抗白血病天然香精油研究
阔叶百里香鲜、干茎叶精油成分及其抑菌效果
接收日期：2020-09-22 接受日期：2020-12-04基金项目：泉州市科技计划项目(2018N054)；福建省科技计划项目(2019N0046) *通信作者。
E-mail:*************阔叶百里香鲜、干茎叶精油成分及其抑菌效果陈品品1，马晓娟1，刘 靓1，吴辉煌2，林金秀1，蓝波妙1，庄卫东1*(1.泉州市农业科学研究所，福建 泉州 362212；2.福建省安溪茶厂有限公司，福建 安溪 362441)摘 要：采用水蒸气蒸馏法和气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析阔叶百里香(Thymus pulegioides )鲜、干茎叶精油含油率、化学组成及其相对含量的差异，并比较精油对链格孢(Alternaria alternata )、粉红单端孢(Trichothecium roseum )和意大利青霉(Penicillium italicum )的抑制效果。
鲜、干茎叶含精油率分别为0.53%、0.37%，分别鉴定出35、40种化合物，其主要化学成分相同，均含有百里香酚(鲜样31.30%，干样26.82%)、麝香草酚甲醚、右旋龙脑和邻伞花烃等，只是相对含量略有差异；在抑菌实验中，百里香精油对链格孢菌的抑制作用最为明显，其次是意大利青霉和粉红单端孢。
鲜、干阔叶百里香精油的组分较为接近，相对含量略有差异；阔叶百里香精油对3种真菌具有较好的抑制效果，且鲜样精油的抑菌效果好于干样精油。
关键词：阔叶百里香；精油；成分；抑菌 Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2021.01.003中图分类号：Q946.85 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2021)01-0015-06Component Analysis and Comparison of Antibacterial Activity of EssentialOil from Fresh and Dry Leaves and Stems of Thymus pulegioidesCHEN Pin-pin 1, MA Xiao-juan 1, LIU Liang 1, WU Hui-huang 2, LIN Jin-xiu 1, LAN Bo-miao 1,ZHUANG Wei-dong 1*(1.Quanzhou Institute of Agricultural Sciences, Quanzhou 362212, Fujian China; 2.Fujian Anxi Tea Factory Co., Ltd., Anxi 362441, FujianChina)Abstract: The essential oil from fresh and dry leaves and stems of Thymus pulegioides was extracted, and their components were detected and identified, and their antibacterial effects were analyzed, so as to provide the basis for the development and application of thyme in this region. Contents of essential oil from fresh and dry thyme were analyzed and compared, by steam distillation extraction and GC-MS. And antibacterial effects of the two essential oils from fresh and dry samples on Alternaria alternate , Trichothecium roseum and Penicillium italicum were compared. The essential oil contents in fresh and dry samples were 0.53% and 0.37%, and total of 35 and 40 compositions were identified, respectively. They had similar main compositions: Thymol(fresh 31.30%, dry 26.82%), 3-methoxy-p-cymene, Borneol and o-Cymene and so on, and these compositions were slightly different in contents. In addition ，the inhibitory effect of thyme essential oil on Alternaria alternate was the most significant, the second was Penicillium italicum and Trichothecium roseum . The compositions of essential oils from fresh and dry samples were similar, and the relative contents were slightly different. The essential oil of thyme had a good inhibitory effect on 3 species of fungi, and the antibacterial effect of essential oil of fresh samples was better than that of dry ones.Key words: Thymus pulegioides ; essential oil; composition; antibacterial2021,50(1): 15～20.Subtropical Plant Science第50卷 ﹒16﹒百里香(Thymus)又名麝香草、地椒、蚊子草、山胡椒等，为唇形科(Laiatae)多年生草本或小灌木，因其植株具有强烈的芳香气味而得名[1]。
植物精油的抑菌作用及机理研究进展论文设计
植物精油的抑菌作用及机理研究进展摘要植物精油，是从芳香植物中提取的具有挥发性和浓郁香味的脂溶性天然化合物。
植物精油具有多种抑菌活性成分，如萜类化合物、芳香族化合物、脂肪族化合物、含氮含硫化合物等，对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、酵母菌和霉菌等具有良好的抑制作用，在食品、制药、香料等行业应用广泛。
本文对植物精油抑菌作用以及抑菌机理进行了综述，以期为植物精油在食品方面的深入研究提供参考依据。
关键词：植物精油；抑菌作用；抑菌机理；研究进展The research progress on antibacterial activity and antibacterial mechanism of extract of plant essentialoilAbstract:Plant essential oil,is extracted from fragrant plant volatile and aroma fat-sol uble naturalcompounds, plant essential oil has a variety of antibacterial active ingredie nts, such as terpenoids,aromatic compounds,aliphatic compounds,nitrogen compounds and so on.It also has good inhibitory effect on gram-negative bacteria, gram-positive bacteria,yeast and mould,having a wide range of applications on food, medicine, spices and other industries. This paper reviews the research progress of plant essential oil's bacteriostatic effect andbacteriostatic mechanism in order to provide reference for the further research of plant essential oil in food.Keywords:Plant essential oil; Bacteriostatic effect; Bacteriostatic mechanism; Research progress目录1引言 (1)2植物精油的主要活性物质 (1)2.1萜类化合物....................................................................... 错误!未定义书签。
樟树叶精油成分的初步研究
樟树叶精油成分的初步研究樟树叶精油是一种以植物萃取出来的精油，有多种功效。
樟树原产于印度次大陆，而今已经遍布世界各地，被称为“世界最古老的植物之一”。
许多不同的文化中，叶精油被用作药用剂，以治疗疾病和改善健康状况。
樟树叶精油成分的研究一直是许多科学家和药理学家关注的焦点之一，其成分可溯至古代，因此也被认为是一种宝贵的资源。
近年来，随着现代药学的发展，樟树叶精油的研究也取得了新的进展。
首先，樟树叶精油最主要的成分是樟脑醇，这是一种强烈的香味、抗菌和抗氧化物质。
樟树叶精油还含有一些其他有益成分，如萜烯、香豆素、和萜烯醇。
这些成分是植物性精油中最重要的物质，可以被用于抗菌、抗炎、抗病毒和抗过敏等疾病的治疗。
此外，近年来樟树叶精油的抗癌特性也引起了越来越多的关注。
研究表明，其中含有的三萜类物质可以抑制癌细胞的生长，从而阻止癌症的发展。
这些抗癌作用的机制尚不清楚，但研究表明它们的抗癌特性比传统的抗癌药物更有效。
此外，最近的研究表明樟树叶精油中还含有抗皱素，它可以防止皮肤衰老，改善肤色，提升皮肤弹性和对紫外线的抵抗能力。
樟树叶精油的科学研究已经取得了很大进展，但仍有许多空白需要填补。
比如，樟树叶精油的有效成分并不完全清楚，而且它的抗癌作用机制也不太了解。
此外，随着人们对精油的不断进步，它的安全性和生产工艺也值得认真考虑。
本文简要介绍了樟树叶精油的成分和药理作用。
未来，樟树叶精油的研究将进一步揭示它的有效成分、生产工艺和治疗效果，以期为人类提供一种有效、安全的治疗手段。
总而言之，樟树叶精油是一种含有多种有益成分的植物精油，具有多种功效，有助于它在药学领域的应用。
更多的研究将加深人们对樟树叶精油的认识，为它的有效性的研究提供更多的依据。
真假精油的功与过
CH INA I NSP ECTION AN D QU ARA NTIN E中国检验检疫2013第9期编辑：j xyz666@假精油的功与过□金尉精油是大自然赠与人类的礼物，精油真正有据可依是从史书记载开始，一位医生通过蒸馏法萃取花瓣制成了精油。
在古希腊盛行时期，医书中多见精油的用途以及制备方法。
直到现今，精油仍被广泛使用。
天然精油是从芳香植物的花、叶、茎、根或果实中，通过水蒸气蒸馏法、挤压法、冷浸法或溶剂提取法提炼的挥发性芳香物质。
不是所有的植物都能产出精油，只有那些含有香脂腺的植物才可能产出精油。
不同植物的香脂腺分布不同，有的是在花瓣、叶子、根茎或树干上。
这些部位的细胞会分泌出芬香的分子，分子会聚集成香囊。
将香囊提炼萃取后，即成为植物精油。
天然精油对人体有很大的好处，除美容护肤外还具有一定的治疗功效，可使人心旷神怡，提神醒脑。
正因为如此，从古至今一直是上至王公贵族下到黎民百姓喜爱的物品。
可惜的是，精油的制备过程繁杂，而且消耗大、产量低，因此价格通常不会太便宜。
品质纯正的精油在蒸馏过程中，不能添加任何的化学药剂，还有些植物不易萃取，如玫瑰、洋甘菊、茉莉，所以这些植物制得的精油价格更高。
如果售价不高的精油，有可能搀杂人工合成的化学香料。
人工合成的化学香料是模仿水果和天然香料气味的浓缩芳香油，获得方式是通过化学反应得到的。
此外合成过程中可能产生副产物，这些化合物未经鉴定，存在对人体造成危害的风险。
据研究，人造香料会对婴儿的神经系统和造血系统产生一定的伤害。
对神经系统方面的伤害主要表现为：注意力不集中、多动，脾气暴躁，可降低婴儿智商5%。
人工合成香精对造血系统的影响主要表现为：能够诱发婴儿白血病。
人工合成的化学香料不会像天然精油一样不被吸收时经过十几个小时会随汗液、呼吸等排出，而是残留在人体内并且不断堆积，累积到一定程度后就会危害人体健康。
天然精油不会对人体产生危害，因此，如何鉴别人工合成精油和天然提取的精油就成为必然。
百里香精油的功效与作用
百里香精油的功效与作用百里香精油，别名为“天使的泪”，其精油是由鲜花、叶子和茎部提取而来，有着独特的香气和强大的药用功效。
百里香自古以来就被广泛应用于草药和芳香疗法中，被誉为“精油之王”。
本文将详细介绍百里香精油的功效与作用，以及如何正确使用和储存它。
第一部分：百里香精油的概述1.1 百里香精油的提取方法和成分1.2 百里香精油的香气和质地1.3 百里香精油的储存和保鲜方法第二部分：百里香精油的功效与作用2.1 抗菌消炎作用2.2 改善消化系统2.3 提高免疫力2.4 缓解感冒和咳嗽2.5 舒缓肌肉疼痛2.6 改善皮肤问题2.7 减轻焦虑和压力2.8 提升记忆力和专注力第三部分：如何正确使用百里香精油3.1 按摩和膏方3.2 蒸气吸入和香薰疗法3.3 熏香和香薰灯3.4 空气清新剂和普通清洁剂3.5 美容和护肤品的添加剂第四部分：注意事项和副作用4.1 孕妇和儿童的使用禁忌4.2 对百里香精油的过敏反应4.3 使用前的皮肤测试方法4.4 百里香精油的副作用和异味第五部分：总结和结论5.1 百里香精油的多种功效与作用5.2 正确使用和储存百里香精油的重要性5.3 推广百里香精油的发展前景在本文中，我们将全面解析百里香精油的功效与作用。
我们将首先介绍百里香精油的提取方法和成分，以及它的香气和质地。
然后，我们将详细探讨百里香精油在抗菌消炎、改善消化系统、提高免疫力、缓解感冒和咳嗽、舒缓肌肉疼痛、改善皮肤问题、减轻焦虑和压力、以及提升记忆力和专注力方面的功效与作用。
接下来，我们将介绍如何正确使用百里香精油，包括按摩和膏方、蒸气吸入和香薰疗法、熏香和香薰灯、空气清新剂和普通清洁剂，以及美容和护肤品的添加剂。
在注意事项和副作用部分，我们将提醒孕妇和儿童的使用禁忌，警示对百里香精油的过敏反应，并介绍使用前的皮肤测试方法，以及百里香精油的副作用和异味。
最后，在总结和结论部分，我们将强调百里香精油的多种功效与作用，以及正确使用和储存百里香精油的重要性，展望其发展前景。
精油香薰疗法对人体的作用Microsoft Word 文档
精油阴阳学气称为“生命力”。
精油的属性是什么，与人体交互作用之后，就会产生效果，相同的精油使用在不同属性的人体，会产生不同的作用。
植物精油分阴阳，黑胡椒、檀香、乳香为阳性，玫瑰、洋甘菊、伊兰花瓣精油属于阴性。
阳性的植物精油有：佛手柑、柠檬、檀香、乳香、茉莉、肉桂、没药、茶树、尤加利、西柚、甜橙、橘子、马鞭草、黑胡椒、生姜阴性植物精油有：天竺葵、玫瑰、洋甘菊、伊兰、橙花精油对人的贡献提供细胞营养，精油含有荷尔蒙、维生素、抗生素、所以能提供我们身体细胞营养精油最重要的物质是气味，它会影响大脑的边缘系统，作用在嗅觉上，微小的芳香分子更会在中枢神经上引起心理及生理不同层次的反应。
有助于加强身体的免疫系统，帮助抵抗各种病菌、病毒精油经呼吸进入鼻腔，精油分子会被带到鼻子最顶端嗅觉细胞，传递到大脑的嗅觉区。
精油中的化学物质促发神经化学物质的析出，而产生镇定、放松或是兴奋效果。
精油也会进入肺部，经过气体交换，进入血液循环。
精油经按摩进入皮肤的毛孔，随着血液的流动，精油停留在体内影响各系统可这数小时、数星期之久，依个人的体质和健康状况而定，传送速度最快的为尤加利、百里香，大约30分钟就可到达心脏、血液等循环系统。
传送最慢的是檀香、广霍香，大约要2小时。
精油可以在30分钟内完全被皮肤吸收，在数小时内经由皮肤、肺、尿液排出。
精油属性罗勒：阳，味道清新，甜雅怡人，提神醒脑、抗沮丧。
治疗头痛、助消化、减轻过敏、促进乳汁分泌、健胃、舒缓痛经、治疗失眠、伤风感冒、消除疲劳、去口腔异味（吃完大蒜后去除口腔异味漱口），思路清淅，增加工作效率点燃香薰炉。
佛手柑：阳，抗沮丧和情绪忧郁、搞感染、搞疲劳，喷洒在长暗疮的皮肤部位，可净化皮肤，淋浴驱除汗味、放松神经、舒缓压力。
阴道瘙阳坐浴杀菌、止痒、除异味。
香柏：阳，治疗沮丧、焦虑、阴瘙痒、尿道炎、阴道炎、膀胱炎、淋病，安抚式按摩和香薰治疗失眠。
有激励作用。
洋甘菊：阴，可镇定、平衡情绪，令人感觉祥和，治疗湿疹、脓疮、粉刺，缓解腹部肠胃气胀、月经痛。
芳樟醇
物理性质
化学式：C10H18O 学名：3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇 外观：无色的流动液体 分子量：154.24 熔点：20℃ 沸点：198-199℃ 密度：0.858 – 0.868 g/cm3， 溶解度： 1.589 g/l
化学性质
具备醇和烯烃类化合物的通性和特征，例如可以进行酯 化、脱水反应，容易被还原为相应的烃类化合物。化学性质 比较活泼，能制成名目繁多的衍生物，广泛在香料、医药、 日化工业上得到应用
芳樟醇的药用价值
芳樟醇具有医疗保健的功效，民间自古以来就将含 有芳樟醇的挥发油或植物作为催眠和镇静剂加以使用
芳樟醇具有抑制人淋巴细胞白血病细胞增值的功能，通过 提高诱导细胞凋亡的方式从而选择行的抑制淋巴细胞，白血 病细胞的增长和增值，对正常人骨骼造血细胞以外周血细胞 的增值没有明显的影响，对人体有较高的安全性，可作为较 为理想的高效低毒抗白血病药物的开发使用
芳樟醇还具有抗菌抗病毒的作用，对大肠杆菌，变形杆菌， 肠炎膜杆菌，葡萄球菌，酿酒酵母菌，白色含球菌，黑曲霉 菌等有较好的抑制作用，有研究结果表明其抗菌活性是苯酚 的五倍。芳樟醇对丙酸菌有抗菌活性，可以治疗痤疮，可以 抑制真菌孢子或菌丝体的生长，可用于真菌感染
应用前景
目前临床上还没有芳樟醇抗肿瘤试剂，众多的体 外研究实验为芳樟醇的抗肿瘤活性提供了有力依据， 对其作用机制深入探索以及临床应用的推进，是未来 研究的重点。另有研究表明芳樟醇或许可以治疗帕金 森症。其抗炎作用，与其他药物一起使用可以减少抗 生素的使用，芳樟醇的应用前景十分广泛。
α -蒎烯路线： α -蒎烯由Pd-C催化氢化至蒎烷，蒎烷被氧化至蒎烷氢过 氧化物，再还原至蒎烷醇，在600摄氏度左右，蒎烷醇催化 裂解成芳樟醇
Β-蒎烯法： β-蒎烯(15)在600℃可以热解开环得到含有70％到90％的 月桂烯(16)产物，从月桂烯出发，经过氢氯化反应，其产物 (17)在氨与亚铜盐的催化下，用醋酸钠处理所生成的是芳樟 醋酸酯(18)，经皂化后得到芳樟醇的总收率大约为60％
桂皮对白血病的治疗作用研究进展
桂皮对白血病的治疗作用研究进展白血病是一种由于异常增殖的白血病细胞引起的恶性血液疾病，在全球范围内都具有较高的发病率和死亡率。
传统的治疗方法主要包括化疗、放疗和造血干细胞移植等，然而，由于治疗药物的毒副作用和耐药性的产生，仍然存在着治疗失败和复发的问题。
因此，人们一直在寻找新的治疗方法和药物。
近年来，越来越多的研究表明，桂皮及其主要活性成分对白血病具有潜在的治疗作用。
桂皮是一种广泛使用于中医药的草药，其富含多种活性成分，如桂皮内酯、桂皮酸、桂皮醇等。
这些成分对于白血病的治疗具有重要的作用。
首先，桂皮及其成分能够抑制白血病细胞的增殖和生长。
一项研究发现，桂皮酸能够通过抑制白血病细胞的DNA合成和细胞周期的变化，阻断白血病细胞的增殖和生长。
此外，桂皮酸还能够通过抑制STAT3信号通路的激活，进一步抑制白血病细胞的生长。
其次，桂皮及其成分能够诱导白血病细胞的凋亡。
凋亡是一种程序性细胞死亡方式，可以有效地抑制肿瘤细胞的生长。
研究发现，桂皮内酯能够通过调节多个凋亡相关蛋白的表达，如Bcl-2、Bax和Caspase家族蛋白等，促进白血病细胞的凋亡。
此外，桂皮酸还能够通过调节氧化应激反应的平衡，诱导白血病细胞的凋亡。
此外，桂皮及其成分还具有抗炎和抗氧化作用，可以减轻白血病患者的疼痛和炎症反应。
研究表明，白血病细胞周围的炎症反应和细胞因子的释放是导致白血病细胞增殖和生长的重要因素之一。
桂皮中的活性成分具有抑制炎症因子的释放和调节免疫反应的作用，这些作用有助于减轻白血病患者的炎症反应和提高治疗效果。
此外，还有研究发现，桂皮对于白血病细胞的侵袭和转移也具有抑制作用。
白血病的侵袭和转移是导致治疗失败和复发的重要原因之一。
相关研究显示，桂皮中的某些成分能够抑制白血病细胞的迁移和侵袭，从而减少白血病的转移和扩散。
需要指出的是，尽管目前已有许多研究证明桂皮对白血病具有治疗作用，但其具体的治疗机制和有效剂量仍需要进一步的研究和验证。
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抗白血病天然香精油研究李化，姚响，冯罕博，吴朝希[摘要]山苍子主要分布在我国，是重要药用植物和香料经济植物；柠檬醛是其精油主要组分。
虽然该精油范围广，但未见文献记载其具有抗白血病功效。
近年国外报道，柠檬醛能诱导早幼粒白血病HL-60细胞凋亡，但机理不明。
本项目拟采用MTT法将山苍子油与多种天然植物香精油进行抗白血病细胞生物活性比较；拟采用生物化学与生物物理方法研究不同浓度的柠檬醛（山苍子油的主要成分）对白血病细胞株（K562、HL-60）生长、繁殖及代谢的影响。
另外通过观察拉曼指纹图谱变化，研究表征柠檬醛抗白血病功效的最佳参数。
以此为拓展山苍子油在中药领域应用奠定理论基础。
[关键词]山苍子油；柠檬醛；白血病The Research of Anti-leukemia Natural Essential OilsAbstract：Cubeba, which mainly distribute in our country, is a kind of important medicinal plants and spices commercial crop.Citral is the main component of its essential oils . Although the Litsea cubeba oil is widely used in medicine, we can’t find any records about its efficacy of Anti-leukemia in literatures. In recent years,it was found that the Citral has the potency of inducing promyelocytic leukemia HL-60 cell apoptosis but its mechanisms is not revealed yet. The project planed to adopt the method of MTT to compare the biological activity in anti-leukemia between Litsea cubeba oil and several other natural plant essential oils.It also use the methods of biochemistry and biophysics to study the effects of different concentrations of citral(the major components of Litsea Cubeba oil) in the growth, reproduction and metabolism of Leukemia cell line (K562, HL-60).In addition,we also focus on the changes of the cell’s Raman fingerprint to find the optimal parameters of citral in its efficiency of anti-leukemic. The results will provide a theoretical foundation of Litsea cubeba oil for expanding its fields in the application of Chinese traditional medicine.Keywords：Litsea cubeba oil；Citral；Leukemia目录一、立项依据及研究进展 (1)二、研究内容 (3)2.1白血病细胞株的培养 (3)2.2细胞生长曲线、培养细胞起始浓度和药物作用时间的确定 (3)2.3 MTT法对不同香精油抑制白血病细胞生长作用比较 (3)2.4 柠檬醛对白血病细胞代谢酶活性的影响 (4)2.5 流式细胞术研究柠檬醛对白血病细胞诱导凋亡作用 (4)2.6 柠檬醛对白血病细胞表面Zeta电位和Kc的影响 (5)2.7 激光拉曼显微散射技术实时无扰监测柠檬醛与K562细胞的作用过程 (6)三、实验结果及其分析 (7)3.1生长曲线绘制、细胞培养起始浓度及药物作用时间的确定 (7)3.2.不同香精油对K562细胞的生长增殖能力影响 (7)3.3 柠檬醛对白血病细胞代谢酶活性的影响 (8)3.4 柠檬醛对HL-60和K562细胞抑制作用的途径不径相同 (9)3.5 柠檬醛具有削弱白血病细胞表面负电位的作用 (11)3.6 柠檬醛对白血病细胞膜流动性具有显著损伤效应 (12)3.7 白血病细胞的靶分子性质分析 (12)四、研究成果 (14)五、总结与展望 (15)六、致谢 (15)七、参考文献 (16)一、立项依据及研究进展在世界范围内抗肿瘤药物的研究已逐步转向天然药物。
天然植物精油及其挥发性单体独特的理化性质、生物学活性和特殊疗效，尤其是长期使用无遗传风险的巨大优势，使得人们从植物精油中寻找治疗人类疑难疾病药物并深究其机理的兴趣越来越浓[1-2]。
白血病发病率和死亡率居儿童及青少年恶性肿瘤首位，且发病率呈逐年增加趋势。
因此，深入开展对白血病致病机制研究并开发新型、高效、价廉的治疗药物，不仅是从事相关专业研究人员的当务之急，而且是关系到儿童和青少年健康大事。
从目前来看采用纯中药医治白血病堪为上策。
从天然植物中提取的香精油资源丰富，来源广泛，价格低廉，若开发成抗白血病药物，将可使大多数低收入患者受益。
山苍子[Litsea cubeba（Lour）Pers]主要分布在我国，是重要的药用植物和香料经济植物。
山苍子果实既可入药，又被用作提取精油的主要原料。
我国山苍子精油生产和出口量居世界第一，其主要成分柠檬醛含量高达65-80%，易提纯，只要控制好温度和蒸汽压，即可获得96.3%以上的纯度。
文献记载山苍子精油不仅能治疗胃病、关节炎、溃疡等多种疾病，而且能用作合成医药和化妆品的原料、食品及日用化工产品的增香剂及农产品的防霉保鲜剂。
大量研究表明，柠檬醛为多用途与功效山苍子精油的有效单体。
毒理学研究表明，无论是山苍子精油还是柠檬醛单体，对动物和人体均无急性和累积性毒害，毒性较低[3-4]。
山苍子精油药用范围虽广，但抗白血病功效未见文献报道。
近五年来，国外研究表明，含柠檬醛精油及单组分柠檬醛具有显著特异性诱导人白血病细胞凋亡活性，但机制仍不明晰[5-7]。
总之，山苍子精油不仅资源丰富，而且提取高纯度柠檬醛（含量大于96%）的可操作性好。
所以对这一大宗中药资源抗白血病新药效给予系统而科学评价，拓展其新的应用领域并开发出具有自主创新特色的中药制剂、中药单体乃致中药新药具有重要的经济和社会效益。
这不仅可使大多数低收入患者受益，提高他们健康水平和生活质量，而且是推进中药事业走向现代化的重要契机。
本项目拟采用生物化学及生物物理学的方法研究不同的香精油对白血病细胞株（K562、HL-60）生长、繁殖及代谢的影响，了解不同香精油抗白血病功效及对细胞生理状态的影响，并通过拉曼指纹图谱变化，研究表征山苍子油抗白血病功效的最佳参数，为拓展山苍子油在中药领域应用奠定理论基础。
二、研究内容2.1白血病细胞株的培养2.1.1细胞株：HL-60、K562 (中山大学生科院)，冻存于－70℃到－80℃。
2.1.2细胞复苏方法：快速融化法，保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞[8]。
2.1.3培养基：RMPI1640细胞培养液：含10 %胎牛血清、双抗(青、链霉素，各100 UI/ml)2.1.4培养条件：37℃、5% CO2的恒温箱培养2.1.5培养密度：5×104个/ml，每2-3天更换培养基并进行传代2.2细胞生长曲线、培养细胞起始浓度和药物作用时间的确定分别用血球计数法和MTT法[9]测定白血病HL-60细胞株生长曲线，并据此得出实验时选取细胞培养的细胞浓度和用香精油处理细胞时选择的加药时间。
2.3 MTT法对不同香精油抑制白血病细胞生长作用比较通过不同香精油不同浓度作用HL-60细胞不同时间，再通过MTT 法检测其抑制率来反映不同香精油对HL-60细胞抑制作用。
在此基础上我们根据抑制作用结果从中选出几种香精油以及最佳的作用时间和作用浓度进行下一步实验。
2.4 柠檬醛对白血病细胞代谢酶活性的影响2.4.1 HL-60细胞乳酸脱氢酶活性测定2.4.1.1 酶分离提取和考马斯亮兰法测定酶提取液中蛋白含量[10-13] 2.4.1.2 体外乳酸脱氢酶酶促反应体系构建及酶活性测定[14]反应公式：LDH丙酮酸+ NADH + H+ 乳酸+ NAD+ NADH在340 nm处有特殊吸光，而NAD+没有这样的性质，所以可以记NADH在酶促反应中量的增加即在340 nm处吸光度的增加可以表示LDH的活力。
2.4.2 HL-60细胞琥珀酸脱氢酶活性测定2.4.2.1酶分离提取和考马斯亮兰法测定酶提取液中蛋白含量[15-17] 2.4.2.2体外琥珀酸脱氢酶（MTT检测底物）反应体系的构建及酶活性测定[18]NBT(氯化硝基四氮唑兰)法：以NBT为受氢体，接受由琥珀酸钠盐被酶作用而脱下来的氢，进而形成蓝紫色的沉淀，于反应体系中加入PMS混匀，37 ℃反应45 min，然后加入TCA终止反应，再加入异丙醇溶解显色，混匀，在548 nm处测OD值。
规定：45 min内548 nm下OD值为1.0时的酶量为一个活力单位，比活力＝活力单位/毫克蛋白。
2.5 流式细胞术研究柠檬醛对白血病细胞诱导凋亡作用以白血病细胞HL-60和K562细胞株为实验细胞株，采用双染法进行不同浓度柠檬醛在作用4h和24h下的细胞凋亡分析。
首先进行Annexin V-FITC染色，上机前5分钟再加入PI染色，流式细胞仪是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的细胞或微粒逐个通过样品池，同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代表前向散射角、侧向散射角和不同荧光强度的电脉冲信号，经计算机处理形成相应的点图，直方图和加三维结构图像进行分析。
利用流式细胞仪可以检测出白血病细胞经过柠檬醛作用后的凋亡情况。
通过此步骤可以检测出柠檬醛对白血病细胞核DNA的影响以及柠檬醛作用白血病细胞后细胞凋亡情况。
2.6 柠檬醛对白血病细胞表面Zeta电位和Kc的影响肿瘤细胞表面所带负电荷数量比较正常细胞明显要多，这与肿瘤细胞扩散和迁移能力直接相关，也是肿瘤细胞的一个显著特征。