亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂实训

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亚甲蓝分光光度法测定水中阴离子表面活性剂方法的探讨

Ａｂｔａｔｓｒｃ：Ｃｏａｉｏｎｌｓｓｈｓｂｅｏｄｃｅｅｗｅｎｉｒｖｄａｄｏｉｉａｔｎａｄ（ｍｐｒｓｎａａｙｉａｅｎｃｎｕｔｄｂｔｅｍｐｏｅｎｒｇｎｌａｄｒＧＢ）ａｐｏｃｏｎｏ — ｓｐｒａｈｆｒａｉｎ
ｔｃｕｇｓｓｔｅｉｒｖｄｍｅｈｄｈｓｎｕｓａｔａａｉｔｎｗｉｔｎａｄｔｓｓｒｓｌｓｉｅｍｓｏａｐｅｌｅｒ— ｉｓｓｇｅｔｈｍｐｏｅｔｏａｏｓｂｔｎｉｌｒａｉｔｓａｄｒｅｔｅｕｔｔｒｆｓｍｌｉａｉｖｏｈｎｎｔｏｆｉｉｎｓＲ２，ｐｅｉｉｎａｄａｃｒｃｙｃｅｆｅｔｃｒｃｓｏｎｃｕａｙ，ｂｔｗｉｈｎｒｏｒｄｓｒｂｔｎａｅｓｎａｄｔｎ，ｔｅｉｒｖｄｍｅｈｄｕｔａｒｗｅｉｔｉｕｉｒａ．Ｉｄｉｉｏｏｈｍｐｏｅｔｏ
亚甲蓝分光光度法测定水中阴离子表面活性剂方法的探讨
袁菊，师昀，高曾广铭，方祥沈
（阳市环境监测中心站，贵贵州贵阳５００）５０２
摘要：水中阴离子表面活性剂的测定方法做了一些改进，优化方法和国家标准方法做比较，标准样品对用对
ｄｔｒｎｔｏｅｕｒｍｅｔｅｅｍｉａｉｎｒｑｉｅｎ．Ｆｕｔｅｒ，ｔｅｏｔｚｄｍｅｈｄｅｔｉｍａｌｒｑａｔｙｏｈｍｉａｇｎｎｔｓｒｈｒｍｏｅｈｐｉｅｔｏｎａｌｓｌｕｎｉｆｃｅｃｌａｅｔｉｅｔｍｉｓｅｔ

亚甲蓝分光光度法测定水中阴离子表面活性剂的优化探讨

前二杯１０ｎｌｎｌ比色皿所接的滤液，将第三杯滤液用于比色，其结果准确可靠。另外，对不同部门生产的标准溶液进行
了比对，结果发现，采用国家环保部生产的标准样品进行量值溯源、考核、比对或仪器校正等也均应采用其相同标准
ｄｅｐａｒｍｅｔｎｔｉｎｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅ．
ＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＵｓｉｎｇＭｅｔｈｙｌｅｎｅＢｌｕｅＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔ￣ｅＭｅｔｈｏｄｔｏＤｅｔｅｍｌｉｎｅＡｎｉｏｎｉｃＳｕｒｆａｃｔａｎｔｓｉｎ
ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ，ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｎｄａｉｓｔｎｒｕｍｅｎｔｓａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ，ｅｔｃ．，ｎｄａｈｅｔｓｔａｎｄａｒｄｓａｍｐｌｅｉｓｐｒｏｄｕｃｅｄｙｂｔｈｅｓｔａｔｅｅｎｖｉｏｒｎｍｅｎｔａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
２Ａｋｅｓｕｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｔｅｃｈｎｉｃａｌｉｎｓｉｔｔｕｔｅ，ＡｋｅｓｕＸｉｎｊｉａｎｇ８４３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｄｉｓｃａｒｄｅｄｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｐｒｉｍａｒｙｉｆｌｔｒａｔｅｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄ，ｗｉｃｈｈｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎｅｘｔｒａｃｔｐｒｏｃｅｓｓｗｈｅｎｄｅｔｅｃｉｔｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｆｏａｎｉｏｉｃｎｓｕｒｆａｃｅａｃｉｔｖｅａｇｅｎｔｉｎｗａｔｅｒ．Ｉｔｆｏｕｎｄｔｈａｔｔｈｅｉｆｒｓｔｔｗｏｃｕｐｓｏｆｔｈｅｉｆｌｔｒａｔｅｉｎ１０ｎｌｌｎｃｕｖｅｔｔｅｓｈｏｕｌｄｂｅｄｉｓｃａｒｄｅｄ，ｔｈｅｔｈｉｒｄ

实验报告-表面活性剂的鉴别

实验六表面活性剂的鉴别
一、测定原理
亚甲基蓝是水溶性染料，但阴离子表面活性剂与亚甲基蓝可形成溶于氯仿的蓝色络合物，从而使蓝色从水相转移到氯仿相。

二、原料
1、亚甲基蓝溶液
2、阴离子表面活性剂溶液
3、氯仿
三、测定步骤
移取5ml试样于在带玻璃塞的试管中，加入10ml亚甲基蓝溶液和5ml氯仿，塞上塞子充分振荡后静置分层，观察两层颜色。

如氯仿层呈蓝色，表示有阴离子表面活性剂存在。

因为试剂是碱性的，如果存在肥皂的话，已经分解成脂肪酸，所以肥皂不能被检出。

如果水层颜色较深，则表明存在阳离子表面活性剂，因为试剂是酸性的，两性表面活性剂通常呈（微弱的）阳性结果。

如果水层呈乳状，或两层基本呈同一颜色则表明有非离子表面活性剂存在。

四、结果记录
五、结果讨论
1、实验配制过程中，氯仿属于有毒气体，需在通风处量取及加入
2、样品四在冷却状态下会结块，需加热之后趁热量取。

水和废水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书（仪器法）

水和废水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书水和废水中阴离子表面活性剂的测定作业指导书(连续流动分析仪法) 1 主题含义主题含义阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分，这里主要指直链烷基苯磺酸钠（LAS ）和烷基磺酸钠类物质。

本方法规定了测定水溶液中阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法。

2 分析方法分析方法2.1 方法出处方法出处《水质阴离子表面活性剂(MBAS)的测定-连续流动分析法（CFA)》ISO16265:2009 2.2 适用范围适用范围适用于测定饮用水、地表水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS ），即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物是LAS 、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠。

、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠。

本方法的最低检出浓度为0.05mg/L LAS ，检测上限为0.40mg/L LAS 。

2.3 原理原理阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS ）。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长650nm 处测量氯仿层的吸光度。

的吸光度。

2.4 试剂和材料试剂和材料实验时仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或同等纯度的水。

实验时仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或同等纯度的水。

2.4.1氯仿（CHCl3）：使用前需超声波除气30min 。

2.4.2直链烷基苯磺酸钠标准溶液直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取5.00mL 十二烷基苯磺酸钠贮备溶液（直接购买，浓度为500mg/L ），用水稀释至250mL ，每毫升含10.0μg LAS 。

当天配制。

2.4.3亚甲基蓝溶液亚甲基蓝溶液先称取105mg 三水亚甲基蓝（指示剂级），用50mL 水溶解，用水定容至100mL ，摇匀。

此溶液贮存于棕色试剂瓶中，4℃下保存一周。

℃下保存一周。

2.4.4 四硼酸钠溶液四硼酸钠溶液称取1.9g 四硼酸钠溶于50mL 水中，加入0.4gNaOH ，加水至80mL ，加入6.8 mL 97％硫酸，定容至100mL 。

流动注射——亚甲基蓝分光光度法测定地表水中阴离子表面活性剂方

2020年第1期新疆有色金属1试剂（1）硫酸（优级纯）（2）氢氧化钠（优级纯）（3）无水乙醇（4）三氯甲烷（CHCl 3）：使用前超声波仪脱气30分钟。

（5）碱性硼酸钠储备液：称3.17g 十水四硼酸钠（Na 2B 4O 7·10H 2O ）,加0.66g 氢氧化钠溶于200mL 去离子水中，储存于棕色瓶中，放冰箱可保存3个月。

（6）亚甲基蓝储备液：称取0.2g 亚甲基蓝溶解于50mL 无水乙醇中，再加入去离子水定容至100mL ，用0.22微米膜过滤后储存于棕色瓶中，放冰箱可保存3个月。

（7）碱性亚甲基蓝溶液：分取36mL 亚甲基蓝储备液（1.6）于1000mL 烧杯中，加入100mL 碱性硼酸钠储备液（1.5），再加入100mL 无水乙醇，用去离子水定容至1000mL ，储存于棕色瓶中，放冰箱可保存1个月，使用前脱气30分钟或过膜。

（8）载流：去离子水，使用前脱气30分钟或过膜。

（9）酸性亚甲基蓝溶液:称取56g 二水合磷酸二氢钠（NaH 2PO 4·2H 2O ）于1000mL 烧杯中，加入约800mL 去离子水溶解，再加入50mL 无水乙醇，搅拌，待溶解后加入6.8mL 硫酸，搅拌，加入7.6mL 亚甲基蓝储备液（1.6），用去离子水定容至1000mL ，储存于棕色瓶中，使用前脱气30分钟或过膜。

（10）流通池清洗液：无水乙醇。

（11）自动进样器载流槽清洗液：去离子水。

（12）十二烷基苯磺酸钠标准储备液1000mg/L （国家标准物质中心购买）：分取10mL 十二烷基苯磺酸钠标准储备液1000mg/L 于100mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀，其浓度为100mg/L 。

分取10mL 十二烷基苯磺酸钠储备液100mg/L 于100mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀，其浓度为10mg/L 。

2仪器和器皿（1）iFIA7全自动流动注射仪（2）分析天平：精度为0.1mg.（3）超声波仪：频率40kHz （4）100mL 容量瓶（5）10mL 比色管3样品采集好的样品保存于清洁的玻璃瓶中，加入甲醛，使甲醛体积浓度为1%，4℃下保存，可保存一周。

实验室对水中阴离子表面活性剂的三种测定方法对比

实验室对水中阴离子表面活性剂的三种测定方法对比作者：陈玉方来源：《环境与发展》2018年第06期摘要：目的：对比分析实验室对水中阴离子表面活性剂的三种测定方法（水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法（GB7494-1987）、亚甲蓝分光光度法一次萃取简化法（GB7494-1987附录B）和流动注射-亚甲蓝分光光度法（HJ826-2017））。

方法：选取13个地表水断面，分别适用上述三种方法进行含量测定。

结果：测定结果进行比较分析。

结论：用三种方法测定标样所的质控样测定结果都合格，三种方法测定地表水和地下水数据基本一致。

关键词：阴离子表面活性剂；亚甲蓝分光光度法；亚甲蓝分光光度法一次萃取简化法；流动注射-亚甲蓝分光光度法中图分类号：X131.2 文献标识码：A 文章编号：2095-672X（2018）06-0115-02DOI：10.16647/15-1369/X.2018.06.066Abstract： Objective： To compare and analyze three methods for the determination of anionic surfactants in water （water quality anionic surfactants， methylene blue spectrophotometry（GB7494-1987）， methylene blue spectrophotometric one extraction simplification （GB7494-1987 appendix B） and flow injection methylene blue spectrophotometry （HJ826-） 2017）method： 13 surface water sections were selected， and the above three methods were applied respectively for content determination. Results： the results were compared and analyzed. Conclusion： the results of quality control samples determined by the three methods are all qualified， and the three methods are basically consistent with the data of surface water and groundwater.Key words： Anionic surfactants； Methylene blue spectrophotometry； Methylene blue spectrophotometric method of first extraction； Flow injection methylene blue spectrophotometric method阴离子表面活性剂是指直链烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠类物质（1）。

亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的不确定度分析

亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的不确定度分析根据实际工作中所测饮用水中LAS含量较低,而LAS为常规必检项目, 本文通过亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的方法，得出本方法的不确定度以定量表达本方法的可信程度，数值只有包含了不确定度才真正有意义。

1.实验部分1.1 原理阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量氯仿层的吸光度。

1.2试剂与仪器在测定过程中，使用分析纯试剂和蒸馏水，7230G可见光分光光度计, 配有10 mm光程的比色皿。

氯仿(CHCl3),分析纯,十二烷基苯磺酸钠标准溶液(1000mg/L)。

当天配制10.0mg L的标准贮备液。

亚甲蓝溶液和洗涤液按GB5750-85.16.1配制。

1.3 实验方案及过程按照《生活饮用水标准检验法》GB5750-85-16.1的步骤进行实验，于250mL 容量瓶中分别加入适量的水，再移取系列直链烷基苯磺酸钠标准溶液于250mL分液漏斗中，加水刚好100mL，以酚酞为指示剂，滴加NaOH溶液至刚好呈桃红色，再滴加0.5mol/L硫酸至桃红色刚好消失。

加入25mL亚甲蓝溶液，用氯仿萃取三次，萃取液用洗涤液洗涤，定容50mL，用分光光度计于波长652nm处测吸光度。

1.4测量的数学模型1）回归曲线：y=a+bx2）浓度计算公式：c=m/v3）根据样品测定计算公式的独立分量，根据不确定度的传播规律，亚甲蓝分光光度法测定水中直链烷基苯磺酸钠标准溶液测量的合成相对标准不确定度公式表达为：式中：u rel (C)—水中LAS 浓度的相对标准不确定度；u rel (C LAS )—LAS 标准贮备液中引入的相对标准不确定度；u rel (f)—将贮备液稀释至使用液引入的相对标准不确定度；u rel (m)—标准网线拟合求得LAS 含量时引入的相对标准不确定度；u rel (A)—重复测定时引入的相对标准不确定度；u rel (R)—回收率引入的相对标准不确定度；2. 不确定度的评定2.1 LAS 标准溶液引入的不确定度u 1标液浓度：1.000±0.020mg/mL其不确定度为:U 11=0.020/3=0.011547mg/mL 、灵敏度系数c 11=0.02。

亚甲蓝分光光度法测定水体阴离子表面活性剂方法的探讨

，
ＬｕｉｕｏＺｈｈａ
（．ＤｉｎｉｎｅｔｌｃｎｅｅａｃｎｔｕｅＨｉｏｇＪａｇ１３１；１ａＱｎＥｖｏｍｎａｉｃｓｒＩｓｔｔ，ｅＬｎｉｎ６３６ｇｒＳｅＲｅｈｉ
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３结论
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由表１可见，三种萃取方法的对同一样品平行萃取测定取得的分析结果表明：法一和方法三均值的相对偏差大体相方似；方法二测定结果明显高于方法一且相对偏差也较大；相对偏差的数值方法一在０３— ．％之间，．２０方法二在１７～．％之．３６
用三种方法对采集的三份萃取水样分别进行平行萃取，并用７２２Ｓ可见光分光光度计平行测定同一方法的两平行萃取
液，定结果见表１测。
壁上的氯仿液珠降落，置分层，氯仿层放人预先盛装有静将５ｍｌ涤液的第二个分液漏斗中，０洗激烈振摇３ｓ静置分层，０，将氯仿层通过脱脂棉，放入ｌｍｍ比色皿中。亚甲蓝和洗涤液配Ｏ制方法同方法一。每一批样品要做一次空白试验：ｌＯｌ取Ｏｍ蒸馏水代替样品，其他步骤各同以上三种方法。以氯仿为参比液在６２ｍ用５ｎ１ｍ０ｍ的比色皿测定样品、标准溶液、和空白液的吸光值，以标准

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亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
1.仪器、试剂
（7）酚酞指示剂溶液（2%）将1.0g酚酞溶于50mL乙醇[C2H5OH，95%(V/V)]中，然后
边搅拌边加入50mL水，滤去形成的沉淀。（8）玻璃棉或脱脂棉
在索氏抽提器中用氯仿提取4h后，取出干燥，保存在清洁的玻璃瓶中待用。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
1.仪器、试剂
（3）氯仿：即三氯甲烷（CHCl3）（4）直链烷基苯磺酸钠（LAS）贮备溶液（1.00mg/mL）
称取0.100 g 标准物质LAS（平均分子量344.4），准确至0.001 g ，溶于50mL水中，转移到100mL容量瓶中，稀释至标线并混匀。此溶液每毫升含1.00mg LAS，保存于 4℃冰箱中。只能放置一周时间。
水环境监测
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
姚进一副教授
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
1.仪器、试剂
1.1 仪器（1）分光光度计，1cm比色皿；（2）250mL分液漏斗，最好聚四氟乙烯（PTFE）活塞；（3）索氏抽提器：150mL平底烧瓶，Φ35×160mm抽出筒，蛇形冷凝管。 1.2 试剂（1）氢氧化钠（NaOH）：4%，即1mol/L （2）硫酸（H2SO4）：3%，即0.5mol/L
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
⑤分液漏斗用完要及时清洗，晾干。（3）在652nm处，以氯仿为参比液，测定样品、标准系列和空白试验的吸光度。（4）以样品的吸光度减去空白试验的吸光度后，代入回归方程，计算LAS的含量。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
4.空白试验
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
分液漏斗萃取操作注意事项： ①使用分液漏斗进行溶液的萃取操作时，要注意分液漏斗的活塞是否配套，漏液的不能使用，要按照分析要求提前清洗干净、并晾干，满足下部颈管处无水。 ②装入萃取液后，塞紧磨口塞子，倒置分液漏斗，一开始轻摇4-5次即从活塞处放气，再次振摇4-5次放气，观察放气量的多少，等到气体不是很多时，可以多次快速摇动后再放气。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
1.仪器、试剂
（5）直链烷基苯磺酸钠标准溶液（10.0mg/L）准确吸取10.0mL直链烷基苯磺酸钠贮备溶液，用水稀释至
1000mL，此溶液每毫升含10.0µg LAS。当天配制。（6）亚甲蓝溶液
先称取50g的NaH2PO4·H2O置于烧杯中，加入约300mL水溶解，缓慢沿杯壁加入6.8mL浓硫酸，混匀，转移到1000 mL容量瓶中。另称取0.030g亚甲蓝（指示剂级）置于烧杯中，用 50mL水溶解后也移入此容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
预计选用的试样体积
预计的MBA5～2.0
100
2.0～10
20
10～20
10
20～40
5
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
3.2 样品测定（1）将所取试份移至分液漏斗，以酚酞为指示剂，逐滴加入 1mol/L氢氧化钠溶液至水溶液呈粉红色，再滴加0.5mol/L硫酸到粉红色刚好消失。（2）加入25mL亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10mL氯仿，激烈振摇30s，注意放气(过分摇动会发生乳化，加入少量小于10mL 异丙醇可消除乳化现象)。慢慢旋转分液漏斗，轻轻晃动，使滞留在内壁上的氯仿液珠降落，静置分层。将氯仿层通过玻璃棉或脱脂棉，放入比色皿中。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
③将分液漏斗正过来静置一段时间，使内部的两相溶液出现清晰的分层。放液前，分液漏斗下部管颈处要塞上一小段脱脂棉，不能太紧也不能太松，不能太落上也不能太落下。 ④放液时，只能从下方活塞处打开放液，不能从上口处放液，放液速度要慢，出现气泡时，可以轻轻敲动分液漏斗壁，让气泡浮出。
按上述“样品测定”步骤进行空白试验，仅用100mL水代替试样。在试验条件下，以10mm光程的比色皿测得的空白试验吸光度不应超过0.02，否则应仔细检查设备和试剂是否有污染。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
5.结果表示
用亚甲蓝活性物质（MBAS）报告结果，以LAS计（平均分子量为344.4）。
c = m /V 式中：c ——水样中亚甲蓝活性物的浓度，mg/L
m ——从校准曲线方程计算出的LAS质量，µg V ——水样体积，mL
结果以三位小数表示。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
6.干扰及其消除
（1）主要被测物以外的其他有机的硫酸盐、磺酸盐、羧酸盐、酚类以及无机的硫氰酸盐、氰酸盐、硝酸盐和氯化物等，他们或多或少的与亚甲蓝作用，生成可溶于氯仿的蓝色络合物，致使测定结果偏高。通过水溶液反洗可消除这些正干扰（有机硫酸盐、磺酸盐除外），其中氯化物和硝酸盐的干扰大部分被去除。经水溶液反洗仍未除去的非表面活性物引起的正干扰，可借气提萃取法将阴离子表面活性剂从水相转移到有机相而加以消除。
亚甲基蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂
3.样品测定步骤
3.1 校准曲线回归方程的测定取一组分液漏斗10个，分别加入100、99、97、95、92、88、
85、80mL水，然后分别移入0、1.00、3.00、5.00、8.00、 12.00、15.00、20.00mL直链烷基苯磺酸钠标准溶液，摇匀。按“样品测定”步骤操作，以测得的吸光度扣除空白试验值（零浓度标准溶液的吸光度）后，计算回归方程和相关系数，相关系数低于0.999时要进行检验，不合格的要重新制作标准曲线。
2.样品采集与保存
取样和保存样品应使用玻璃瓶，并事先经甲醇清洗过。取样时于取样现场加入硫酸酸化至pH小于2，密盖。
短期保存可在4℃冰箱中冷藏，可保存48小时；若保存期为4天，加入1%（V/V）的40%（V/V）甲醛溶液即可；若保存期长达8天，则需用氯仿饱和水样。
本方法测定的是水样中溶解态的阴离子表面活性剂。若水样混浊，在测定前应将水样预先经中速定性滤纸过滤以去除悬浮物，吸附在悬浮物上的表面活性剂不计在内。