动物组织标本制作技术及注意事项
动物标本的制作技术

动物标本的制作技术一、动物浸制标本的制作浸制标本是采用保存液来防腐的标本。
如果保存得好,这种标本可以长期保存下去。
它能清晰地显示生物体的外部形态和内部构造,还能长期保持生物体的原来色泽。
脊椎动物标本的制作1.防腐动物整体标本浸制时,保存液不易渗入,时间一长,内脏容易腐败,要注入保存液防腐。
可用注射器套上针头,插入草蜥的头部、胸部和腹部,各注入少量10%福尔马林。
2.整形浸制标本的固定十分重要,要细心地从头部一直做到尾部,不能遗漏。
固定时解剖板或解剖蜡盘。
将注射过防腐剂的草蜥,背部朝上平放在解剖板上,头颈下面衬垫一团棉絮,使头部仰抬。
如果要使口张开,可在口内塞入一团棉絮。
将前肢、后肢、躯干和尾部按生态摆好,用大头针固定指、趾和尾,如果标本瓶短,可将尾巴弯曲。
草蜥的尾容易断,如果尾部断脱,可以用细竹丝插入,连接断尾,再整理姿态。
用毛笔蘸40%福尔马林,在蜥蜴皮肤上涂遍两次。
1小时以后,草蜥标本的前后肢的指,趾和尾尖部已经定形硬化,拔去大头针,取下浸在10%福尔马林里。
10%福尔马林用作过渡浸液,可以浸掉草蜥体内的黄液,以免正式上瓶时污染浸液。
标本要浸1~3个月,中间换新液3~4次,直到浸液不再发黄为止。
3.装瓶从10%的浸液中取出蜥蜴,用针穿好白丝线,在蜥蜴的胸部靠近前肢处和腹部靠近后肢处各穿过一条白线,将线缚在玻璃片上,在玻璃片的边缘上打结,尾部也可绑扎一条白线,使整个标本缚扎于玻璃片上,然后制做玻璃片的垫角,安装于玻璃片上,再装入已洗刷干净的标本瓶中。
将标本装入瓶后再加入保存液,盖好瓶盖。
瓶中的保存液不宜装得过满,液面不能接触瓶盖。
取树脂胶或蜡,用毛笔蘸着填入瓶盖与瓶身的缝隙处,直到填平为止,然后,在瓶身贴上标签。
保存浸制标本不宜放在阳光直射的地方,以防瓶口封蜡溶化,浸液挥发。
也不宜放置在零度以下的地方保存,防止浸液冰冻,玻璃破裂。
在搬动时,不能剧烈震动,且要放置平直,以免翻倒。
二、动物剥制标本的制作方法动物剥制标本的制作是指脊椎动物而言,也就是说脊椎动物的大部分种类都可以制成剥制标本,但在实际应用中,主要适用于哺乳类和鸟类,以及一些不宜采用浸制方法的其它各纲的大型种类,如鲸、鲨鱼、海龟等。
动物标本的制作方法

动物标本的制作方法1. 概述动物标本是保存动物身体结构和形态特征的一种方式,有助于研究和教学。
制作动物标本需要经过一系列步骤,包括采集、制备、处理和保藏等过程。
2. 采集2.1 选择合适的动物选择具有代表性的动物进行标本制作,可以根据研究或教学需要选择不同种类的动物。
2.2 采集工具准备好适当的采集工具,如手套、剪刀、镊子、塑料袋等。
确保工具干净,并避免对野生动物造成伤害。
2.3 预防措施在采集过程中,要注意个人安全和环境保护。
遵守相关法律法规,尊重自然保护区规定。
2.4 采集方法•对于较小的动物,可以使用剪刀或镊子将其放入塑料袋中。
•对于较大的动物,可以使用剪刀在适当位置进行切割,并用塑料袋包裹。
•尽量保持动物完整,并避免对其造成损伤。
2.5 采集记录对于每个标本,应记录采集地点、日期、采集者等信息,并在标本上附上相应标签。
3. 制备3.1 清洗将采集得到的动物标本进行清洗,去除附着在表面的泥土、沙粒和其他杂质。
可以使用温水和中性洗涤剂轻轻擦洗,注意不要对动物造成损伤。
3.2 骨骼制备如果需要制作骨骼标本,可以选择将动物进行骨骼制备。
将动物放置在通风良好的地方晾干,以去除大部分软组织。
使用小刀或剪刀将软组织彻底清除。
将骨骼进行漂白处理,使其颜色更加均匀。
3.3 标本整理根据需要,对动物进行适当的整理。
可以调整动物身体的姿势、展开翅膀或四肢,并使用线或针固定。
4. 处理4.1 防腐处理为了保持标本的完整性和持久性,需要进行防腐处理。
常用的方法包括乙醛浸泡、乙酸铅浸泡或甲醛喷洒等。
注意使用防护措施,避免直接接触防腐剂。
4.2 干燥处理将标本进行适当的干燥处理,以避免腐败和霉变。
可以使用干燥剂、风扇或低温干燥箱等方法进行干燥。
4.3 彩色处理(可选)如果需要制作彩色标本,可以使用染色剂或颜料对动物进行染色处理。
注意选择适合动物材质的染料,并遵循使用说明。
5. 保藏5.1 存放容器选择合适的存放容器,如玻璃瓶、塑料容器或密封袋等。
动物标本制作总结

动物标本制作总结一、简介动物标本指的是经过特殊处理制作成为具有展示和保存价值的动物模型或动物骨骼的物品。
制作动物标本需要经历多个步骤,包括采集、剥制皮毛、处理骨骼以及装饰等。
本文将总结动物标本制作的基本步骤和注意事项。
二、采集和剥制皮毛1. 采集采集动物的过程需要遵循相关法律和规定,并且尽量选择已死亡的动物进行采集。
一般来说,采集时需要保证动物完整性,避免造成明显的损伤。
2. 剥制皮毛剥制皮毛是制作动物标本的重要步骤。
在剥制皮毛之前,需要先进行解剖和去内脏等处理。
剥制皮毛时要仔细操作,保持动物皮毛的完整性,最大程度地避免划破皮毛。
三、处理骨骼处理骨骼是制作动物标本的重要环节。
主要包括以下步骤: ### 1. 去肉和脂肪去除骨骼上的肉和脂肪是制作标本的首要任务。
可以使用酶溶解法或者放射法进行去肉和脱脂处理。
2. 漂白处理后的骨骼需要进行漂白处理。
漂白可使用含氯漂白剂进行,但要注意浓度的控制,避免骨骼腐蚀。
3. 硬化和固定为了更好地保持骨骼的形状和结构,可以使用硬化剂进行处理。
硬化剂可以帮助骨骼保持坚硬并防止腐蚀。
4. 整理处理完骨骼后,需要仔细整理骨骼,确保其各个部分的位置正确、完整。
可以使用特殊工具进行整理,如小刷子和镊子。
四、装饰装饰是制作动物标本的最后一步,可以增添标本的观赏价值。
在装饰过程中,需要注意以下几点: ### 1. 选择合适的展示材料选择合适的展示材料可以更好地展示标本的特征。
常见的装饰材料包括木制底座、石头底座以及透明树脂。
2. 定位和固定在装饰过程中需要将标本固定在底座上,并保持合适的展示角度。
可以使用铜丝、胶水或者螺丝等固定标本。
3. 清洁和保护装饰完成后,需要对标本进行清洁和保护,防止灰尘和湿气对其造成损害。
可以使用软刷或者吹风机进行清洁,同时可以涂抹保护漆进行保护。
五、注意事项制作动物标本需要注意以下几点: - 遵守采集和制作标本的相关法律法规; - 仔细操作,避免对动物造成二次伤害; - 进行标本处理时要注意安全,避免接触有毒物质; - 在处理骨骼时要保持骨骼的完整性,避免过度处理; - 在装饰过程中要注意使用合适的装饰材料,保证标本的观赏价值; - 定期清洁和保养标本,延长其使用寿命。
动植物标本的制作与保存技术

动植物标本的制作与保存技术动植物标本是研究生物多样性、系统分类学等领域的重要工具。
制作一个完美的标本需要注意许多细节,这篇文章将介绍动植物标本制作技术与保存技巧。
一、动物标本的制作1.1 杀死和保存动物在动物标本制作之前,需要杀死和保存动物。
杀死动物的方法因动物种类和目的而异。
在无痛杀死动物的过程中,最好避免对动物造成痛苦和创口,以免标本受损。
保存动物的方法包括冰冻、浸泡在无水酒精中或采取其他特殊的保护方法。
1.2 清洗和制作标本动物标本的清洗和制作是关键步骤。
首先,用镊子或刷子将皮肤和羽毛小心地剥离,并清洗内部器官。
然后,将标本塞满吸水性材料,如纸胶带或纸巾。
最后,将标本放置于恰当的容器中,加入适当的控制湿度和环境温度的保护剂。
1.3 补充和修饰最后,对标本进行补充和修饰,通过一些手法,使标本更加饱满和自然。
这些手法包括使用毛髓进行缝合、修补骨骼缺失和润色等。
二、植物标本的制作2.1 采集和保存植物采集植物标本的最佳季节通常是在鲜花盛开之前。
在采集时,应尽量保持植物的完整性和生长习性。
将植物放入一个防水袋中,并尽快将植物放入保存植物的流体中,常用的流体包括70%的酒精、乙醇和甲醛等,这类流体可以避免植物的腐烂和病变。
2.2 加工和制作标本植物标本的加工和制作需要经过一系列工序,包括解剖、烘干和保护处理。
首先,将植物通过解剖刀切成片,然后用高温烘箱将植物烘干至干燥的状态。
最后,将植物贴在专门的标本纸上并标注信息,用标本皮打包好即可保存。
2.3 修饰和保管最后,对于精致的植物标本,可以通过修饰和加工使其更加精美和自然。
标本应保存在封闭的柜子内,并避免阳光直射和潮湿环境。
三、标本的保护和管理标本保护和管理也是标本制作的重要环节。
标本应存储在恰当环境中,保持干燥、静止和防虫。
对于大型标本,应选择大型柜子或抽屉,并用防潮剂和杀虫剂进行处理。
标本也应按照名称、时间、位置等方式,建立专门库房进行管理和维护。
重要 动物组织切片制作技术

脂无作用,渗透力较弱,很少单独使用,固定后
收缩明显,用含苦味酸的固定液固定组织一般不
宜超过24小时。
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(5)重铬酸钾:其穿透速度快,对组织收缩小并
稍有膨胀,重铬酸钾常备水溶液为3-5%。其混合 固定液,如Zenker液、Helly液及Regaud液等被 广泛用于组织学,凡经重铬酸钾、铬酸、铬酸盐 固定的组织,必须以流水冲洗后方能转入脱水剂。
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(四)、固定液
1、固定液种类:一类是单纯固定液,即只有一种
试剂;另一类是混合固定液,由两种或两种以上试
剂组成。 作为较好的固定液,应有下列特性,首先,有 强渗透力,能迅速的渗入组织内部;其次,不使组 织过渡收缩或膨胀,并能使组织内欲观察的成分得 以凝固为不溶性物质;最后,能使组织达到一定的 硬度并获得较佳的折光率和对某些染料具有较强的
一般厚度约 5mm 的实质性器官,总的浸蜡时间约 2-
3h,均在恒温箱内进行。较理想的的浸蜡温度是石
蜡刚溶化的温度,或在蜡杯底部尚残留一小部分未 熔完蜡时的温度,浸蜡完成后,即做成包有组织的 蜡块。包埋蜡块的器材有专用的包埋框,也有自己 制作的包埋盒,只要是具有一定形状的容器,我们
都可以把它用作包埋盒。包埋的具体过程详述。
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4、使组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程 中不易损坏。 5、使不同组织成分对染料有不同的亲和力,经 染色处理后易于辨认。 6、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态 结构。
7、使组织块硬化,便于制作薄片。
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(三)、注意事项及影响固定的因素
1、组织块不易过大,一般以厚度5mm,长宽不超过
15×15mm。 2、固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜。 3、必须选择渗透力强,又不使组织过渡收缩或膨 胀的试剂作为固定液。 4、有的固定剂是由氧化剂与还原剂混合而成,如 甲醛(还原剂)与重铬酸钾(氧化剂)混合成的 Helly液等。
动物组织标本制作技术

动物组织标本制作技术动物组织标本制作技术是一项重要且常用的生物学实验技术,它可以有效地保存动物组织的结构和形态,为科学研究和教学提供了重要的参考材料。
本文将介绍动物组织标本制作的基本步骤以及相关的注意事项。
一、动物组织标本制作的基本步骤1. 动物标本的收集:首先需要选择合适的动物标本进行采集,可以选择已死亡的动物标本,也可以通过活体组织切片的方式进行制作。
在采集过程中需要注意保持标本的完整性,避免损坏或变形。
2. 组织固定:采集到的动物标本需要进行组织固定,以保持组织的结构和形态。
常用的组织固定剂有福尔马林、乙醛等,根据实验需要选择适当的固定剂进行处理。
3. 组织切片:固定后的动物组织需要进行切片,以便观察组织的细胞结构和形态。
切片的厚度一般为5-10微米,可以使用专用的切片刀或者切片机进行切割。
4. 切片染色:切片完成后,需要进行染色处理,以使组织结构更加清晰可见。
常用的染色方法有血液染色、组织染色等,可以选择适当的染色方法根据实验的需要。
5. 覆盖玻片:染色完成后,需要将切片放置在玻片上,并在上方加上透明的覆盖玻片。
覆盖玻片的目的是保护切片,防止切片脱落或受到污染。
6. 标本保存:制作完成的动物组织标本需要进行保存,以便长期保存和使用。
标本可以保存在特制的盛放容器中,也可以进行冷冻保存或者石蜡包埋保存。
二、动物组织标本制作的注意事项1. 样本选择:选择合适的动物标本对于制作高质量的组织标本非常重要。
标本的选择应尽量保持完整无损、结构清晰、形态规整,以有利于后期的观察和分析。
2. 组织固定剂的选择:不同的固定剂会对组织产生不同的影响,因此需要根据实验的需要选择合适的固定剂。
固定剂浓度和固定时间也需要进行合理的控制,避免过度固定导致组织结构的改变。
3. 切片技术的掌握:切片技术对于制作高质量的组织标本至关重要。
切片时需要注意切割均匀、厚度一致,避免切片过厚或过薄,以免影响观察结果。
4. 染色方法的选择:染色方法可以增强组织标本的对比度和清晰度,但染色过程中也需要注意方法的选择和操作的规范性,避免染色不均匀或染色剂超出时间导致结果不准确。
制作动物标本的方法

制作动物标本的方法以制作动物标本的方法为标题,下面将详细介绍制作动物标本的步骤和技巧。
一、准备工作制作动物标本的第一步是进行准备工作。
首先要选择合适的动物标本,可以选择已经死亡的动物,也可以选择自然死亡或者经过人工处理的动物。
此外,还需要准备一些工具和材料,如手套、刀具、防腐剂、填充物等。
二、剥皮剥皮是制作动物标本的重要步骤之一。
首先,需要将动物的身体彻底清洗干净,去除掉表面的污垢和血液。
然后,用刀具小心地从动物的腹部或背部开始,将皮肤剥离下来。
在剥皮的过程中要注意保持皮肤的完整性,避免造成损伤。
三、清洗与消毒剥离下来的皮肤需要进行清洗和消毒处理,以去除残留的血液和细菌。
可以用温水和肥皂进行清洗,然后用消毒液进行消毒处理。
清洗和消毒的目的是保证标本的干净与卫生。
四、防腐处理防腐处理是制作动物标本的关键步骤之一。
在清洗和消毒完成后,需要将动物的皮肤浸泡在防腐液中,使其充分吸收。
防腐液可以选择一些常见的防腐剂,如甲醛、甲酸等。
浸泡的时间可以根据动物的大小和厚度来确定,一般需要几天至几个星期。
五、填充与塑形在防腐处理完成后,需要对动物进行填充与塑形。
首先,需要选择合适的填充物,如棉花、泡沫塑料等,将其填充到动物的体内,使其保持自然的形态。
然后,用细线将动物的四肢和头部固定在正确的位置上,使其达到最佳展示效果。
六、干燥与修整填充和塑形完成后,动物标本需要进行干燥与修整。
将标本放置在通风干燥的地方,让其自然风干。
干燥的时间会根据动物的大小和湿度而有所不同,一般需要几天至几个星期。
在干燥的过程中,可以适当调整动物的形态,使其更加自然和美观。
七、固定与存储动物标本干燥后,需要进行固定与存储。
可以使用一些特殊的固定剂,如树脂或胶水,将动物的各个部分固定在一起,以确保标本的稳定性和耐久性。
然后,将标本放置在干燥通风的地方,放置在适当的容器中,以防止湿气和昆虫侵蚀。
八、展示与保养制作完成的动物标本可以进行展示和保养。
动物标本制作

动物标本制作1. 引言动物标本制作是一种将动物身体进行保存和展示的技术手段。
通过将动物身体处理成干燥、稳定的形式,可以使其在长期展示过程中不受腐烂和变形的影响。
动物标本制作是生物学、动物学研究中重要的一环,也是自然历史博物馆中不可或缺的组成部分。
本文将介绍动物标本制作的一般过程、材料和工具,以及制作过程中需要注意的事项。
2. 动物标本制作材料和工具2.1 材料在进行动物标本制作时,我们需要准备以下材料:•动物标本:选择新鲜且完整的动物尸体,最好是刚死亡或者是保存得很好的动物尸体。
•防腐剂:用于防止尸体腐烂和变形的化学物质。
•缓冲剂:用于调节动物尸体的酸碱度,保持组织结构的完整性。
2.2 工具在进行动物标本制作时,需要使用以下工具:•启齿钳:用于打开动物的口腔。
•剃刀和手术剪:用于割开和修整动物尸体。
•钢针和线:用于缝合和稳定动物尸体。
•活塞泵:用于注入防腐剂和缓冲剂。
3. 动物标本制作步骤3.1 清洗和消毒首先,将动物尸体彻底清洗干净,去除附着在皮肤和毛发上的污垢和细菌。
然后,用消毒液对尸体进行消毒处理,以防止细菌滋生。
3.2 剥皮和剖腹使用启齿钳打开动物的口腔,然后将剃刀切开皮肤沿中线,剖开动物的腹部。
注意需要小心操作,以免损坏内部器官。
3.3 剥离内脏将动物的内脏逐个剥离,并清洗干净。
内脏的处理需要非常谨慎,并注意保持各个器官的完整性。
3.4 防腐处理将已经清洗干净的动物尸体浸泡在防腐剂中,使其充分吸收。
防腐剂的选择应根据动物的大小和类型来确定。
3.5 干燥和定型将浸泡在防腐剂中的动物尸体放置在通风良好的地方,让其自然干燥。
在干燥的过程中,可以使用针和线将动物表皮进行固定,以保持其形态。
3.6 缓冲处理在动物尸体完全干燥后,可以将其浸泡在缓冲剂中进行调节酸碱度的处理。
这一步骤可以帮助保持动物的组织结构的完整性。
3.7 修整和整理最后,对动物标本进行进一步的修整和整理。
修整包括修剪毛发、修复损坏的部分等。
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动物组织标本制作技术
第一章:取材及固定
一、动物致死法
1、麻醉法
第二章可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或有盖玻璃瓶内进行麻醉;也可用4%戊巴比妥作静脉注射,剂量按动物体重1ml/kg;或用20%氨基甲酸乙脂作腹腔注射,剂量一般按动物体重5ml/kg。
2、空气栓塞法
如家兔可用50ml注射器将空气由耳静脉推入,使动物很快死亡。
3、击头法
如大、小鼠,可用重物击头后部或将其头后部猛撞桌沿,最好一击而死。
4、断头法
青蛙、小鼠等小动物,可用剪刀剪去其头部,较大动物如兔子等,可用斧头迅速砍头致死。
5、股动脉放血法
动物经吸入乙醚或氯仿稍麻醉后,立即切开股动脉放血。
注意:上述各法,应根据制片需要选用,如空气栓塞法不宜用作血管注射标本的制作;乙醚麻醉对丘脑下神经部分泌物染色标本不利;股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。
二、取材注意事项
1、材料新鲜
最好是动物心脏还在跳动时取材,立即投入固定液内,脏器的上皮组织最易变质,应争取在死后半小时内处理完毕。
2、组织块力求小而薄
组织块的厚度以不超过5毫米为宜,较理想的厚度为2毫米左右,主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。
3、勿使组织块受挤压
切取组织块时刀剪要锋利,不要来回挫动,夹取组织时切勿猛压,取材时组织块可稍大,以便固定后修块。
4、尽量保持组织的原有形态
新鲜组织经固定后,或多或少产生收缩现象,为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
5、要熟悉取材部位
要能准确的按解剖部位取材,如胰腺,一般取胰岛较多的胰腺尾部;肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。
6、动物品种的选择
如观察肥大细胞,以大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片为佳,欲观察运动终板,可用小鼠的肋间肌等。
7、选好组织块的切面
熟悉某些器官组织成分安排,然后决定其切面的走向;如一长管状器官以横切面较好。
8、保持材料的清洁
组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用生理盐水冲洗,然后再入固定液,但要注意防止组织损伤。
9、切除不需要的部分
特别是组织周围的脂肪等,应尽可能清除掉,否则给固定、脱水、浸蜡、切片等带来一些不必要的问题。
三、组织固定法
(一)、固定的方法
1、小块组织固定法:从人体和动物取下的小块组织,立即置入液态固定剂中进行固定,这是应用最广泛最经常的方法。
2、注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部或需要对整个脏器或整个动物进行固定。
这时宜采用注射固定法,将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。
3、蒸汽固定法:比较细小而薄的标本,可用锇酸或甲醛蒸汽固定。
主要用于血液或细胞涂片以及某些薄膜组织的固定。
(二)、固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞的死后变化,防止自溶与腐败,使之尽量保持生前的状态与结构。
2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质,以保持其原有状态。
3、使组织内各种物质成分产生不同的折光率,以便染色后易于鉴别和观察。
4、使组织块在脱水、包埋、切片、染色等过程中不易损坏。
5、使不同组织成分对染料有不同的亲和力,经染色处理后易于辨认。
6、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有形态结构。
7、使组织块硬化,便于制作薄片。
(三)、注意事项及影响固定的因素
1、组织块不易过大,一般以厚度5mm,长宽不超过15×15mm。
2、固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜。
3、必须选择渗透力强,又不使组织过渡收缩或膨胀的试剂作为固定液。
4、有的固定剂是由氧化剂与还原剂混合而成,如甲醛(还原剂)与重铬酸钾(氧化剂)混合成的Helly液等。
5、固定时间的长短视固定剂的不同要求而定,也与气温、组织块的大小有关。
温度高时则时间缩短,组织块过大则应延长固定时间。
6、软组织或较大组织可先经2-3小时固定后再修整成小块重新投入新配制的固定液内继续固定。
7、特殊要求的组织,常需要特殊的固定液,所以,取组织之前应做好准备。
如各种神经组织因显示内容不同,需不同的固定液与固定方法。
(四)、固定液
1、固定液种类:一类是单纯固定液,即只有一种试剂;另一类是混合固定液,由两种或两种以上试剂组成。
作为较好的固定液,应有下列特性,首先,有强渗透力,能迅速的渗入组织内部;其次,不使组织过渡收缩或膨胀,并能使组织内欲观察的成分得以凝固为不溶性物质;最后,能使组织达到一定的硬度并获得较佳的折光率和对某些染料具有较强的亲和力。
2、单纯固定液
(1)酒精:既是配制混合固定液的基本成分,又可作为单纯固定液使用。
用于固定时以80%-95%浓度为好。
缺点是经酒精固定的组织容易变硬,对组织收缩较大。
(2)甲醛水溶液:常用的甲醛水溶液即市售的福尔马林,常用浓度为10%,指以10ml的商品甲醛(37%-40%甲醛水溶液)加入90ml水配成的,此液实际上只有4%的甲醛。
(3)醋酸:亦名乙酸,能与酒精、水、氯仿等多种试剂混合,故为许多混合固定液成分之一,其穿透速度很快,固定小组织仅1h即可,对组织和细胞有膨胀作用,且不能凝固细胞质中的蛋白质,一般与引起收缩的固定液一起使用,以达到平衡目的。
(4)苦味酸:苦味酸能沉淀蛋白质,对脂肪、类脂无作用,渗透力较弱,很少单独使用,固定后收缩明显,用含苦味酸的固定液固定组织一般不宜超过24小时。
(5)重铬酸钾:其穿透速度快,对组织收缩小并稍有膨胀,重铬酸钾常备水溶液为3-5%。
其混合固定液,如Zenker 液、Helly液及Regaud液等被广泛用于组织学,凡经重铬酸钾、铬酸、铬酸盐固定的组织,必须以流水冲洗后方能转入脱水剂。
(6)锇酸:锇酸一般只用于某些特殊染色或电镜切片染色或固定,配制时要用洗涤干净的玻塞棕色瓶,最好用双蒸水配制,锇酸穿透力弱,且易使组织硬脆,因此它固定的组织必须小而薄,体积最好在3×3×2mm以内。
(7)铬酸:铬酸能沉淀蛋白质,适用于核蛋白的固定,并能增强核的染色能力,穿透速度慢,一般组织块的固定,需经12-24h,硬化程度中等,收缩显著,除用作固定液外,万分之一的铬酸水溶液,可制作分离标本。
(8)丙酮:丙酮能使蛋白质沉淀,渗透力强,但对核固定欠佳,且使组织剧烈收缩。
广泛用于组织化学中酶的固定,其作用基本与酒精相同。
(9)三氯醋酸:作用与醋酸相似,很少单独使用,在混合固定液中对组织起膨胀作用。
3、常用混合固定液
(1)Bouin液:饱和苦味酸水溶液:75ml;甲醛水溶液(40%):25ml;冰醋酸:5ml。
三者在配方中的实际比例为1:5:15,为实验室常用固定剂,其渗透力强,对组织固定均匀且收缩较小,染色效果好。
冰醋酸固定染色质,苦味酸使组织适当硬化,甲醛水溶液调节两种试剂对组织的膨胀作用。
其固定时间以12-24h为宜。
(2)Carnoy液:冰醋酸一份,氯仿三份,无水酒精六份。
此液浸透速度快,固定时间不宜过长,小块组织2-3小时即可,固定后直接入无水酒精脱水。
常用于糖原及尼氏体固定。
一般固定时须放在冰箱中,低温环境可明显减少收缩作用。
(3)中性甲醛液:最常用的固定液之一,配方:40%甲醛120ml,蒸馏水880ml,磷酸二氢钠4g,磷酸氢二钠13g,pH7.0。
(4)中性缓冲甲醛液:为免疫组织化学最常用的固定液。
固定时间24h为宜,配方:40%甲醛10ml,0.01mol/LpH7.4的PBS90ml。