正交设计优化紫荆果总黄酮醇提工艺
正交试验法优化香附总黄酮提取工艺
正交试验法优化香附总黄酮提取工艺1. 背景和目的香附（scientific name：Vladimiria souliei Franch），又称“防风”，是一种传统的中草药。
其主要活性成分为总黄酮，具有一定的抗氧化、抗炎、抗氧化、抗肿瘤和解热镇痛等多种药理活性。
因此，研究香附总黄酮的提取工艺具有广泛的研究价值和应用前景。
本文旨在利用正交试验法对香附总黄酮的提取工艺进行优化，以获得提取率高、工艺简便的提取方法。
2. 实验设计2.1 实验设备和试剂实验使用的设备：混合器、研钵、吸附剂、离心机、pH计等；实验所需试剂：香附药材、醇类、乙醇、丙酮、甲酸、乙酸、二氯甲烷等。
2.2 实验步骤1.香附药材研磨成为粉末。
2.将香附粉末加入不同的溶剂中（以1 g/ 10 ml为比例），进行不同条件下的提取过程。
（乙醇）+醋酸、（乙醇）+ 甲酸、（乙醇）+ 丙酮、（乙醇）+ 水、或（乙醇）+ 二氯甲烷。
3.异常溶剂法进行脱色。
4.吸附剂进行精制。
2.3 正交试验设计选取溶剂配伍方式、提取时间和提取温度作为影响提取率的三个因素，采用L9（3的4次方）正交设计，共进行9次实验，每组实验取平均值计算提取率。
3. 结果和分析3.1 正交试验数据根据L9（3的4次方）正交试验法的设计，得到如下的9组数据（单位：%）：试验序号溶剂配伍提取时间提取温度提取率1 A A A 0.9872 A B B 0.9963 A C C 1.1664 B A B 0.9765 B B C 1.0206 B C A 1.1357 C A C 1.0808 C B A 1.0459 C C B 1.041其中，A、B、C分别代表提取时间、提取温度和溶剂配伍方式。
3.2 数据分析通过正交试验的数据分析可得到不同因素对提取率的影响顺序为：溶剂＞提取温度＞提取时间，即溶剂配伍方式对提取率的影响最大，提取时间次之，提取温度的影响最小。
3.3 最佳工艺条件通过综合考虑各因素对提取率的影响，得出最佳的提取工艺：采用乙醇作为溶剂，提取时间为2 h，提取温度为50℃。
正交试验法优选田基黄中总黄酮提取工艺
分别精密量取一定浓度芦丁标准溶液 ０ 、 ．、 ． １ ５ ０
２０ ．、４０ ． ６０ ， 于 ５ｍＬ 容量瓶 中， ．、３０ ．、５０和 ． 置 ｍＬ ０
现代药理研究表明田基黄具有抑菌作用 ，保肝 作用 ， 抑制肿瘤作用 ， 对心血管系统作用， 目前田基 黄已被制成注射剂用于临床治疗急、慢性肝炎【 。 】
按 照１ ． ．２ ２ 方法测定 ，计算出相对平均标准偏差 ，
第 ｌ 期 ２
易运红等 ：正交试验法优选 田基黄中总黄酮提取工艺
２ ｌ
ＲＤ ．６ Ｓ 为０ ５ ％。仪器的精密度 良 。 ４ 好
１ ． 稳定性试验 ．４ ２ 在加入 １％ Ｎ Ｏ 后０ １ｍｉ￣内测定 ，计算 ０ ａＨ ，２ ｎ － ；
此本 文就 提取 工艺展 开研 究 。
１ ． 得芦丁浓度 ｘ 与吸光度 ｙ关系曲线的回归方程 式 ： ．． Ｘ ０ ０１ ， ５ －． ２ ，相关系数 ：Ｒ＝ ． ９ 。浓 ２７ ０ ２０ ９ ５ ９
度在 ０ ０．． ５ ｇ Ｌ范围内线性关系良好 。 ．５ ０ ｍ／ ０ ０２ ｍ
０． ５ ３ ｙ １ ５７ 一 ０ ００ ２ ｘ ２１
中图分类号 ：Ｒ ５ ２ ． ８５ 文献标识码 ；Ａ 文章编号 ：１ ７－９ ５２ １） ０ ００ ６ １ ０ （０ ０． ２ ．３ ９ ０
田基黄味甘、微苦 ，性凉，具有清热利湿 、散 瘀止痛 、消肿解毒 的功效临床用于治疗急、慢性肝
加蒸馏水使体积达到 １ｍ ， ６ Ｌ分别加 ５ ａ Ｏ Ｌ ％Ｎ Ｎ ２ ｍ ， ２
摇匀， 放置 ６ ｉ 后分别加 １％ Ａ （ Ｏ ）２ Ｌ摇匀， ｍｎ ０ Ｉ ３ ｍ ， Ｎ ３ 再放置 ６ ｉ后分别加４ ａ Ｈ２ ｍ ， ｍｎ ％Ｎ Ｏ Ｌ加水至刻度， ０
正交设计优选细果角茴香中总黄酮的提取工艺条件
正交设计优选细果角茴香中总黄酮的提取工艺条件崔廷金【摘要】[目的]研究细果角茴香中总黄酮的最佳提取工艺,并测定其含量.[方法]以总黄酮含量为考察指标,以甲醇浓度、料液比和提取时间为考察因素,通过正交试验确定提取总黄酮的最佳条件.[结果]吸收曲线测定结果显示,总黄酮在510 nm处有最大吸收.正交试验结果可知,最佳的提取条件为A1B2C2,即甲醇浓度为50％,料液比为1∶15(g/ml),超声提取2次,每次提取时间为20 min;在此条件下,总黄酮的含量最高为48.63 mg/g.[结论]该方法操作简捷,结果准确可靠,提取效率高.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2013(000)025【总页数】2页(P10282-10283)【关键词】细果角茴香(Herb of Thinfruit Hypecoum);超声波法;总黄酮;提取工艺;含量测定【作者】崔廷金【作者单位】青海省西宁市八一路陆军四医院,青海西宁810007【正文语种】中文【中图分类】S567细果角茴香(Herb of Thinfruit Hypecoum)为罂粟科(Papaveraceae)角茴香属(Hypercom)一年生草木植物节裂角茴香(Hypercom leprosarium Hook.f.et Thomas)的干燥全草［1］，别名角茴香(《青海常用中草药手册》)，巴尔巴大、哇日哇哒(藏名)。
其味苦、性凉，具有解热镇痛和消炎解毒的功效［2］，主治伤风感冒、头痛、四肢关节疼痛和胆囊炎等，并能解食物中毒［3］。
翻阅文献发现，细果角茴香还能治流感、咽喉肿痛和目赤等症［4］。
药理研究表明，细果角茴香中含有多种生物碱成分，含量约为0.38%;其中分离出原阿片碱85.0%、血根碱0.1%、白屈菜红碱及黄连碱痕迹量，无定形非酚型碱7.8%，无定形酚型碱2.7%。
而且，细果角茴香中还含有黄酮类成分，而黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化和降糖等多种生理活性，对藏药生产有很大的意义。
紫荆皮总黄酮超声提取工艺优化
综合单 因子试验结果 ， 选取料液 比、 水浴温度 、 提取 时间 ３个 因素， 采用苯酚 一硫酸 比色法并 经星点设计 试验最 终确 定了牡蛎 多糖 的最优提 取工艺 。试验结 果表 明， 因素 的 ３个 二次项对于提取率有较大影响 ， 交互项影 响相对较小 ， 因素 各
对紫荆皮 中总黄酮 的含 量进行 了测定 ， 以总黄酮得 率为考 并
察指标 ， 优化其超声提取工艺， 旨在为进一步研究开发紫荆提
供依据。
１ 材料与方法
１ １ 材 料 和 试 剂 ．
心血管疾病方面有强心、 抗心肌缺血 、 扩张血管 、 、 降压 抗心律
失常、 降血脂 、 抗动脉粥样硬化等 多种作用 ， 能有效 抑制 血小
［０ Ｈ ｕ Ｃ ｅ １ ］ ｏ Ｘ， ｈｌＷ．Ｏ ｔ ｉ ｔ ｎｏ ｅｔ ｃ ｏ ｒ ｅ ｆ ｒ ｅ ０ － ａ ｐ ｍ ｚ ｏ ｆ ｘ ａ ｉ ｐ ｃｓ ｏ ｃ ｄ Ｊ ｉ ａ ｉ ｒ ｔｎ ｏ ｓ ｕ ｐ ｙ
限公 司） Ｓ ２ １ Ｈ ，Ｋ ５ ０ Ｐ超声 波 机 （ 上海 科 导超 声 仪 器有 限公
（ 上接 第 ２ ５页） ６
参考 文献 ：
［］ １ 巫旗生 ， 王晓清 ， 曾志南 ， 等．中国牡 蛎分类方 法研 究进展 ［ ］ Ｊ．
福建水产 ，０ １ ３ （ ）６ ７ ． ２ １ ，３ １ ：７— ２
对提取率的影 响不是简单的线性关系 。
［］ 妍， ７李 魏建和 ， 许旭东 ， 苯酚 一 酸法定量测定桔梗 多糖的 等． 硫
研究［］ Ｊ．时珍 国医国药 ， ０ ， （ ）５ ７ ２ ９２ １ ： — ． ０ ０
［］ ９ 蔡恩博 ， 张崇禧 ， 朱启光 ， 星点设 计 一 等． 效应 面法优 选暴 马丁香
正交试验法优化草莓中总黄酮的提取工艺研究
草 莓 又 叫 木 莓 Ｊ 、红 梅 、杨 梅 、地 梅 等 ， 属 于蔷 薇科 蔷薇 亚 科 草莓 属 ，多 年生 草 本 植 物 的 浆果 ，外 观呈 心形 ，主要 分 布 在我 国东 部 沿 海
ａｏ ｃｎｅｔ ｔ ｎ＞ｓｌ ｌｕｄｒｔ （ ／ Ｌ ＞ｅｔ ｃ ｏ ｍ ＞ｅｔ ｃ ｏ ｍ ｅａ ｒ，ｈ ｐ ｍ ｍ ｅｔ ｃｎ ｏ— ｎｌ ｏｃｎｒ ｉ ａｏ ｏｉ ｉ ｉ ｉ ｇ ｍ ） ／ ｄ ｑ ａｏ ｘｒ ｔｎｔ ｅ ｘ ａｔ ｎｔ ｐｒｔ ｅ ｔｅ ｔ ｕ ｘｒ ｔ ｇｃｎ ａｉ ｉ ｒ ｉ ｅ ｕ ｏｉ ａｉ
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正交试验 法优 化草莓 中总黄 酮的提取工艺研究
扶 庆 权 ，徐 鉴
（ 京 晓庄 学 院生 物化 工与环 境 工程学 院 ，南京 南 ２ ７ ） １ １ １ １
摘
要 ：对草莓 中黄酮类物质的提取工艺进行了优化 ，在单因素的基础上 ，采用 （ 正交试验设计 ，研 ３）
ｔｅｅｔ ｃｏ ｔ ｏ ｔ ａｏｏ ｓ ａ ｕ ｉ ｃｏ ｉｇ ｏ ９３ ） ｏｔｏｏａ ｔ ｔ Ｔ ｅ ｅｕｔ ｓｏ ｅ ａ ｆｃ ｒ ｉ— ｈ ｘｒ ｔｎｒ ｅ ｆｏ ｌ ｖｎ ｉ ｓ ｔｄｅ ａｃｒ ｎ （ ｒ ｇｎ ｓ． ｈ ｓｌ ｗ ｄｔ ｔａｔ ｓ ｎ ａ ｉ ａ ｔａｆ ｌ ｄｗ ｓ ｄ ｄ ｔＬ ｈ ｌｅ ｒ ｓｈ ｈ ｏ
正交实验法优化紫茎泽兰总黄酮提取的技术创新
正交实验法优化紫茎泽兰总黄酮提取的技术创新紫茎泽兰（Eupatorium adenophorum Spreng）菊科泽兰属植物，因其茎、叶柄呈紫色，故名紫茎泽兰[1]，是我国危害最为严重的外来入侵物种之一[2]。
紫茎泽兰化学成分分析文献显示，其含倍半萜、甾体、三萜、黄酮、苯丙素酚等类型化合物[3-4]。
近年来，黄酮类化合物因其在保护心血管、抗氧化自由基等方面的功效而受到关注。
摸索紫茎泽兰中黄酮的提取工艺，利用紫茎泽兰提取黄酮，原材料经济、易得，亦为紫茎泽兰的防治开辟一条新的途径。
杨郭等[5]研究了紫茎泽兰总黄酮的提取工艺，但没有把影响得率的重要因素之一“提取次数”纳入工艺提取设计之中，本研究将乙醇浓度、提取温度、液料比、提取时间、提取次数作为考察因素优化紫茎泽兰总黄酮提取工艺。
1仪器、试剂与材料主要仪器、试剂721型分光光度计（四川分析仪器厂）、超声波器、旋转蒸发仪、数显恒温水浴锅HH-2型（国华电器有限公司）、远红外恒温干燥箱、赛特路斯电子分析天平BS210S型、XA-1型高速万能粉碎机（银河实验仪器厂）。
芦丁标准品；乙醇（分析纯，重庆化学试剂总厂）；10%硝酸铝（分析纯，天津市化学试剂三厂）；5%亚硝酸钠（化学纯，北京化工厂）；1mol/L氢氧化钠（分析纯，天津致远化学试剂公司）。
材料紫茎泽兰总黄酮含量在发育过程中呈不断上升趋势，其在夏季生长旺盛，夏秋之交黄酮含量较高。
在九月份采集成熟、肥厚的紫茎泽兰叶片（采至昆明市西南林业大学校园林地）风干备用。
在使用前将风干的材料置于恒温干燥箱中，至60℃烘干，捣碎。
2方法采用乙醇浸提法提取紫茎泽兰中黄酮化合物，以芦丁为标准品，制作浓度—吸光度标准曲线，可见—紫外分光光度计法测定提取液的吸光度，从而计算黄酮得率。
通过单因素试验和正交试验，对影响黄酮得率的主要因素进行筛选，从而得到紫茎泽兰中总黄酮的最佳提取工艺。
在测定样品吸光度时，加入亚硝酸钠，防止黄酮类化合物被氧化；加入硝酸铝，形成黄酮铝络合物，增强其吸光度；最后，加入氢氧化钠，使其吸收峰红移，利于排除其他物质的干扰。
正交实验优化啤特果中总黄酮提取工艺
Abstract: The extraction process of total flavonoids from Pyrus sinkiangensis by ethanol reflux method was optimized郾 The optimum extraction conditions of total flavonoids from Pyrus sinkiangensis were determined by the method of absorbance determination, single factor test and orthogonal test郾 The factors affecting the extraction rate of total flavonoids from Pyrus sinkiangensis were material-liquid ratio, alcohol concentration, extraction time and extraction temperature in turn郾 The optimum conditions of extracting total flavonoids from special fruit were as follows: ratio of material to liquid was 125, ethanol concentration was 70% , extraction temperature was 80 益 , and extraction time was 3郾 5 h郾 Under these conditions, the extraction rate of total flavonoids from the fruit was 7郾 95% 郾
正交设计优选枳椇子中总黄酮的提取工艺
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｔ ｏ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｆ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｆ ｌ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｔｕ ｒ ｎ ｊ ｕ ｊ ｕ ｂ ｅ Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｛ ｌ ａ ｖ ｏ ｎ ｏ ｉ ｄ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｔｕ ｒ ｎ ｊ ｕ ｊ ｕ ｂ ｅ ｂ ｙ ｕ ｌ ｔ ｒ ａ ｓ ｏ ｎ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ，ｃ ｏ ｎ ｓ ｉ ｄ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｚ ｅ ｏ ｆ ｒ ａ ｗ ｍａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ，ｍａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ — ｔ ｏ ｒ
Ｈｏ ｖ ｅ ｎｉ ａ ｄ ｕ ｌ ｃ ｉ ｓ Ｔｈ ｕ ｎｂ ｂ ｙ Ｏｒ ｔ ｈ ｏ ｇ ｏ ｎａ ｌ Ｄｅ ｓ ｉ ｇ ｎ
ＴＩ ＡＮ Ｚ ｈ ｉ ｙ ｏ ｎ ｇ ，ＣＨＡＩ Ｚｈ ｅ ｎ ｇ，ＸＵ Ｙａ ｆ ｅ ｉ ，Ｚ ＨＡＯ Ｊ ｉ ｎ ｇ ｊ ｉ ｎ ｇ，Ｌ Ｉ ＮＧ Ｃｈ ｕ ｎ ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ
ｌ ｉ ｑｕ ｉ ｄ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ，ｅ ｘｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｍ ｐｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ，ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏｎ ｆ ｒ ｅ ｑｕｅ ｎ ｃ ｙ ａ ｓ ａ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｎｇ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｂｙ Ｌ９（ ３ ４） ｏ ｒ ｔ ｈ ｏｇ ｏｎ ａ ｌ ｄ ｅ ｓ ｉ ｇｎ； ｕｓ ｉ ｎ ｇ
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第33卷第5期2014年10月大豆科学SOYBEAN SCIENCEVol．33No．5Oct．2014正交设计优化紫荆果总黄酮醇提工艺李红平，董方亮（鹤壁职业技术学院，河南鹤壁45803）摘要：以紫荆果总黄酮提取率为考察指标，采用乙醇浸提法提取紫荆果中总黄酮，对工艺参数通过单因素试验及正交试验进行优化。
通过与二丁基羟基甲苯（BHT ）的对照实验，初步探究了紫荆果中的总黄酮对羟自由基（·OH ）的清除活性。
结果表明：乙醇浸提法最佳工艺为料液比为1．5ʒ60（g ʒmL ），浸提时间为2．5h ，浸提温度为80ħ，提取剂乙醇浓度为75%。
此条件下总黄酮提取率可高达2．910%。
紫荆果中的总黄酮对羟自由基（·OH ）清除活性高于相同浓度的BHT 。
关键词：紫荆果；总黄酮；提取率；清除活性；羟自由基中图分类号：S131；S132文献标识码：A DOI ：10．11861/j．issn．1000-9841．2014．05．0735收稿日期：2013-11-19基金项目：河南省科技攻关计划（122102110236）。
第一作者简介：李红平（1966-），男，硕士，副教授，主要从事应用数学研究。
E-mail ：hbzyjsxy@163．com 。
Orthogonal Design Optimization for Extraction Process of Total Flavonoids in Cercis ChinensisLI Hong-ping ，DONG Fang-liang（Hebi College of Vocation and Technology ，Hebi 458030，China ）Abstract ：To optimize the extraction of total flavonoids in Cercis chinensis Bunge and study the scavenging effect on hydroxyl radicals ，flavonoids from Cercis chinensis Bunge were extracted by using ethanol．The preferred extraction conditions were deter-mined by single factor experiment and orthogonal experiment．The result showed that the optimal condition was ethanol concen-tration 75%，solid-liquid ratio 1．5ʒ60（g ʒmL ），temperature at 85ħand extraction for 2．5h．The extraction ratio of flavonoids reached up to 2．910%by using spectrophotometry．Antioxidant effects of flavonoids and BHT were measured to remove hy-droxyl radicals by comparative experiments ，the effect of the same concentration of flavonoids was better than BHT．Key words ：Cercis chinensis Bunge ；Flavonoids ；Extraction ratio ；Scavenging effect ；Hydroxyl radicals黄酮类化合物是一类多酚类物质，广泛存在于高等植物及以植物为原料的食品中，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，参与蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达等生理活动，是一类极具开发前景的天然药物［1-3］。
紫荆（Cercis chinensis Bunge ）属豆科植物，其花、果、树皮和木材均可入药，具有活血行气、清热解毒、消肿止痛等功效［4］。
研究发现，紫荆含有丰富的黄酮类化合物［5］，目前已有关于紫荆花及紫荆皮总黄酮提取的研究［6-7］，但尚未发现有关紫荆果中总黄酮的研究报道。
本研究对紫荆果中总黄酮的含量进行了测定，以总黄酮提取率为考察指标，优化其醇沉提取工艺，并初步探究提取物的抗氧化性质，即对羟自由基的清除活性，为紫荆在医药领域的综合开发利用提供数据参考。
1材料与方法1．1材料1．1．1原料紫荆果，采集于郑州人民公园。
1．1．2试剂无水乙醇、芦丁、二丁基羟基甲苯、水杨酸、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠、硫酸亚铁、双氧水及氯化铁均为市购优级纯。
1．1．3仪器设备CP214C 电子天平（德国赛多利斯）、722N 可见分光光度计（上海光学仪器厂）、SHSG-3050型高速多功能粉碎机（上海硕光科技有限公司）、202-0A 电热恒温干燥箱（北京金志业仪器设备有限责任公司）、HH．S11-Ni4电热恒温水浴锅（北京三二八科学仪器有限公司）。
1．2方法1．2．1芦丁标准曲线的绘制准确吸取0．2mg ·mL －1的芦丁标准液0，2．50，3．50，4．50，5．50，6．50mL 分别置于50mL 容量瓶中，各加入5%亚硝酸钠溶液0．40mL ，摇匀，静置6min ；加10%硝酸铝溶液0．40mL ，摇匀，静置6min ；加4%氢氧化钠溶液5．00mL ，用浓度为70%的乙醇溶液定容至50．00mL ，摇匀，静置10min 。
在510nm 波长处以试剂空白为参比测定吸光度，绘制标准曲线得回归方程，A =－0．0053+0．2458C ，Ｒ2=0．99904。
1．2．2紫荆果总黄酮的提取将紫荆果洗净，干燥至恒重，磨碎，过40目筛。
准确称取2．0000g 的紫荆果粉末，用乙醇溶液作提取剂，水浴浸提，提取液过滤，用相同浓度的乙醇溶液洗涤并定容至50mL 容量瓶中，即得总黄酮提取液。
用分光光度法在510nm 波长处测紫荆果提取液的吸光度，按下式计算总黄酮提取率：736大豆科学5期总黄酮提取率（%）=CˑV1MˑV2ˑ50ˑ10－3ˑ100式中：V1为第二次定容后提取液的体积50mL；V2从母液中量取的提取液体积0．50mL；C为提取液中总黄酮浓度；M为样品（紫荆果）质量。
1．2．3紫荆果中总黄酮的提取单因素试验1）乙醇浓度对总黄酮提取率的影响：准确称取2．0000g 的紫荆果粉末，固定料液比为2ʒ60，改变提取剂乙醇浓度分别为55%、60%、65%、70%、75%、80%，在80ħ恒温水浴中浸提2h，将提取液冷却至室温过滤、洗涤、合并提取液和洗涤液，并用与提取剂相同浓度的乙醇溶液在50mL容量瓶中定容。
在510nm波长处测其吸光度，做3组平行试验。
将吸光度的平均值代入线性回归方程，计算提取液中总黄酮浓度和紫荆果中总黄酮提取率，选择较佳的提取剂浓度。
2）料液比对总黄酮提取率的影响：准确称取2．0000g的紫荆果粉末，固定提取剂乙醇的浓度为70%，提取温度80ħ，提取时间2h，改变料液比分别为：1．0ʒ60、1．5ʒ60、2．0ʒ60、2．5ʒ60、3．0ʒ60，以总黄酮提取率为指标，考察料液比对紫荆果总黄酮提取率的影响。
3）浸提温度对总黄酮提取率的影响：准确称取2．0000g的紫荆果粉末，固定提取剂乙醇浓度为70%，料液比为2．0ʒ60，提取时间2h，提取温度分别为50，60，70，80，85，90ħ，以总黄酮提取率为指标，考察提取温度对紫荆果总黄酮提取率的影响。
4）浸提时间对总黄酮提取率的影响：准确称取2．0000g的紫荆果粉末，固定提取剂乙醇的浓度为70%，料液比为2．0ʒ60，提取80ħ，浸提时间分别为1．5，2．0，2．5，3．0h，以总黄酮提取率为指标，考察提取时间对紫荆果总黄酮提取率的影响。
1．2．4紫荆果总黄酮最佳提取工艺优化在单因素试验结果基础上，以黄酮提取率为综合考察指标，选定料液比、浸提时间、浸提温度、乙醇浓度4个因素，每个因素3个水平，设计L9（34）表进行正交试验，优化紫荆果中总黄酮提取工艺条件。
1．2．5总黄酮对羟自由基的清除作用参考Fen-ton反应体系，加入不同体积的总黄酮提取液，在510nm波长处测定吸光度［8］。
扣除提取液的本底吸收。
计算提取液中总黄酮对羟自由基的清除率，并以二丁基羟基甲苯（BHT）为对照，比较两种抗氧化剂对·OH的清除活性。
·OH清除率（%）=A－（Ax-Ax0）Aˑ100式中：A0为空白对照溶液吸光度；Ax为提取液吸光度；Ax0为不加H2O2提取液的本底吸光度。
1．3数据分析采用Excel2003对数据进行处理分析。
2结果与分析2．1紫荆果中总黄酮提取单因素试验2．1．1乙醇浓度由图1可知，随着乙醇浓度的增加总黄酮提取率逐渐增加，当乙醇浓度为70%时，总黄酮提取率最高，之后提取率逐渐降低，即紫荆果中提取总黄酮，提取剂乙醇的较佳浓度为70%。
图1乙醇浓度对总黄酮提取率的影响Fig．1Effect of ethanol concentration onthe extraction ratio of total flavonoids2．1．2料液比由图2可知，料液比为2．0ʒ60（gʒmL）时，测定提取液的吸光度值最大，即总黄酮提取率最高，结果显示紫荆果中提取总黄酮的较佳料液比为2．0ʒ60（gʒmL）。
图2料液比对总黄酮提取率的影响Fig．2Effect of solid-liquid ratio on theextraction ratio of totalflavonoids图3浸提温度对总黄酮提取率的影响Fig．3Effect of temperature on theextraction ratio of total flavonoids2．1．3浸提温度由图3可知，在50 80ħ，总黄酮提取率随温度升高而增加，浸提温度高于80ħ，总黄酮提取率随着温度升高而降低，可能是温度升5期李红平等：正交设计优化紫荆果总黄酮醇提工艺737高引起的溶剂挥发损耗。
结果表明80ħ为较佳的浸提温度。
2．1．4浸提时间由图4可知，总黄酮提取率开始随着时间延长而增加，当时间超过2．0h后，总黄酮提取率随着时间延长而降低。
可能是随着时间延长提取剂乙醇的挥发损耗。
结果显示紫荆果中总黄酮提取的较佳浸提时间为2．0h。
2．2紫荆果中总黄酮提取条件优化表1可知，4个考察因素的主次关系为C＞B＞A＞D，即浸提温度为最重要的因素，其次依次为浸提时间、料液比和乙醇浓度。