微核

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医学:人外周血淋巴细胞微核测定

医学:人外周血淋巴细胞微核测定

06 微核测定的研究展望
CHAPTER
提高检测灵敏度与特异性
优化样本处理
通过改进样本处理方法,减少杂质干扰,提高检测的灵敏度和特 异性。
研发新型标记物
探索新的生物标志物,以更准确地反映细胞损伤和疾病状态。
引入人工智能技术
利用人工智能算法对检测结果进行深度分析和模式识别,提高检测 的准确性和可靠性。
结果分析
计数微核率
对观察到的具有微核的淋巴细胞进行计数,计算微核率。微 核率越高,说明受试者的染色体受到损伤的程度越高。
结果解读
根据微核率的大小,结合受试者的基本信息和健康状况,对 结果进行解读,为受试者的健康状况提供参考依据。
04 微核测定的结果解读
CHAPTER
正常值范围
1
正常值范围因年龄、性别、种族等因素而异,通 常根据大样本统计数据确定。
在辐射损伤评估中的应用
辐射暴露监测
微核测定可以用于监测辐射暴露者的DNA损伤程 度,评估辐射对人体的影响。
辐射剂量估算
通过微核计数可以估算辐射剂量,为受辐射损伤 人员的治疗和康复提供参考。
辐射危险评估
微核测定可以用于评估不同人群在不同环境中的 辐射危险程度,为制定防护措施提供依据。
在药物安全性评价中的应用
02
微核是由于染色体断裂或异常复 制形成的,是细胞染色体异常的 标志之一。
微核测定的历史与发展
微核测定最早由国外学者于20世纪 70年代提出,经过几十年的发展, 已经成为一种广泛应用于医学、生物 学和环境科学领域的实验室技术。
随着技术的不断进步,微核测定的方 法不断完善,检测的灵敏度和特异性 不断提高,为科学研究提供了更加可 靠的实验数据。
医学人外周血淋巴细胞微核测 定

实验十(方案设计)诱变物质的微核测试

实验十(方案设计)诱变物质的微核测试

结果分析与讨论
结果分析
对实验结果进行深入分析,探讨诱变物质导致微核形成的可能原因,如DNA损伤、染色体畸变等。
结果讨论
将实验结果与已有研究进行比较,讨论本实验的优缺点及改进方向,提出进一步的研究设想和建议。
06
实验结论与展望
实验结论总结
诱变物质对微核率的影响
通过对比不同浓度诱变物质处理后的微核率,发现随着浓度的增加,微核率呈现上升趋 势,表明诱变物质具有诱导微核形成的能力。
6. 数据分析
根据观察到的微核数量,计算诱变物质的诱变指数(MI), 并绘制剂量-效应曲线。通过比较不同浓度梯度下的MI值, 评估诱变物质的诱变能力。
03
微核测试技术
微核测试原理
微核形成机制
微核是由于染色体或染色质的无着丝粒断片或纺锤丝受损伤而丢失的整个染色 体,在细胞分裂后期遗留在细胞质中,成为由单层膜包被的细胞质中的遗传物 质,即形成微核。
诱变物质作用
诱变物质能够导致染色体断裂,形成无着丝粒断片,从而在细胞分裂过程中形 成微核。通过检测微核的出现频率,可以评估诱变物质的遗传毒性。
微核测试方法
样本制备
选择适当的实验动物或细胞系,给予不同浓度的诱变物质处理, 同时设立对照组。
微核观察
在特定的时间点,收集处理组和对照组的细胞样本,经过染色后, 在显微镜下观察微核的出现情况。
微核测试优缺点
假阳性率高
某些非诱变物质也可能导致微核的形成,从而产生假 阳性结果。
无法确定具体机制
微核测试只能检测到遗传物质的损伤,但无法确定具 体的损伤机制和路径。
受多种因素影响
实验结果可能受到实验动物种类、年龄、性别、生理 状态以及处理条件等多种因素的影响。

微核试验的原理原理

微核试验的原理原理

微核试验的原理原理微核试验是一种利用基因工程技术测定对特定物质敏感的微生物的方法。

其核心原理是利用基因工程技术将目标物质敏感的基因与荧光标记基因连接到一起,使得微生物在受到目标物质诱导后产生荧光信号。

微核试验的具体步骤包括有源菌株的培养、基因工程的构建、转化菌的选择和测试等。

首先,需要选用一种天然的微生物作为有源菌株,它对待检物质具有一定的敏感性。

有源菌株在培养基中生长,形成菌液用于后续实验操作。

接下来,需要构建基因工程载体,将目标物质敏感的基因与荧光标记基因连接到一起。

在构建的过程中,需要选择适当的启动子、调控元件和选择性标记基因等。

启动子能够在受到目标物质的诱导时促进基因的表达,调控元件能够调节激活基因的程度,选择性标记基因能够筛选成功转化的菌株。

然后,将构建好的基因工程载体转化到有源菌株中。

转化可以采用化学方法、电转化方法或基因枪法等不同的转化方法。

转化成功后,会得到具有目标基因的转化菌株。

接着,对转化菌株进行筛选和文化处理。

筛选可使用抗生素等选择性标记基因进行,只有获得构建好的基因工程载体的菌株才能存活下来。

筛选过程中,需要对转化菌株进行培养,以保证菌株的活性和增殖。

最后,进行目标物质的检测。

将培养好的转化菌株置于受检物质条件下进行培养,如果待检物质存在,则会激活目标基因的表达,产生荧光信号。

通过观察菌液中的荧光强度可以判断待检物质的存在与浓度大小。

微核试验的原理主要是利用了生物体对待检物质的敏感性,通过基因工程技术的手段将该敏感基因与荧光标记基因连接起来,实现了对待检物质的检测。

微核试验的优势在于可以快速、准确地检测某种特定物质,并且对环境友好,无需使用放射性或有毒性物质。

因此,微核试验在环境污染监测、食品安全检测等领域具有广泛的应用前景。

微核形成的原理(3篇)

微核形成的原理(3篇)

第1篇一、引言微核是细胞分裂过程中出现的一种异常核结构,它是由细胞核部分断裂后形成的。

微核的形成与多种因素有关,包括物理因素、化学因素、生物因素等。

本文将详细探讨微核形成的原理,包括微核的形成机制、影响因素以及与人类疾病的关系。

二、微核的形成机制1. 微核的形成过程微核的形成过程主要分为以下几个阶段:(1)核断裂:细胞分裂过程中,由于物理、化学或生物等因素的作用,细胞核发生断裂。

(2)染色体丢失:断裂的细胞核内部分染色体或染色单体丢失,导致核体积缩小。

(3)核膜重新形成:断裂的细胞核周围形成新的核膜,将断裂的染色体包裹在内。

(4)微核形成:断裂的染色体或染色单体在核膜内进一步分裂,形成微核。

2. 微核的形成原因(1)物理因素:电离辐射、紫外线等物理因素可以导致细胞核发生断裂,从而形成微核。

(2)化学因素:某些化学物质,如苯、甲醛等,可以与细胞核中的DNA结合,导致DNA损伤,进而引发细胞核断裂。

(3)生物因素:病毒、细菌等生物因素可以干扰细胞分裂过程,导致细胞核断裂。

三、微核的影响因素1. 微核的大小:微核的大小受断裂程度、断裂部位等因素的影响。

断裂程度越大,断裂部位越靠近核膜,微核越大。

2. 微核的数量:微核的数量与细胞核断裂的次数和断裂程度有关。

断裂次数越多,断裂程度越大,微核数量越多。

3. 微核的形态:微核的形态受断裂部位、断裂程度等因素的影响。

断裂部位靠近核膜,微核形态不规则;断裂部位远离核膜,微核形态规则。

4. 微核的染色体:微核中包含的染色体数量与断裂的染色体数量有关。

断裂的染色体数量越多,微核中的染色体数量越多。

四、微核与人类疾病的关系1. 微核与遗传疾病:微核的形成可能导致染色体异常,进而引发遗传疾病。

例如,唐氏综合征就是一种由染色体异常引起的遗传疾病。

2. 微核与肿瘤:微核的形成与肿瘤的发生、发展密切相关。

研究发现,肿瘤细胞中微核数量较多,且与肿瘤的恶性程度有关。

3. 微核与药物不良反应:某些药物可以导致细胞核断裂,形成微核。

微核试验的原理

微核试验的原理

微核试验的原理随着科技的发展,人类对于原子核的研究也越来越深入。

微核试验就是其中的一种方法。

所谓微核试验,就是通过加速器将高能粒子轰击目标核,使其发生裂变或者反应,进而研究原子核的性质和行为。

本文将从微核试验的基本原理、实验装置、数据分析以及应用领域等方面进行介绍。

一、微核试验的基本原理微核试验的基本原理是利用高能粒子与目标核的相互作用,研究原子核的性质和行为。

高能粒子可以通过加速器进行加速,使其具有足够的能量与目标核发生相互作用。

目标核可以是稳定核或者放射性核,也可以是天然存在的核素或者是通过合成得到的核素。

高能粒子与目标核的相互作用包括以下几种:1.弹性散射当高能粒子与目标核发生弹性散射时,粒子的能量和动量不变。

这种相互作用可以用来研究原子核的大小和形状。

2.非弹性散射当高能粒子与目标核发生非弹性散射时,粒子的能量和动量会发生变化。

这种相互作用可以用来研究原子核的激发态和衰变行为。

3.核反应当高能粒子与目标核发生核反应时,会产生新的核素和粒子。

这种相互作用可以用来研究原子核的结构和核反应过程。

二、微核试验的实验装置微核试验的实验装置主要包括加速器、目标核、探测器和数据采集系统等。

1.加速器加速器是微核试验的核心设备,用于将粒子加速到足够高的能量。

常用的加速器包括静电加速器、电子直线加速器、质子循环加速器等。

2.目标核目标核是微核试验的实验对象,可以是稳定核或者放射性核,也可以是天然存在的核素或者是通过合成得到的核素。

目标核的选择与实验目的密切相关。

3.探测器探测器用于探测高能粒子与目标核的相互作用产生的粒子和辐射。

常用的探测器包括闪烁体探测器、半导体探测器、气体探测器等。

4.数据采集系统数据采集系统用于采集探测器探测到的信号,并将其转化为数字信号进行处理。

数据采集系统的设计和构建对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。

三、数据分析微核试验的数据分析主要包括对探测器探测到的信号进行处理和分析。

简述微核试验的原理及应用

简述微核试验的原理及应用

简述微核试验的原理及应用1. 微核试验的原理微核试验是一种利用微型核反应堆进行核试验的方法,其原理主要包括以下几个方面:1.核反应堆设计:微核试验使用的微型核反应堆通常采用高浓缩铀或钚-铀合金作为燃料,通过控制核化学反应速率实现可控的核反应过程。

反应堆的设计与普通核反应堆相似,但规模较小。

2.控制核反应速率:微核试验通过控制反应堆中燃料的丰度、温度、压力等参数,调节核反应的速率,以达到预定的核反应条件。

通过调整核反应速率,实现核反应堆的平衡运行。

3.核分裂与核聚变反应:微核试验主要利用核分裂和核聚变两种反应进行能量释放。

核分裂反应是指重核原子的裂变产生能量和裂变产物,核聚变反应则是指轻核原子的聚变产生能量和聚变产物。

微核试验可选择不同的核反应类型,根据需求选择合适的实验目标。

4.辐射控制:微核试验在进行核反应时,需要对辐射进行有效控制。

通过设计合适的屏蔽装置,控制反应堆中的辐射传输和辐射泄漏,保证环境和操作人员的安全。

2. 微核试验的应用微核试验作为一种新型的核试验方法,其应用广泛,包括以下几个方面:1.核能研究:微核试验为核能研究提供了有效的实验平台。

通过控制核反应过程,研究核裂变和核聚变等反应的特性和机制,为核能利用和核能源开发提供理论和实验基础。

2.核武器研究:微核试验可用于核武器研究和核弹头试验。

微型核反应堆可以模拟核武器中的核反应过程,通过核分裂和核聚变反应释放出的能量来检验核武器的设计和性能。

3.核安全研究:微核试验对核安全研究有重要意义。

通过对微型核反应堆的设计和控制,可以研究核材料的安全性、辐射控制技术和核事故应急处理等方面的问题,为核能源开发提供更安全的环境和操作条件。

4.核医学研究:微核试验可用于核医学研究和放射性医学治疗。

通过调节反应堆的核反应速率和辐射剂量,研究放射性药物的代谢和作用机制,为放射性治疗提供理论依据和实验支持。

5.核废物处理:微核试验还可用于核废物处理技术的研究。

微核测定实验报告

1. 掌握微核检测的基本原理和方法。

2. 了解微核形成的原因及其与遗传毒性的关系。

3. 通过实验,验证不同处理条件下细胞微核率的差异。

二、实验原理微核检测是一种快速、简便的遗传毒性检测方法,主要用于评估化学物质、物理因素等对生物体遗传物质的损伤。

实验原理是:在细胞分裂过程中,染色体发生断裂或畸变,导致染色体片段或整个染色体未能正常分配到子细胞中,形成微核。

通过显微镜观察细胞核形态,计数含微核的细胞数量,计算微核率,从而评估遗传毒性。

三、实验材料1. 细胞培养液2. 细胞培养皿3. 不同处理组的试剂(如溶剂、药物等)4. 显微镜5. 计数板6. 染色剂7. 计数器四、实验方法1. 将细胞培养至对数生长期。

2. 将细胞分为不同处理组,分别加入溶剂、药物等试剂,设置对照组。

3. 在不同处理条件下培养细胞24小时。

4. 收集细胞,用染色剂染色,制片。

5. 在显微镜下观察细胞核形态,计数含微核的细胞数量。

6. 计算微核率,并统计分析各组数据。

1. 对照组微核率:5.0% ± 0.5%2. 溶剂处理组微核率:4.5% ± 0.3%3. 药物处理组微核率:7.5% ± 0.8%六、实验分析1. 对照组微核率较低,说明正常细胞分裂过程中微核形成较少。

2. 溶剂处理组微核率略有下降,可能与溶剂对细胞的轻微损伤有关。

3. 药物处理组微核率明显升高,说明该药物具有一定的遗传毒性。

七、实验结论1. 微核检测是一种快速、简便的遗传毒性检测方法。

2. 本实验结果表明,该药物具有一定的遗传毒性,需要进一步研究其作用机制。

八、实验讨论1. 微核形成的原因可能与染色体断裂、畸变、缺失等因素有关。

2. 微核检测结果受多种因素影响,如实验条件、细胞类型、处理时间等。

3. 在实际应用中,应结合其他遗传毒性检测方法,全面评估物质的遗传毒性。

九、实验改进1. 在实验过程中,可增加实验重复次数,提高实验数据的可靠性。

微核形成的原理

微核形成的原理微核啊,它可不是什么特别神秘莫测的东西。

咱们得先从细胞说起。

细胞就像一个小小的王国,里面有各种各样的结构和物质在忙活着。

细胞里面有个很重要的东西叫染色体,这染色体就像是细胞王国里的宝藏地图或者是操作手册,它上面记录着很多很重要的信息,指挥着细胞的各种活动,像怎么生长啦,怎么分裂啦之类的。

正常情况下呢,细胞分裂的时候那可是有条不紊的。

染色体就像训练有素的小士兵,整整齐齐地排列好,然后均匀地分配到两个新的细胞里去。

可是呢,有时候会有一些调皮捣蛋的情况发生。

比如说啊,有一些外界的因素来捣乱了。

像那些化学物质,就像是一群坏小子,偷偷溜进了细胞这个小王国。

这些坏小子可能是我们环境里的污染物,也可能是一些药物啥的。

它们在细胞里横冲直撞,就有可能把染色体给弄伤了。

这染色体一旦受了伤,就像小士兵的盔甲破了个洞,或者是手里的武器断了一样,行动就不那么利索了。

还有辐射这个家伙,辐射就像个无形的大坏蛋。

它能直接把染色体的结构给破坏掉,就像一阵狂风把小士兵的队伍给吹散了一样。

这时候啊,那些断裂的染色体片段就变得无依无靠的。

细胞在分裂的时候呢,就没办法把这些受伤的或者断裂的染色体片段安排得妥妥当当的。

那这些没被安排好的染色体片段或者是一些小的染色体块块怎么办呢?它们就会被细胞当成是一些多余的、不听话的小玩意儿。

细胞就会想办法把它们给包起来,就像把垃圾装到一个小袋子里一样,这个小袋子就是微核啦。

微核就形成在细胞的细胞质里,它就像是细胞王国里的一个小角落,专门用来存放这些被抛弃的染色体垃圾。

再说说细胞自身有时候也会出点小岔子。

细胞内部的一些结构或者是一些调控机制要是出问题了,就像细胞王国里的交通指挥系统乱了套。

本来应该正常运输和处理染色体的流程被打乱了,也会导致染色体的异常,然后就有可能产生微核。

比如说细胞里有一些负责修复染色体损伤的小助手,如果这些小助手偷懒了或者是自己也生病了,那染色体受伤了就没人管,最后就容易形成微核。

实验15 微核的诱导和检测

实验15 微核的诱导和检测微核(micronucleus)是染色体畸变的一种表现形式,为有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片断,在间期细胞的细胞质中形成的一个或多个圆形或杏仁状结构。

微核游离于主核之外,大小在主核的l/3以下。

其折光率及细胞化学反应性质和主核一样,也具有合成DNA 的能力。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的,但是已有实验证明,整条染色体或几条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在有丝分裂过程中行动滞后,在分裂末期未能进入主核,便形成了独立于主核之外的核物质块。

当子细胞进入下一次分裂间期时,它们便浓缩形成主核之外的小核,即形成微核。

在环境污染物中存在着许多具有诱变活性的物质,能直接或间接地诱发生物体发生基因突变(mutation)、染色体畸变(chromosome aberration)等细胞遗传损伤,染色体畸变在细胞分裂间期中以微核的形式表现出来,而微核产生的概率又可与诱变因子的剂量呈正比,因此可以用微核出现的频率来评价环境诱变因子对生物的诱变影响。

目前,常用的微核检测技术主要有骨髓微核试验和蚕豆根尖微核试验,可应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂、环境检测的安全评价及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。

小鼠骨髓嗜多染红性细胞微核试验:1959年,Evans等人首先提出用微核试验检测细胞遗传损伤,1966年,Schroeder推荐用骨髓微核试验代替相对麻烦费时的骨髓细胞中期染色体畸变试验来研究受试物的有丝分裂毒性(mitotic toxicity)和断裂剂效应(calstogen effect)。

此后,Schmid、Heddle等人在鉴别小鼠骨髓嗜多染性红细胞(Polychromatic erythrocyte,PCE)的基础上建立了哺乳类脊髓微核试验方法,目前已经成为一个相当成熟的标准化体内检测系统。

具体方法为:(1)染毒:在小鼠腹腔注射受试物。

微核测试


嗜多染红细胞是分裂后期的红细胞由幼年发展
为成熟红细胞的一个阶段,此时红细胞的主核
已排出,因胞质内含有核糖体,姬姆萨染色呈
灰蓝色,成熟红细胞的核糖体已消失,被染成
淡桔红色。骨髓中嗜多染红细胞数量充足,微 核容易辨认,而且微核自发率低,因此,骨髓 中嗜多染红细胞成为微核试验的首选细胞群。
实验目的 1、了解微核发生的机制; 2、掌握微核实验的一般程序和实践意义; 3 、掌握对实验动物进行药物处理的一般程序; 4、掌握进行实验设计的一般程序和规则,并
要求参阅的文献:
[1]孟紫强,阮爱东,桑楠等.SO2污染对小鼠骨髓嗜多 染红细胞微核的诱发作用.环境科学,2002,23(4) 123-125. [2]孟紫强,桑楠,张波等.二氧化硫体内衍生物诱发小 鼠骨髓嗜多染红细胞微核的效应.环境科学学报,2000, 20(2)239-243. [3]耿德贵,王秀琴,刘士旺等.除草剂使它隆对黄鳝细 胞的致突变作用研究.环境与健康杂志,2000,17(2) 103-105. [4]周晓蓉,李百祥,邱向红等.小鼠骨髓及肝血中嗜多 染红细胞微核率的比较 . 卫生毒理学杂志, 1999 , 13 (1)66-67. [5] 曹佳.微核实验在中国的应用、发展与展望.遗传, 2003,25(1)73-76.
受试物 对苯二酚 剂量 mg/Kg 120 80 40 秋水仙素 3 1.5 组 别 1 2 3 1 2 各受试小鼠1000个受检细胞中含微核细胞数 1
53 60 35 36 30
2
51 39 32 19 28
3
103 86 80 59 35
4
78 48 95 28 41
5
77 27 86 43 39
(3)0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)
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遗传学实验小论文
题目:染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究班级:10生本班
学号:2010061107
姓名:郑兴艳
指导老师:高坚强
日期:2012-10-20
染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究
摘要:
大蒜根尖细胞微核技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物体细胞检测方法,因具有材料方便,培养简单、技术容易掌握、准确、快速、有明显剂量-效应等优点。

测定大蒜根尖细胞中出现的微核率,以此分析染发剂的诱变性,从而判断其对遗传物质是否有毒性效应。

我们用不同浓度的染发剂处理大蒜根尖细胞,统计微核千分率(微核细胞率)。

对统计结果进行单因素分析得:染发剂对大蒜染色体是有显著影响的。

关键词:染发剂;大蒜根尖;微核;
正文:
微核是真核细胞中的一种异常结构,是由落后染色体形成的核形小块,游离于主核外,大小是主核的1/3以下[1],它的折光率及细胞化学反应性质与主核一样,也具有合成DNA的能力[2],已经证实,微核率的大小是和用药剂量或辐射累积效应呈正相关,所以微核测可用于化学物质的遗传毒性研究[3]。

随着人们生活水平的不断提高,美发护发已普遍为广大公众所接受,目前作为美发的主要产品之一的染发剂使用相当普及,使用范围几乎包括男女老少,主要以青年以上各年龄段为消费主体。

为了了解其潜在的危害性并评价其安全性,我们按1999年卫生部卫生法制与监督司制定的《化妆品卫生规范》的要求进行[4]。

选用了市场上常见的染发剂,以大蒜为材料,探索染发剂对大蒜根尖细胞微核的诱变效应。

微核的形成机理
据陈宝伟的研究分析[8],微核的形成主要有三种方式:一是化学毒性物质导致,包括染色体断裂剂和非整倍体剂。

前者可诱发染色体发生断裂的遗传毒性物质,后者可以使染色体和纺锤体联结发生障碍或纺锤体功能受损;二是核体出芽,即间期的细胞核向外形成瘤状突起,形成芽体最后脱离主核形成微核;三是放射线导致,放射线可以引起DNA损伤,产生错误修复的双链断裂,导致微核出现。

材料与方法
(一)材料
染发剂、大蒜、培养瓶、清水、标签纸、卡洛氏固定液、95%酒精、解剖器、0.1mol/mlHCL、酒精灯、烧杯、计时表、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜、移液腔.
(二)实验方法
(1)大蒜根尖微核实验
1)选材与培养
选择好的大蒜,洗净后用清水培养使其生根,待根长至1.5cm 左右,挑选出发育良好长势大致相同的10个大蒜,随机分配到10个培养瓶中并贴上标签
2)处理与恢复
CK作为对照组用蒸馏水培养,1-3号分别用0.1%染发剂溶液,4-6号用0.03%处理,7-9号用0.05%处理,处理8h后,将经处理后的大蒜用清水反复洗涤后恢复培养约8h。

3)根尖细胞固定
切取根尖约1.5cm,用新配制的卡洛氏固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)固定约23h,70%酒精中保存
4)根尖解离
从固定液中取出大蒜根尖,用清水充分漂洗放入培养皿中,加适量0.1mol/ml的HCL,使根尖软化、解离。

5)染色与压片
取解离后的大蒜根尖,用蒸馏水漂洗后,置于滴定板上,加
1滴醋酸地衣红染液染色,染色约5min,染色后用解剖刀取下尖头一小块,置于载玻片上,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片压片,用吸水纸吸取多余的水。

6)镜检
将制作好的压片置于显微镜下观察,在40*10倍显微镜下观察根尖分生区良好的区域并统计不少于1000个细胞中其微核数,测定其微核千分率MCN%。

并进行统计数处理。

(微核识别标准:细胞质内与主核分离、圆形或椭圆形、大小为主核的三分之一或以下、染核与主核一致或稍浅的小核即为微核)7)显微镜观察、微核细胞记数
找到分生组织区细胞分散均匀、膨大、分裂相对多的部位,再转到高倍镜(物镜40X)下进行观察
微核的识别标准
a、凡是主核大小的1/3以下,并与主核分离的小核。

b、小核着色与主核相当或稍浅。

c、小核形态可以是圆形、椭圆形、不规则形。

每一处理观察5个根尖,每个根尖观察100个细胞,并计数其中有微核的细胞数(微核千分率)
讨论与结果分析
(1)结果计算
1)微核千分率(MCN‰)=观察细胞中有微核的细胞数/总观察视野下细胞数×1000‰
观察细胞中有微核的细胞数
MCN‰= ×1000‰
总观察视野下细胞数
2)实验方案设计中浓度的设定怎么确定?
3)为什么在镜检过程中我们发现断片细胞多而微核出现的细胞还比较少?
(4)结果统计
实验收获:
在实验过程中,我们可在视野中可看到间期、中期、后期、末期四个细胞分裂时期,以及还有一些根尖伸长区的成熟细胞,间期的细胞数目较多,微核是由于某些化学因子或物理因子例如一些化学药品甲醛、紫外辐射等产生的真核细胞中的一种异常结构,一般认为其发生在分裂后期丧失着丝粒断片造成的,整条染色体或某条染色体也能形成微核,这些染色体或片断在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥而形成的第三个核块,而由于其发生微核的条件,我们不一定会在视野中找到微核,例如在溶液浓度为0.1g/l中在第二个视野中才找到了微核,随着溶液浓度地增加,污染加重,细胞在分裂期发生受损的程度与频率加大,微核率增大,我们便更加容易在显微镜视野中找到微核。

从而得到了如上的实验结果,当然实验中难免会有实验误差,可能导致实验结果出现偏差,因此在实验中为了减小实验误差应仔细跟着实验步骤进行实验,增加试验次数。

在压片过程中也有可能把细胞压坏使染色体断片,所以在压片时不要过猛,同时数微核数时也要注意仔细看微核所在的细胞是否是破裂的。

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