用Elisa试剂盒检测人血清血浆中VEGF血管内皮生长因子的浓度
人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书【试剂盒名称】人血管内皮细胞生长因子（VEGF）定量检测试剂盒（ELISA）【试剂盒用途】定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。
将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子（VEGF））多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中人血管内皮细胞生长因子（VEGF））含量。
【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL2 标准品：1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL4 标准品稀释液6mL10 说明书1份5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张6 酶标试剂6mL12 密封袋1个备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：1600、800、400、200、100、50pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
人血管内皮生长因子受体VEGFR酶联免疫分析ELISA
人血管内皮生长因子受体(VEGFR)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中血管内皮生长因子受体(VEGFR)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平。
用纯化的人血管内皮生长因子受体(VEGFR)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血管内皮生长因子受体(VEGFR)，再与HRP标记的血管内皮生长因子受体(VEGFR)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血管内皮生长因子受体(VEGFR)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血管内皮生长因子受体(VEGFR)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书
产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒（Human VEGF ELISA KIT）产品货号：H6139S, H6139M, H6139L产品规格：24T, 48T, 96T产品内容：注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存，有效期见外包装。
开封后，保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白，基因定位于第6号染色体长臂，由8个外显子和7个内含子交替构成，约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同，产生了单链分别含121，145，165，183，189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa，是可溶性分泌型蛋白质，以游离状态存在，不能与肝素结合；VEGF 165分子量为45 kDa，30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质，其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌，心肌，肝细胞，成骨细胞，中性粒细胞，巨噬细胞，角质形成细胞，血小板，褐色脂肪组织，CD34+细胞，星形细胞，神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF，由于血小板可释放VEGF，因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
医学统计学期末考试模拟题(三)
《医学统计学》期末模拟考试题（三）一．是非题（每题1分，共20分）1．评价某人的某项指标是否正常，所用的范围是。
（）2．配对资料若用成组t检验处理，就降低了统计效率。
（）3．因为两类错误的存在，所以不能凭假设检验的结果下结论。
（）4．随机区组设计的区组变异和误差两部分相当于完全随机设计方差分析的组内变异。
（）5．抗体滴度资料经对数转换后可做方差分析，若方差分析得P<0.05，则可认为实测数据的各总体算术均数不全相等。
（）6．五个百分率的差别的假设检验，＞，可认为各组总体率都不相同。
（）4．在两样本均数比较的Z检验中，若Z≥Z0.05，则在α=0.05水平上可认为两总体均数不等。
（）5．在t检验中，若拒绝H，P值越小，则说明两总体均数差别越大。
（）6．对三个地区血型构成（A、B、O、AB型），作抽样调查后比较，若有一个理论频数小于5大于1且n＞40，必须作校正检验。
（）7．如果两个变量的变动方向一致，同时呈上升或下降趋势，则二者是正相关关系。
（）8．Ⅱ期临床试验是指采用随机盲法对照实验，评价新药的有效性及安全性，推荐临床给药剂量。
（）9．临床试验中，为了避免人为主观因素的影响，保证结果的真实性，通常不让受试者及其家属知道他参与这项试验。
（）10．假定变量X与Y的相关系数r1是0.8，P1<0.05；变量M与N的相关系数r2为－0.9，P2<0.05，则X与Y的相关密切程度较高。
与Y的相关系数r1是0.8，P1<0.05；变量M与N的相关系数r2为－0.9，P2<0.05，则X与Y的相关密切程度较高。
（）11．临床试验必须符合《赫尔辛基宣言》和国际医学科学组织委员会颁布的《人体生物医学研究国际道德指南》的道德原则。
（）12．当直线相关系数r＝0时，说明变量之间不存在任何相关关系。
＝0时，说明变量之间不存在任何相关关系。
（）13．偏回归系数表示在除Xi 以外的自变量固定不变的条件下，Xi每改变一个单位的平均变化。
ELISA样本准备及实验步骤
ELISA的标本准备在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用。
对于隔天再检测的标本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。
标本应避免反复冻融。
液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
尿液：用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照此实行。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
ELISA实验步骤工作原理（以VEGF ELISA Kit为例）血管内皮细胞生长因子（VEGF）是最重要的血管生长因子之一。
二个亚单位由二硫键连接，组成分子量46-48KDa的糖蛋白质。
血浆内皮素,血管内皮生长因子水平在糖尿病肾病患者治疗前后变化意义
血浆内皮素,血管内皮生长因子水平在糖尿病肾病患者治疗前后变化的意义【摘要】目的：探讨了糖尿病肾病患者治疗前后血浆内皮素和血管内皮生长因子水平的变化和意义。
方法：分别应用放免法和elisa 法对69例糖尿病患者进行了血浆 et和vegf水平测定，并与35名健康人作比较。
结果：在治疗前血浆et和vegf水平非常显著的的高于正常人组（p<0.01），经治疗后3个月，血et和vegf水平明显降低，但与正常人比较仍有显著性差异（p<0.05）。
结论：检测糖尿病肾病患者血浆et和vegf水平对了解病情，观察疗效，与病情的发生和发展密切相关。
【关键词】糖尿病肾病；血浆内皮素；血管内皮生长因子plasma endothelim,vascular endothelial growth factor levels before and after treatment in patient with diabetic nephropathywang xinjunthe people,s hospital of minquan county,henan 【abstract】objective：to explore the changes of plasma endothelim(et) and vascular endothelial growthfactor(vegf)levels before and after treatment in patients with diabetic nephropathy and their clinical signmificance.methods:blood was tested for levels of et(with ria)and vegf(with elisa)in all the patients both before andafter treatment in 69 patients as wellas normalcontrols.results: before of treatment in plasma et and vgef levels were significantly higher than those in normal controls（p<0.01）,after treatment in three months,plasma et and vegf levels weresignificantly( p<0.05）.conclusions:detection opf plasma et and vegf levels of ideal for evaluton of treatment effect and great clinical important values in patients with diabetic nephropathy.【key word】diabetic nephropathy,endothelim(et), vascular endothelial growth factor(vegf)糖尿病肾病为糖尿病微血管病变并发症，其发病机理目前尚无十分明确，许多因素参与了糖尿病肾病的发展过程。
血管内表皮生长因子检测原理
血管内表皮生长因子检测原理英文回答：The detection principle of vascular endothelial growth factor (VEGF) involves measuring the levels of this important growth factor in the blood. VEGF is a proteinthat plays a crucial role in the formation of new blood vessels, a process known as angiogenesis.There are several methods for detecting VEGF in the blood, with the most common being enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In ELISA, a specific antibody that binds to VEGF is coated onto a plate. Then, the blood sample is added, and if VEGF is present, it will bind to the antibody. A second antibody linked to an enzyme is then added, and a substrate for the enzyme is added, resultingin a color change that indicates the presence and amount of VEGF in the sample.Another method for detecting VEGF is through the use ofa protein microarray. This technique involves spotting tiny amounts of VEGF-specific antibodies onto a chip, which can then be exposed to the blood sample. If VEGF is present, it will bind to the antibodies on the chip, and this binding can be detected using fluorescent or chemiluminescent signals.In summary, the detection of VEGF in the blood involves using specific antibodies to capture and measure the levels of this important growth factor. These methods are crucial for understanding the role of VEGF in various diseases and for monitoring the response to VEGF-targeted therapies.中文回答：血管内皮生长因子（VEGF）的检测原理涉及测量血液中这一重要生长因子的水平。
vegf检测评价指标
vegf检测评价指标Vascular Endothelial Growth Factor（血管内皮生长因子）简称VEGF，是一种在血管形成和维护过程中起主要作用的分子。
VEGF通过在血管内皮细胞上结合VEGF受体来促进新血管形成，并且参与多种疾病的发生和进展。
为了评估VEGF的作用和相关疾病的发生风险，VEGF检测成为研究人员广泛使用的评价指标。
目前，VEGF检测技术已经得到了不断的改进，主要包括ELISA法、荧光定量PCR法、免疫组织化学法以及免疫荧光法等多种方法。
其中，ELISA法具有灵敏而高效的特点，被广泛用于定量分析疾病患者血浆和组织中的VEGF水平。
荧光定量PCR法因其准确和快速，成为了常用的测定VEGF mRNA表达水平的方法。
免疫组织化学和免疫荧光法可用于检测VEGF蛋白的表达，同时也能够确定蛋白在哪些组织和细胞类型中表达。
此外，研究人员还采用荧光分析技术、生物传感器技术等先进技术，不断推进VEGF检测技术的研究与应用。
在疾病的诊断和治疗中，VEGF成为了一个重要的生物标志物。
例如，在肿瘤学上，目前许多疗法已经将VEGF作为肿瘤治疗的关键目标，如抑制VEGF等有望成为治疗肿瘤的一种新途径。
在人类的动脉粥样硬化中，VEGF也被证明对新血管形成和斑块稳定起重要作用。
研究表明，通过VEGF检测技术可以提高对此类疾病的诊断和治疗的准确性和效果。
总之，VEGF检测技术已成为检测疾病和评估治疗效果的重要手段，它在目前的实际应用中已经得到了证实。
最新研究也为我们提供了更好的VEGF检测方法和途径，愿将来的VEGF检测技术在更多的疾病中为人类的健康保驾护航。
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用Elisa试剂盒检测人血清血浆中VEGF血管内皮生长因子的
浓度
引言
VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor，血管内皮生长因子) 是一种重要的
血管生成调节因子，在多种生理和病理状态下发挥着重要的作用。
测定血清血浆中VEGF的浓度可以为许多疾病的诊断和治疗提供有价值的参考依据。
本文将介绍如
何使用Elisa试剂盒来定量检测人血清血浆中VEGF的浓度。
实验准备
材料
1.试剂盒：Elisa试剂盒 (VEGF检测)
2.样本：人血清血浆样本
3.校准曲线标准品：不同浓度的VEGF标准品
仪器和设备
1.Elisa酶标仪
2.微量移液器和相应的移液枪尖
3.微量离心机
实验步骤
1.将试剂盒中的标准品取出并溶解。
2.准备一系列不同浓度的标准品，包括0 pg/mL，10 pg/mL，20
pg/mL，50 pg/mL，100 pg/mL，200 pg/mL和400 pg/mL。
标准品的浓度
根据试剂盒的说明书进行稀释。
3.将标准品和待测样本加入已涂有VEGF抗体的微孔板中。
4.混合孔板中的标准品和样本，并在37°C的恒温孵育箱中孵育一段时
间。
5.将孵育后的孔板倒置，用洗涤缓冲液洗涤孔板，去除未结合的物质。
6.加入带有酶标记的VEGF抗体，并在37°C的恒温孵育箱中孵育一段
时间。
7.再次倒置孔板并洗涤，去除未结合的物质。
8.加入底物溶液，并在室温下孵育一段时间。
9.加入停止液，停止反应。
10.使用Elisa酶标仪测量各孔的吸光度。
11.利用标准曲线，根据各孔的吸光度读数来计算出样本中VEGF的浓度。
数据分析
根据测得的吸光度读数，通过标准曲线可以计算出待测样本中VEGF的浓度。
将各样本的浓度数据进行统计分析，计算出平均值和标准差，以及样本之间的相关性。
通过使用Elisa试剂盒，我们可以方便、快速地检测人血清血浆中VEGF的浓度。
这对于疾病的诊断和治疗提供了有价值的参考依据，同时也为相关生物学研究提供了重要的数据支持。
参考文献
1.Santos CD, et al. ELISA: The state of the art[J]. Applied Microbiology
and Biotechnology, 2006, 72(2): 315-330.
2.Muhl L, et al. ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the
detection of VEGF[J]. In: Nyström AM, Varani L, editors. Vascularization for
tissue engineering and regenerative medicine. Cham: Springer, 2017. p. 177-184.。