肿瘤的免疫诊断及治疗

二 被动免疫治疗
2.过继免疫疗法
将自身或异体抗肿瘤效应细胞或其前体细胞在体外进行诱 导、激活和扩增，然后转输给肿瘤患者，提高患者抗肿瘤 免疫力，以达到治疗和预防复发的目的 常见的免疫效应细胞有LAK、TIL、CD3AK、CTL
LAK（lymphokine activated killer）

常见的标记物质有： 肝癌的甲胎蛋白（AFP） 结肠癌的癌胚抗原（CEA） 胰腺癌的糖链抗原（CA199） 前列腺癌的前列腺特异性抗原（PSA）
甲胎蛋白（AFP） 是胎儿早期血清中主要的蛋白质。分泌型胚胎抗原，主要 由胎肝和卵黄囊产生的糖蛋白。当肝细胞或生殖腺胚胎组 织发生恶性病变时，AFP含量升高. AFP的检测: EIA 和RIA ；正常成人<20 μg/L 成人血清AFP升高见于： ☞原发性肝癌（80-90 %）可在症状出现前6-12个月作出诊 断 ☞非转移性肝癌及肝外肿瘤，生殖腺胚胎癌、胃癌或胰 腺癌 ☞非肿瘤性疾病；先天性胆道闭锁症，急性肝炎，肝硬 化等 ☞孕妇血清AFP增高
血清PSA升高见于： （1）来自列腺癌患者可见血清PSA浓度升高。以血清t-PSA >4μg /L判断阳性，则阳性率可达50%-80%。t-PSA血清浓度和阳性率随 着病程的进展而增高，因此，PSA可作为监测前列腺癌病情变 化和疗效的重要指标。 （2）前列腺肥大、前列腺炎，也可见t-PSA和f-PSA水平轻度升 高，必须结合其它检查进行鉴别。 （3）单独使用t-PSA和f-PSA升高来诊断前列腺癌时很难排除前 列腺增生症，特别是当t-PSA在5 μg /L-10 μg /L时。此时应用tPSA和f-PSA来判断。t-PSA/f-PSA<10%提示前列腺癌，t-PSA和fPSA比值>25%时提示前列腺增生症。其特异性达90%, 正确率 >80%。
癌胚抗原（ CEA） 主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常情况 下CEA入胃肠道，而肿瘤细胞分泌的CEA则进入血液和淋巴 液，故血中CEA含量会增高。 CEA的检测： EIA 、RIA 参考值 <5μg/L （97%健康人低于此值） 血清CEA升高见于： ☞ 消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。 ☞ 非消化道恶性肿瘤：如卵巢癌、肺癌有不同程度升高。 ☞ 检测胸、腹水或胃液的CEA含量对鉴别诊断有意义。 ☞ CEA与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症的检 出率。
毒素
蓖麻毒素由A、B两条链组成。A链比B链稍短，两链之间以一个二硫 键相连接。当毒素进入体内，A、B链分开。A链通过渗透经细胞膜进 入细胞浆，主要使真核细胞的核糖体抑制失活，从而抑制蛋白质的合 成。B链与细胞表面结合，通过内陷作用转入细胞内，它能促使A链进 入胞浆。主要通过抑制蛋白质合成来杀伤癌细胞 白喉毒素 绿脓杆菌外毒素 其中放射性核素应用方便、标记简便，易显像及定位定量检测，并能破 坏邻近未被单抗结合的肿瘤细胞，因此应用最多。
糖链抗原（CA199） （CA19-9）在消化道腺癌病人血清中的浓度可明显升高，是 胰腺癌和胆管癌的肿瘤标志物。 [参考值] ELISA法 0~3.7 ku /L （1）胰腺癌(80%~95%)、肝癌、胆管癌、胃癌时CA19-9 可明 显升高。 （2）急性胰腺炎、胆汁淤积性胆管炎、胆石症、急性肝炎、 肝硬化 等CA19-9有不同程度升高。 （3） CA19-9、 CA50与CEA联合检测可提高阳性检出率
（三）核酸疫苗
DNA疫苗是指人工克隆一段编码 肿瘤特异性抗原的DNA，并通过质粒等方式注入机体，使其 在体内细胞中有效表达蛋白而成为肿瘤特异性抗原。这种抗 原模仿了病毒蛋白等内源性抗原的递呈方式，解除了免疫耐 受，诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。DNA疫苗虽有许 多问题有待研究，但显示了诱人的前景。
HBV或HCV感染与原发性肝癌
HBV (Hepatitis B virus ) HCV (Hepatitis C virus )
HPV感染与宫颈癌
人类乳突病毒Human Papilloma virus
CTL
用特异性多肽抗原体外诱导CTL克隆
三 细胞因子疗法
将某些细胞因子注射体内后，可调节、增强一种或多种免疫 细胞的活性，发挥更强的抗肿瘤免疫功能 目前临床常用的细胞因子有IL-2、TNF-α、IFN-γ、CSF等
细胞因子用于免疫治疗
IFN-α, IFN-β 缓解毛细胞白血病, 对癌症有弱的效应 增加MHC-I分子的表 达 增加MHC-I分子的表 达, 激活Tc 和 NK 细胞 使T细胞活化和增殖, 激活NK细胞 激活巨噬细胞和淋 巴细胞
免疫导向疗法
将具有细胞毒作用的杀伤因子与单克隆抗体偶联制成“生 物导弹”，利用单抗能特异性结合肿瘤抗原的特性将杀伤 因子“导向”肿瘤病灶，杀伤肿瘤细胞
常用的杀伤因子：
放射性核素(131I) 抗肿瘤药物
氨甲蝶呤临床用于急性白血病，尤其是急性淋巴细胞性白血病，绒毛 膜上皮癌及恶性葡萄胎等效果较好。对头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌及 盆腔肿瘤均有一定疗效。 阿霉素主要适用于急性白血病，对急性淋巴细胞白血病及粒细胞白血 病均有效，一般作为第二线药物，即在首选药物耐药时可考虑应用此 药。恶性淋巴瘤，可作为交替使用的首先药物。乳腺癌、肉瘤、肺癌、 膀胱癌等其他各种癌症都有一定疗效，多与其他抗癌药联合使用。
IFN-β
缓解卵巢癌
IL-2
缓解肾细胞癌和黑 色素瘤 减少恶性腹水
TNF-α
四 基因疗法
克隆某些可用于肿瘤治疗的目的基因，体外转染受体细胞， 然后回输体内 直接将目的基因体内注射，使目的基因在体内有效表达 增强体内抗肿瘤作用或改善肿瘤微环境以增强抗肿瘤免疫 力
目前常用的抗肿瘤目的基因
能够杀伤NK不敏感肿瘤细胞 TIL（tumor infiltrating lymphocytes）
卵巢部位的原发或继发肿瘤。
用高浓度IL-2激活来自患者自体或正常供者的外周血单个核细胞，
从切除的瘤组织或癌性胸腹水中分离淋巴细胞，体外经IL-2诱导 激活扩增。TIL已应用于临床，主要治疗皮肤、肾、肺、头颈部、肝、
（一） 细胞疫苗
1 基因修饰的肿瘤细胞
细胞因子的基因或 MHCI 分子的基因等转移入 肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫原性。
2 基因修饰的树突状细胞（DC）
（二）分子疫苗
1
2
肿瘤抗原疫苗 包括TAA/TSA疫苗、MHC抗原多肽复合疫苗、HSP-肽复合 体疫苗，以及人工合成肿瘤肽疫苗等。热休克蛋白(HSP)是在生物进化中高 度保守、广泛分布的蛋白质，具有“分子伴侣”(molecule chaperone)作用， 参与多种胞内蛋白的折叠、装配及转运。从肿瘤组织中提取的HSP-肽复合 体含有多种肿瘤相关肽，可诱导多个肿瘤特异性CTL克隆，发挥特异性杀伤 作用，而且不受MHCⅠ类抗原限制，因此，HSP-肽复合体疫苗展示一定的 应用前景。 与肿瘤发生有关的病毒疫苗病毒疫苗不仅可以预防病毒性疾病，更重要的 可以预防或治疗人类许多与病毒感染密切相关的肿瘤，如乙型肝炎病毒疫 苗。目前，以病毒为载体与其他肿瘤抗原或多肽组成的重组病毒疫苗(如重 组痘苗病毒)正在研制和I期临床试验之中。
肿瘤的免疫诊断
肿瘤的免疫诊断：
通过生化和免疫学技术检测肿瘤抗原、抗肿瘤抗体或其 他肿瘤标记物。
肿瘤的免疫诊断包括三个方面： ①检查肿瘤标记物质 ②检查特异性抗体 ③检查细胞免疫状态
肿瘤标志物的定义： 肿瘤标志物（tumor marker, TM）是指在肿瘤的发生和 增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿 瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质。 一般可以从血或尿中检测。
肿瘤的免疫学治疗
肿瘤的免疫学治疗
1． 主动免疫治疗
给机体输入具有抗原性的瘤苗，刺激机体免疫系统产 生抗肿瘤免疫以达到治疗肿瘤、预防肿瘤转移和复发的目 的。 给机体输入外源性的免疫效应物质，使其在宿主体内 发挥抗肿瘤作用。
2 被动免疫治疗
3． 细胞因子治疗 4 肿瘤的基因治疗
一 主动免疫治疗
肿瘤的特异性主动免疫治疗(ASI)是指利用肿瘤细胞或肿瘤 抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫，增强机 体的抗瘤能力，阻止肿瘤的生长扩散和复发以治疗肿瘤的 方法。
酶联免疫吸附试验（ELISA ） （Enzyme linked lmmunosorbent Aassay）
【原理】把抗原抗体的免疫反应和酶（主要有辣根过氧化物 酶、碱性磷酸酶等）的高效催化作用有机地结合起来，并仍
保持其免疫和酶的活性。结合在抗原抗体复合物上的酶在遇
到相应的底物时，可以催化底物水解、氧化或还原，从而产 生有色的物质。颜色反应的深浅与抗体或抗原的量成正比。
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抗独特型抗体疫苗抗独特型抗体作为抗原的内影像，可模拟抗原的结构并 代替肿瘤抗原成为疫苗，诱发机体产生特异性抗肿瘤免疫应答。制备简便， 只需以肿瘤特异性单克隆抗体作为免疫原，制备抗体并筛选具有内影像作 用的抗独特型抗体，不需要分离或鉴别肿瘤抗原。抗独特性疫苗的优点 在于不含抗原或抗原片段，制备起来经济，可大量人工合成。抗独特性抗 体的分子量 小，其免疫原性往往不完全，故需与免疫载体结合。采用抗 独 特性抗体疫苗已治疗了淋巴瘤、黑色素瘤、结肠癌、皮肤T 淋巴细胞瘤、卵 巢癌等，其临床疗效有待观察。一组临床试验 用抗独特型抗体疫苗治疗了 40例恶性淋巴瘤，15％获完全缓解 、50％获部分缓解，缓解期为6个月左右。 抗独特型抗体疫苗治 疗的主要障碍是肿瘤内存在独特型阴性的细胞，因而 可逃脱 免疫反应的攻击。
细胞因子基因 肿瘤抗原基因
IL-2～12、IFN-γ、TNF-α、CSF等基因
MAGE、CEA等基因
MHC基因 协同刺激分子基因 肿瘤自杀基因
抑癌基因
TK、CD基因等
CD54、LFA-3等基因