实训十 大黄的显微鉴定
大黄的鉴定实验报告
一、实验目的通过本次实验，了解大黄的形态特征和化学成分，掌握大黄的鉴定方法，提高中药材鉴定技能。
二、实验原理大黄为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根及根茎。
大黄的主要成分是含蒽醌类化合物，具有泻下、清热、解毒、止血等功效。
大黄的鉴定主要从性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和色谱鉴别等方面进行。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：大黄药材、大黄粉末、乙醇、氯仿、稀甘油、水合氯醛试液、氢氧化钠试液、硫酸、碳酸钠、碳酸氢钠、浓盐酸、乙酸等。
2. 实验仪器：显微镜、微量升华装置、紫外分析仪、pH计、分光光度计、色谱仪、电子天平等。
四、实验方法与步骤1. 性状鉴别（1）观察大黄药材的外观：呈类圆柱形、圆锥形、卵圆形或不规则块片状，表面黄棕色至红棕色，可见类白色网状纹理及星点（异型维管束）散在，残留的外皮棕褐色。
（2）观察大黄药材的质地：质坚实。
（3）观察大黄药材的断面：断面淡红棕色或黄棕色，显颗粒性；根茎髓部宽广，有星点环列或散在；根木部发达，具放射状纹理，形成层环明显，无星点。
（4）观察大黄药材的气味：气清香，味苦而微涩，嚼之粘牙，有砂粒感。
2. 显微鉴别（1）制片：取大黄药材横切面组织切片，用稀甘油、水合氯醛试液制成永久制片。
（2）镜检：观察大黄根茎横切面组织切片，自外向内观察其主要组织特征：① 木栓层及皮层大多已除去，偶有残留。
② 韧皮部射线宽一至数列细胞，内含棕色物。
③ 韧皮部中有粘液腔。
④ 形成层环明显。
⑤ 木质部导管稀疏，非木化。
⑥ 髓部宽广，有异常维管束，其形成层呈环状，外侧为木质部，内侧为韧皮部，射线呈星状射出，韧皮部中有粘液腔，内含红棕色物质。
⑦ 薄壁细胞含淀粉粒及大形草酸钙簇晶。
3. 理化鉴别（1）酸碱度测定：用pH计测定大黄药材的酸碱度，大黄药材的pH值应在3.5～5.5之间。
（2）大黄酸含量测定：采用高效液相色谱法测定大黄药材中大黄酸的含量，大黄酸含量应不低于0.5%。
4. 色谱鉴别（1）制备大黄药材的氯仿提取物。
大黄鉴定实验报告
大黄鉴定实验报告大黄鉴定实验报告引言：大黄是一种常见的中药材，被广泛应用于中医药领域。
然而，市场上的大黄产品质量良莠不齐，为了确保其质量和安全性，我们进行了一项大黄鉴定实验。
本报告将详细介绍实验的目的、方法、结果和结论，以及对大黄的进一步研究建议。
实验目的：1. 鉴定市场上常见的大黄样品是否符合质量标准。
2. 分析大黄中主要活性成分的含量。
3. 提供有关大黄的质量控制和鉴定方法。
实验方法：1. 样品采集：从市场上购买了10种不同品牌的大黄样品。
2. 外观检查：观察大黄的外观特征，包括颜色、形状、气味等。
3. 质量评估：使用质量评估方法，包括湿润度、含水量、灰分等指标。
4. 化学成分分析：使用高效液相色谱法（HPLC）分析大黄中主要活性成分的含量。
实验结果：1. 外观检查：所有样品的外观特征相似，呈现出黄褐色的颜色，具有典型的大黄形状和气味。
2. 质量评估：样品的湿润度、含水量和灰分均在合理范围内，符合质量标准。
3. 化学成分分析：HPLC分析结果显示，大黄中的主要活性成分为大黄素和大黄酚。
其中，大黄素的含量在不同样品中存在一定差异，而大黄酚的含量相对稳定。
讨论：1. 外观特征的相似性表明市场上的大黄样品质量较为一致，没有明显的质量问题。
2. 质量评估结果显示样品的湿润度、含水量和灰分均在合理范围内，符合质量标准，进一步验证了大黄的质量良好。
3. 化学成分分析结果表明大黄中的主要活性成分为大黄素和大黄酚，这两种成分对于大黄的药理作用具有重要意义。
4. 大黄素的含量差异可能与不同地域、生长环境和加工方法等因素有关，需要进一步研究。
5. 进一步研究大黄的药理作用、毒副作用和质量控制方法，有助于提高大黄的应用价值和安全性。
结论：通过对市场上的大黄样品进行鉴定实验，我们得出以下结论：1. 大黄样品的外观特征相似，质量较为一致，符合质量标准。
2. 大黄中的主要活性成分为大黄素和大黄酚，具有重要药理作用。
3. 大黄素的含量存在一定差异，需要进一步研究。
大黄及显微镜的使用(生药学)
1.组织（根茎横切面）：注意韧皮部、形成层、木质部的特征，黏液腔的分布， 详细观察髓部异型维管束的构造。
韧皮部散有黏液腔，木质部导管稀少，髓部大，其内散生内韧式的异型 维管束，射线呈星状射出。薄壁细胞含淀粉粒及大型草酸钙簇晶。
薄荷(茎)横切面简图 1.表皮 2.厚角组织 3.皮层 4.内皮层 5.形成层 6.髓部 7.木质部 8.韧皮部 9.橙皮苷结晶
粉末图的绘制
粉末图是用来表示高倍镜下所见细胞及内含物的特征的详图。要 求细胞的形状、壁的厚薄、纹孔和层纹等都要尽可能的绘清楚、准确， 并将显微镜下观察的主要特征按类别画出来。
图的注解：
① 在靠近各类组分图的 附近标上番号；
② 图下注明图的名称、 放大倍数；
③ 按图中番号注字，番 号下角用缩写符号 “.”
番泻叶粉末图(10×40)
1.表皮细胞及平轴式气孔 3.晶鞘纤维 2.非腺毛 4.草酸钙簇晶
四、实验报告的书写格式
实验次数及名称 学生姓名 年级及专业 学号 日期
一、材料来源
注意事项
养成双眼观察的习惯；观察标本先低倍后高倍；保持显微镜干燥、清洁。
瞳距调节
屈光调节
二、粉末制片法
粉末制片是鉴定中药材最常用的方法之一，简便快速， 主要鉴别细胞的形态特征。 • 粉末的制备
方法：粉碎 → 过筛 → 混合均匀备用 细度：中药材通过药典4~5号筛（孔径0.17~0.25mm） 中成药通过药典6号筛（孔径0.15mm） 要求：样品具有代表性；全部过筛；混合均匀。
2.粉末：黄棕色，气特异。
① 大型草酸钙簇晶，棱角多短钝。 ② 大型的网纹导管，非木化或微木化（木化染色：间苯三酚 + 盐酸→红色）。 ③ 众多的淀粉粒，单粒呈圆球形或长圆形，脐点多星状，复粒由2～7分粒组成。
大黄粉末实验报告
一、实验目的1. 掌握大黄粉末的显微鉴别方法。
2. 通过观察大黄粉末的显微特征，学习中药鉴定中的粉末制片技术。
3. 了解大黄粉末的主要成分及其在中药学中的应用。
二、实验原理大黄为蓼科植物大黄的干燥根及根茎，具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒等功效。
大黄粉末的显微鉴别主要依据其特有的显微特征，如草酸钙簇晶、网纹、梯纹导管和淀粉粒等。
三、实验材料1. 大黄粉末2. 显微镜3. 载玻片4.盖玻片5. 饱和水合氯醛溶液6. 稀甘油7. 10%盐酸8. 5%氢氧化钠9. 30%硝酸10. 乙醚四、实验步骤1. 制片- 取大黄粉末少许，置于载玻片上。
- 在粉末上滴加饱和水合氯醛溶液2-3滴。
- 用酒精灯加热，使粉末透化，注意不要沸腾。
- 反复透化1-2次，直至粉末完全透化。
- 滴加稀甘油1-2滴，必要时用解剖针或牙签拌匀。
- 取洁净盖玻片沿一个方向轻轻放下，防止产生大量气泡。
- 多余试液用滤纸吸去。
2. 显微镜观察- 将制片置于显微镜下观察。
- 依次观察草酸钙簇晶、网纹、梯纹导管和淀粉粒等特征。
3. 特征描述- 草酸钙簇晶：呈长方形或类方形，棱角大多短钝，直径约40-60μm。
- 网纹导管：直径约20-40μm，纹孔明显。
- 梯纹导管：直径约20-40μm，纹孔呈梯形。
- 淀粉粒：呈类球形或椭圆形，直径约5-20μm。
五、实验结果1. 在大黄粉末制片中，观察到草酸钙簇晶、网纹导管、梯纹导管和淀粉粒等特征。
2. 草酸钙簇晶数量较多，棱角大多短钝。
3. 网纹导管和梯纹导管数量较多，纹孔明显。
4. 淀粉粒数量较多，呈类球形或椭圆形。
六、实验讨论1. 大黄粉末的显微特征是鉴别大黄的重要依据。
草酸钙簇晶、网纹导管、梯纹导管和淀粉粒等特征具有特异性，有助于区分大黄与其他药材。
2. 在制片过程中，注意控制加热温度和时间，避免过度加热导致粉末碳化。
3. 显微镜观察时，应调整显微镜的焦距和光圈，使观察到的特征清晰可见。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了大黄粉末的显微鉴别方法，学会了中药鉴定中的粉末制片技术，并了解了大黄粉末的主要成分及其在中药学中的应用。
简要写出大黄的显微鉴定步骤
简要写出大黄的显微鉴定步骤
1.切片：将大黄标本切成薄片，厚度通常为0.1mm左右。
2.上清剂：将切片浸泡在脱脂汽油、醇、二甲苯等清洗剂中，去除样
品表面的杂质和着色物质。
3.染色：使用化学染料，如伊红、固原染色剂等，对样品进行染色。
4.加蓝：在染色前或染色后加一定浓度的碘化钾溶液，加强细胞核和
染色体的显色度。
5.封片：用封片剂将切片封在玻璃片和封片纸之间，使其保持平整。
6.显微镜观察：将封好片的样品放在显微镜下观察，根据不同的结构
特征，对大黄进行鉴定。
比如，大黄的草酸钙晶体可以用偏光显微镜观察。
实验1-4大黄
具翅幼果
植物形态 (Plant Description)
唐古特大黄 形态与掌叶大黄相 似，主要区别为叶片掌状深裂，裂 片再做羽状浅裂。裂片披针形。
植物形态 (Plant Description)
药用大黄 叶片掌状浅裂，一般 仅达叶片1/4处，裂片宽三角形； 花较大，白色。
植物形态 (Plant Description)
唐古特大黄 深裂
药用大黄 浅裂
掌叶大黄 中裂
叶分裂程度：药用大黄<掌叶大黄<唐古特大黄
性状(Description)
1.掌叶大黄 根茎呈类圆柱形、圆锥形或不规则块 状。 表面黄(红)棕色，质坚实，横断面淡 橙红色，颗粒性。 皮部极狭，可见暗色形成层环纹、棕 红色射线。髓宽广，有多数星点（异 型维管束）环列或散在。 气清香，味苦而微涩，嚼之有砂粒 感，唾液染成黄色。 根类圆柱形，横切面则无星点。
对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄
酚、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含芦荟大黄素、 大黄酸、大黄素、大黄酚各80µ g，大黄素甲醚40µ g的溶液；分别精密
量取上述对照品溶液各2ml，混匀，ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ得。
色谱条件： 色谱柱：Shim-Pak CLC-ODS 柱 (150×6.0mm, 5 µ ) m 柱温：25°C 流动相：甲醇—0.1%磷酸溶液（85:15） 流速：1ml/min 检测波长：254nm
大黄(Rheum palmatum 根茎) 粉末 [ Powder of rhizome from Rheum iffucubake] 1.草酸钙簇晶(Clusters of calcium oxalate) 2.导管(Vessels) 3.淀粉粒(Starch granules)
包医大生药学实验指导07根茎类生药——大黄
实验七根茎类生药一一大黄大黄RheiRadixetRhizoma一、实验目的1、掌握大黄的生药性状特征2、掌握大黄切面组织特征与粉末显微特征二、实验材料大黄原植物标本、生药饮片、组织横切片及粉末。
三、实验内容及步骤：工、性状鉴别取大黄标本，从形状、表面特征、气味等方面描述大黄性状特征。
2、显微鉴定(1)镜检大黄根茎横切面组织切片，自外向内观察其主要组织特征：①木栓层与皮层多已经除去，偶残存。
②韧皮部射线1・4列细胞，内含棕色物。
③形成层环状明显。
④木质部导管径向稀疏排列。
⑤髓部宽广，散有多数异形维管束（星点）异形维管束系复合维管束，由多个外木式维管束组成，形成层类圆形，木质部在外，射线呈星芒状射出。
（2）去大黄粉末，分别以蒸锵水及水合氯醛试液装片，镜检下列特征：①草酸钙簇晶大而多，菱角大多短钝。
②导管主要为网纹导管，并有具缘纹孔，及细小螺纹导管,直径约至140微米，非木化。
③淀粉粒单粒呈圆球形或长方形，脐点大多呈星状，复粒由2-7个分粒组成。
（3）观察所示标本的性状特征。
3、理化鉴定（1）Borntrager反应取大黄0.1g置小试管中，加入10%的NaoH试液2毫升，振摇，溶液即成红色，滤过，滤液加10%盐酸中和，溶液变黄色，再加入乙醛2毫升，振摇使之分层，液呈黄色吸取酸液层置另一试管，加氢氧化钠试液1毫升，振摇后碱液又显红色。
（2）醋酸镁反应：取大黄粉末0.2g于试管中，加乙醇3毫升，水浴温热5分钟，滤过，得滤液，加1%醋酸镁甲醇溶液2滴，振摇后观察，溶液渐呈橙红色。
（3）微量升华：取大黄粉末少许于金属圈内，小火徐徐加热数分钟，可见黄色升华物附着载玻片上，将玻片取下翻装后镜检，低温升华时可见针状结晶；高温时可见羽状结晶。
四、作业1、绘大黄根茎横切面简图2、绘大黄粉末显微特征图，示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。
大黄的鉴定(实验)【实用参考】
实 验 八：根与根茎类生药
大黄的鉴定
Radix et Rhizoma Rhei Rhubarb
一、实验的目的
大黄的鉴定(实验)
31 1 掌握掌大握黄大的黄生药生性药状性鉴状别鉴特别征特征 2 掌握大黄的显微鉴别特征 3 掌握大黄的理化鉴别方法
二、仪器、试剂及材料
大黄的鉴定(实验)
（1）仪器：生物显微镜、酒精灯、载玻片、 盖玻片、吸水纸、火柴、擦镜纸、微量 升华装置。
大黄的鉴定(实验)
大黄的鉴定(实验)
（2）根茎粉末：棕黄色
1.草酸钙大形簇晶众多 2.网纹、具缘纹孔导管 3.淀粉粒大多圆球形。
1 3
大黄的鉴定(实验)
2
1．大型簇晶 2．导管 3.淀粉粒 掌叶大黄根茎粉末
大黄的鉴定(实验)
草酸钙簇晶 网纹导管
（三）大黄的理化鉴定
1．本品粉末进行微 量升华，可见菱针状 或羽毛状结晶,加碱液 溶解并显红色。（羟 基蒽醌类反应）
大黄的鉴定(实验)
大黄的鉴定(实验)
▪ 大黄微量升华实验现象
小结
大黄的鉴定(实验)
本实验从根茎类生药--大黄的生药性状鉴定、 显微鉴定和理化鉴定三个方面进行实验，在本 次实验中，显微鉴定是重点也是难点。在粉末 鉴定中，大家要抓住它的主要特征，如草酸钙 簇晶，网纹、梯纹导管和淀粉粒等主要特征的 鉴别，才能在大黄的粉末或者多种末知粉末中 准确地进行显微鉴别。
四、作业
大黄的鉴定(实验)
1 描述掌叶大黄的生药性状特征 2 绘大黄粉末的显微鉴别图 3 绘大黄根茎横切片显微鉴别简图 4 记录大黄理化鉴定的结果
课后思考
大黄的鉴定(实验)
如何采用显微鉴别和理化鉴别方法鉴定三种大黄及其混伪品？
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一、实训目的 （1）掌握大黄粉末主要的显微特征 （2）掌握草酸钙簇晶在显微镜的形态特征。 （3）通过实验，进一步掌握根茎类药材的显 微特征 二、实训仪器、材料与试剂 （1）仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、酒精 灯等。 （2）材料：药材粉末为大黄干燥根及根茎 （3）试剂：水合氯醛、稀甘油试剂
三、实训要点与难点 （1）大黄根和根茎性状鉴别上的要点 （2）大黄粉末中草酸钙簇晶较大、导管非木 化和淀粉粒脐点呈星状。
【功 效】：攻积滞；清湿热；泻火；凉血； 祛瘀；解毒。 【主 治】：实热便秘；热结胸痞；湿热泻痢； 黄疸；淋病；水肿腹满；小便不利；目赤； 咽喉肿痛；口舌生疮；胃热呕吐；吐血； 咯血；衄血；便血；尿血；蓄血；经闭； 产后瘀滞腹痛；症瘕积聚；跌打损伤；热 毒痈疡；丹毒；烫伤。 【性味】：苦，寒。 【归经】：脾、胃、大肠、肝、心包经概述
大黄：属蓼科植物大黄属大黄种。分为掌叶大黄、 唐古特大黄、药用大黄。 性状：本品呈类圆柱形、圆锥形、卵圆形或不规则 块状，长3～17cm,直径3～10cm 。质坚实，有的 中心稍松软， 断面淡红棕色或黄棕色，显颗粒性； 根茎髓部宽广，有星点环列或散在；根木部发达， 具放射状纹理，成层环明显，无星点。 气清香，味苦而微涩，嚼之粘牙，有砂粒感。
四、显微鉴定特征 大黄的粉末特征：淡黄棕色，味苦，气清香。 （1）草酸钙簇晶多，菱角大多短钝。 （2）导管非木化，多为网纹，并有具缘纹孔 及细小螺纹导管。
五、思考题与作业 1.思考题 （1）请总结一下观察过含有草酸钙簇晶的药 材。 （2）大黄横切面的“星点”是由大黄的什么 构造形成的？ 2.作业 绘制大黄粉末主要的显微特征图。