乙型溶血性链球菌使用说明
乙型溶血性链球菌的脉冲场凝胶电泳分型研究
引起“ 。脉冲场凝胶 电泳（ Ｆ Ｅ 是传染 ＤＮ 分 子 量标 准为 Ｂｏ ａ ｓ公 司的 ｍＬ０５ Ｔ Ｅ缓冲液的电泳槽中电泳 。 ＰＧ ） Ａ ｉ ｂ Ｌ ． Ｂ ￣ 电
ｍｂ ａＬａ ｄ ｒＰ Ｍ ｒｅ 。 病流行病学调查的有力工具， 在霍乱、 伤 Ｌａ ｄ ｄ ｅ ＦＧ ａ ｋ ｒ
泳参 数 ： 电压 ６Ｖ ｃ 电泳 时 间 ｌ ， ／ｍ， ８ｈ 脉 冲 参 数 ４～ ４ Ｓ电场 夹 角 １０ 。 ， ０， ２ （） 电泳
寒及 痢疾 等 传 染病 的调查 中得 到广 泛应 １ Ｐ Ｇ 实验 方 法 ． ＥＥ ２ 用 ， 渐形 成一 套标准 化 、 已逐 可重 复、 分辨 １ ． 原位全基 因组 ＤＮ ．１ ２ Ａ凝胶制备
细 菌基 因组 Ｄ ＮＡ 经 Ｓ Ｉ限制 性 ｍａ
养 ，２份标本分 离菌株经分离纯化后应 为 Ａ群 乙型溶血性链球菌 。 １ ． 主要仪器 ．２ １
用模具梳子将胶块直接取出， 投入 内切酶 酶切后 ， 通过 Ｐ ＧＥ ２株乙型溶 Ｆ ，
ｍｍｏ Ｌ Ｅ Ｔ ＋ ％十 二烷 基 肌 胺 酸 钠 ， 子量 大 小 一 致 ， ｌ Ｄ Ａ １ ／ 片段 为 ２ ０～ ３ ０ｋ （ ０ ｂ 见 图 １ 。应 用 Ｑ ａｔｙｏ ｅ 分析 软 件 对 ） ｕ ｎ ｔ ｎＴ ｉ Ｍ
【 关键 词】 乙型 溶 血性 链 球 菌 ； 脉冲 场 凝 胶 电泳 ； 分型
Ｐ ＧＥ具有 很强 的菌株分辨能力 ， Ｆ 可用 于乙型溶血
性链球菌的同源性分析， 为猩红热爆发疫情提供分子流行病学依据。 【 中图分类号】 Ｒ ７ ． ２ 【 ３ ８１ 文献标志码】 Ａ ＋ 【 文章编号】 １７ ．８０２ １）２０ ８ ．２ ６ １０ ０ （０ ００ ．１９０
A组乙型溶血性链球菌感染90例临床分析
中国抗生素杂志2019年5月第44卷第5期.591 .文章编号：1001-8689(2019)05-0591 -04A 组乙型溶血性链球菌感染90例临床分析陈阳 朱紫瑶章婉徐志伟**收稿日期：2018-04-27作者简介：陈阳，男，生于1992年，在读硕士研究生，主要研究方向为感染医学，E-mail: 1974004098@*通讯作者，E-mail: 823534368@(温州医科大学附属第二医院，第二临床医学院，温州325000)摘要：目的 分析总结A 组乙型溶血性链球菌(group A Streptococcus pyogens, GAS)感染患者的临床特点以提高诊疗水平。
方法收集温州医科大学附属第二医院自2005-2016年收住的90例证实为GAS 感染患者的临床资料并进行统计分析。
结果GAS 感染在儿童中最常见的疾病表现为扁桃体炎(3&0%),成人中则为局部皮肤软组织感染(72.7%)。
实验室指标，C 反应蛋白(CRP)、白细胞(WBC)、降钙素原(PCT)、抗链球菌溶血素O(ASO)可有所升高。
目前GAS 对常用抗菌药物仍较敏感。
预后89例治愈后出院，1例死亡病例。
结论 GAS 感染在儿童中以学龄期常见，在成人中以中年期常见。
GAS 感染患者在合理使用抗菌药物 后，预后良好，少有危重症感染发生。
关键词：A 组乙型溶血性链球菌；感染；临床特点中图分类号：R97&1文献标志码：AAnalysis of 90 cases' clinical manifestation of group A Streptococcus pyogensinfectionsChen Yang, Zhu Zi-yao, Zhang Wan and Xu Zhi-wei(The Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University Second Clinical Medical School, Wenzhou 325000)Abstract Objective To analyse the clinical features in patients with Group A Streptococcal infection.Methods We collected the clinical data of 90 patients diagnosed with GAS infections isolates from 2005 to 2016 in The Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University for retrospective analysis. Results GAS infectionsin children mostly were seen as tonsillitis (38.0%), while in adults were partly skin infections (72.7%). Experimental markers including CRP, WBC, PCT and ASO can increase. At present, GAS is sensitive to most of the conventional antibiotics. Conclusion If taking good advantages of antibiotics, the prognosis of GAS infections can be really excellent and the dead case is rare.Key words Group A Streptococcus pyogens^ Infections; Clinical features链球菌是一种革兰阳性菌，常根据其在血琼脂培养基上溶血环的大小，分为甲、乙、丙三型，其中乙型溶血性链球菌具有完全的溶血性，大多数人或动物链球菌感染即属于此型，Lancefieldi'i 将乙型 溶血性链球菌按C 抗原性的不同，将其分为A-H 和 K-V 共20个族，是临床上常用的分型。
溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告
溶血性链球菌实验活动生物安全危害风险评估报告溶血性链球菌所有的实验活动均应在BSL-2实验室操作一、评估对象及分类等级1 溶血性链球菌（Streptococcus hemolyticus）细菌又称乙型溶血性链球菌（β- hemolyticus Streptococcus）和化脓性链球菌（Streptococcus pyogrnes），是链球菌按照是否产生溶血和溶血性质分类，在血平板上产生2~4mm宽的透明溶血环的一类链球菌，可引起人类及灵长类动物多种疾病。
2 根据《中华人民共和国传染病防治法》，由溶血性链球菌引起的传染病列为乙类传染病。
3 在卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中溶血性链球菌被列为第三类病原微生物。
二、背景资料1 一般生物学特性1．1 形态染色链球菌呈球形或椭圆形，直径0.6-1.0μm，呈链状排列，长短不一，从4-8个至20-30个菌细胞组成不等，链的长短与细菌的种类及生长环境有关。
在液体培养基中易呈长链，固体培养基中常呈短链，由于链球菌能产生脱链酶，所以正常情况下链球菌的链不能无限制的延长。
多数菌株在血清肉汤中培养2-4h易形成透明质酸的荚膜，继续培养后消失。
该菌不形成芽胞，无鞭毛，易被普通的碱性染料着色，革兰氏阳性，老龄培养或被中性粒细胞吞噬后，转为革兰氏阴性。
1．2 培养特性需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。
最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。
在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。
在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，溶血性链球菌形成透明溶血环。
1．3 生化反应分解葡萄糖，产酸不产气，对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异。
一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，触酶阴性。
乙型溶血性链球菌穿越软骨组织的实验研究
疏松结缔组织的基质是 由生物大分子构成的无 定形胶状物质 ， 这些生物大分子物质含有蛋自多糖， 蛋白多糖聚合体形成有许多微小孔隙的分子筛。大 于分子筛 孔 隙的大 分 子 物质 、 菌 和肿 瘤 细胞 等 不 细 能通过 ， 基 质成 为 限制细 菌 等 有 害物 扩散 的 防御 使 屏障 。乙型溶 血性链 球 菌 能 产生 透 明 质酸 酶 … ， 它 能分 解蛋 白多糖 聚合 体 中 的透 明 质酸 ， 坏 基 质 的 破 防御屏 障 ， 而在 组 织 中扩 散 。软骨 基 质 的 主要 成 从 分也是蛋白多糖和水 ， 其蛋 白多糖与疏松结缔组织 中的类 似 ， 以长链 的透明质 酸分子 为主干 ， 它 干链 上 以许 多较短 的蛋 白质链 连接 硫 酸 软 骨素 Ａ、 Ｃ和硫 酸角 质素 ， 种 羽状分支 的大 分子结合 着大量 的水 ， 这 大分 子又相 互结 合 构成 分 子筛 ｊ 因此 ， 计 用 乙 。 设 型溶 血性链 球菌 产生 的透 明质 酸酶破 坏兔耳 软骨 基 质， 来观察 软骨组 织 受 损后 细 菌培 养 液 的渗 漏 和 细 菌的渗 出
３ 讨
论
白色 葡 萄球 菌 不 产生 透 明质 酸 酶 ， 不破 坏 软骨 的组织 结构 ， 不发 生 菌 液 渗漏 和细 菌 的 渗 出。 而 故 乙型溶 血性链 球 菌 产生 透 明 质 酸酶 ， 能 分 解 软骨 它 基质分子筛 中的透明质酸 ， 破坏组织的防御屏障 ， 使
菌液发生渗漏 ， 细菌渗出。随着时间的推移 ， 透明质 酸酶对 分 子筛 的破坏 愈 来 愈严 重 ， 当软 骨 组 织 损坏 到某 种程 度时 ， 型溶 血 性链 球 菌顺 势 流 出 。本 实 乙 验直接 观察 到 了乙型溶 血性链 球 菌对软 骨组织 的穿 越 。通 过 白色葡 萄球 菌 作 为 实验 对 照 ， 以判 断 引 可
溶血性链球菌的检验
溶血性链球菌在自然界分布较广，可存在于水、空气、 尘埃、牛奶、粪便及人的咽喉和病灶中，按其在血平板 上溶血能力分类，可分为甲型溶血性链球菌、乙型溶血 性链球菌、丙型溶血性链球菌和亚甲型溶血性链球菌。 与人类疾病有关的大多属于乙型溶血性链球菌，其血清 型90%属于A族链球菌，常可引起皮肤和皮下组织的化 脓性炎症及呼吸道感染，还可通过食品引起猩红热、流 行性咽炎的爆发性流行。因此，检查食品是否有溶血性 链球菌具有现实意义。
4.链激酶试验
致病性乙型溶血性链球菌能产生激酶素（即溶纤维蛋白酶），此酶能激 活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋 白。
吸取草酸钾血浆0.2ml，加0.8ml灭菌生理盐水，混匀，再加入18h24h，36度培养的链球菌培养物0.5ml及0.25%氯化钙0.25ml，振荡摇 匀，置于36度水浴中10min，血浆混合物自行凝固，然后观察凝固块重 新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h不溶解即为阴性。
食品学院
3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明 质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。 4、链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维 蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散 作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 5、脂磷壁酸（LTA）：与细菌粘附于宿主细胞表面有关， 大多数LAT位于细胞膜和肽聚糖之间，通过肽聚糖孔伸展 至细菌细胞表面，人类口腔粘膜和皮肤上皮细胞、血细胞 等细胞膜上均有LAT的结合位点。
食品学院
5.杆菌肽敏感试验 挑取乙型溶血性链球菌液，涂布于血平板上，用灭菌镊子 夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片，放于上述平板上， 于36度培养18-24h，如有抑菌带出现即为阳性，同时用 已知阳性菌株作为对照。
链球菌属及其检验「微生物检验」
链球菌属及其检验「微生物检验」链球菌属(Streptococcus)细菌，呈链状排列的革兰阳性球菌，个别种成双排列。
广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部，大多数不致病，致病菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎以及风湿热、肾小球肾炎等超敏反应性疾病。
下面是yjbys店铺为大家带来的关于链球菌属细菌的知识，欢迎阅读。
⒈分类链球菌的分类方法尚未统一。
常用下列两种方法。
⑴根据溶血现象：分为3类。
①甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus)：菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，该类菌又称草绿色链球菌，为条件致病菌。
②乙型溶血性链球菌(β-hemolytic streptococcus)：菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血，该类菌又称溶血性链球菌，致病性强，常引起人和动物多种疾病。
③丙型链球菌(γ-streptococcus)：菌落周围无溶血环，因而又称不溶血性链球菌，一般不致病。
⑵根据抗原结构：按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A、B、C、D …等20个群。
同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同又分若干型。
如A群根据其M抗原不同，可分成约100个型;B群分4个型。
对人致病的链球菌菌株，主要是 A群，多数呈现乙型溶血。
⒉细菌特性⑴链球菌① 形态染色球形或椭圆形，直径0.5～1.0μm，链状排列，链的长短与细菌的种类和生长环境有关，在液体培养基中形成的链较长。
无芽胞，无鞭毛。
多数菌株在培养早期(2～4h)形成透明质酸的荚膜。
革兰染色阳性。
②分离培养要求较高，培养基中需加入血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质。
多数菌株兼性厌氧，少数为专性厌氧。
在液体培养基中呈沉淀生长，在血平板上，37℃18～24h后可形成灰白色、圆形、凸起、光滑、直径为0.5mm～0.75mm的细小菌落，菌落周围出现不同类型的溶血环。
③生化反应触酶阴性、一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。
溶血性链球菌
分布
溶血性链球菌溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻 腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品 也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。
1、链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O为含有-SH的蛋白质，具有抗原性，S为小分子多肽，分子量较小， 故无抗原性。
2、致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，会引起局部或全身红疹、发热、 疼痛、恶心、呕吐、周身不适。
3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩 散。
大多数链球菌无鞭毛,不能运动,但D群和X群中某些菌株具有鞭毛。不能形成芽孢。多数链球菌在血清肉汤幼 龄培养物（2-2.5h）中,易发现荚膜,当培养时间延长,荚膜即逐渐消失。
链球菌用普通苯胺染料易于着染,自病灶分离的链球菌为革兰阳性,但若长时间培养,或被吞噬细胞吞噬后,革 兰染色常为阴性。
培养特征
溶血性链球菌需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多 数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。 在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、 直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。
什么是乙型溶血性链球菌
什么是乙型溶血性链球菌你知道什么是乙型溶血性链球菌吗，其实这种链球菌，是属于致病性比较强的一种病菌，对我们健康，自然而然会带来很多的影响和威胁，因此大家必须了解他的各种常识以及致病类型，这样在生活当中才可以有效地预防，下面就为大家具体分析，到底什么是乙型溶血性链球菌。
乙型溶血性链球菌，是链球菌属中的一种，具有致病性强的特点。
菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。
乙型溶血性链球菌又称A群溶血性链球菌，是链球菌属中的一种，具有致病性强的特点。
菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病。
疾病危害：溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。
病理分类：溶血性链球菌的致病性与其产生的毒素及其侵袭性酶有关。
主要有以下几种：1、链球菌溶血素：溶血素有O和S两种，O为含有-SH的蛋白质，具有抗原性，S为小分子多肽，分子量较小，故无抗原性。
2、致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质，会引起局部或全身红疹、发热、疼痛、恶心、呕吐、周身不适。
3、透明质酸酶：又称扩散因子，能分解细胞间质的透明质酸，故能增加细菌的侵袭力，使病菌易在组织中扩散。
4、链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。
只有我们在了解了这些常识介绍之后，才可以有效地避免更多的疾病影响和危害，尤其是在现在的生活当中，关注这些常识，才可以保证我们的健康，因为你越是忽视健康问题，就越容易让一些疾病有机可乘。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
储存温度：-‐80℃
基 因 组 ：
乙型溶血性链球菌
简 介 ：
乙型溶血性链球菌，是链球菌属中的一种，具有致病性强的特点。菌
注 意 事 项 ：
1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放
置会导致菌种衰退；
2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；
3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来 电询问； 5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧 状态；培养过程中亦要保持厌氧状态； 6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要 5-‐10%CO2 促 进生长； 7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。 8、部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。 保 藏 条 件 ： -‐20℃保存（复溶液于 2-‐8℃保存） 保 藏 时 间 ： 2-‐10 年，应根据菌种状况及时转接
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数
的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 ：
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌 株 复 溶 ：
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻
管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h，真菌在 23-‐28℃培养箱中培养 24-‐72h
乙型溶血性链球菌
编号
名称
北京华越洋生物 NRR00360
乙型溶血性链球菌
基 本 信 息 ：
名称：乙型溶血性链球菌
规格：300ul 甘油菌
（必要时，可适当延长培养时间）。
菌 株 传 代 ：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量
增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓
慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
落周围形成一个 2-‐4mm 宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙
型溶血，因而这类菌亦称为溶血性链球菌，该菌的致病力强，常引起人类
和 动 物 的 多 种 疾 病 。
操 作 说 明 ：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表