IL_10抑制转化生长因子_1诱导的大鼠肝星状细胞_型胶原合成作用观察
转化生长因子β1在肝纤维化发病中的作用
通过诱 导 库 普 弗 细 胞 等 方 式 产 生 其 他 促 肝 纤 维 化 细胞 因子 ， 同时 诱 导 ＨＳ 表 达 这 些 细 胞 因子 受 体 Ｃ
而 刺 激 ＨＳ 活 化 和 增 殖 。 肝 损 伤 时 活 性 Ｔ —１ Ｃ ＧＦ ｊ ３ 被 认 为 可 能 是 激 活 邻 近 ＨＳ 的 初 始 信 号 ； 时 激 Ｃ 同
键性 作用 。本 文重 点对 近年有 关进展 作一综 述 。
１ Ｔ —ｌ受 体 和 Ｔ － Ｓ ｄ信 号 转 导 途 径 ＧＦｐ ＧＦ［ ｍａ Ｈ／ Ｔ —１的 生 物 学 作 用 由 细 胞 膜 上 的 特 异 性 受 ＧＦ ｔ ７
体介 导 。 目前 发 现 有 三 种 不 同 的膜 整 合 受 体 （ 即
该 复 合 物 随 即 转 移 到 胞 核 与 其 他 转 录 因 子 共 同调 节
激 活毗邻 ＨＳ Ｃ并 维持 其活化 状 态 。不 同状态 ＨＳ Ｃ 的 ＴＧ —１信 号 转 导 中具 体 参 与 介质 有 所 不 同 ， ＦＩ ３ 静
息 ＨＳ 中 Ｔ —１促 进 Ｓ ｄ 的 磷 酸 化 和 核 转 Ｃ ＧＦ ｌ ３ ｍａ ２ 位 ， 活 化 后 的 ＨＳ 中 ＴＧ 一 １ 则 主 要 影 响 而 Ｃ Ｆ口 Ｓ ｄ， Ｓ ｄ ｍａ ３ 且 ｍａ ２和 Ｓ ｄ ｍａ ３在 ＨＳ 的 活 化 中 起 着 Ｃ 不 同 的 作 用 ］ 有 研 究 显 示 ， ｍａ ３的 过 度 表 达 与 。 Ｓ ｄ
到 损 伤 时 ， Ｃ 活 化 向 ＭＦ ＨＳ Ｂ转 型 并 增 殖 而 成 为 能 合 成 Ｉ型 、 型 、 型 胶 原 和 纤 维 连 接 蛋 白 等 Ｅ Ｍ Ⅲ Ⅳ Ｃ 主 要 组 成 物 质 的 细 胞 ； 化 的 ＨＳ 可 分 泌 大 量 炎 活 Ｃ 性 因子 、 胞 黏 附 分 子 促 进 自身 活 化 、 殖 、 化 并 细 增 趋 促进 炎性 细胞和骨 髓 细胞趋 化 ， 进肝纤 维化 进展 。 促 肝 脏 炎 症 损 伤 时 肝 细 胞 坏 死 、 氧 化 损 伤 等 因 过 素 促 使 潜 伏 状 态 Ｔ —１向 活 性 Ｔ 一１转 变 ， ＧＦ ｐ ＧＦ ８ 可
肝星状细胞在逆转肝纤维化中的作用
肝星状细胞在逆转肝纤维化中的作用徐天华;陈金铃;朱丹丹;吕蕾;段义农【摘要】肝纤维化是一种能够导致门静脉高压、肝硬化、肝衰竭的严重疾病.已经发现肝星状细胞的活化是引起肝纤维化的中心环节,因此抑制肝星状细胞的活化、加速肝星状细胞的清除有望逆转肝纤维化.本文将对活化的肝星状细胞的凋亡、衰老以及清除的研究进展作综述,阐明肝星状细胞在肝纤维化过程中所起的作用及相关机制.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2015(031)011【总页数】5页(P1065-1068,1074)【关键词】肝纤维化逆转;肝星状细胞;凋亡;衰老【作者】徐天华;陈金铃;朱丹丹;吕蕾;段义农【作者单位】南通大学医学院病原生物学系,南通226001;南通大学医学院病原生物学系,南通226001;南通大学医学院病原生物学系,南通226001;南通大学医学院病原生物学系,南通226001;南通大学医学院病原生物学系,南通226001【正文语种】中文【中图分类】R372肝脏受到各种致病因子侵袭后会引起肝损害和炎症反应，机体会对慢性肝损伤进行修复。
若这种修复过程过度或失控就会引起肝内细胞外基质过度沉积，导致肝脏结构、肝功能发生异常，最终形成肝纤维化。
肝纤维化是最严重的肝脏疾病之一，可由肝炎病毒、过量饮酒、非酒精性脂肪肝炎所诱导，最终导致门静脉高压、肝硬化、肝衰竭以及增加患肝癌的机率[1]。
因此，对于寻找逆转肝纤维化的途径非常必要。
纤维化过程中，间叶样成纤维细胞会迁移到伤口区域合成基质蛋白，导致细胞外基质过度增生、异常沉积。
肝纤维化中的间叶样细胞即肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)，是肝纤维化过程中主要的效应细胞和细胞外基质的主要来源。
HSCs，又称伊东细胞或贮脂细胞，位于Disse间隙内，紧贴着肝细胞和肝窦内皮细胞。
HSCs可通过自身突触与相邻近的肝细胞、肝窦内皮细胞及神经末梢细胞相互接触。
肝纤维化讲解
ECM旳构成及主要功能
构成：蛋白质（胶原、弹力纤维）、糖蛋白 及蛋白多糖
功能：
1、支撑及维持组织构造、形态与修复 2、细胞接触面及半选择性弥散屏障 3、调整细胞分化、增殖、移行及信息传递 4、参加调整微循环、代谢及免疫反应
ECM 旳胶原蛋白质
间质性胶原（纤维形成胶原）： I、III型：为肝内主要胶原成份，各占33%，I / III百分比为1:1；
非创伤性诊疗 创伤性诊疗
组织病理学诊疗
肝活检标本组织学检验是纤维化诊疗旳金原则 常规组织形态学评估 特殊旳组织学检验 肝纤维化组织学半定量评估系统 计算机图像分析系统
几种肝纤维化分期半定量评估系统
评分 Knodell
Ishak
Scheuer
0
无纤维化
无纤维化
无纤维化
1
汇管区扩大 有些PF±短纤维隔
V型：分布于血窦周围和门脉区，作为关键使I、III型胶原形 成粗大旳纤维；
VI型：分布于I、III、V型胶原形成旳纤维素之间起粘附作用； 基底膜胶原（非纤维形成胶原）：
IV型：主要分布于肝血窦内皮下，是肝细胞和内皮细胞功 能性基底膜旳主要成份；
ECM 旳非胶原糖蛋白
纤维连接素（FN)：在肝纤维化早期时增多，作为后来胶原 沉积旳支架；
TGFß1在肝纤维化形成所起旳中心作用
刺激ECM合成 增长I、III、IV型胶原、 FN 诱致HSC合成胶原 调整细胞增生 克制HSC增生，但刺激其转化
克制基质降解 降低MMPS合成 增长TIMPS旳合成并调整本身活性型旳变化
受体体现增强 TGFβ辅助受体合成↑
刺激其他生长因子受体（PDGF、TGFα）体现↑及整合素家族受体↑
参加肝纤维化旳细胞成份
结直肠癌组织Tregs_占比和Foxp3、IL-10、TGF-β1_mRNA_表达变化及其意义
结直肠癌组织Tregs 占比和Foxp3、IL -10、TGF -β1 mRNA 表达变化及其意义马虎林1，孙晓霞2，陈良全1，张浩1，党利敏31 内蒙古自治区人民医院腹部肿瘤外科，呼和浩特 010010；2 内蒙古自治区人民医院外科门诊；3 内蒙古医科大学内蒙古临床学院摘要：目的 观察结直肠癌（CRC ）组织中调节性T 细胞（Tregs ）占比及叉头转录因子（Foxp3）、白细胞介素10（IL -10）、转化生长因子β1（TGF -β1）表达情况，并分析Tregs 占比与CRC 临床病理参数的关系。
方法 选取手术切除的CRC 组织及正常结肠组织各24例份，采用流式细胞术测算两组织中Tregs 占比，实时定量PCR 法检测两组织中Foxp3、IL -10、TGF -β1 mRNA 相对表达量，Spearman 相关分析法分析Tregs 占比与CRC 临床病理参数的关系。
结果 与正常结肠组织比较，CRC 组织Tregs 占比增加（P <0.05）；与正常结肠组织比较，CRC 组织Foxp3、IL -10、TGF -β1 mRNA 相对表达量增加（P 均<0.05）；Tregs 占比与CRC 肿瘤分期相关（P <0.05）。
结论 CRC 组织中Tregs 占比增加，Foxp3、IL -10、TGF -β1表达升高，Tregs 占比与患者肿瘤分期有关，Tregs 可能通过调节Foxp3、IL -10、TGF -β1发挥免疫逃逸作用。
关键词：结直肠癌；调节性T 细胞；叉头状转录因子；白细胞介素10；转化生长因子β1doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.24.004中图分类号：R735.3 文献标志码：A 文章编号：1002-266X （2023）24-0017-04Proportion of Tregs in colorectal cancer and expression changes of Foxp3， IL -10 and TGF -β1 mRNA and their significanceMA Hulin 1， SUN Xiaoxia ， CHEN Liangquan ， ZHANG Hao ， DANG Limin1 Abdominal Tumor Surgery Department ， Inner Mongolia People's Hospital ， Hohhot 010010， ChinaAbstract ： Objective To explore the proportion of regulatory T cells （Tregs ） in colorectal cancer （CRC ） tissuesand the expression of Foxp3， interleukin 10 （IL -10）， and transforming growth factor β1 （TGF -β1）， and to analyze the rela‑tionships between the proportion of Tregs and the clinicopathological parameters of CRC. Methods Twenty -four CRC tis‑sues and 24 normal colon tissues were selected from surgical resection. Flow cytometry was used to detect the proportion of Tregs ， and real -time quantitative PCR was used to detect the expression levels of Foxp3， IL -10 and TGF -β1 mRNA in these two groups. Spearman correlation analysis was used to analyze the relationships between the proportion of Tregs andthe clinicopathological parameters of CRC. Results Compared with the normal colon tissues ， the proportion of Tregs inCRC tissues increased （P <0.05）. Compared with the normal colon tissues ， the relative expression of Foxp3， IL -10 and TGF -β1 mRNA in CRC tissue increased （all P <0.05）. Tregs proportion was correlated with the stage of CRC （P <0.05）.Conclusions The proportion of Tregs in CRC tissues increased ， and the expression of Foxp3， IL -10 and TGF -β1 in‑creased. The proportion of Tregs was related to the tumor stage of patients ， and Tregs played an immune escape role proba‑bly by regulating Foxp3， IL -10 and TGF -β1.Key words ： colorectal carcinoma ； regulatory T cells ； Foxp3； interleukin -10； transforming growth factor -β1结直肠癌（CRC ）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是癌症相关死亡的主要原因之一［1］。
抗肝纤维化药物及柴胡抗肝纤维化作用研究进展
肝纤维化是慢性肝病发展到肝硬化的必经阶 蛋白酶 －２（ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ －２， ＭＭＰ －２）
段，已有大量研究表明，肝纤维化在去除损伤因素后 和金属蛋白酶组织抑制剂 －１（ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆｍｅｔ－
是可以逆转的［２］ ，而肝硬化则基本为不可逆，因此， ａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ －１， ＴＩＭＰ －１ ） 等促纤维化因子，对肝
３ 抗肝纤维化药物研究进展 ３．１ 中医药抗肝纤维化作用
献 可溶性 ＴＧＦ －βⅡ型受体及针对 ＴＧＦ －βⅡ型的 ｉＲ－
中医学认为肝纤维化基本病机为正虚血瘀，中
综 述 ●
ＮＡ 等在动物实验中均可抑制肝星状细胞活化、降 低肝脏胶原等细胞外基质含量、减轻肝纤维化程度。
医药治疗肝纤维化以肝、脾、肾三脏为主，以“ 扶正 补虚，活血化瘀” 为治疗根本，基本治法为益气养
其他抑制 ＨＳＣ 活化的药物有：ＩＦＮ －γ在 ＨＳＣ 培养 阴、活血化瘀、疏肝健脾、滋养肝肾、清热利湿等［１５］ 。
及肝纤维化动物模型中均可以下调 ＨＳＣ 的激活；瘦 刘氏等［１６］ 在 ２０１１ 年通过对近 ５ 年来肝纤维化中医
素（Ｌｅｐｔｉｎ）在活化的 ＨＳＣ 表面具有表达，它可影响 证治用药规律进行总结，调查结果表明：治疗肝纤维
抗氧化剂可以减少 ＨＣＶ 感染患者 ＨＳＣ 的活化，在 （ＨＧＦ）在动物实验中显示出较强的抗纤维化作用，
实验性铁沉积中可以阻断肝纤维化的发生。 抗氧化 其机制包含促进肝细胞再生和抑制 ＴＧＦ －β表达、
剂包括维生素 Ｅ、水飞蓟宾、硫腺苷甲硫氨酸等。 水 促进胶原酶生成二个方面。 联合尿激酶型纤溶酶原
飞蓟宾具有细胞保护和抑制 Ｋｕｐｆｆｅｒ 细胞活性、减少 激活物（ｕＰＡ） 和 ＨＧＦ 基因治疗实验性大鼠肝纤维
IL-10抑制TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖及表型转化
IL-10抑制TGF-β1诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖及表型转化郝燕捷;陈莹;薛林;韩晓宁;丁文惠【摘要】目的：研究白细胞介素10（IL-10）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的大鼠心脏成纤维细胞（CFBs）增殖、向肌样成纤维细胞（MyoFbs）转化的影响及其作用通路。
方法原代培养SD乳鼠CFBs，应用第2～4代，分为对照组、IL-10刺激组、TGF-β1刺激组、IL-10与TGF-β1共同刺激组（ IL-10预处理后加入TGF-β1）。
每个刺激组设3个复孔，所有实验重复3次。
四氮唑盐比色法检测细胞增殖，免疫细胞化学染色检测增殖细胞核抗原表达，免疫细胞化学染色及Western blot检测α-平滑肌细胞肌动蛋白（α-SMA）和ERK1／2、P38激酶磷酸化蛋白的表达。
结果与对照组比较，TGF-β1（10μg／L）能显著刺激 CFBs 增殖及表型转化（α-SMA 表达）（P ＜0.01），用 IL-10（10、50和100μg／L）预处理后，TGF-β1诱导的CFBs增殖及α-SMA表达呈剂量依赖性被显著抑制（ P＜0.01）。
TGF-β1能显著刺激CFBs内ERK1／2和P38磷酸化水平（P＜0.01），而IL-10（100μg／L）预处理后， TGF-β1诱导的ERK1／2和P38激酶磷酸化被明显抑制（ ERK1／2：P＜0.05；P38：P＜0.01）。
结论 IL-10可能通过抑制ERK1／2和P38激酶活化抑制了TGF-β1诱导的CFBs增殖及向MyoFbs转化。
%Objective To examine the effects of IL-10 on cardiac fibroblasts ( CFBs) proliferation and phenotype transformation to myofibroblasts (MyoFbs) induced by transforming growth factor-β1 (TGF-β1);and to investigate the regulating pathways .Methods Cardiac fibroblasts were isolated from cardiac ventricles of neonatal SD rats . The passage 2~4 were used and divided into the following groups fortreatment:1) control group, 2) IL-10 reac-tion group, 3) TGF-β1 reaction group, and 4) IL-10 plus TGF-β1 reaction group (TGF-β1 treatment followed with IL-10 pretreatment ) .Cells proliferation was assessed by MTT assay and immunocytochemistry staining for prolifera-ting cell nuclear antigen (PCNA);the phenotype transformation into MyoFbs was assessed by immunocytochemistry of α-smooth muscle actin (α-SMA);extracellular signal related kinase ( ERK1/2) and P38 kinase pathways were assessed by western-blot.Results TGF-β1 (10 μg/L) treatment boosted the proliferation and the expression ofα-SMA significantly (P<0.01), while IL-10 (10, 50 or 100 μg/L) plus TGF-β1 co-treatment induced lower cell proliferation and expression of α-SMA than treating with TGF-β1 alone ( P<0.05 ) , with the inhibitory effect of IL-10 being concentration dependent .TGF-β1 could significantly stimulate the ERK 1/2 and P38 kinase phospho-rylation( P<0.01 ) , however IL-10 (100 μg/L) plus TGF-β1 co-treatment failed to down-regulated the phospho-rylation of ERK1/2 and P38 kinase compared with TGF-β1 alone ( ERK1/2:P<0.05;P38:P<0.01 ) .Conclu-sions IL-10 can attenuate TGF-β1-induced CFBs proliferation and phenotype transformation to MyoFbs .The in-hibitory effects may explained by a mechanism of inhibiting the activation of ERK 1/2 and P38 kinase .【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】6页(P1182-1187)【关键词】白细胞介素-10;心脏成纤维细胞;转化生长因子-β1;细胞外信号调节激酶;P38激酶【作者】郝燕捷;陈莹;薛林;韩晓宁;丁文惠【作者单位】北京大学第一医院心内科，北京100034; 北京大学第一医院风湿免疫科，北京100034;北京大学第一医院心内科，北京100034;北京大学第一医院心内科，北京100034;北京大学第一医院心内科，北京100034;北京大学第一医院心内科，北京100034【正文语种】中文【中图分类】R541.1在急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后的心室重构发展过程中，心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFBs）增殖、向肌样成纤维细胞（myofibroblasts，MyoFbs）转化、分泌大量细胞外基质是重要的病理机制之一。
逆转心血管重构的研究进展
大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成Ⅲ１。 此外，他汀类药物对ＶＳＭＣ有抑制增殖与迁移，诱
导凋亡的作用。Ａｘｅｌ等（２０００）研究发现，单一培养第 １代和第２代人动脉平滑肌细胞，具有亲脂特性的他 汀类药物如普伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀可以减少 其生长，而西立伐他汀可显著抑制其培养人动脉平滑 肌细胞的增殖与迁移。辛伐他汀可阻止血小板衍化生 长因子（ＰＤＧＦ）诱导的ＤＮＡ合成（Ｎｅｇ等，２００１）。
１．２ 降脂药物 他汀类药物是目前临床广泛应用的调整血脂药
物，大规模临床研究已证实，他汀类药物所带来的Ｉ临床 益处已远远超过其血脂调节作用¨“。目前比较肯定 的他汀类药物调脂作用外，还包括：改善血管内皮功 能，抑制血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖和迁移，调节细 胞凋亡，抗血小板聚集。抗炎作用，降低血压，影响细胞 黏附等作用［１５－－１７）。王安才等¨驯应用阿托伐他汀处理 自发性高血压大鼠６周后，不但收缩压明显下降．而且 心脏质量，左心室质量和左心室质量指数明显下降；与 对照组比较，阿托伐他汀组心肌细胞核膜较完整，肌原 纤维清晰，排列较整齐，间质胶原纤维无明显增生。辛 伐他汀干预入肥厚型心肌病转基因模型家兔，１２周后 左心室质量平均减少３７％，室问隔厚度减少２ｌ％Ⅲ。。 在高血压主动脉狭窄大鼠，辛伐他汀显著改善心肌肥 厚和心肌纤维化，还能抑制血管升压素诱导的新生ＳＤ
siRNA干预CTGF和TIMP-1对大鼠肝星状细胞胶原分泌的影响
ｓＲＮ Ａ ｎｔ ｒ ｅ ｅ ｃ ｆＣＴＧ Ｆ ａ ｄ ＴＩ Ｐ １ ｏ Ｒａ ｅ ａ ｉ ｔ ｌａ ｅ ｉ Ｉ ｅ ｆｒ ｎ ｅｏ ｎ Ｍ － ｎ ｔＨ ｐ ｔｃ Ｓ ｅ ｌ ｔ Ｃｅ ｌＣｏ ｌ ｇ ｎ Ｓ ｃ ｅ ｉ ｎ ｌ ｌａ ｅ ｅ ｒ ｔｏ Ｈｕ ｎ ｉｑ ａ Ｊａ ｎ ａ Ｌ ｎ ｅ Ｚ ａ ｇＪａ ｕ ｎ， ｉｏ Ｙｕ ｔ ｏ， ｉＬａ ｔ ａ
Ｉ、 Ⅲ型 胶 原 量 比 ｓＲ ＭＰ１组 少 ， 差 异 具 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ ０ ０ ） 而 与 ｓ ＮＡ ＴＧ ｉ ＮＡ ＴＩ 一 且 均 ＜ ．５ ； ｉ Ｒ Ｃ Ｆ组 比较 ， Ｃ Ｆ ｍＲ 其 ＴＧ —
ＮＡ 和 蛋 白抑 制率 增 高 ， 细胞 上 清 液 中 Ｉ、 Ⅲ型 胶 原 量 较 ｓ ＮＡ 联 合 组 减 少 ， 差 异 无 统 计 学 意 义 （ Ｐ ０ ０ ） ｉ Ｒ 但 均 ＞ ． ５ 。结 论 针 对 ＨＳ Ｔ Ｃ Ｔ６Ｃ ＧＦｍＲＮＡ 因 全 长 ９ ３位 点 和 ＴＩ 一 ＮＡ ０ 基 ４ ＭＰ １ｍＲ ３ ４位 点 化 学 合 成 的 ｓ ＮＡ， 靶 基 因 ｍＲＮ 和 蛋 白 ｉ Ｒ 对 Ａ 表 达 有 较 好 的抑 制 效 果 ，ＴＧＦ和 ＴＩ 一 Ｃ ＭＰ １沉 默 可 显 著 减 少 细胞 上 清 液 中 Ｉ、 型 胶 原 含 量 ； ＴＧ Ⅲ Ｃ Ｆ和 Ｔ ＭＰ １ 种 基 因 Ｉ 一两
第 ４ １卷 第 １期 第 ２ ２页 ２１ ０ ２年 ２月
华中科技大学学报（ 学版） 医
Ａｃ ａ Ｍ ｅ ｉ ｃ ｃ ｎ ｌＨ ｕ ｚ ｏ ｇ ｔ ｄ Ｕｎ ｖ Ｓ ｉ Ｔｅ ｈ ｏ ａｈ ｎ
Ｖｏ ． １ Ｎｏ １ Ｐ． ２ １４ ． ２
Ｆｅ ． ２ １ ｂ ０ ２
同时沉默 ， 增强抗肝纤维化效果 的可能 。 有
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pro co llagen
团安泰空 气 技术 有限 公 司 BCM 1000 型超 净工 作 台 , 美 国 T ECH PEL 公司酶标仪。 1 2 方法 : 1 2 1 实验分组 : A 对照组 : 加磷酸盐缓冲液 B C D E T GF 1 8 ng / ml 组 : 加 T G F 1 至浓度为 8 ng/ ml IL 10 2 ng/ m1 组 : 加 IL 10 至浓度为 2 ng / m1 I L 10 20 ng/ ml 组 : 加 IL 10 至浓度为 20 ng/ ml IL 10 50 ng/ m1 组 : 加 I L 10 至浓度 为 50 ng / ml
! Abstract∀ Objective T o investig ate the possible antif ibrog enic mechanism o f IL 10. Methods r HSC 99 cells cultured
in v itr o w as ex posed in v ario us concent ratio ns o f IL 10 and/ o r T G F 1 . T he synthesis of ty pe proco llag en was measured by enzyme linked immuno adso rdent assay ( EL ISA) . Results T GF 1 r emarkably increased the pr oductio n of t ype pro co llagen in HSC. T he pro ductio n of ty pe pro collag en had no r emarkable change when H SC w as only exposed in IL 10. But IL 10 sig nificantly inhibited the product ion o f t ype pr ocollag en mediated by T GF 1 . Conclusion T G F 1 r emarkably increased the pr oducit on of ty pe pro co llagen. T he ant ifibro genic action of IL 10 is partly due to its inhibition on the pr omot ion of the pro duct ion of ty pe pro collag en mediated by T GF 1 . ! Key words∀ H epatic stellate cell; Inter leukin 10; T ransfo rming gr ow th fact or 1; T y pe 目前已明确 H SC 的激活 是肝纤 维化形 成的 关键 [ 1] 。在 HSC 的激活、致纤维 化以 及与其 他细 胞的相 互作 用的 过程 中 , 细胞因子 扮演 着重 要角 色。其 中转 化 生长 因子 ( T G F
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福建医药杂志 2006 年第 28 卷第 1 期
Fu jian M ed J V ol 28, N o. 1 2006
实验研究 IL 10 抑制转化生长因子
1
诱导的大鼠肝星状细胞
甄茂*
福建医科大学附属第一医院普外科 ( 350005) !摘 要∀ 目的 探讨 IL 10 抗纤维化的可能机 制 。 方法
附表 IL 10、 TGF ( x ∃ s) 组别 A B C D E F G H I 型胶原的浓度 ( g/ m1) n 24h 5 5 5 5 5 5 5 5 69 27 ∃ 9 14 115 62 ∃ 14 05* 64 50 ∃ 9 08 62 79 ∃ 10 12 62 86 ∃ 9 88 105 45 ∃ 7 80 % 88 18 ∃ 9 96 % 76 56 ∃ 9 09 % 48h 88 02 ∃ 9 48 182 37 ∃ 14 84* 84 15 ∃ 6 41 82 78 ∃ 9 28 82 18 ∃ 9 70 150 99 ∃ 16 68 % 116 08 ∃ 10 73 % 104 62 ∃ 10 92 % 72h 81 07 ∃ 8 03 157 22 ∃ 18 26* 79 96 ∃ 9 51 73 03 ∃ 8 10 71 00 ∃ 12 67 141 65 ∃ 14 09 % 116 98 ∃ 10 02 % 110 56 ∃ 12 82 % 0 01 对 HSC 的 型胶原表达的影响
体外 培养大 鼠肝星 状细胞系 r HSC 99, 分别 用不
同浓度的 IL 10 、 T GF 1 干预和两者共同干预 , 用 EL ISA 法检测 肝星状 细胞 ( H SC) 的 型 胶原合 成的影 响 。 结 果 T GF 1 显著增强 H SC 的 I 型胶原的合成 。 IL 10 单独 干预对 H SC 的 I 型胶 原的合成 无明显 影响 , 但 IL 10 可 显著抑制 T G F 1 促进 H SC 的 I 型胶 原的合成 。 结论 T GF 1 显著促进 H SC 的 型胶原的合成 , IL 10 对 T G F 的促 H SC 型胶原合成有抑制作用 , 这可能是 IL 10 发挥抗肝纤维化作用的途径之一 。 ! 关键词∀ 肝星状细胞 ; 白介素 10; 转化生长因子 1 ; 型胶原 ! 中图分类号∀ R575 2 ! 文献标识码∀ B ! 文章编号∀ 1002 2600( 2006) 01 0076 02
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是促 进肝纤维化 重要的 细胞 因子。各 种致病 因
素作用 于 肝 脏 引 起 的 损 伤 时 , 可 即 刻 诱 导 T G F 1 的 表 达 [ 1] 。在 T GF 1 的作用 下激 活的 H SC 向 损伤 部位 迁移 和 产生胶原 , 并促进 自分泌 T G F 1 , 形成 正反馈 效应 , 导 致 ECM 不断的 产生 , 同 时抑 制 ECM 的 降 解 , 导致 肝 纤维 化 的发生发展 [ 8] 。 我们 用 T GF 法检测 作 用于 体外 培养 的 HSC, 运 用 EL ISA
F T GF 1 8 ng / ml+ IL 10 2 ng / ml 组 : 加 T GF 浓度为 8 ng/ ml, 加 I L 10 至浓度为 2 ng/ ml G T G F 1 8 ng / m l+ IL 10 20 ng/ m1 组 : 加 T G F 浓度为 8 ng/ ml, 加 I L 10 至浓度为 20 ng / ml H T G F 1 8 ng/ ml+ IL 10 50 ng / ml 组 : 加 T G F 浓度为 8 ng/ ml, 加 I L 10 至浓度为 50 ng / ml 中
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制因子 , 临床和动物实 验表明 , IL 10 可减轻 肝脏 炎症 , 抑 制肝纤维化的发展 , 可望发展为抗肝纤维化药物 , 但其作用 机制尚未明确 [ 2, 3] 。本 研究 通 过 I L 10、 T GF 1 : 干 预 和共 同干预体外培养的 H SC, 观察其对 H SC 的 型胶原合成的 影响 , 探讨 IL 10 抗肝纤维化的作用机制。 1 材料与方法 1 1 材料 : 1 1 1 H SC: 采用 大鼠肝 星状 细胞 系 r HSC 99, 此细 胞系 保持激活的 H SC 细胞特性 [ 4] 。 1 1 2 主 要试 剂 : 重 组大 鼠 IL 10 购 自 P EP ROT ECH EC 有限公 司 , 人 T GF 1 购 自 R& D 公 司 , 大 鼠 I 型 胶 原 EL ISA 试 剂 盒 购 自 M A RK ET I NC 公 司 , 胎 牛 血 清 购 自 Gibco 公司。 1 1 3 主 要仪 器 : 美 国 P recisio n Scientific 公 司 细 胞培 养 箱 , 日本 OL Y M PU S 公司 CH 2 型相差显微镜 , 苏 州苏净集
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型 胶 原的 表 达。结 果 表 明 : T GF
能显著促进
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H SC 型胶原的合 成 , 这和 以往 的研究 结果 相似 [ 9] 。因 此 通过抑制 T GF 1 的产 生或 阻断 其生 物 学活 性 来抑 制 HSC 胶原的分泌 , 是抗肝纤维化治疗 的重要靶点之一。本实验结 果显示 , IL 10 单独干预 对 型 胶原的 表达无 明显影 响。但 IL 10 对 T GF 1 诱导的 型胶原的表达 有明显的抑 制作用 , 并呈量效依赖关系。说明 IL 10 对 T GF 1 的促 HSC 型胶 原合成有抑制作用 , 这可能是 IL 10 发挥抗 肝纤维化作 用的 途径之一。 参
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IL 10 prevents transforming growth factor
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mediated type
collangen accumulation
in cultured rat hepatic stellate cel ls Zhen M aochuan, W eng Shan geng , L in Yongkun, et al. Depart ment o f Surg er y, t he F ir st Af f iliat ed H ospit al of F ujian M edical U niversity , F uzhou 350005, China
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考
文
献
R ot h S, M ichel K , G res sner A M . T ransf orming gr ow t h fact or in liver parenchymal cells , it s inju ry dependen t rel ease, and para crine ef f ect s on rat hepat ic st ell at e cells. H epat ology, 1998, 27: 1003 1012.