气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察

生物与化学工程学院

仪器分析实训报告

题目：气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察

Study on the methodology investigation of detecting nicotine content by

GC internal standard method

专业：食品科学与工程

姓名：戚效群

学号：10501094002

完成日期：2010-5-24

气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察

【摘要】烟碱(又称尼古丁)是烟叶中的主要成分。本次试验以喹啉为内标物，烟碱为测定对象，考查及检测气相色谱法内标法测定烟碱含量的方法学。试验中以有机溶剂萃取、填充气相色谱法测定对试验的重现性及精密度和线性关系进行进行了认真分析。一定范围内，烟碱含量的峰高比及面积比呈现线性关系，重现性及精密度良好。

【关键词】：内标法烟碱气相色谱方法学

Study on the methodology investigation of detecting

nicotine content by GC internal standard method

Abstract：Nicotine (also called nicotine) is the main ingredient. Tobacco This trial as internal standard with things, -1h-qunolin-2-ones nicotine to determine object, examines and detecting gas chromatography internal standard method for determining the content of nornicotine methodology. Experiments with organic solvent extraction, filling gas chromatography was developed for the determination of the test the reproducibility and precision and linear relationship between analyzed carefully. A certain range, high ratio of nicotine content than present peak area of linear relation, reproducibility and precision is good.

Keywords：Internal standard method nicotine gas chromatography

methodology

目录

1绪论 (5)

1.1 烟碱的结构与化学性质 (5)

1.2 烟碱的检测方法 (6)

1.2.1 非水滴定法检测烟碱含量 (6)

1.2.2 紫外线分光光度法检测烟碱含量 (6)

1.2.3 水蒸气蒸馏法检测烟碱含量 (6)

1.2.4 高效液相色谱法检测烟碱含量 (7)

1.2.5 气相色谱法检测烟碱含量 (7)

1.2.5.1 外标法检测烟碱含量 (8)

1.2.5.2 归一化法检测烟碱含量 (8)

1.2.5.3 内标法检测烟碱含量 (8)

1.3 检测方法学考察 (9)

1.3.1 线性关系的考察 (9)

1.3.2 精密度的考察 (9)

1.3.3 重现性实验的考察 (10)

1.3.4 回收率 (10)

1.3.5 验证性 (10)

2 实验部分 (11)

2.1 目的 (11)

2.2 材料和仪器 (11)

2.2.1 材料 (11)

2.2.2 仪器 (11)

2.3 色谱条件 (11)

2.4 实验设计及结果分析 (11)

2.4.1 线性关系实验的考察 (11)

2.4.2 精密度实验的考察 (13)

2.4.3 重现性实验的考察 (14)

2.4.4 结果分析 (15)

参考文献 (15)

气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察

1 绪论

1.1 烟碱的结构与化学性质

烟碱又名尼古丁，是一种无色至淡黄色透明油状液体，是烟草中含氮生物碱的主要成分，在烟叶中的含量为1～3%。它能迅速溶于水及酒精中，通过口、鼻、支气管黏膜，很容易被人体吸收。粘在皮肤表面的尼古丁，可“渗”入人体内。香烟中的尼古丁对人的致死量是50～70毫克，相当于20～25支香烟尼古丁的含量。如果将一支雪茄或三支香烟的尼古丁一次注入人的静脉内,3～5分钟人即可死亡。对昆虫具有杀灭作用

1.1.1烟碱的结构

尼古丁

1.1.2烟碱化学性质

一种吡啶型生物碱，分子式C10H14N2。俗称尼古丁（nicotine）。存在于烟草属经济植物中。无色挥发性液体，有刺激性臭味，熔点－79℃，沸点246.7℃(745毫米汞柱)，相对密度1.0097（20／4℃），比旋光度－169°。可以水蒸气蒸馏。在空气中易发生变质。易溶于水、乙醇、乙醚、氯仿和石油醚。烟碱能与各种无机酸（如盐酸、硫酸）和有机酸（如酒石酸、苦味酸）生成结晶的单盐和双盐，其中双苦味酸盐的熔点278℃，常用来鉴别烟碱。烟碱与二氧化汞生

成结晶形复合物，此反应可用来纯化烟碱。

1.2烟碱的检测方法

1.2.1非水滴定法检测烟碱含量

烟碱含量是烟草质量的重要指标，本法分别以盐酸和水为浸取剂、三氯甲烷为萃取剂、溴甲酚绿和甲基红的混合试剂为指示剂，在最佳浸取、萃取、ｐＨ值等条件下，用标准硫酸溶液直接滴定烟碱的方法。本法准确、快速、简便。烟草样品中,烟碱的测定方法有:有机溶剂萃取蒸馏酸碱滴定法,在强碱性介质中蒸汽蒸馏.硅钨酸沉淀重量法,另外文献亦有报导;烟草中钾的测定方法,有钾与亚硝酸钴钠生成复盐,高锰酸钾分解,草酸返滴定法;漆酚冠醚钾离子选择性电极格兰计算法等,提出用氟硼酸根离子选择性电极作为指示电极、四苯硼钠电位滴定法测烟叶中的钾与总烟碱量。样品加入过量四苯硼钠的溶液,分别在pH=10中沉淀钾在pH=4、pH=10时沉淀烟碱与钾,过量的四苯硼钠分别用溴化十六烷基三甲基铵返滴，计算出烟碱含量。

1.2.2紫外分光光度法检测烟碱含量

它是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。烟碱(又名尼古丁)是烟草特有的植物碱,它给予吸烟者感官上感觉到“劲头”而满意,所以烟碱是烟草质量的重要化学成份之一.过去我们采用经典的硅钨酸沉淀法测定,这个方法准确性虽高,但化费时间却很长,每作一个样品的测定需要30个小时,因此不能适应我国烟草工业形势发展的需要,现我们改用紫外分光光度法来测定,其原理是烟碱溶液在特定波长的紫外光源通过时,紫外光量的吸收与烟碱浓度成比例.一个样品仅需两小时就可完成测定

1.2.3水蒸气蒸馏法检测烟碱含量

烟碱是由两个杂环（吡啶和四氢吡咯）构成含氮碱，很容易与盐酸反应生成烟碱盐酸盐而溶于水。此提取液加入NaOH后可使烟碱游离。游离烟碱在左右具