(完整版)裂解液主要特点与区分
红细胞裂解液
红细胞裂解液货号GM02原理:本公司生产的红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称ACK Lysis Buffer，是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。
本裂解液经过优化配方，在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
主要有效成分为氯化铵。
本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
保存条件:4℃保存，一年有效。
试剂盒组成:使用说明：对于组织细胞样品：1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。
本步骤在室温或4度操作均可。
3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。
4℃离心效果更佳。
4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。
可再重复1次，共洗涤1-2次。
洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。
4℃离心效果更佳。
6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤：1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2. 对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。
本步骤在室温或4度操作均可。
3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。
裂解液主要特点与区分
用于普通的Western、IP或co-IP，我们推荐使用Western及IP细胞裂解液，该裂解液已被国内各大研究机构广泛使用，用户普遍反映很好。
裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA 团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。
另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。
对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。
如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。
如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。
RIPA裂解液（强）（RIPA Lysis Buffer）Code No. PG410501产品简介：➢本公司的RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
➢RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
➢RIPA裂解液（强）的主要成分为50mM Tris （pH 7.4），150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。
可以有效抑制蛋白降解。
➢用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用本公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒（PG400301）测定蛋白浓度。
裂解液
Western及IP细胞裂解液品名：Western及IP细胞裂解液简介：Western及IP细胞裂解液(Cell lysis buffer for Western and IP)，是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。
本细胞裂解液裂解的细胞，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris (pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等多种抑制剂。
可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。
由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
别名：Cell lysis buffer for Western and IP使用说明：对于培养细胞样品：1. 融解Western及IP细胞裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。
按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。
再用手指轻弹以充分裂解细胞。
充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
蛋白裂解液的种类
蛋白裂解液的种类蛋白裂解液是一种常用于蛋白质提取和分析的试剂，具有多种不同的种类和配方。
下面将介绍几种常见的蛋白裂解液及其特点。
1. RIPA裂解液RIPA（Radioimmunoprecipitation Assay）裂解液是一种常用的蛋白裂解液，用于细胞裂解和蛋白质提取。
它的主要成分包括盐类、离子型洗涤剂（如NP-40或Triton X-100）、蛋白酶抑制剂（如苯甲酰氟化物）和缓冲剂（如Tris-HCl）。
RIPA裂解液能够有效地破坏细胞膜，并且可以溶解大部分细胞组分，适用于多种蛋白质的研究。
2. SDS裂解液SDS（Sodium Dodecyl Sulfate）裂解液是一种常用的蛋白裂解液，用于蛋白质电泳分析。
它的主要成分是SDS和Tris-HCl缓冲液。
SDS裂解液能够使蛋白质变性并带负电荷，使其在电场中按照分子大小进行迁移，便于分析和测定。
3. Urea裂解液Urea裂解液是一种常用的蛋白裂解液，用于蛋白质的变性和解聚。
它的主要成分是尿素和Tris-HCl缓冲液。
尿素能够破坏氢键和疏水作用力，使蛋白质变性并解聚，便于后续的分析和提取。
4. NP-40裂解液NP-40（Nonidet P-40）裂解液是一种非离子型洗涤剂，常用于细胞裂解和蛋白质提取。
它的主要成分是NP-40和Tris-HCl缓冲液。
NP-40裂解液能够有效地破坏细胞膜，并且具有低表面张力和渗透压，有利于蛋白质的提取和分析。
5. RIPA-Lysis裂解液RIPA-Lysis裂解液是一种改良版的RIPA裂解液，常用于细胞裂解和蛋白质提取。
它的主要成分包括盐类、离子型洗涤剂（如NP-40或Triton X-100）、蛋白酶抑制剂（如苯甲酰氟化物）和缓冲剂（如Tris-HCl），与RIPA裂解液相似。
不同之处在于RIPA-Lysis裂解液中添加了额外的蛋白酶抑制剂和磷酸酯酶抑制剂，可以更好地保护蛋白质的完整性。
总结：蛋白裂解液是一种用于蛋白质提取和分析的重要试剂，常见的种类包括RIPA裂解液、SDS裂解液、Urea裂解液、NP-40裂解液和RIPA-Lysis裂解液等。
trizol裂解液成分
trizol裂解液成分
Trizol裂解液是一种广泛应用于生物实验的试剂，主要用于提取total RNA 和DNA。
它的使用方法简单，提取效果显著，被广大科研工作者所青睐。
那么，Trizol裂解液的成分是什么？它又是如何发挥作用的？下面我们将详细介绍Trizol裂解液的成分及其在实验中的应用。
Trizol裂解液的主要成分包括：异丙醇、氯仿、柠檬酸钠、糖类、酚类等。
这些成分在裂解液中各自发挥着特定的作用。
异丙醇和氯仿主要用于破碎细胞膜和细胞器，释放细胞内的核酸；柠檬酸钠和糖类则可以稳定核酸，防止其降解；酚类化合物具有抗氧化作用，可以保护实验过程中核酸的完整性。
Trizol裂解液在生物实验中的应用非常广泛。
无论是对植物组织、动物组织，还是微生物组织，都可以取得良好的提取效果。
在使用Trizol裂解液时，要注意以下几点：
1.实验操作过程中，要严格遵守试剂说明书，确保实验结果的准确性。
2.由于Trizol裂解液具有较强的裂解能力，操作时要尽量避免接触到眼睛和皮肤，以免对人体造成伤害。
3.在提取RNA时，最后一个步骤是加入70%的乙醇进行洗涤，以去除残留的DNA。
这一步非常重要，否则可能会影响RNA的纯度。
4.实验废弃物要妥善处理，遵守实验室废弃物处理规定，以防对环境造成污染。
总之，Trizol裂解液作为一种优秀的生物实验试剂，凭借其高效的提取能力和简单的操作方法，赢得了科研工作者的信赖。
了解其成分和应用注意事
项，能够帮助我们更好地利用Trizol裂解液，提高实验效率和成果。
P0013B-RIPA裂解液_强_
RIPA裂解液(强)产品简介：碧云天生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
关于不同的RIPA裂解液以及碧云天生产的其它裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页：/lysis-buffer.htm 。
RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris (pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。
可以有效抑制蛋白降解。
用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/ P0012S)测定蛋白浓度。
由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件：-20℃保存，一年有效。
注意事项：为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。
可以适当分装后使用。
需自备PMSF。
PMSF(ST506)可以向碧云天订购。
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
关于裂解液的选择，一方面可以参考碧云天的相关网页：/lysis-buffer.htm 选择合适的裂解液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：对于培养细胞样品：1.融解RIPA裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
裂解液强中弱功能对比
清，用于后续实验。
直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。
该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。
在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。
如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。
附：碧云天生产的各种裂解液主要特点、差异和选择用，发表大量SCI论文，用户普遍反映很好。
裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。
另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。
对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液(P0013)效果不是非常理想，可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。
如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。
如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液(P0013)效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。
使用RIPA裂解液(强)的用户也非常多，发表了大量SCI论文。
用于特定用途需要自行添加特定抑制剂或不需要添加抑制剂时，可以考虑选购P0013J或P0013K。
P0013J在很多时候可以兼容酶活性和生物小分子的检测，对于特定的酶或生物小分子的检测是否兼容需要自行测试，碧云天不提供具体的应用信息。
Ficoll400裂解液(40% wv)菲可400裂解液
北京吉美生物技术有限公司
Ficoll400裂解液(40% w/v)菲可400裂解液
产品简介：
密度梯度离心是利用特定的介质形成连续或不连续的密度梯后，将组织匀浆或细胞悬液置于介质顶部，通过离心力或重力作用使细胞或细胞逐级分离开来。
Ficoll 400又称聚蔗糖400，分子量40KD，具有无毒、低渗透压、密度高等特性，容易使细胞聚集，是分离细胞或细胞器较好的介质。
Jimei Ficoll 400裂解液主要用于分级梯度分离细胞器如完整细胞等，主要由PM缓冲液、Ficoll 400、蛋白酶抑制剂等组成，经过滤除菌。
根据梯度不同，Ficoll 400含量分别为20%~50%不等。
产品组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、根据实验要求操作。
注意事项：
1、注意无菌操作，避免反复冻融。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
4。
C可储存1个月。
相关产品：。
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用于普通的Western、IP或co-IP，我们推荐使用Western及IP细胞裂解液，该裂解液已被国内各大研究机构广泛使用，用户普遍反映很好。
裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA 团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。
另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。
对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。
如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。
如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或
NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。
RIPA裂解液（强）
（RIPA Lysis Buffer）
Code No. PG410501
产品简介：➢本公司的RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
➢RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
➢RIPA裂解液（强）的主要成分为50mM Tris （pH 7.4），150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，
sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。
可以有效抑制蛋白降解。
➢用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用本公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒（PG400301）测定蛋白浓度。
由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法
测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
包装清单：➢RIPA裂解液（强）
➢说明书100ml 1份
保存条件：➢-20℃保存，一年有效。
注意事项：➢为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。
可以适当分装后使用。
➢需自备PMSF。
➢裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
➢为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：➢对于培养细胞样品：
♦融解RIPA裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入
PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
♦对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍
（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗）。
按照6孔板每孔加入
150-250微升裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使裂解液和细
胞充分接触。
通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
♦对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每
孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。
再用手指轻弹以充
分裂解细胞。
充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
如果细胞量较多，必
需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
♦充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的
PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔
细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加
大裂解液的用量到200微升或250微升。
➢对于组织样品：
♦把组织剪切成细小的碎片。
♦融解RIPA裂解液，混匀。
取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
♦按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。
（如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
）
♦用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
♦充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
♦如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。
然后同样离心取上清，用于后续实验。
直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
➢注：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。
该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。
在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。
如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可检测到这些转录因子。