多糖的提取纯化研究
多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展

多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展多糖是一类由多个单糖单元组成的生物大分子,具有多种生物活性和广泛的应用价值。
多糖的提取、纯化、化学修饰和抗氧化性研究是多糖研究中的重要内容。
本文将对多糖提取纯化、化学修饰和抗氧化性的研究进展进行综述。
多糖的提取纯化是多糖研究的第一步,目前常用的多糖提取方法有酸碱法、酶解法和热水法等。
酸碱法是最常用和经济的提取方法。
在酸碱法中,多糖首先通过酸处理将其脱除,然后用碱中和溶液pH值调整至碱性,在极性溶剂中进行提取。
酶解法是一种通过酶分解作用将多糖从生物背景中提取出来的方法。
热水法是将生物样品与水加热浸泡,使多糖溶解于水中,然后通过沉淀、离心等步骤来纯化。
多糖的化学修饰是利用化学反应将不同的官能团引入到多糖分子中,从而改变多糖的结构和性质。
常用的多糖化学修饰方法有酯化、醚化、磷酸化和羟烷化等。
酯化是将多糖上的羟基与酸反应形成酯键的过程,可以增加多糖的溶解性和稳定性。
醚化是将多糖上的羟基与醇反应形成醚键的过程,可以提高多糖的溶解性和抗氧化性。
磷酸化是将多糖上的羟基与磷酸反应形成磷酸酯键的过程,可以提高多糖的生物活性和生物相容性。
羟烷化是将多糖上的羟基与环氧丙烷反应形成环氧丙基键的过程,可以增强多糖的交联性和机械强度。
多糖具有显著的抗氧化性,可以作为天然抗氧化剂应用于食品、生物医药和化妆品等领域。
多糖的抗氧化性主要通过清除自由基、抑制氧化酶活性、增强抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化等机制实现。
目前,越来越多的研究表明多糖的抗氧化性与其结构和物理化学性质密切相关。
多糖的抗氧化性受多糖分子量、空间构象、结构稳定性、官能团等因素的影响。
通过多糖的化学修饰来改变多糖的结构和性质,可以进一步提高其抗氧化性能。
多糖提取纯化、化学修饰和抗氧化性研究是多糖研究中的重要内容。
多糖的提取纯化方法有酸碱法、酶解法和热水法等。
多糖的化学修饰方法有酯化、醚化、磷酸化和羟烷化等。
多糖具有显著的抗氧化性,其抗氧化性与其结构和物理化学性质密切相关。
多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展

多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展多糖是一类含有多个糖基的生物高分子化合物,广泛存在于植物和动物体内。
多糖具有多种生理功能,如调节免疫系统、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等。
多糖的提取纯化、化学修饰和抗氧化性研究对于开发多糖的生物活性和应用具有重要意义。
多糖的提取和纯化是多糖研究的基础工作。
传统的多糖提取方法包括浸提法、酶解法和离子溶液沉淀法等。
浸提法是将原料与溶剂接触,在适当条件下提取多糖。
酶解法是通过适当的酶对原料进行酶解,从而获得多糖。
离子溶液沉淀法是利用离子溶液与多糖反应,形成离子复合物,再通过沉淀和洗涤等步骤获得纯净的多糖。
还有一些新型的多糖提取方法,如超声波辅助法、微波辅助法和离子液体辅助法等。
这些新型的提取方法能够更高效、更快速地提取多糖,并且能够减少对环境的污染。
多糖的纯化是为了去除多糖样品中的杂质,提高多糖的纯度。
目前常用的纯化方法有超滤、透析、凝胶渗透层析和离子交换层析等。
超滤是利用超滤膜的筛分作用,将多糖和较小分子的杂质分离。
透析是通过半透膜的选择性渗透,将多糖和低分子物质分开。
凝胶渗透层析是利用凝胶颗粒的孔隙大小分离不同分子大小的物质。
离子交换层析是通过阳离子交换剂和阴离子交换剂对多糖样品进行交换,从而实现多糖的分离纯化。
化学修饰是将多糖分子与化学试剂反应,改变多糖的化学结构和性质。
常用的化学修饰方法有酯化、醚化、羧化、硫酸化和甲基化等。
酯化是将多糖中的羟基与酸反应,形成酯键的修饰方法。
醚化是将多糖中的羟基与醚试剂反应,形成醚键的修饰方法。
羧化是将多糖中的羟基与羧基试剂反应,形成酯键或酰胺键的修饰方法。
硫酸化是将多糖中的羟基与硫酸试剂反应,形成硫酸酯的修饰方法。
甲基化是将多糖中的羟基与甲基试剂反应,形成甲基基团的修饰方法。
化学修饰能够改变多糖的理化性质和生物活性,拓宽多糖的应用领域。
多糖的抗氧化性是指多糖对有害自由基的清除能力和抑制氧化反应的能力。
多糖的抗氧化性主要通过两种方式实现:直接清除自由基和间接抑制氧化反应。
植物多糖提取与纯化方法的步骤与技巧

植物多糖提取与纯化方法的步骤与技巧植物多糖是一类具有广泛生物活性的天然产物,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。
因此,植物多糖的提取与纯化方法备受关注。
本文将介绍植物多糖提取与纯化的步骤与技巧,以帮助读者更好地了解和应用这些方法。
首先,植物多糖的提取需要选择适当的溶剂。
常用的提取溶剂包括水、醇类和酸碱溶液。
水是最常用的提取溶剂,因为植物多糖多为水溶性。
但有些植物多糖在水中溶解度较低,此时可以选择醇类溶剂如乙醇、丙醇等。
酸碱溶液的选择要根据不同的植物多糖来确定,一般来说,酸性条件有利于提取酸性多糖,碱性条件有利于提取碱性多糖。
其次,植物多糖的提取需要注意样品的准备。
样品的选择要根据植物多糖的来源来确定,可以是植物的根、茎、叶、果实等部位。
样品在提取前需要经过粉碎处理,以增加提取效果。
此外,样品的质量也会影响提取效果,因此要选择新鲜、干燥、无霉变的样品。
接下来是植物多糖的提取步骤。
一般而言,提取步骤包括浸提、过滤、浓缩和沉淀等。
浸提是将样品与提取溶剂接触一段时间,使植物多糖溶解到溶剂中。
过滤是将提取液中的固体颗粒去除,以获得澄清的提取液。
浓缩是将澄清的提取液进行浓缩,以减少体积。
沉淀是通过加入沉淀剂使植物多糖从溶液中沉淀出来,然后通过离心等方法将沉淀物收集。
在提取过程中,还需要注意一些技巧。
首先是浸提时间的控制,过短的浸提时间可能导致多糖未能充分溶解,过长的浸提时间可能导致多糖的降解。
因此,需要根据不同的植物多糖来确定合适的浸提时间。
其次是提取溶剂的选择和用量,溶剂的选择要根据植物多糖的特性来确定,用量要适量,既能保证提取效果又能节约溶剂。
此外,还可以采用超声波辅助提取、微波辅助提取等方法来提高提取效率。
提取完成后,还需要对提取液进行纯化。
纯化的目的是去除杂质,提高植物多糖的纯度。
常用的纯化方法包括醇沉、蛋白酶处理、离子交换层析、凝胶过滤层析等。
醇沉是将提取液中的植物多糖用醇类溶剂沉淀出来,然后通过离心等方法将沉淀物收集。
多糖的提取和纯化

多糖的提取和纯化目前,真菌多糖的提取可从子实体和采用深层培养发酵液的菌丝中分离获得,但以从子实体中提取多糖为主。
首先是将子实体粉碎,加入甲醇或乙醇乙醚1:1混合液,水浴加热搅拌1一3小时除去表面脂肪。
其次是用残渣提取多糖,常用的方法有不同温度下的水提法、稀酸提法、冷热稀碱提法。
水提法采用的较多,适合于提取水溶性多糖。
稀酸提取法适用于提取酸溶性多糖、时间宜短,温度不超过50℃,以防止糖昔键断裂。
稀碱法适合于提取碱溶性糖。
然后除去小分子杂质,常采用透析法,将多糖提取液置于半透膜透析袋中,逆向流水透析1一3天。
第四步是沉淀多糖。
大部分多糖在有机溶剂中的溶解度极小,所以可用有机溶剂来沉淀。
常用4一5倍低级醇、丙酮,一般在pH=7.0左右沉淀多糖,制得粗多糖。
最后是除去蛋白质。
除去多糖中的蛋白质常用的方法是三氯醋酸法。
得到的溶液基本上是没有蛋白质与小分子杂质的多糖混合物或单一多糖。
多糖的纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖。
纯化方法很多,主要纯化方法有:(l)分步沉淀法根据不同多糖在不同浓度的低级醇或酮中具有不同溶解度的性质,逐次按比例由小而大加入这些醇或酮分步沉淀。
此法适用于分离各种溶解度相差较大的多糖。
(2)盐析法根据不同多糖在不同浓度盐中具有不同溶解度而分离。
纯度鉴定和分子量测定多糖纯度标准不能用通常化合物纯度标准来衡量,因为我们所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围内的均一组成。
因此,测得的分子量一般为平均分子量。
过去常用粘度法、蒸气压渗透计法、沉降法、超速离心法、光散射法等测定高分子化合物分子量的方法测定真菌多糖的分子量,但由于这些方法测定起来比较麻烦,且误差较大,现多数已不采用。
目前实验室常用的方法为凝胶过滤法和高压液相色谱法,对于分子量小于1百万的多糖用高压液相法为最好。
1.2.1发酵、提取取香菇465菌株斜面菌种接人摇瓶培养基中振荡培养,逐级扩大培养至10O0L,25℃下通气培养72h,压滤,得香菇深层培养菌丝体。
多糖的提纯化技术

多糖的提纯化技术
溶剂提取法
(1) 水提法:以水为溶剂,可采用热水浸提或冷水浸提(植物多糖多采用热水浸提,可直接或离心去除杂质),由于多糖不溶于乙醇,可通过沉淀将多糖提纯出来。
水提法的确缺点在于温度高、耗时长、提取率低。
(2) 酸提法:有些含酸性基团的多糖在酸性条件下不易溶解,可用盐酸或乙酸处理后,再用乙醇或不溶性络合物将多糖沉淀出来。
酸提法容易破坏多糖的空间结构,一般较少使用。
(3) 碱提法:一些含有糖醛酸的多糖和酸性多糖在碱性条件下都比较稳定,可提高多糖的提取率,一般用硼氢化钠或硼氢化钾作为溶剂。
碱提法的不足之处在于某些多糖在碱性较强时会降解,而且容易影响成品的色泽和风味。
多糖的提取和纯化

多糖的提取和纯化Company Document number:WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT多糖的提取和纯化→粉碎→脱脂→粗提(2-3次)→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
原料经粉碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或1:1的乙醇乙醚混合液,水浴加热搅拌或回流1-3小时,脱脂后过滤得到的残渣一般用水作溶剂(也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1%醋酸和1%苯酚或-1M氢氧化钠作为提取溶剂)提取多糖。
温度控制在90-100℃,搅拌4-6小时,反复提取2-3次。
得到的多糖提取液大多较粘稠,可进行吸滤。
也可用离心法将不溶性杂质除去,将滤液或上清液混合(得到的多糖若为碱性则需要中和)。
然后浓缩,再加入2-5倍低级醇(甲醇或乙醇)沉淀多糖;也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三甲基铵等,与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。
然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。
将洗干后疏松的多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥(若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时,可直接冷冻干燥)。
干燥后可得粉末状的粗多糖。
微波辅助提取法:其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度,使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使萃取物质从基体或体系中分离出来,进入到介电常数小,微波吸收能力较差的萃取剂中[14]。
由于微波能极大加速细胞壁的破裂,因而应用于中草药中有效成分的提取能极大加快提取速度,增加提取产率。
而且由于其选择性好,提取后基体能保持良好的性状,提取液也较一般的提取方法澄清[15]。
聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取[18]中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较,发现微波辅助提取法所需时间最短(10min),多糖的提取率最高(%)。
超声辅助法:其原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取[16]。
多糖分离纯化

多糖分离纯化1. 概述多糖是由许多重复单元组成的生物大分子,具有广泛的生物功能和应用价值。
多糖的分离纯化是从混合物中分离出目标多糖并提高纯度的过程。
本文将介绍多糖分离纯化的常用方法和技术,以及其在食品、药品和生物工程等领域的应用。
2. 多糖的分离方法多糖的分离方法主要包括溶剂沉淀、离子交换、凝胶过滤、超滤、逆流层析、电泳和气相色谱等。
下面将分别介绍这些方法的原理和应用情况。
2.1 溶剂沉淀溶剂沉淀是利用溶剂的物理性质,如极性和温度等,使多糖在溶液中发生相分离的方法。
通常采用醇类溶剂,如乙醇或异丙醇。
溶剂沉淀适用于多糖与其他溶质的溶解度差异较大的情况,但纯度较低。
2.2 离子交换离子交换是利用离子交换树脂上的功能基团与多糖分子间发生离子交换反应的方法。
树脂的功能基团可以选择性吸附或释放多糖分子。
离子交换适用于多糖的分子量差异较大的情况,例如海藻酸和壳聚糖的分离。
2.3 凝胶过滤凝胶过滤是利用凝胶的孔隙结构将分子按大小分离的方法。
多糖分子较大,可以被凝胶孔隙排除,而小分子可以通过凝胶透过。
凝胶过滤常用于多糖与其他小分子的分离,如蛋白质和核酸。
2.4 超滤超滤是利用超滤膜的孔隙结构将溶液分离的方法。
超滤膜的孔径可以根据需要选择,通常是分子量截留范围在1 kDa至100 kDa之间。
超滤适用于多糖与其他大分子的分离,如蛋白质和核酸。
2.5 逆流层析逆流层析是利用多糖与填料间的亲和作用进行分离的方法。
填料可以是具有特定亲和性的配体,如亲和树脂。
逆流层析适用于分子间相互作用较强的多糖分离。
2.6 电泳电泳是利用电场作用将分子按电荷和大小进行分离的方法。
多糖可根据电荷差异选择合适的电泳方法,如聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳。
电泳在多糖的分子量分析和负载量测定中广泛应用。
2.7 气相色谱气相色谱是利用样品在气相载体中的分配和迁移以实现分离的方法。
多糖需要经过甲硅烷衍生化处理后才可以进行气相色谱分析。
气相色谱适用于多糖的含量测定和结构分析。
多糖提取实验报告

一、实验目的1. 了解多糖的基本概念、性质和分类;2. 掌握多糖提取的基本原理和实验方法;3. 学习利用水提法、醇沉法等方法提取多糖;4. 掌握多糖的纯化、鉴定和含量测定方法。
二、实验原理多糖是一类由单糖分子通过糖苷键连接而成的天然高分子化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗病毒等。
本实验主要采用水提法、醇沉法等方法提取多糖,并对其纯化、鉴定和含量进行测定。
三、实验材料1. 实验材料:植物样品(如玉米、小麦、胡萝卜等);2. 实验试剂:蒸馏水、乙醇、丙酮、苯酚、硫酸、蒽酮、葡萄糖标准品等;3. 实验仪器:组织捣碎机、离心机、分光光度计、磁力搅拌器、容量瓶、移液管、试管等。
四、实验方法1. 植物样品预处理:将植物样品洗净、晾干、磨碎,过筛,得到植物粉末。
2. 水提法提取多糖:(1)称取一定量的植物粉末,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(2)在80℃条件下加热提取2小时;(3)冷却后,用离心机分离溶液和沉淀;(4)取上清液,加入乙醇,使多糖沉淀;(5)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到粗多糖。
3. 醇沉法提取多糖:(1)称取一定量的植物粉末,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀;(2)在80℃条件下加热提取2小时;(3)冷却后,用离心机分离溶液和沉淀;(4)取上清液,加入丙酮,使多糖沉淀;(5)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到粗多糖。
4. 纯化多糖:(1)将粗多糖溶解于适量的蒸馏水中;(2)加入适量的苯酚,使多糖与苯酚形成复合物;(3)离心分离,收集沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀,干燥,得到纯多糖。
5. 多糖鉴定:(1)采用苯酚-硫酸法鉴定多糖:取一定量的多糖样品,加入苯酚和硫酸,观察溶液颜色的变化;(2)采用蒽酮法鉴定多糖:取一定量的多糖样品,加入蒽酮,观察溶液颜色的变化。
6. 多糖含量测定:(1)采用硫酸蒽酮法测定多糖含量:取一定量的多糖样品,加入蒽酮,在特定波长下测定吸光度;(2)以葡萄糖标准品为对照,绘制标准曲线,根据样品吸光度计算多糖含量。
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f 1 . Xi n y a n g Ag r i c u l t u r a l P r o d u c t s Qu a l i t y S a f e t y T e s t i n g C e n t e r , Xi n y a n g 4 6 4 0 0 0 , Ch i n a ; 2 . C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e , Xi n y a n g No r ma l Un i v e r s i t y , Xi n y a n g 4 6 4 0 0 0 , C h i n a )
水解 法 、超 临界 C O 2 萃 取 、高速 逆流 色谱提 取法 六种 . 选 择不 同 的溶剂 、不 同的提 取方 法 ,可得 到不 同组
分 和活性 的多糖 1 .因此本 文 就多 糖 的提取 纯 化方 法作 了综 述 ,旨在 为多糖 的深入 研究 及 开发利 用 提供 参
考.
1 多 糖 的 提 取
多糖 提取 方法 ,通 常在 热水 浸提法 的基 础上 ,辅 助采 用酶解 、微 波 、超声 波等方 法 ,以进 一 步提 高多糖 得
率.
1 . 1 溶 剂 提 取 法
溶 剂 提 取法 首 先 是根 据 多糖 不 同 的溶 解度 选 择 一种 溶剂 ,对 多糖 进 行提 取 .最 常用 的溶 剂 是水 ( 冷 或 温) 、稀 醇 、碱金 属氢 氧化物 或碱 金属 碳酸盐 的稀 水溶 液( 5 %以下) 以及 0 . 5 %~ 1 %草 酸铵 溶液 .二 甲亚 砜是 一 种提 取多 糖 的 良好 溶剂 ,能 够溶解 大 多数 的多糖 ,且 具有化 学惰 性 ,对 乙酰多糖 也可 溶解 而 不影响 其 乙酰 基 团等优 点 ,但其 价格 昂贵 ,对人体 有 害 ,限制 了其 大规模 应用 【 3 】 .水提 醇沉 法是 目前 提取 多糖应 用最 多 的
摘
要 : 研 究 了 多糖 的提 取 纯 化 方 法 ,提 出 了将 来 的 研 究和 发 展 方 向 .
关 键 词 : 多 糖 ;提 取 方 法 ; 纯 化
中 图分 类 号 :T S 2 0 1 . 1
文献 标 志码 :A
文 章编 号 :1 6 7 4 - 3 3 2 6 ( 2 0 1 3 ) 0 4 — 0 2 5 8 — 0 5
收 稿 日期 :2 0 1 3 - 0 6 — 0 2
修 回 日期 :2 0 1 3 - 0 7 — 1 9
作者简介 :马世 民( 1 9 6 5 一) ,男,河 南罗山人.高级农艺师 ,研 究方向 :农产品检 测. E - ma i l : ms m0 5 1 9 @1 6 3 . c o m.
O 引 言
多糖( p o l y s a c c h a r i d e s ) X称 多聚糖 ,是 由多个 醛糖 或 酮糖脱 水形 成 的糖 苷键 以线 性或分 枝连 接而 成 的链 状聚合 物 , 相 对分 子量 通常达 到数 万到数 百 万[ ” .目前多糖 研究 主要 以真 菌 、 植物 为 主 ,动物 多糖研 究相对 较少 ,昆虫 多糖研 究更 少 .国内外越 来越 多 的研究 结果表 明 ,多糖在 抗肿 瘤 、免疫 调 节 、抗 衰老 、降 血糖 、 抗病 毒等 方 面具有 良好 的活性作 用 .多糖 的提 取方 法常 用 的有水 提法 、酸 液提 取法 、碱 液 提取法 、蛋 白酶
Abs t r a c t : Ex t r a c t i o n a n d p u r i ic f a t i o n o f p o l y s a c c h a r i d e s i s s t u d i e d a t p r e s e n t a n d i n t h e f u t u r e s t u d y a n d d e v e l o p me n t d i r e c t i o n s a r e p r o p o s e d . Ke y wo r d s : p o l y s a c c ha r i d e s ;e x t r a c t i o n me t h o d s ; p u r i ic f a t i o n
S t u d y oa t i o n Me t h o d s 0 f P0 l y s a c c h a r i d e s
M A Sh i — mi n . TI AN H ua ‘
第3 0卷 第 4期
、 厂 0 1 . 3 0 N O. 4
新 乡学院学报 (自然科 学版 )
J o u r n a l o f Xi n x i a n g U n i v e r s i t ) r ( N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n )
2 0 1 3年 8月
Au g. 201 3
多糖 的提取纯化研 究
马世 民 , 田 华
(1 . 信 阳市农产 品质量 安全检 测 中心 ,河 南 信 阳 4 6 4 0 0 0 ;2 . 信 阳师 汜 a 4 - 学 院 生命 科 学 学院 ,河南 信 阳 4 6 4 0 0 0)