实验四放线菌、霉菌、酵母菌形态及大小观察
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.

实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察(一)放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成,它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段,大部分气生菌丝分化成孢子丝,通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样,有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似,后期形成孢子菌落呈粉状、干燥,有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌(Str.microflavus)。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿,载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅,显微镜,超净工作台,恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后,倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内,凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中,插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线,放置28℃培养3~7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上,小心用镊子将盖玻片抽出,轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体,将生长良好的菌丝体面向的载玻片,压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
4实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察

一、实验目的要求
• 1.学习掌握观察放线菌、霉菌和酵母菌形 态的基本方法。
• 2.加深理解放线菌、霉菌和酵母菌的形态 特征。
二、实验原理
放线菌、霉菌和酵母菌分类地位
原核类:细菌、古生菌、放线菌、蓝细菌、支原体 、立克次氏体、衣原体等。 真核类:真菌(酵母菌、霉菌、蕈菌)、原生动物 、 显微藻类。 非细胞类:病毒、亚病毒(类病毒、朊病毒等)
• 注意:染色水洗时水流要缓,以免破坏孢子丝形态。
放线菌 10092436俞佩枫拍摄
放线菌
四、实验步骤
• 2. 酵母菌形态观察及死活细胞鉴别: • 美蓝浸片的观察: (1)滴一小滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液于载玻片
中央,按无菌操作取少量酵母菌与其混合均匀。 • 用镊子取一块盖玻片,将盖玻片一边与菌体接触,
取少量已经产孢子的霉菌菌丝; (3)放在载玻片上的染液中,用解剖针小心
将菌丝分开; (4)盖上盖玻片,置于10X低倍镜下观察,
必要时换40X高倍镜.(不用油镜!)
黑曲霉 10092436俞佩枫拍摄
四、实验步骤
3. 霉菌的形态观察 注意: • 用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心,
尽量减少菌丝断裂及形态被破坏,盖盖玻 片时避免气泡产生。
• 1. 放线菌孢子丝形态观察(插片法) (1) 融化高氏1号培养基,冷却至50度倒平板,平
板要厚一些,以利于插片。接种、插片、培养。 (2)染色:用镊子小心取出盖玻片,并将其背面附
着的菌丝体擦干净,用0.05%美蓝染色约1min后 水洗。然后将盖玻片无菌丝体的面放在载玻片上。 (3)1.放线菌:是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌,广泛分布 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。
放线菌、霉菌、酵母菌形态观察

七、下一个实验
实验五 微生物数量的测定
酵母菌具有典型的真核细胞
结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、
细胞质、液泡、线粒体等,有的
还具有微体。
啤酒酵母的菌落
红酵母的菌落
各种酵母菌的菌落
酵母菌和霉菌的培养对比
电镜下的酵母
三、实验器材
1、菌种:根霉、青霉、曲霉、放线菌、酵 母等标本片
2、显微镜、蒸馏水、插镜纸、香泊油、二 甲霉。
菌丝无隔、多核、分枝状,在基物内外能 广泛蔓延,有假根,无匍匐菌丝。
毛霉
毛霉显微结构
根霉
根霉(Rhizopus)属于毛霉目 根霉在自然界分布很广,用途广泛,其淀粉酶活性很强,
是酿造工业中常用糖化菌。我国最早利用根霉糖化淀粉 (即阿明诺法)生产酒精。
根霉显微形态
曲霉
红曲霉 黑曲霉 米曲霉
曲霉
曲霉的显微的显微结构
曲霉和青霉的异同
两者同属于曲霉科的,主要鉴别特征就是 孢子。曲霉成的是放射状的孢子 青霉成的 是扫把状的孢子 。
他们都属于半知菌,基本结构特征相同即 菌丝有隔,分生孢子,无有性世代等等。 显微镜下最容易观察到的是青霉扫帚状排 列的分生孢子小梗和曲霉膨大的分生孢子 头(顶囊),另曲霉的分生孢子梗直立于 菌丝独特厚壁的足细胞上。
实验四 放线菌、霉菌、 酵母菌的形态观察
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察
一、实验目的
1、学习掌握观察放线菌、霉菌标本片形态特征。
2、学习掌握观察酵母菌标本片形态特征。
二、实验原理---放线菌
放线菌 因菌落呈放线状而的得名
二、实验原理
放线菌
放线菌的形态比细菌复杂些, 但仍属于单细胞。在显微镜 下,放线菌呈分枝丝状
微生物学实验10 放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察

南京大学生物技术系实验报告题目放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察【一、实验目的】1、通过菌落及细胞形态的观察和比较,掌握区分细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的要点。
2、掌握观察放线菌孢子的方法。
3、掌握观察霉菌孢子及根霉假根的方法。
4、了解酵母菌子囊孢子形成的方法。
【二、实验原理】1、三类微生物菌落形态特征:霉菌形态比细菌、酵母菌复杂,个体比较大,具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌营养体的基本形态单位是菌丝,包括有隔菌丝和无隔菌丝。
营养菌丝分布在营养基质的内部,气生菌丝伸展到空气中。
营养菌丝体除基本结构以外,有的霉菌还有一些特化形态,例如假根、匍匐菌丝、吸器等。
霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体,例如分生孢子,孢子囊等,包裹其内或附着其上的有各类无性孢子;还包括有性繁殖结构,例如子囊果,其内形成有性孢子。
在观察时要注意细胞的大小,菌丝构造和繁殖方式。
放线菌一般由分枝状菌丝组成,它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段,大部分气生菌丝分化成孢子丝,通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样,有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
酵母菌是单细胞的真核微生物,细胞核和细胞质有明且分化,个体比细菌大得多。
酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。
酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子;酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。
酵母菌母细胞在一系列的芽殖后,如果长大的子细胞与母细胞并不分离,就会形成藕节状的假菌丝。
2、三点接种法与霉菌菌落形态的观察霉菌的菌落形态是分类鉴定的重要依据。
为便于观察,通常用接种针挑取极少量霉菌孢子点接于平板中央,使其形成单个菌落;或在平板上接三点,即在等边三角形的三个顶点上接种,经培养后同一菌种可形成三个重复的单菌落。
后一方法称为三点接种法。
实验四 微生物的菌落形态观察、平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)

浊度与微生物生物量测定
原理:
①细胞的存在会 造成光的散射, 降低光线的透过;
②在一定范围内 细胞浓度与吸光 度成正比
二、平板菌落计数的优缺点
优点:反映的是微生物活菌数量,可获 得活菌的信息,所以被广泛用于生物制 品检验(如活菌制剂),以及食品、饮 料和水(包括水源水)等的含菌指数或 污染程度的检测。 缺点:操作较繁,所需时间较长,测定 结果易受多种因素的影响。
(3)菌体浊度的测定(只针对单细胞微 生物); 利用分光光度计在600nm测定吸光度 值。 (4)细胞干重和湿重的测定(有时湿重 以体积计量); (5)各种细胞物质含量的测定(蛋白质、 核酸、 ATP、磷、叶绿素等定量测 定)——建立了多种快速检测方法; 说明:后两种对丝状菌比较有意义。
2、常见微生物检测项目
10-3
3 平均 1 2
10-4
3 平均
霉 菌
cfu数/平板 每毫升中的cfu数
实验内容四
——介绍菌种保藏的原理和方法
一、菌种保藏的重要性
微生物基本特性所决定的——微生 物个体微小、代谢活跃、生长繁殖 快、易变异、易污染。 研究工作的连续性需要。 工业及科研菌种要注意菌种的衰退 和复壮。
4、若所有稀释度的平均菌落数均大于 300,则应按稀释度(倍数)最高的平均菌落数 乘以稀释倍数(见下表,例4)。
5、若所有稀释度的平均菌落数均小于30, 则应按稀释度(倍数)最低的平均菌落数乘以 稀释倍数(见下表,例5)。
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在 30~300之间,则以最近300或30的平均菌落 数乘以稀释倍数(见下表,例6)。
计算公式说明:
①如样品来源为液体其表示为CFU/ml;
②所加样品量为每个平板所加入的相应稀释液的体积(ml)。
04 实验四 放线菌、酵母和霉菌形态的观察

04 实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察实验目的:1. 了解微生物的形态特征。
2. 熟悉显微镜的使用方法,学习普通染色技术。
3. 学习鉴别放线菌、酵母和霉菌的形态特征。
实验材料:1. 盐酸裂解液、甲醛定型液、碘酒、甲基橙、溴酚蓝等。
2. 放线菌、酵母和霉菌的培养物。
实验步骤:1. 取一小块培养物放在玻片上,滴上一滴生理盐水并用小棒子将其研磨均匀。
2. 放线菌培养物制片:将研磨好的放线菌制成薄片,滴上盐酸裂解液使其变成透明,定型液使其固定,并在空气中晾干。
然后,在火上加热定邦,再用碘酒染色,过后清水洗净,醋酸洗净并晾干或用吹风机吹干。
3. 酵母培养物制片:将研磨好的酵母制成薄片,滴上碘酒染色剂染色,过后清水洗净,醋酸洗净,晾干或用吹风机吹干。
4. 霉菌培养物制片:将研磨好的霉菌制成薄片,滴上甲基橙染色剂染色,过后清水洗净,醋酸洗净,晾干或用吹风机吹干。
5. 用显微镜观察制片。
实验结果:放线菌:放线菌为革兰阳性菌,细胞形状呈弯曲的短小棍形,光学显微镜下看到的细胞较长,一般在1-20微米之间,可以分枝,分枝形成的菌丝从外形上呈现出类似于蜘蛛网的形状。
勃林美细胞内有许多成熟的孢子,呈现为典型的链状。
常常在不规则的小菌落或黏液内生长。
酵母菌:酵母细胞直径一般在2-5微米之间,为单细胞生物,在将染好色的玻片放在光学显微镜下很容易看到直径3微米以上的球形,卵圆形等细胞结构,表面光滑。
细胞质软,柔软而透明。
霉菌:霉菌属真菌,具有多种形态,种类繁多,细胞直径1-5微米,长1-10微米,细胞呈现不规则形状,通常形成的是在菌丝基础上聚合并且扩展而成的菌落。
通过本次实验观察和比较放线菌、酵母和霉菌的形态特征,可以得出以下结论:1. 放线菌为分枝杆菌,细胞型态呈弯曲状,外观类似于蜘蛛网。
2. 酵母为单细胞生物,呈圆球形或卵圆形,表面光滑、整齐。
3. 霉菌属于真菌,细胞形态呈现不规则形状。
实验四酵母菌霉菌放线菌个体形态观察

实验四酵母菌霉菌放线菌个体形态观察实验目的:通过对酵母菌、霉菌和放线菌的个体形态观察,了解它们的外部特征及区分方法。
实验器材:1.酵母菌:酵母菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片;2.霉菌:霉菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片;3.放线菌:放线菌培养基、显微镜、玻璃片、盖玻片。
实验步骤:1.酵母菌的观察:(1)取一片酵母菌培养基,用微量移液器吸取适量酵母菌悬浊液滴于盖玻片上;(2)将盖玻片放在显微镜上,用40倍镜下观察酵母菌的形态特征。
2.霉菌的观察:(1)取一片霉菌培养基,用微量移液器吸取适量霉菌悬浊液滴于盖玻片上;(2)将盖玻片放在显微镜上,用40倍镜下观察霉菌的形态特征。
3.放线菌的观察:(1)取一片放线菌培养基,用微量移液器吸取适量放线菌悬浊液滴于盖玻片上;(2)将盖玻片放在显微镜上,用40倍镜下观察放线菌的形态特征。
实验结果:1.酵母菌的形态特征:酵母菌是单细胞真菌,呈卵圆形或肾脏形状,大小约为5-10微米。
在显微镜下观察,可以看到酵母菌呈透明或微黄色,细胞表面光滑,没有菌丝或分枝。
在适宜的培养条件下,酵母菌可以通过分裂繁殖。
2.霉菌的形态特征:霉菌是多细胞真菌,细胞呈丝状或孢子状,构成了菌丝体。
在显微镜下观察,可以看到菌丝呈无规则分枝状,菌丝上有许多孢子。
菌丝和孢子的颜色和形状有所差异,根据这些特征可以区分不同种类的霉菌。
3.放线菌的形态特征:放线菌是革兰氏阳性菌,形态特征类似细菌。
在显微镜下观察,可以看到放线菌呈革兰氏阳性杆菌,有时菌体呈分枝状。
放线菌是严格需氧菌,所以通常在培养基的表面形成菌落。
放线菌的菌落通常呈灰黄色、红色或蓝绿色等,形状不规则。
放线菌还可以产生一种特殊的菌丝结构,孢子链,它们是放线菌繁殖和传播的主要方式。
实验结论:通过对酵母菌、霉菌和放线菌的个体形态观察,我们可以区分它们的外观特征。
酵母菌是单细胞真菌,没有菌丝或分枝,呈卵圆形或肾脏形状;霉菌是多细胞真菌,构成了分枝的菌丝体,菌丝上有多个孢子;放线菌是革兰氏阳性菌,菌体类似细菌,可产生分枝状的菌体和特殊的孢子链。
微生实验报告 2012.10.31 实验四 酵母菌的形态观察及细胞死活的鉴别,微生物细胞大小的测定

微生实验报告姓名:王晶晖专业年级:2011级生物技术学号:040312011032实验四酵母菌的形态观察及细胞死活的鉴别,微生物细胞大小的测定一、实验目的1.观察酵母菌的形态及出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法;掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理,掌握测定微生物细胞大小的方法.3.了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二、实验原理美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此,具有还原能力的酵母细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,由于菌体微小,只能在显微镜下测量。
用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长10μm,每格长(0.01mm),是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。
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气生菌丝发育到一定阶段,其上可 气生菌丝发育到一定阶段, 分化出形成孢子的菌丝,即孢子丝, 分化出形成孢子的菌丝,即孢子丝, 又称产孢丝或繁殖菌丝。 又称产孢丝或繁殖菌丝。其形状和 排列方式因种而异, 排列方式因种而异,常被作为对放 线菌进行分类的依据。 线菌进行分类的依据。 营养菌丝发育到一定阶段, 营养菌丝发育到一定阶段,伸向空 间形成气生菌丝, 间形成气生菌丝,叠生于营养菌丝 可覆盖整个菌落表面。 上,可覆盖整个菌落表面。在光学 显微镜下观察,颜色较深, 显微镜下观察,颜色较深,直径较 ),有的产色素 粗(1-1.4 µm),有的产色素。 ),有的产色素。 营养菌丝生长于培养基内或紧贴表 吸收营养,也称基内菌丝。 面,吸收营养,也称基内菌丝。一 般无隔膜,直径0.2-0.8 µm,长度差 般无隔膜,直径 , 别很大,有的可产生色素。 别很大,有的可产生色素。
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌 放线菌、霉菌、 形态(及大小) 形态(及大小)观察
一、实验目的
• • 观察了解放线菌、 观察了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 特征 掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方 法
二、实验原理
• (一)放线菌 • 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 在形态上具有分枝状菌丝, 在形态上具有分枝状菌丝,以孢子进行繁 殖。放线菌实际上是属于细菌范畴内的原 核微生物
四、实验内容及操作
• • • • (一)放线菌形态观察(插片法) 放线菌形态观察(插片法) (二)霉菌形态观察 (三)酵母菌形态观察 (四)微生物大小测定
--
融合
子囊孢子
酵母菌菌落特征
与细菌菌落类似,但一般较细菌菌落大且厚, 与细菌菌落类似,但一般较细菌菌落大且厚,表面 湿润,粘稠,易被挑起,多为乳白色,少数呈红色。 湿润,粘稠,易被挑起,多为乳白色,少数呈红色。
酵母菌死活细胞观察
• 美蓝染液
(四)微生物大小测定
三、实验材料
• 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、香柏 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、 擦镜纸、 油、擦镜纸、醇醚试剂等 • 放线菌插片培养物、霉菌培养物及装片、 放线菌插片培养物、霉菌培养物及装片、 酵母菌菌悬液
(三)酵母菌
一大类单细胞真菌的总称, 一大类单细胞真菌的总称,不具有分类学意义
形态: 圆形或椭圆形 形态:
假丝酵母菌
细胞结构
高尔基体 核糖体 内质网
酵母菌的繁殖 无性繁殖:芽殖为主, 无性繁殖:芽殖为主,裂殖
有性繁殖:子囊孢子(有性孢子) 有性繁殖:子囊孢子(有性孢子)
子囊
பைடு நூலகம்
+
质配、 质配、核配 减数分裂 有丝分裂
放线菌形态与结构
t单细胞,大多由分枝发达的菌丝组成; 单细胞,大多由分枝发达的菌丝组成; 单细胞 t菌丝直径与杆菌类似,约1µm; 菌丝直径与杆菌类似, µ ; 菌丝直径与杆菌类似 t细胞壁组成与细菌类似,革兰氏染色阳 细胞壁组成与细菌类似, 细胞壁组成与细菌类似 性(少数阴性); 少数阴性); t细胞的结构与细菌基本相同, 细胞的结构与细菌基本相同, 细胞的结构与细菌基本相同 t按形态和功能可分为基内菌丝(营养菌 按形态和功能可分为基内菌丝( 按形态和功能可分为基内菌丝 丝)、气生菌丝和孢子丝三种。 )、气生菌丝和孢子丝三种。 气生菌丝和孢子丝三种
不同形状的分生孢子丝是放线菌分类鉴定的依据
放线菌菌落形态特征
能产生大量分枝和气生菌丝的种类(如链霉菌) 能产生大量分枝和气生菌丝的种类(如链霉菌) 菌 落 形 态 菌落质地致密,较坚硬,小而不蔓延, 菌落质地致密,较坚硬,小而不蔓延,与培养 基结合紧密,不易挑起或挑起后不易破碎, 基结合紧密,不易挑起或挑起后不易破碎,菌 落正反面的颜色往往不一致 不能产生大量菌丝体的种类(如诺卡氏菌) 不能产生大量菌丝体的种类(如诺卡氏菌) 与培养基的粘着力差,粉质, 与培养基的粘着力差,粉质,针挑起易粉碎
(二) 霉菌
霉菌( 霉菌(mold)是一些“丝状真菌”的统称,不是 )是一些“丝状真菌”的统称, 分类学上的名词。 分类学上的名词。霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝 (hypha)构成。 )构成。 许多菌丝交织在一起,称为菌丝体 菌丝体( 许多菌丝交织在一起,称为菌丝体(mycelium)。 )。 低等丝状真 菌:无隔多 核菌丝 高等丝状真菌: 高等丝状真菌: 有隔单核或多 核菌丝
菌丝功能分化 营养菌丝 菌丝功能 气生菌丝 繁殖菌丝
霉菌菌丝直径约2~10µm,比放线菌菌丝大几到几十倍 µ , 霉菌菌丝直径约
霉菌菌落形态特征
菌落由分枝状菌丝体组成,疏松,呈绒毛状、 菌落由分枝状菌丝体组成,疏松,呈绒毛状、絮状 或蜘蛛网状,比细菌菌落大,有的有色素。 或蜘蛛网状,比细菌菌落大,有的有色素。