激光捕获纤维切割技术
1第四章
激光捕获显微切割技术
（Laser Capture
Microdissection，LCM）激光捕获显微切割技术(Laser Capture
Microdissection，LCM)：是一种有效的细胞
纯化技术，可在基本不损伤细胞内DNA、RNA
和蛋白质并保持组织细胞结构完整的条件
下，从组织中分离出同质细胞群、单个细胞
甚至亚细胞结构。
LCM技术的必要性：
研究对象的异质性
研究材料日趋微小基于流式细胞术的荧光激活细胞分选：
LCM是目前从组织或细胞单层分离亚群细胞
的有效方法，同时实现将组织中每种细胞群
作为研究对象，其分子表达谱会非常接近体
内状态
LCM技术能够使我
们分离得到特异的
目的细胞，而没有
周围细胞的污染。LCM技术的特点：
细微：研究对象可以达到μm 级
原位：在组织细胞原位取材，定位清楚、
准确
同质：保证获得同质研究对象
结合：分子生物学、免疫学及病理学研究
2组织标本
同质细胞群、单个细胞、亚细胞成分
DNARNA蛋白质LCM分离纯化结合多种分子生物学技术：
DNA水平：结合测序、RFLP、SSCP、MSP等方法,
基因突变、染色体易位、甲基化改变等方面的
研究。
RNA水平：结合Real-time PCR、cDNA芯片等技
术，基因表达分析。
蛋白水平：结合western blot、2-D电泳、蛋白
组学方法，肿瘤研究。
样品保存
固定方法
切片厚度
切割效率影响LCM标本
中DNA、RNA、
蛋白质提取量
的因素
普通染色：苏木素，甲基绿等
免疫染色：是在LCM之前进行免疫组化或免疫
荧光染色，增强在复杂组织中对目的细胞的鉴
别能力，可以在形态上相似的细胞中选出在免
疫表型上明显不同的细胞，如B和T细胞，实现
对功能分类后的细胞进行分选。
3免疫染色LCM
主要用于研究DNA和RNA
染色过程应注意，使用高亲和力和高浓度
的抗体，并尽量缩短免疫染色的时间，减
少对DNA和RNA的破坏。
全自动显微镜、软件操作
金属卤素光源，激发光强度可调
切割、收集一体化
目标自动识别
石蜡、冰冻切片、活细胞（贴壁细胞）、涂
片、甩片、树脂包埋组织
6.3x、20x、40x切割专用物镜主要应用：
从组织切片中获取同质目的细胞
GFP标记的活细胞筛选
4工作原理：激光束通过物镜，由电脑控制
沿着设定好的路径切割，即可获得需要的
特定细胞或组织，依靠重力作用收集。组织切片
PEN膜
载玻片PEN（polyethylene naphthalate）
收集管载玻片
PEN膜
组织切片激光束6.3x
20 x
40 x物镜
5GFP（green fluorescent protein）标
记的活细胞筛选：
目的：筛选稳定转染目的基因的细胞群稳定转染目的基因的细胞：研究某个外源基因
对细胞某些生物学行为（增殖、凋亡、迁移、
侵袭）的影响。稳定表达外源基因的肿瘤细胞
接种到动物体内可以直接观察体内成瘤和转移
情况，同时施加一些处理因素，如放化疗、免
疫生物治疗等对体内肿瘤的疗效。
将带有绿色荧光蛋白（GFP）标签的质粒载体连
接目的基因，转染进入细胞后，能够同时表达
出GFP和目的基因，GFP的表达和定位代表目的
基因。目前GFP已经成为跟踪活组织或细胞内基
因表达及蛋白定位的常用标记物。
GFP目的
基因表达融合蛋白利用LCM系统对活细胞筛选，就是将这
些表达GFP（代表目的基因）的单细胞
克隆逐个挑选出来，分别培养扩增，最
终建立稳定表达目的基因的细胞系。
2.倒置、切割3.收集
4.转移皿盖1.接种细胞
PEN膜
6整个过程可以保证无菌操作
分选得到的细胞克隆准确可靠
一次即可分选出所有阳性克隆
全景扫描（Specimen overview）：利用电动
扫描台的精确步进功能，在高倍视野下（40×）
对一整块组织按顺序连续扫描，每个镜下视野
采集一张图像，形成一个m×n个图片拼接而成
的组织全景图片
可以实现组织切片的电子放大
寻找连续切片的镜下同一位置
计数相似面积内的不同组织切片中结节或
阳性细胞的数量展望：
发展单细胞切割技术
更智能的自动识别功能
固定、染色和抽提方法的改进
用于芯片、蛋白质组学等高通量分析
MALDI-TOF-IMS分析DAI大鼠脑组织内差异蛋白的分布
MALDI-TOF-IMS分析DAI大鼠脑组织内差异蛋白的分布
任冠恒;翁榕花;施妍;黄平;邓恺飞;刘宁国;陈忆九
【摘 要】目的 基于基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像(matrix assisted
laser desorption/ionization-time of flight imaging mass
spectrometry,MALDI-TOF-IMS)技术建立弥漫性轴索损伤(diffuse axonal
injury,DAI)大鼠脑组织内蛋白差异化表达的质谱成像方法.方法 应用Autoflex Ⅲ
MALDI-TOF质谱仪在质荷比1 000～20 000范围内对DAI组和对照组脑组织进行质谱扫描,利用ClinProTool 2.2软件对两组数据进行统计学分析,挑选出存在表达差异的蛋白质分子进行质谱成像,观察不同质荷比的蛋白质分子在脑组织中的分布情况. 结果 质荷比为4963、5634、6253、6714及7532的5个蛋白质分子在DAI大鼠脑组织内表达量存在差异. 结论 MALDI-TOF-IMS可用于大鼠DAI后脑组织内差异蛋白的研究,初步建立了质谱成像技术检测DAI大鼠脑组织中差异蛋白分布的分析方法.
【期刊名称】《法医学杂志》
【年(卷),期】2016(032)004
【总页数】4页(P241-244)
【关键词】法医病理学;弥漫性轴索损伤;质谱分析法;基质辅助激光解吸电离;脑干;大鼠
【作 者】任冠恒;翁榕花;施妍;黄平;邓恺飞;刘宁国;陈忆九
【作者单位】司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063;南方医科大学基础医学院法医学系,广东广州510515;莆田市公安局城厢分局,福建莆田351100;司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063;司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063;司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063;司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063;司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室上海市司法鉴定专业技术服务平台,上海200063
激光光镊技术及其应用
激光光镊技术及其应用
陈 君
传统的机械镊子夹持物体时必须用镊尖接触物
体,然后施加一定压力,物体才能被夹住。而光镊则
不同,它是基于光的力学效应使物体受到光束的束
缚,然后通过移动光束来迁移或翻转物体。与机械
镊子相比,光镊夹持和操纵物体的方式是温和而非
机械接触的,能够无损伤地捕获和操作微小的活细
胞及纳米量级的颗粒。光镊为研究微观世界提供了
一种新手段,可以预见,在21世纪,作为纳米科技和
生命科学领域得力工具的光镊技术必将具有广阔的
应用前景,也必将成为本研究领域不可或缺的技术
手段之一。
一、激光光镊的渊源与特点
激光光镊技术早期也称为激光捕获技术,它利
用聚焦的激光束夹起并操纵细胞、细菌或原子等尺
度约在几纳米到几十微米之间的微粒。早在1969年,光镊技术的发明人贝尔实验室的阿什金(A.
Ashkin)就首次实现了激光驱动微米粒子。此后他又发现微粒会在横向被吸入光束(当微粒的折射率
大于周围介质折射率时)。在研究了这两种现象之
后,他又利用相对传播的两束激光实现了双光束光
阱。1970年,他利用多光束激光的三维势阱成功夹
起并移动了水溶液中的小玻璃珠,后来这种激光夹
持微粒的技术经过不断改进,所能捕获的粒子越来
越小。1985年,阿什金开始采用单光束夹持细菌、
病毒等微小生物体,并在1987年利用1064纳米的
红外激光成功夹起病毒。但由于活性体对可视波段
激光具有强烈的吸收作用,因此早期实验在对细菌
的操作过程中存在活细胞损伤的问题,后来阿什金
发现红外光对大多数生物细胞和有机体是相对透明
的,所以为了避免损伤活细胞组织,在用于大多数生
物研究的光镊装置中以800～950纳米的红外激光
配合一定的功率操作。
光镊自诞生以来已在微米尺度量级的粒子操控
和粒子间相互作用的研究中发挥了重要作用,成为
这一尺度微粒的特有操控研究设备。由于它是用
“无形”的光束来实现非机械接触弹性捕获微粒,因
此不会对样品产生机械损伤,又由于光镊的所有机
械部件离捕获对象的距离都远大于捕获对象的尺度,是“遥控”操作,因而几乎不干扰粒子的周围环
ipg 激光器工作原理
ipg 激光器工作原理
IPG（International Photonics Group）激光器的工作原理基于光纤激光器的技术。具体来说，IPG激光器采用了光纤放大器的原理。
IPG激光器的工作原理涉及到以下几个关键步骤：
1. 光纤耦合：IPG激光器将激光二极管或其他激光源产生的光通过光纤进行耦合。光纤是一种具有较高折射率的纤维状结构，可以将光束有效地引导、捕获和传输。
2. 激光增益：经过耦合后，光在光纤中传输。在光纤中，激发动能将光子转化为光子，并且随着光在光纤中传播，光的数量逐渐增加。这种现象称为激光增益，通过激增益，光纤中的光强度可以显著增加。
3. 激光放大器：经过激光增益后，光信号被传递到激光放大器。激光放大器是一种能够对激光信号进行放大的装置。在激光放大器中，光纤通过受激辐射过程被放大，从而产生高强度的激光束。
4. 输出激光：经过放大后，激光束从激光器的输出端口被释放出来。这个激光束可以被用于各种应用，如切割、焊接、打孔、医疗等。
总的来说，IPG激光器通过光纤的放大来增加激光信号的强度，并将其输出为高质量、高功率的激光束。这种激光器具有高效率、高可靠性和稳定性的特点，被广泛应用于工业和科学研究领域。
自动光纤切割刀原理
自动光纤切割刀原理
自动光纤切割刀的工作原理主要基于激光技术。以下是具体的步骤：
1. 激光器发射出一束高能量密度的激光光束。
2. 激光光束经过特定的镜片和透镜聚焦，形成一个小而集中的光斑，其直径可以小于。
3. 这个高能量密度的光斑照射到工件（光纤）上，使得被照射的区域瞬间达到高温，从而使材料熔化甚至汽化。
4. 通过控制激光束的位置和功率，可以精确控制加工效果，从而实现高精度、高效率的切割。
5. 光纤切割机通常配备数控机械系统，可以自动移动光斑，从而实现连续的切割。
6. 边缘整齐、平滑，适用于高精度的切割加工，如金属板等。
以上信息仅供参考，如需了解更多信息，建议查阅光纤切割刀相关书籍或咨询专业人士。
激光捕获显微切割细胞的全基因组DNA扩增
病理学杂志２ＯＯ２年２月第３ｌ卷第１
圈２ 用自来水分色时髓鞘及神经轴索色泽偏蓝 天青一美蓝 染色｛葺ｘ ２Ｄ０ 丰富区域的皮肤活检，镜下可以找到感觉神经的末梢纤维成 分。 我们舟绍的方法有 速简便、分辨清晰的特点，在病理 诊断方面可以比石蜡切片提高分辨率，为明确诊断提供更详 细的信息 在光学显傲镜下显示很多微细的结构甚至可以与 ２００２．Ⅷ３１．№．１ 低倍电子显傲镜下的观察结果相媲美。树脂包埋薄切片的 天青一美蓝染色还可对周围神经进行形态测量学研究，在观 察周围神经病理形态变化的同时还可对神经柬的面积及有 髓神经纤维的数量、直径甚至髓鞘的厚薄作计量研究，从而 为脱髓病变及轴索病变的诊断提供更为可靠的参考数据。 参考文献 ｌ郭玉璃．何毅，王建明遗传运动感觉性周围神经病 中华神经 精神科杂志，１９９２，２５ ２６１－２６３ ２郭玉璞，陈琳，曾维民线粒体肌病合并周围神经扁．中华神经 精神科杂志．１９９２，２５：２５８－２６０ ３郭玉璞，王建明，何毅糖尿病周围神经病临床病理观察中华 病理学杂志，１９９１，２０，４：２９２－２９４ ４袁云，陈清棠，吴丽娟．多发性肌炎的周围神经改变．中华神经 精神科杂志，１９９３，２６：３５．３７ ５于洪藻。李成库病理标车村作技木长春：白求思医科大学出 版社，ｌ９８９ １５５—１５９． ６田玉旺，邢惠清，丁华野，等．变色酿２Ｒ一亮绿法在神经髓鞘染色 中的应用中华病理学杂志．１９９８，２７：３０７ ７邛平，宋一旋，祝隶镇．改良三色法显示石蜡切片中的神经轴究 及神经髓鞘中华病理学杂志，１９９８ ２７：２３５． （收藕日期：２００１＂０１．１７） （本文编辑：常秀青）
激光捕获显微切 细胞的全基因组ＤＮＡ扩增 王振宁马琳徐惠绵 姜莉 张成洪何向民 陈峻青 张学 组织是多种细胞群体相互作用、相互依存的三维空间结 构，这使得在相当长的一段时间内难以准确、深＾地从分子 水平研究某类特定细胞基因结构和功能的动态变化。肿瘤 组织包括瘤细胞、其发源的正常细胞、淋巴细胞、血管内皮细 胞、成纤维细胞等多种成分。在肿瘤分子病理学和基因组学 研究中，排除非肿瘤细胞污染对实验结果的影响尤为重 要…。激光捕获显微切割（１ａｓｅｒ ｃａｐｔｕｒｅ ｎｆｉｃｒｏｄＪｓ唧 ｎ。ＬＣＭ） 是在显散镜下从组织切片中分离、纯化单一类型细胞群或单 个细胞的技术。２ Ｊ 它能有效地解除组织中细胞异质性造成 的偏差。但从ＬＣＭ获得的有限细胞中提取的微量ＤＮＡ难以 满足多基因、多位点、多次检测的需求，特别是以ＤＮＡ芯片 为代表的高通量检测的需求。在本研究中，我们通过ＬＣＭ 从癌组织中精确分离目的细胞结合高可信度垒基因组扩增 技术（ｈｉ 蜘ｅｈｔｙ－ｗｈｏｌｅ ｇｅｎｏｍｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＨＦ－ＷＧＡ），建立一 基金项目：国家重点基础研究发展规划（９７３】基金资助项目 （Ｇ１９９￣１２０３）；教育部高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划 （１９９９年度）贷助项目 作者单位 １１０００１沈阳，中国医科大学卫生部细胞生物学重点实 验室【王振宁（现在第一临床学院肿瘤科，１１０００１）、马琳、姜莉、张成 洪、何向民、张学］，第一临床学院肿瘤科（撩惠绵、陈竣青） 通信作者：张学 种从徽量同质细胞中制备足够量基因组ＤＮＡ用于多次聚合 酶链反应（ＰＣＲ）检测的方法，以提高实验结果的可重复性、 可信性、可比性及后续工作的效率。 一、材料和方法 １实验材料：人胃癌组织取自我校第一临床学院肿瘤外 科２０ＯＯ年３月手术标本。高可信度Ｐｙｌ＇￣ｅ ＤＮＡ聚台酶 （５ ｕ／ ）、１０× ｌ０ｈ嘲ｔ缓冲液、ｄＮＴＰｓ以及普通Ｔａｑ ＤＮＡ聚合 酶【５ ｕ／ ）、１０ Ｘ ｐｃＲ缓冲液、ｄＨⅡ 购自宝生物工程（大连） 有限公司。￣－ｃａｔｅｎｉｎ基因外显子３ Ｉ：＇ＣＲ扩增弓ｌ物为：５ 一 ＴＧＧＡＡＣＣＡ ＴＡＴＣＣ－－３，扩增片段为１４９ ｂｐ；ＩＬ－１Ｂ基因启动子区域ＰＣＲ扩 增引物为５＇－ＡＧＡＡＧＣＴＩ￣ＣＡＣＣＡＡＴＡＣＴＣ．３ 和５＇－ＡＣ，ＣＡＣＣ一 ３ ，扩增片段为２３９ ｂｐ；ｐ２１基因ＰＣＲ扩 增引物为５ ．ＴＡＣＣＣｃｒｃＡＡＧＡＧＡＣＡＧＡＧ３Ｗ＿Ｍ￣ＡＣＧ－３ 和５ 一 ＧＧＡＣＡＡＧＴＧＧＣＡ￣ＡＧＧＡＧＧＡＡＧＴＡＧＣ－３ ．扩增片殷为５２３ ｈｐ， 均由宝生物工程（大连）有限公司合成。主要仪器有ＬＭ２００ 型ＬＣＭ系统（日本Ｏｌｙｍｐｕｓ、美国Ａ－￣ｃｔｕｒｕｓ Ｅ Ｉ响公司）， ＵＮＯＩＩ型ＰＣＲ仪（Ｂｉｏｍｅｔｒａ公司）。 ２比Ｍ：新鲜胃癌切除标本，立即分别切取正常胃、原发 癌灶以及转移淋巴结组织，ＯＣＴ包埋．放人液氨中保存。８ ｇｍ厚连续冷冻切片，按ＮＩＨ推荐程序［引行ＨＥ染色。将第 一张封片镜下明确病理诊断，其余切片不封片。采用Ｉ￣２００
同种异体骨髓间充质干细胞在大鼠体内心肌缺血微环境中的分化及存活
・３００・ 安徽医科大学学报Ａｃｔａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ Ａｎｈｕｉ ２０１４ Ｍａｒ；４９（３）
同种异体骨髓问充质干细胞在大鼠体内
心肌缺血微环境中的分化及存活
张静 ，魏峰 ，吴忠东 ，王亭忠 ，倪雅娟 ，马爱群
摘要 目的观察大鼠同种异体骨髓间充质干细胞（ＭＳＣｓ） 在体内心肌缺血微环境中，向心肌细胞分化过程中主要心肌 特异性标志物的分化表达及存活。方法 采用左冠状动脉 前降支（ＬＡＤ）结扎术建立大鼠急性心肌梗死（ＭＩ）模型（ｎ＝ ６２），将绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）转染标记的ＭＳＣｓ，于心外膜下 注射到心肌梗死周边区；免疫荧光染色观察移植后３、５、７、９ ｄ移植的ＭＳＣｓ的存活情况及其主要特异性标志物（ＭＹＨ、 Ｃｘ４３、ｃＴｎＩ、仪一ａｃｔｉｎ）蛋白的表达；应用激光捕获显微切割技 术分离心肌组织中ＧＦＰ标记的ＭＳＣｓ群，应用Ｒｅａｌ・ｔｉｍｅ ＰＣＲ 法测定其ＭＹＨ、Ｃｘ４３、ｃＴｎＩ、 －ａｃｔｉｎ相对于未移植的ＭＳＣｓ的 ｍＲＮＡ表达，对移植后９ ｄ的移植区域行ＴＵＮＥＬ凋亡染色。 结果免疫荧光染色观察到移植的ＭＳＣｓ于移植后３ ｄ开始 持续表达ＭＹＨ、Ｃｘ４３，于移植后５ ｄ开始持续表达ｃＴｎＩ，未观 察到 —ａｃｔｉｎ的表达；Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ法结果显示，移植的 ＭＳＣｓ上ＭＹＨ于移植后５、７ ｄ的表达量较３ ｄ的明显增多 （Ｐ＜０．０５），Ｃｘ４３、ｃＴｎＩ于移植后７ ｄ的表达量较５ ｄ的均增 加（Ｐ＜０．０５），于移植后９ ｄ ＭＳＣｓ几乎观察不到，ＴＵＮＥＬ凋 亡染色示移植的ＭＳＣｓ发生了凋亡。结论移植的ＭＳＣｓ在 大鼠体内心肌缺血微环境下向心肌细胞分化的过程中能够 表达部分主要心肌特异性标志物，但其不能长时间、有效的 存活。 关键词 心肌梗死；骨髓间充质干细胞；移植；心肌特异性标 志物；ＭＹＨ；Ｃｘ４３；ｃＴｎＩ； —ａｃｔｉｎ 中图分类号Ｒ ５４１．７ 文献标志码Ａ文章编号１０００—１４９２（２０１４）０３—０３００—０５
分子病理学技术新进展
分子病理学技术新进展
•病理学的发展与使用的工具 和方法的更新密切相关：
解剖刀剪等—进行尸体检查—器官病理学
显微镜—发明百年之后—细胞病理学
电子显微镜—发展—超微病理学
免疫组织化学—促进—免疫病理学
分子生物学—带动—分子病理学
计算机及网络—走进—信息病理学
病理学技术就是如何应用新工具的方法和措施。
从发展过程看，在新工具面前必须首先解决使用的技术及其相应措施，才能在理论上有所发现。所以，我们必须关注那些新工具、新方法，才能得以用于解决病理学中的问题。
病理学技术包括传统病理学技术和现代新技术
•传 统：Formalin固定，石蜡切片和HE染色及特殊染色技术—病理学的基本技术。
•新技术：免疫组化、原位杂交、原位PCR、凝胶电泳技术 、核酸杂交技术（包括FISH、CGH） 、
PCR技术 、基因重组技术、基因测序技术、细胞凋亡检测技术、细胞培养技术、流式细胞技术、激光共聚焦、显微切割技术、组织芯片技术、DNA芯片技术等等。
•根据科研和临床病理诊断的需要，不断建立和开展新技术，把传统技术和新技术相结合，不断提高病理学技术水平，逐步与国际水平接轨。
常规病理技术
•近20余年来，常规病理技术也得到较大发展：
➢ 微波方法缩短组织脱水、浸蜡时间；
➢ 新的化学试剂取代传统的甲醛、二甲苯；
➢ 逐步向自动化发展（全自动封闭式组织脱水机、全自动染色封片系统、全自动特殊染色机等）
➢ 细胞病理学技术 ：传统的涂、刮片逐步向
薄层液基细胞学发展
TCT 液基细胞学检测
新柏氏超薄细胞检测仪
特殊染色技术
•HE染色虽是一种快捷、经济、且易于掌握的方法，但它不能回答病因学、组织发生及发病机制等许多方面的问题。为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色，固称特殊染色。
【国家自然科学基金】_激光医学_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
序号科研热词推荐指数序号科研热词1医用光学与生物技术141医用光学与生物技术2蛋白质组92蛋白质组学3细胞凋亡73医用光学4质谱54双向电泳5蛋白质组学55凋亡6细胞骨架56生物组织7激光57卵巢癌8活性氧58蛋白质组9大鼠59蛋白质10双向电泳510细胞骨架11飞秒激光411激光12超热电子412微丝13细胞培养413大鼠14组织光学414光动力疗法15线粒体膜电位415高糖环境16心肌细胞416飞秒激光17凋亡417钙离子18低强度激光418膀胱19静电场319细胞凋亡20过氧化氢320生物光学21转染321甘油22足细胞322烧伤23能量沉积323激光消融24聚乳酸-聚乙醇酸共聚物324漫反射光谱25线粒体325活性氧26纳米粒子326小鼠27红细胞327多药耐药28积分球328增殖29神经元329图像处理30激光扫描共聚焦显微镜330兔31游离钙离子331光生物调节作用32海马332光声成像33流式细胞术333靶向34拉曼光谱334长寿因子35心肌肥厚335铜绿假单胞菌36基质辅助激光解吸电离飞行时336钩端螺旋体37双向凝胶电泳337量子点38压力超负荷338造影剂39分化339转染40乳腺癌340超声41丹参酮ⅱa341豚鼠42cd2相关蛋白342视网膜成像43caspase-3343血清蛋白组学44鲜红斑痣244蛋白质芯片45骨髓245蛋白质相互作用46雷帕霉素246蛋白表达47陡脉冲电场247蒙特卡罗模拟48钙离子248荧光光谱49输运249自适应光学50表皮生长因子250膜片钳51血管紧张肽受体251腹腔巨噬细胞52血管内皮细胞252肿瘤的早期检测与治疗监控2008年2009年53血氧饱和度253肿瘤54荧光寿命成像254编码激励55荧光共振能量转移255纳米化56荧光光谱256糖尿病膀胱57自适应光学257突变58脂多糖258神经生长因子59肿瘤259磁共振成像60肺肿瘤260电泳,凝胶,双向61肺动脉平滑肌细胞261热声成像62缓释262激光捕获显微切割63细胞色素c263激光技术64细胞264激光外科65组织工程265淋巴细胞66纳米266早期诊断67红移267拉曼光谱68管花苷b268抗血管生成69神经生长因子269扫频光源70癌症270快速成型71电泳,凝胶,双向271心脑血管疾病早期检测72生物标志物272微管73生物光学273小麦74特征提取274塑性变形75烧伤275基质辅助激光解吸飞行时间串76灵敏度276图像配准77激光共聚焦显微镜277图像分割78氨基酸278反射光谱79检测279医用光学和生物技术80有限元方法280医学图像去噪81成纤维细胞281医学光学与生物技术82微球282分辨率83干细胞283内窥镜84壳聚糖284内稳态85增殖285共聚焦激光扫描显微镜86基质辅助激光解吸/电离飞行286光谱法,质量,基质辅助激光解87基因治疗287光敏剂88变形性288光学相干层析成像89单态氧289光学相干层析90半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3290光动力学治疗91冠状动脉291偏振92内皮细胞292体外释放93兔293低频超声波94免疫荧光294低强度激光95光谱法,质量,基质辅助激光解295低密度异物检测96光学相干层析成像296亚细胞定位97光学特性297乳腺癌98光动力疗法298乳腺99光动力学疗法299一氧化氮100侵袭2100thz波101人良性前列腺增生组织2101kubelka-munk光谱函数102临床试验2102he-ne激光103中性粒细胞2103dna104rna干扰2104cxcr4105pten2105cpg岛106pc12细胞2106cajal间质细胞
【国家自然科学基金】_结直肠腺癌_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
序号科研热词推荐指数序号科研热词
1金属硫蛋白11结直肠癌
2荧光定量反转录-聚合酶链反12锯齿状病变
3胃肿瘤13错配修复
4结直肠腺癌14鉴别
5结直肠肿瘤15遗传性非息肉病性结直肠癌
6结直肠癌16诊断
7组织蛋白酶b17荧光
8系谱18腺瘤
9病理学,临床19肝转移
10抗体反应110聚合酶链反应
11广泛型线粒体肌酸激酶111维甲酸受体
12干扰素诱导的跨膜蛋白-1112维甲酸
13家族性113结直肠肿瘤
14基因表达114结直肠疾病
15癌前状态
16染色体畸变
17早期诊断
18原位杂交
19动物模型
20先证者
21ki-67抗原
22eb病毒
23balb/c鼠结肠腺癌细胞株(ct
24balb/c鼠
25amsterdam标准2008年2009年
乳腺癌的分子分类与靶向治疗
综 中外医学研究 ２０１１年１０月 第９卷第２９期 蠢 ｜ 。 一。 。 ●‘＿－－。 ＣＨＩＮＥＳＥ ＡＮＤ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＥＡＬ ＲＥＳＥＡＲＣＨ
｜｜一００｜｜ ≯｜曩－ 曩０一｜曩ｌ誊 曩ｕ一番 誊誊。ｊ誊 ：
乳腺癌的分子分类与靶向治疗
张品南 陈艳梅
温州市第三人民医院（浙江 温州３２５０００）
【关键词】 乳腺癌；分子分类；靶向治疗
乳腺癌是多基因参与、多步骤发生的恶性肿瘤，基因表达谱
的不同使得乳腺癌具有不同的生物学特征，而乳腺癌的异质性导
致了病理类型与分期相同的患者对临床治疗的反应及预后会有
很大差别。确定一种能准确反映乳腺癌治疗疗效及预后的分型
对进行个体化治疗和改善乳腺癌患者预后具有重要意义。基因
芯片技术的开发利用与２００４年完整的人类基因图的公布推动了
乳腺癌分子分型的研究与分子靶向治疗的研发有了一个飞跃性
的发展。现就目前已发现的基于基因表达的乳腺癌分子分型与
分子靶向治疗加以综述…。
１ 固有分子分型
２０００年，Ｐｅｒｏｕ等 首先报道了人类乳腺癌的固有分子分
型，他对６５例乳腺癌手术标本（含２０例新辅助化疗前后的标本）
和１７株乳腺细胞株，利用含有８０１２个人类基因的ＣＤＮＡ微陈列
进行检测，通过聚类分析等方法筛选出４９６个基因进行基因表达
谱的测定，发现乳腺癌可以分为ｂａｓａｌ—ｌｉｋｅ、Ｌｕｍｉｎａｌ—ｌｉｋｅ、
ｅｒＢ一２阳性型和ｎｏｒｍａｌ ｂｒｅａｓｔ—ｌｉｋｅ型。该分型提示，在雌激素受
体阴性的乳腺癌中，至少包含ｂａｓａｌ～ｌｉｋｅ和ｅｒＢ一２ 两个生物学
特征明显不同的亚型，应该区别对待。之后，Ｓｏｒｌｉｅ等 对８４例
乳腺癌组织进行基因表达谱的检测，发现Ｌｕｍｉｎａｌ—ｌｉｋｅ型又可
分为Ｌｕｍｉｎａｌ Ａ、Ｌｕｍｉｎａｌ Ｂ和ＬｕｍｉｎａｌＣ ３个亚型，随访结果显示，
ｂａｓａｌ—ｌｉｋｅ型和ｅｒｂＢ一２ 型乳腺癌预后最差，Ｌｕｍｉｎａｌ Ａ型预后