通用细胞裂解液
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介： 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测，尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成：操作步骤(仅供参考)：注意：绝大多数情况下，应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心，弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液：新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer ,10×)简介： 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH 4Cl 。
RBC Lysis Buffer(10×)配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
使用1×RBC Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测，尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。
组成：操作步骤(仅供参考)：注意：绝大多数情况下，应使用无菌去离子水稀释RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式细胞术除外。
(一)组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃离心，弃红色上清。
本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS 、HBSS 、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。
4℃，离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。
6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)1、制备细胞悬液：新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入1×RBC Lysis Buffer ，轻柔吹打混匀，裂解。
本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
白细胞裂解液产品说明书(中文版)
白细胞裂解液产品说明书（中文版）主要用途白细胞裂解液是一种旨在通过使用化学方法快速充分裂解纯化白细胞，并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下，通过超速离心，收集所有细胞内可溶性蛋白质的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种白细胞（动物、人体）等样品。
适用于后续蛋白鉴定、酶活检测、免疫反应等。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，裂解效果显著。
技术背景通过特殊裂解液和蛋白酶抑制混合剂可以防止裂解后细胞内各种活性蛋白成分遭到活化的内源性蛋白酶的破坏，充分保留细胞内蛋白质的免疫和生物学活性。
产品内容裂解液（）毫升产品说明书份保存方式保存在－℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证月用户自备缓冲溶液（）：用于清洗待测细胞样品毫升离心管：用于样品保存的容器毫升锥形离心管：用于样品操作的容器（微型）台式离心机：用于样品操作实验步骤1．移入待测的纯化白细胞悬液（细胞）到毫升锥形离心管2．放进℃台式离心机离心分钟，速度为3．小心抽去上清液4．加入毫升用户自备的缓冲溶液，用移液管混匀细胞颗粒群5．放进℃台式离心机离心分钟，速度为6．小心抽去上清液7．加入微升裂解液（）8．强力涡旋震荡秒，充分混匀9．放进冰槽里孵育分钟，期间每分钟强力涡旋震荡秒一次10．用微升枪头移出细胞液到无菌的毫升离心管11．（选择步骤）如暂时停止，放进－℃冰箱里储存备用12．即刻放进℃微型台式离心机离心分钟，速度为（或，例如）13．小心移取上清液到新的毫升离心管14．放进－℃的冰箱里备用15．或放进冰槽里，继续后续（西方杂交、免疫沉淀、酶活性检测等）操作注意事项1．本产品为毫升规格，次操作2．建议使用纯化白细胞样品3．待测白细胞样品为细胞，约毫克细胞重量4．根据细胞量的不同，按比例调整试剂用量5．所有操作均须在℃状态下进行6．建议裂解液（）适量分装储存7．如果放在－℃冰箱里储存备用，避免反复冻融8．本公司提供系列裂解试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定无核酶和蛋白酶污染。
联科生物科技有限公司流式细胞仪红细胞裂解液说明书
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: Lysing solution for FACS (10×)I.产品信息目录号: LSB01, LSB02, LSB03 规格: 100T,250T, 500T保存: 室温效期: 一年II.产品简介本产品可在哺乳动物外周血细胞经荧光素标记的抗体染色后，将红细胞裂解，随后进行流式分析。
当抗体加入到全血中，与白细胞特异性的表面抗原结合。
染色的样品随后用流式红细胞裂解液处理，在温和的低渗条件下裂解红细胞，从而保留住白细胞。
III.使用方法1.用蒸馏水将10×红细胞裂解液稀释为1×，稀释后的工作液可在室温保存一个月。
2.用合适的抗凝管收集全血。
3.取100 μl混匀的抗凝血到流式管。
4.按照抗体说明书加入合适的剂量，混匀后孵育适当时间。
5.加入2 ml 1×红细胞裂解液，涡旋振荡混匀。
6.室温避光孵育10分钟。
7.300 - 400 g离心5分钟，弃上清。
8.加入2 ml PBS，300 - 400 × g离心5分钟。
9.弃上清，加入0.5 ml PBS重悬细胞沉淀。
10.在流式细胞仪上进行分析。
如不能马上检测，请将样品避光保存于2 - 8℃。
IV. 结果示例图. FSC/SSC散点图。
全血细胞经1×红细胞裂解液裂解后，在Becton Dickinson FACSCalibur TM流式细胞仪。
通过FSC和SSC可以清晰地区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞，几乎很少细胞碎片产生。
Toll Free: 400 6721 600 (China Only) Website: V. 注意事项1.本产品经优化，专门针对临床实验室所用的流式细胞仪，包括Becton Dickinson FACSCalibur TM和CoulterEPICS® XL®。
组织细胞裂解液介绍
宝枫林组织细胞裂解液描述：组织细胞裂解缓冲液，为您提供完整的组织、细胞总蛋白制备方案，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。
裂解液中含有去氧胆酸钠和EDTA，裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
储存：4℃保存。
规格：100ml制备细胞裂解产物：1.800g 4℃离心 5 分钟收集培养细胞，估计细胞离心后的体积（PCV, 106cells=~20ul, 107cells=~100ul PCV）；2.每 50～100ul PCV 加入 5 倍体积组织细胞裂解缓冲液（250~500ul）,冰浴放置 10 分钟，每隔 5 分钟在漩涡混合仪上振荡 30 秒；3.12000g 4℃离心 10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物；注意：假如所得蛋白产物较为粘稠，可先95℃加热5 分钟，迅速冰浴5 分钟，然后再进行步骤3制备组织裂解产物：1.取 50-100 mg 组织在冰上剪成碎片，用预冷的 PBS 洗涤 2 次离心弃去 PBS；2.加入 0.5-1 ml 预冷的组织细胞裂解缓冲液；3.4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40 次，直到95％的细胞被破碎，然后在冰浴中放置10 分钟，并每隔5 分钟在漩涡混合仪上振荡 30 秒；4.12000g 4℃离心 10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物；注意：假如所得蛋白产物较为粘稠，可先95℃加热5 分钟，迅速冰浴5 分钟，然后再进行步骤4说明：1.在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物；2.在做免疫沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取，以避免某些不稳定蛋白的降解；3.在该裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂，用户可自行选择进行添加。
（完整版）裂解液主要特点与区分
（完整版）裂解液主要特点与区分⽤于普通的Western、IP或co-IP，我们推荐使⽤Western及IP细胞裂解液，该裂解液已被国内各⼤研究机构⼴泛使⽤，⽤户普遍反映很好。
裂解细胞或组织后，没有⾮常粘滞的透明状DNA 团块形成，不必采⽤超声处理等就可以⾮常理想地⽤于后续操作。
另外该裂解液裂解的产物也适合⽤于磷酸化蛋⽩的Western检测。
对于某些特殊蛋⽩的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是⾮常理想，可以尝试⽤RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。
如果发现IP的时候背景很⾼，即⾮特异的蛋⽩也被IP下来，则需要选⽤裂解强度较⾼的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。
如果发现⽬的蛋⽩⽆法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使⽤较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋⽩的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液效果不是⾮常理想，可以尝试使⽤裂解强度更⾼的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。
RIPA裂解液（强）（RIPA Lysis Buffer）Code No. PG410501产品简介：?本公司的RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是⼀种传统的细胞组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解得到的蛋⽩样品可以⽤于常规的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。
RIPA裂解液的配⽅有很多种，根据其裂解液的强度⼤致可以分为强、中、弱三类。
RIPA裂解液（强）的主要成分为50mM Tris （pH 7.4），150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂。
可以有效抑制蛋⽩降解。
非变性组织 细胞裂解液使用说明书
非变性组织/细胞裂解液使用说明书货号：R0030规格：100mL，本产品配有一支PMSF（1.5mL）保存：4℃保存，有效期1年，长期保存可置于-20℃。
产品简介：非变性组织/细胞裂解缓冲液内含非离子型去垢剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。
非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。
另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。
使用说明：根据使用量，取每1mL裂解液加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
混匀备用（PMSF现用现加）。
1、样品前处理：a)对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。
按照6孔板每孔加入150-250ul 裂解液的比例加入裂解液。
用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，冰上放置裂解5-10分钟。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。
按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液，冰上放置裂解5-10分钟。
期间可以用手指轻弹以充分裂解细胞。
充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。
按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。
用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：充分裂解后，将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western 和免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。
注意事项：为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。
可以适当分装后使用。
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
裂解时间可根据实验要求进行优化处理。
细胞裂解液选型与配制方法
细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。
对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。
去污剂主要类型及其作用根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。
去污剂主要类型及其作用根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类常用细胞裂解液#RIPA缓冲液最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名，是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。
常用配方：25 mM Tris-HCl, pH 7.6150 mM NaCl1% NP-401%去氧胆酸钠0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)兼容应用：BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。
#IP缓冲液是一种修饰型的RIPA缓冲液（不含SDS），可有效溶解细胞蛋白，但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物，可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。
常用配方：25 mM Tris-HCl, pH 7.4150 mM NaCl1% NP-401% mM EDTA5% 甘油兼容应用：BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。
#NP-40缓冲液NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂，常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。
常用配方：150mM NaCl1.0% NP-4050mM Tris-HCl，pH值8.0兼容应用：BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。
#Tris-Triton缓冲液非离子型表面活性剂，常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。
Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。
常用配方：10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4100mM NaCl1mM EDTA1mM EGTA1% Triton X-10010% 甘油0.1% SDS0.5% 去氧胆酸钠兼容应用：。
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通用细胞裂解液
产品简介：
多种成分均可以从细胞中提取总蛋白，例如去Triton、SDS、NP-40等。
通用细胞裂解液(Common Lysis Buffer )，是采用一种非变性裂解方法来裂解细胞，并获得总蛋白的裂解液。
所获得的蛋白质可以用于PAGE电泳，Western，免疫沉淀(Immunol Precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等，主要由Tris、Triton X-100等组成，并含有多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
用Common Lysis Buffer得到的蛋白，可以用leagene BCA蛋白浓度测定试剂盒(PT0001)测定蛋白浓度。
由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不宜用Bradford 法测定由通用细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。
主要成分：主要由Tris-HCl、NaCl、低浓度Triton X-100，低浓度sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA等多种蛋白酶抑制剂组成。
自备材料：
1、高速离心机
2、微量移液器
3、PMSF，亦可采购Leagene的苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)(PI0011)
操作步骤（仅供参考）：
(一)贴壁培养细胞
1、取Leagene Common Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，使用前取适当量的裂解液
加入PMSF，使其最终浓度为1mM。
2、去除贴壁细胞的培养液，用PBS、NS或无血清培养液清洗1次，低速离心，弃上清，
留取沉淀。
3、按照6孔板每1孔加入100～200μl含有PMSF的裂解液的比例，加入Common Lysis
Buffer。
移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。
冰上或4℃裂解30～60min。
4、10000～12000g，4℃离心10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二) 悬浮培养细胞
1、取Common Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，使用前取适当量的裂解液加入PMSF，
使其最终浓度为1mM。
2、低速离心悬浮细胞，一般500～1000g即可，弃上清，收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞，使其松散。
按照6孔板每孔细胞加入100～200μl含有PMSF的裂
解液的比例加入Common Lysis Buffer 。
通常6孔板每孔细胞加入100ul裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150～200μl。
再用手指轻弹以充分裂解细胞, 充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
4、10000～12000g，4℃离心10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可), 取上清。
5、进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三) 组织样本
1、取Common Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，使用前取适当量的裂解液加入PMSF，
使其最终浓度为1mM。
2、把组织剪切成细小的碎片，越小越好。
3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控
制在1～2min之内，以减少蛋白的降解。
4、按照每20mg组织加入100～200μl裂解液的比例，加入含有PMSF的Common Lysis
Buffer。
冰上或4℃裂解30～60min。
5、步骤3、4亦可以采用如下过程：按照每20mg组织加入100～200μl裂解液的比例，
加入含有PMSF的Common Lysis Buffer。
用玻璃匀浆器或组织研磨器匀浆，直至充分裂解，过程尽量控制在1～2min之内，以减少蛋白的降解。
6、10000～12000g，4℃离心10～15min (如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
7、进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
注意事项：
1、在壁培养细胞的操作步骤中，去除贴壁细胞的培养液后，如果血清中的蛋白没有干扰，
可以不用清洗。
2、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减
少裂解液的用量。
3、在培养细胞的裂解中，如果细胞量较多，必需分装成50～100万细胞/离心管，然后再
裂解。
大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex
使样品裂解充分。
然后同样离心取上清，用于后续实验。
直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5、溶解Leagene Common Lysis Buffer的时候，应尽量缩短溶解时间，避免裂解液中的
有效成分失效。
6、细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或4℃进行。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关产品：
产品编号 产品名称
PE0025SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×)
PE0080Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH6.8)
PE0081Tris-HCl缓冲液(1.5mol/L,pH8.8)
PE0092Tris-甘氨酸电泳缓冲液(5×SDS-PAGE)
PE0103丙烯酰胺:亚甲基双丙烯酰胺溶液(30%Acr-Bis,29:1)
PI0011苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)
PS0009Western及IP细胞裂解液
PS0013RIPA裂解液(强)
PT0001BCA法蛋白定量试剂盒
PT0013考马斯亮蓝快速染色液
PW0084丽春红S染色储存液(10×Ponceau S)。