IBA浓度与培养基对黄芩不定根生物量和总黄酮含量的影响

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黄芩的质量分析

黄芩的质量分析

黄芩的质量分析黄芩被称为中草药中的“不可多得的宝贝”,它的质量是影响用药效果的重要因素,因此质量分析是黄芩的重要研究内容。

黄芩的质量分析:1.分分析。

黄芩的成分包括:黄酮类、芳香类、多糖类、杀菌活性物质、金属及其他有机物。

它们是黄芩药效及药力的主要成分,要求黄芩的成分在各个组分中必须保持合理的比例,以保证其功效。

2.泽分析。

黄芩是一种植物,它的质量分析要通过色泽分析来确定黄芩植物的品种、新鲜程度及品质。

一般来说,新鲜的黄芩药材色泽黄绿相间,外观干燥,粒大、肥厚、柔软、伸条,具有明显的香气和清香。

3.分分析。

黄芩药材的水分含量是黄芩药效及药力的重要指标之一,它可以反映药材是新鲜的还是保存时间长的。

一般来说,新鲜的黄芩药材水分含量需要在15%以下,太高的水分含量将会影响黄芩的功效,因此要求质量的黄芩药材的水分含量一定要控制在15%以下。

4.质类分析。

杂质类分析是检查黄芩药材中杂质的指标。

一般来说,黄芩药材的杂质有外来物质、变质物质、腐朽物质等,这些杂质会影响黄芩的效力,可能对人体健康造成危害。

因此,要求黄芩药材中杂质的含量不得超过0.01%。

5.生物分析。

微生物分析可以帮助我们检测黄芩药材中的有害微生物,例如大肠杆菌、链霉菌、霉菌等,以确定黄芩药材是否安全可用。

要求黄芩药材中的有害微生物必须在国家规定的标准范围之内,以确保黄芩的质量。

6.金属分析。

重金属分析是检查黄芩药材中的重金属的指标,例如铅、镉、铜、汞等,它们是污染物,会严重影响黄芩的功效,甚至对人体健康造成危害。

因此,要求黄芩药材的重金属含量必须低于国家规定的标准,以确保黄芩的质量。

综上所述,黄芩的质量分析包括成分分析、色泽分析、水分分析、杂质分析、微生物分析和重金属分析等研究内容。

质量分析可以帮助我们检查黄芩药材的各项指标,以确保其功效及质量的可靠性,为人们提供安全有效的药物。

黄芩根系中黄酮类成分测定与综合利用研究

黄芩根系中黄酮类成分测定与综合利用研究

he t oo r t s t o c k nd a ma n i r o o t , he t c o n t e n t s o f b a i c a l e n i i n d i f e r e n t p a r t s we e r s i mi l a r . Co n c l u s i o n : Th e r e we e r d i f e en r t
A S t u d y o n Co mp r e he n s i v e Ut i l i z a t i o n a n d t h e De t e r mi n a t i o n o f Fl a v o n o i d s
i nRo o t S y s t e m o f Hu a n g Q i n
i n Hu a n g Q i n , me ha t n o l a n d 0 1 %p h o s p h o n c a c i d a s mo b i l e p h a s e , a n d g r a d i e n t e l u t i o n wa s p e r f o me r d . R e s u l t s : 1 1 1 e
C H E NY u j u a n , S U NY u 1 P h a r m a c e u t i c a l D e p a r t me n t , S e c o n d P r o v i n c i a l P e o p l e 5 Ho s p i t a l o fG a n s u , L a mh o u 7 3 O O 3 O , C h i n o ,
p e r c e n t a g e s o f he t c o n t e n t s o f l f a v o n o i d s c o n ai t n e d n i r o o t s t o c k , ma n i oo r t , r o o t l e t a n d h a i r oo r t we r e 4 . 2 6 %一 7 . 2 0 %。

培养基成分对彭泽贝母愈伤组织增殖及生物碱含量的影响

培养基成分对彭泽贝母愈伤组织增殖及生物碱含量的影响

培养基成分对彭泽贝母愈伤组织增殖及生物碱含量的影响(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)【摘要】目的研究MS培养基中大量元素、微量元素对彭泽贝母愈伤组织生长及生物碱含量的影响,筛选有利于彭泽贝母愈伤组织生长和生物碱积累的培养基配方。

方法采用正交和单因素实验设计,以生长40 d的彭泽贝母愈伤组织的生长率和生物碱含量为指标,评价各因素对其影响的大小。

结果各因素对彭泽贝母愈伤组织生长影响大小依次为PCaKN,对生物碱积累影响大小依次为KNCaP;培养基中NO3-N含量较高时,有利于生物碱的积累;微量元素缺乏时均有利于彭泽贝母愈伤组织的生长,缺Cu、缺I时不利于生物碱的积累。

结论有利于彭泽贝母愈伤组织生长和生物碱积累的最佳组合分别为:N3P1K3Ca2、N1P2K3Ca1;培养基中大量元素、微量元素对彭泽贝母愈伤组织生长及生物碱含量存在一定影响。

【关键词】彭泽贝母愈伤组织生长量生物碱Abstract:ObjectiveTo study the effect of large elements, trace elements of MS culture medium on the growth and alkaloidcontent of Fritillaria monantha Migo callus ,and to select the culture medium which is advantageous in its growth and alkaloid accumulation.MethodsWith the growth rate and alkaloid content of the 40 days’callus as indexes, single-factor and orthogonal experimental design was conducted to evaluate the impact of various factors.ResultsThe effect of various factors on the growth of the callus is PCaKN ,and on the alkaloids was KNCaP; the alkaloid content was higher when the proportion of NO3-N was higher than NH+4-N;Lacing trace elements were all advantageous in growth of the callus,but lacing I and Cu were not helpful to the accumulation of alkaloids. ConclusionThe best combination of the various factors for the growth and the accumulation of alkaloids of the callus respectively is: N3P1K3Ca2、N1 P2 K3Ca1;large elements, trace elements of MS culture medium have effects on the growth and alkaloid content of Fritillaria monantha Migo callus.Key words:Fritillaria monantha Migo; Callus; Alkaloids ; Growth江西彭泽贝母Fritillaria monantha Migo主产于江西北部的彭泽、湖口、都昌、九江、瑞昌、修水等县,已被确定为国产贝母属植物在江西的新分布,彭泽贝母作川贝母使用已有多年的历史,现代药理学研究表明,彭泽贝母的药理、药效接近甚至优于几种常用贝母。

培养基成分和培养条件对黄芪愈伤组织中黄芪皂苷积累的影响

培养基成分和培养条件对黄芪愈伤组织中黄芪皂苷积累的影响

培养基成分和培养条件对黄芪愈伤组织中黄芪皂苷积累的影响张宗申;王子茜【摘要】对提高黄芪愈伤组织中黄芪皂苷含量的人工调节技术进行了研究.生长在6,7-V基本培养基上的黄芪愈伤组织中黄芪皂苷含量比MS培养基上的高,而且光照比黑暗更有利于黄芪皂苷合成.调整6,7-V培养基中氨态氮和硝态碳的比例为1∶1(氮源总浓度为60mmol·L-1)、KH2PO4浓度为1.5mmol·L-1、CaCl2浓度为8.97mmol·L-1时比较适合黄芪皂苷的积累.以蔗糖为碳源比葡萄糖和麦芽糖更有利于皂苷的积累.通过调节培养基成分和培养条件是改变黄芪细胞中黄芪皂苷积累趋势的一个重要手段.【期刊名称】《大连工业大学学报》【年(卷),期】2009(028)003【总页数】4页(P174-177)【关键词】膜荚黄芪;愈伤组织;黄芪皂苷【作者】张宗申;王子茜【作者单位】大连工业大学,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连工业大学,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034【正文语种】中文【中图分类】TS972.161;R282.710 引言黄芪是豆科黄芪属植物,全世界约2 000多种,而我国有278种、2 亚种35 变种2变型,分布于南北各省区[1]。

现代医学研究表明,黄芪中的有效成分是皂苷、黄酮和多糖类物质,具有抗炎、镇痛、抗血栓形成、抗衰老、抗病毒、抗风湿、抗肝纤维化等多种药理作用[2-3]。

历史上黄芪以野生为主,但由于长期过度采挖,致使野生黄芪资源几近枯竭,不能满足医药市场日益增长的需求[4]。

利用植物组织培养技术生产黄芪次级代谢产物是解决目前供需矛盾的有效途径之一。

目前,对黄芪组织培养的研究主要集中在愈伤组织诱导、器官发生和利用毛状根培养系统提高其次生代谢产物的产量等方面。

陈刚等[5]通过组织培养的手段从草木樨状黄芪无菌苗茎段诱导出愈伤组织进而诱导出丛生芽,并发育成苗。

胡之璧等[6]建立了由发根农杆菌感染膜荚黄芪叶片外植体形成的毛状根培养系统并得到了较多的活性成分。

黄芩植株体内黄芩苷积累规律及其影响因素研究进展

黄芩植株体内黄芩苷积累规律及其影响因素研究进展

中华中医药学刊黄芩植株体内黄芩苷积累规律及其影响因素研究进展张永清1,张春凤2,李佳1(1.山东中医药大学药学院,山东济南250355;2.中国药科大学中药学院,江苏南京210009)摘要:对近20年来有关黄芩植株体内黄芩苷合成与积累规律方面的研究进行了总结与综述。

结果显示:黄芩植株根、茎、叶等器官均含有黄芩苷,以根部含量最高;在黄芩植株不同的个体发育阶段,其体内的黄芩苷含量按一定规律发生着变化,表现在于不同的时间采收时其黄芩苷含量不同;栽培周期、产地、肥料等因素对黄芩植株体内黄芩苷的含量均有影响。

最后指出了现有研究存在的问题。

关键词:黄芩;黄芩苷;积累规律中图分类号:R282.71文献标识码:A文章编号:1673-7717(2009)05-0914-03Re sea r c h P r ogre sse s on Ba i c a li n Ac cum u l a ti o n i n Scu t e ll a ri a eBa i c a l e ns is G e org i.a nd Its Aff e c ti n g Fa c torsZ HANG Yo ng2qing1,Z HANG Chun2feng2,LI Jia1(1.College of Phar macy,Sh andong Un i versity of Ch i neseM ed i ci n e,J in'an250014,Shandong,China;2.Co ll ege of Ph ar m acy,Ch i na Phar m aceuti calUn i versit y,Nan ji ng210009,J i angsu,Ch i n a)Abs tra c t:The syntheti c and accumu l a ti ng dy na m ics of baica li n i n S cutellar i ne ba ica lensis Georg.i was su mma rized i n t h i s paper.Ba icali n distri buted i n roots,wh i ch conta i ned t he h i ghest ba ica li n co n tents,ste m and l eaves,accord i ng to t he lite rature i n recent20years.Its contents changed i n regu l ar pattern alo ngw ith deve l op i ng phase,sho w i ng ba icali n contents differed with harvesti ng ti m e.Gro w i ng perio d,producing area,f e rtiliza ti on affec ted baicali n content i n Scutella riae ba2 ica lensis Georg.i.The proble m existed no w was a lso ra ised i n t h is paper.Ke y w ords:Scutella ria e ba ica lensis Georg;i ba i ca li n;accu m ulati ng dyna m i cs收稿日期:2008-12-19基金项目:山东省农业良种工程重大课题(2005LZ08);山东省科技发展计划自主创新重大专项课题(2006GG1109078)作者简介:张永清(1962-),男,山东平邑人,教授,博士研究生导师,研究方向:中药材质量控制。

IBA浓度对草莓组培苗生根的影响

IBA浓度对草莓组培苗生根的影响

IBA浓度对草莓组培苗生根的影响作者:陈淑君来源:《农家科技下旬刊》2019年第02期摘要:吲哚丁酸(IBA)是植物体内天然存在的一种生长素,为提高草莓组培苗的生根率和生根质量,本试验探讨了IBA不同浓度对草莓组培苗生根过程的影响,从而筛选出有利于草莓生根的浓度。

本试验以草莓佐贺清香的组培苗为材料,采用MS基本培养基分别与不同浓度的IBA(0.0 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L)配组为生根培养基。

结果表明,在草莓组培苗的生根过程中,IBA对苗的生根量有促进作用,同时它又抑制根长的生长,使组培苗的根短而整齐,试验中0.04 mg/L IBA对草莓苗的生根效率最高。

关键词:草莓;组织培养;IBA;生根草莓(Fragaia ananassa Duchesne),蔷薇科(Rosaceae),草莓属(Fragaria)。

广东省地处亚热带地区,冬春气候非常有利于浅休眠草莓品种生长,可露地栽培,与北方的大棚保温栽培相比,既节约了成本又降低了病虫害的发生,而且可以和水稻、玉米、秋菜等轮作、间作、套种,产量高,经济效益显著,栽培草莓有独特优势。

目前,在很多地区,主要靠匍匐茎进行无性繁殖,导致体内病毒积累逐年增加,病毒病发生严重,感染了病毒的草莓生长缓慢、叶皱缩、果子变小、畸形、品质差,一般减产30%~80%,并逐年加重,目前最好的防治措施是使用脱毒苗。

利用草莓微茎尖( 0.2~0.5 mm)脱毒结合组织培养快繁技术培育出的草莓组培苗,可部分或全部脱除病毒,使品种的优良性状得以保持,产量提高。

组织培养繁殖的优势在于繁殖速度快,占地少,更主要的是可进行脱去病毒处理。

本试验用MS基本培养基,添加不同浓度的IBA(0.0 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L)配组为生根培养基,研究IBA浓度对草莓组培苗生根的影响,筛选合适的生根培养基,为草莓苗大规模生产奠定技术基础。

一、材料和方法1.试验设计选取佐贺清香的组培苗为试材,采用MS基本培养基,添加不同浓度的IBA。

IBA对棉花组培苗生根的影响

IBA对棉花组培苗生根的影响
均达 到极 显著 性 水 准 , 因此 选 取 密 度 每 公 顷 2 2 0 6 5 株 , 纯 氮量 K > K > K , 明 第 三水 平 最 优 , 施 。 。 说 经 显 著 性 测 验 , 水 平 间 均 达 到 极 显 著 性 水 准 , 此 三 因
选 取 施 纯 氮 量 每 公 顷 3 0 k 化 控 量 K3 K1 0 g; > >
品种审 定委 员会 审 定 , 0 6年 列 入 湖 北 省 主推 品 20
种 。 为 了探 索 该 品 种 的 高 产 栽 培 技 术 措 施 , 该 品 为 种 的 推 广 应 用 提 供 依 据 , 0 4年 对 鄂 杂 棉 1 20 2进 行 了 高产 栽 培 技 术 的 研 究 。 1试 验 方 法 试验 在 黄 冈 市 农 科 院梅 家墩 试 验 基 地 进 行 。 前 茬 为 白 菜 型 油 菜 。4 月 2 日收 获 。 土 壤 为 冲 积 7
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为 了提 高 再 生苗 的移 栽 成
活 率 , 时 减 少 嫁 接 方 面 的 过 同
而 I A 对根 毛 的影 响除 了在 0 3mg・ 中 有一 B . I 个 突 然 的下 降 外 , 随着 I A 含量 的增 加而增 加 。 B 2 2 B 与不 同棉 花品种 组 培苗生 根 的关系 由轰 . A I
著, 是影 响鄂 杂棉 1 2产 量的 主要 因素 , 节胺 用量 缩
对 鄂 杂棉 1 2产 量 作 用 不 显 著 。 再 从 三 因 素 的 K 值 看 : 度 因 素 的 K > K > K。 说 明 第 二 水 平 最 优 , 密 z ,
经显 著性测 验 , 第二 水 平 与 第 一 水 平 、 第三 水 平 间
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不同外源激素对黄芩无菌短枝组织培养的影响

不同外源激素对黄芩无菌短枝组织培养的影响
近年来 , 学 者对 黄芩 的药 理作 用做 了大 量 的研究 , 发 现 黄芩 的有 效成 分有 抗 氧化作 用 、 抗 感 染作 用 、 调节
1 . 1 . 3 仪器 人工气候箱 Q H X - 2 5 0 B S - 3 ( 上海新 苗医疗器械制造有限公 司 ) 、 立式压力蒸汽灭菌锅 L D Z X 一 5 0 K B S ( 上海 申安医疗 器械厂 ) 、 超净工作 台 s w— c 卜I F D( 苏州 净 化 设 备 有 限 公 司 ) 、 分 析 天 平
( 兰州太 宝制 药有 限公 司 , 甘肃
兰州
7 3 0 0 5 0 )
摘要: 以1 / 2 MS培养 基 为基本 培养 基 , 添加 不 同质量 浓 度 的萘 乙酸 ( N A A) 、 吲哚 乙酸 ( I A A) 、 吲哚 丁酸
( I B A ) 配制成不 同的培养基, 然后将 带一个腋 芽的黄芩短枝接种到培养基上 , 统计不 同质量浓度的激素对黄
理接种 4瓶。
1 . 2 . 2 外植 体 的 消毒 将剪 下 的黄 芩 短枝 用 流水 冲洗 4 0~ 5 0 m i n , 然后 在超 净工作 台上 用 2 %次 氯 酸 钠溶液浸 泡 1 0 mi n后 , 用无菌水 冲洗 3~ 5次 , 待用 。 1 . 2 . 3 外植 体 的接 种 将 已消 毒 的外 植 体 置 于无
X B 2 2 4 ( 上海精 科 天 美 科 学仪 器 有 限公 司 ) 、 海 尔 电 冰箱 B C D一 2 1 6 Y H( 青 岛海 尔 股 份 有 限公 司 ) 、 电子
作用 、 抗肿瘤作用等 , 因而对于人体延缓衰老 、 变态 反 应性 疾病 及 恶性 肿瘤有 广 泛 的应 用前 景 j 。
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IBA浓度与培养基对黄芩不定根生物量和总黄酮含量的影响摘要:为了筛选适宜黄芩不定根生长的培养基和IBA 浓度,研究了2种培养基B5、MS以及不同浓度IBA对不定根生长和总黄酮积累的影响。

结果表明,B5+1.0 mg/L IBA为最适培养基,此时黄芩不定根生长状态良好、健壮,生物量较多,并且总黄酮含量最高,达到2.49 mg/g,明显高于其他处理。

关键词:黄芩;不定根;IBA浓度;培养基;总黄酮中图分类号:S567.23+9.043 文献标志码:A文章编号:1002-1302(2015)04-0065-02收稿日期:2014-05-23基金项目:吉林省科技项目(编号:201115228)。

作者简介:田海丽(1990―),女,陕西宝鸡人,硕士研究生,主要从事植物生物技术研究。

E-mail:tianhaili123@。

通信作者:吴松权,博士,副教授,硕士生导师,主要从事植物种质研究。

Tel:(0433)2435633;E-mail:arswsq@。

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)为唇形科黄芩属多年生草本植物,别称山茶根、黄金茶,始载于《神农本草经》,被列为中品[1]。

黄芩以根入药,其味苦性寒,有清热除湿、泻火解毒、止血安胎、镇静抗炎的功效[2-3]。

黄酮类化合物是黄芩的有效成分,具有较强的抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗HIV、清除自由基等作用,并且其毒性小,不易产生耐药性,生物安全性高[4-8]。

这些特点使得黄芩的应用和开发越来越受到国内外医学界的关注,需求量随之急剧增加,致使野生黄芩被大量采挖,野生资源遭到了严重破坏,而黄芩在栽培过程中往往出现品质下降、农药残留等问题,市场供求矛盾日益尖锐。

不定根培养是一种植物器官培养方法,近年来正成为获取特定次生代谢产物的有效手段之一,具有生长周期短、可人为控制生长条件、重复性强等优点[9]。

在目前的药用植物不定根研究中,研究得较为透彻的是人参,如韩国在研究人参不定根培养方面取得了重大成就,已达到了工业化生产程度;我国科研人员也相继对丹参、太子参、三七、红豆杉、甘草、柴胡、苍术、白术、东北刺人参、黄芪进行了研究[10]。

但是目前还未发现利用黄芩不定根进行次生代谢的研究,因此本试验以黄芩为材料诱导不定根,研究B5、MS培养基与不同IBA浓度的组合对不定根增殖的影响,以期通过测定生物量、总黄酮含量,优化出最适宜的培养基与IBA激素浓度,为利用黄芩不定根规模化生产黄酮类化合物提供理论依据。

1 材料与方法1.1 材料和仪器黄芩种子采集于吉林省延边朝鲜族自治州安图县。

标准品芸香苷购自上海融禾医药科技发展有限公司;试验中所用到的其他试剂均为分析纯。

主要仪器为UV-3100紫外-可见分光光度计。

1.2 试验方法1.2.1 黄芩不定根诱导选取籽粒饱满的黄芩种子播种,待苗长至6 cm时,选取根部,先用自来水冲洗2 h,再分别用75%乙醇漂洗45 s、无菌水漂洗3次、0.1%氯化汞消毒 6 min、无菌水漂洗6次后切成1 cm×1 cm的外植体,接种于B5+2.0 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂、pH值为5.8的培养基上,于(25±1)℃暗培养,诱导不定根。

1.2.2 培养基及激素浓度组合的筛选培养基为MS、B5,添加不同浓度的IBA(0、1、2、3、4、5 mg/L),培养基中其他成分同诱导培养基。

在(25±1)℃条件下暗培养7周,60 ℃烘干后称其干质量,即为生物量。

1.2.3 总黄酮测定(1)对照品溶液的制备:精确称取1 mg芸香苷标准品,置于10 mL容量瓶中,先加30%乙醇溶解,再定容至10 mL,混匀后配制成标准溶液。

(2)标准曲线的绘制:精确量取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL对照品溶液,分别置于10 mL容量瓶中,加30%乙醇至5 mL,再分别加入0.3 mL 5%亚硝酸钠,混匀,静置6 min;加入0.3 mL 10%硝酸铝溶液,混匀,静置6 min;加入2.0 mL 1 mol/L的氢氧化钠溶液,再分别用30%乙醇定容至10 mL,静置15 min,在510 nm 波长处测定其吸光度D510 nm。

以吸光度D510 nm为纵坐标、标准溶液浓度为横坐标绘制标准曲线,y=11.8929x+0077 6,r2=0998 2。

(3)样品溶液制备:称取100 mg烘干至恒质量的黄芩不定根,在液氮中充分研磨,加入1 mL 无水乙醇充分混匀,振荡暗提取24 h,12 000 r/min离心10 min,收集上清液置于1 mL容量瓶备用。

(4)样品总黄酮的测定:精确量取0.3 mL 样品,以取样0 mL为空白对照,按照标准曲线的制备步骤的“加入30%乙醇至5 mL”起,至“分别测其吸光度”,从标准曲线上读出样品溶液中总黄酮的含量。

1.2.4 统计分析使用SPSS 19.0进行数据统计分析。

2 结果与分析2.1 培养基与IBA浓度对不定根生长的影响由表1可以看出,在B5、MS培养基中,不定根的生长能力不同,且2种培养基之间存在显著性差异,B5培养基显著优于MS培养基,不定根在B5培养基中生长旺盛、分化多、白嫩、生长状态良好、老化速度慢,而在MS培养基中不定根生长缓慢、分化少、易老化,且生物量少。

从激素浓度看,IBA促进了黄芩不定根生长,B5培养基与IBA组合促进了黄芩不定根的生物量积累,显著高于MS培养基与IBA组合;并且随着IBA浓度的提高,不定根上的愈伤组织也随之增多,当IBA浓度为1.0 mg/L时,不定根生长旺盛、分化多、根长、基本无愈伤组织,生物量较大,达0.628 g;当IBA浓度为4.0 mg/L时,生物量积累最大达0.641 g,但是此时不定根分化较少,且根长度较短,愈伤组织较多;当IBA浓度为5.0 mg/L 时,生物量有所减少,这可能与激素浓度过高有关。

表1 培养基与IBA浓度对黄芩不定根生物量的影响培养基类型不同IBA浓度的不定根生物量(g)0 mg/L 1.0 mg/L 2.0 mg/L 3.0 mg/L 4.0 mg/L 5.0 mg/LB5 0.168j 0.628b 0.526d 0.612c 0.641a 0.436eMS 0.128k 0.284g 0.242h 0.176i 0.304f 0.244h注:表中数据后标有不同小写字母代表在0.05水平下差异显著。

表2同。

2.2 培养基与IBA浓度对黄芩培养基不定根总黄酮含量的影响由表2可以看出,IBA对黄芩不定根总黄酮的累积有促进作用,添加IBA后不定根的总黄酮量明显高于对照组,虽然MS培养基与IBA组合对总黄酮含量促进作用明显高于B5培养基与IBA组合,但是B5培养基中不定根的生物量显著高于MS培养基(表1),因此认为B5培养基更利于总黄酮的累积。

IBA浓度为1.0 mg/L时,总黄酮含量最高,且与其他处理之间存在显著性差异;当IBA浓度为3.0 mg/L时,B5培养基总黄酮含量与对照无显著性差异,而MS培养基与对照之间存在显著性差异。

因此可以认为,选择适当的IBA浓度才能增加黄芩不定根总黄酮的含量;万贵香等研究也表明,适宜的外源激素才能促进黄芩愈伤组织中黄芩苷的积累[11]。

表2 培养基和IBA浓度对黄芩不定根总黄酮含量的影响培养基类型不同IBA浓度的总黄酮含量(mg/g)0 mg/L 1.0 mg/L 2.0 mg/L 3.0 mg/L 4.0 mg/L 5.0 mg/LB5 1.54bcd 2.49a 1.54bcd 1.34cd 2.11ab 1.79abcdMS 0.59e 2.03abc 1.57bcd 1.39bcd 1.06de 1.97abc注同表1。

3 结论由研究结果可以看出,无论是B5还是MS培养基,在供试IBA浓度范围内黄芩不定根生物量与总黄酮的累积都存在2个高峰。

第1个高峰期为1.0 mg/L IBA,这可能是低浓度的IBA促进了不定根的生长与黄酮类物质的积累;随着IBA浓度增加,对其促进作用减小并逐渐形成激素胁迫使生物量与总黄酮减少;之后随着IBA浓度进一步增加,不定根响应激素胁迫而逐渐适应了较高的IBA浓度,出现了第2个高峰期,在B5培养基生物量和总黄酮最高时期为4.0 mg/L处理,而MS 培养基中生物量最高时期为4.0 mg/L处理,总黄酮最高时期为5.0 mg/L处理。

可见黄芩不定根在不同培养基中应对高浓度外源激素胁迫的能力是有不同的,总体可见,B5培养基中IBA浓度为1.0 mg/L时,总黄酮含量最高,达2.49 mg/g。

B5培养基和MS培养基主要区别在于培养基的铵态氮与硝态氮比值的差异,B5培养基铵态氮与硝态氮比值是MS培养基的1/6,铵态氮含量远低于MS培养基,从而使硝态氮更利于不定根生长及总黄酮积累,这也可能是B5培养基优于MS培养基的原因。

Cui等研究发现,氮源类型影响不定根生长及次生代谢产物积累,硝态氮更利于不定根的生长[12]。

本试验表明,黄芩不定根在B5培养基中生长状态良好,而且B5培养基生物量显著高于MS培养基,使B5培养基总黄酮积累显著高于MS培养基,推测是由于氮源类型的差异引起的,这还需要进一步的试验鉴定。

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