UltraVIEW VoX 活细胞共聚焦
武汉大学化学与分子科学学院大型仪器平台收费细则

说明: 1、 以上测试时长超过 8h 的为特殊样品,其费用另计。
14、Varian Inova 600MHz 核磁共振波谱仪
实验类型
院内价格(元)
普通 1H (时间约 5 min)
10
普通 13C (时间约 10 min)
20
院外价格(元) 30 80
需成倍延长扫描时间的氢谱与碳谱样品按照时间计费:
9、PE Spectrum & Quantum FX 小动物活体成像系统
细则
院内
校内
校外
说明
不足 30 分钟按半小时计 1 扫描样品 200 元/小时 600 元/小时 1000 元/小时 费,超出 30 分钟不足一小
时按一小时计算
10、Bruker microOTOF-Q III 高 性 能 电 喷 雾 - 四 级 杆 - 飞 行 时 间
LC/MS/MS 串联质谱仪
细则
院内
校内
校外
1
直接进样(ESI-MS)
100 元/样
300 元/样
800 元/样
2
液相分离(LC-MS)
100 元/小时 300 元/小时 800 元/小时
3
高级用户自主操作
待定
待定
Байду номын сангаас待定
11、Cypher ES 环境型原子力显微镜
测试项目
自主上机
院内
校内
校外
1
普通成像
3、 透射电镜观察
(1) JOEL 2100plus 透射电子显微镜
细则
1
普通形貌观察
2
高分辨形貌观察
(拍摄晶格像、晶格条纹)
院内 200 元/小时 400 元/小时
乳酸对粪肠球菌的抑菌作用及作用机制

乳酸对粪肠球菌的抑菌作用及作用机制王凤婷;靳盼盼;刘芳;孙芝兰;吴海虹;王道营;许晓曦;徐为民【摘要】目前乳酸常被用来控制食品中腐败菌的生长,但是有关其对食品优势腐败菌抑菌机制方面的研究较少.本试验以一株从肉制品中分离得到的腐败菌粪肠球菌R612-Z1为目标菌株,研究乳酸对其的杀菌效果及作用机制.结果表明,各浓度(0.25%、0.50%、1.00%)的乳酸均有杀菌效果而且作用明显,通过激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测发现,处理后细胞膜通透性增强.扫描电镜及腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)浓度的测定结果说明,胞内物质流出聚集在细胞外侧,胞外ATP浓度和核酸类物质浓度明显上升,膜电势快速升高.因此,乳酸通过破坏粪肠球菌的细胞壁,增加细胞膜通透性,改变细胞内外电势,导致内容物流出,从而达到杀菌效果.%Lactic acid(LA) is widely used to control the growth of contaminating bacteria in food,but there are few reports about the antibacterial mechanism of it. The antimicrobial activity of LA against a dominated spoilage bacterium, Enterococcus faecalis R612-Z1,isolated from water-boiled salted duck was studied. The results showed that all the selected concentrations of LA (0.25%,0.50%, 1.00%) had obvious bactericidal action. The permeability of cell membranes was increased for the bacterial cells treated with 1.00% LA, which was detected using the laser scanning confocal microscope and flow cytometry. The intracellular substances were leaked according to the results of scanning electron micrographs and the detection of extracellular ATP and UV-absorbing materials. The membrane potentials were found to be increased. There-fore,the antibacterial effect of LA on E. faecalis was mainly completed by the massive leakage of intracellular component,which was caused by damaging the cell membrane and membrane potential.【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2018(034)001【总页数】7页(P200-206)【关键词】粪肠球菌;乳酸;抑菌机理【作者】王凤婷;靳盼盼;刘芳;孙芝兰;吴海虹;王道营;许晓曦;徐为民【作者单位】江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150030;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150030;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014;东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨150030;江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏南京210014【正文语种】中文【中图分类】TS201.3食品的安全、质量及营养价值是人们密切关注的问题[1]。
分析测试中心收费标准

超高分辨率显微镜
GE API OMX V4
450元/小时
200元/小时
试运行价格
光谱小动物活体成像系统
CRi Maestro
500元/小时
300元/小时
设备名称
仪器型号
收费标准
备注
所外
所内
分子相互作用仪
Fortebio Octet RED
200元/探针
100元/小时
120元/探针
50元/小时
扫描电镜(能谱)
HITACHI U8010
500 元/小时
200 元/小时
扫描制样
固定脱水
150元/个
100元/个
所外包干
500元/个
所内包干
300元/个
(试运行价格)
喷金
150元/个
100元/个
电镜观察
250元/个
150元/个
超高速冷冻离心机
Beckman XL-100K
150元/小时
80元/小时
150元/个
100元/个
所外包干
500元/个
所内包干
300元/个
制片+染色
150元/个
100元/个
电镜观察
250元/个150元/个冷冻源自薄切片Leica EM UC7
500元/个
300元/个
不含免疫标记(试运行价格)
电镜负染制片
100 元/个
50 元/个
如含样品观察所外200元/个,所内100元/个
750元/小时
500元 /小时
半小时起算
BD FACS AriaIII(分析)
60元/样本
30元/样本
活细胞工作站技术

3’ MCS
/techinfo/vectors/vectorsE/pEGFP-N1.html
Multiple Cloning Site (MCS) of pEGFP-N1
Vector map of pEGFP-C1
Multiple Cloning Site (MCS) of pEGFP-C1
Selecting and focusing specimen section
5. Place the specimen on the xy-stage. 6. Focus the image directly at the microscope. 7. Switch on the VIS observation output on the front panel of the microscope. If the contrast method is changed the intensity slider is automatically adjusted. 8. Use the SmartMove to bring a selected specimen section to the focus plane and focus it.
特点(二)
二. 最大程度减少因各种原因造成的图像 模糊
1. 防止室温变化的效应 孵育箱 2.全自动数控载物台, 配备各类卡具 3.全自动物镜转换器:定时、自动聚焦 4. 防止内置电子元件引起的热变形
自动聚焦功能
特点(三)
三. 使细胞处于最佳的生理状态 1. 高纯度CO2 2. CO2控制器 3. 温度控制器 4. 加热器 5.电动快门的使用(数十毫秒):减少光损伤
Transfection Protocol
分析测试中心收费标准

500元 /小时
半小时起算
BD FACS AriaIII(分析)
60元/样本
30元/样本
分析流式细胞仪
贝克曼
BCEpics XL
20元/样本
10元/样本
中国科学院武汉病毒研究所分析测试中心
2013年6月
全自动微生物鉴定仪
BIOLOG GEN 3 Omnilog Combo Plus
500元/板
300元/板
圆二色谱仪
Applied Photophysics Chirascan
300元/小时
150元/小时
差示扫描量热仪
TANANO DSC
200元/小时
70元/小时
分选流式细胞仪
BD FACS AriaIII(分选)
扫描电镜(能谱)
HITACHI U8010
500 元/小时
200 元/小时
扫描制样
固定脱水
150元/个
100元/个
所外包干
500元/个
所内包干
300元/个
(试运行价格)
喷金
150元/个
100元/个
电镜观察
250元/个
150元/个
超高速冷冻离心机
Beckman XL-100K
150元/小时
80元/小时
分析测试中心收费标准
设备名称
仪器型号
收费标准Biblioteka 备注所外所内200千伏透射电子显微镜
FEI Tecnai G220 TWIN
500元/小时
200元/小时
HITACHI H-7000FA
冷冻透射电镜
FEI Tecnai G220 TWIN
800元/小时
FRET暨活细胞显微成像系统

荧光共振能量转移(FRET)影像系统Olympus(北京)销售服务有限公司上海分公司PDF created with pdfFactory Pro trial version 荧光共振能量转移(FRET)影像系统一、研究目的随着生命科学研究的不断深入, 光学显微镜使我们理解了细胞结构和有关功能。
但是分子 生物学研究已经显示了分子事件,例如信号传导和基因翻译,需要蛋白质的装配成特殊的大 分子复合体等。
对各种生命现象发生的机制,特别是对细胞内蛋白质间相互作用的研究变得尤 为重要。
传统的生物物理或生物化学方法例如亲和色谱法或免疫沉淀反应法和近来的酵母双杂 交、磷酸化抗体、免疫荧光、放射性标记等方法等,都需要破碎细胞或对细胞造成损伤,无 法做到在活细胞生理条件下实时地对细胞内蛋白质-蛋白质间相互作用进行动态研究。
而基于强度的影像技术FRET方法,使得研究活细胞内的这些相互作用变得容易了,荧光 共振能量转移( FRET)是用于对生物大分子之间相互作用定性、定量检测的一种有效方法。
根 据所基于的荧光显微镜配置不同而有不同的应用侧重,可在多细胞,单细胞,细胞膜,细胞 器等不同层次对生物大分子间的相互作用距离,动力学特性等进行研究。
二、FRET的原理和实现方法FRET的原理和发生的基本条件:1. 2. 3. 4. 发色团之间的距离在10A到100A 。
供体D的荧光光谱和受体A的吸收光谱足够多的重叠。
供体D的量子产率和受体A的吸收系数足够大。
D和A的跃迁偶极矩有最佳的相对取向,或者两者之一有一定的快速旋转的自由度。
FRET的实现方法:1) 稳态方法(基于供体、受体的三通道计算校准) 供体荧光的减弱-主要的方法 受体荧光的增强 激发光谱和吸收光谱的比较 2) 3) 光漂白方法 (Pb-FRET) 时间分辨方法(TR-FRET) 供体荧光的衰减 受体荧光的增长PDF created with pdfFactory Pro trial version FRET 特点:1) 动态实验,采集速度快 / 高速Shutter、高速CCD 2) 3) 4) 维持活细胞活性-CO2培养箱、恒温培养箱、恒温板 尽量减少光毒性,减少光照时间 保证长时间观察奥林巴斯 FRET 系统组成:1、显微镜 2、光源、高速荧光激发光切换控制和电动光闸 3、电动 XY 载物台 4、环境控制 5、高灵敏度冷 CCD 6、多种部件同时工作的控制软件 7、图像分屏器——DualView三、Olympus FRET系统详细技术参数一)显微镜:Optics 光学性能Ø 光学系统(Optical System): 奥林巴斯 2005 年最新推出的 UIS2 无限 远光学系统(UIS2 Infinity optical system) (UIS2 光学系统具有的高光 透过率和全光谱范围的色差校正,及高信噪比的特点,非常适合荧光 方面的研究,可以说是目前最先进的光学系统之一) 光路设计: V型光路把反射时的光线损失减少到最小程度,保证最大光 通过量System Flexibility系统适应性Ø Ø Ø 光口: 双层多光口设计(奥林巴斯首创)保证了输入/输出灵活性,提 供 6 条射入/射出光路,最多可同时接 4 路采集原像的图像获取系统。
武汉大学化学及分子科学学院大型仪器平台收费细则

武汉大学化学与分子科学学院大型仪器平台收费细则(2017-04)1、x射线粉末衍射仪(1) Bruker D8 Advance粉末衍射仪细则院内校内校外说明1 普通快扫(<20min)40元/样60元/样80元/样普通快扫时间超过20分钟,每超出20分钟按多扫一个样品计费,不足20分钟按20分钟计。
2 小角扫描(SAXS)60元/样80元/样100元/样3 长时间扫描100元/小时150元/小时200元/小时(2) Rigaku MiniFlex600粉末衍射仪细则院内校内校外说明1 普通快扫(<5min)40元/样60元/样80元/样普通快扫时间超过5分钟,每超出5分钟按多扫一个样品计费,不足5分钟按5分钟计。
2 长时间扫描150元/小时200元/小时250元/小时(3) RigakuSmartLab 9kW多功能粉末衍射仪细则院内校内校外说明1 普通快扫(<10min)60元/样80元/样100元/样普通快扫时间超过10分钟,每超出10分钟按多扫一个样品计费,不足10分钟按10分钟计。
2 小角扫描(SAXS)120元/样150元/样180元/样3 长时间扫描150元/小时200元/小时250元/小时注意:1、以上如采用毛细管等特殊装置进行测试,则样品制备时间算在测试时间内,且毛细管等耗材费用另计。
2、XRD自主操作培训费用1000元/人次(校外人员不能自主操作)。
2、x射线单晶衍射仪细则院内校内校外1 扫单胞50元/样100元/样200元/样2 晶体结构数据采集(整套数据8h以内)400元/样600元/样800元/样3 晶体结构数据采集(整套数据超过8h)每小时加收100元/样每小时加收150元/样每小时加收200元/样4 2D衍射(4h以内)400元600元800元5 低温液氮费30元/小时30元/小时60元/小时注意:1、以上如采用毛细管等特殊装置进行测试,则样品制备时间算在测试时间内,且毛细管等耗材费用另计。
蔡司LSM900共聚焦显微镜的成像原理

蔡司LSM900共聚焦显微镜的成
像原理
蔡司LSM900共聚焦显微镜的成像原理
共聚焦显微镜是指利用共聚焦显微成像技术(Confocal microscopy)作为技术基础,应用光学手段进行成像的一种光学显微镜。
共聚焦显微成像技术是一种利用逐点照明和空间针孔调制来去除样品非焦点平面的散射光的光学成像手段,相比于传统成像方法可以提高光学分辨率和视觉对比度。
共聚焦显微镜是一种利用逐点照明和空间针孔调至来去除样品非焦点平面的散射光成像技术的显微镜,是拥有高对比度和高分辨率的专业级显微镜。
常用语细胞及生物荧光样品观察分析;绿荧光蛋白分析;荧光复位杂交分析;光切片扫描以及
3D图像处理等应用中。
蔡司LSM900共聚焦显微镜的成像原理主要用于生物领域,共聚焦成像也被称为细胞CT。
能够获得焦平面细胞内一个层面的细胞图像,因无其它层面信号的干扰,能获得非常清晰的细胞图像。
共聚焦成像经过多年发张,如超分辨技术具有多种一样的实现方式相同,有多种方式能够实现共聚焦,不同的成像方式之间特点互补。
共焦成像是利用激光点扫描共焦成像的原理,即通过单个激光点激发样品中的荧光获得荧光信号,通过针孔屏蔽非焦平面信息,从而获得单片细胞图像。
在转盘可以聚焦的成像原理上,激光或普通激发光通过转盘变成多个激发点,转盘的旋转使激发光扫描整个样品,得到的荧光通过转盘的针孔去除非焦点细胞图像。
更多信息请咨询北京瑞科钟毅科技相关人员。
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超低的光漂白和光毒性
长时间活细胞观察的首选仪器
超高速、高分辨率的活细胞成像
清晰捕捉快速的生物过程,提供高质量的图像结果
独有的ProSync 同步控制技术
实现高速扫描下的无损失成像
ProSync 同步单元 亚毫秒级同步控制技术
激光光源与激光耦合系统 可扩展的固体激光器 实现六线激光整合 单通道AOTF 独立激光调节控制
7
方案完善
配置灵活
UltraVIEW VoX的配置具有高度灵活性,使 其既可以满足单个实验室的专项研究,又可 以兼顾中心平台多方向的科研需求。模块式
组合设计,为系统升级提供便利。通过整合
最新的软件、硬件和计算机系统,PerkinElmer为您构建最理想的活
高
中
(X-Y-Z共焦) (Y轴分辨率受损)
逐点
逐线
很慢(1帧/秒)
一般
高
一般
(必须多重平均)
其他转盘扫描
转盘扫描 (多光束或狭缝式)
弧光灯 CCD, EMCCD 专用/兼容 <200帧/秒
低 中 (狭缝扫描Y轴分辨率受损) 全视场同时获取 一般 一般 (背景噪音高)
落射荧光 无
弧光灯 CCD,EMCCD 兼容性强
13.3 mm x 13.3 mm 9.5帧/秒 >90%
支持Leica, Nikon, Olympus和Zeiss的正/倒置,手动/电动显微镜
3D扫描 多点扫描
支持多种Z轴控制部件(电动显微镜,物镜式或载物台式压电陶瓷马达Z轴) 电动XY载物台和多种样品适配器
图像工作站 标准应用
高级应用 离线分析
Macintosh或32-bit/64-bit Windows操作系统
ProSync同步控制技术
PerkinElmer独有的亚毫秒级ProSync同步控制技 术,可以实时协调整个系统的各种操作,如 Nipkow转盘的转速,CCD相机的曝光,激光波长 的选择和Z轴的光切移动等。该技术克服了高速 扫描样本时,非同步控制的系统中普遍存在的 扫描线问题。正是由于这种优越的控制技术, UltraVIEW VoX系统将能够在极高的图像采集速率 下获得高质量的图像。同时,ProSync同步控制技 术确保样本的照射只在图像采集时进行,从而 进一步减小了光漂白和光毒性的影响。
基于这些技术的进步,UltraVIEW VoX系统能够帮您完成各种富有挑战性的工作, 带您领略新一代3D活细胞成像技术的至高性能。
PerkinElmer为您提供最完善的3D活细胞共聚焦成像分析方案
3
UltraVIEW VoX
—— 活 细 胞
实时成像技术
细胞成像方案。
灵活的配置组合,满足您目前的需求,预留未来升级空间
共聚焦
最新一代Yokogawa CSU-X1扫描头
激光器
多达6线激光组合,405 nm,440 nm,488 nm,514 nm,561/594 nm,640 nm
探测器
多款CCD/EMCCD探测器,提供不同的速度、灵敏度、分辨率选择
显微镜
Nipkow转盘扫描
微透镜增强型 多光束转盘扫描
激光 CCD, EMCCD 兼容性强 2000 帧/秒*1
低 高 (X-Y-Z共焦) 全视场同时获取 很快(1体素/秒) 高 (背景噪音低)
传统点扫描 单光束扫描
传统狭缝扫描 狭缝扫描
激光
激光
PMT
Line CCD
专用
专用
~1帧/秒
~120帧/秒
严重
严重
1000 x 1000
6.45 µm x 6.45 µm
8 µm x 8 µm
8.67 mm x 6.60 mm
8.0 mm x 8.0 mm
16.2帧/秒
30帧/秒
>70%
>60%
36,000个电子(HDR On)
70,000个电子
最大达10倍
最大达2,000倍
12位
14位
气密封装的强制空气电-热冷却
共聚焦扫描头CSU-X1 高速10 位发射光滤光片转轮
Interline/EM CCD 探测器 高速、高分辨率、高信噪比 最优的EMCCD 共聚焦扫描同步效果
4
Photokinesis 激光诱导动力学单元
针对目标区域的快速光漂白/ 光活化 FRAP、FLIP、Photoswitching
实时多维共聚焦成像
6 维(x, y, z, t, w, p)成像,完整展现真实生命过程
整合的控制分析软件Volocity
同一软件环境下完成图像获取、分析及数据发表的全部功能
全64 位操控系统
大幅提高图像数据分析处理能力
显微镜 兼容各品牌正/ 倒置研究级显微镜
UltraVIEW VoX 系统的组成 共聚焦扫描头 激光光源 探测器 ProSync 同步单元 显微镜 工作站
UltraVIEW VoX系统正将活细胞成像技术带入到一个崭新的高度。该系统将共聚 焦成像技术的最新研究成果融于一身,包括Yokogawa®微透镜增强型Nipkow双转 盘扫描技术,高灵敏度电子倍增型(EMCCD)检测技术,快速微分干涉(DIC) 兼容的压电型Z轴控制技术,并配以半导体泵浦固体激光器(DPSS)来实现超 高速、高分辨率的活细胞成像。PerkinElmer独有的亚毫秒级ProSync™同步控制技 术,实时协调整个系统的各种操作,确保在超高速下获得高质量的图像。借助 Volocity软件的全自动控制,用户可以轻松设置各类复杂的图像采集程序,并在 同一软件环境中实现图像采集、渲染展示和定量分析的全部功能。
- 35ºC
- 50ºC
9100-13
背照式EM CCD 512 x 512
16 µm x 16 µm 8.192 mm x 8.192 mm
31.9帧/秒 >90%
370,000个电子 最大达1,200倍
16位 气冷 / 水冷 - 75ºC / - 90 ºC
9100-14
背照式EM CCD 1024 x 1024 13 µm x 13 µm
型号
CCD类型 有效像素 像素面积 有效面积 全帧速率 量子效率(峰值) 典型满阱容量 增益 模/数转换器 冷却方式 稳定冷却温度
UltraVIEW VoX高速激光共聚焦实时成像系统 间行/列扫描型和电子倍增型数码相机性能比较表
ORCA-R2
9100-50
间行/列扫描型CCD
EM CCD
1344 x 1024
灵活的软件授权方案、高性能计算方案,数据管理方案,满足离线分析要求
8
共聚焦扫描头
UltraVIEW VoX系统配备了目前扫描速度最快的Yokogawa新型扫描单元CSU-X1。与先 前型号相比,CSU-X1的光学效率提高一倍,能够在2,000帧/秒的速率下扫描样本。 系统通过平均叠加瞬时记录的图像,获得极佳的成像效果。因其所需的激光功率 更低,可以有效的降低光漂白和光毒性作用,实现长时间的活细胞动态扫描。
活细胞6D(x, y, z, t, w, p)成像
活细胞5D(x, y, z, t, w)成像
固定细胞4D(x, y, z, w)成像
3D(x, y, z)成像
3D(x, y, z)追踪
3D(x, y, z)共定位
3D(x, y, z)荧光共振能量转移(FRET)
光漂白相关技术(FRAP等,需要附件支持)
1 经滤光镜过滤,进入扫描单元,约 1000 个微透镜被光源同时照射
微透镜阵列转盘
光源
。
探测器
5 探测器同时采集激光经微透镜聚焦后通过与其相对应
2 的针孔,形成点光源;聚光镜大大提 高了到达样品的光线透过率,为样品 提供了足够强度的激发光
物镜
样品
。 。
。
透镜
使用PerkinElmer独有的ProSync同步控制 技术采集的神经细胞图像(上),而 没有同步处理的图像(下)存在明显 的扫描线,严重影响成像质量
UltraVIEW VoX系统的应用领域
发育生物学
蛋白质与囊泡示踪
神经生物学
基因表达
细胞周期
细胞信号传导
感染与免疫
UltraVIEW VoX系统常用的实验技术
二色镜
样品的发射光沿光路返回,
4 通过针孔后由二色镜将发射
光与激发光区别开来
激光通过物镜聚焦后照射样品,
3 使样品被1000 个光束同时激发, 随着转盘旋转进行多点扫描
。
。
扫描方式
光源 探测器 显微镜 全幅扫描速度 光漂白光毒性 共聚焦水平
图像获取 3D成像速度 成像质量
6
Nipkow转盘式共聚焦与其他常见共聚焦系统的比较
任意 低 /
全视场同时获取 / 低
(背景噪音高)
“鱼”与“熊掌”兼得
——超高速、
高分辨率
活细胞成像
在活细胞成像过程中,速度至关重要。然而在很多共聚 焦系统中,速度的提高必须以降低图像质量为代价。 UltraVIEW VoX系统以其卓越的性能,为您提供超高速、高 分辨率的活细胞成像,使您可以按照实验的需要自由设定 图像采集速度,无需再为图像质量担心。独有的ProSync同 步控制技术令UltraVIEW VoX系统可以真实再现多维、多色 的活细胞动态过程。
高速共聚焦、固定或活细胞成像,2D或交互式3D,多点同步成像;2D/3D测 量,荧光定位、共定位分析,FRET,追踪制图,趋势分析,图像、视频、统 计数据的发表和展示
FRAP, FLIP, Photoswitching, Photoactivation, TIRF, Ratio, Restoration(反卷积)