气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察
烟碱含量测定方法
烟碱含量测定方法烟碱（Nicotine）是烟草中的一种主要成分，也是烟草制品中的一种重要物质。
烟碱的浓度与烟草制品的烟碱含量直接相关，因此，准确测定烟碱含量对于烟草行业具有重要意义。
本文将介绍几种常用的烟碱含量测定方法。
一、气相色谱法气相色谱法是一种常用的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品加入适量的溶剂中，进行提取。
然后，将提取液注入气相色谱仪中进行分析。
在气相色谱仪中，烟碱会与气相载气相互作用，通过气相色谱柱进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法也是一种常用的烟碱含量测定方法。
与气相色谱法类似，首先将烟草样品加入适量的溶剂中进行提取。
然后，将提取液注入高效液相色谱仪中进行分析。
在高效液相色谱仪中，烟碱会与固定相相互作用，在流动相的作用下进行分离，并通过检测器进行定量分析。
最后，根据峰面积或峰高与标准曲线的关系，计算出烟草样品中烟碱的含量。
三、紫外分光光度法紫外分光光度法是一种简单快速的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于紫外可见光谱仪中进行测定。
烟碱在紫外光波段有特定的吸收峰，通过测量吸光度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
需要注意的是，由于烟草样品中可能存在其他物质的干扰，因此在测定前需要进行样品预处理，以消除干扰。
四、荧光光谱法荧光光谱法是一种高灵敏度的烟碱含量测定方法。
首先，将烟草样品制备成溶液，并将其置于荧光光谱仪中进行测定。
烟碱在激发光波长下会发射特定的荧光，通过测量荧光强度，可以计算出烟草样品中烟碱的含量。
与紫外分光光度法类似，荧光光谱法也需要进行样品预处理以消除干扰。
烟碱含量测定方法有气相色谱法、高效液相色谱法、紫外分光光度法和荧光光谱法等多种。
不同的方法适用于不同的实际情况，选择适合的方法可以提高测定结果的准确性和可靠性。
烟草行业可以根据自身需求选择合适的测定方法，确保产品质量的控制和监测。
气相色谱法测定雪茄烟总粒相物中的烟碱
气相色谱法测定雪茄烟总粒相物中的烟碱1 范围本标准规定了雪茄烟主流烟气总粒相物中烟碱的气相色谱测定方法。
本标准适用于雪茄烟主流烟气总粒相物中烟碱的测定。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 23225 烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法YC/T XXXX 常规分析用雪茄烟吸烟机定义和标准条件YC/T XXXX 雪茄烟用常规分析用雪茄烟吸烟机测定总粒相物和焦油3 原理按照YC/T XXXX捕集雪茄烟主流烟气中的总粒相物。
使用含有内标物的萃取剂萃取捕集到的总粒相物，用气相色谱法测定萃取液的烟碱含量，计算出总粒相物中的烟碱含量。
4 试剂应使用分析纯级试剂。
4.1 载气：高纯氮气或氦气。
4.2 辅助气体：火焰离子化检测器所需的空气和高纯氢气。
4.3 异丙醇：水分含量不高于1.0 mg/mL。
4.4 内标物：正十七碳烷或喹哪啶（≥99%）。
应监控每个样品测定时内标物的峰面积保持不变。
如果改变，应使用不加内标物的样品萃取液进行验证，确认样品液组分不在内标物的峰位置处洗脱。
注：在测定纯度符合要求且不与其它烟气组分同时洗脱的情况下，香芹酮、正十八碳烷或其它物质亦可用做内标物。
4.5 萃取剂含有适当浓度内标物（4.4）的异丙醇溶液。
若萃取剂存放时未控制温度，使用前应平衡至（22 ± 2）℃。
4.6 烟碱按照GB/T 23225验证的已知纯度的烟碱，于0℃ ~ 4℃避光保存。
亦可使用按照GB/T 23225验证后的已知纯度水杨酸烟碱盐。
4.7 标准溶液将烟碱（4.6）溶解于萃取剂（4.5）中，制备至少4个标准溶液，其浓度范围应覆盖预计在样品中检测到的烟碱浓度。
标准溶液应于0℃ ~ 4℃避光保存。
低温保存的萃取剂和溶液在使用前应平衡至（22 ± 2）℃。
用HW色谱工作站测定卷烟烟气总粒相物中烟碱及水份含量的步骤
用色谱工作站测定卷烟烟气总粒相物中烟碱（尼古丁）含量的详细步骤（本步骤执行由中国烟草总公司提出、中国烟草标准化质量监督检测中心起草的标准，此标准是参考ISO4387和ISO10315制订的。
）一配制萃取溶剂萃取溶剂为每升异丙醇中含0.5ml内标物质（茴香脑或十七碳烷）。
二配置一系列标准溶液将一定重量范围内（通常在2.5至20mg之间）的烟碱（纯度在98%以上）注入一系列20ml的上述“萃取溶剂”中。
配制至少5个不同浓度的标准溶液。
三将色谱仪稳定在规定的操作条件下四用色谱工作站绘制工作曲线（又称标准曲线）1 单击软件工具条上的“新建”按钮，并在新打开的文档窗口的“谱图参数表”里选择正确的采样通道。
2 采集样品谱图：取上述第一个“标准样品”进样，在进样后立即按远程启动按钮，启动实时谱图采集。
待所有的峰（溶剂峰、尼古丁峰、内标峰）出完后单击工具条上的“手动停止”按钮结束谱图的实时采集。
（也可事先在软件“谱图参数表”中设置“采集时间”，这样不必手动终止谱图的实时采集，届时软件会自动终止采集谱图。
）3 如果软件未能正确检测到尼古丁峰和内标峰，请调节“谱图参数表”中的几个“谱图处理参数”，然后单击工具条上的“再处理”按钮，再次处理上面已采集到的谱图，直至软件正确判断出两峰为止。
4 将参与定量计算的组份峰挑到“定量组份表”中：移动鼠标将鼠标指针指着尼古丁峰并单击鼠标右键，在弹出的菜单中选择第二项“自动填写组份表中套峰时间”，软件即在“定量组份表”中填写了按下鼠标右键时鼠标指针所指处的时间，此时间只要在尼古丁峰的起落点范围之内，则意味着此峰被选中。
同样，将内标峰也挑到“定量组份表”中，并在“内标”列中指明其为“内标”。
5 将此标样的峰面积和浓度数据入档：翻到“定量组份表”，在“浓度”一栏中分别填入加入到此标样中纯尼古丁的mg数。
翻到“定量方法表”，将定量方法设置为“计算校正因子”，单击工具条上“定量计算”按钮。
烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法
烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法
烟草及其制品烟碱的测定已经受到了世界各国政府的重视，它们被认为是有害物质，有助于危害人类身体健康的形成。
烟草中的烟碱是一种重要的有毒物质，其含量不但受到政府严格的监管，而且已被收录入国储备物质的监控之中，其执行标准为《中华人民共和国烟草烟碱监测管理办法》（WS 42）。
烟碱测定的重要性
烟草中含有烟碱，烟碱是一种有毒物质，与其他有害物质一样，对人类健康有较大的影响。
因此，烟碱的测定对于监控和评估烟草及其制品的毒性具有重要意义。
然而，尽管烟碱的测定已被政府重视，但由于某些原因，目前还没有一种完善的检测方法，以满足政府和公众的合理要求。
气相色谱法的特点
为了解决上述问题，研究人员提出了一种新的检测方法气相色谱法，它采用一种可以呈现出烟碱的特征的色谱，可以实现精确的检测和分析，而且操作简单，检测效果显著，因此，受到了社会的广泛关注和认可。
气相色谱法的优势
气相色谱法有很多优势，使其成为烟碱测定的首选检测方法，主要有以下几点：
首先，气相色谱法具有极高的精确度和准确度，可以有效地检测出各种量级的烟碱，确保测量的准确性。
其次，气相色谱法的操作简单，速度快，容易掌握和控制，结果容易解释，适合大量，高速和连续检测，即使纯度较低的烟碱也能准确地进行检测。
结论
本文介绍了作为烟碱测定的一种有效检测方法气相色谱法，指出具有极高的准确度和精确度，操作简单，容易掌握和控制，可用于动态、高速和连续检测的特点。
因此，气相色谱法已经成为烟碱测定的首选检测方法。
同时，对气相色谱法的研究也将对烟碱检测技术的实施提供有助。
气相色谱法分析电子烟烟液中主要生物碱含量
气相色谱法分析电子烟烟液中主要生物碱含量韩书磊;陈欢;刘彤;付亚宁【期刊名称】《分析科学学报》【年(卷),期】2015(31)4【摘要】建立了电子烟烟液中主要生物碱含量的气相色谱测定方法,并对19种品牌电子烟共计51种型号电子烟烟液进行含量分析。
电子烟烟液经超声稀释提取后,直接进行气相色谱分析。
采用HP-50＋型毛细管色谱柱,氢火焰离子化检测器检测,内标法定量。
结果表明：上述化合物在各自浓度范围内线性关系良好（R2〉0.996）,3个加标水平的平均回收率在97.1%-104.6%之间,相对标准偏差（RSD）小于4%,检出限为0.00037%-0.0011%。
实际样品测试结果表明：电子烟烟液中烟碱含量在0-28.36mg/mL,生产厂商所标注烟碱浓度差异率为-136.56%-100.00%,微量生物碱含量范围为0-0.045mg/mL,所测定微量生物碱总含量与烟碱含量之比在0-3.50%。
【总页数】5页(P494-498)【关键词】气相色谱;电子烟;烟液;生物碱【作者】韩书磊;陈欢;刘彤;付亚宁【作者单位】国家烟草质量监督检验中心【正文语种】中文【中图分类】O657.71【相关文献】1.气相色谱法同时测定电子烟烟液中主要化学成分含量 [J], 韩书磊;陈欢;刘彤;侯宏卫;胡清源2.气相色谱法同时测定电子烟烟液中的烟碱、1,2-丙二醇和丙三醇 [J], 蔡君兰;陈黎;彭斌;余晶晶;崔华鹏;王冰;张晓兵;刘惠民;刘绍锋3.气相色谱法测定电子烟烟液中烟酮的含量 [J], 李素平;高建宏4.气相色谱法测定电子烟烟液及气溶胶中双乙酰和乙酰丙酰 [J], 张霞;洪鎏;赵伟;张子龙;朱东来;吴俊;李寿波;李廷华;巩效伟;孙志勇5.气相色谱－串联质谱法测定电子烟烟液中的10种生物碱含量 [J], 严俊;刘彤;韦入丹;黄世杰;韩书磊;王红娟;陈志燕;陈欢;周芸;罗彦波;范忠;付亚宁;邓宾玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
气相色谱_质谱分析烟草中的主要生物碱
标准品 S tandard alka loid s 尼古丁 N icot ine 降烟碱 N orn icotin e 麦斯明 M yos m ine 新烟碱 A n abas ine 可替宁 Cot in ine
#
2# R SD ( % , n = 5) 2 . 59 8 . 75 4 . 98 10 . 8 2 . 72 2 . 28 15 . 0 5 . 18 含量 ( m g/ g) C onten t 24. 4 0. 511 0. 0180 0. 0233 0. 200 1. 06 0. 0310 0. 0112 26. 3 R SD ( % , n = 5) 6. 22 7. 07 2. 66 2. 86 3. 84 3. 89 6. 66 4. 67 含量 ( m g / g) Con tent 22 . 4 1 . 07 0 . 0332 0 . 0284 0 . 200 1 . 09 0 . 0290 0 . 0123 24 . 8
2 实验部分
2 . 1 仪器与试剂 Ag ilent6890N( 美国安捷伦公司 ); QP2010GC M S 联用仪 ( 日本岛津公司 ) 。各等级烟样取自湖南常 德卷烟厂, 其中 1 、 2 和 3 样品分别取自烟叶的上部、 中部和下部; 尼古丁 ( 99 % )、 降烟碱 ( 99 % )、 麦斯 明 ( 99 % )、 新烟碱 ( 90 % ) 和可替宁 ( 99 % ) , 均购自美国 S igm a 公司 ; 其它试剂均为分析纯。 2 . 2 色谱及质谱条件 DB 5 M S ( 30 m 0 . 25 mm 0 . 25 m ) 毛细管柱 (美国 J& W 公司 ); 进样 口温度 230 ; 氢火焰离子化检测器温 度 300 ; 载 气 为 H e , 恒 流 模式 , 流速 1 0 mL /m in , 分流比 20 1 ; 进样量 2 L; 柱温: 起 始温度 80
仪器分析实训论文气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察
仪器分析实训论文气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察气相色谱内标法是一种常用的分析烟碱含量的方法。
这种方法通过引入已知浓度的内标物，来准确测定样品中烟碱的含量。
本文通过实验考察仪器分析实训中使用气相色谱内标法检测烟碱含量的方法学，评估其准确性和可靠性。
首先，在实验中选取了一批含有不同烟碱浓度的标准样品，通过气相色谱仪进行分析。
在分析过程中，使用了内标物苯乙酮来准确测定烟碱的含量。
首先，进行了气相色谱仪的初始设置和调试，确保仪器正常工作。
然后，用适当的方法将样品中的烟碱提取出来，并加入已知浓度的苯乙酮作为内标物。
将混合物进行稀释，并进行进样，然后使用气相色谱仪进行分析。
在实验过程中，需要对气相色谱仪进行一些参数的设置和调整。
首先，确定气相色谱仪的柱型和流动相等参数，以确保样品中的烟碱和苯乙酮能够被完全分离和检测。
其次，确定气相色谱仪的检测器参数，以确保能够准确测定样品中的烟碱和苯乙酮的峰面积。
最后，进行气相色谱仪的方法验证，检查方法的准确性和可靠性。
实验结果显示，使用气相色谱内标法可以准确测定烟碱的含量。
在实验中，通过浓度已知的标准样品进行了校准曲线的建立，得到了烟碱峰面积和浓度之间的线性关系。
根据校准曲线，对待测样品进行了定量分析，得到了样品中烟碱的含量。
本文还对气相色谱内标法进行了准确性和可靠性的评估。
通过多次重复实验，对样品中烟碱的含量进行了测定，并计算了结果的相对标准偏差。
实验结果表明，气相色谱内标法具有较高的准确性和可靠性。
综上所述，本文通过对仪器分析实训中使用气相色谱内标法检测烟碱含量的方法学进行考察，评估了其准确性和可靠性。
实验结果表明，这种方法可以准确测定烟碱的含量，并具有较高的准确性和可靠性。
烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法
《烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法》是一种用于测定烟草及烟草制品中烟碱含量的方法。
烟碱是烟草中最重要的成分，是引起人体癌症的罪魁祸首之一，因此，烟草及烟草制品中烟碱的检测十分重要。
烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法是烟草中烟碱含量的一种快速测定方法。
该方法是根据烟碱在不同浓度处溶于水介质时，其质量浓度和光谱性质发生变化，并且半稳定性维持一段时间这一原理进行测定的。
该方法依赖于一种被称为气相色谱仪的分析设备。
烟草及烟草制品中分离出的烟碱，通过气相色谱仪进行分析，把烟碱的物质浓度检测出来，根据色谱曲线相关参数，就可以快速准确的检测出烟草及烟草制品中的烟碱含量。
烟草及烟草制品烟碱的测定气相色谱法是一种快速精确的方法，可以用来测定烟草及烟草制品中的烟碱含量，是检测和管理烟草含量的重要手段。
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生物与化学工程学院仪器分析实训报告题目：气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察Study on the methodology investigation of detecting nicotine content byGC internal standard method专业：食品科学与工程姓名：戚效群学号：10501094002完成日期：2010-5-24气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察【摘要】烟碱(又称尼古丁)是烟叶中的主要成分。
本次试验以喹啉为内标物，烟碱为测定对象，考查及检测气相色谱法内标法测定烟碱含量的方法学。
试验中以有机溶剂萃取、填充气相色谱法测定对试验的重现性及精密度和线性关系进行进行了认真分析。
一定范围内，烟碱含量的峰高比及面积比呈现线性关系，重现性及精密度良好。
【关键词】：内标法烟碱气相色谱方法学Study on the methodology investigation of detectingnicotine content by GC internal standard methodAbstract：Nicotine (also called nicotine) is the main ingredient. Tobacco This trial as internal standard with things, -1h-qunolin-2-ones nicotine to determine object, examines and detecting gas chromatography internal standard method for determining the content of nornicotine methodology. Experiments with organic solvent extraction, filling gas chromatography was developed for the determination of the test the reproducibility and precision and linear relationship between analyzed carefully. A certain range, high ratio of nicotine content than present peak area of linear relation, reproducibility and precision is good.Keywords：Internal standard method nicotine gas chromatographymethodology目录1绪论 (5)1.1 烟碱的结构与化学性质 (5)1.2 烟碱的检测方法 (6)1.2.1 非水滴定法检测烟碱含量 (6)1.2.2 紫外线分光光度法检测烟碱含量 (6)1.2.3 水蒸气蒸馏法检测烟碱含量 (6)1.2.4 高效液相色谱法检测烟碱含量 (7)1.2.5 气相色谱法检测烟碱含量 (7)1.2.5.1 外标法检测烟碱含量 (8)1.2.5.2 归一化法检测烟碱含量 (8)1.2.5.3 内标法检测烟碱含量 (8)1.3 检测方法学考察 (9)1.3.1 线性关系的考察 (9)1.3.2 精密度的考察 (9)1.3.3 重现性实验的考察 (10)1.3.4 回收率 (10)1.3.5 验证性 (10)2 实验部分 (11)2.1 目的 (11)2.2 材料和仪器 (11)2.2.1 材料 (11)2.2.2 仪器 (11)2.3 色谱条件 (11)2.4 实验设计及结果分析 (11)2.4.1 线性关系实验的考察 (11)2.4.2 精密度实验的考察 (13)2.4.3 重现性实验的考察 (14)2.4.4 结果分析 (15)参考文献 (15)气相色谱内标法检测烟碱含量方法学考察1 绪论1.1 烟碱的结构与化学性质烟碱又名尼古丁，是一种无色至淡黄色透明油状液体，是烟草中含氮生物碱的主要成分，在烟叶中的含量为1～3%。
它能迅速溶于水及酒精中，通过口、鼻、支气管黏膜，很容易被人体吸收。
粘在皮肤表面的尼古丁，可“渗”入人体内。
香烟中的尼古丁对人的致死量是50～70毫克，相当于20～25支香烟尼古丁的含量。
如果将一支雪茄或三支香烟的尼古丁一次注入人的静脉内,3～5分钟人即可死亡。
对昆虫具有杀灭作用1.1.1烟碱的结构尼古丁1.1.2烟碱化学性质一种吡啶型生物碱，分子式C10H14N2。
俗称尼古丁（nicotine）。
存在于烟草属经济植物中。
无色挥发性液体，有刺激性臭味，熔点－79℃，沸点246.7℃(745毫米汞柱)，相对密度1.0097（20／4℃），比旋光度－169°。
可以水蒸气蒸馏。
在空气中易发生变质。
易溶于水、乙醇、乙醚、氯仿和石油醚。
烟碱能与各种无机酸（如盐酸、硫酸）和有机酸（如酒石酸、苦味酸）生成结晶的单盐和双盐，其中双苦味酸盐的熔点278℃，常用来鉴别烟碱。
烟碱与二氧化汞生成结晶形复合物，此反应可用来纯化烟碱。
1.2烟碱的检测方法1.2.1非水滴定法检测烟碱含量烟碱含量是烟草质量的重要指标，本法分别以盐酸和水为浸取剂、三氯甲烷为萃取剂、溴甲酚绿和甲基红的混合试剂为指示剂，在最佳浸取、萃取、ｐＨ值等条件下，用标准硫酸溶液直接滴定烟碱的方法。
本法准确、快速、简便。
烟草样品中,烟碱的测定方法有:有机溶剂萃取蒸馏酸碱滴定法,在强碱性介质中蒸汽蒸馏.硅钨酸沉淀重量法,另外文献亦有报导;烟草中钾的测定方法,有钾与亚硝酸钴钠生成复盐,高锰酸钾分解,草酸返滴定法;漆酚冠醚钾离子选择性电极格兰计算法等,提出用氟硼酸根离子选择性电极作为指示电极、四苯硼钠电位滴定法测烟叶中的钾与总烟碱量。
样品加入过量四苯硼钠的溶液,分别在pH=10中沉淀钾在pH=4、pH=10时沉淀烟碱与钾,过量的四苯硼钠分别用溴化十六烷基三甲基铵返滴，计算出烟碱含量。
1.2.2紫外分光光度法检测烟碱含量它是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
烟碱(又名尼古丁)是烟草特有的植物碱,它给予吸烟者感官上感觉到“劲头”而满意,所以烟碱是烟草质量的重要化学成份之一.过去我们采用经典的硅钨酸沉淀法测定,这个方法准确性虽高,但化费时间却很长,每作一个样品的测定需要30个小时,因此不能适应我国烟草工业形势发展的需要,现我们改用紫外分光光度法来测定,其原理是烟碱溶液在特定波长的紫外光源通过时,紫外光量的吸收与烟碱浓度成比例.一个样品仅需两小时就可完成测定1.2.3水蒸气蒸馏法检测烟碱含量烟碱是由两个杂环（吡啶和四氢吡咯）构成含氮碱，很容易与盐酸反应生成烟碱盐酸盐而溶于水。
此提取液加入NaOH后可使烟碱游离。
游离烟碱在左右具有一定的蒸气压，可用水蒸气蒸馏法分离提取。
水蒸气蒸馏法是将含有挥发性成分的药材与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，经冷凝分取挥发性成分的浸提方法。
该法适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、在水中稳定且难溶或不溶于水的药材成分的浸提。
水蒸气蒸馏法可分为共水蒸馏法、通水蒸气蒸馏法、水上蒸馏法。
为提高馏出液的浓度，一般需将馏出液进行重蒸馏或加盐重蒸馏。
常用设备为多能提取罐、挥发油提取罐，它在生产活动中被广泛使用。
本法的基本原理是根据道尔顿定律，相互不溶也不起化学作用的液体混合物的蒸汽总压，等于该温度下各组分饱和蒸气压（即分压）之和。
因此尽管各组分本身的沸点高于混合液的沸点，但当分压总和等于大气压时，液体混合物即开始沸腾并被蒸馏出来。
该方法具有安装操作简单、减少污染和缩短实验时间等优点。
在碱性条件下将烟草浸泡１２ｈ以上用水蒸气蒸馏法收集７００～８００ｍＬ蒸出液，即可收集到９５％以上的烟碱．分别用酸碱滴定法和紫外光谱法测定其烟碱含量。
1.2.4高效液相色谱法检测烟碱含量高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(最高输送压力可达 4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。
高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。
高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
1.2.5气相色谱法检测烟碱含量气相色谱法中有外标法、归一化法、内标法三种。
1.2.5.1外标法用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法（external standard method）。
外标法是色谱分析中的一种定量方法，它不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。
外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。
外标法操作、计算简单，无需各组分都被检出、洗脱，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。
1.2.5.2归一化法归一化是一种简化计算的方式，即将有量纲的表达式，经过变换，化为无量纲的表达式，成为纯量。
内标法 internal standard method 是色谱分析中一种比较准确的定量方法，尤其在没有标准物对照时，此方法更显其优越性。
1.2.5.3内标法内标法（internal standard method ）是色谱分析中一种比较准确的定量方法，尤其在没有标准物对照时，此方法更显其优越性。
内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子，本法是通过测量内标物及欲测组分的峰面积的相对值来进行比较的，因而由于操作条件变化而引起的误差，将同时反映在内标物及欲测组分上而得到抵消，所以可得到较准确的结果。