类较多，主要包括以下几种：1. 缺失：染色体上的一部分基因或染色体段缺失。
2. 倍数变化：染色体的数量出现变化，如三体、四体等。
3. 倒位：染色体上两个不同区域的片段发生交换。
4. 转座：染色体上的某个基因或片段移动到其他染色体上。
这些染色体变异会影响个体的遗传信息，导致遗传病的发生或个体特征的改变。
实验三：生态系统与环境保护题目1：生态系统的组成与功能答案：生态系统是由生物和环境组成的生态系统，它包括以下几个方面的组成与功能：1. 生物群落：由相互作用的不同物种组成的群体。
生物实验考试试题及答案
生物实验考试试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 下列哪项不是细胞的基本结构？A. 细胞膜B. 细胞壁C. 细胞质D. 细胞核答案：B2. 细胞分裂过程中，染色体的数目在哪个阶段加倍？A. 间期B. 有丝分裂前期C. 有丝分裂后期D. 减数分裂答案：C3. 光合作用中，光能被转化为化学能的阶段是？A. 光依赖反应B. 光合磷酸化C. 暗反应D. 呼吸作用答案：A4. 以下哪个不是线粒体的功能？A. 产生ATPB. 储存遗传物质C. 参与细胞呼吸D. 调节细胞死亡答案：B5. 以下哪个选项是真核细胞特有的结构？A. 核糖体B. 内质网C. 细胞膜D. 核糖体和内质网答案：D6. 基因突变是指什么？A. 基因序列的改变B. 染色体结构的改变C. 基因表达的改变D. 基因数量的改变答案：A7. 以下哪个不是细胞周期的阶段？A. G1期B. S期C. G2期D. M期答案：D8. 以下哪个是细胞凋亡的特征？A. 细胞体积增大B. 细胞膜破裂C. 细胞核浓缩D. 细胞质凝聚答案：C9. 以下哪个是细胞信号传导的第二信使？A. ATPB. cAMPC. 钙离子D. 所有选项都是答案：D10. 以下哪个是细胞骨架的组成部分？A. 微管B. 微丝C. 中间丝D. 所有选项都是答案：D二、填空题（每空2分，共20分）1. 细胞膜的主要功能是_________和_________。
答案：保护细胞内部结构；控制物质进出2. 细胞分裂的两种类型是_________和_________。
答案：有丝分裂；减数分裂3. 细胞周期包括_________、S期、G2期和M期。
答案：G1期4. 细胞凋亡是一种_________的细胞死亡方式。
答案：受控5. 细胞信号传导的第一步是_________。
答案：受体与配体结合三、简答题（每题15分，共30分）1. 描述细胞呼吸的过程，并简述其在细胞能量代谢中的作用。
答案：细胞呼吸是细胞将有机物质（如葡萄糖）氧化分解，释放能量的过程。
今年生物实验考试题及答案
今年生物实验考试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 细胞膜的主要功能是什么？A. 储存遗传信息B. 保护细胞内部结构C. 传递神经冲动D. 合成蛋白质答案：B2. 下列哪项不是线粒体的功能？A. 能量转换B. 细胞呼吸C. DNA复制D. 蛋白质合成答案：D3. 植物细胞特有的结构是：A. 叶绿体B. 线粒体C. 核糖体D. 高尔基体答案：A4. 以下哪种物质不是细胞壁的主要成分？A. 纤维素B. 木质素C. 蛋白质D. 胆固醇答案：D5. 细胞周期中，DNA复制发生在哪个阶段？A. G1期B. S期C. G2期D. M期答案：B二、填空题（每空1分，共10分）1. 真核细胞的细胞核中包含有_______，是遗传信息的主要储存场所。
答案：DNA2. 细胞膜的流动性是由于其组成成分中的_______和_______具有流动性。
答案：磷脂、蛋白质3. 光合作用中，光能被_______捕获，转化为_______能。
答案：叶绿素、化学4. 细胞分裂过程中，染色体数量加倍发生在_______期。
答案：有丝分裂5. 细胞凋亡是一种_______的细胞死亡过程。
答案：程序化三、简答题（每题10分，共20分）1. 描述一下细胞呼吸的过程，并说明其在细胞中的作用。
答案：细胞呼吸是细胞将有机物质氧化分解，释放能量的过程。
主要分为三个阶段：糖酵解、柠檬酸循环和电子传递链。
细胞呼吸的作用是为细胞提供能量，以维持细胞的各种生命活动。
2. 解释一下什么是基因表达，以及基因表达调控的基本机制。
答案：基因表达是指基因信息被转录成mRNA，然后翻译成蛋白质的过程。
基因表达调控的基本机制包括转录调控、mRNA的加工和降解、翻译调控等。
这些机制可以控制基因在特定时间和空间的表达，以适应细胞的生理需求。
四、实验题（每题15分，共30分）1. 实验目的：观察植物细胞的质壁分离和复原现象。
实验材料：洋葱鳞片叶表皮、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、0.3M 蔗糖溶液、清水。
生物实验考试题及答案
生物实验考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 细胞的基本结构包括：A. 细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核B. 细胞膜、细胞质、线粒体和叶绿体C. 细胞质、细胞核和核糖体D. 细胞膜、细胞质、细胞核和细胞器答案：D2. 以下哪个不是真核细胞的特征？A. 有核膜包围的细胞核B. 细胞质中存在多种细胞器C. 细胞壁由纤维素构成D. DNA与蛋白质形成染色体答案：C3. 光合作用中，光能被转化为：A. 热能B. 动能C. 化学能D. 电能答案：C4. 以下哪个过程不涉及DNA的复制？A. 细胞分裂B. 基因表达C. 细胞分化D. 有丝分裂答案：B5. 以下哪个是细胞呼吸的最终产物？A. 葡萄糖B. 二氧化碳和水C. 氧气D. 氨基酸答案：B6. 酶的催化作用主要依赖于：A. 酶的浓度B. 酶的活性中心C. 酶的温度稳定性D. 酶的分子量答案：B7. 以下哪个不是细胞周期的阶段？A. G1期B. S期C. G2期D. R期答案：D8. 基因突变可能导致：A. 染色体结构变异B. 基因表达的改变C. 细胞周期的改变D. 所有以上选项答案：D9. 以下哪个是孟德尔遗传定律？A. 基因型决定表型B. 显性基因掩盖隐性基因C. 基因独立分离D. 环境影响基因表达答案：C10. 以下哪个是生物进化的证据？A. 化石记录B. 物种的地理分布C. 比较解剖学D. 所有以上选项答案：D二、简答题（每题10分，共30分）1. 描述细胞分裂过程中的有丝分裂过程。
答案：有丝分裂是细胞分裂的一种方式，它包括四个阶段：前期、中期、后期和末期。
在前期，染色体复制形成姐妹染色单体，核膜和核仁消失。
中期时，染色体排列在细胞的中央形成赤道面。
后期，姐妹染色单体分离，向细胞两极移动。
末期，核膜和核仁重新形成，细胞质分裂，形成两个新的细胞。
2. 解释什么是基因重组，并给出一个例子。
答案：基因重组是遗传物质在生物体中重新排列的过程，它可以通过交叉互换或基因工程实现。
生物技术复习题(附参考答案)
生物技术复习题（附参考答案）一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、在DNA生物合成中，具有催化RNA指导的DNA聚合反应、RNA水解反应及DNA指导的DNA聚合反应三种功能的酶是A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、逆转录酶D、DNA水解酶正确答案：C2、有关辅酶的叙述正确的是( )A、为一种高分子化合物B、一种辅酶只能与一种酶蛋白结合C、不参与质子、电子及化学基团转移D、可决定酶的特异性E、与酶蛋白结合比较疏松正确答案：E3、用含Oligo-dT配基的纤维素柱层析提纯真核组织mRNA是非常有效的方法，这是因为mRNA含有A、m7Gppp的结构B、CCA-OH的结构C、poly(A)的结构D、poly(T)结构正确答案：C4、反竞争性抑制作用的描述是A、抑制剂既与酶结合又与酶-底物复合物相结合B、抑制剂使酶促反应的K m值升高，V max降低C、抑制剂使酶促反应的K m值降低，V max增高D、抑制剂只与酶-底物复合物相结合正确答案：D5、细菌芽孢释放的时期（）A、延滞期B、稳定期C、衰亡期D、指数期正确答案：C6、位于糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径、糖原合成和糖原分解各条代谢途径交汇点上的化合物是A、1-磷酸葡萄糖B、1，6-二磷酸果糖C、6-磷酸果糖D、6-磷酸葡萄糖正确答案：D7、胞质中的NADH可以进行下列哪项A、直接进入线粒体氧化B、将H交给FAD，生成FADH 2后进入线粒体氧化C、还原磷酸二羟丙酮后所生成的还原产物可进入线粒体D、由肉碱协助进入线粒体进一步氧化正确答案：C8、采用温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对物体本身基本无害的措施叫（）A、化疗B、消毒C、防腐D、灭菌正确答案：B9、氯仿在植物DNA提取过程中的作用,表述正确的是( )。
A、氯仿使蛋白质变性B、氯仿降低产生气泡C、氯仿除去多糖D、氯仿提取DNA正确答案：A10、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A、接种针、手、高压锅B、高压锅、手、接种针C、接种针、手、培养基D、培养基、手、接种针正确答案：D11、DNA拓扑异构酶的作用是A、将DNA双螺旋解链B、使DNA解链旋转时不致打结C、稳定解开的双螺旋D、将复制中不连续的两段链连接起来正确答案：B12、配制1000mL的固体培养基需加琼脂为（）A、2～7gB、50gC、10gD、15～20g正确答案：D13、仅适用于澄清液体和气体的灭菌方法是（）A、化学药品灭菌法B、湿热灭菌法C、干热灭菌法D、过滤除菌法正确答案：D14、尿素的合成过程称为A、嘌呤核苷酸循环B、柠檬酸循环C、鸟氨酸循环D、核蛋白体循环正确答案：C15、干热法常用于（）灭菌。
生物技术测试题(附参考答案)
生物技术测试题（附参考答案）一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、不能用干燥方法除去的水分是( )A、结合水分B、非结合水分C、自由水分D、平衡水分正确答案：D2、用牛肉膏作培养基能为微生物提供（）A、C 源B、N 源C、生长因素D、A，B，C都提供正确答案：D3、细菌的芽胞是（）A、细菌生长发育的一个阶段B、一种运动器官C、一种细菌接合的通道D、一种繁殖方式正确答案：A4、实验室常用的培养放线菌的培养基是（）A、麦芽汁培养基B、马铃薯培养基C、牛肉膏蛋白胨培养基D、高氏一号培养基正确答案：D5、血液NPN增高，其中最主要的物质是A、肌酸B、尿酸C、胆红素D、尿素正确答案：D6、5-羟色胺是由哪种氨基酸转变生成A、脯氨酸B、酪氨酸C、组氨酸D、色氨酸正确答案：D7、测定某一蛋白质样品的氮含量为2.0g，该样品中约含蛋白质A、11gB、13gC、14gD、12.5g正确答案：D8、下列哪种胆汁酸是次级胆汁酸A、牛磺胆酸B、鹅脱氧胆酸C、石胆酸D、甘氨胆酸正确答案：C9、细菌的基本形态是（）A、杆状B、球状C、螺旋状D、以上都是正确答案：D10、关于酮体的叙述正确的是A、是脂酸在肝中大量分解产生的异常中间产物，可造成酮症酸中毒B、各组织细胞均可利用乙酰CoA合成酮体，但以肝为主C、酮体只能在肝内生成，肝外利用D、酮体氧化的关键酶是乙酰乙酸转硫酶正确答案：C11、细胞质内生成乳酸的代谢途径是A、脂肪酸合成B、脂肪酸β氧化C、糖酵解D、磷酸戊糖途径正确答案：C12、cDNA是指A、在体外经逆转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经逆转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD、在体内经逆转录合成的与RNA互补的DNA正确答案：A13、实验室中含糖培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是( )A、121℃/50minB、115℃/10minC、140℃/30minD、115℃/30min正确答案：D14、以下哪种方法保藏菌种最好（）A、斜面低温保藏B、砂土管保藏法C、冷冻真空干燥法D、石蜡油封法正确答案：C15、革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为（）A、黄色B、紫色C、无色D、红色正确答案：B16、过滤和培养的耦合是把一定浓度发酵液通过( )进行过滤,使培养液中的培养基成分和溶解的胞外产物随滤液排出,而菌体则循环回反应器继续进行发酵。
生物实验大赛试题及答案
生物实验大赛试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 细胞分裂过程中，染色体数量加倍的时期是：A. 有丝分裂前期B. 有丝分裂中期C. 有丝分裂后期D. 有丝分裂末期答案：C2. 以下哪种物质不是细胞膜的主要成分？A. 磷脂B. 蛋白质C. 糖类D. 核酸答案：D3. 光合作用中，光能转化为化学能的场所是：A. 叶绿体B. 线粒体C. 细胞核D. 细胞质答案：A4. 以下哪种激素是由胰腺分泌的？A. 胰岛素B. 甲状腺激素C. 肾上腺素D. 性激素答案：A5. 细胞呼吸过程中，释放能量最多的阶段是：A. 糖酵解B. 柠檬酸循环C. 电子传递链D. 无氧酵解答案：C二、填空题（每空1分，共10分）1. 细胞膜的主要功能是________和________。
答案：保护细胞内部结构，控制物质进出2. 植物细胞特有的细胞器是__________。
答案：叶绿体3. DNA复制过程中，需要的酶是__________。
答案：DNA聚合酶4. 人体免疫系统中，负责特异性免疫的是__________细胞。
答案：淋巴5. 植物细胞壁的主要成分是__________。
答案：纤维素三、简答题（每题5分，共20分）1. 描述细胞周期的各个阶段及其特点。
答案：细胞周期包括间期和有丝分裂期。
间期又分为G1期、S期和G2期。
G1期细胞生长，准备DNA复制；S期DNA复制；G2期细胞继续生长，准备有丝分裂。
有丝分裂期包括前期、中期、后期和末期，细胞核和染色体的变化是主要特征。
2. 简述光合作用的过程。
答案：光合作用是植物、藻类和某些细菌利用光能将二氧化碳和水转化为葡萄糖和氧气的过程。
光反应阶段在叶绿体的类囊体膜上进行，光能被叶绿素吸收，产生ATP和NADPH。
暗反应阶段在叶绿体的基质中进行，利用ATP和NADPH将二氧化碳转化为葡萄糖。
3. 描述人体免疫系统的三道防线。
答案：第一道防线是皮肤和粘膜，它们可以阻挡病原体侵入；第二道防线包括体液中的杀菌物质和吞噬细胞，它们可以消灭病原体；第三道防线是特异性免疫，由免疫器官和免疫细胞组成，可以识别并攻击特定的病原体。
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生物技术大实验一、核酸凝胶电泳的基本原理是什么？（1）核酸分子糖—磷酸骨架中的磷酸集团，呈负离子化状态；核酸分子在一定电场强度的电场中，他们会向正极移动。
（2）电泳中使用无反应活性的稳定支持介质，电泳迁移率与与分子摩擦系数成反比。
物质在电场作用下的迁移速度叫作电泳的速率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的磨擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。
因此，可在同一凝胶中、一定电场强度下分离出不同分子量大小或相同分子量而构型有差异的核酸分子。
二、CTAB法提取植物总DNA中CTAB的中文名称及其作用原理是什么？CTAB的全称是十六烷基三甲基溴化铵基因组DNA的提取包括组织粉碎，细胞膜破坏，蛋白质去除和DNA的沉淀.一般取植物的幼嫩组织，其DNA含量丰富，组织易于破碎。
组织破碎方法有很多种，可以研磨，捣碎机捣碎，超低温冷冻使组织细胞间结冰，稍加研磨即可以粉碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。
DNA提取缓冲液主要是由对DNA有稳定作用的盐如Tris,EDTA和破坏细胞的试剂SDS或者CTAB组成。
蛋白质的去除是用苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。
上清液中加入异丙醇或无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，之后用RNase处理去除少量的RNA，即得植物总DNA溶液。
三、SDS-PAGE电泳的基本原理是什么？SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）是蛋白分析中最经常使用的一种方法，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基磺酸钠），它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠（SDS）以及巯基乙醇一起加热，SDS能断裂分子内和分子间氢键，使蛋白变性，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。
当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b 均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
用SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白质的分子量和纯度。
在4%浓缩胶和12%分离胶上，以标准分子量蛋白（Protein Marker,High 29-205 kDa）为对照，电泳分离。
经考马斯亮蓝-R250染色和脱色液脱色后，比较样品与标准分子量蛋白的迁移率，确定蛋白质的分子量及酶制剂纯度。
四、RNA提取过程中的注意事项有哪些？RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。
高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。
细胞裂解后，除了RNA，还有DNA、蛋白质和细胞碎片，通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。
注意事项1. 从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。
例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。
糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml 是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2. 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。
RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3. 分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
预期产量：1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为：肝和脾6-10μg ,肾3-4μg ,骨骼肌和脑组织1-1.5μg ,胎盘1-4μg ,上皮细胞8-15μg ,成纤维细胞5-7μg 。
常见问题分析：得率低：A.样品裂解或匀浆处理不彻底B. RNA沉淀未完全溶解A260/A280<1.65 ：A.检测吸光度时，RNA样品没有溶于水，而溶于了TE中。
低离子浓度和低pH值条件下A280值偏高B．样品匀浆时加的试剂量太少C. 匀浆样品时未在室温放置5分钟D. 吸取水相时混入了有机相E .RNA沉淀未完全溶解。
RNA降解：A.组织取出后没有马上处理或冷冻B. 待提取RNA的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃C. 细胞在用胰酶处理时过度D. 溶液或离心管未经RNase去除处理E. 电泳时使用的甲醛pH值低于了3.5DNA污染: A. 样品匀浆时加的试剂量太少B. 样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液蛋白聚糖和多糖污染: 沉淀RNA的过程中作以下改进可去除这些污染，步骤7中,每使用1ml TRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2M NaCl)混合离心,按之前操作进行。
这种方法可使蛋白聚糖和多糖留在溶液中，高效沉淀出纯RNA。
从含有大量多糖的植物中提取RNA时应在匀浆后离心，并加上以上操作步骤。
4. 在研磨过程中，利用液氮时刻使组织保持冰冻状态。
5. RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶类，除了细胞内源RNA酶外，外界环境中均存在RNA酶，所以操作时应戴手套，并注意时刻换新手套。
五、DEPC的中文名称汲取作用原理焦碳酸二乙酯（DEPC）：是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。
它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。
六、感受态细胞的定义及其制备流程。
经过适当处理后容易接受外来DNA进入的细胞。
如大肠杆菌经CaCl2处理，就成为容易受质粒DNA转化的细胞。
（1）取一支无菌的摇菌试管，在超净工作台中加入2ml LB（不含抗菌素！）培养基。
（2）从超低温冰柜中取出DH5 菌种，放置在冰上。
在超净工作台中用烧红的接种环插入冻结的菌中，然后接入含2ml LB 培养基的试管中，37℃摇床培养过夜。
（3）取0.5ml 上述菌液转接到含有50mL LB 培养基的三角烧瓶中，37℃下250r/min 摇床培养2—3h，测定OD590为0.375（<0.4 0.6，细胞数<108/mL，此为关键参数！）。
以下操作除离心外，都在超净工作台中进行。
（4）将菌液分装到1.5mL 预冷无菌的聚丙烯离心管中，于冰上放置10min，然后于4℃，5000rpm 离心10min。
（5）将离心管倒置以倒尽上清液，加入1ml 冰冷的0.1 mol/L CaCl2 溶液，立即在快速混匀器上混匀，插入冰中放置30min。
（6）4℃，5000rpm 离心10min，弃上清液后，用1mL 冰冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重悬，插入冰中放置30min。
（7）4℃，5000rpm 离心10min，弃上清液后，用200¦ L 冰冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重，超净工作台中按每管100 L 分装到1.5mL 离心管中。
可以直接用作转化实验，或立即放入-80℃超低温冰柜中保藏（可存放数月）。
七、Taq酶蛋白提取过程中基于哪些原理？在PCR循环的高温条件下仍能保持较高的活性八、PCR技术的原理是什么？有那些作用？PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR），是与发生在细胞内的DNA复制过程相似的技术，其结果都是以原来的DNA为模板产生新的互补DNA片段。
PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理与细胞内DNA复制相似，但反应体系相对较简单。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。
九、PCR反应的组分有哪些？主要起到什么作用？十、碱式裂解法提取质粒DNA的实验流程是什么？溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的组成及作用原理？实验步骤1.氨苄青霉素过滤灭菌：首先灭菌滤头、滤膜、注射器、超纯水、1.5ml EP管；再按比例溶解氨苄青霉素；过滤灭菌。
2.挑选一个单菌落，接种到5 ml离心管含适当抗生素（氨苄青霉素100 mg/L）的3ml LB培养液中，37℃振荡培养12-16小时。
3.取1.2 ml菌液于1.5ml EP管中，12,000rpm离心1分钟，收集菌体，重复一次。
4.加入预冷的溶液I 100μl，涡旋振荡充分悬浮，分散，混匀，冰浴5分钟 (重悬细胞)。
5.加入200μl溶液Ⅱ(现配)，快速轻柔颠倒几次，直至溶液澄清，保持冰浴 (碱变性染色体DNA、蛋白质)。
6.在5分钟内，加入溶液III 150μl，轻柔颠倒5-10次，冰浴10分钟（利用pH差异，复性质粒DNA）7.12,000rpm离心10分钟，沉淀染色体DNA，及不溶的变性蛋白，取上清。
8.上清液加入2倍体积无水乙醇，混匀后，室温放置10-15分钟。
9.在12,000rpm离心10分钟得到质粒DNA沉淀。
10.去上清，加入1ml 75%乙醇，洗涤沉淀。
11.12,000rpm 离心10分钟。
12.去上清，吸出痕量剩余乙醇，风干。
13.加入30-50μl ddH2O溶解质粒DNA，-20℃保存。
十一、设计在大肠杆菌中表达Taq聚合酶的实验流程。
实验目的了解通过诱导重组DNA表达目的基因的技术实验原理克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。
这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。
大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。