不同产地玛咖中总生物碱的含量测定研究
广西不同产地对叶百部总生物碱的含量测定
１ ． １ 仪器
２ ］ 杨敏． 仙草提取物 的体 外抗 氧化实验 入 国际中草药市场的基本保证。 而 ［
研究 ［ Ｊ ］ ．中 华 预 防 医 学 杂 志 ， 凉粉草作 为中草药 和制作凉粉冻 ２ ０ ０ ６， ４ ０ （ ３ ） ： ２ ０ ３ — ２ ０ ４ ． 的原料在我 国乃至东南 亚地区 已 ［ ３ ］刘 富来 ， 冯翠 兰 ． 仙草对 禽大肠 杆菌 有悠久的历史 ， 已成为我 国一些地
药典中 ， 百部项下仅有性状 、 鉴别 、 表６ 的 结 果 ，广 西 灵 山 凉 粉 草 ２ ０ ０ ４ ， ２ ４ （ １ ２ ） ： １ ６ ７ ２ — １ ６ ７ ５ ． 浸 出物等项 目， 尚不能有效控制百 （ ２ ０ １ ２ ０ ３ ）中除了ｃ ｒ 夕 其余元素含 ［ ８ ］ 李 文龙 ， 荆淼， 陈军辉 ， 等． 微 波消解 部药材和相关制剂的质量 。 生物碱 Ｉ Ｃ Ｐ — ＭＳ 测 定４ Ｏ 种 中药材 中的 ５ 种 有 量均高于其他产地 ，其 中Ｃ ｕ ， Ａ ｓ ， 是百部脂溶性部位 的主要成分 ， 同 毒 元素 ［ Ｊ ］ ．分 析 试 验室 ， ２ ０ ０ ８ ， ２ ７ Ｃ ｄ ， Ｐ ｂ 都在 限度范围内。而广西灵 时也是百部提取物 的主要 活性成 （ ２ ） ： ６ － ８ ． 山凉粉 革（ ２ Ｏ ｌ ｌ Ｏ ３ ） 中Ｃ ｒ 的含量 明 其具有 良好的杀虫 、 抗菌 、 镇 咳 ［ ９ ］ 何佩雯 ， 杜钢 ， 赵海誉 ， 等． 微波消解 一 分， 显偏 高 。 原子 吸 收光谱 法测 定 ９ 种 中药材 中 祛痰等作用【 ５ ］ 。经查 阅文献 ， 尚未 ３ － ３ 基体效 应会对待测元素产生 重 金 属 含量 ［ Ｊ ］ ． 药 物分 析 杂 志 ， 见有关广西产对 叶百部 生物碱含 抑制作用 ， 故本实验采用内标法对 ２ ０ １ ０ ， ３ ０ （ ９ ） ： １ ７ ０ ７ — １ ７ １ ２ ． 量 的报 道 。因此 ， 本研 究 以广 西不 基体效应进 行补偿 ，选 用Ｇ ｅ 、 Ｉ ｎ 、 ［ １ ０ ］ 钱春燕 ， 宋薇 ， 杨彦 丽 ， 等． 微波消解一 同产地对 叶百部药材为对象 ， 参照 Ｂ ｉ 、 ｓ ｃ 四种元素作为内标 ，浓度为 原子吸收光谱法 分析 中药材 中Ｐ ｂ ， 文献 ［ ６ ］ 方法 ， 以对叶百 部碱 为对 １ ０ ｎ ｇ ／ ｍ ｌ ，根据信号响应值与内标 ｃ ｄ ， Ａ ｓ ， № 的含 量 ［ Ｊ ］ ． 现代 科 学 仪 照品 ， 采用酸性染料 比色法测定其 器， ２ ０ ０ ４ （ ４ ） ： ３ ８ — ４ ０ ． 响应值 的比值计算数值 ， 从而提高 现报道如下 。 ［ １ １ ］ 王 志嘉 ， 尤海丹 ， 吴 志刚 ， 等． 微 波消 总生物碱含量 ， 测定结果 的准确性。
贵州不同产地苗药飞龙掌血中总生物碱和白屈菜红碱的含量测定
贵州不同产地苗药飞龙掌血中总生物碱和白屈菜红碱的含量测
定
张艳焱;徐剑;张永萍
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2012(000)027
【摘要】[目的]测定贵州不同产地苗药飞龙掌血中总生物碱和白屈菜红碱的含量.[方法]采用反滴定法测定总生物碱含量,并采用高效液相色谱法测定白屈菜红碱的含量,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-浓度0.1％磷酸水溶液(V/V,28∶ 72),检测波长为270 nm,流速为1.0 ml/min.[结果]总生物碱、白屈莱红碱的平均回收率分别为97.5％和99.8％；RSD分别为2.71％和0.40％.[结论]该分析方法准确、灵敏、可靠,可用于飞龙掌血中总生物碱和白屈菜红碱的含量测定.
【总页数】2页(P13322-13323)
【作者】张艳焱;徐剑;张永萍
【作者单位】贵阳中医学院药学院,贵州贵阳550002;贵阳中医学院药学院,贵州贵阳550002;贵阳中医学院药学院,贵州贵阳550002
【正文语种】中文
【中图分类】S567
【相关文献】
1.贵州不同产地钩藤的总生物碱含量测定 [J], 张华;李姗
2.不同产地玛咖中总生物碱的含量测定研究 [J], 范祥;蔺苗;杨永寿;田昆仑;王光明
3.不同产地玛咖中总生物碱的含量测定研究 [J], 范祥;蔺苗;杨永寿;田昆仑;王光明;
4.响应面法优化飞龙掌血中总生物碱的提取工艺 [J], 冯慧霞;陈桂林;郭明全
5.响应面法优化飞龙掌血中总生物碱的提取工艺 [J], 冯慧霞;陈桂林;郭明全
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HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究
HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究
崔灿
【期刊名称】《内蒙古中医药》
【年(卷),期】2017(036)014
【摘要】目的:探究高效液相色谱(HPLC)法鉴定不同产地黄连饮片中所含生物碱情况.方法:采用HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中的生物碱种类及对应含量,流动相为50∶50的乙腈-0.1％磷酸溶液,加入十二烷基磺酸钠0.1g/100ml,柱温为30℃,检测波长为345nm,流速为1.0ml/min.结果:盐酸小檗碱在0.2405～1.6841μg内线性良好,平均回收率为97.5％.黄连中含有的生物种类有小檗碱、黄连碱、表小檗碱和巴马汀,不同产地的黄连饮片中各种生物碱含量及生物碱总含量存在显著差异,其中以四川洪雅县高庙镇产的生物碱含量最高,最低为云南德钦县产黄连.结论:HPLC 法鉴定不同产地黄连饮片中生物碱类型及含量,操作简便,重现性好,准确率高,对黄连的质量鉴定具有重要的参考价值.
【总页数】1页(P132)
【作者】崔灿
【作者单位】开封市中医院药剂科河南开封475000
【正文语种】中文
【中图分类】R683.2
【相关文献】
1.不同产地和生长年限黄连的总生物碱含量测定
2.不同等级黄连饮片味觉信息表征及其与总生物碱的相关性
3.HPLC法测定不同产地黄连饮片中生物碱的含量
4.不同产地岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的比较研究
5.HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物碱含量
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深入了解玛咖的生物活性成分(华宝通玛咖文库)
深入了解玛咖的生物活性成分(华宝通玛咖文库)Maca的生物活性成分1．生物碱（alkaloids）生物碱是生物体内一类含氮的有机化合物，这类化合物多有特殊而显著的生理作用。
生物碱存在于许多天然植物中。
玛咖酰胺和玛咖烯为玛咖独有的成分，在玛咖提取物中的含量达到0.6%。
药理研究发现这类物质对性功能和生育力的提高有显著效果。
2．芥子油苷及其挥发油（essential oil）成分芥子油苷（glucosinolates）在十字花科植物中存在较为广泛，国外研究发现很多十字花科植物中的芥子油苷具有抗肠癌和甲状腺癌的作用，而且美国已经有抗癌作用的花椰菜保健产品得到FDA认证。
因此，控制好芥子油苷的食用量及其选择合适的含该类物质的食物，对人体的健康还是十分有利的。
Johns等最早在玛咖中发现了芥子油苷和具有挥发性的异硫氰酸酯类物质，并声称芳香族的芥子油苷与玛咖提高人的生育力有着某种关联。
3．甾醇（sterols）植物甾醇是植物中的一种活性成分，广泛存在于各种植物油、坚果、和植物种子等植物性食物和蔬菜水果中，大量的实验室研究证明显示，植物性甾醇可以有效的控制各种慢性病（如各种慢性心脏疾病、癌症、慢性前列腺病症）的发生率。
2000年9月，美国食品与药品管理局（FDA）通过了对植物甾醇的健康声明，含有植物甾醇的人造奶油和色拉酱被列入功能食品，在许多西方国家已被广泛用于人群慢性病的预防。
4．氨基酸（amino acid）氨基酸的分子结构中同时带有氨基（-ＮＨ２）羧基（-ＣＯＯＨ），具有两性性质，是天然产物中独特的一类。
在生物体类可以是游离形式存在，也可以是以肽键连接成的多肽和蛋白质形式存在。
玛咖中含有丰富的天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和多种支链氨基酸，是玛咖具有高营养、抗疲劳、增强运动能力、增加生育力等重要生理活性的物质基础之一。
5．其他活性物质在玛咖根中还有一些微量的次生代谢物质，例如牛磺酸、植物多酚、皂角苷、类黄酮(flavonoid)、香豆素（conmarins）、脂肪族伯胺(secondary aliphatic amines)、叔胺（tertiary amines）、花色素胺（anthocyamines,引起玛咖根颜色的不同）等，它们在玛咖中的含量没有上面提到的天然活性成分高，但是玛咖的多种传统功效很可能与其中的一些成分有关，因为虽然这些活性成分含量比较低，但它们很多可以在低含量状态下就起到较好的生理作用，而且随着对这些具有极大研究开发潜力的活性成分的深入了解，我们对玛咖将会有更新更全面的认识。
HPLC法测定不同产地及炮制方法的乌头类药材生物碱含量
HPLC法测定不同产地及炮制方法的乌头类药材生物碱含量常锦明;宋清宏;曹烨民;魏莉【期刊名称】《上海中医药杂志》【年(卷),期】2014(48)7【摘要】目的建立同时测定乌头类药材中6种生物碱含量的方法,并测定不同产地和炮制方法的乌头类药材中生物碱的含量,评价17批乌头类药材的质量。
方法采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定乌头类药材中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱3种单酯型生物碱和新乌头碱、次乌头碱、乌头碱3种双酯型生物碱的含量;色谱条件为Kromasil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:[乙腈-四氢呋喃(25∶15)](A)-0.1 mol/L醋酸铵(1 000 ml加冰醋酸0.5 ml)(B),梯度洗脱;检测波长:235 nm;并采用滴定法测定其总生物碱含量,考察乌头类药材不同产地及炮制品生物碱的含量变化。
结果乌头类药材中,6种生物碱的含量差距悬殊,考察样品中以四川和陕西的较好,苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱3种单酯型生物碱的含量均不低于0.701 3%、0.092 7%、0.394 1 mg/g;新乌头碱、次乌头碱、乌头碱3种双酯型生物碱的含量均不高于0.309 7%、0.437 2%、0.057 4 mg/g。
结论该方法合理、可行、准确,可用于测定不同产地和炮制方法的乌头类药材中生物碱的含量;不同产地和炮制方法的乌头类药材的质量存在较大差异。
【总页数】5页(P99-103)【作者】常锦明;宋清宏;曹烨民;魏莉【作者单位】上海中医药大学中药学院;上海市中医老年医学研究所;上海市中西医结合医院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.HPLC法测定西北地区不同产地苦豆子药材中生物碱的含量△2.HPLC-Q-TOF-MS法测定不同厂家小金丸中9种乌头类生物碱的含量3.HPLC法测定新疆准噶尔乌头不同炮制品中单酯型生物碱的含量4.HPLC测定不同产地乌头类药材生物碱含量5.酸性染料比色法测定乌头属不同药材中乌头生物碱含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究
HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究摘要】目的：研究高效液相色谱法（HPLC）在不同产地黄连饮片中生物碱检测中的价值。
方法：选择HPLC法分别检测各区域黄连中生物碱情况。
结果：不同区域黄连中小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀生物碱以及总含量具有一定差别，其中四川洪雅县的黄连生物碱含量较高，而云南德钦县较低。
结论：HPLC在不同区域黄连生物碱的检验中效果显著，操作较为方便，具有一定重复性，鉴定结果的准确率较高，值得广泛推广及应用。
【关键词】生物碱；黄连；高效液相色谱法；饮片【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0362-01黄连属于常见的中药饮片，具有泻火解毒、清热燥湿的功效，取得了较高的临床价值。
黄连的主要成分为生物碱，若能够准确掌握黄连中有效成分，选择疗效确切的鉴定方式在保证饮片质量中具有重要意义。
临床上常采取紫外分光光度计或者薄层扫描方式进行鉴定，虽然取得过一定检验价值，但效果并不明显[1]。
其中薄层扫描鉴定结果的准确性较低，而紫外分光光度计仅能够检出黄连中生物碱的总含量。
随着鉴定技术不断完善，临床认为采取HPLC法鉴定效果显著，不仅能够检出各生物碱含量，同时能够保证结果准确[2]。
因此本文展开研究，探讨HPLC法在不同区域黄连生物碱的检验中的价值，现作出如下报道。
1.资料与方法1.1 仪器与试剂日本日立公司生产的高效液相色谱仪器、色谱柱、超声波清洗器、电子分析天平、色谱数据工作站、乙腈色谱纯试剂、盐酸小檗碱以及双蒸水等。
1.2 方法将盐酸小檗碱判定为对照，按照HPLC法分别检测黄连中各生物碱含量。
1.3 色谱条件色谱柱为4.6mm*250mm，5um；流动相50:50的乙腈-0.1%磷酸液体，与0.1g/100ml的十二烷基磺酸钠混合，柱温设置为30℃，检验波长345nm，流速1.0ml/min。
1.4 配置溶液将100℃干燥后的盐酸小檗碱放入流动相中，浓度设置成240.6ug/ml；取0.1g黄连粉末，放置于锥形瓶中，加入流动相（80ml），采取超声处理，频率200W，功率40kHz，时间控制35min左右。
17个不同产地的川贝母总生物碱的含量测定
17个不同产地的川贝母总生物碱的含量测定
马利琼;王晓铭;王化远
【期刊名称】《华西药学杂志》
【年(卷),期】2001(16)1
【摘要】目的 :测定了中国药典收载的四基源种 17个不同产地的川贝母生物碱的含量。
方法 :采用两相滴定法。
结果 :川贝母的含量为 0 0 8% ,暗紫贝母为 0 0 4% ,梭砂贝母为 0 0 7% ,甘肃贝母为 0 0 5 %。
结论 :17个不同产地的川贝母中总生物碱的含量以川贝母较高。
【总页数】2页(P60-61)
【关键词】川贝母总生物碱;川贝母;贝母辛;两相滴定法
【作者】马利琼;王晓铭;王化远
【作者单位】华西医科大学公共卫生学院;华西医科大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.贵州不同产地钩藤的总生物碱含量测定 [J], 张华;李姗
2.不同规格川贝母的总生物碱,西贝素含量测定 [J], 辛宁
3.不同规格川贝母中总生物碱的含量测定方法 [J], 戴晖;吴梓春
4.壮药矮陀陀中总生物碱含量测定条件优选及不同产地药材含量比较 [J], 马雯芳;
唐玉荣;颜萍花;曾祥燕;蔡毅
5.不同商品规格川贝母总生物碱含量测定的方法研究 [J], 王纯玉;何祖新;吴玉良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
略谈玛咖的化学成分及生物活性
略谈玛咖的化学成分及生物活性摘要：玛咖是一种富含多种营养成分和多种的次生代谢产物包括生物碱、芥子油苷、玛咖多糖等的新资源食品，具有增强性功能、抗氧化、抗疲劳、神经保护等生物活性，已成为相关行业的研究对象，本文从玛咖入手，通过文献综述等手段对玛咖的化学成分进行探究，分析其生物活性，发现玛咖活性的研究多是基于粗提物，在活性评价方面缺乏系统性和深入性的研究，活性组分作用靶点和机制尚不清楚。
因此，提取、分析玛咖各组分的活性物质，并从分子水平对其作用机制进行研究，将对玛咖产品品质提升和应用拓展发挥积极的推动作用。
关键词：玛咖；化学成分；生物活性随着“健康中国”战略不断推进，健康服务日益成为政策和百姓关注的重点，围绕“健康中国”建设，大卫生、大健康行业将迎来黄金发展时期。
玛咖作为一种营养丰富的新资源食品（2011年5月被批准），具有较为特殊的化学成分，已成为相关行业的研究对象，加强对玛咖的分析，研究其化学成分，分析其生物活性，在此基础上对玛咖的应用进行探究，充分发挥其功能，对促进玛咖产业发展具有积极的作用。
一、玛咖概述玛咖（Lepidium meyenii）是一种天然生长在秘鲁安第斯山脉高原地区的十字花科植物，主要生长在海拔3000米至4500米的高寒地区。
这些地区的气候条件极端，包括强烈的紫外线辐射、干燥的空气和寒冷的气温。
玛咖能够适应高原地区的极端气候条件，它通常生长在贫瘠的土壤中，对土壤质量要求不高，在当地有悠久的种植及食用历史，具有重要地位，被视为安第斯山神的礼物，还具有“秘鲁人参”的美誉[1]，玛咖的生长周期较长，需要大约7至9个月的时间才能完全成熟。
植株通常在地下形成块茎，类似于萝卜的形状，收获后的玛咖块茎经过洗净、晾晒等处理，最终制成市面上所见的玛咖产品。
玛咖不仅营养丰富而且具有多种生物活性，早在1992年联合国世界粮农组织（FAO）就将玛咖推荐为可食用的安全食品，2001年通过了由美国食品和药品管理局（FDA）开展的玛咖保健药品进入美国的论证，目前，玛咖已在全世界很多地方种植成功，包括美国、澳大利亚、日本、西班牙等，玛咖是2000年左右通过引种栽培引入中国的，目前在云南、四川、西藏等地有种植，2006年批准了两款玛咖相关的保健食品，2011年5月玛咖粉被批准为新资源食品食用[2]。
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大理大学学报JOURNAL OF DALI UNIVERSITY 第1卷第12期2016年12月Vol.1No.12Dec.2016［DOI］10.3969/j.issn.2096-2266.2016.12.010玛咖（Lepidium meyennii Walp）为十字花科（Brassicaceae）独行菜属（Lepidium）1年生草本植物，药用部位为地下球茎，颜色有紫色、黄色、白色3种。
玛咖原产于秘鲁海拔3500m以上的安第斯山区，已有几千年的栽培历史，是当地不可缺少的作物之一〔1〕，在我国，玛咖主要作为保健品。
研究表明，玛咖富含植物蛋白、氨基酸、脂肪及微量元素等营养成分，还含有多种次生代谢物质：玛咖烯（macaene）、生物碱（包括玛咖酰胺macamide）、芥子油苷及其水解衍生物、甾醇、多酚类及其他成分〔2-4〕。
其中玛咖生物碱可提高动物成熟卵泡小体的数量、精子的流动性和精子的数量，从而可显著提高哺乳动物和鱼类的生育力〔2-5〕。
玛咖生物碱还可以作用于视丘下部和脑垂体，具有调节内分泌腺（如肾上腺、甲状腺、胰腺、卵巢等）的功能，能够起到平衡荷尔蒙的作用，因此可用于治疗女性更年期综合征〔5〕。
其营养成分还具有增强人体精力、耐力等功效，因此又常被称为”秘鲁人参”。
近年来，由于国内保健品市场对玛咖的需求量大增，玛咖被我国多地引种栽培〔6〕，但生长环境不同，是否对玛咖中主要成分造成影响，未见相关文献报道。
本文采用酸性染料比色法对不同产地9批玛咖中总生物碱的含量进行测定，以考察不同产地玛咖的品质。
1材料1.1仪器超声波清洗器（SB2200，宁波新芝生物科技股份有限公司）；恒温水浴锅（SSY-4，北京泰克仪器有限公司）；旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；酸度计（pHS-25，上海虹仪仪器厂）；电子天平（AE240，瑞士梅特勒）；双光束紫外-可见分光光度计（UV2500，日本岛津）。
1.2试药9批不同产地玛咖样品（产地分别为秘鲁、曲靖会泽、丽江玉龙雪山、迪庆香格里拉、东川因民、昆明禄劝、新疆塔什库尔干、大理宾川、四川阿坝，由大理大学生药教研室杨月娥老师鉴定为十字花科独行菜属草本植物玛咖）；氧化苦参碱（中国生物制品药品研究院，批号：110780-201007），其他试剂均为分析纯。
2方法2.1溶液的配制2.1.1供试品溶液的制备精密称取经粉碎后过2号筛的玛咖粉0.5g于150mL圆底烧瓶中，加入20mL甲醇，超声提取40min，残渣重复提取2次，合并提取液，减压浓缩至干后加20mL2%的HCl溶液溶解浸膏，洗涤烧瓶，合并酸液。
用10%氢氧化钠溶液调pH至7.2，再用等体积氯仿萃取3次。
合并不同产地玛咖中总生物碱的含量测定研究范祥1，蔺苗2，杨永寿2，田昆仑1，王光明3*（1.大理大学基础医学院，云南大理671000；2.大理大学药学与化学学院，云南大理671000；3.大理大学临床医学院，云南大理671000）［摘要］目的：采用酸性染料比色法对不同产地玛咖样品中总生物碱的含量进行测定，以评价其品质。
方法：以氧化苦参碱为对照品，采用紫外-可见分光光度法测定玛咖中总生物碱的含量，并对玛咖总生物碱的提取方法、显色剂的用量、pH值、检测波长进行考察。
结果：采用超声提取，时间为40min，提取3次，显色剂用量为6mL，pH为7.2，测量波长为415nm，玛咖中总生物碱含量相对较高的3个产地是秘鲁、丽江和迪庆。
结论：本法操作简便，灵敏度高，重现性好，可作为玛咖中总生物碱的含量测定方法。
［关键词］玛咖；总生物碱；紫外-可见分光光度法；含量测定［中图分类号］R284［文献标志码］A［文章编号］2096-2266（2016）12-0043-04［收稿日期］2015-08-31［修回日期］2015-10-09［作者简介］范祥，硕士研究生，主要从事病理学研究.*通信作者：王光明，教授，博士.43大理大学学报总第12期自然科学萃取液，减压浓缩回收氯仿，用甲醇分次溶解、洗涤，合并甲醇液，定容至10mL，即得玛咖总生物碱的供试品溶液〔7-9〕。
2.1.2对照品溶液的制备精密称取氧化苦参碱对照品0.1g，用甲醇溶解，定容至100mL，即得浓度为1.0mg/mL的对照品溶液。
2.1.3溴麝香草酚蓝显色剂的配制精密称取溴麝香草酚蓝0.125g，溶于1000mL的磷酸缓冲溶液中（0.2mol/L Na2HPO4与0.2mol/L NaH2PO4溶液等量混合），混匀即得〔10-12〕。
2.2测量波长的选择分别精密量取“2.1.1”项的玛咖总生物碱提取液1.0mL和“2.1.2”项下得到的对照品溶液1.0mL于10mL量瓶中，分别加入溴麝香草酚蓝6.0mL，用甲醇定容，摇匀，静置显色15min，即得样品和对照品待测液，同法配制空白对照液。
以空白对照液校正仪器，在400~700nm范围内分别扫描对照品测定液和样品测定液。
2.3单因素考察2.3.1pH值考察精密量取“2.1.1”项下制备好的玛咖样品溶液6份，每份1.0mL，分别加入pH值为6.8、7.0、7.2、7.4、7.6的溴麝香草酚蓝显色剂6.0mL，用甲醇定容，震荡摇匀，静置显色15min，在415nm 处测定吸光度。
2.3.2显色剂用量考察精密量取“2.1.1”项下制备好的玛咖样品溶6份，每份1.0mL于10mL量瓶中，分别加入pH为7.2的溴麝香草酚蓝显色剂2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，用甲醇定容，震荡摇匀，静置显色15min，在415nm处测定吸光度〔13-15〕。
2.3.3提取方法的考察精密称取经粉碎过2号筛的玛咖粉末0.5g，共称取6份。
置150mL圆底烧瓶中，加20mL甲醇，分别进行超声和回流提取，提取时间为40min。
按“2.1.1”项方法操作得样品提取液，分别加入溴麝香草酚蓝显色剂6.0mL，用甲醇定容，震荡摇匀，静置显色15min，于415nm波长处扫描，测定〔11-13〕。
2.4样品含量测定分别精密称取来自不同产地的9批玛咖样品粉末各3份，每份0.5g，按“2.1.1”项下制备待测样品溶液。
各精密量取1.0mL，按“2.2”项下方法显色，测其吸光度，计算样品中总生物碱的含量。
3结果3.1提取方法按“2.3.3”项试验方法确定提取方法。
见表1。
结果表明，超声提取法的玛咖中总生物碱的平均含量为4.71mg/g，回流提取的玛咖中总生物碱的平均含量为3.05mg/g。
因此选择超声提取法作为玛咖中总生物碱的提取方法。
表1提取方式比较（n=3）编号123456提取方法超声提取ìíîïïïï回流提取ìíîïïïï样品量/g0.50040.50010.50070.50020.50070.5006总生物碱含量/（mg/g）4.724.694.703.053.063.03平均含量/（mg/g）4.713.05 3.2测量波长的选择按“2.2”项试验方法对样品和对照品溶液进行显色测定。
见图1。
结果表明，对照品和样品在415nm处均有最大吸收，故选择415nm为本实验测量波长。
mAU波长/nmⅡⅠ1.0000.7500.5000.2500.000350.00380.00410.00440.00470.00500.00图1对照品（Ⅰ）和样品（Ⅱ）溶液的吸收光谱曲线3.3pH值的选择按“2.3.1”项试验方法确定实验过程中缓冲液pH值。
见图2。
缓冲液pH值对玛咖中总生物碱提取液吸光度的影响如图2所示，当磷酸盐缓冲液的pH为7.2时所测得的吸光度值最大，表明此时显色剂解离成的阴离子与玛咖生物碱阳离子定量结合形成稳定的有色离子对最多，故选择缓冲溶液pH7.2。
3.4显色剂用量考察按“2.3.2”项试验方法确定显色剂的用量。
见图3。
结果表明，显色剂的最佳用量为6.0mL。
44总第12期第１卷范祥，蔺苗，杨永寿，等不同产地玛咖中总生物碱的含量测定研究0.70.60.50.40.30.20.10.06.06.26.46.66.877.27.47.67.8吸光度磷酸盐缓冲液pH图2pH 考察0.70.60.50.40.30.20.10.0012345678吸光度显色剂用量/mL图3显色剂用量考察3.5样品含量测定按“2.4”项测定不同产地玛咖中总生物碱的含量。
见表2。
结果表明，秘鲁产的玛咖中生物碱的含量最高，丽江、迪庆两个地区次之，东川、禄劝、宾川产的玛咖生物碱含量较低。
表2样品测定（n =3）产地秘鲁新疆塔什库尔干四川阿坝丽江玉龙雪山曲靖会泽东川因民昆明禄劝大理宾川迪庆香格里拉颜色黄色紫色黄色白色紫色白色黄色紫色黄色海拔/m 355031002900360022002300210024003300含量/(mg/g)5.014.163.624.722.892.222.262.764.48RSD/%0.640.530.410.650.821.350.970.671.073.6方法学考察3.6.1线性关系考察精密移取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL 于10mL 量瓶中，加麝香草酚蓝显色剂6.0mL ，用甲醇定容，震荡摇匀，静置显色15min ，于415nm 处测定吸光度，以氧化苦参碱对照品的浓度（C ）为横坐标，对应的吸光度（A ）为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性回归方程A =12.874C -0.0341（r =0.9992），结果表明，氧化苦参碱在0.01~0.12mg/mL 浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。
3.6.2精密度试验精密移取苦参碱对照品溶液1.0mL ，按“2.2”项下方法操作，显色后于415nm 处重复测定吸光度5次，测定结果的RSD 为0.8%（n =5），表明仪器的精密度良好。
3.6.3稳定性试验精密量取“2.1.1”项下制得的玛咖总生物碱提取液1.0mL 按“2.2”项下方法显色，在415nm 处每隔20min 测1次其吸光度值，测得结果的RSD 为0.58%（n =6），结果表明样品液在2h 内稳定。
3.6.4重复性试验精密称取同一批经粉碎后过2号筛的玛咖粉末5份，每份0.5g ，按“2.1.1”项下制备样品溶液，精密量取1.0mL ，按“2.2”项下方法显色，测定，计算得玛咖中总生物碱的平均含量为4.11mg/g ，RSD 为0.7%（n =5），表明方法的重复性好。
3.6.5回收率试验精密称取已知总生物碱含量（4.11mg/g ）的玛咖样品粉末9份，精密加入各加标量对应的苦参碱对照品，按“2.1.1”项制备样品溶液。
精密量取各待测样品溶液1.0mL ，按“2.2”项试验方法显色，测定吸光度，计算回收率。