花青素提取(借鉴材料)
天然花青素的提取
花青素的提取一.课题目的、意义及研究现状1．课题的目的从瓜果蔬菜之中提取天然花青素，满足人们对新型保健品的需求，提高生活水平，丰富选择性，抗氧化、防突变，预防一些心脑血管疾病、保护肝脏等。
花青素(Anthocyanidin)，又称花色素，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝，属类黄酮化合物。
也是植物花瓣中的主要呈色物质，水果、蔬菜、花卉等五彩缤纷的颜色大部分与之有关。
花青素的相对分子质量：287.246 分子式：61115O H C花青素分子式2.研究意义花青素同其他天然色素一样无毒无副作用，安全性能高，着色色调自然，更接近天然物质的颜色，且具有保健功能。
自然界有超过300种不同的花青素，他们来源广泛，存在于许多瓜果蔬菜之中，功效神奇。
花青素是一种强有力的抗氧化剂，能够保护人体免受自由基的有害物质的损伤，花青素还能够增强血管弹性，改善循环系统和增进皮肤的光滑度，抑制炎症和过敏，改善关节的柔韧性。
花青素为人体带来多种益处。
从根本上讲，花青素是一种强有力的抗氧化剂，它能够保护人体免受一种叫做自由基的有害物质的损伤。
另外也可用于化妆品，如红色花青素做口红。
这些商品用色素(除葡萄皮色素外)共同特征是对光、热、氧稳定性好，对微生物稳定，一般溶于水和乙醇，不溶于植物油。
具体来说，花青素有如下几种作用：⑴．有助于预防多种与自由基有关的疾病，包括癌症、心脏病、过早衰老和关节炎；⑵．通过防止应激反应和吸烟引起的血小板凝集来减少心脏病和中风的发生； ⑶．增强免疫系统能力来抵御致癌物质；⑷．降低感冒的次数和缩短持续时间；⑸．具有抗突变的功能从而减少致癌因子的形成；⑹．具有抗炎功效，因而可以预防包括关节炎和肿胀在内的炎症； ⑺．缓解花粉病和其它过敏症；⑻．增强动脉、静脉和毛细血管弹性；⑼．保护动脉血管内壁；⑽．保持血细胞正常的柔韧性从而帮助血红细胞通过细小的毛细血管，因此增强了全身的血液循环、为身体各个部分的器官和系统带来直接的益处，并增强细胞活力；⑾．松弛血管从而促进血流和防上高血压（降血压功效）；⑿．防止肾脏释放出的血管紧张素转化酶所造成的血压升高；⒀．作为保护脑细胞的一道屏障，防止淀粉样β蛋白的形成、谷氨酸盐的毒性和自由基的攻击，从而预防阿尔茨海默氏病；⒁．通过对弹性蛋白酶和胶原蛋白酶的抑制使皮肤变得光滑而富有弹性，从内部和外部同时防止由于过度日晒所导致的皮肤损伤等等；⒂. 花青素可以促进视网膜细胞中的视紫质再生，预防近视，增进视力。
花青素提取实验报告
花青素提取实验报告花青素提取实验报告植物中的花青素是一类具有丰富颜色的天然色素，广泛存在于花朵、果实、叶子等植物组织中。
花青素不仅为植物赋予了吸引力的色彩，还具有很多生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。
因此，对花青素的提取和研究具有重要意义。
本实验旨在探究不同溶剂对花青素提取效果的影响，并比较不同植物材料中花青素的含量差异。
实验选取了红花、紫苏和紫甘蓝三种常见的植物材料作为研究对象。
实验步骤如下：1. 材料准备：准备红花、紫苏和紫甘蓝三种植物材料，并将其分别洗净、切碎备用。
2. 提取溶剂选择：选取乙醇、醋酸乙酯和水三种常用溶剂作为提取试剂，分别标注为A、B和C。
3. 提取过程：将每种植物材料分别加入三个烧杯中，每个烧杯中加入适量的提取溶剂，浸泡一段时间后，用搅拌棒搅拌均匀。
4. 过滤：将提取液用滤纸过滤，去除固体颗粒。
5. 浓缩：将过滤后的提取液分别倒入烧杯中，放在加热板上进行浓缩，直至溶剂蒸发完全。
6. 称量：将浓缩后的花青素溶液称量并记录。
7. 分光光度计测定：将每个烧杯中的花青素溶液分别转移到试管中，使用分光光度计测定吸光度。
8. 计算花青素含量：根据吸光度值，利用标准曲线计算出花青素的含量。
实验结果如下：在本实验中，我们选取了红花、紫苏和紫甘蓝三种植物材料进行花青素提取实验。
通过比较不同溶剂对花青素提取效果的影响，我们发现乙醇溶剂（A）对三种植物材料中花青素的提取效果最好。
在红花提取实验中，乙醇溶剂（A）的吸光度值最高，表明乙醇溶剂对红花中花青素的提取效果最佳。
紫苏和紫甘蓝的提取实验结果也是如此。
这可能是因为乙醇具有较好的溶解性，能够更好地溶解植物组织中的花青素。
此外，我们还发现不同植物材料中花青素的含量存在差异。
红花中花青素含量最高，紫苏次之，紫甘蓝最低。
这可能与不同植物材料的生长环境、基因差异等因素有关。
通过本实验，我们深入了解了花青素的提取过程以及不同溶剂对提取效果的影响。
同时，我们也发现了不同植物材料中花青素含量的差异。
紫甘蓝中花青素提取实验报告
紫甘蓝中花青素的提取（安徽农业大学 12青年农场主班）花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。
目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。
1、实验原理紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物，极性较高，可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。
根据相似相溶的原则，本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂，采用大孔吸附树脂法分离提纯。
大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用，使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离。
紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞，使花色素尽可能多的溶解。
为了防止花色素的降解以提高其溶出率，可在其中加入1%盐酸。
八层纱布过滤后，留一小烧杯备用，剩余的用大孔树脂除杂，加入200ml 15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质，让树脂吸附花色素，再用60%乙醇洗脱，解析得到乙醇和花色素的混合液。
将过柱的溶液以HCl：混合液=1:4的比例混合至烧杯中，在90。
C的水浴锅中水解一小时，以破坏花色素的糖苷键，使花色素均以花青素的形式存在。
此时，用20ml纯水除杂，用无水乙醇洗脱，得到较为单一的花青素与乙醇混合液。
在旋转蒸发仪上蒸干。
2、材料、药品与仪器新鲜紫甘蓝15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪3、实验步骤●配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用●称取100.0g新鲜紫甘蓝叶片，量取60%+1%HCl混合液300ml（浸提剂），同时放入组织捣碎机中捣碎，浸提●所得固液混合物用8层纱布过滤，取一点滤液备用，剩余滤液1：5加水稀释得色素原液●将备用滤液再用滤纸过滤，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度，并作标准曲线。
花青素提取实验论文[终稿]
![花青素提取实验论文[终稿]](https://img.taocdn.com/s3/m/5b090c7349d7c1c708a1284ac850ad02de8007d3.png)
紫甘蓝中花青素的提取研究【摘要】蓝花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。
目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。
本文主要研究了紫甘蓝花青素的提取工艺;用大孔树脂初步纯化紫甘蓝花青素;对紫甘蓝花青素纯度鉴定。
采用“溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱”相结合的方案对紫甘蓝花青素进行了分离纯化。
【关键词】紫甘蓝花青素提取分离纯化1.1引言花青素作为可使用色素之一，具有多种生物学作用，将广泛用于食品加工、医药保健品、化妆品行业。
虽然国内外己开展了一些研究，主要集中在花青素粗品的提取方法的研究方面，而对紫甘蓝花青素的组成及分子结构鉴定、生物学活性、药理作用的研究还很少，还需要大量数据为其进一步开发和利用提供理论依据。
2.1材料与方法2.1.1实验材料新鲜紫甘蓝2.1.2实验方法溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱2.2主要仪器、试剂分析天平、外分光光度计、环水式多用真空泵、心机、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、无水乙醇、甲醇、孔树脂、浓盐酸。
2.3实验方法2.3.1紫甘蓝色素的提取取新鲜80G的紫甘蓝叶片于大杯中加入一定的浸提剂，吸取一定体积的浸提液于 1 Oml比色管中，用浸提剂稀释至刻度，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度。
采用溶剂提取法。
称取紫甘蓝80g，用500ml的60%乙醇和1%盐酸混合液进行捣碎浸提8层纱布过滤，4℃条件下静置3h，离心测OD 值。
2.3.2紫甘蓝色素的初步纯化大孔树脂预处理的方法:将待处理的大孔树脂装入柱中，用95%乙醇浸泡24h一用95%乙醇2}4BV冲洗一用去离子水洗至无醇味一5%氢氧化钠溶液2}4BV冲洗树脂柱一水洗至中性一10%乙酸2}4BV冲洗通过树脂柱一水洗至中性，备用。
滤液用5倍的纯水稀释，大孔吸附树脂法分离，往吸附柱中先用15%乙醇除杂，再用60%乙醇洗脱收集洗脱液；用四分之一的盐酸在90℃条件下水解1h，再加5倍纯水稀释；大孔吸附树脂再次分离，此时用水除杂，无水乙醇洗脱收集；2.3.3花青素的浓缩结晶无水乙醇洗脱液用旋转蒸发仪浓缩，放冰箱中等待是否有结晶甲醇：盐酸=4:1做展开剂测纯度3.1 实验结果及讨论3.1.1浓度计算紫甘蓝捣碎榨汁后得到深紫色溶液，过滤静置稀释40测得OD值为0.865由曲线可得到花青素含量为1.98mg/ml或 6.94mmol/ml3.1.2结果讨论关于天然色素的提取纯化。
花青素的提取方法和步骤
花青素的提取方法和步骤花青素是一类广泛存在于植物中的天然色素，具有重要的生物学和营养学价值。
提取花青素的方法有很多种，下面将介绍其中几种常用的方法和步骤。
一、酸碱法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫苏叶、蓝莓等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备酸性和碱性的溶剂，如乙酸、盐酸和氢氧化钠等。
4. 酸性提取：将粉碎的植物材料与酸性溶剂混合，加热搅拌一段时间，使花青素溶解在溶剂中。
5. 碱性提取：将酸性溶剂中的混合物与碱性溶剂混合，再次加热搅拌一段时间，使花青素从酸性溶剂中转移到碱性溶剂中。
6. 分离花青素：用分液漏斗将混合溶液分离，花青素会被碱性溶剂提取出来。
7. 萃取花青素：将碱性溶剂中的花青素进行浓缩和纯化，可用醇类溶剂进行萃取。
8. 干燥花青素：将提取到的花青素溶液经过过滤和浓缩后，用低温真空干燥仪将溶剂去除，得到干燥的花青素。
二、醇法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫薯、葡萄皮等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备醇类溶剂，如乙醇、丙酮等。
4. 醇提：将粉碎的植物材料与醇类溶剂混合，加热搅拌一段时间，使花青素溶解在溶剂中。
5. 过滤：将醇提液进行过滤，去除固体杂质。
6. 浓缩：将过滤后的溶液进行浓缩，可用旋转蒸发仪等设备进行浓缩。
7. 纯化：对浓缩后的花青素溶液进行纯化处理，如用硅胶柱层析等方法进行纯化。
8. 干燥花青素：将纯化后的花青素溶液进行低温真空干燥，得到干燥的花青素。
三、超声波法提取花青素1. 材料准备：将需要提取花青素的植物材料（如紫甘蓝、蓝莓等）洗净，晾干备用。
2. 粉碎植物材料：将晾干的植物材料用粉碎机或者研磨器研磨成细粉末。
3. 提取溶剂的准备：准备酸性和醇类溶剂，如盐酸和乙醇等。
花青素用水提取的原理
花青素用水提取的原理
花青素是一类水溶性天然色素，其主要存在于蓝色、紫色的植物和食物中，如紫菜、蓝莓、紫薯、葡萄皮等。
提取花青素的一种常用方法是水提取，其原理如下：
1. 破碎：首先，需要将含有花青素的植物材料（例如紫薯）进行破碎，以增加其表面积，便于花青素与水的接触。
2. 溶解：破碎后的植物材料会与水接触，其中的花青素会溶解在水中。
这是因为花青素具有较好的水溶性，其分子结构中含有亲水基团，可与水分子形成氢键。
3. 过滤：提取出的花青素溶液需要通过过滤的方式去除杂质、植物残渣等固体物质。
一般会使用滤纸或滤网等设备进行过滤。
4. 蒸发：将过滤后的花青素溶液进行蒸发，去除水分，使溶液中的花青素浓缩。
5. 结晶：浓缩后的花青素溶液可能会形成结晶，可以通过结晶的方式进一步提纯花青素。
需要注意的是，水提取花青素的效果受到多种因素的影响，包括植物原料的质量、温度、时间等。
此外，花青素的稳定性较差，容易受到光、热、氧化等因素的影响而降解，因此在提取过程中需要注意保护花青素的稳定性。
葡萄中原花青素的提取
葡萄中原花青素的提取摘要原花青素是抗氧化、清除自由基能力很强的物质，它能有效清除人体内多余的自由基，具有超强的延缓衰老和增强免疫力的作用。
原花青素是一大类多酚化合物的总称，最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体。
本题我们通过标准曲线法对葡萄中原花青素含量进行定量分析；二我们利用超声波破碎提取法分别得出葡萄皮和葡萄籽中原花青素的得率。
关键词原花青素标准曲线法定量超声破碎提取法得率前言原花青素，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。
一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多有机溶剂。
一般为葡萄籽提取物或法国海岸松树皮提取物。
原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。
实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。
葡萄籽原花青素是清除自由基最强的抗氧化剂。
在人体内的抗氧化和清除自由基的能力是维生E的50倍，是维生素C的20倍。
其作用机理主要是原花青素能够自由基交换一个氢原子或电子，与欲清除的自由基有近似的氧化还原电位，生成的自由基通过离域化而稳定由于原花青素分子结构上有多个酚羟基，它们可以与暂存性自由基结合，生成稳定的自由基，螯合启动脂质过氧化的金属离子，参与抗氧化的协同作用。
通过终止自由基链式反应，螯合金属离子，清除活性氧（与封闭系统中的氧反应），原花青素可以减少或消除氧自由基对机体组织和器官的损害作用。
原花青素能够通过制造弹性蛋白和胶原纤维加固毛细血管壁，从而进一步防御自由基的侵蚀。
高品质的低聚原花青素由于在水中和醇中具有良好的溶解性，加上色泽亮丽，资源丰富，疗效显著，副作用微小的特点，被广泛应用到药物、化妆品和功能性食品等领域。
同时其既可作为营养强化剂，又可作为防腐剂替代合成防腐剂（如苯甲酸等），符合人们回归自然的要求，提高了其应用的安全性。
花青素的提取
生化实验报告———————————————————————————山楂原花色素的提取一实验目的1.了解并掌握从山楂中制备原花色素的方法。
二实验原理原花色素（也称原花青素）（proanthocyanidins）是一类从植物中分离得到的在热酸条件下能产生花色素的多酚化合物。
它既存在于多种水果的皮、核和果肉中，如葡萄、苹果、山楂等。
也存在于如黒荆树、马尾松、思茅松、落叶松等的皮和叶中。
原花色素属于生物类黄酮（flavonoids），它们是由不同数量的儿茶素或表儿茶素聚合而成，最简单的原花色素是儿茶素的二聚体，此外还有三聚体，四聚体等。
依据聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体，而五聚体以上的称为高聚体。
从植物中提取原花色素的方法一般有两种，分别是用水抽提或用乙醇抽提。
其抽提物为低聚物，称之为低聚原花色素（oligometic proanthocyanidins，简称OPC）。
生理功用：1.最好的心脏保护剂，抵御引发心血管疾病的诱变因素的冲击。
2.强化血管，有消肿化瘀的功效。
减少毛细血管的阻力和改善渗透性，使细胞更容易吸收养分与排除废物。
3.高效抗氧化能力。
清除氧自由基的能力比其他天然抗氧化剂如胡萝卜素、维生素C和E、儿茶素等强很多。
4.产生组胺的抑制剂，减轻炎症。
抗过敏皮肤保健、抗衰老。
利用低聚原花青素溶于水的特点，用热水煮沸抽提原花青素，再用大孔吸附树脂吸附、洗脱得到原花青素。
D-101树脂是一种球状、苯乙烯型、非极性交联聚合物吸附剂，具有相当大的比表面积和适当的孔径，对皂苷类、黄酮类、生物碱等物质有特殊的选择性，适用于从水溶液中提取类似性质的有机物质。
三实验器材1. 新鲜山楂（或山楂片），市售。
2. 烧杯。
3. 高速组织粉碎机。
4. 玻璃层析柱1.5cm*20cm。
5. 大孔吸附树脂D-101。
6.电磁炉。
7. 不锈钢锅。
8.双层纱布。
四实验试剂1、95%乙醇（实验室提供）。
2、60%乙醇：取95%乙醇60ml，加入蒸馏水，使体积达到95ml。
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桑椹酒渣中花青素提取
1材料与方法
1.1材料
桑椹果酒酒渣。
1.2试剂药品
试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。
1.3主要仪器
电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。
1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）
样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。
1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较
分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
1.4.3温度对提取效果的影响
以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。
1.4.4提取时间对提取效果的影响
每隔20分钟取样测得OD值。
1.4.5正交实验
1.4.6得率试验
称取一定量样品，经提取后。
提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。
方法一稀HCl+95%乙醇提取
1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较
固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色
素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。
按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。
注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
分别称取2.0g酒渣，按液料比5、10、15、20、25、30加入相应体积的浸提溶剂，在40℃下避光提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。
取1mL清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对液料比作图，分析液料比对色素提取量的影响。
3温度对提取效果的影响
分别称取2.0g酒渣置入5个50mL的三角瓶中，各加入浸提溶剂，搅拌5 min，用封口膜将瓶口密封并用铝箔纸包裹好以避光。
分别置于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃的恒温水浴上提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。
取1mL上清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对温度作图，分析温度对色素提取量的影响。
4提取时间对提取效果的影响
每隔30分钟取样测得OD值。
用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对时间作图，分析提取时间对色素提取量的影响。
5桑椹红色素酸性乙醇溶剂提取条件的正交试验
根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以浸提溶剂中乙醇浓度、浸提时
间、浸提温度、液料比为因素，安排4水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。
方法二超声波辅助提取桑椹红色素
1超声波功率对红色素提取的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在30℃温度下，分别以200～700 W超声功率萃取20min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲液稀释(吸光值控制在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声功率作图，分析功率对色素提取量的影响。
2超声温度对色素提取量的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，以？W超声功率分别在20～60℃温度下萃取20min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλma x和700nm姗处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声温度作图，分析温度对色素提取量的影响。
3超声时间对色素提取量的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在？℃温度下，以？W 超声功率分别萃取5、10、15、20、25、30min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声时间作图，分析时间对色素提取量的影响。
4桑椹红色素超声波辅助提取条件的正交试验
根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以超声功率、超声温度、超声时间为因素，安排3水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。
方法三微波辅助提取桑椹红色
选择微波辅助提取温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ , 以微波功率500W、600W、700W、800W、900W,微波辐射时间2S、4S、6S、8S、10S以及液料比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1为单因素考察因素.
选择其中重要的3因素进行正交实验。
最后HPLC分析：
将三种方法所得到的产品进行HPLC分析，看其活性物质是否有变化，主要是后面两种方法是否对活性物质改变。
方法三超高压辅助提取桑椹红色
1 压力对色素提取量的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；以不同压力100～500MPa进行加压3min，加压1次的处理。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对高压压力作图，分析压力对色素提取量的影响。
2 加压时间对色素提取量的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别以加压时间l～5min进行300MPa，加压1次的高压处理。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压时间作图，分析时间对色素提取量的影响。
3加压方式—间歇式对色素提取量的影响
精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别加压1次(300MPa处理3min)、加压2次(300MPa处理1.5min，卸压，再300MPa 处理1.5min) 、加压3次(300MPa处理1min，卸压，再300MPa处理1min，再300MPa处理1min)。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压次数作图，分析结果。
方法四加入酶对红色素提取的影响
未加酶；果胶酶0.1%；纤维素酶.01%；果胶酶0.05%+纤维素酶0.05%。
测定花色苷含量的方法有很多，经典的有薄层层析法、快速测定比色法、紫外吸收光谱(UV)等，现代的有红外吸收光谱、液相色谱(HPLC)以及核磁共振(NMR)、质谱(FAB)等。
除紫外吸收分光光度法外，其余方法均需要标准色素样品，测定的是某种花色营的具体含量。
这对于尚未确定组成的新样品的初步研究是一个难题，也给一般性的检验分析带来了困难。
花色苷是水溶性色素，根据比尔定律，溶液的浓度与其吸光度A成正比，因此在未有标准品时，可用紫外-可见吸收分光光度法测定总花色苷的含量。
花色苷含量主要有2种表示方法：色价及代入消光系数用公式计算。
由此可见，关键是吸光值A的测定。
综合国内外资料，主要有以下几种计算吸光值A的方法：
(1)当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时，需消除叶绿素吸收含量的影响；此时，计算公式为：
A=(A max－A620) －0.1(A650－A620)
国内已有用此方法测定苹果果皮表面及山植果实中花色苷含量的报道。
(2)含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:
直接法：在新鲜的植物提取物中，因为很少含有在花色营的最大吸收区发生吸收的干扰物质，花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。
计算公式为：A=A max。