高效液相色谱测定构树叶中辅酶Q_10_含量
反相高效液相色谱法测定厚朴树叶中的厚朴酚
反相高效液相色谱法测定厚朴树叶中的厚朴酚作者：刘存芳来源：《江苏农业科学》2015年第08期摘要：超声辅助法提取秦巴山区野生厚朴树叶中的厚朴酚，用显色法和薄层色谱法对厚朴酚进行定性鉴定，反相高效液相色谱法测定厚朴树叶中厚朴酚的含量。
采用高效液相色谱仪测定，以 C18为固定相，选择不同的流动相，检测波长为294 nm，流速为1 mL/min，进样量20 μL。
试验结果表明，厚朴树叶中含有厚朴酚，且厚朴酚的含量为075%，以体积比78 ∶ 22的甲醇∶水为流动相，测得厚朴酚的保留时间为4 528 min，分离效果好、简单、灵敏、重现性好、结果满意，适合于厚朴树叶中厚朴酚含量的测定。
关键词：厚朴树叶；厚朴酚；含量；高效液相色谱法；测定中图分类号： O657 7+2；R284 2 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）08-0311-03厚朴（Magnolia officinalia）是木兰科木兰属的一种高大落叶植物 [1]，别名川朴、紫油厚朴，树高15～20 m，广泛地分布于湖北西部、四川西南部、陕西南部、甘肃南部、江西、安徽、浙江、福建、湖南等地 [2]，厚朴树皮是我国传统中药材，称为中药厚朴，始载于《神农本草经》，列为中品，其后历代本草均有记载，厚朴的树皮、根皮、花、籽及嫩芽均能入药[3]，有燥湿消痰、化湿导滞、消除腹胀便秘、治疗痰饮喘咳、驱风镇痛等功效，还具有抗菌、抗病毒、抗过敏、影响胃肠活动、松弛肌肉和中枢抑制等作用，以厚朴树皮为主，将其作为中药材或深加工的原料使用。
厚朴酚是厚朴中的活性物质之一 [4]，有抗菌、镇静中枢神经、松弛肌肉、抗溃疡、抗氧化、预防龋齿等药理作用 [5]，最近研究表明厚朴酚还有抑制癌细胞的作用 [6]，厚朴酚应用广泛，是一些中成药如保和丸、藿香正气水等的主要成分。
目前，厚朴酚主要是从厚朴树皮提取，厚朴树皮资源有限，厚朴树一般要生长15年才能符合药用需要，挖根剥皮，一次性使用，而厚朴树叶资源却非常丰富 [7]。
高效液相色谱法测定槲树叶中槲皮素的含量
甲醇 一水 （５： ５ 溶液 ； ５ ４） 检测 波长 ：６ ｎ 结果 ： ３ ５ ｍ。 槲皮素 的平均 回收率为 ９ ．％， Ｓ （ ＝ ） １ ６ 结论 ： ７９ Ｒ Ｄ ｎ ６ 为 ． ％。 ４ 方 法简便 、 准确 ， 可作为槲树叶的质量控制 方法 。 关键词： 槲树叶 ； 槲皮 素 ； 高效液相色谱法
２６ 含量测定 ．
图 １ 标 准 曲线
Ｆｇ １ Ｓ ａ ｄ ｒ ｕ ｖ ｉ． ｔ ｎ ａ ｄ ｃ ｒｅ
３ 讨 论
（ ） 选用 甲醇 一水 溶 液 、 １试 乙腈 ～水 溶 液 等 为 流动 相 ， 结果 以前者 为 流动 相 ， 比例 为 ５ ４ ５： ５时槲 皮 素 的 峰型 最好 ， 与其 相邻 组 分分 离 度都 可 达 到要
中图 分 类 号 ： ６ ７７ ０ ５． 文献标识码 ： Ａ
Ｄｅ ｅ ｍｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｕ ｒ ｅ ｉ ｎ ｏ ｋ ｌ ａ ｅ ｙ ＨＰ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆｑ ｅ ｃ ｔ ｉ ａ ｖ ｓｂ ＬＣ ｎ ｅ
Ｚ ＡＯＨｕｎ ｊｎ，ＨＡ ｉ’ Ｕ ｈｎ －ｉｇ， Ｉ ｉ Ｈ ａ －ｕ Ｚ Ｏ Ｌｎ， ＮＣ ａ ｇｊ 。ＬＵＷｅ Ｓ ｎ
谱工作站 ； Ｑ ２０ Ｋ ３０ 超声波清洗器（ 江苏昆山） 。
高效液相色谱法测定功劳木中3种生物碱含量
内与峰 面积 线性 关 系 良好 （ ＝ ． ９ ） 平均 回收 率 为 １０ ２ ％ 。 论 该 法 简便 、 速 、 ｒ ０ ９ ９９ ， ０ ．９ 结 快 重现 性 好 ， 用 于功 劳木 中盐酸 药根 碱 、 适 盐酸 巴马
汀和 盐 酸 小 檗碱 含 量 的测 定 。
关 键词 ： 劳木 ； 酸 药根 碱 ； 功 盐 盐酸 巴马 汀 ； 盐酸 小 檗碱 ； 效 液相 色谱 法 高
药 物研究
２１ 年第 ｌ 卷第 ２ 期 ００ ９ ０
高 效液 相 色谱 法 测 定功 劳 木 中 ３种 生物 碱 含 量
丘 明 明
（ 西壮族 自治 区食 品药品检验所 ， 西 南 宁 ５ ０ ２ ） 广 广 ３ ０ １
摘要： 目的 建 立测 定功 劳木 中盐酸药根碱 、 酸巴马 汀和盐 酸小 檗碱 含量 的 高效液相 色谱 （ Ｐ Ｃ 法。 盐 Ｈ Ｌ ） 方法 色谱柱 为 Ｇａｅｍ ｒＣ。 ２ ０ ｍｘ ｒ Ｓ ａ 柱（５ ｍ ｃ ｔ ４ ６ ｍ， ｔ ， ００ ｏ／ ． ５ｘ 以 ．５ｍ ｌ Ｌ磷 酸 二 氢钾 溶 液 （ ｍ ｍ） 用磷 酸调 ｐ 至 ３ ０ 一乙腈 （０：０ 为流 动 相 ， 测 波 长 为 ２５ｎ 柱 温为 ３ Ｈ ．） ７ ３） 检 ６ ｍ， ５℃ ， 速 为 流 １０ Ｌ ｍ ｎ 结果 盐 酸 药根 碱 进 样 量在 ０ ０ ～１ ９ ｇ范 围 内与峰 面积 线 性 关 系良好 （ ＝ ． ９ ） 平均 回收 率 为 ９ ．５ ； ． ／ ｉ。 ｍ ．３ ．７ ｒ ０ ９ ９６ ， ８ ４ ％ 盐酸 巴马 汀 进 样 量 在 ０ ０ ２ １ ｇ范 围 内与峰 面积 线 性 关 系 良好 （ ＝ ． ９ ）平 均 回收 率 为 １０ ９ ％ ； 酸 小 檗碱 进 样 量 在 ０ ０ ２ １ ｇ范围 ．４～ ． ９ｔ ｘ ｒ ０ ９ ９８ ， ０．４ 盐 ． ３～ ． ２ｔ ｘ
高效液相色谱法测定楤木及其提取物中齐墩果酸的含量
高效液相色谱法测定楤木及其提取物中齐墩果酸的含量引言齐墩果酸是一种天然单萜类化合物，广泛存在于植物中，具有抗炎、抗菌等药理活性。
楤木是一种常用的中药材，主要用于通气化痰、止咳化痰、消肿解毒等功效。
本文旨在利用高效液相色谱法对楤木及其提取物中齐墩果酸的含量进行测定，并探讨该方法的操作流程和结果分析。
实验方法样品准备本实验分为两组样品：楤木和楤木提取物。
楤木样品为通过观察、鉴别、簸箕等工艺处理获得的天然药材，选取新鲜且质量良好的样品。
楤木提取物样品为采用乙醇提取法得到的楤木提取物，按照提取物质量比例制备。
样品处理1.楤木样品的制备：将楤木洗净，晾干后破碎成粉，过筛备用。
2.楤木提取物样品的制备：称取一定量的楤木提取物样品，用甲醇将其完全溶解，备用。
试剂准备1.齐墩果酸标准物质（purity>98%）。
2.甲醇。
仪器设备1.液相色谱仪（HPLC）。
2.反相色谱柱（C18）。
3.二波长检测器。
色谱条件•流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（30:70)。
•流速：1 mL/min。
•柱温：35℃。
•检测波长：210 nm。
•进样量：10 μL。
实验操作流程1.准备齐墩果酸标准曲线：取齐墩果酸标准物质适量，用甲醇进行稀释，最终浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L。
2.取10 mg的楤木样品粉末或楤木提取物样品，加入5 mL甲醇中，用超声波法进行提取。
过滤所得稀释液，取适量过滤液进行检测。
3.将样品适量注入HPLC系统，进行分析。
4.根据标准曲线计算齐墩果酸含量。
结果分析标准曲线见下表：浓度（μmol/L）峰面积（mV*s）0.05 3502.480.1 6992.410.2 13594.880.4 26811.220.8 54805.63样品处理结果见下表：样品齐墩果酸含量（mg/g）楤木样品0.825楤木提取物样品 4.321结论本文采用高效液相色谱法对楤木及其提取物中齐墩果酸的含量进行了测定，测定结果表明，楤木提取物中齐墩果酸的含量明显高于楤木样品，在该方法下得到了较好的检测效果。
高效液相色谱-质谱联用分析无患子中的表面活性物质
收稿日期：!""#$"%$&"作者简介：王小淳（#’("$），女，硕士，工程师，电话：（"!#）%)"’*"""$!"")，+$,-./：01-2!345/.1672-6892618。
高效液相色谱!质谱联用分析无患子中的表面活性物质王小淳（上海白猫有限公司，上海!""!&#）摘要：应用高效液相色谱和大气压电离质谱联用技术，分离分析了无患子果皮中的表面活性成分。
根据质谱结果确定其相对分子质量，根据源内的碰撞诱导解离（:;<）技术产生的碎片初步推测表面活性物质的结构，发现了数个未见文献报道的组分。
关键词：高效液相色谱；大气压电离质谱；无患子；皂甙；倍半萜糖甙中图分类号：=>%*文献标识码：?文章编号：#"""$*(#&（!""#）">$"%!’$"&"前言无患子是一种野生落叶乔木，广泛分布于长江流域以南地区，其果实外壳是化痰中药，也是一种天然表面活性剂的原料。
无患子果皮中表面活性成分主要为萜类皂甙（如常春藤皂甙）和倍半萜糖甙（见图#）［#］。
这些天然表面活性物质具有很强的降低表面张力的作用，有良好的去污及洗涤性能，对人体温和、无刺激。
分离无患子果皮中表面活性成分时，常采用萃取、大孔树脂分离、反复进行硅胶柱色谱和反相柱色谱等方法，最后用制备型高效液相色谱分离得到单一组分。
利用化学水解法和核磁共振等仪器分析方法可确定组分的化学结构［!］。
第#’卷第>期!""#年##月色谱:F ;Y +J +Z =[@Y ?H=M:F @=I ?\=]@?G F ^W E /6#’Y E 6>Y E _6!""#!结果与讨论!"#液相色谱分离皂甙类物质的紫外吸收弱，紫外扫描显示最大吸收为!"#$%，经示差折光检测器和二极管阵列检测器同时检测对照发现，检测波长为!"#$%时可保证样品中主要组分被检出。
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量
药学论文-高效液相色谱法测定复方银杏叶片中银杏总黄酮的含量【摘要】目的建立复方银杏叶片中银杏总黄酮含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，用Symmetry C18色谱柱( 250 mm×4.6 mm,5 μm )，以甲醇0.4%磷酸溶液（52∶48）为流动相，流速为1.0 ml·min-1，检测波长360 nm ，柱温35℃。
结果该法线性关系良好，平均加样回收率为98.35 % ,RSD为1.17 % ( n = 5 )。
结论该法操作简便，分离效果好，结果准确，专属性强，可作为复方银杏叶片的质量控制方法。
【关键词】复方银杏叶片；黄酮；槲皮素；山柰素；异鼠李素；高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish the determination method of flavonoids in compound Ginkgo biloba Leaves Tablets .MethodsThe analysis was performed on aSymmetry C18 column（4.6 mm ×250 mm,5 μm） with methanol 0.4% phosphoric acid( 52:48 ) as mobile phase at a flow rate of 1.0 ml ·min-1, and at a column temperature of 35℃. The detection wavelength was 360nm.ResultsThe linearity of this method was good.The average recovery of added samples was 98.35 % with RSD 1.17 %. (n=5 ) .ConclusionThe method is convient with a good separating degree for the determination of flavonoids and can be used to evaluate the quality of compound Ginkgo biloba Leaves Tablets.Key words：Compound Ginkgo biloba LeavesTablets； Flavonoid； Quercetin ； Kaempferol； Isorhamnetin； HPLC复方银杏叶片是由银杏叶提取物和广西野葛根提取物等制成的复方制剂，具有活血化淤，降低血脂，清除自由基和抗衰老等功效和作用［1］。
高效液相色谱法测定银杏叶中芦丁
３４ 色谱峰的鉴定 ．
银 杏 叶样 品的色 谱图 见图 １ 芦丁标 样的色谱 图见 图 ２根据洗脱峰 的保 留时间确定芦丁峰位 。 ，
２４ 标准溶液的配制 ．
准确称取芦丁标样 ．００ １０ Ｌ棕色容 １０ｇ于 ０ｍ 量瓶中， 用甲醇定容至刻度， 此溶液浓度为 １ｇ ｍ／
ｍ 。经不同程度稀释后 制作 浓度分别 为 ２ ０８ ， Ｌ ０４ ０
由芦 丁标准溶 液 的紫外 吸收 光谱 可知 芦丁 的 λ ｍ ５ｎ ＝２６ｍ。
水－ 冰醋酸（６ ９ ＶＶ ， ４ ／ 计算机控制梯度洗
脱 醇 ｍ ｎ从 ９％甲 醇 ｉ ０ （ ＋冰醋酸） 水 。 （ ＋ 冰 醋 酸 ） ２５ ｉ 水 到 ．ｍｎ ４ ％ 甲醇 ５ （ ＋冰醋 酸）２５ ６ ｉ 为 ４％ 甲 水 ． ．ｍ ｎ ５
３５ 线性回归分析 ． 将浓度分别为２，０６ ８ １０ｇｍ ０４ ０ ０ ０ ／ Ｌ的标准 芦丁溶液进样 １ ， ０Ｌ所得芦丁峰面积 （） Ｙ 对标准溶
液浓度 （ ） Ｘ 进行线性 回归分析 ， 得工作 曲线方程为 ： Ｙ＝ １４８ １５ Ｘ ５４８ １３相关系数 ＝ ．９ １ ０ ．５１ ０，
本文收稿 日期 １９ 年 ６ ２ ９４ 月 ６日， 修回 日期 ： ９ 年 ９ ２日 １４ ９ 月
５ 平 １２８２ －５６６
等 ．日本公开特 许公报 ，９９ １８ ；
Ｍｅｓｒｍ ｎ ｏ Ｒ ｔ ｕ ｉ Ｌ ａｅ ｏ Ｇ ｎ ｇ Ｂｌ ａ ｈ ａｕｅ ｅｔ ｕｉ ｍ ｅｖｓ ｉｋｏ ｏ ｗｔ ｆ ｎ ｎ ｆ ｉｂ ｉ Ｒ ｖｒｅ－ｈｓ Ｈ ｇ Ｐ ｒ ｒ ａ ｃ Ｌｑ ｉ Ｃ ｒｍ ｔｇａｈ Ｈ Ｌ ） ｅｅｓ Ｐ ａｅ ｈ ｆ ｍ ｎｅ ｕ ｈｏ ａｏｒｐ ｙ Ｐ Ｃ ｄ ｉ ｅｏ ｉ ｄ
【CN109758397A】一种构树叶活性成分提取方法及提取物的应用【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910209782.2(22)申请日 2019.03.19(71)申请人 云南农业大学地址 650201 云南省昆明市盘龙区沣源路452号云南农业大学(72)发明人 田洋 周露 盛军 宋爽 陶亮 彭磊 解静 (74)专利代理机构 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350代理人 汤东凤(51)Int.Cl.A61K 8/9789(2017.01)A61Q 19/00(2006.01)A61Q 19/08(2006.01)A61P 17/00(2006.01)A61P 29/00(2006.01)(54)发明名称一种构树叶活性成分提取方法及提取物的应用(57)摘要本发明公开一种构树叶活性成分提取方法及提取物的应用，涉及植物提取物、植物化学技术领域。
本发明的构树叶活性成分提取方法，具体包括活性成分水提和活性成分醇提，通过水提取法和醇提法提取构树叶中的活性成分，之后用石油醚除去杂质，用活性炭脱色；提取工艺也较简单，提取周期明显缩短，可以工业化生产；同时将获得的活性成分提取物制备构树叶活性成分提取物补水面霜以及日常护肤品，可以改善肌肤衰老状况，对皮肤炎症也有较好抑制作用；为构树叶的开发利用提供新思路。
权利要求书1页 说明书3页 附图1页CN 109758397 A 2019.05.17C N 109758397A权 利 要 求 书1/1页CN 109758397 A1.构树叶活性成分提取物在日化产品制备中的应用。
2.如权利要求1所述的构树叶活性成分提取物在面霜、乳液、面膜制备中的应用。
3.如权利要求1或2任意一项所述的构树叶活性成分提取物的应用，其特征在于：所述构树叶活性成分提取方法，包括活性成分水提和活性成分醇提，之后用石油醚除去杂质，用活性炭脱色。
4.如权利要求3所述的构树叶活性成分提取物的应用，其特征在于：所述构树叶活性成分水提的提取方法，包括以下步骤：将构树叶切碎，30-50℃加热后用水浸泡叶1-2小时。
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营养学报2008年第30卷第4期 417高效液相色谱测定构树叶中辅酶Q10含量李万仓，郑宏燕1，张惠娟，张 浩2，曹玉广（华中科技大学同济公共卫生学院流行病与卫生统计系，武汉 430030；1华中科技大学同济公共卫生学院环境与健康研究平台，武汉430030；2深圳市华士康科技有限公司，深圳518000）【摘 要】目的 建立一种测定构树叶辅酶Q10含量的方法。
方法 构树叶用75%乙醇提取，萃取，蒸馏，浓缩。
色谱柱为C18 250mm×4.6mm i.d 10μm,流动相为无水乙醇-甲醇（65:35），流速为1 ml/min，检测器波长275nm。
结果 辅酶Q10在4～64μg/ml(r=0.9997)范围内具有良好的线性关系。
平均加样回收率为98.66%，RSD为0.97%（n=6）。
构树叶中辅酶Q10的最低检测限为10 ng/ml（S/N =3）。
结论 该法快速，简便，准确。
适宜于构树叶辅酶Q10含量的检测。
[营养学报，200 8，（4）：417－419 ]关键词：构树叶； 辅酶Q10（CoQ10）； 高效液相色谱中图分类号：R151.2 文献标识码： A 文章编号：0512-7955（2008）04-0417-03DETERMINATION OF COENZYME Q10IN BROUSSONETIA PAPYRIFERA BY HIGHPERFORMANCE CHROMATOGRAPHYLI Wan-cang, ZHENG Hong-yan1, ZHANG Hui-juan, ZHANG Hao2, CAO Yu-guang（Department of Epidemiology and Health Statistics, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030;1 Department of Research Platform of Environment and Health, Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology, 430030;2Huashikang Technology Co. Ltd, Shenzhen 518000, China）【Abstract】Objective A simple and rapid high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of coenzyme Q l0 (CoQ10) in Broussonetia paryifera was developed. Method The sample of Broussonetia paryifera leares was extracted by 75% ethanol, extraction, distillation, concentration. Hypersil C18 (250mm× 4.6 mm i.d 10 µm) was selected as the analytical column, ethanol-methanol (65:35 by volume) as the mobile phase with flow-rate of 1 ml/min and UV 275 nm as the detection wavelength. Results The1inear range of the calibration curve of concentration vs. peak height was 4-64 µg/ ml with a coefficient of determination was 0.9997. The average recovery rate was 98.66% and the RSD was 0.97% (n=6). The detection limit of CoQ10 in Broussonetia paryifera was 10ng/ml (S/N=3). Conclusion This method was rapid, simple and suitable for the determination of CoQ l0 in Broussonetia paryifera．[ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2008, 30(4):417－419]Key words：Broussonetia paryifera leaves; coenzyme Q10 (CoQ10); HPLC辅酶Q10(CoQ10)是一种脂溶性类维生素物质，广泛地存在于动植物细胞内。
CoQ10对缺血性心脏病,高血压症及风湿性充血性心力衰竭所引起的症状有效[1]。
CoQ10是细胞代谢和细胞呼吸的激活剂，有天然抗氧化活性，并增强人体非特异性免疫功能[2，3]。
它能有效地保持膜脂流动性，防止皮肤过早老化，同时提供细胞代谢和呼吸能量，从而激活肌肤细胞，促进皮肤再生[4]。
所以CoQ10已被广泛地应用于临床疾病治疗和化妆品生产。
但CoQ10原料来源困难，我们首次发现构树叶中含有CoQ10并建立了反相高效液相色谱测定法。
收稿日期2007-09-30作者简介李万仓（1980-），男，硕士，E-mail：wancangli@；通讯作者曹玉广，教授，E-mail:caoyg@418 Acta Nutrimenta Sinica,Aug.,2008, V ol.30 No.41 材 料 与 方 法1.1 仪器与试剂Waters 515 高效液相色谱仪；Waters紫外可见光波长检测器(2487)；Empower工作站，柱温箱，手动进样阀；色谱柱(大连分析仪器厂)；旋转蒸发仪(SHZ-Ⅲ型巩义市英峪仪器有限公司)；超声清洗仪（上海）；CoQ10标准品(sigma公司)；构树叶(湖北）；甲醇，色谱纯；无水乙醇，无水硫酸钠，氢氧化钠，石油醚，乙醚，焦性没食子酸，均为分析纯；硅胶（100～200目）。
1.2 CoQ10 制备1.2.1 前处理： 构树叶用75%乙醇提取得浸膏液。
1.2.2 醇碱皂化：称取5g构树提取液,加入10 g 的焦性没食子酸,搅拌均匀,再缓慢加入100 g/l 的氢氧化钠-乙醇溶液50ml搅拌,组织材料将变成黑色稠糊状,置90℃水浴加热回流30 min。
1.2.3 萃取：加入0.5倍体积的石油醚,多次萃取,至石油醚颜色变清亮。
萃取液用双蒸水洗至中性。
然后用无水硫酸钠除去水分(约6g)。
1.2.4 减压浓缩：以旋转蒸发器和循环水式真空泵联合，在35℃减压蒸馏除去石油醚至原体积5%。
1.2.5 层析分离：以石油醚、硅胶装柱,将澄清浓缩液体引入硅胶层析柱,先用石油醚洗脱，除去杂质，再用乙醚-石油醚（5:95）混合液洗脱,收集黄色带部分洗脱液,多次反复洗脱至无色。
1.2.6 浓缩结晶：将洗脱液再同法减压蒸馏除去石油醚至小体积，再蒸馏,去除溶剂,得黄色油状物。
加入无水乙醇,温热,使之完全溶解,趁热过滤,滤液置于－4℃冰箱中冷却结晶,得CoQ10产品。
1.3 对照品与样品溶液的制备精密称CoQ10对照品及构树叶提取物样品10 mg，置25ml容量瓶中，加无水乙醇适量，振摇溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品和构树叶提取物的储备液，置棕色容量瓶中，当天用完。
1.4 色谱条件依利特色谱柱，250 mm×4.6 mm不锈钢色谱柱，填料为十八烷基硅烷键合硅胶，直径为10 µm;甲醇:无水乙醇(35:65)；流速l ml/min；检测波长275 nm,温度30℃,进样量20 µl。
2 结 果2.1 线性关系及灵敏度考察(图1)精密量取对照品储备液0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 ml分别置10 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，进样分析。
以对照品峰面积（Y）对对照品浓度(X)用最小二乘法线性回归，得回归方程为：Y=1.27×107X+1.43×105, r=0.9997（n=5）。
CoQ10在4-64μg/ml范围内与积分面积呈良好的线性关系。
最低检测限为10 ng/ml（S/N =3）。
Fig. 1 Standard curve of CoQ102.2 精密度及其重复性试验（表1）Table 1 Repeatability test of CoQ10 from Broussonetiaparyifera leaves1 2 3 4 5 6 RSD%Weight 1.024 1.015 1.006 1.013 1.007 1.002Content0.0680.0650.066 0.069 0.0670.0652.45取CoQ10浓度为10 µg/ml对照品溶液及称取构树叶样品6份，按前述方法制备。
按色谱条件，重复测定6次，测得CoQ10峰面积分别为：33746.91，33584.18，33619.46，33889.03，32980.96，33402.71。
其相对标准偏差(relative standard deviation)为0.95%，表明本法的精密度和重复性都很好。
2.3 加样回收率试验（表2）精密称构树叶提取物样品1g，共6份,3份加入0.5 mg,3份加1.0 mg CoQ10对照品,按供试品溶液制备项操作,进样，计算。
结果表明，回收率良好。
Table 2 Recovery rate of CoQ10 from Broussonetiaparyifer a leavesWeight（g）ContentsampleAdded(mg)Determi-nationReco（%）Avg rate（%）RSD（%）1.026 0.0680.5020.55998.071.012 0.0670.5100.56297.401.006 0.0640.5160.57498.971.028 0.0681.009 1.07099.351.010 0.0671.013 1.07399.351.003 0.0661.005 1.05898.7998.66 0.97reco is denote recovery; avg rate is average recovery rate and unit is percent(%); content sample unit is (mg)2.4 稳定性试验（表3）称构树叶提取物粉末1.0 g，按供试品溶液制备方法制备，以液相色谱条件分别在1，3，6，9，12 h吸取20 µl进样，记录 CoQ10的峰面积，结营养学报2008年第30卷第4期 419果表明，供试品溶液在制备后12 h内稳定。