生化实验考题1
生化实验试题及答案

生化实验试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 以下哪种物质不是蛋白质的组成成分?A. 氨基酸B. 核苷酸C. 肽键D. 碳链答案:B2. 酶促反应中,酶的作用是:A. 降低反应的活化能B. 提高反应的活化能C. 改变反应的平衡位置D. 增加反应物的浓度答案:A3. DNA复制过程中,互补配对的碱基是:A. A-TB. G-CC. A-GD. T-C答案:B4. 下列哪种物质是细胞膜的主要成分?A. 蛋白质B. 脂质C. 碳水化合物D. 核酸答案:B5. 以下哪种方法可用于测定蛋白质的浓度?A. 紫外吸收法B. 比色法C. 电泳法D. 离心法答案:A二、填空题(每空1分,共10分)1. 细胞内负责合成蛋白质的细胞器是________。
答案:核糖体2. 酶的活性中心通常由________组成。
答案:氨基酸残基3. 真核细胞中,DNA复制主要发生在________。
答案:细胞核4. 细胞膜上的脂质主要是________。
答案:磷脂5. 蛋白质的一级结构是由________连接而成的。
答案:肽键三、简答题(每题5分,共20分)1. 简述DNA复制的过程。
答案:DNA复制是一个涉及解旋、合成和校对的复杂过程。
首先,DNA 双螺旋被解旋酶解旋,形成复制叉。
接着,DNA聚合酶在模板链上添加互补碱基,形成新的互补链。
同时,DNA连接酶将新合成的片段连接起来,形成完整的DNA分子。
2. 描述酶的专一性。
答案:酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应的特性。
这主要是因为酶的活性中心具有特定的形状和化学性质,能够与特定的底物结合,从而催化特定的反应。
3. 解释什么是基因表达。
答案:基因表达是指基因信息被转录成mRNA,然后翻译成蛋白质的过程。
这个过程包括转录和翻译两个主要步骤,是基因信息从DNA到蛋白质的传递过程。
4. 描述细胞凋亡的过程。
答案:细胞凋亡是一种程序化的细胞死亡过程,由一系列基因控制。
它包括细胞膜的凋亡信号接收、凋亡信号的传导、核DNA的断裂和细胞质的凝缩,最终导致细胞的分解和死亡。
生化习题(附答案)

生化习题(附答案)第一章蛋白质结构与功能一、选择题1.组成蛋白质的氨基酸是(CD)A、γ-氨基丁酸B、瓜氨酸C、天冬氨酸D、半胱氨酸E、β-丙氨酸2.下列哪些氨基酸属于碱性氨基酸(BD)A、丝氨酸B、组氨酸C、蛋氨酸D、精氨酸3.下列含有两个羧基的氨基酸是(C)A、苯丙氨酸B、赖氨酸C、天冬氨酸D、苏氨酸4.若样品蛋白质中含氮量为32克,则该样品的蛋白质含量为(D)A、100克B、32克C、72克D、200克E、50克5.测得某一蛋白含氮量是0.2克,此样品的约含蛋白质多少克?(B)A、1.00克B、1.25克C、1.50克D、3.20克E、6.25克6.处于等电点状态的蛋白质(A)A、分子不带净电荷B、分子带的电荷数最多C、电泳时泳动最快D、最不易沉淀7.下列关于蛋白质的叙述正确的是(D)A、均由20种L-α-氨基酸组成B、均有一个N-端和一个C端C、均有一、二、三级结构D、二硫键参与维持空间结构8.蛋白质的变性是由于?(D)A、蛋白质氨基酸组成的改变B、蛋白质氨基酸顺序的改变C、蛋白质肽键的断裂D、蛋白质空间构想的破坏E、蛋白质的水解9.谷胱甘肽分子中不包括下列那种氨基酸(C)A、GluB、GlyC、AlaD、Cys10.某种蛋白质分子结构分析具有一个N端和一个C端,该蛋白质的最高级结构是(C)A、一级结构B、二级结构C、三级结构D、四级结构11.关于肽键叙述正确的是(B)A、可自由旋转B、肽单元处于一个平面C、键能最高D、为非共价键12.维持蛋白质三级结构的最重要的化学键是BA. 氢键B. 疏水键C. 二硫键D. 肽键13.维系蛋白质四级结构的化学键是(ABCD)A、氢键B、疏水键C、离子键D、范德华力14.分离纯化蛋白质的方法可依据(ABCD)A、分子大小和形状不同B、电荷不同C、溶解度不同D、蛋白质密度和形状15.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:EA.盐键B.疏水键C.肽键D.二硫键E.氢键16.蛋白质变性是由于:DA.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏E.蛋白质的水解17.于280 nm 波长处有吸收峰的氨基酸是D:A.丝氨酸和亮氨酸B.谷氨酸和天冬氨酸C.蛋氨酸和赖氨酸D.色氨酸和酪氨酸E.精氨酸和组氨酸18.测得某一蛋白含氮量是0.2克,此样品约含蛋白质多少克?( B )A. 1.00克B.1.25克C. 1.50克D. 3.20克E、6.25克19.谷胱甘肽分子中不包括下列那种氨基酸(A )A. AlaB. GlyC. GluD. Cys二、填空题1.蛋白质分子中,含有两个氨基的氨基酸是Lys ,蛋白质分子中氨基酸之间以肽键连接。
生化检查试题及答案

生化检查试题及答案1. 人体血清中,哪种酶通常用来作为肝脏功能损伤的指标?A. 肌酸激酶B. 乳酸脱氢酶C. 丙氨酸氨基转移酶D. 肌酐激酶答案:C2. 血清中哪种物质的浓度可以反映肾脏的滤过功能?A. 尿酸B. 肌酐C. 总蛋白D. 葡萄糖答案:B3. 血红蛋白的测定通常用来诊断哪种疾病?A. 贫血B. 高血压C. 糖尿病D. 高胆固醇答案:A4. 哪种生化检查可以用来评估胰腺的功能?A. 胰岛素释放试验B. 甲状腺功能试验C. 肝功能试验D. 肾功能试验答案:A5. 血钙水平的测定对于诊断哪种疾病有帮助?A. 甲状腺疾病B. 骨质疏松症C. 心脏病D. 肝病答案:B6. 血清白蛋白水平的降低通常与哪种情况有关?A. 营养不良B. 急性感染C. 慢性肝病D. 所有以上情况答案:D7. 哪种生化检查可以反映肝脏的合成功能?A. 丙氨酸氨基转移酶B. 碱性磷酸酶C. 总蛋白D. 直接胆红素答案:C8. 胆固醇水平的测定通常用于评估哪种健康问题?A. 心血管疾病风险B. 糖尿病C. 肝脏疾病D. 肾脏疾病答案:A9. 哪种生化检查可以用于诊断甲状腺功能亢进?A. 甲状腺刺激激素B. 甲状腺素C. 游离三碘甲状腺原氨酸D. 所有以上情况答案:D10. 血糖水平的测定通常用于诊断哪种疾病?A. 贫血B. 糖尿病C. 高血压D. 心脏病答案:B。
生化室考试题及答案解析

生化室考试题及答案解析一、选择题(每题2分,共20分)1. 以下哪项不是细胞的基本组成元素?A. 碳B. 氢C. 氧D. 硅2. 酶的活性中心通常由哪种氨基酸组成?A. 酸性氨基酸B. 碱性氨基酸C. 非极性氨基酸D. 芳香族氨基酸3. 以下哪种物质不是DNA的组成成分?A. 脱氧核糖B. 磷酸C. 核苷酸D. 碱基4. 蛋白质的二级结构主要依靠哪种化学键?A. 氢键B. 离子键C. 疏水作用D. 范德华力5. 以下哪种物质是细胞膜的重要组成部分?A. 胆固醇B. 葡萄糖C. 核酸D. 氨基酸二、填空题(每空1分,共10分)6. 细胞膜的流动性主要是由于________的存在。
7. 细胞呼吸过程中,________是能量的主要来源。
8. 蛋白质合成的场所是________。
9. 核糖体是由________和________组成的。
10. 细胞周期包括________期、分裂期两个阶段。
三、简答题(每题10分,共20分)11. 简述DNA复制的过程。
12. 描述细胞分裂的类型及其特点。
四、计算题(每题15分,共30分)13. 已知某蛋白质分子由100个氨基酸组成,求其分子量。
(假设每个氨基酸的平均分子量为120)14. 假设某细胞在培养液中每30分钟分裂一次,求该细胞在8小时内分裂的次数。
答案解析一、选择题1. 答案:D。
硅不是细胞的基本组成元素,细胞主要由碳、氢、氧、氮等元素组成。
2. 答案:B。
酶的活性中心通常由碱性氨基酸组成,这些氨基酸可以形成氢键,稳定酶的结构。
3. 答案:C。
DNA的组成成分包括脱氧核糖、磷酸和碱基,不包括核苷酸。
4. 答案:A。
蛋白质的二级结构主要依靠氢键来维持。
5. 答案:A。
细胞膜的重要组成部分是胆固醇,它有助于维持膜的流动性和稳定性。
二、填空题6. 答案:磷脂双层。
7. 答案:葡萄糖。
8. 答案:核糖体。
9. 答案:rRNA,蛋白质。
10. 答案:间。
三、简答题11. 答案:DNA复制是一个半保留的过程,首先DNA双链被解旋酶解旋,然后DNA聚合酶在模板链上添加互补的碱基,形成两条新的DNA链。
生化实验复习题及答案

生化实验复习题及答案一、单项选择题1. 酶的催化作用主要依赖于其活性中心中的哪种基团?A. 疏水基团B. 极性基团C. 金属离子D. 氨基酸残基答案:B2. 以下哪种物质不是蛋白质的组成单位?A. 氨基酸B. 核苷酸C. 多肽D. 糖类答案:D3. DNA复制过程中,以下哪种酶负责解开双螺旋结构?A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. 拓扑异构酶D. 解旋酶答案:D二、填空题1. 蛋白质的一级结构是指_________的线性排列顺序。
答案:氨基酸2. 脂质体是一种由_________构成的球形结构。
答案:磷脂双层3. 核酸分子中的碱基配对遵循_________原则。
答案:互补配对三、简答题1. 描述糖酵解过程中的关键酶及其作用。
答案:糖酵解过程中的关键酶包括己糖激酶、磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶。
己糖激酶催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,磷酸果糖激酶-1催化果糖-6-磷酸磷酸化生成果糖-1,6-二磷酸,丙酮酸激酶催化磷酸烯醇丙酮酸转化为丙酮酸,同时生成ATP。
2. 简述细胞呼吸过程中的三个主要阶段及其能量产生。
答案:细胞呼吸的三个主要阶段包括糖酵解、柠檬酸循环和电子传递链。
糖酵解在细胞质中进行,产生少量ATP和NADH;柠檬酸循环在细胞线粒体基质中进行,产生NADH、FADH2和少量ATP;电子传递链在线粒体内膜上进行,通过氧化NADH和FADH2产生大量的ATP。
四、计算题1. 如果一个DNA分子中有1000个碱基对,其中腺嘌呤占20%,那么该DNA分子中鸟嘌呤的含量是多少?答案:由于DNA中腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)配对,鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)配对,且A+T=G+C,所以如果A占20%,则T也占20%,G 和C各占30%。
因此,鸟嘌呤的含量是1000个碱基对的30%,即300个鸟嘌呤。
生化考试题+参考答案

生化考试题+参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、血浆中哪种脂蛋白水平高的人群,动脉粥样硬化的发生率低( )A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、LDL和HDL正确答案:D2、δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶的辅基中含有( )A、硫胺素B、钴胺素C、烟酸D、吡哆醛E、核黄素正确答案:D3、帕金森氏病(Parkinson’s diseae)患者体内多巴胺生成减少,这是由于:( )A、蛋氨酸代谢异常B、胱氨酸代谢异常C、精氨酸代谢异常D、酪氨酸代谢异常正确答案:D4、尿毒症患者治疗中采用的血液透析、腹膜透析利用的原理是( )A、蛋白质是亲水胶体B、蛋白质的变性C、蛋白质的两性电离D、蛋白质的沉淀E、蛋白质不能透过半透膜正确答案:A5、下列对脂肪酸β-氧化的叙述中正确的是( )A、反应在胞液中进行B、反应产物为CO2和H2OC、反应在胞液和线粒体中进行D、反应过程中消耗ATPE、起始代谢物是脂酰CoA正确答案:E6、某底物脱下的2H氧化时P/O比值约为3.0,应从何处进入呼吸链:( )A、FADB、NAD+C、CoQD、CytbE、Cytaa3正确答案:B7、完全食肉的个体,下列哪种维生素可能缺乏?( )A、TPP+B、烟酸C、钴胺素D、VitCE、泛酸正确答案:C8、糖无氧分解有一步不可逆反应是下列那个酶催化的?( )A、3-磷酸甘油醛脱氢酶B、醛缩酶C、丙酮酸激酶D、乳酸脱氢酶E、磷酸丙糖异构酶正确答案:C9、苯丙酮尿症是先天性氨基酸代谢缺陷病,原因是( )A、缺乏二氢蝶啶氧化酶B、缺乏酪氨酸氧化酶C、缺乏苯丙氨酸氧化酶D、缺乏苯丙氨酸羟化酶正确答案:D10、细胞色素含有:( )A、胆红素B、铁卟啉C、血红素D、FADE、NAD+正确答案:B11、低血钾是指血钾浓度(mmol/L)低于( )A、5.5B、4.1C、5D、4E、3.5正确答案:E12、Tm是指什么情况下的温度?( )A、双螺旋DNA达到完全变性时B、双螺旋DNA开始变性时C、双螺旋DNA结构失去1/2时D、双螺旋结构失去1/4时正确答案:C13、肺在维持酸碱平衡中的作用是调节( )A、NaHCO3的浓度B、血浆H2CO3的含量C、NaH2PO4的含量D、NaHCO3和H2CO3的含量E、CO2呼出的速度正确答案:E14、在RNA分子中不含有的碱基是( )A、胞嘧啶B、尿嘧啶C、胸腺嘧啶D、鸟嘌呤E、腺嘌呤正确答案:C15、tRNA分子二级结构的特征是( )A、3’端有多聚AB、5’端有C-C-AC、有反密码子环D、有氨基酸残基E、尿嘧啶环正确答案:C16、体内氨的主要运输,贮存形式是:( )A、胺B、谷氨酰胺C、谷氨酸D、尿素E、嘌呤,嘧啶正确答案:B17、DNA复制与转录过程的许多异同点中,描述错误的是( )A、转录是只有一条DNA链作为模板,而复制时两条DNA链均可为模板链B、在复制和转录中合成方向都为5′→3′C、复制的产物通常大于转录产物D、两过程均需RNA引物E、两过程均需聚合酶和多种蛋白因子正确答案:D18、生物氧化CO2的产生是:( )A、呼吸链的氧化还原过程中产生B、有机酸脱羧C、碳原子被氧原子氧化D、糖原的合成E、以上都不是正确答案:B19、含GOT(AST)最多的组织是( )A、心B、肝C、骨D、脑E、肾正确答案:A20、DNA复制时,模板序列5′—TAGA—3′,将合成下列哪种互补结构?( )A、5′—TCTA—3′B、5′—ATCA—3′C、5′—UCUA—3′D、5′—GCGA—3′E、5′—TCUA—3′正确答案:A21、酶具有高效催化能力的原因是( )A、酶能改变化学反应的平衡点B、酶能降低反应的活化能C、酶能催化热力学上不能进行的反应D、酶能提高反应物分子的活化能正确答案:B22、下列关于辅基的叙述哪项是正确的?( )A、一般不能用透析和超滤法与酶蛋白分开B、是一种结合蛋白质C、与酶蛋白的结合比较疏松D、只决定酶的专一性,不参与化学基因的传递正确答案:A23、脂肪酸分解产生的乙酰 CoA的去路是( )A、合成脂肪B、一部分氧化供能,另一部分合成酮体C、合成胆汁酸D、合成胆固醇E、以上都是正确答案:B24、已知某混合物存在A.B两种分子量相同的蛋白质,A的等电点为6.8,B的等电点为7.8,用电泳法进行分离,如果电泳液的PH为8.3,则( )A、蛋白质A向正极移动,B向负极移动B、蛋白质A向负极移动,B向正极移动C、蛋白质A和B都向负极移动,A移动速度快D、蛋白质A和B都向正极移动,A移动速度快E、蛋白质A和B都向正极移动,B移动速度快正确答案:D25、三羧酸循环的限速酶是:( )A、延胡羧酸酶B、琥珀酸脱氢酶C、异柠檬酸脱氢酶D、丙酮酸脱氢酶E、顺乌头酸酶正确答案:C26、下列哪种胆汁酸是次级胆汁酸( )A、甘氨胆酸B、甘氨鹅脱氧胆酸C、牛磺胆酸D、脱氧胆酸E、牛磺鹅脱氧胆酸正确答案:D27、电子按下列各式传递,能偶联磷酸化的是:( )A、Cytaa3→ 1/2 O2B、琥珀酸→ FADC、CoQ → CytbD、SH2 → NAD+E、以上都不是正确答案:A28、下列关于cAMP的论述哪一个是错误的( )A、是由腺苷酸环化酶催化ATP产生B、是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的C、是细胞第二信息物质D、可被磷酸二酯酶水解为5'-AMP正确答案:B29、核酸中核苷酸的连接方式是( )A、氢键B、3’,5’-磷酸二酯键C、2’,5’-磷酸二酯键D、糖苷键E、2’,3’-磷酸二酯键正确答案:B30、天然蛋白质中不存在的氨基酸是( )A、瓜氨酸B、脯氨酸C、丝氨酸D、蛋氨酸E、半胱氨酸正确答案:A31、儿茶酚胺是由那种氨基酸转化生成的?( )A、谷氨酸B、胱氨酸C、赖氨酸D、酪氨酸E、色氨酸正确答案:D32、糖原分解过程中磷酸化酶催化磷酸分解的键是( )A、(-1,4-糖苷键B、(-1,4-糖苷键C、(-1,6-糖苷键D、(-1,6-糖苷键正确答案:A33、肌酸激酶催化的化学反应是:( )A、肌酸→肌酐B、肌酸+ATPC、肌酸+CTPD、乳酸E、肌酸+UTP正确答案:B34、脂肪酸合成时所需的氢来自( )A、NADHB、NADPHC、FADH2D、NFMNH2E、UQH2正确答案:B35、磷酸戊糖途径的真正意义在于产生( )的同时产生许多中间物如核糖等。
生化室考试题及答案

生化室考试题及答案****一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶的活性中心是指:A. 酶分子上具有催化活性的区域B. 酶分子上与底物结合的区域C. 酶分子上与辅酶结合的区域D. 酶分子上与抑制剂结合的区域**答案:A**2. 以下哪种物质不是蛋白质合成的原料?A. 氨基酸B. 核苷酸C. 核糖D. 脱氧核糖**答案:C**3. 糖酵解过程中,下列哪种物质是NADH的来源?A. 葡萄糖B. 3-磷酸甘油醛C. 6-磷酸果糖D. 丙酮酸**答案:B**4. 以下哪种维生素是辅酶A的组成部分?A. 维生素AB. 维生素B1C. 维生素B2D. 维生素B5**答案:D**5. 脂肪酸的合成过程中,以下哪种酶是必需的?A. 柠檬酸合酶B. 丙酮酸激酶C. 脂肪酸合成酶D. 琥珀酸脱氢酶**答案:C**6. DNA复制过程中,以下哪种酶负责解开双螺旋结构?A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. DNA限制酶**答案:C**7. 以下哪种物质是细胞呼吸的主要产物?A. 二氧化碳B. 乳酸C. 乙醇D. 丙酮酸**答案:A**8. 以下哪种氨基酸是必需氨基酸?A. 丙氨酸B. 赖氨酸C. 谷氨酸D. 丝氨酸**答案:B**9. 以下哪种物质是细胞膜的主要组成成分?A. 蛋白质B. 核酸C. 多糖D. 脂质**答案:D**10. 以下哪种激素是类固醇激素?A. 胰岛素B. 肾上腺素C. 甲状腺素D. 性激素**答案:D**二、填空题(每空1分,共20分)1. 酶的催化机制中,底物结合到酶的活性中心后,通过______降低反应的活化能,从而加速反应速率。
**答案:诱导契合**2. 蛋白质的一级结构是指蛋白质分子中的______序列。
**答案:氨基酸**3. 在DNA复制过程中,新合成的链与模板链之间的互补配对是通过______碱基配对实现的。
**答案:A-T和C-G**4. 细胞呼吸过程中,NADH和FADH2在线粒体内膜上的电子传递链中被氧化,释放的能量被用来合成______。
生化试题(含答案)

第一章核酸的结构和功能一、选择题1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是()A、骤然冷却B、缓慢冷却C、浓缩D、加入浓的无机盐2、在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,取决于()A、DNA的Tm值B、序列的重复程度C、核酸链的长短D、碱基序列的互补3、核酸中核苷酸之间的连接方式是:()A、2’,5’—磷酸二酯键B、氢键C、3’,5’—磷酸二酯键D、糖苷键4、tRNA的分子结构特征是:()A、有反密码环和 3’—端有—CCA序列B、有密码环C、有反密码环和5’—端有—CCA序列D、5’—端有—CCA序列5、下列关于DNA分子中的碱基组成的定量关系哪个是不正确的?()A、C+A=G+TB、C=GC、A=TD、C+G=A+T6、下面关于Watson-Crick DNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是正确的?()A、两条单链的走向是反平行的B、碱基A和G配对C、碱基之间共价结合D、磷酸戊糖主链位于双螺旋内侧7、具5’-CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列哪种RNA杂交? ()A、5’-GpCpCpAp-3’B、5’-GpCpCpApUp-3’C、5’-UpApCpCpGp-3’D、5’-TpApCpCpGp-3’8、RNA和DNA彻底水解后的产物()A、核糖相同,部分碱基不同B、碱基相同,核糖不同C、碱基不同,核糖不同D、碱基不同,核糖相同9、下列关于mRNA描述哪项是错误的?()A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。
B、真核细胞mRNA在 3’端有特殊的“尾巴”结构C、真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构10、tRNA的三级结构是()A、三叶草叶形结构B、倒L形结构C、双螺旋结构D、发夹结构11、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是()A、氢键B、离子键C、碱基堆积力 D范德华力12、下列关于DNA的双螺旋二级结构稳定的因素中哪一项是不正确的?()A、3',5'-磷酸二酯键 C、互补碱基对之间的氢键B、碱基堆积力 D、磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键13、Tm是指( )的温度A、双螺旋DNA达到完全变性时B、双螺旋DNA开始变性时C、双螺旋DNA结构失去1/2时D、双螺旋结构失去1/4时14、稀有核苷酸碱基主要见于( )A、DNAB、mRNAC、tRNAD、rRNA15、双链DNA的解链温度的增加,提示其中含量高的是()A、A和GB、C和TC、A和TD、C和G16、核酸变性后,可发生哪种效应?()A、减色效应B、增色效应C、失去对紫外线的吸收能力D、最大吸收峰波长发生转移17、某双链DNA纯样品含15%的A,该样品中G的含量为()A、35%B、15%C、30%D、20%二、是非题(在题后括号内打√或×)1、杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。
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1、简述分光光度法的原理和分光光度计的操作步骤。
原理:物质对不同波长的光波有选择吸收的特性,利用单色光可测定物质对光的吸收能力。
根据Lambert-Beer定律:A=lgl/T=lgI。
/I=εbC,在分光光度计的测定范围内,可测定某一浓度物质的A值。
注:单色光、稀溶液、0.2-0.8、最大波长处、加合性
步骤:(1)预热:通电,开盖,选择“T”,预热20min(2)取比色杯。
光面为光通路,手拿毛面,样品入比色杯后,滤纸擦拭杯外液体
(3)装样:空白管放在靠近自己的第一个孔,比色杯中液体占总体积2/3~4/5(4)调零:选“T”,关盖,按100:;开盖,按0.选择“A”,关盖,按0(5)测量
2、等电点的定义,为什么等电点时蛋白质溶解度最低?
定义:蛋白质分子酸性离解与碱性离解相等,静电荷和净迁移率均为0时溶液的pH为该蛋白质的等电点
等电点时蛋白质处于等电状态,蛋白质颗粒上的静电荷为零,无电荷间的排斥作用,容易凝集成大颗粒而沉淀,因而最不稳定,溶解度最小。
3、以实验folin酚法测定人体血清蛋白含量为例,说明样品待测液显
色浓度、样品待测液浓度与样品实际浓度三个基本概念。
样品待测液显色浓度:样品与显色试剂甲、乙显色后,和标准液进行颜色强度对比得出的样品浓度;
样品待测液浓度:稀释并显色后的样品由分光光度计测定A值,通过标准曲线法查得或标准管法求得的待测管的蛋白质浓度
样品实际浓度:稀释500倍的待测血清的实际浓度
4、以蔗糖为例,分三个方面简述蔗糖酶专一性测定原理。
蔗糖分子组成为α-吡喃葡萄糖-1,2-β-呋喃果糖,蔗糖酶专一水解α-吡喃葡萄糖-1,2-β-呋喃果糖苷键,故能催化蔗糖水解,水解产物与班氏试剂共热可产生红棕色沉淀。
实验在同一条件下设置对照组和实验组,变量分别为pH值、温度、蔗糖酶的浓度。
5、简述醋酸纤维薄膜电泳法的原理及操作步骤。
原理:
用醋酸纤维素薄膜作为支持物,用合适pH值的缓冲液使Pr带电,在电场力作用下,带电颗粒向着与其电性相反的电极移动。
由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液中,则蛋白质将带正电荷而向负极移动。
反之,则向正极移动。
依据V=Eq/6πrη得蛋白质分子在电场中移动的速度与其带电量、分子的形状及大小有关,所以,可用电泳法将不同的蛋白质分离开来。
(血清中含有多种蛋白质,它们的等电点都在pH 7.5以下。
将血清放于pH 8.6的缓冲液电泳时,所有的血清蛋白都带有负电荷,在电场中将向正极移动。
由于各种血清蛋白在相同pH时所带电荷数量不等,分子颗粒大小不一,因而泳动速度不同,经电泳被分离开来)。
分离后的Pr经显色或紫外光等可进行测定。
步骤:1.泡膜(薄膜毛面一端1.5cm处铅笔划线) 2.准备仪器3.点样 4.电泳
5.检测鉴定(5.染色
6.浸洗
7.定量)
6、简述凝胶过滤层析法的原理和操作步骤。
原理:凝胶颗粒内部有大小不一的孔隙,且孔隙大小有一定范围,相对分子质量大的物质能够更容易从颗粒间缝隙通过而最先被洗脱出来,相对分
子量最小的物质最后被洗脱出来,从而将不同成分分离开。
操作:1.准备凝胶 2.装柱、 3.处理样品4.上样、洗脱5.观察、收集6.透析 7.鉴定)
7、乳酸脱氢酶(LDH)有几种同工酶,经过醋酸纤维薄膜电泳分离前后顺序怎样?
由阳极到阴极依次为LDH1、2、3、4、5
8、什么叫酶动力学?做酶动力学实验操作的注意事项有哪些?
酶动力学是研究酶结合底物能力和催化反应速率的科学。
预热,保证反应迅速开始;使用微量加样器精确取样和加样;配置各种试剂和反应液必须混匀;加酶液要迅速准确;各酶促反应尽量同时开始,严格控制反应时间相同;注意试剂滴加顺序
9、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。
三个不连续:缓冲液成分、pH、凝胶孔径不连续
三个物理效应:浓缩效应、分子筛效应、电荷效应
10、用分光光度法测定物质的浓度时,制作标准曲线须注意些什么?
曲线以A为纵坐标,相应的溶液浓度为横坐标;选择合适的标度;做出的曲线为过原点的直线
操作
1、分光光度法的操作
2、刻度吸量管的使用
3、离心机的使用
4、电泳操作。