如何配置细胞裂解液
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
组织裂解液和细胞裂解液如何配制组织裂解液和细胞裂解液是在实验室中用于将组织或细胞中的生物分子（如蛋白质、核酸等）裂解或溶解的溶液。
这些液体通常包含一系列试剂和缓冲液，以帮助维持理想的酸碱平衡和溶解条件。
以下是组织裂解液和细胞裂解液常见的配制方法。
1. 常用的组织裂解液配方为RIPA裂解液（RIPA lysis buffer），其成分包括：- 50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）-150mM氯化钠（NaCl）- 1% NP-40或Triton X-100-0.5%钠脱氧胆酸或SDS-0.1%SDS-1mMEDTA-1mM苯甲硫酸酯（PMSF）2.配制方法：a. 称取所需量的Tris-HCl缓冲液和NaCl溶解于蒸馏水中；b. 加入适量的PMSF和其他表面活性剂（如NP-40、Triton X-100）；c.配制完毕后，pH应调整至理想值；d.将裂解液过滤或使用高速离心去除悬浮物。
细胞裂解液的配制：1.常用的细胞裂解液配方为RIPA裂解液（同组织裂解液配方）或RIPA缓冲液（不含表面活性剂），以避免破坏裂解液中的蛋白质。
2.配制方法：a.同组织裂解液的步骤1；b.不加入表面活性剂，方便后续蛋白质的分析。
同时，裂解液的配制可以根据实验需要做出适当更改，以满足特定的研究目的和条件。
在裂解液的配制过程中，需要注意以下几点：1.所选择的缓冲液的pH应调整到适合所需实验的范围内，以确保溶液的稳定性；2.表面活性剂的添加量应适中，以满足蛋白质溶解的需要，但过多的添加会造成裂解液的稀释和稳定性下降；3.裂解液的配制应注意在低温下进行，以防止试剂的降解和活性的损失；4.在裂解液的使用过程中，最好将裂解液与细胞/组织充分接触，并且较长时间地孵育，以满足完整的裂解过程。
红细胞裂解液的配方
红细胞裂解液的配方红细胞裂解液是一种可以用于制备单细胞悬液的液体，是用于培养细胞、测定细胞特性或进行免疫学和细胞生物学分析时必不可少的。
红细胞裂解液的配方可能会随着应用不同而有所不同，一般来说，红细胞裂解液应该包含两种主要成分：溶剂和除去红细胞壁的酶。
第一步，选择溶剂。
红细胞裂解液的溶剂有多种，如水、生理盐水、PBS(phosphate buffered saline)、Tris-HCl（tris hydrochloric acid）及EDTA （ethylenediaminetetraacetic acid）等。
其中，生理盐水和PBS是最常用的，因为它们能够保持细胞环境的稳定性，PBS也是大多数细胞生物学实验中最常用的溶剂之一，而EDTA是一种有助于去除红细胞壁的溶剂。
第二步，选择酶。
红细胞裂解液中的酶一般是由trypsin或RNase组成，这两种酶都有助于去除红细胞壁，以便使细胞可以被溶解。
有些研究者会添加DNAse （deoxyribonuclease），这种酶可以帮助降解DNA，从而减少胎牛血清白蛋白对细胞的污染。
第三步，添加抗凝剂。
抗凝剂可以防止细胞在悬液中凝结，常用的抗凝剂有EDTA、heparin、citrate等。
抗凝剂的用量一般以0.1%~0.5%的浓度添加到溶剂中。
第四步，添加抗生素。
抗生素可以有效预防致病微生物的污染，常用的抗生素有penicillin/streptomycin、gentamicin、amphotericin B等，一般以100U/ml的浓度添加到溶剂中，以防止污染。
最后，将上述所有成分添加到一定的比例中，并搅拌均匀，就可以制备出一种完整的红细胞裂解液了。
通常情况下，红细胞裂解液的配方可以根据具体的实验要求而有所不同，可根据实验的具体要求调整添加的各种成分的比例，以满足实验的要求。
总之，红细胞裂解液的配方应当包括溶剂、除去红细胞壁的酶、抗凝剂和抗生素，经过调整添加各种成分的比例，即可制备出一种完整的红细胞裂解液。
红细胞裂解液使用说明
货号：R1010
规格：100ml /500ml
保存：2-8℃保存，保质期 2 年。常温运输。
产品简介：
红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细
胞的。
红细胞裂解液经无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离
其余同上。）
注意事项：
本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： D8210 DEPC P1020 1×PBS，PH7.2-7.4，0.01M H1020 Hanks，含钙镁，含酚红 31800 RPMI Medium 1640 T1300 胰蛋白酶－EDTA 消化液(0.25%)不含酚红 P1400 青链霉素混合液(100×) D1800 全血基因组 DNA 提取试剂盒 G1010 姬姆萨染色液（工作液）
纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
使用说明：
1. 1 倍体积的新鲜全血，加入 3 倍体积的红细胞裂解液。如 1ml 新鲜全血加入 3ml 红细胞
裂解液，轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置 15 分钟，其间轻轻涡旋混匀两次，红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。
3. 收集细胞：4℃，450×g 离心 10 分钟以沉淀白细胞，小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液
为 1ml，则加入 2ml 的红细胞裂解液。
பைடு நூலகம்
5. 4℃，450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞，小心并彻底吸去上清液。
6. 重悬细胞，用于后续实验；如提取 RNA，最好于此步开始使用 DEPC 水配制的溶液进行操
裂解液配制方法
裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 20211、红细胞裂解液（去除红细胞）配制试剂所需材料：1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solutiona) NH4Cl (1.5 M) 80 gb) KHCO3 (100 nM) 10 gc) Na4EDTA (10 nM) 3.7 gd) Distilled H2O 1000 mL2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用）配制步骤：1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中；2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml；3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。
保存：储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）；2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。
2、ripa裂解液NP-40 or Triton-100 1%TrisHCl (pH 50mmol/LNaCl 150mmol/LPMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml)Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml)Leupeptin（亮抑制肽） mlAprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml)（注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中；Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES；Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存）3、细胞裂解液（Tris－HCL）1．1M Tris 溶液的配置取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。
2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。
两种裂解液的成分和配制步骤
两种裂解液的成分和配制步骤 标签：细胞裂解液裂解液组织裂解液 摘要 : 细胞裂解液的成分包括了 Tris-HCl、EDTA 和 NaCl。
组织裂解液的成分主要 是 Urea、thiourea、CHAPS 等。
除了蛋白提取裂解液外，上述两种裂解液在一些实 验中的用途也不可小觑。
本文介绍这两种裂解液的配方和配制过程。
组织裂解液配 方：` 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2M thiourea(76.12) 1.5224 g 100mM DTT 0.1543 g 4% CHAPS 0.4 g 0.5mM EDTA 0.00146 g 40Mm Tris 0.0485 g 广州赛诚生物基因表达调控专题 Qiagen：10 个窍门助你更好掌控 qPCR 实验 沐赛生物:快速建立基因敲除细胞系 细胞裂解液的成分包括了 Tris-HCl、 EDTA 和 NaCl。
组织裂解液的成分主要是 Urea、 thiourea、 CHAPS 等。
除了蛋白提取裂解液外，上述两种裂解液在一些实验中的用途也不可小觑。
本文介绍这两种裂解 液的配方和配制过程。
组织裂解液配方：` 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2M thiourea(76.12) 1.5224 g 100mM DTT 0.1543 g 4% CHAPS 0.4 g 0.5mM EDTA 0.00146 g 40Mm Tris 0.0485 g 2%(v/v) NP-40 0.2 ml 1%(v/v) Triton X-100 0.1 ml 5mM PMSF 用前加 0.00871 g 2%pharmalyte 0.2ml 共 10ml 分装成 400µl/每管(可应用于 30-80 毫克组织裂解) 注：已配好分装成 400µl/每管可供应用 不需另配!!! 细胞裂解液配方： 6M Urea(60. 06) 1.8018 g 2M thiourea(76.12) 0. 7613 g 65mM DTT 0.050 g 4% CHAPS 0.2 g 40Mm Trisbase 0.02425 g 共 5ml 分装成 200µl/每管(可应用于 50-100ml 培养瓶内的细胞裂解) 1、溶液准备 2×样品缓冲液：130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴 酚蓝 , 2% DTT PBS ( pH7.4 ) ：10mM Na2HPO4 , 1.8mM KH2PO4 , 50mM NaCl , 2.7mM KCl RIPA 缓冲液：50mM Tris-HCl(pH7.4) , 150mM NaCl , 1mM EDTA , 1%Triton×100 , 1%去氧胆酸钠 , 0.1%SDS , 1mM PMSF , 1μ g/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 ( aprotinin ) , 1μ g/ml 亮抑蛋白酶肽 ( leupeptin )裂解液缓冲液：10mM Tris-HCl(pH7.4) , 0.15M NaCl , 5mM EDTA(pH8.0) , 1%Triton×100;使用前 加 5mM DTT,0.1mM PMSF 异丙醇和 5mM ε -氨基己酸 2、裂解液的制备 制备细胞裂解液： 收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用 PBS 清洗。
细胞组织裂解(提蛋白)方法
细胞组织裂解(提蛋白)方法编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（细胞组织裂解(提蛋白)方法）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。
本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为细胞组织裂解(提蛋白)方法的全部内容。
蛋白匀浆缓冲液：50 mM Tris—HCl (pH7。
5) 150 mM NaCl 5 mM EDTA 1 % NP-40 1 mM PMSF操作步骤直接用这个进行组织匀浆然后于10000 rpm 离心20分钟收集上清作SDS－PAGE电泳从染色的情况来看所得到的总蛋白纯度都不错条带比较清晰。
我是作的小鼠八种常规组织也包括肾脏在内.将抽提好的蛋白分装后直接放在负八十保存。
上样大概3~8ul每孔都可以的具体看个人需要。
70v 浓缩,150v分离第二种方法裂解液配方: 尿素：8M CHAPS：4％DTT：65mM(现加) PMSF：1mM(现加）MiliQ 水操作步骤：取300mg样品在液氮环境下研磨，加入1ml裂解液混匀，室温静置1小时（实验证明改为匀浆更好，蛋白降解轻），15000g离心1小时，取上清测定蛋白质浓度。
在裂解液中加IPG buffer有两个作用:1，增强蛋白质的溶解性2,可以结合核酸，在沉淀的时候予以除去。
建议最好加,浓度从0。
5—2％不等（这取决于您样品蛋白质的难溶程度）。
IPG buffer 是载体两性电解质，IPG buffer另外一个作用是促进蛋白质溶解的，所以IEF前一定要加,裂解液中没有IPG buffer可以么？（可以的，最后上胶条的时候可以再加）不过，我觉得液氮研磨以后，最好是粗离心一下,把一些结缔组织给离心掉（150g既可)然后再加裂解液。
如何配置细胞裂解液
如何配置细胞裂解液
组织裂解液（全细胞蛋提取）：
1：Tris-HCL 50mmoL/L PH 7.4
2: Nacl 150 mmoL/L
3: 去氧胆酸钠0.25%
4：NP-40或Triton-x-100 1%
5: EDTA 1 mmoL/L
6：PMSF 1 mmoL/L
7：Aprotinin 1μg/ml
8: leupeptin 1μg/ml
9: pepstain 1μg/ml
其中:7,8,9作用不持久，要使用前加入。
细胞裂解液：1：NP-40裂解体系：150 mmoL/L Nacl 1.0%NP-40或Triton-x-100
50 mmoL/L Tris(PH8.0)
2：RIPA裂解体系：150 mmoL/L Nacl
1.0%NP-40或Triton-x-100
0.5%脱氧胆酸钠
0.1%SDS
50 mmoL/L Tris( ph8.0)
如何配置细胞裂解液 如何配置细胞裂解液 组织裂解液(全细胞蛋提取): 1:tris-hcl 50mmol/l ph 7.4 2: nacl 150 mmol/l 3:去氧胆酸钠0.25% 4:np-40或triton-x-100 1% 5: edta 1 mmol/l 6:pmsf 1 mmol/l 7:aprotinin 1μg/ml 8: leupeptin 1μg/ml 9: pepstain 1μg/ml 其中:7,8,9作用不持久,要使用前加入. 细胞裂解液:1:np-40裂解体系:150 mmol/l nacl 1.0%np-40或triton-x-100 50 mmol/l tris(ph8.0) 2:ripa裂解体系:150 mmol/l nacl 1.0%np-40或triton-x-100 0.5%脱氧胆酸钠 0.1%sds 50 mmol/l tris( ph8.0) 下载文档原格式( word原格式 ,共1页)
(推荐)细胞组织裂解(提蛋白)方法
第一种方法蛋白匀浆缓冲液：50 mM Tris-HCl (pH7.5) 150 mM NaCl5 mM EDTA1 % NP-40 1 mM PMSF操作步骤直接用这个进行组织匀浆然后于10000 rpm 离心20分钟收集上清作SDS－PAGE电泳从染色的情况来看所得到的总蛋白纯度都不错条带比较清晰。
我是作的小鼠八种常规组织也包括肾脏在内。
将抽提好的蛋白分装后直接放在负八十保存。
上样大概3~8ul每孔都可以的具体看个人需要。
70v 浓缩，150v分离第二种方法裂解液配方：尿素：8M CHAPS:4% DTT:65mM(现加）PMSF:1mM(现加）MiliQ 水操作步骤：取300mg样品在液氮环境下研磨，加入1ml裂解液混匀，室温静置1小时（实验证明改为匀浆更好，蛋白降解轻），15000g离心1小时，取上清测定蛋白质浓度。
在裂解液中加IPG buffer有两个作用:1,增强蛋白质的溶解性2,可以结合核酸,在沉淀的时候予以除去。
建议最好加，浓度从0.5-2%不等（这取决于您样品蛋白质的难溶程度）。
IPG buffer 是载体两性电解质，IPG buffer另外一个作用是促进蛋白质溶解的,所以IEF前一定要加，裂解液中没有IPG buffer可以么？（可以的，最后上胶条的时候可以再加）不过，我觉得液氮研磨以后，最好是粗离心一下，把一些结缔组织给离心掉（150g既可）然后再加裂解液。
裂解液加1ML应该没什么问题，主要取决你以后蛋白的浓度。
用这个方法最好经丙酮沉淀一次比较好）第三种方法建议最好加完裂解液后再用超声波破碎，我做肝脏蛋白提取时一般采取400W工作10秒，间歇10秒，次数15次，一次结束后大约30分钟再重复上述步骤一次（因为不同的样品用一根超声柱子，可能会导致污染，所以一定要用双蒸水冲洗干净，再用70%乙醇洗一下，再用水洗一次），另外样品超声时要置于冰浴中，以免产热做过的是用10ml蛋白裂解液来匀浆3克的组织，最终用考马斯亮兰染色法测得的蛋白浓度大概为 30~50 ug/ul测595 OD值时，设定一个只用水的空白，把所有测得的值都减去这个空白。