地中海贫血筛查
地中海贫血筛查检测ppt课件
轻型（标准型）a-地贫 出生时脐血血红蛋白Hb Bart's （a a /--）或（a-／a-） 占5％-10% 血红蛋白H病 （-a /--），或（a -/-），或（a aT /--），或 （a aT／a aT）
患者多无明显临床症状,实验室检 查可小细胞低色素性贫血，MCH 和MCV均较低．
出生时脐血Hb Bart's约占20％- 终生轻度至中度贫血和肝脾肿大 30％，此时HbH含量较低；但 等，但差异较大 .实验室检查可 出生后Hb Bart's含量迅速降低， 见小细胞低色素性贫血，红细胞 HbH含量逐渐增高。通常成年 内可见包涵体． 期患者HbH含量会持续在4%20%范围内。
地中海贫血的临床特征
小细胞低色素性溶血型贫血(中、重度)
黄疸
肝脾肿大 (脾大明显)
骨髓扩增
发育迟缓
合并感染 Bart’s 水肿胎(α地贫,宫内或出生后数小时内死亡)
地贫血液学分析
• 最常用的方法:
红细胞平均容积(MCV)、红细胞脆性试验、 Hb电泳联合检测进行筛查,发现异常者再 进行基因诊断。
地中海贫血的血液学表型特征
1 2 3 4
500V, 25min
5
全自动血红蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱
1、正常成人HbA2,无HbF区带; 2、成人HbA2升高,但HbF碱变性含量正常,图谱中不能扫描出HbF区带; 3、成人HbA2升高,HbF碱变性含量稍高于正常,图谱中可见浅染HbF区带; 4、成人HbA2升高,HbF碱变性含量高于正常,图谱中可见一浅染HbF区带; 5、成人HbA2升高,HbF碱变性含量明显高于正常,图谱中可见一清晰HbF 区带。
小红细胞正色素性贫血
<80
< 80 ＞94
地中海贫血筛查简介
地中海贫血筛查简介展开全文1、什么是地中海贫血症？地中海贫血（简称地贫），最早发现于地中海地区的人群，故称地中海贫血。
是一种由于珠蛋白基因缺失或突变导致肽链合成障碍而引起的溶血性贫血，是我国南方地区常见的单基因遗传病，在广东、广西两省发病率最高，湖南省亦属高发地区。
正常人的血红蛋白是有α、β两类肽链组成的四聚体，由于基因突变，α和β肽链表达量降低，导致两者的比例不平衡，使得血红蛋白合成缺陷，红细胞容易破裂从而引发溶血性贫血。
2、地中海贫血分类及临床症状根据突变基因类型不同，地中海贫血主要可分为a-地贫和b-地贫两类。
α 肽链基因位于人类第16号染色体上，有α1、α2两个基因，一个正常人有4个α基因。
α地中海贫血就是由于α基因缺失或者突变，使得α肽链合成量下降，胎儿体内过多的HbBart’s(γ4)，或者成人体内过多的β珠肽链形成HbH（β4），导致无效造血和红细胞破坏。
引发α地中海贫血的突变在我国主要有三种缺失和三种突变。
分别是缺失型——SEA/；-α3.7/；-α4.2/及点突变αCS；αWS，αQS。
根据α基因的缺失情况及临床症状α地中海贫血又可分为静止型、轻型、中间型和重型。
一般来说只缺失一个α基因，成人基本无明显临床表现，部分携带者血常规和血红蛋白电泳无异常。
而对于缺失两个α基因的携带者，会有轻微的贫血，其血常规和血红蛋白电泳都有一些异常，这样的携带者如果和同样缺失α基因的患者结婚，就有可能会生育重型地贫患儿。
轻型携带者与静止性携带者有四分之一的可能生育HbH患儿，就是缺失3个α基因，是中间型地贫患者，有较为明显的贫血，临床表型因人而异，有的HbH患者能够比较好的生活，而有的则有比较严重的贫血，影响到生活质量。
轻型α地贫患者若与同样是轻型α地贫患者结婚则有四分之一的可能生育重型地贫患儿即HbBart’s患儿。
HbBart’s 患儿即缺失四个α基因，无法存活。
HbBart’s 胎儿会产生严重的水肿胎现象，受累胎儿由于严重贫血、缺氧常于妊娠23-40周左右在宫内或分娩半小时后死亡。
地中海贫血及新生儿筛查检测项目介绍
福建
湖南 四川 重庆
4.1
2.2 1.9 1.0
1.5
2.0 2.2 2.3
5.6
4.2 4.1 3.3
J Clin Pathol, 2004; Clin Genet, 2010; 中华医学遗传学杂志, 2012.
地中海贫血
基因类型
αα/αα
临床类型
正常人
症状
-α/αα或αTα/αα
--/αα、-α/αTα或 ααT/ααT或-α/-α --/-α或--/ααT --/--
把住“三关” --婚检、孕检和产检
地中海贫血
中国南方α和β地贫的人群携带率
地区 α地贫 广西 云南 17.6 9.8 携带率（%） β地贫 6.4 7.3 合计 24.0部）
12.7
8.5 4.2 3.5
2.7
2.5 5.1 2.9
15.4
11.0 9.3 6.4
地中海贫血及新生儿筛查检测项 目介绍
王冰冰 博士
广东凯普生物科技股份有限公司
地中海贫血检测技术介绍
地中海贫血
地中海贫血（ Thalassemia ），简称地贫，世界上发 病率最高、危害性最大的单基因遗传性疾病，主要分为 α-地贫和β-地贫。 我国以长江以南各省发病率高，多见于广东、广西、海 南、福建、云南、贵州、四川 等地区。
新生儿筛查检测项目
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏 病,俗称蚕豆病。我国是本病的高发区之一，主要分布在长江以南各省， 以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。G6PD缺乏症发病原 因是由于G6PD基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤 而遭受破坏，引起溶血性贫血。临床表现为慢性非球形细胞溶血性贫血、 蚕豆病、药物性溶血、新生儿黄疸及某些感染性溶血。
地中海贫血筛查-血液学分析
加强地中海贫血的预防和治疗
1 2 3
预防措施
推广地中海贫血的预防措施，如婚前和孕前筛查、 产前诊断等，降低疾病的发生率。
治疗方法
研究和发展新的地中海贫血治疗方法，如基因治 疗、干细胞移植等，提高治疗效果和患者的生存 质量。
医疗资源
加强地中海贫血医疗资源的建设和配置，提高基 层医疗机构的服务能力，确保患者能够得到及时、 有效的治疗和管理。
提高公众对地中海贫血的认识
普及知识
通过宣传和教育活动，提高公众对地中海贫血的认识，了解疾病 的病因、症状、治疗方法等，减少歧视和误解。
自我筛查
鼓励公众了解地中海贫血筛查的重要性，积极参与筛查活动，提高 自我保健意识。
家庭关怀
为地中海贫血患者家庭提供关怀和支持，帮助他们理解和应对疾病， 增强家庭成员之间的理解和支持。
血清铁蛋白检测
通过对血清铁蛋白的检测，可以了 解体内铁的储存情况，对于地中海 贫血的诊断具有一定的参考价值。
04
地中海贫血的预防和治疗
预防措施
01
02
03
婚前和孕前筛查
通过血液学分析，对有地 中海贫血风险的夫妇进行 筛查，以预防重型地中海 贫血患儿的出生。
遗传咨询
向筛查出的高风险夫妇提 供遗传咨询，解释疾病的 发生机制、遗传方式和风 险，并提供生育建议。
早期诊断
通过地中海贫血筛查活质量和预 后。
预防并发症
地中海贫血患者如果未得到及时诊断和治疗，可能导致贫 血、黄疸、脾肿大等并发症，影响生活质量。早期筛查有 助于预防这些并发症的发生。
遗传咨询
地中海贫血筛查结果可以为患者和家庭提供遗传咨询，指 导生育决策，避免将疾病遗传给下一代。
基因检测
女性地中海贫血筛查
女性地中海贫血筛查女性地中海贫血筛查定义地中海贫血又称海洋性贫血，是一组遗传性疾病，是人群中最常见的不完全显性的慢性溶血性贫血病。
其发病机制是合成血红蛋白的珠蛋白链减少或缺失导致血红蛋白结构异常，这种含有异常血红蛋白的红细胞变形性降低，寿命缩短，可以提前被人体的肝脾等破坏，导致贫血甚至发育等异常，这种疾病也就是医学上讲的溶血性贫血。
地中海贫血症属于一种可防难治的遗传性疾病，如果能在婚前就清楚了解自己的遗传背景，并且在产前做好地中海贫血筛查和诊断，就可以有效把下一代患重型地贫的机会减至最低。
地中海贫血筛查的时间一般是在怀孕3个月左右。
因此，产前筛查发现孕妇为地贫基因携带者后，其配偶也需要前来接受检查，如果查出双方为同类型地贫基因携带者，则要为孕妇腹中的胎儿进行产前基因诊断。
如果基因诊断发现胎儿患有中间型或重型地贫，医生会建议孕妇终止妊娠，如果是正常或轻型地贫儿，则可以继续妊娠。
女性地中海贫血筛查作用地中海贫血筛查是孕期的一个重要的检查项目，一般是在孕13周之前也就是第一次产检的时候进行的，进行这项检查能够很有效的预防地贫儿。
孕妈妈们千万不能忽视孕期的检查，否则可能会给家庭带来一些不必要的痛苦。
地中海贫血目前无法根治。
为了预防本病，孕妇和配偶应进行婚前检查和胎儿产前基因诊断，避免孕育出下一代地贫患儿。
一般来说，如果夫妻双方属同一类型的地中海贫血基因携带者，其子女有25%的机会为正常，50%的机会为地贫基因携带者，另25%的机会为重型地中海贫血患者。
要想有效预防本病，需抽血进行肽链检测和基因分析。
重度地贫儿给家庭带来的精神以及经济负担都是难以承受的。
重型α地贫通常会造成胎儿胎死腹中或者出生后夭折。
而重型β地贫的影响更甚，患此病的婴儿一般在出生后三个月到半年内发病，需长期接受输血和注射除铁药物，每月需要高昂的治疗费用，而患儿最终常因长期输血造成的铁负荷过重而死亡，由此带来的精神和经济负担更加长远。
地中海贫血筛查及基因检测质控体系
➢ 阴、阳性质控样本:用实验室已知结果的有、无地贫突变样本或 者临检中心室间质评样本；
➢ 加样时最好最后加阴性和空白对照。
2、室间质评 实验室应每年定期参加国家临检中心组织的地贫基因
检测项目室间质量评价活动并获取合格证书。
血常规和血红蛋白电泳检测实验室质量控制
1、检验前
• 标本运送，保存 血常规：建议4小时内完成检测 血红蛋白电泳：检测1周内完成检测（室温放置时间不得 超过4小时，应直立放入2-8℃冰箱保存） • 每日开机后的自检，清洗和检查
血常规和血红蛋白电泳检测实验室质量控制
2、检验中
• 正确的上机操作 • 室内质量控制 • 室间质量评价
5、样本采集
产前诊断所有样本均需经过母体污染排除
➢ 绒毛：基于微卫星分析的分子诊断技术STR ➢ 羊水：培养 ➢ 脐血：血红蛋白电泳
本院一例绒毛样本的STR结果
脐血样本正常的电泳结果
外周血样本正常的电泳结果
地贫基因检测与产前诊断实验室质量控制
二、检验中 1、室内质控
① DNA提取：应同时设置一个空白对照，排除DNA提取过程 中的污染；DNA提取成功后，应检测提取DNA的浓度和纯 度（紫外分光光度计）
地贫基因检测与产前诊断实验室质量控制
2、报告单发送
地贫产前基因检测报告单除了由 检测者和审核者签字外，还需由 两名副高以上的执业医师签字。
C目录 ONTENTS
1 地中海贫血的筛查与诊断
2 实验室的质量控制
3
案例分析
谢谢！
等，需进行α地贫基因检测 ➢ 出现异常血红蛋白区带，如：Hb E，需进行β地贫基因检测
地中海贫血筛查
根据病情轻重和基因缺陷类型，地中海贫血可分为轻型、中间型和重型。
02 地中海贫血筛查方法
血红蛋白电泳
总结词
血红蛋白电泳是一种常用的地中海贫血筛查方法，通过分析血红蛋白成分，有助 于发现异常血红蛋白。
详细描述
血红蛋白电泳通过电泳技术将血红蛋白分离，并检测其组成成分。在地中海贫血 的病例中，会出现异常的血红蛋白，如缺失或减少的血红蛋白。通过血红蛋白电 泳，可以检测到这些异常，从而初步判断是否存在地中海贫血。
地中海贫血筛查
目录
CONTENTS
• 地中海贫血概述 • 地中海贫血筛查方法 • 地中海贫血筛查流程 • 地中海贫血筛查的意义与局限性 • 地中海贫血筛查的推广与应用
01 地中海贫血概述
定义与特点
定义
地中海贫血是一种遗传性溶血性 疾病，由于珠蛋白基因缺陷导致 血红蛋白异常，从而引起贫血。
特点
地中海贫血具有地域性分布特点 ，主要在热带和亚热带地区流行 ，与当地人群遗传背景密切相关 。
筛查的局限性
假阳性与假阴性
遗传咨询与伦理问题
由于筛查方法的敏感性和特异性有限， 可能出现假阳性或假阴性的结果，影 响筛查的准确性。
对于筛查出的携带地中海贫血基因的 个体，需要进行遗传咨询和心理辅导， 涉及伦理和隐私保护等问题。
成本与普及度
地中海贫血筛查需要一定的技术和设 备支持，成本较高，难以在广大地区 普及。
05 地中海贫血筛查的推广与 应用
政策支持与宣传教育
要点一
政策支持
政府出台相关政策，将地中海贫血筛查纳入公共卫生服务 项目，为筛查工作提供政策保障。
要点二
宣传教育
开展地中海贫血筛查宣传教育活动，提高公众对地中海贫 血的认识和重视程度，增强筛查意识。
92550例普宁地区地中海贫血筛查结果分析
好，能够配合整项研究。
排除标准：(1)慢性病性贫血和缺铁性贫血，包括平均红细胞体积(MCV)<82fL、平均血红蛋白量(MCH)<27pg、平均血红蛋白浓度(MCHC)<320g/L、血红蛋白A2(HbA2)<2.5%、HbA2>3.5%、胎儿血红蛋白(HbF)>2%；(2)直系亲属中有地中海贫血患者。
92550例中男性46275例，女性46275例；年龄15~49岁，平均(32±6.23)岁。
本研究经医院医学伦理委员会批准，所有检查人群知情并签署知情同意书。
1.2检测方法所有样本均采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)和聚合酶链反应结合反向点杂交(PCR-RDB)检测。
(1)标本采集：研究对象均采集外周静脉血2mL，加入乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝，置于4℃FYL-YS-828L医用冰箱(北京福意电器有限公司提供)保存血样备用，保存不超过1周，样本在运输过程中避免剧烈震荡。
(2)DNA基因组提取：DNA 提取试剂盒由潮州凯普生物化学有限公司提供，取200μL血液加入到离心柱中，14000×g，离心10min，弃去上清液后，使用QIAamp DNA Blood Mini Kit抽提DNA，具体提取操作步骤根据试剂盒提供的说明书进行，所提取DNA浓度为20~40ng/μL，OD260/OD280的值在1.5~2.5，置于-20℃FYL-YS-828L医用冰箱(北京福意电器有限公司提供)保存血样备用。
(3)α-地中海贫血基因检测：采用Gap-PCR基因诊断技术检测3种缺失型α-地中海贫血(--SEA、-α3.7、-α4.2)、3种突变型α-地中海贫血(WS、CS和QS)。
试剂盒为潮州凯普生物化学有限公司提供。
(4)β-地中海贫血基因检测：采用PCR-RDB方法，基因诊断试剂盒由广州凯普生物化学有限公司提供，检测16种β地贫基因突变，包括β41-42/βN、β43/βN、β654/βN、β71-72/βN、βCap/βN、βInt/βN、βIVS1-1/βN (G-T，G-A)、βIVS1-5/βN、βE/βN、β14-15/βN、β17/βN、β27-28/βN、β-28/βN、β31/βE和β-29/βN。
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3’α
30
缺失类型 缺失范
围 100以上
30-34
31
20
-111 11.1
-α4.2 4.2 -α3.7 3.7 -α2.7 2.7
α-地中海贫血分子机制
CD30
CD31
CD49
2
CD13
CD44–45
CD59
5’ 1
UTR EXON I IVS I
EXON II
CD74
IVS II
CD78
CD122 -HbWS
轻度贫血，胎儿期 ‘s 5% -10%
胎儿期有 's（1-2%）， 成人无异常血象
地中海贫血的筛查
• 筛查目的：通过地贫筛查、基因检测发现发现双方都是同种类型基因携带者的高风险夫妇，经产前诊断减 少重症地贫患儿出生，努力提高出生人口素质。
• 筛查方法：血常规+血红蛋白毛细管电泳
• 筛查对象：
• 1、孕前夫妇
地中海贫血全球分布区域 .2008;8:592-9.
中国南方地中海贫血人群携带率
湖南：地贫基因携带率2.96； β-地贫基因携带率1.37%； 福建：地贫基因携带率3.17%；β-地贫基因携带率1.32%
地中海贫血的预防
地中海贫血的预防
婚前
地贫检 查
产前
地贫筛 查
新生儿
地贫筛 查
避免重型地贫患者的出 生，体现发现病症，及 早治疗
α链 β链正常
α链缺失
β链缺失
常见的是α-地中海贫血，其次为β-地中海贫血，比较少见δ-地中海贫血，γ-地中海贫血。各类地中海贫血之间又可以互相 组合，也可以和各种异常组合。
α-地中海贫血分子机制
5’
0 10
20
-70
主要的，s水肿儿基因类型 （95%）
广东｛
3.1% 0.95%
中国α地贫主要的的缺失类型
2
：α2β2 ；2 ：α2δ2；：α2γ2
少量表达
地中海贫血：遗传性珠蛋白合成不平衡导致的溶血
d g
Normal Hb A=22 HbA2=2d2 Hb F=2g2
d
2降低
g
-Thalassemia
4=HbH g4=HbBart’s
d g 2增高 -Thalassemia Increased HbA2 (4-6%)
前诊断的时机。 • 越早越好
地中海贫血的筛查（1）
1.血常规：参数 ＜82 、 ＜27是2项重要的阳性指标，更可靠 一方＞6，对方需做同样检查。 （血红蛋白下降可刺激红细胞生成，石及分离） 静止型a和β地贫、 β复合a型地贫、可正常
地中海贫血的筛查（2）
2.血红蛋白分析： 毛细管电泳进行、2、定量是鉴别地中海贫血分型的依据。
•
筛查夫妇之一如果是致病基因携带者，再筛查其配偶
• 2、初检孕妇及其配偶
地中海贫血的筛查
• 知情同意：遵循知情自愿原则，告知夫妇地贫筛查的意义，在充分知情的基础上，征得夫妇双方同意，签 订《地中海贫血筛查知情同意书》。
• 申请单的填写
• 夫妇基本信息逐项填写清楚，如双方家庭成员有地贫家族史或其他请注明，务必详细记录近期的血常规结 果。
CD125 -HbQS CD142-Hbcs
EXON III
UTR
3’
CD118
12种见于中国人群的导致 2/ 1珠蛋白基因表达降低的突变
错义突变 小缺失或插入
终止密码突变 移码突变
α-地中海贫血分类
由于4个α基因均缺失， 80%以上血红蛋白为（ ’s (γ4)，其余为(β4）。胎儿 水肿
病，胎儿期5-30%的 ’s。 成人（β4）达4-30%，严 重者伴有黄疸和脾肿大.
•
血样采集
• 用抗凝管采集血样，每管不少于2，可及血常规共管。周三由县妇幼收集血样，周四检测，周五出结果。
产前筛查最佳时间
• 首次产检即进行血常规毛细管电泳筛查 • 孕妇血常规或毛细管电泳阳性时，配偶行地贫筛查 • 筛查阳性孕妇，建议孕18周前完成夫妇双方的地贫基因诊断 • 孕16周后仍未进行表型筛查的夫妇，建议血常规表型筛查阳性的， 电泳和基因诊断同时进行，避免延误产
种合成减少或不能合成。 （表达量的变异）
异常血红蛋白病 一组珠蛋白链分子结构异常性疾 病，是由于控制珠蛋白肽链合成
的基因突变的结果。
（结构的变异）
由于缺失部分δ和γ基因，使得 γ基因高表达，从而使得成人期
仍有较高的.
(表达时象的变化)。
地中海贫血分类
α地中海贫血——由于 珠蛋白基因的缺 失或缺陷使 链的合成受到抑制而引起的溶 血性贫血。
地中海贫血的临床特征
小细胞低色素性溶血型贫血(中、重度) 黄疸 肝脾肿大 (脾大明显) 骨髓扩增 发育迟缓 合并感染 ’s 水肿胎 (α地贫,宫内或出生后半小时内死亡)
血红蛋白的结构 •血红蛋白分子是由4条多肽链(2类)和4个可以结合铁和氧气的血红素.
血红蛋白运输氧气
血红蛋白α2β2 3
α,β基因结构图
2＜2.5%( 地贫) 2＞3.5%(β地贫或β复合 地贫) ＞ 230%(重症β地贫) ＞12.7-17%(中间型 地贫，病) 出现其他异常条的具体分析
地中海贫血筛查
国家政策支持.陈竺适宜技术防控
为落实深化医药卫生体制改革相关任务和卫生部陈竺部长“关于利用适宜技术有效防控地中海贫血 ”的指示精神，以及卫生部及广西、云南、贵州等省（区）政府的有关协议，为广西、广东、海南、贵 州、湖北、云南、江西、湖南、福建等9省（区）地中海防控工作提供技术支撑，提高地中海贫血高发 地区的防控能力。
避免严重地贫男女 婚配
防止重型地贫患儿 的出生
提前发现治疗
血红蛋白疾病概述
血红蛋白病是世界上最常见的一类单基因遗传疾病，包括地中海贫血（）、异常血红蛋白疾病（ ）和遗传性持续 性胎儿血红蛋白综合症（）。
地中海贫血 （珠蛋白生成障碍性贫血）特点 是由于珠蛋白基因的缺陷使血红 蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几
β地贫 - β珠蛋白基因（11p15.3） • 突变纯合子：重型地贫 - 致死
中间型地贫 - 致残 • 病理学基础： /β链比例失衡
重型地贫:胎儿水肿综合征 • 早产死胎或出生前后死亡 • 可导致严重产科并发症 • 无理想治疗方法
地贫纯合子：致死性出生缺陷
重型地贫 • 出生后1年内发病 • 多于未成年前因严重贫血而夭折 • 输血和去铁治疗可维持,代价昂贵
※ 基因缺失是引起 地中海贫血的主要原因
β地中海贫血——由于 珠蛋白基因的缺失 或缺陷使 链的合成受到抑制而引起的溶血性 贫血。
※ 基因突变是引起 地中海贫血的主要原因 特点：
都表现为小细胞低色素性贫血
地贫是严重致死、致残性遗传病
• 常染色体隐性单基因遗传病 • 受累基因：地贫 - 珠蛋白基因（16p13.3）