乙肝表面抗原检测操作规程
乙肝病毒表面抗原诊断操作规程
乙肝病毒表面抗原诊断操作规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。
2、将标本对应微孔按顺序编号。
3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照
各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。
4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）
充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。
5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，
静置5秒，甩干，重复5次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。
6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，
封板，置37度孵育15分钟。
7、每孔加终止液1滴，混匀。
8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双
波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。
二、结果判断：
样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。
阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。
三、注意事项：
1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。
2、封片不能重复使用。
3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。
4、不同批号的试剂不可混用。
5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。
6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程处理。
乙肝表面抗原试剂条操作说明书
乙肝表面抗原试剂条操作说明书操作步骤：1. 准备工作在操作前，请确保以下物品已准备妥当：- 乙肝表面抗原试剂条- 试剂条开封器- 试剂条操作台- 样本采集针- 乙肝表面抗原检测所需的标本（血液样本）- 记录表格2. 使用前准备将乙肝表面抗原试剂条和试剂条开封器放置在干燥而洁净的操作平台上。
确保操作平台没有任何杂质。
3. 样本采集使用样本采集针采集需要检测的血液样本。
确保采样过程中要按照卫生规范进行，避免交叉感染。
4. 操作步骤a) 取出一条试剂条，同时确保试剂条上的标识未损坏或模糊不清。
b) 将采集的血液样本滴于试剂条指定位置。
注意滴液量不得少于标记线，也不能超过标记线。
c) 在试剂条上滴加适量（约2-3滴）的检测缓冲液。
d) 将试剂条放置在水平表面上，等待反应发生。
反应时间约为10-15分钟。
e) 操作时间结束后，观察试剂条上的结果。
5. 结果解读a) 阅读结果应在15分钟内进行，不应延迟。
b) 结果判断应基于试剂条上显示的线条颜色。
- 若试剂条上出现两条线（测试线和对照线）显示红色或粉色，表明该血样中包含乙肝表面抗原。
- 若试剂条上仅有对照线出现，而测试线没有出现或颜色较浅，表明该血样中不含乙肝表面抗原。
- 若试剂条上的任何线条未显示，或显示结果不清晰，应重新进行测试。
6. 结果记录将结果记录在预先准备的记录表格上。
记录时应包括样本编号、操作时间、结果判断等信息。
7. 清理与处理操作结束后，将已使用的试剂条和其他废弃物放入指定的废弃物容器中。
同时，清洁操作平台和周围区域，确保卫生与安全。
注意事项：- 本试剂条仅用于乙肝表面抗原检测，其他用途请勿使用。
- 请在产品有效期内使用，过期产品可能导致结果不准确。
- 请遵循正确的操作步骤，以获得准确的检测结果。
- 请妥善保存并存放本试剂条，避免受潮或受到阳光直射。
- 如对操作步骤或结果解读有任何疑问，请咨询相关专业人员。
本操作说明书仅供参考，请确保在操作前详细阅读并理解本书上的信息。
乙肝表面抗原检测流程
乙肝表面抗原检测流程
1. 采集样本，通常使用静脉血作为检测的样本。
医务人员会使用消毒的针头抽取一定量的血液。
2. 样本处理，采集到的血液样本会被送往实验室进行处理。
在实验室中，血清会被分离出来，以便进行后续的检测。
3. 酶免疫法检测，乙肝表面抗原通常使用酶免疫法（ELISA）进行检测。
ELISA是一种常用的免疫学检测方法，通过检测血清中特定抗原或抗体的存在来进行诊断。
4. 结果分析，实验室技术人员会分析样本中乙肝表面抗原的检测结果。
阳性结果表明患者体内存在乙肝病毒，阴性结果则表明患者体内暂时没有乙肝病毒的感染。
5. 结果报告，最终的检测结果会被记录在报告中，并由医生进行解读和诊断。
如果检测结果呈阳性，医生可能会建议进行进一步的检测以确认诊断，并制定相应的治疗方案。
需要注意的是，以上流程仅为一般的乙肝表面抗原检测流程，
具体的操作步骤可能会因医疗机构和实验室的不同而略有差异。
在进行乙肝表面抗原检测前，建议咨询专业医生以获取详细的检测流程和注意事项。
1乙肝表面抗原检测操作规程
1.1乙肝表面抗原检测操作规程-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA）1原理：在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。
2试剂：试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司包装规格：96Test/Kit试剂盒组成：HbsAb预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg酶标抗体（含HRP标记HbsAb）, HbsAg阳性对照（含基因工程HbsAg），HbsAg阴性对照（正常人血清），HbsAg样品稀释液（含BSA缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T 缓冲液），底物A（含H2O2），底物B（含TMB），终止液（含H2SO4），封板膜，自封袋，说明书。
试剂储存条件及有效期：2~8℃避光保存，有效12个月。
3样本采集：取静脉血3-4ml于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可置于4℃冰箱保存，如长期保存需置于-15至-20℃冻存，并避免样本反复冻融。
高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。
4所需仪器全自动酶免分析仪新鲜蒸馏水或去离子水酶标仪（单波长450nm或双波长450nm/630nm）微量移液器37℃恒温箱或水浴箱洗板机或洗瓶5检验方法平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。
配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。
编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。
稀释：每孔加入20ul样品稀释液。
加样：分别在相应孔中加入100ul阴、阳性对照血清或待测样本。
温育：置37℃温育60min。
加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul。
区人民医院乙肝病毒表面抗原操作规程
区人民医院乙肝病毒表面抗原（HBsAg）操作规程1方法胶体金法2原理本品采用胶体金免疫层析专业技术，在玻璃纤维素膜上预包被HBsAg,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被HBsAg单抗（sAb2）和羊抗鼠IgG.检测阳性血清或血浆样本时，样本中HBsAg与胶体金标记抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗体结合形成夹心物而凝聚显色，游离金标抗体则在对照线处与羊抗鼠IgG结合而富集显色。
阴性标本则尽在对照线处显色。
3 试剂英科新创（厦门）科技有限公司4 试剂组成4.1试纸条25条4.2说明书1份5 仪器目测6 操作步骤6.1将试纸条取出，水平放置并做好标记。
6.2用加样器或毛细吸管吸取60ul新鲜全血（或血清、血浆）缓慢滴加与试剂条箭头下方的垫片上6.3为防止弱阳性标本的漏检，请于加样后10分钟观察并记录试验结果。
7 结果判断阴性：出现一条红线。
阳性：出现二条红线。
无效：不出现红线。
8 正常参考值阴性9 临床意义同ELISA法测定。
10 标本采集10.1 可采用全血、血清、血浆进行检测，血浆标本对抗凝剂无要求。
10.2 采集静脉血的血清血浆应在无菌条件下，避免样品溶血。
10.3 血清、血浆在7天内检测，样品须放在2-8℃保存，大于7天则冷冻保存。
11 注意事项11.1实验室环境应保持一定湿度、避风。
避免在过高温度下进行。
11.2试纸可在室温下保存，谨防受潮。
低温保存下的应平衡室温方可使用。
11.3试剂从包装中取出后，应尽快进行实验，避免放置于空气中时间过长，导致受潮。
11.4实验应在加样10分钟内判读结果，只需在检测线出现紫红线，即可判断阳性结果。
乙肝表面抗原HBsAg标准操作程序SOP文件
Cal 2阳性定标液（黑盖），2瓶，1.3ml/瓶，HBsAg浓度约为0.5IU/ml,人血清，含防腐剂
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-15
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
储存和稳定性：
存放在2－8度，切莫倒置。
未开封，可稳定至标明的保质期。
情况需要再次定标：
·一个月（同一批号试控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。
定标液范围：
(电化学发光信号计数)阴性（Cal 1）600-1200
阳性（Cal 2）3000-8000
质控：
用Elecsys HBsAg质控品1和2（PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
·Elecsys HBsAg确证试验货号11820648
·Elecsys通用稀释液货号11732277
·Elecsys 2010分析仪
·Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988
·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
·Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346
反应混和液吸到测量池中微粒通过磁铁吸附到电极上未结合的物质被清洗液洗去电极加电压后产生化学发光通过光电倍增管进行测定
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-15
版序：ABCD
页码：第1页，共4页
用途：
用免疫学方法定性测定人血清或血浆中的乙肝表面抗原(HBsAg)。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。
乙肝表面抗原标准操作规程
乙肝表面抗原标准操作规程一。
1.1 乙肝表面抗原是啥。
咱先来说说这乙肝表面抗原到底是个啥。
简单讲，它就是能反映一个人是不是可能感染了乙肝病毒的一个重要指标。
就好比是一个“小信号”，告诉咱们身体里可能有“敌人”入侵啦。
1.2 为啥要检测它。
这可太重要啦！检测乙肝表面抗原能让咱早早知道是不是被乙肝病毒给盯上了。
早发现就能早治疗，免得病情加重，那可就麻烦大了。
而且，知道了结果，也能让咱心里有个底，该注意啥，该咋预防，都能做到心里有数。
二。
2.1 检测前的准备。
要做这个检测，也有一些要准备的。
比如说，检测前得好好休息，别熬夜，要不然可能会影响结果。
还有啊，别吃那些太油腻、太刺激的东西，让身体保持一个比较“清爽”的状态。
2.2 检测的过程。
检测的时候呢，别紧张。
一般就是抽点血，送到实验室让专业的医生和仪器去分析。
这过程就像一场“侦察行动”，医生们通过各种手段找出那些可能存在的“敌人”线索。
2.3 检测结果咋看。
等结果出来了，要是显示阳性，那可就得小心了，可能是感染了乙肝。
要是阴性，也别大意，还得继续保持好的生活习惯，预防着点。
三。
3.1 阳性结果咋办。
要是真不幸是阳性，也别慌。
赶紧找医生，听听专业的意见。
可能需要进一步检查，看看病情到底咋样。
然后按照医生说的，该吃药吃药，该治疗治疗，要有信心打败这个“小病魔”。
3.2 阴性结果也不能放松。
阴性结果虽然是个好消息，但也不能掉以轻心。
还是要注意个人卫生，别和别人共用牙刷、剃须刀这些可能会传播病毒的东西。
打乙肝疫苗也是个好办法，给自己加一层“保护罩”。
这乙肝表面抗原检测是个很重要的事儿，大家都得重视起来，保护好自己的身体，健健康康的才好！。
荣盛-乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg )标准操作程序SOP文件
7、终止：每孔加终止液1滴（50ul），轻拍混匀。
8、测定：用酶标仪（450nm波长）测定各孔吸光度OD值（先用空白孔校零）。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-01-55
乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg )
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-01-55
乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg )
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[前言]
HBsAg是乙型肝炎病毒（HBV）颗粒（Dane氏颗粒）的外壳部分，由蛋白质所组成。
[原理]
本试剂盒采用一步夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强及可多次使用等优点。
注：阴性对照孔OD值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际值计算。
[试剂盒灵敏度]
≤0.5ng/ml
[质量控制]
每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。
[参考范围]
酶联免疫吸附试验（ELISA）：阴性
[临床意义]:
（1）HBsAg阳性，常为慢性HBsAg携带者、急性乙型肝炎潜伏期、慢性迁延性肝炎与慢性活动性肝炎、肝硬化。
5、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
6、洗涤必须充分，洗涤时各孔均须加满，防止孔口内含有游离酶不能洗净。
7、若浓缩洗涤液出现结晶时，可于37℃放置至溶解。
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[结果判定]
1、临界值（C.O.）：本室界值室内标准品平均OD值。（界值室内标准品平均OD值/部检验中心2ng/ml质控品OD值应小于2.5且大于1.5。
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乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA）
1原理：
在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。
2试剂：
2.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）
2.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司
2.3包装规格：96Test/Kit
2.4试剂盒组成：HbsAb预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg 酶标抗体（含HRP标记HbsAb）, HbsAg阳性对照（含基因工程HbsAg），HbsAg阴性对照（正常人血清），HbsAg样品稀释液（含BSA缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T缓冲液），底物A（含H2O2），底物B（含TMB），终止液（含H2SO4），封板膜，自封袋，说明书。
2.5试剂储存条件及有效期：2~8℃避光保存，有效12个月。
3样本采集：
取静脉血3-4ml于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可置于4℃冰箱保存，如长期保存需置于-15至-20℃冻存，并避免样本反复冻融。
高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。
4所需仪器
4.1全自动酶免分析仪
4.2新鲜蒸馏水或去离子水
4.3酶标仪（单波长450nm或双波长450nm/630nm）
4.4微量移液器
4.5 37℃恒温箱或水浴箱
4.6洗板机或洗瓶
5检验方法
5.1平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。
5.2配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。
5.3编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。
5.4稀释：每孔加入20ul样品稀释液。
5.5加样：分别在相应孔中加入100ul阴、阳性对照血清或待测样本。
5.6温育：置37℃温育60min。
5.7加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul。
5.8温育：置37℃温育30min。
5.9洗涤：用洗涤液充分洗涤5次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s的浸泡时间）。
5.10显色：每孔加入底物A、B各50ul，轻拍混匀，37℃暗置30min。
5.11终止：每孔加入终止液50ul，混匀。
5.12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm
测定各孔OD值（用单波长测定时，需用空白对照调零），并记录结果。
6结果判定与分析
临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD平均值*2.1；阴性对照OD均值小于0.05时以0.05计算。
结果判定：样本OD值S/C.O.>=1者为HbsAg阳性
样本OD值S/C.O.<1者为HbsAg阴性
阴性对照均值>0.1或阳性对照均值<0.4时，实验无效，应重新试验。
7质量控制
每次试验用HBsAg的质控血清同步检测，S/CO值应在控制范围内；如失控，检查试剂校期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至从新试验使其在控。
8参考范围阴性
9临床意义
在血清或血浆中HbsAg的存在表明有急性乙肝或慢性乙肝或为无症状携带者。
10操作性能灵敏度为ng/ml，特异性高
11方法的局限性
11.1此方法仅适用于个体的血清或血浆样本的检测，不适合与混合血清或血浆样本及其他体液样本。
11.2该方法仅作为定性检测乙型肝炎病毒表面抗原。
11.3试剂盒中的阳性对照不能作为灵敏度的考核指标，阳性对照仅用于按照说明书步骤操作时，验证试剂盒中的组分
是否有效。
11.4由于方法学的局限性，本实验结果仅作为判断疾病的一项依据，如需对患者进行确诊，建议施于其它检验手段予以确认。
12注意事项
12.1试验前请详细阅读试剂说明书，任何违反试剂说明书的使用或操作行为，都可能得到不准确的结果。
12.2所有样本、试剂和各种废弃物应按传染物处理，严格防止交叉感染，严格健全和执行消毒隔离制度。
对于含有传染病和怀疑含有传染源的物质，应有合适的生物安全保证制度，下列为有关注意事项，但不仅限于此：
1）戴手套处理样本和试剂；
2）不要用嘴吸样；
3）不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜等；
4）用消毒剂对溅出的样本和试剂进行消毒；
5）按科室有关条列来消毒和处理所有样本、试剂和潜在的污染物。
12.3加试剂前应先将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。
建议使用加液器进行加液，并经常对加液器进行校准。
加液时注意勿使加液枪头接触孔内液体，避免液体间相互污染。
仔细操作，避免加样时在孔中产生气泡。
12.4每板设阴、阳性对照各两孔，设空白对照1孔，空白对照不加样本和酶标抗体、其余各步相同。
12.5避免在孵育和保存过程中试剂被阳光暴晒和接触次氯酸等强氧化性物质。
12.6孵育温度要保持在37℃+-1℃，温度过高或者过低可能会影响检测结果的准确性。
12.7封模板为一次性使用，重复使用可能导致污染。
12.8洗板机在使用结束后要使用新鲜蒸馏水或高品质去离子水冲洗干净，以防止管路堵塞和腐蚀。
洗涤时各孔军需加满但不溢出，防止孔内有残留物未能洗净。
12.9每次洗涤结束请尽早进行后续加液操作，避免长时间暴露而引起错误结果。
12.10使用全自动生化仪器时，封板和洗版后扣干步骤可以省略。
但需要注意保证洗涤液的加液量，保证洗涤后将微孔板孔中的洗液充分吸干，以免对实验造成错误的结果。
12.11确保反应孔板的底清洁干燥，在读板前要确保孔中液体没有气泡。
12.12终止后尽早用酶标仪进行读数测量（建议在10min 内完成读值），避免放置过长时间而引起的错误结果。
12.13检测结果用酶标仪进行读数测量。
样本的检测读数与样本中抗原的浓度不一定呈正相关。
12.14检测结果呈阴性的样本，不能绝对保证样本中没有低浓度抗原的存在，不能完全排除HBV感染的可能。
12.15该免疫测试不能绝对排除非特异性反应的存在，如对检测结果有疑问，用相应的确认试剂或方法对检测样本进行结果确认。
12.16试剂盒各组分在正确处理和保存的情况下至效期都保持稳定，不能使用过期的试剂，以免造成错误结果。
12.17不同厂商，不同品名、不同批号的试剂不能混用，以免产生错误结果。