肉桂醇脱氢酶(CAD)检测试剂盒(肉桂酸比色法)
花生 肉桂醇脱氢酶
花生肉桂醇脱氢酶
花生肉桂醇脱羟酶（Cinnamyl alcoho1 dehydrogenases，CAD）是一种存在于植物体内的酶，它在木质素的生物合成过程中发挥着关键作用。
木质素是一种复杂的有机化合物，广泛存在于植物细胞壁中，尤其是在花生中含量较多。
肉桂醇是一种有机化合物，它可以由苯丙烷（一种存在于植物体内的碳氢化合物）通过一系列生化反应转化而来。
在这个过程中，肉桂醇脱羟酶起着至关重要的作用。
花生肉桂醇脱羟酶的功能和作用：
1. 促进木质素合成：肉桂醇脱羟酶能够催化木质素生物合成过程中的关键反应，加速木质素的形成。
2. 调节木质素结构：通过影响木质素的化学结构和空间排列，肉桂醇脱羟酶能够调节木质素的性质和功能。
3. 参与植物防御：在植物防御病原菌入侵的过程中，肉桂醇脱羟酶可能发挥着一定的作用。
在花生中，肉桂醇脱羟酶的活性和表达受到多种因素的影响，包括基因、环境因子和营养状态等。
通过对花生肉桂醇脱羟酶基因的研究，人们可以更深入地了解花生木质素生物合成的机制，为提高花生产量和品质提供理论支持。
枇杷采后果肉木质化研究进展
要的顺式作用元件 ，是位于结构基因 ５端上游区的 Ｄ Ａ序列，它能指导 Ｒ Ａ聚合酶与模板的正确结 Ｎ Ｎ 合 ，是转录调控的中心。苯丙氨酸解氨酶是苯丙烷类代谢的关键酶 ， 植物 Ｐ Ｌ活性的调控主要在转录 Ａ 水平 进行 ，并 受到 Ｐ Ｌ启 动子的 影响 Ｊ Ａ 。有 研 究表 明在 编码 Ｐ Ｌ的基 因 中 ，ＥＥ Ｐ １的表 达 与枇 杷 Ａ ｊＸ Ａ
活性 的上升 是导 致枇 杷果 肉发生 木质化 的主要原 因。
４一香豆 酸辅 酶 Ａ连 接酶 （ ４一Ｃ ）处 在苯 丙烷 类化 合物生 物代 谢总途 径 向分支 途径 的转 折 点 ，而 Ｌ
肉桂醇 脱氢 酶 （ Ａ Ｃ Ｄ）在苯 丙烷 类代 谢途径 中催 化 香豆 醛 向香 豆醇 转 化 的还 原 反应 ，是 木 质 素前体 生
福 建果树 ２ １ ０１
Ｆｕ ｉｎ Ｆ ｕ ｔ ｌ ｒｉ ａ ｓ
枇 杷 采 后 果 肉木 质 化 研 究 进 展
陈 婷 雷 羹 黄 新 忠 刘 鑫 铭
（ 建 省 农 业 科 学 院 果 树 研 究 所 ，福 建 福 州 ３０ １ ） 福 ５０ ３
枇杷属 亚热 带特色 水果 ，果 实柔 软 多汁 ，酸 甜 可 口 ，风 味 独特 ，营 养 丰 富 。由于 其 成熟 于 初夏 高 温多 雨季节 ，采 后常温 下贮 藏过 程 中易发 生软 化现 象 ，过 度 软 化常 导 致 果 实腐 烂 ¨ 。低温 贮 藏 可有 效 控制果 实腐烂 的发 生 ，但枇 杷果 实经 冷藏 后果 肉易 发生 木 质化 败 坏 ，丧 失 食用 价值 。木质 化 是 指植 物 细胞壁 内填充 木质 素 的过程 。 目前 ，已有 许多 学 者从 不 同 角度 探 讨 了枇 杷 冷藏 果实 的木 质化 问 题 。本
RP-HPLC 测定不同产地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量
RP-HPLC 测定不同产地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量马蓉蓉;唐意红;孙兆林;季宇彬;黄成钢【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2008(010)004【摘要】目的:建立不同产地肉桂中有效成分桂皮醛和肉桂酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,测定了16个产地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量.色谱柱:迪马公司DiamonsirTM(钻石)C18柱(250mm×4.6mm,5μm);检测波长:285nm;温度:20℃;流动相:乙腈-0.3%磷酸水溶液(35:65);流速:1mL·min-1.结果:建立了同时测定肉桂中桂皮醛和肉桂酸的高效液相色谱法,产自越南的肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量明显高于其他产地.结论:本法简便、快速、准确,适用于肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量测定.【总页数】3页(P9-11)【作者】马蓉蓉;唐意红;孙兆林;季宇彬;黄成钢【作者单位】哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究发展中心,黑龙江,哈尔滨,150076;中国科学院上海药物研究所,上海,201203;中国科学院上海药物研究所,上海,201203;中国科学院上海药物研究所,上海,201203;中国科学院上海药物研究所,上海,201203;中国科学院上海药物研究所,上海,201203【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.RP-HPLC法测定不同产地山茱萸在不同生长期中熊果酸含量的动态积累研究 [J], 宋梅2.RP-HPLC法测定不同产地及不同部位马蓝中六种活性成分的含量 [J], 肖春霞;杨万霞;涂江涛;苑春茂;黄烈军;胡永;段玉书;顾玮;郝小江3.六种不同产地的肉桂中桂皮醛及总挥发油的含量测定 [J], 黄青[1,2];许军[2];苏丽飞[3];杨振兴[3];董小萍[1];赵中振[2]4.HPLC法测定不同产地地骨皮中肉桂酸的含量 [J], 陈向明;孙宪臣;索有瑞5.不同产地独角莲药材中肉桂酸的含量测定 [J], 张洪娟;张妍妍;隋军;徐鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4246
微量法肉桂醇脱氢酶（CAD）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4246规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体120mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二液体×1瓶4℃保存试剂三液体25mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、提取液：内含不溶物，使用前摇匀。
2、试剂一：临用前加入5mL试剂三溶解。
可溶解后分装-20℃保存，避免反复冻融。
3、试剂二：液体置于试剂瓶内玻璃管中。
临用前加入15mL乙醇充分混匀，配好后4℃保存。
4、工作液的配制：将试剂一、试剂二、试剂三按1:1:2（V:V:V）的比例配制工作液，工作液现用现配。
产品说明：CAD是木质素生物合成途径中的关键酶之一，催化香豆醛、芥子醛以及松柏醛等生成与之相应的肉桂醇。
该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
CAD催化肉桂醛和NADPH生成肉桂醇和NADP+，在340nm下测定NADPH消耗速率，即可反映CAD活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、乙醇和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。
2、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
肉桂酸的制备 实验报告
肉桂酸的制备实验报告肉桂酸的制备实验报告引言：肉桂酸是一种常见的天然有机化合物，广泛存在于植物中。
它具有独特的香气和药用价值，被广泛应用于食品、香料、药物等领域。
本实验旨在通过合成的方法制备肉桂酸，以探索其制备过程和反应机理。
实验材料和方法：1. 材料：肉桂醛、无水乙醇、氢氧化钠、硫酸、氯化铁。
2. 仪器：反应瓶、加热器、冷却器、漏斗、烧杯、试管等。
实验步骤：1. 将肉桂醛溶解在无水乙醇中，制备肉桂醛醇溶液。
2. 在反应瓶中加入适量的氢氧化钠溶液，并将肉桂醛醇溶液缓慢滴加入反应瓶中。
3. 加热反应瓶，使反应溶液保持沸腾状态，并继续加热一段时间。
4. 将反应溶液冷却至室温，然后用醋酸酐进行酯化反应。
5. 将反应溶液中的酯化产物经过酸化处理，得到肉桂酸。
6. 通过加入氯化铁溶液，观察肉桂酸的颜色变化。
实验结果：通过上述步骤，成功合成了肉桂酸。
合成的肉桂酸呈现出浅黄色的结晶体，具有独特的香气。
在加入氯化铁溶液后，肉桂酸溶液呈现出深红色的反应，进一步证明了合成的肉桂酸的纯度和稳定性。
实验讨论：本实验采用了醇酸酯化反应的方法，通过肉桂醛和无水乙醇的反应制备肉桂酸。
氢氧化钠的加入起到了催化剂的作用，促使反应的进行。
酯化反应后，通过酸化处理得到了纯净的肉桂酸产物。
实验结论：通过本实验，成功合成了肉桂酸，并验证了合成产物的纯度和稳定性。
肉桂酸的制备过程中，醇酸酯化反应是关键步骤，氢氧化钠的加入起到了重要的催化作用。
本实验结果为肉桂酸的制备提供了一种有效的方法。
结语：肉桂酸作为一种重要的有机化合物，在食品、香料、药物等领域具有广泛的应用。
通过本实验，我们深入了解了肉桂酸的制备过程和反应机理。
通过合成实验，我们不仅学到了实验技术，还加深了对有机化合物合成的理解。
希望本实验能为相关研究和应用提供一定的参考价值。
肉桂酸检测
肉桂酸检测
肉桂酸（Cinnamic acid），又称反式肉桂酸、桂皮酸、β-苯丙烯酸，是从肉桂皮或安息香分离出的有机酸。
植物中由苯丙氨酸脱氨降解产生的苯丙烯酸。
主要用于香精香料、食品添加剂、医药工业、美容、农药、有机合成等方面。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测肉桂酸的含量变化。
对于某些有机酸，迪信泰检测平台提供GC-MS测定服务。
此外，我们还提供其他有机酸检测服务和中药成分检测服务，以满足您的不同需求。
样品制备
有机酸提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
固体有机酸样品制备方法：
1）称量约1 g的固体有机酸样品于50 mL容量瓶中；
2）加入约45 mL乙酸乙酯；
3）超声处理30 min；
4）静置过夜，加乙酸乙酯定容；
5）过滤，取25 mL滤液蒸干；
6）加甲酸溶解，定容至10 mL，之后用HPLC检测。
液体有机酸样品制备方法：
1）移去10 mL的有机酸样品于50 mL的烧杯中；
2）加入0.1 g活性炭，用玻璃棒搅拌均匀；
3）静置15 min，用滤纸过滤；
4）0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC检测。
HPLC和LC-MS测定肉桂酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 肉桂酸含量信息。
柑橘果实粒化过程中木质素生物合成与调控研究进展
柑橘果实粒化过程中木质素生物合成与调控研究进展张旭; 王小佳; 黎思辰; 董甜甜; 汪志辉【期刊名称】《《浙江农业学报》》【年(卷),期】2019(031)012【总页数】10页(P2131-2140)【关键词】柑橘; 汁胞粒化; 木质素; 关键酶; 转录因子【作者】张旭; 王小佳; 黎思辰; 董甜甜; 汪志辉【作者单位】四川农业大学园艺学院四川成都611130; 四川农业大学果蔬研究所四川成都611130【正文语种】中文【中图分类】S666柑橘果实易在成熟期和采后贮藏的过程中发生汁胞粒化现象，表现为汁胞变硬，颜色变白，风味变淡，导致果实品质严重下降，甚至丧失商品价值。
相关研究表明，在沙田柚、红肉蜜柚和伦晚脐橙的粒化汁胞中观察到明显的木质化现象，粒化汁胞中存在显著的木质素积累现象[1-2]。
利用低场核磁成像对伏令夏橙粒化汁胞进行研究发现，随着汁胞粒化程度的加剧，结合水数量增加，木质素含量与粒化程度呈显著正相关[3]。
木质素作为植物细胞壁的主要组成部分，与纤维素、半纤维素、果胶等物质交叉联接。
木质素的合成能够对植物细胞起重要的保护作用，增强植物细胞抵抗病害和逆境的能力。
但就园艺商品而言，木质素的积累会造成果实品质的下降，对园艺产业的发展是不利的。
木质素生物合成的研究已经持续了很长时间，由于其合成途径是一个非常复杂的过程，目前关于木质素生物合成的机理仍在不断探索中。
1 木质素的组成木质素是由苯丙烷单体及其衍生物聚合形成的复杂酚类聚合物，依据不同的苯丙烷单体可将木质素分为由香豆醇合成的对-羟基苯基木质素(H)、由松伯醇合成的愈创木基木质素(G)、由芥子醇合成的紫丁香基木质素(S)三种类型[4]。
不同的植物含有的木质素类型和组成比例不同，果树上的研究发现，砀山酥梨果实中主要以G、S 型木质素为主，且G/S的比值会影响木质素的降解，从而决定果实中石细胞含量[5]。
琯溪蜜柚粒化汁胞中发现木质素主要为G型木质素[6]。
杨树肉桂醇脱氢酶基因序列和表达模式分析及CAD4酶活性检测
收稿 Ｅｌ期 ：２０１１－０５ ２６ 基金项 目：国家 自然科 学基金重点项 目（ＮＳＦ３０６３００５３）、福建省科技计划重点项 目（２０１０Ｎ００１８）、北 京林 业大学新进教 师科研启动基 金项
目（２０１０ＢＬＸ０３）和 中国 博 士后 科 学基 金 项 目（２００９０４５００１５） 任珊珊 ，硕士研究生．研究方向 ：生物化学与分子生物学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｒｓｓａｓｈｌｅｙ＠１６３．ｃｏｍ 通讯作者 ：盖 颖 ，博士 ，讲师．研究方 向：生物化学与分子生物学．Ｅ ｍａｉｌ：ｇａｉｙｉｎｇ＠ｂｊｆｕｅｄｕ．ｃｎ
醇 、香 豆醇 和松 柏 醇＿２］。全 长 ＣＡＤ 基 因 ｃＤＮＡ 于 ＣＡＤ 基 因 的 ｃＤＮＡ，进 行 正 义 和 反 义 转 化 欧 洲 山
１９９５年首 次从 苜 蓿 中被 克 隆 出来 ，到 目前 为 止 ，已 杨 ×银 白杨 ［１１－１２］，结 果 发 现 ＣＡＤ 的 活 性 被 明显 抑
１ 材 料 与 方 法
ＣＡＤ可分 为 ３类 ，第 ３类存 在 于 裸子 植 物 和被
子植 物 中 ，而 第 １类 和 第 ２类 只存 在 于 被 子 植 物 １．１ ＣＡＤ基 因家族 成员 的筛 选与 鉴定
中 ｌ４］。拟 南 芥 、水 稻 和 高 粱 的 ＣＡＤ 蛋 白 中都 存 在 拟南芥家族成员信息来 自 Ｓｉｂｏｕｔ等嘲的研究 。
ｇｅｎａｓｅ，ＣＡＤ）是 参 与木质 素单 体合 成被 研究 得 较早 ＣＡＤ属 于 乙醇 脱氢 酶 超 家族 ，即具 有 ＮＡＤ结 合 蛋
豆醛 和 白和 Ｚｎ结合 位 点 。乙 醇脱 氢 酶蛋 白往 往 以二 聚体
松 柏醛 ）还 原生成 ３种 木 质 素单 体 的前 体 物 质 芥 子 形 式存 在 ［１ 。有 研 究 从 毛 果 杨 ×美 洲 黑 杨 分 离 出
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肉桂醇脱氢酶(CAD)检测试剂盒(肉桂酸比色法)
简介：
肉桂醇脱氢酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)是催化香豆醛形成松柏醇的酶。
该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
Leagene 肉桂醇脱氢酶(CAD)检测试剂盒(肉桂酸比色法)检测原理是以肉桂酸、NADP 作为底物，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法，于分光光度计检测吸光度，以吸光度变化所需酶量进行计算。
该试剂盒主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的肉桂醇脱氢酶活性，尤其适用于检测水果中肉桂醇脱氢酶活性，25T 可以检测23-24个样本。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、蒸馏水
2、研钵或匀浆器
3、离心管或试管
4、低温离心机
5、水浴锅或恒温箱
6、比色杯
7、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①植物样品：取植物组织或水果中层果肉置于液氮中迅速研磨或匀浆，加入预冷的CAD
编号
名称
TE041925T Storage
试剂(A):CAD Lysis buffer 50ml 4℃避光试剂(B):CAD Assay buffer 20ml 4℃避光试剂(C):NADP 2支
-20℃使用说明书
1份
Lysis buffer，离心，留取上清液，冻存，用于肉桂醇脱氢酶的检测。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，冻存，用于肉桂醇脱氢酶的检测。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用CAD Lysis buffer进行适当匀浆，，离心，取上清液，冻存，用于肉桂醇脱氢酶的检测。
④高活性样品：如果样品中含有较高活性的肉桂醇脱氢酶，可以使用CAD Lysis buffer稀释进行恰当的稀释。
2、配制CAD Assay buffer工作液：取1支NADP完全溶解于CAD Assay buffer，即为
CAD Assay buffer工作液。
该NADP工作液4℃保存1周，-20℃保存3个月。
3、加样：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的CAD活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
加入物(ml)对照管测定管
CAD Lysis buffer0.2－
待测样品－0.2
CAD Assay buffer工作液0.80.8
4、CAD检测：立即以分光光度计，比色杯光径1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的
吸光度(A测定0)。
准确孵育后，立即加入CAD终止液终止反应(备选方案)，以分光光度计，比色杯光径1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的吸光度(A测定1)。
注意：加入CAD终止液终止反应不是必须步骤，可准确孵育后直接以分光光度计，比色杯光径
1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的吸光度(A测定1)。
计算：
CAD活性单位的定义：在该实验条件下，每1min吸光度变化所需酶量为一个活性单位。
组织样本CAD(U)={(A测定1-A测定0)×V T}/(W×V S×0.01×t)
式中：A测定1=孵育10min后测定管的吸光度值
A测定0=加入CAD Assay buffer工作液后立即测定的测定管吸光度值
W=组织样本的重量(g)
V T=提取酶液的总体积(ml)
V S=测定时所用酶液体积(ml)
液体样本CAD(U)=(A测定1-A测定0)/(0.01×t)
式中：A测定1=准确孵育10min后测定管的吸光度值
A测定0=加入CAD Assay buffer工作液后立即测定的测定管吸光度值
t=反应时间
注意事项：
1、待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
2、CAD酶液提取时，注意低温操作，防止酶活性，亦可-20℃保存。
3、CAD终止液具有一定腐蚀性，请小心操作。
4、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定。
每次检测指标不宜过多，否则
操作时间不一，有可能导致样本间的差异。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CM0004LB培养基
DC0032Masson三色染色液
DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)
NR0001DEPC处理水(0.1%)
PS0013RIPA裂解液(强)
TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。