武生院基因工程期末试题
基因工程期末考试试题.docx
基因工程试卷B名词解释（每个2分，共20分）1、转化：2、质粒转移性：3、DNA文库：4、RACE:5、选择标记基因:6、降落PCR7、载体：8、感受态细胞：9CaMV35s:10、ORF:二、选择题（每题1分，共15分）2(）限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A修复自身的遗传缺陷C强化自身的核酸代谢）生物工程的下游技术是基因工程及分离工程促进自身的基因重组提局自身的防御能力蛋白质工程及发酵工程D分离工程及蛋白质工程1(3）基因工程操作常用的酶是:（1内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶A.I + IIB. I + III + IVC. II + III + IVD. I +11 + IV + III4 ()限制性内切核酸酶的星活性是指：A在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
B活性大大提高C切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同5()下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAGD. GAAACTGCAGTTTC6 ()关于cDNA的不正确的提法是：A同mRNA互补的单链RNAB同mRNA互补的含有内含子的DNAC以mRNA为模板合成的双链RNAD以上都不正确7()下列有关连接反应的叙述，错误的是A,连接反应的最佳温度为37 °CB,连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C,连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于ImMD,连接酶通常应过量2-5倍8( )T4 -DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A. 2' -OH 和5' —PB. 2' -OH 和3'-PC. 3'-OH 和5' —PD. 5'-OH 和3' -P9()载体的功能是A.外源基因进入受体的搭载工具B.不能为外源基因提供整合能力C.不能提供复制能力D.不能为外源基因提供表达能力10()黏性末端连接法，不仅操作方便，而且A产生新切点B易于回收外源片段C载体不易环化D影响外源基因的表达11()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)D X噬菌体12()考斯质粒(cosmid)是一种A.容量最大一种载体B,由X-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D,不能在受体细胞内复制，但可以表达13()某一重组DNA 的载体部分有两个BamHI酶切位点。
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
《基因工程原理与应用》期末考试试卷附答案
《基因工程原理与应用》期末考试试卷附答案一、名词解释(共5小题，每小题4分，共20分)1、基因工程：2、星活性：3、插入型载体：4、反转录PCR：5、感受态：二、填空题(共10空，每空2分，共20分)1、用酚—氯仿抽提DNA 时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇，这是因为异戊醇可以；分离DNA 时要使用金属离子螯合剂，如EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是。
2、按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为和。
3、λ 噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入Lytic growth 也可以进入Lysogenic state 。
如果其基因组DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入。
；它也可以选择进入，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。
4、ddNTP 与普通的dNTP 的不同之处在于ddNTP ，它们可以在DNA 聚合酶的作用下，通过其掺入到正在增长的DNA 链中，导致链延伸反应终止。
5、Klenow DNA 聚合酶是经蛋白酶裂解而从全酶中除去活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。
三、选择题(共10题，每小题2分，共20分)1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）。
A、特定的三联密码；B、双链DNA 的特定碱基对；C、双链DNA 的特定碱基序列；D、单链DNA 的特定碱基序列。
2、在切口平移方法标记DNA 探针时只能使用（）。
A、Klenow 酶；B、DNA 聚合酶Ⅰ；C、DNA聚合酶Ⅱ；D、DNA聚合酶Ⅲ。
3、在下列进行DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（）。
A、反应体积；B、酶反应温度；C、反应时间；D、酶量。
4、PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（）。
A、退火温度过低；B、退火温度过高；C、dNTP 浓度过高；D、循环次数过多。
5、以下不属于PCR 的应用的为（）。
A、随机扩增多态性DNA（RAPD）；B、扩增片段长度多态性（AFLP）；C、RACE；D、S1 酶作图。
6、pUC18 与pUC19 的区别在于（）。
基因工程期末考试试题及答案
基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案：B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶？A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案：C3. 基因枪技术主要用于：A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案：A二、填空题1. 基因工程中，常用的载体有________、________和________。
答案：质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中，________是基因表达的调控元件。
答案：启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。
2. 基因工程在医学领域的应用有哪些？答案：基因工程在医学领域的应用包括：生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。
答案：基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面：提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。
2. 基因工程在环境保护中的应用。
答案：基因工程在环境保护中的应用主要包括：开发生物修复技术，用于污染土壤和水体的净化；利用基因工程改造微生物，用于处理工业废水和废气；通过基因工程改良植物，用于重金属污染土壤的修复等。
五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉，该抗虫棉能够减少农药的使用，降低农业生产成本。
请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。
答案：该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量，减少因农药使用带来的健康风险。
经济效益包括降低农药成本，提高作物产量，增加农民收入。
环境效益包括减少农药对环境的污染，保护生态平衡，促进农业的可持续发展。
基因工程期末考试题及答案
基因工程期末考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 纤维素酶B. 限制性内切酶C. 淀粉酶D. 过氧化氢酶答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因的表达C. 基因的克隆D. 基因的测序答案：D3. 基因枪法是一种：A. 植物转基因方法B. 动物转基因方法C. 微生物转基因方法D. 所有生物的转基因方法答案：A4. 重组DNA技术中，通常使用哪种质粒作为载体？A. 质粒DNAB. 线粒体DNAC. 核糖体RNAD. 染色体DNA答案：A5. 基因工程中，目的基因的表达通常需要：A. 启动子B. 终止子C. 增强子D. 所有选项答案：D二、填空题（每空2分，共20分）1. 基因工程是指按照人们的意愿，将不同来源的基因在体外构建杂合DNA分子，然后导入到活细胞和生物体内，以改变生物的遗传特性并取得新品种或新产品。
2. 基因工程中常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母菌和________。
答案：哺乳动物细胞3. 基因工程中，________是连接目的基因和载体DNA的关键酶。
答案：DNA连接酶4. 目的基因的表达需要________和________的协同作用。
答案：启动子；终止子5. 基因工程产品在医学领域的应用包括生产________、________和基因治疗等。
答案：重组蛋白；单克隆抗体三、简答题（每题10分，共30分）1. 请简述基因工程在农业中的应用。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括提高作物的抗病性、抗虫性、抗旱性和提高作物的产量和品质。
例如，通过基因工程培育的抗虫棉可以减少农药的使用，提高棉花的产量和质量。
2. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、单克隆抗体、基因治疗和疫苗开发等。
例如，利用基因工程技术生产的胰岛素可以治疗糖尿病，单克隆抗体用于治疗癌症和自身免疫性疾病。
3. 请解释什么是转基因生物，并简述其潜在的风险。
20202021大学基因工程期末课程考试试卷含答案
20202021大学基因工程期末课程考试试卷含答案2020-2021大学基因工程期末课程考试试卷（含答案）一、选择题（共40题，每题2分，共80分）1. 以下哪项不是基因工程的主要应用领域？A. 转基因植物的培育B. 基因治疗的研究C. 疾病的基因诊断D. 遗传算法的应用2. 哪个细胞器是负责蛋白质合成的？A. 叶绿体B. 中心体C. 核糖体D. 质体3. 基因工程研究中的DNA重组技术是指：A. DNA的合成B. DNA的裂解C. DNA的修复D. DNA的重排4. 下面哪种技术是基因工程研究中经常用到的？A. 西方印迹B. 南方印迹C. 北方印迹D. 东方印迹5. PCR反应中，以下哪项是PCR的三个温度阶段？A. 解链、退火、延伸B. 解链、延伸、退火C. 退火、解链、延伸D. 延伸、退火、解链... （省略部分内容）二、判断题（共10题，每题2分，共20分）请判断以下各题，正确的在括号内打“√”，错误的在括号内打“×”。
1. （√）基因工程是应用与微生物的生物技术，对生物技术的发展起到了巨大推动作用。
2. （×）扩增子是一段有相同序列的DNA重复片段。
3. （√）逆转录聚合酶是将RNA的信息转录为DNA的酶类。
4. （√）转基因技术被广泛应用于农作物的改良。
5. （×）CRISPR/Cas9是一种RNA干扰技术。
三、简答题（共5题，每题10分，共50分）1. 请简述基因工程的概念及其应用领域。
解答示例：基因工程是利用生物技术对生物体中的基因进行操作与改变的一门学科。
其应用领域涵盖农业、医学、工业等多个领域。
例如，基因工程可以通过转基因技术，将具有特定性状的基因导入植物，提高作物的产量和抗逆能力；在医学领域，基因工程可以用于基因诊断、基因治疗等，旨在改善人类健康状况；在工业领域，基因工程可以生产各种重要蛋白质和化合物，应用于药物生产、环境污染治理等方面。
2. 请简述PCR反应的原理及其在基因工程中的应用。
(完整word版)基因工程期末复习题
2012级基因工程复习题名词解释1. 限制酶：是由细菌产生的一类能特异识别双链 DNA 中的特 定碱基序列，并在识别位点 切割磷酸二酯键的核酸内切酶。
2. 同尾酶：来源不同、识别序列不同，但切割后能产生相同黏性末端的限制性核酸内切酶。
3. 外切核酸酶：一类从多核苷酸的末端开始逐个降解核苷酸的酶。
4. 同切点酶：一类来源于不同微生物、能识别相同序列的限制性核酸内切酶。
5. 反转录酶：是依赖于RNA 的DNA 聚合酶，是分子克隆中重要的核酸酶之一。
6. 新裂酶：识别序列相同、但切割位点与原型酶不同的酶。
7. 星号活性：是指当条件改变时，许多酶的识别位点会改变，导致识别与切割序列的非特 异性的现象。
8. 质粒：存在于多种宿主细胞、独立于染色体外的可以自主复制闭合环状的 DNA 分子。
9. 松弛型质粒：其复制宿主不偶联，每个细胞中有几十到几百个拷贝数的质粒。
10. 隐蔽质粒：不赋予寄主细胞任何表型或者究竟赋予寄主细胞何种表型，迄今仍未清楚， 因此特称这类质粒为隐蔽质粒。
（自己搜的，正确性不明确）11. 人工染色体载体：染色体具有复制功能，利用染色体的复制元件来驱动外源DNA 片段复制的载体。
12. 表达载体：可携带外源DNA 片段进入宿主细胞进行复制并进行转录、翻译的载体，即用 于在宿主细胞中高水平表达外源蛋白质的载体。
13. 克隆载体：克隆和运载目的基因并转移到宿主细胞中进行复制和扩增的载体。
14. 平末端：限制性核酸内切酶在识别序列的对称轴上切割形成的片段末端。
15. 黏性末端：是指DNA 分子在限制酶的作用之下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构， 它们能够通过互补碱基间的配对而重新环化起来 。
16. 反向PCR 由已知的一段DNA 序列向两端扩增未知核苷酸序列并能快速获得未知序列的 PCF 操作。
17. PCR 平台效应：PCR 反应经过一定数量的循环后，随着产物的对数积累趋于饱和， 片段不再呈指数积累，而进入线性增长期或静止期的过程。
基因工程考核试题标准答案及评分细则.doc
《基因工程技术》题库第一章概论一、名词解释题基因，基因工程技术，内含子，外显子%1.简答题1.基因具有什么功能？2.基因工程技术的主要操作内容是什么？3.用图示筒要说明基因工程技术的技术路线。
4 .简述基因工程技术的巨大意义有我国在该领域取得的成就?5.生物制药专业的学生为什么要学习基因工程技术？第二章DNA重组一、名词解释题遗传密码，变性，复性，复制子，翻译与转录，基因突变与突变基因，表达二、简答题1.DNA的组成单位是什么？组成元素有哪些？组成成分是什么？2.基因突变的生物学效应是什么？3.D NA的复制与转录有何异同点？如何利用基因突变为制药服务？4 .简述生物物种的遗传稳定性和进化原理与DNA的性质与功能的关系第三章植物基因工程技术一、名词解释题转基因植物，植物细胞反应器，抗逆性，叶盘法二、简答题1.从用途出发，转基因植物FI前可以分为儿类？2.图示植物遗传转化基本过程3.简述农杆菌介导法生产转基因植物的注意事项。
4.植物基因工程技术研究应用在医药上的优势是什么？5.什么是抗虫转基因植物？第四章动物基因工程技术一、名词解释题动物乳腺生物反应器，转基因动物，显微注射法，胚胎干细胞1.简述转基因动物技术路线2.显微注射法制备转基因动物的主要过程及注意事项是什么？3.简述动物基因工程技术与医药领域的应用。
一、名词解释题细胞因子，基风工程技术抗体，基风工程技术疫苗，基因治疗二、简答题1.举例说明细胞因子的种类、功能及其临床应用2.简述基因工程技术抗体种类及结构特点3.举例说明基因工程技术激素类药物及其临床应用4.简述基因诊断和治疗的原理第六章基因工程技术工具酶一、名词解释题限制性内切酶，平末端与粘性末端，酶活性单位，回文序列二、简答题1.限制性内切酶的特点与使用注意事项有哪些？2.影响限制性内切酶反应的因素有哪些？3.简述限制性内切核酸酣在基|大I工程技术中的作用。
4.举例说明不同类型DNA片段是如何连接的。
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2013-2014年度第二学期基因工程期末考试
卷型：A 考试时间：90分钟满分：100分
一、名词解释（3×5）
限制性内切酶(或其它工具酶)：能在特异位点上催化双联DNA分子断裂，产生相应的限制性DNA片段
荧光定量PCR:所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法
（半定量PCR:是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法，通过mRNA反转录成cDNA，再进行PCR扩增，并测定PCR产物的数量，可以推测样品中特异mRNA的相对数量）
星活性：非标准条件下切割相似序列，产生非特异性片段
同裂酶（或同尾酶）：来源不同但具有相同识别序列，产生相同或不同末端
转基因技术（或转基因动植物等）：就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中，从而达到改造生物的目的。
二、填空（1×15）
1.Cosmid 实际上是由cos 位点和质粒构成的杂合载体，也可以说是带有cos 序列的质粒。
2.超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA 在琼脂糖凝胶电泳的特点是：电泳的泳动速度由大到小分别是：超螺旋质粒>线状质粒>开环质粒。
3.质粒DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。
4.基因工程中常用载体是质粒、噬菌体、动植物病毒。
5.设计引物是一般要求C+G的比例在40%-60%，长度在17-30bp 。
6.BAC载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性。
三、选择题（2×15，实卷应是1×35）
1.基因工程创始人（D）
A A. Kornberg
B W. Gilbert
C P. Berg
D S. Cohen
2.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（C）
A. 既可以作用于双链DNA ，又可以作用于单链DNA
B.只能作用于单链DNA
C. 只能作用于双链DNA
D.只能作用于RNA
3.氨苄青霉素的工作原理为（A ）
A.可以抑制细胞壁肽聚糖的合成
B.可以抑制核糖体的转位
C.可以与核糖体50S 亚基结合并抑制蛋白质合成
D.可以与核糖体30S 亚基结合并抑制蛋白质合成
4.反转录酶是一种（C ）
A. 依赖DNA的DNA聚合酶
B. 依赖DNA的RNA聚合酶
C. 依赖RNA的DNA聚合酶
D. 依赖RNA的RNA聚合酶
5.II 类限制性内切核酸酶( A )
A．仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
B．限制性识别非甲基化的核苷酸序列
C．有外切核酸酶和甲基化酶活性
D．仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
6.下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是II 类酶的识别序列(C)
A.GAATCG
B.AACCTT
C.GATATC
D.ACGGCA
7、（多选）在基因工程中，可用碱性磷酸酶( AB )。
A．止DNA 的自身环化
B．同多核苷酸激酶一起进行DNA 的5’端标记
C．制备突出的3’端
D．上述说法都正确
8.K1enow 酶与DNA 聚合酶相比，前者丧失了( C )的活性。
A．5’→3’合成酶B．3’→5’外切酶
C．5’→3’外切酶 D ．转移酶
9.自然界中存在的植物植物基因工程载体是（D）
A.YAC
B.根癌农杆菌
C. Puc18
D.Ti质粒
10．质粒具备下列特征，因此适合作为克隆载体，除了(B)。
A．赋予宿主细胞某种可检测的特性
B．甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解
C．独立复制的能力
D．可复制自身DNA 以及插入的外源DNA
11．用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为(C)。
A．染色体DNA断成了碎片
B．染色体DNA分子质量大，而不能释放
C．染色体变性后来不及复性
D．染色体未同蛋白质分开而沉淀
12.DNA提取过程中，异戊醇的作用是(D)。
A．使蛋白质脱水B．使DNA脱水
C．帮助DNA进入水相D．减少气泡，促进分相
13.PCR反应的必备条件是(B)。
A.至少有100个起始DNA分子B．拟扩增的目的DNA片段的部分序列信息C.扩增需要cDNA模板 D.至少100kb长度的模板
14.你打算扩增下面所示的两段序列之间的DNA，
5’-GACCTGTGGAAGC----------------------CATACGGGATTG-3’3’
-CTGGACACCTTCG-----------------------GTATGCCCTAAC-5’最适合的引物序列是（B ）。
A．引物1，5’-CTGGACACCTTCG 引物2，5’-GTATGCCCTAAC
B．引物1，5’-GACCTGTGGAAGC 引物2，5’-CAATCCCGTATG
C．引物1，5’-CGAAGGTGTCCAG 引物2，5’-GTTAGGGCATAC
D．引物1，5’-GCTTCCACAGGTC 引物2，5’-CATACGGGATTG
15、Southern 印迹是用DNA 探针检测DNA 片段，而Northern 印迹则是( C )。
A．用RNA 探针检测DNA 片段B．用RNA 探针检测RNA 片段C．用DNA 探针检测RNA 片段D．用DNA 探针检测蛋白质片段
四、简答题（5题×6）
1、基因工程的操作步骤是什么？制备目的基因方法有哪些？（或CTAB、SDS 原理？）答：1.获取目的基因2.从大肠杆菌中分离质粒3.酶切目的基因与质粒4.DNA连接酶连接目的基因与质粒5.导入受体细胞表达6.筛选与鉴定
获取目的基因方法：（1）以氨基酸序列为基础的功能克隆法（2）以核苷酸序列为基础的同源序列克隆法（3）基因组DNA文库（4）cDNA文库（5）图位克隆法
（6）转座子标签法（7）T-DNA插入法（8）mRNA差异显示法（9）化学合成法
（10）直接分离法（11）PCR分离法
2、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？
答：将外源DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。
载体应具备：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；②必须具备合适的酶切位
点，供外源DNA 片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于筛选；④其它：有一定的拷贝数，便于制备。
⑤遗传稳定
3、影响限制性内切酶的活性因素？
答：①DNA的纯度②DNA甲基化程度③DNA的分子结构④限制性核酸内切酶的缓冲液⑤酶切消化反应的时间和温度⑥反应体积和甘油浓度
4、简述cDNA文库的构建过程。
答：⑴细胞总RNA的提取和mRNA的分离
⑵第一链合成：由mRNA到cDNA的过程为反转录，由反转录酶催化。
⑶第二链合成：①自身引物合成法②置换合成法③引导合成法④引物—衔接头合成法
⑷双链cDNA里连接到质粒或噬菌体载体并导入大肠杆菌中繁殖
5、常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？（备选）
答：限制性内切核酸酶,DNA聚合酶和Klenow大片段,DNA连接酶,
碱性磷酸酶,末端脱氧核苷酸转移酶.
限制性内切核酸酶：能够识别特异的DNA碱基序列，DNA碱基序列往往呈回文对称结构；
DNA 聚合酶 a 位于细胞核内，也许是复合物，有催化细胞增生的作用；Klenow大片段：它也可以通过基因工程得到，分子量为76kDa 。
DNA连接酶：负责双链DNA中相邻3`-OH与5`-磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。
碱性磷酸酯酶：从DNA或RNA的三磷酸核苷酸上除去5`磷酸根残基。
末端转移酶的作用是将脱氧核糖核苷酸通过磷酸二酯键加到DNA分子的3`-OH末端。
6、重组分子筛选方法有哪些？并简述蓝白斑筛选原理。
（或基因工程在工农商的应用）
答：重组体的筛选方法：1 遗传表型筛选法2 结构特征筛选法3 核酸分子杂交筛选法4 免疫化学筛选法。
蓝白斑筛选原理：-半乳糖苷酶基因（Lac Z），其上有外源DNA的插入位点。
受体菌基因-IPTG诱导表达。
载
-半乳糖苷酶。
互补而产生的lacZ+细菌在诱导剂IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的作用下，在生色底物X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）存在时产生蓝色沉淀物，使菌落显蓝色。
如果外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，无法实现互补，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
五、综合论述（15分）
现有pBR322质粒载体，你想将小鼠（真核）中的一个序列已知、编码单体酶蛋白的基因在大肠杆菌（原核）中表达，怎样进行？你又如何确保最终能得到产
物? 请设计实验详细说明。