激光捕获显微切割技术应用研究新进展
细胞生物学习题库(附答案)
细胞生物学习题库（附答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、以下哪种激素可以直接穿过细胞膜调控靶细胞分化状态,无需膜受体参与A、生长激素B、胰岛素C、甲状腺素D、雌激素E、肾上腺素正确答案：D2、目前已知的最小细胞是A、立克次体B、杆菌C、衣原体D、支原体E、球菌正确答案：D3、下列能够进行自我装配的细胞结构是A、染色体B、线粒体C、脂质双层D、糖蛋白E、胰岛素正确答案：C4、男性,29岁,视物不清10年,双上睑下垂8年,眼球运动障碍7年半,眼球固定6年,无晨轻暮重现象,无复试。
未正规治疗,近5年出现四肢无力,易疲劳。
眼底检查显示视网膜色泽青灰,呈污秽样外观,可见虫蚀样色素紊乱,黄斑区网膜呈金箔样反光。
肌电图显示:肌源性损害,重复电刺激无衰减。
心电图:完全右束支和左前分支传导阻滞。
基因检测显示mtDNA 4977bp的缺失。
上述检测结果提示该患者可能为A、Leber遗传性视神经病B、闭角性青光眼C、Kjer病D、Kearns-Sayre综合征E、Leigh综合征正确答案：D5、新生肽链导入糙面内质网需要一系列的蛋白质分子帮助完成,下列物质中与这个过程无关的是A、SRP受体B、GTP结合蛋白C、蛋白二硫键异构酶D、信号肽E、SRP正确答案：C6、胚胎发育过程中,中胚层在哪一个时期出现A、卵裂期B、原肠胚期C、器官形成期D、囊胚期E、神经轴胚期正确答案：B7、下列不属于残余小体的结构是A、多泡体B、髓样结构C、含铁小体D、类核体E、脂褐素正确答案：D8、在附着核糖体上合成的蛋白质不包括A、血红蛋白B、膜整合蛋白C、抗体蛋白D、分泌蛋白E、溶酶体蛋白正确答案：A9、可用于观察完整组织或细胞三维立体结构的显微镜技术是A、透射电子显微镜B、荧光显微镜C、激光共聚焦显微镜D、普通光学显微镜E、扫描电子显微镜正确答案：C10、根据利用爪蟾卵母细胞核重建体系的研究发现,关于重建的没有核纤层的细胞核,下列哪项叙述不正确A、抑制核孔复合体围绕染色体的组装B、能够进行DNA复制C、能够把DNA复制过程所需的蛋白质运输到细胞核内D、抑制间期核的组装E、不能够形成新的核膜正确答案：B11、下列关于rRNA合成的叙述不正确的是A、由RNA聚合酶Ⅰ负责转录B、转录产物的3'端形成RNP颗粒C、位于核仁组织区的rDNA是合成RNA的模板D、形成明显的“ChristmasE、转录产物的5'端形成RNP颗粒正确答案：B12、关于组蛋白的错误叙述是A、是真核细胞特有的结构B、富含带负电荷的氨基酸C、在细胞周期的S期合成D、不同种属的组蛋白具有极大的相似性E、在细胞周期的S期与DNA组装成核小体正确答案：B13、下列哪一种结构主要由微丝构成A、联会复合体B、核纤层C、纺锤体D、收缩环E、中心体正确答案：D14、有关发育过程中三个胚层作用说法正确的是A、三个胚层各自独立分化互不影响B、三个胚层的分化完成于囊胚期C、中胚层首先独立分化D、在卵裂期就已经决定了三个胚层的发育前途E、胚胎诱导发生在胚层之间而非胚层内部正确答案：C15、假设你乘坐一艘微型的能进入细胞的潜水艇来观察细胞内的囊泡运输过程,那么会发现下列哪种运输路径不存在囊泡运输A、内质网到高尔基体B、细胞外到细胞内C、细胞核内到细胞核外D、细胞内到细胞外E、高尔基体到细胞膜正确答案：C16、在用琼脂糖凝胶电泳检测细胞内的DNA时,发现DNA呈梯状条带,则此细胞可能发生A、细胞分化B、细胞癌变C、细胞坏死D、细胞衰老E、细胞凋亡正确答案：E17、低分化细胞和正常细胞相比,细胞周期的哪一时期比较短A、GB、M期C、GD、GE、S期正确答案：A18、分泌性蛋白质合成与运输需要多种细胞器的参与协作才能完成,以下哪组细胞器正确A、细胞核、微管、内质网B、线粒体、内质网、高尔基复合体C、核糖体、内质网、高尔基复合体D、细胞核、内质网、溶酶体E、线粒体、内质网、溶酶体正确答案：C19、下面哪项不属于胞吞作用A、基团转移B、受体介导的胞吞作用C、吞噬作用D、吞饮作用E、通过网格蛋白有被小泡介导的胞饮作用正确答案：A20、以下染色体,常见次缢痕结构的是A、2号染色体B、Y染色体C、21号染色体D、1号染色体正确答案：D21、平衡沉降离心根据组分的何种特性将其分离A、密度B、构象C、等电点D、电荷E、分子量正确答案：A22、在一个细胞中发现下述复杂的大分子:DNA与RNA聚合酶相连、DNA 与延伸的RNA链相连、DNA与核糖体相连、DNA与两个tRNA相连、DNA与延伸的氨基酸链相连。
激光捕捉显微切割技术操作流程
激光捕捉显微切割技术操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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激光捕获微切割技术在肿瘤基础研究中的应用进展
关键词 ： 肿瘤 ； 光捕获微 切割 ； 激 基础研究
中 图分 类 号 ： ７ ０ ５ Ｒ ３ ７ 文 献 标 识 码 ： Ｂ
膜与组 织 切片的接 触面部控 制在 宽约 ４ 的窄带 中 ． ０… 从而减 少 由于吸收的光 能在 膜 ｆ ～的扩 散 而造 成 周边 “ 质 ”出胞 的黏 杂 妻 附， 提高 ｒ准确性 。 ｌ 、 具有简便 高效的特点 ， Ｍ （ 儿乎所有操 作 ０、 ０ ５ ０、 ０ ｇ
文章编 号 ：０ １５ ３ （０ ２ ０ —４ ５０ １０ —９ ０ ２ ０ ）４０ ４ —２
显微 切割 （ ｃｏ ｉ ｅｔ ｎ 是 ２ 世 纪 ９ ｍｉ ｄｓ ｃｉ ） （ ｒ ｓ ｏ ） Ｏ年 代 出现 的 新 技
ｌ Ｌ Ｍ 的 原 理 和 方 法 Ｃ
损 伤的光 化学 反应 。
１ ３ ＥＶＡ 膜 ．
Ｅ ＶＡ 膜厚约 １０ ０ ｎ ， 吸收近红 外激光 产生 的大部 ０ ～２ ０Ｈ ｌ可 分能量 一 可在 瞬间将激光束 所照射 区域 的温度 提高 到９ 并 ８， ０
保持数 毫秒 ， 不仅 使局部 的薄膜融化 并快速再 塑型 ， 而且瞬间温
１ １ 细 胞 显 微 切 割 的 过 程 Ｊ ．
Ｌ ＣＭ 的切片范 围很 广 ， 以是新鲜 冷冻组织 也可 以是 石蜡 可 包埋组织 。切片准备情 况 直接 影响 微切 割 的效果 ， 如脱 水 不完 全就会 造成组织 与载玻片 的黏 附 力增加从 而 不能获得细胞 组 织 的保 存及切 片的 固定 、 染色 主要 有 以下 步骤 ： 手术 及活检标
度变化 不会引起膜 下方细胞 中 Ｄ ＮＡ 、 ＲＮＡ、 白质的变 化 蛋
ｌ ４ 组 织 切 片 的 准 备
激光切割技术国内进展及应用案例论文
激光切割技术国内进展及应用案例学院：机械工程学院系：机械制造班级：11机制2班制作人：刘卓聿、雷丰源指导老师：龚老师【摘要】随着我国国民经济的快速发展，我国正从一个制造大国向制造强国迈进。
激光加工制造技术是一项集光、机、电于一体的先进制造技术，在许多行业中已得到了越来越普遍的应用。
而在工业生产中，激光切割占激光加工的比例大约在70﹪以上，是激光加工行业中最重要的一项应用技术。
本文深入浅出地介绍了目前常用的激光切割技术，而且内容丰富、实用性强。
【关键词】激光加工、激光切割技术目录一、激光切割的基本技术二、激光切割技术的优点三、激光切割技术的发展四、国内激光技术现况五、激光切割技术的分类5.1汽化切割5.2熔化切割5.3氧化融化切割5.4控制断裂切割六、激光切割技术的应用七、参考文献一、激光切割的基本技术激光：(LASER-Light Amplification of Stimulate Emission Radiation)是利用原子或分子受激辐射的原理，使工作物质受激而产生的一种单色性高，方向性强，亮度高的光束。
激光器：激活介质、激活装置、光学谐振腔激光器按工作介质来分类分为固体激光器、液体激光器、气体激光器、半导体激光器，此为，还有化学激光器和自由电子激光器等。
原理：利用高功率密度的激光束来穿过材料表面，在极短的时间内将材料加热到几千甚至上万度，使材料融化或者气化，并用高压气体将融化或者汽化的物质从切缝中吹走，以达到切割材料的目的。
经过30多年的发展，现已开发的激光器超过200多种，种类繁多，特点各异，用途也各不相同。
虽然激光器的种类繁多，但目前适用于激光切割的工业化和YAG激光器。
激光器主要是CO2激光加工技术是利用激光束与物质相互作用的特性对材料(包括金属与非金属)进行切割、焊接、表面处理、打孔、微加工等的一门技术。
二、激光切割技术的优点激光加工技术与传统加工技术相比具有很多优点，所以得到如此广泛的应用。
【国家自然科学基金】_激光捕获显微切割技术_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
2011年 科研热词 推荐指数 激光捕获显微切割 2 葡萄胎(hm) 1 肺鳞癌 1 等位基因 1 短串联重复序列(str) 1 激光解吸电离飞行时间质谱技术 1 激光捕获显微切割技术(lcm) 1 激光捕获显微切割技术 1 差异蛋白质 1 定量蛋白质组学 1 基因芯片 1 喉肿瘤 1 卵巢肿瘤 1 免疫磁珠技术 1 itraq 1
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32
科研热词 血管生成拟态 显微切割 高等植物 遗传学 蛋白质组学 蛋白质组 葡萄胎 膜联蛋白a2 胚胎和胎儿发育 胃肿瘤 肿瘤干细胞 肾小球肾炎 肝细胞肝癌 肝细胞癌 肝癌干细胞 结直肠肿瘤 细胞分离 短串联重复序列 猪,雏型 激光捕获显微切割技术 激光捕获显微切割 流式细胞仪 模型,动物 密度梯度离心 大鼠 受体,fc 原生质体分离 内皮相关分子 乙酰化标记 cd34 cd133 barx1
2008年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
科研热词 推荐指数 激光捕获显微切割 3 蛋白质组 2 骨桥蛋白 1 质谱分析法 1 表浅性膀胱移行细胞癌 1 蛋白质 1 肿瘤异质性 1 肺肿瘤 1 癌,鳞状细胞 1 癌,肝细胞 1 生物通路 1 琼脂糖凝胶电泳 1 牙齿发育 1 激光捕获显微切割技术 1 比较基因组杂交芯片 1 显微切割 1 数据库 1 寡核苷酸序列分析 1 喉肿瘤 1 免疫组织化学 1 光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离 1 rna质控 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
激光微纳加工技术创新与发展动态
激光微纳加工技术创新与发展动态激光微纳加工技术是一种利用激光对微米和纳米尺度的物质进行加工和制造的科技手段。
近年来，随着纳米科技和微纳制造的快速发展，激光微纳加工技术在材料科学、生物医学、光电子学等领域展现出巨大的潜力。
本文将从技术创新和发展动态两个方面，分析激光微纳加工技术的最新成果与前景。
一、技术创新1. 激光直写技术激光直写技术是一种通过激光束直接进行材料加工的方法。
在过去，激光直写技术主要用于光纤与集成光子芯片的制造。
然而，最近的研究表明，激光直写技术也可以用于制造微纳结构和生物医学器械。
通过控制激光束的功率和聚焦点，激光直写技术可以实现对材料的高精度加工，如微米级的结构和孔洞。
此外，激光直写技术还可以用于制造微纳流体器件和生物芯片，为生物医学研究和临床诊断提供了新的手段。
2. 超快激光加工技术超快激光加工技术是一种利用超快激光脉冲对材料进行高精度加工的方法。
与传统的激光加工方法相比，超快激光加工技术具有更高的加工精度和效率。
通过调节激光脉冲的幅度和频率，可以实现对材料的微纳结构加工。
超快激光加工技术在光电子器件、光学元件和光电子材料等领域有着重要的应用。
例如，通过超快激光加工技术可以制造出高效的光伏材料和光学元件，有助于提高光电转换效率和光学传输性能。
二、发展动态1. 激光微纳加工技术在材料科学中的应用激光微纳加工技术在材料科学中的应用越来越广泛。
通过激光微纳加工技术可以制造出具有特殊结构和性能的材料，如纳米线、纳米点阵和纳米图案等。
这些材料具有很高的比表面积和各向异性特性，可以在催化、传感和能源存储等领域发挥重要作用。
此外，激光微纳加工技术还可以用于制造高强度、高硬度和高导热性能的材料，如金属合金和陶瓷材料，为航空航天、汽车工业和能源领域的发展提供了新的材料支持。
2. 激光微纳加工技术在生物医学中的应用激光微纳加工技术在生物医学中的应用也备受关注。
通过激光微纳加工技术可以制造出微米级别的生物芯片和医学器械，如微流控芯片和植入式生物传感器。
显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势
显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势摘要：显微分析技术在材料研究中起着至关重要的作用。
它利用不同的原理和方法对材料进行深入观察和分析，以揭示其组织结构、成分特征和功能性能。
本文概述了光学显微镜、电子显微镜和扫描探针显微镜等常见的显微分析技术。
光学显微镜通过可见光的折射、散射和吸收现象实现样品的显微观察和形貌表征。
电子显微镜则利用高速电子束与样品相互作用，获得更高分辨率和详细的图像信息。
扫描探针显微镜可以利用扫描探针对样品表面进行拓扑和化学成分的显微观察。
这些技术在材料研究中具有不同的优势和局限性，并满足不同研究需求。
光学显微镜适用于表面形态和颗粒分析，电子显微镜适用于高分辨率和深度分析，扫描探针显微镜则提供高精度的化学成分信息。
显微分析技术在材料研究中有着广泛的应用，有助于揭示材料的微观性质和特征。
随着先进显微镜技术的发展和改进，未来的显微分析技术将更加强大和多样化，为材料科学的深入研究提供更广阔的空间。
基于此，本篇文章对显微分析技术在材料研究中的应用与发展趋势进行研究，以供参考。
关键词：显微分析技术；材料应用分析；发展趋势分析引言材料研究是现代科学与工程领域的重要组成部分，对于开发新材料、改进现有材料以及解决实际问题具有重要意义。
而显微分析技术作为材料研究中不可或缺的分析工具，具有深入了解材料微观结构和性能的能力。
它可以对材料进行高分辨率观察和深度分析，并揭示其组织结构、成分特征和功能性能。
随着科学技术的不断进步，显微分析技术也得到了极大的发展。
同时，对于显微分析技术的发展趋势的探讨，也有助于我们认识到改进和创新的机会，提高材料研究的效率和质量。
因此，本文旨在为材料科学领域的学者和研究人员提供有关显微分析技术应用与发展的综合指南和参考，促进材料研究的进一步发展与创新等。
1显微分析技术概述显微分析技术是一种广泛应用于材料研究领域的重要工具。
它根据不同的原理和方法，对材料进行深入观察和分析，以揭示其组织结构、成分以及功能性能。
显微切割技术章
第七章显微切割技术人体组织是由相互作用的不同的细胞群体组成的，这些细胞群体彼此组成复杂的三维结构，每种细胞均有自己的独特的mRNA与蛋白质表达（表现型）。
因此在复杂的组织中取得同质性的样本是相当困难的。
尤其在肿瘤的病理学研究中，样本的同质性是经常遇到的问题。
例如，霍奇金病的肿瘤细胞——Reed-Sternberg细胞和Hodgkin细胞（R-S/H细胞），通常单个分散在大量的反应性细胞（如淋巴细胞、组织细胞、嗜酸性粒细胞和浆细胞）组成的背景之中，给R-S/H细胞起源的研究带来很大的困难。
随着分子病理学研究的深入，需要分离的样本越来越小，从大块的组织精确到单个的细胞，甚至细胞器或者染色体。
常规的研究方法对此无能为力，而显微切割技术的出现解决了上述难题。
在显微切割技术（microdissection technique）发展之前，进行原位的细胞表型的研究方法是免疫组化和原位杂交。
但是免疫组化和原位杂交方法一般只能局限于一种或是几种基因表达的分析，而且难以进行DNA、mRNA和蛋白质的定量分析（如突变、缺失）。
显微切割技术能够对于组织病理学上确定的细胞群（甚至精确到一个特定的细胞，或特定的细胞器或特定的染色体）进行分子病理学研究，达到高度敏感性和高度特异性的统一。
尤其是在需研究的细胞只占样本中细胞的少数时，以及需研究的细胞呈散在分布时，显微切割的重要性尤为明显。
加之现在的免疫组织化学和原位杂交等技术可以在切片上特异性定位所需的细胞，因此显微切割技术在最近几年中得到了迅速地发展。
由于和高通量（high-throughput）基因分析（基因芯片）以及蛋白分析技术结合，显微切割技术显示出良好的发展前景（图7-1）。
图7-1一、显微切割技术发展的回顾组织显微切割的概念尤为简单，即直接在光学显微镜下从异质性的组织样本中选取某一特定的细胞群。
实际上，要达到这一目的在技术上经历了以下几个阶段：早期是从冰冻组织切片上在肉眼下用解剖刀刮去不需要的部分，剩下感兴趣的组织。
激光捕获显微切割技术及其在肿瘤基础研究中的应用进展
激光捕获显微切割技术（ Ｃ 是 ２ Ｌ Ｍ） Ｏ世纪 ９ ｏ年代末期 由
美 国 国立 卫 生 研 究 院 开 发 ， 由 Ａ ｃ ｒｓ 司 商 品 化 发 展 起 并 ｒｔ ｕ 公 ｕ
基 本 上 由软 件 控 制 ， 作 者 无 需 手 动切 割 。 整个 过 程 在 显 微 操
镜下进行 ， 可以直观地选取 目的细胞 ， 具有 “ 所见 即所得 ” 的
显微镜与 电脑相连接 以便对 激光进 行控制及 获得相 应 的图 像资料。 将 专用组织切片放置在倒置显微镜 的载物 台上 ， 在一个
与 标 准 Ｅ ｐｎ ｏｆ 配 套 的 扁 平 盖 子 上 贴 附 一 层 直 径 约 ６ ｐ ｅｄｒ 管
于 Ｌ Ｍ 仪器集普通光学 显微 镜和 荧光 显微镜 于一体 ， Ｃ 故除 了常规染料外也可把荧光染料 （ Ａ ＩＦＴ ｈｄｍｉ ） 如 Ｐ 、ＩＣ、ｏ ａ ｎ等 用 于样品的分离 ， 样不仅可以依据组织细胞的形态而且 可以 这
３ Ｌ Ｍ 技 术 在 肿 瘤 基 础 研 究 中 的 应 用 Ｃ
细胞上 。Ｅ Ａ膜受 照射后 瞬间温 度升 高使薄膜溶 解并 与其 Ｖ
下方的细胞 紧密粘连 ， 其黏附力远大于组织与载玻 片的黏附 力， 与薄膜相连 的细胞 可以被完整地从组织切片 中取 出而不
会损伤。这一过 程 可以在 盖 子表 面重 复进行 ， ～ 张 Ｅ Ａ 用 Ｖ 膜可以在切片的不 同部位快 速选取 大量被 选细胞 。然后将 黏 附有 细胞 的 盖 子 盖 在 装 有 微 量 缓 冲 液 的 Ｅ ｐ ｎｏｆ 上 ， ｐ ｅｄｒ 管 通 过洗 脱 使 细胞 与 薄 膜 分 离 而 获 得 完 整 的 细 胞 。 利 用 此 管
特 点 。而 且 速 度 快 ， 割 过 程 可 以 在 几 秒 内完 成 ， 练 的 操 切 熟
蛋白质组学技术的研究
1439科研进展蛋白质组学技术的研究欧阳学剑湖北中医药高等专科学校（434020）摘要：本文讨论了蛋白组学对人体疾病研究的意义。
采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、激光捕获显微切割、质谱技术等研究方法。
结合数据库和分析软件对实验结果的分析，探索在蛋白质水平上的作用模式、功能机理、调节、调控，以及蛋白质群组内相互作用。
为各种全身疾病的早期诊断，进展监测，新靶点的确定提供了重要依据。
关键词：蛋白质组学；技术；研究St udy of pr ot eom e t echni cal A ut hor O uyang X ue-j i an,chi nes e m edi ci ne m oder n di st ance educat i on of chi na.J our nal i s t N o Z2208002A ddres s Ji ngzhou ar ea peopl e r oad N o.10of hubei,434020,C hi na.Em ai l i bggg@.A bs t r act:St udy s ens e of t hi s t ext di s cus s ed pr ot eom e t o t he hum an body di seas e.R es ear ch m et hod of adopt t he t w o-di m ens i onalpol yacr yl am i de gel el ect r o-phor es i s；t he l aser capt ur es m i cr odi s s ect i on；t he m as s spect r a t echni cal.R esul t anal ys es of com bi nedat a l i br ary and s of t w ar e t o experi m ent,i nt er pl ay m ode of expl or e prot ei n m ol ecul ar l evel up；f unct i on m echani s m；r egul at e；r egul at or y and r eci proci t y of pr ot ei n crow d s et.Earl y s t age di agnos e of for vari ous di s eas e and m oni t or w i t h det er m i ne provi des ci ent i f i c bas i s for s t h of new t ar get.K ey w or ds:pr ot eom e,t echni cal,st udy蛋白质组学（prot eom e）系基因所能表达的全部蛋白质，它能更为清楚的表达细胞或机体在特定时间和空间上表达的所有蛋白质。
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峰， 等 & 激光捕获显微切割技术应用研究新进展 经 染色 的 用 于 存 档 的 切 片 也可 被 成 功 进行显微切割。 尽管Байду номын сангаас234 应用广泛， 但对于常规染 色、固定且不加盖玻片的组织切片，其 视觉分辨率受到很大限制。而对于那些 本身缺乏一定结构特点的复杂组织（如 淋巴组织， 广泛浸润的腺癌等 ） ， 要准确 分 离出 某 一 类 细 胞 几 乎 是 不可 能 的 。 IB:D 等
破性的进展，现已广泛应用于肿瘤研究， 包括前列腺癌 -0J #% / 、 肾癌 -## / 、肺癌 - #. / 、甲 状腺癌
-#>J #H/
!
"#$ 的优缺点
234 最 显 著 的 优 点 在 于 其 迅 速 、
、食管癌 、胃癌 、 肝癌
-#’/ -#"/
- #K /
、
胆管癌 - #! / 、 结肠癌 - #0J .% / 、 乳腺癌 - .# / 、 胶质 瘤 -../ 、 恶性胸膜间皮瘤 -.> / 、 淋巴瘤 -.H / 、 卵巢 癌 -.’ / 等。此外， 234 还成功应用于其它 一些疾病的研究中， 如 378L: 病 获得性免疫缺陷综合征 丙型肝炎
- ’J " /
!"#
直接进行标准的聚合酶链反应 （;8(O$B79AB 6L95: 7B96=58:， ， 从而在 G3P） MN+ 水平上进行基因改变的分析。 前列腺癌是严重威胁男性健康的 一种恶性疾病，其发病率及病死率均较 高，但有关前列腺癌发生的分子机制尚 未明确。3LB: 等
-0 /
成功将 234 技术应
通过采用特殊染色， 尤其是
免疫组化方法，使目标细胞或想要去除 的细胞变得更加醒目，从而解决了上述 难题。 应用 234，偶尔会出现无法将选择 的细胞从切片上移走的情况，出现这种 结果有两种原因： ? # @ 细胞与热塑膜之 间的粘合力不足，通常是由于组织未完 全脱水或激光的能量设置过低造成的； ? . @ 组织切片与载玻片间的粘合力过强， 通常发生在显微切割干燥时间过长的冰 （包括免疫组 冻切片。针对不同样本组织 化染色的组织切片） ，一些研究小组分别 详尽报道了采用适合的处理方法， 以达到 最佳的显微切割条件 - ’J KJ ! / 。
用于前列腺癌的研究中，分别捕获了前 列腺癌癌巢细胞和癌前病变细胞，对其 线粒体基因组（一种敏感的细胞质 进行基因分析。 结果发现 J 0%Q 前 MN+） 列腺癌标本中存在有体细胞突变，突变 发生在线粒体基因组调控区，从而证实 了 在前 列 腺 癌 和 其 癌 前 病 变内 存 在 有 诱发线粒体突变的机制。 检 测 杂 合 子 丢 失 （(8AA 8R LB=B78S TOE8A5=O，2UV）是 MN+ 分析的一项重要 已有许 内容。 应用 234 进行 2UV 检测， 多成功的报道。 3L979RBSW9<RR7B= 等 - .# / 对 ’> 例乳腺癌标本应用 234 提取肿瘤细 胞，进行基因分析，发现有 . F > 的肿瘤 细胞在 !;##S.# 区域内存在 2UV，而在 肿瘤周围的组织中未检测到 2UV 发生， 这对于乳腺癌的早期诊断有重要意义。 495=79 等 - >. / 分析比较了皮肤黑色素瘤与 良性黑色素细胞痣发生 2UV 的情况。 应 用 234 从 >H 例黑色素细胞性损害 （#0 例恶性黑色素瘤和 #’ 例黑色素细胞痣， 后者中有 #. 例是出生后发生的， 其余 > 例 是先 天 性 的 ） 捕 获 肿 瘤细 胞 或 痣 细 胞，分别对其 ’ 个染色体区域 （#;>"J "X..S.>& >J !;..S.HJ #%X.>J 9:D ##X.> ） 进行 2UV 检测分析。结果发现 （0’Q ） 存 #0 例恶性黑色素瘤中有 #! 例 在 2UV， #’ 例黑色素细胞痣中有 0 例存 （"%Q ） ，但在 > 例先天性黑色素 在 2UV 细胞痣中没有一例发生 2UV，而且黑色 素细胞痣中所发生的 2UV 并非是随机 性的，其发生区域与恶性黑色素瘤基本 一致。这些结果从分子水平上证实了黑 色 素细 胞 痣 是 皮 肤 黑 色 素 瘤的 癌 前 病 变。 肾血管肌脂肪瘤是一种少见的血 管源性肿瘤，偶发于女性肺淋巴管肌瘤 病 ? (O$;L9:E58$O8$9=8A5A， 2+4 @ 和结节 性硬化症。 血管肌脂肪瘤包含 ’ 种不同 形态学特点的血管：细胞性（ 6B((<(97 ） 、 胶原性 ? 68((9EB:8<A @ 、血管外皮细胞性 （LB$9:E58;B756O=56） 、 血 管 球 性
R% S
关键词： 激光捕获显微切割；[HU 分析；基因表达分析 中图分类号： \$>6>> 文献标识码： U （<##& ） 文章编号： %### ; &"$] #$ ; #!"# ; #D
出激光捕获显微切割技术（:8+*) /8,0I)* 。次年，美国 A3/)(.3++*/03(-， 2’T） U)/0I)I+ @-53-**)3-5 公司成功研制激光 捕获 显 微 切 割系 统 ， 并 实 现 商 品化 销 售。应用该技术可以在显微镜直视下快 速、准确获取所需的单一细胞亚群，甚 至单个细胞，从而成功解决了组织中细 胞异质性问题。这项技术现已成为美国 “肿瘤基因组解剖计划 ” （/8-/*) 5*-(A* 8-80(AV ,)(W*/0， ’XUY） 的一项支撑技 术。
开发
闫 镜、固态红外激光二极管、激光控制装 （固定载玻片） 置、 控制显微镜载物台 的操 纵杆、 电耦合相机及彩色显示器。用于捕 获目标细胞的热塑膜直径通常为 " $$， 覆在透明的塑料帽上， 后者恰与后继实验 所用的标准 %& ’ $( 离心管相匹配。 机械臂悬挂控制覆有热塑膜的塑 料 帽， 放 到 脱 水 组 织 切 片上 的 目 标 部 位。显微镜直视下选择目标细胞，发射 激光脉冲，瞬间升温使 )*+ 膜局部熔 化。 熔化的 )*+ 膜渗透到切片上极微小 的 组织 间 隙 中 ， 并 在 几 毫秒 内 迅 速 凝 固。组织与膜的粘合力超过了其与载玻 片间的粘合力，从而可以选择性地转移 目标细胞。 激光脉冲通常持续 %& ’ , ’& % 毫秒，并且可在整个塑料帽表面进行多 次重复，从而可以迅速分离大量的目标 细胞。将塑料帽盖在装有缓冲液的离心 管 上， 将 所 选 择 的 细 胞 转移 至 离 心 管 中，从而可以分离出感兴趣的分子进行 实验 。
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"#$ 的原理及技术基础
2’T 的 基 本 原 理 是 通 过 一 低 能 红
外激光脉冲激活热塑膜—— — 乙烯乙酸乙 （*0KV:*-* F3-V:8/*080* ， （其 烯酯 膜 @ZU） 最大吸收峰接近红外激光波长 ） ，在直 视下 选 择 性 地将 目 标 细 胞 或 组 织碎 片 粘到该膜上 R % S 。2’T 系统包括倒置显微