液质联用操作及注意事项
岛津公司液质联用仪LCMS操作手册LCMStrainingmaterial.pdf
LCMS简易操作手册前 言感谢您选择岛津公司的液质联用仪LCMS, 此本简易手册包括七节内容，供您学习参考。
学习LCMS之前，要求对高效液相色谱有一定的了解和熟悉。
更详细的软件功能及参数请参考软件说明书。
目录第一节 LCMS简易操作流程第二节 完全开关机和日常开关机第三节 系统配置第四节 方法设置和进样分析第五节 LCMSsolution定量分析第六节 LCMS调谐操作第七节 报告制作第一节：LCMS简易操作流程一 抽真空1．打开质谱右侧电源开关。
2．打开计算机。
3．打开LC-MS工作站，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。
4．点击左侧System Control按钮，进入抽真空界面，点击Auto startup,开始抽真空，直到Ready指示灯由黄变绿。
真正样品分析一般需要抽真空8小时以后才能进行。
以上步骤一般情况下不做，只有在卸真空后，重新开机时，才必须完成的步骤。
二 调谐MS1．配备调谐液及调谐液流动相。
2．连接好流路，ESI源调谐时，前端可以连阻尼管。
APCI源调谐时，可以直接PEEK管连接。
3. 进入LCMS Real Time Analysis 界面，点击Tuning，进入调谐界面。
4. 先保存调谐报告（File-Save Report as），而后点击Fill up,气泡排干净。
之后点击AutoTuning 开始进行调谐。
4. 调谐完成，虚拟打印调谐报告成PDF格式，保存。
以上步骤一般情况下不做，只有长时间未用、重新开机或仪器经过大的调整时，才必须完成的步骤。
三 联机1．开机前打开氮气发生器。
2．开泵、脱气机、系统控制器、柱温箱及PDA电源，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。
3．联机成功，显示Ready；操作失败，显示Not Connection。
四 建立分析方法1．在LCMS Real Time Analysis 界面，所有参数设置均在界面下半部分，如：MS、Interface，Data Acquisition LC Time Prog. Pump Column Oven.分别设置各操作参数， 保存方法文件。
液质联用操作方法
液质联用操作方法
液质联用（LC-MS）是一种结合液相色谱和质谱分析技术的方法，用于分析和鉴定化合物。
液相色谱（LC）部分步骤如下：
1. 样品预处理：将待测样品制备成液态，并进行适当的前处理（如提取、浓缩）。
2. 样品注射：将处理好的样品注射到液相色谱柱中。
3. 色谱分离：使用适当的流动相在柱上进行色谱分离。
根据样品的特性，可以选择不同的柱材和分离条件。
4. 数据采集：使用色谱检测器对分离出的化合物进行检测，并记录数据。
质谱（MS）部分步骤如下：
1. 离子化：通过引入电离源，将色谱分离出的化合物转化为带电荷的离子。
2. 分析：使用质谱仪分析离子的质量-荷比，并进行质谱图的记录和解释。
3. 数据处理：对质谱数据进行处理和解析，包括离子识别、质量准确度计算、离子结构推测等。
液质联用操作方法一般如下：
1. 准备样品并进行前处理。
2. 将样品注射到液相色谱装置中，进行色谱分离。
根据需要，可以选择不同的柱材和分离条件。
3. 将分离出的化合物引入质谱仪中，进行质谱分析。
可以选择不同的离子化方
式和质谱分析模式。
4. 记录和解释质谱数据，进行化合物的鉴定和定量分析。
5. 对数据进行处理和解析，进行结果的报告和解释。
液质联用方法在化学、生物、药物等领域中广泛应用，可用于定性和定量分析、代谢研究、蛋白质组学研究等。
具体的操作方法可以根据实验需求和仪器设备的不同进行调整和优化。
液质联用
现代分析技术之液相色谱-质谱联用技术一、 概述1、质谱质谱法（Mass Spectrometry）即质谱分析法不同质荷比的离子经质量分析器分离，而后被检测并记录下来的谱图叫做质谱图(Mass Spectrum)质谱图的横坐标是质荷比（m/z)，纵坐标是离子强度2、质谱检测的是离子质量质谱中采用的质量单位—Da=Dalton（道尔顿）质量单位，等于一个碳原子（12C）质量的十二分之一，约为1.66×10-24克；一克约为6×1023道尔顿—amu=atomic mass unit，原子质量单位1amu=1Da3、质量数¾名义质量数—采用元素质量数的整数进行计算，例如：C=12，H=1，O=16¾单同位素质量数或准确质量数—用丰度最大的同位素准确质量数计算—例如：12C=12,1H=1.0078,16O=15.9948¾平均质量数或化学质量数—考虑到所有天然同位素丰度的该元素原子量来计算—例如：C=12.001，H=1.00794，O=15.9994¾质谱获得的单电荷离子的m/z值，是单同位素质量数4、分子量的计算利血平，C33H40N2O9的MW的计算5、液质联用（LC/MS）色谱质谱的联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。
6、LC/MS中的液相色谱液质联用的前提和基础=进样+分离根据化合物的化学特性分离样品（比如极性化合物，非极性化合物，酸性化合物，碱性化合物等）LC的特点：分离技术分离效率高连续流出，峰宽有限有时需要使用缓冲盐提高分离度高压环境工作（>1000 psi）7、LC/MS中的质谱质量是物质固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱分析物被转化为气相离子而被分析离子按其质荷比（m/z）被分离及检测MS的特点：灵敏度高定性/定量高真空环境工作溶剂参与反应（API电离源）8、LC/MS的局限性异构体，立体化学方面区分能力差。
Waters 液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程
Waters Quattro Premier液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程（SOP）2004-11-09目录1．简述 (1)1.1样品入口 (2)1.2真空系统 (2)1.3数据系统 (2)2．环境要求 (3)3．仪器使用 (3)3.1开机步骤 (3)3.2质谱调谐窗口各项参数设定 (5)3.3创建项目 (6)3.4质量校正 (7)3.5调谐(Tuning) (14)3.6信号采集 (15)3.7 2695型液相色谱（Inlet Method） (19)3.8创建质谱方法 (25)3.9创建样品列表 (27)3.10 运行样品列表（ Sample List） (30)3.11 QuanLynx来编辑定量方法 (39)3.12 用QuanLynx进行批处理 (44)3.13 查看QuanLynx定量结果 (47)3.14关机 (52)4．注意事项 (53)5．维护与保养 (54)1. 简述Quattro Premier (Figure 1-1 )是一台高效串联四极杆质谱仪，用于常规LC/MS/MS分析。
Figure 1-1 Quattro Premier Mass Spectrometer样品的离子化发生在处于大气压状态下的离子源中。
离子通过取样锥孔进入真空系统，然后穿过源travelling-wave（T-Wave TM）进入第一级四极杆，在此按照质/荷比(m/z)过滤(Figure 1-2 )。
按照质量数分开的离子进入T-Wave碰撞室，进一步发生碰撞诱导裂解（CID）或者直接进入第二级四极杆。
碎片离子通过第二级四极杆进行质量分析。
离子最后经过倍增电极，phosphor和光电倍增器检测系统检测。
输出信号被放大，数字化后传给信号系统。
Figure 1-2 Quattro Premier Schematic1.1 样品入口该仪器可以与下列两种进样方式组合：a. HPLC系统，可以提供LC流出组分的分子量信息，进行目标分析和定量。
液质联用实验服务安全操作及保养规程
液质联用实验服务安全操作及保养规程背景液质联用技术在生物医学和化学分析等领域中得到广泛应用。
利用液质联用技术，可以对化合物的结构进行详细的分析和定量解析。
但是，如果在操作和保养过程中缺乏安全意识，会对人员和仪器设备造成严重的损害。
因此，本文档旨在为液质联用实验服务人员提供必要的安全操作和保养规程，以确保实验过程的安全性和仪器设备的稳定性。
安全操作规程风险评估在进行液质联用实验服务之前，必须对实验流程中可能出现的危险进行充分的评估。
评估结果将决定所需的安全措施和防护装备。
评估的主要内容包括：•有害物质的性质和数量；•风险控制措施和应急预案；•实验过程中可能出现的安全风险。
实验现场安全实验现场的安全是实验成功的前提条件。
操作前，必须充分准备，并特别注意以下几点：•确保实验区域清洁、宽敞、通风、明亮。
•穿戴合适的实验服，规范化妆。
避免穿戴过于紧身的衣物或戴着首饰。
•避免在实验现场饮食，吸烟或使用香水等化学制品。
•保持情绪稳定，注意仪器设备操作安全。
化学品的安全使用使用化学品时，必须严格执行安全规程。
包括以下几个方面：•熟悉化学品的物理化学性质、安全操作规程和应急处理准则。
•不允许将化学品倒在水中或混合使用不同的化学品。
•使用有毒、易燃或易爆物质时，必须正确使用个人防护装备。
•不得私自调整压力和真空等参数，严格遵守设备操作说明书的规定。
仪器设备的安全使用液质联用技术中，仪器设备是实验的核心。
为了确保设备的正常运行，必须遵循以下几个方面：•在操作仪器设备前，必须熟悉仪器设备的操作流程和仪器设备说明书。
•操作前要检查仪器设备是否处于正常工作状态。
•操作中不得超出仪器设备的规定范围，对仪器设备进行损坏或调整可能导致设备失效。
•在使用过程中，及时清洗和保养仪器设备。
不得使用清洗剂或工具对仪器设备进行清洗和保养。
保养规程日常清洁保养仪器设备的日常清洁保养对设备的正常运行、数据的准确性、实验的结果等方面具有重要作用。
液质联用操作规程
1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。
2. 职责2.1操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。
2.2保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。
2.3科室负责人负责监督检查规程的执行。
3．操作程序日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。
注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。
建立新方法和project的操作步骤：准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。
3.1开机：3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。
打开计算机电源> 等待windows正常启动>电脑界面右下角网络图标红叉。
打开UPLC自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。
打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。
打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。
打开Masslynx软件，masslynx主界面-----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。
至少抽真空4个小时> 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度>达到7.x e-5mbar 。
3.1.2 日常开机顺序（仪器未关闭）开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa，打开Masslynx软件，进入工作站。
液相色谱与质谱联用操作规程
液相色谱与质谱联用操作规程1开机步骤1.1 分别打开质谱、液相色谱和电脑电源，此时质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。
1.2待液相色谱通过自检，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。
a.Degasser On(打开脱气机)。
b.Wet Prime(湿灌注)。
c.Purge Injector。
d.平衡色谱柱。
1.3双击桌面上的MassLynx 4.1图标进入质谱软件。
如果进入软件时出现提示：“The embedded system is not responding, The system will run in standalone mode”，则说明质谱内置的CPU（EPC）与电脑主机的通讯联系还未建立，请稍等后再进入软件，如果打开软件仅为处理数据则没有关系（质谱主机电源未开时进入软件也会有同样提示）。
1.4点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。
1.5选择菜单“Options > Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。
等达到真空要求后，仪器前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。
1.6点击真空状态图标，检查真空规的状态，确认真空达到要求。
1.7确认氮气气源输出已经打开，输出压力为90 psi。
1.8设置源温度（Source Temp）到目标温度。
2.质谱调谐窗口各项参数设定2.1大气压化学电离源（APCI）2.2.1在质谱调谐窗口选择要使用的离子模式，Ion Mode>APCI+。
2.2.2进入Source界面，设定Source界面里各项参数。
Corona 高压放电针电流，正离子模式一般在0－10之间优化，负离子模式一般在0－5之间优化。
Source Temp 源温度，一般在120℃－150℃之间优化。
APCI Probe Temp APCI加热器温度，一般在300℃－600℃之间优化。
液质联用操作规程
1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。
2. 职责2.1操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。
2.2保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。
2.3科室负责人负责监督检查规程的执行。
3．操作程序日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。
注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。
建立新方法和project的操作步骤：准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。
3.1开机：3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。
打开计算机电源> 等待windows正常启动>电脑界面右下角网络图标红叉。
打开UPLC自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。
打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。
打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。
打开Masslynx软件，masslynx主界面-----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。
至少抽真空4个小时> 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度>达到7.x e-5mbar 。
3.1.2 日常开机顺序（仪器未关闭）开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa，打开Masslynx软件，进入工作站。
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hystar；hystarhystar；hystar软件培训资料；布鲁克公司北京应用技术培训中心； hystar软件介绍；软件功能：软件功能：；液质联用仪器控制和维护液质联用数据采集液质联用方；软件启动界面；简洁的软件启动界面，简洁的软件启动界面，按操作流；第一步：第一步：HardwareSetup硬件；调用已配置好并保存的硬件配置文件*.hss；或者；hystarhystar hystarhystar 软件培训资料布鲁克公司北京应用技术培训中心hystar 软件介绍软件功能：软件功能：液质联用仪器控制和维护液质联用数据采集液质联用方法编辑软件启动界面简洁的软件启动界面，简洁的软件启动界面，按操作流程，按操作流程，一步一步设置。
一步一步设置。
第一步：第一步：Hardware Setup 硬件配置调用已配置好并保存的硬件配置文件*.hss；或者新建硬件配置文件；或者新建硬件配置文件；建议将配置文件保存在C盘以外的路径下；的路径下；只有在硬件发生改动时，只有在硬件发生改动时，才有必要进行硬件配置，要进行硬件配置，日常实验可忽略这一步；这一步；Agilent 液相硬件配置模块化设置，模块化设置，分别选择泵、分别选择泵、进样器、进样器、柱温箱、检测器等模块的型号，检测器等模块的型号，特殊型号需安装相应的插件，装相应的插件，请与工程师联系。
请与工程师联系。
Waters 和Dionex 液相硬件配置整体设置， Waters UPLC 系列和 Dionex Ultimate系列在安装插件后才能在Hystar中显示。
中显示。
第二部：第二部：Method 方法文件配置调用已配置好并保存的方法配置文件*.m；方法文件应包含所有硬件对应的方法；的方法；方法可在下一步Sample Table（样品表）样品表）中分别设置。
中分别设置。
第三步：第三步：Sample Table 样品表编辑调用已编辑好并保存的样品表文件*.xml；或者新建样品表文件；或者新建样品表文件；建议按不同日期建立样品表文件；建议按不同日期建立样品表文件；样品表编辑界面- General样品表以Exel表形式列出，表形式列出，界面整洁；界面整洁；支持W indows 常用的复制、常用的复制、粘贴等命令，粘贴等命令，方便修改；方便修改；样品名进样体积样品盘位置数据保存路径样品表编辑界面- Methods液相方法编辑选择液相方法选择质谱方法对每个样品，对每个样品，可分别调用不同的液相方法、可分别调用不同的液相方法、质谱方法、质谱方法、数据处理方法等等；数据处理方法等等；建议不同硬件的方法，建议不同硬件的方法，如液相方法、如液相方法、质谱方法等，质谱方法等，分别保存在不同的路径下；分别保存在不同的路径下；可以将所有方法合并保存，可以将所有方法合并保存，生成Super method，即第二步中可调用的方法；即第二步中可调用的方法；质谱方法的编辑在 mi crOTOFcontrol 中，编辑好后保存为质谱方法文件，编辑好后保存为质谱方法文件， hystar 中只能调用文件；只能调用文件；液相方法编辑- General方法的描述信息方法编辑后，方法编辑后，可保存成单独的液相色谱文件，谱文件，以备调用。
以备调用。
液相方法编辑- LC parametersLC parameters又细分为四个页面；又细分为四个页面； LC Pump 定义了液相方法的流速、定义了液相方法的流速、流动相初始比例、流动相初始比例、运行时间和采集时间等参数液相方法编辑- AutosamplerAutosampler 定义了自动进样器的参数设置，定义了自动进样器的参数设置，包括吸取和排出的速度，排出的速度，进样针深度，进样针深度，洗瓶的位置；洗瓶的位置；液相方法编辑- Column Oven设置柱温箱温度液相方法编辑- Detector设置检测器采样频率液相方法编辑- LC Timetable设置流动相变化梯度液相方法编辑- Signal设置 hystar 中显示的检测信号，中显示的检测信号，包括紫外信号和质谱信号；号和质谱信号；可最大支持8个信号输出显示；个信号输出显示；第四步：第四步：进入Acquisition仪器控制界面编辑完样品表后，编辑完样品表后，点击 Acquisition键，即可进入第四步“第四步“Acquisition”仪器控制界面系统控制和状态区全紫外扫描数据和质谱数据显示区液相参数和色谱图显示区系统控制和状态区液相系统状态信息当前样品信息分模块显示，分模块显示，液相系统（液相系统（泵、进样器、进样器、柱温箱、柱温箱、检测器等）检测器等），质谱系统等；质谱系统等；对于Agilent 液相，液相，控制命令在相应模块的右键菜单中；控制命令在相应模块的右键菜单中；对于Dionex 液相和 Waters，可进入其自身的控制软件界面；可进入其自身的控制软件界面；液相控制和操作请参考液相系统说明书；液相控制和操作请参考液相系统说明书； hystar 状态区显示为绿色时，状态区显示为绿色时，表示所有系统准备就绪，表示所有系统准备就绪，可开始采集数据；可开始采集数据；点击“点击“start”开始数据采集数据采集开始批量或单次采集自定义采集结束后的系统设置使用批量采集可更灵活、使用批量采集可更灵活、方便的添加或删除样品采集结束后的系统设置自动关闭泵自动关闭检测器切换质谱到待机状态液质联用小常识1. 通讯问题有时会在液质联用中出现，一般通过重启软件或电脑解决；2.自动进样未完成时，容易出现通讯问题，建议不要做任何动作；3. 建议打开hystar 前，关闭单独运行的micrOTOFcontrol；4. 液质联用，流速不要大于0. 4mL/min（分流或用细内径的柱子i.d. <=2.1mm）；5. 流动相中尽量避免缓冲盐和表面活性剂； 6. 平衡柱子和冲洗柱子时，不要连质谱； 7. 注意液相系统的日常维护。
Divert ValveHPLCSyringe pumpBruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTMDivert Valve 校正模式（校正模式（含定量环）含定量环）Sample flow through the divert valve with loop:Divert valve in waste position: · HPLC to nebulizer. · syringe p ump via loop to waste -loop is filled with calibrant.From Syringe Pump To WasteDivert valve in source position: · HPLC via loop to nebulizer - c alibrant from loop is From injected to source. Syringe Pump To · Syr inge pump to waste.Waste Loop To Source From HPLC ColumnLoop To Source From HPLC ColumnConclusion: ···· constant flow, independent from valve posi tion. loop must be filled during runtime of the LC analysis. filling time of loop should be optimized with flow rate of syringe. calibrati on is done in post processing software (not in micrOTOFcontrol).Bruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTMDivert Valve 废液模式（废液模式（不含定量环）不含定量环）Divert valve in source position: ? green (HPLC) to yellow (nebuli zer). ? blue (calibrant) via loop to gray (waste). Divert valve in wa ste position: ? green (HPLC) is connected to grey (waste) -> HPLC flo w is not connected to source (this is useful for flushing HPLC or col umn. ? blue (calibrant) is connected to yellow (nebulizer).Conclusion: ? no constant flow, flow rate is dependent on valve p osition (HPLC flow <-> syringe flow). ? calibration can be done in mi crOTOFcontrol software or in post processing software. ? valve can be used for switching HPLC flow directly to waste. ? syringe pump can b e used for infusions.Bruker Daltonics micrOTOF Series Training R Veluri 08/14/06 V1.0 Enabling Life Science Tools Based on Mass SpectrometryTM多级质谱：多级质谱：Auto MS/MS 适用于定性MS/MS页面下又细分为四个分页面Auto MS/MS页面可定义自动二级质谱相关的数据采集策略；页面可定义自动二级质谱相关的数据采集策略； Smart Exclusion 会自动排除强度不变的背景；会自动排除强度不变的背景；动态排除是增加数据量；动态排除是增加数据量；根据实际背景离子添加相应的排除离子；根据实际背景离子添加相应的排除离子；根据实际背景（根据实际背景（基线）基线）确定绝对信号强度的阈值。