串联质谱
串联质谱如何定量？
串联质谱定量时,是以后面产生的碎片峰（子离子）定量,但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片，所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。
建立方法的步骤是：用一定溶度的标准品溶液（1-10 ug/mL）Tune化合物的一级质谱条件，找到母离子的最佳质谱条件，然后对母离子进行打碎，优化碰撞能量，得到其特征性的子离子。
最后利用该质谱条件和该母离子->子离子对进行定量。
API和ABI如何区别？
但API也是Atmosphere Pressure Ionization （大气压电离，包括ESI、APCI和最新的大气压光电离APPI）的简称，API是LCMS的关键，因为这一技术最开始是ABI公司发明的，所以ABI的LCMS和LCMSMS都以API命名，常见的型号有API2000，API 3000，API4000。
您问的API也可能是指这个。
Q-Tof中的Q是什么意思？？
Q就是指的四极杆，TOF是指的飞行时间。
QQQ是三重四极杆。
两者是四极杆－飞行时间的串联一般的四极杆串联都是三重四极杆的空间串联，至于纯粹的二重四极杆没有听说过，但是QQ-TOF有没有就不是很清楚
质量偏差怎么办？
不知道你用的是哪个厂家的仪器，应该每个厂家都会随机带有校正液。
质谱的质量数偏了，说明你的仪器该校正了，一般3个月就要校一次机。
做样前－检查氮气，流动相，质谱仪的真空度，毛细管温度，…
1 最好不用直接进样（容易污染离子源）！
2 做联用时最好分流（a可以使用常规柱，b缩短分析时间，c 延长质量分析器寿命）
3 最好使用在线切换阀，降前每个样品的前后1－2分钟的流动相切入废液（避免样品中的盐进入质谱，做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液）
4 开始联用前，直接运行质谱数分钟，可以先将温度（毛细管温度和离子源温度（APCI））加热到预设定值（如果是APCI源还可以避免将烧掉heater，很贵的，我烧掉过一个）
5 待机时将切换阀置于waste，避免刚开液相时将流动相打入离子源，
6 关机前毛细管的温度先降下来，稳定一段时间后再关闭电源，避免风扇停止转动后毛细管外围的热量向里扩散，容易引起内部线路及电子元器件老化加速，
7 每天清理毛细管口外部，擦洗干净，每次停机时注意清洗Skimmer，用无尘擦拭纸，kimberly
那种，
8 如果用的是钢瓶而且天天做样的话，将两个钢瓶并联，当然，一月不做一次的话就算了，
9 做定量时注意离子源喷针的具体位置，否则标准曲线就不能用了，
10 不要不经过柱子分离进行定量分析，结果不可靠（竞争性抑制目标分子离子化）
11 如果是负离子检测的话，可以相流动相中加入少量异丙醇，
12 不好使用不挥发性盐，可以使用挥发性盐，但浓度不要超过20mmol/l
13 需要使用酸的情况下可以用甲酸，乙酸，三氟乙酸可以用，但能用甲酸或乙酸时就别用TFA
CID和CAD区别？
CID 英文是collision－induced dissociation 碰撞诱导解离。
通常在真空接口处调节电压发生CID现象，一般是去除溶剂，如果电压增大，也会产生碎片离子。
这是一级质谱的原理。
CAD collision-activated dissociation 碰撞活化解离。
做二级质谱时，应该是发生在Q2处吧，选择的母离子的进入Q2后碰撞活化产生子离子，这个过程称为CAD.
我们用的API3200，CID指的是Q0里面的诱导碰撞的气体，CAD指的是Q3里面的诱导碰撞气体，也就是说，API里的CID&CAD都是指氮气。
氮气发生器该使用吗？
氮气发生器的工作原理是分离空气，电解膜的负极侧发生氧化反应，吃掉空气中的氧化
性气体，在正极侧还原，空气流过电解池后就只剩下氮气和惰性气体，故国内发生器的纯度大多标有“相对含氧量”，氮气的纯度和空气流速，有效分解面的长度，电解电势的强弱都有关系，这种分离方法也决定了氮气的纯度不可能做的很高。
加入电解质的作用就是提高水的导电率，使电化学反应能顺利进行。
发生器对色谱的影响有一点常常被忽略，就是发生器内的开关电源工作事会对电网电压造成一定的干扰（压缩机的启动和停止也会），所以色谱仪必须经过稳压电源供电，当然不用稳压电源的用户极少，但还是有，我遇见过。
APCI和ESI的不同点？
离子产生的方式
1.APCI利用电晕放电离子化，气相离子化。
2.ESI利用离子蒸发，液相离子化。
能被分析的化合物类型不同
1.APCI 弱极性，小分子化合物，且具有一定的挥发性
2.ESI 极性化合物和生物大分子。
流速
1.ESI 0.001到0.25 ml/min。
2.APCI 0.2到2 ml/min。
多电荷
1.APCI不能生成一系列多电荷离子，所以不适合分析大分子。
2.ESI 能生成一系列多电荷离子，特别适用于蛋白，多肽类等生
物分子。
气质和液质的检测器没有什么不同，都是四极杆和离子阱？
气相和液相的差别有流动相、仪器结构、检测器、样品气化难易等。
气质和液质除了采用的分离手段不同（气相和液相）外，就其质量检测器而言，差别在哪里？
主要的区别在于真空系统和电离方式。
气质的真空系统比较简单，只要一个小的机械泵和一个分子涡轮泵就可以了。
液质的机械泵要比气质大，需要两个分子涡轮泵。
气质的电离方式有电子电离(EI)和化学电离(CI)。
液质的电离方式有电喷雾电离(ESI)、大气压化学电离(APCI)和大气压光电离(APPI)
现在液质的应用更广，样品处理不用衍生化，我是搞药的，主要用的液质。
农残和兴奋剂检测似乎还是气质应用更多。
等度还是梯度如何选？
其实如果作新药和西药只做一两个化合物，是等度洗脱好，速度快，但也并非越快越好，特别在分析生物样品时，考虑到基质效应，保留因子控制在2-3左右最好！
梯度洗脱适合分析多个结构不同的样品及化合物与代谢产物一同鉴定的时候，比如苷和苷元的一同测定，另外很多做合成化学的分析实验室用的也是一通用的梯度洗脱方法，一个方法搞定大部分样品。
一般来说对于组成简单的样品可以采用等度洗脱，而对于那些复杂的样品分离通常需要进行梯度洗脱。
质谱没有信号原因？
质谱没信号要顺藤摸瓜地找原因。
一般先从离子源找起，然后看离子传输通道，再到质量分析器，接下来是离子探测器数据采集卡和软件。
一般情况下不会有什么大问题。
你检查一下各路的连线是否良好接触。
skimmer的中文一般翻译成漏勺，它的主要作用是阁开两个不同真空度的空间，同时让离子通过。
如何更换机械泵油？
一般的，3个月到半年更换一次泵油，同时停机对仪器进行一次清洗。
更换泵油的时候，先开启振气阀5-10分钟，待将泵内沉淀振起后，关闭振气阀，同时关闭电源。
打开泵下的泵油排放阀门，放掉旧油。
如果，泵油已经很脏，则可取少许新油清洗泵后，放掉……
我一般3个月更换一次泵油，毕竟油比泵要便宜多了
北京四方特种油品厂出产的高速真空泵油有比较好的口碑,价格合理。
质谱不出峰的故障排除？
如果在检测样品什么峰都看不到，可从以下几方面考虑：
1 进样系统与离子源没连接或有漏液；
2 六通阀漏液
3 雾化气没开
4 喷雾电压没有
5 离子进入分析器的离子通道堵塞
6 喷雾毛细管堵塞
如何根据样品选择离子源？
看分子量的大小、极性
APCI适合小分子，极性小的化合物
ESI适合分析的分子量范围较大、分子要求带有一定极性。
一般都用ESI分析，如果极性实在太小，才想到用APCI
怎么测仪器的灵敏度？
检验仪器灵敏度的方法一般都是用利血平，
通过定量环直接进样，看信噪比
产生碰装室离子交互影响（Collision Cell Cross Talk）的原因及消除？
多通道扫描（MRM）时，如果两个离子扫描通道的碎片离子一样（或类似，相差1-2分子量单位），前一个离子通道扫描结束后，碰装室里的离子来不及清除，影响下一个离子通道反应的定量（如果色谱分离完全则无此影响）。
消除：
1、选择特异的子离子（特别是在用稳定同位素内标时）
2、增加离子通道扫描反应之间的时间间隔（100 ms→300 ms）
3、可设置额外的“无用的离子扫描通道（dummy MRM）”。
仪器分析之 串联质谱
三重四级杆的定性定量方式
三重四级杆的扫描方式
DAU子离子扫描 PAR母离子扫描 CNL中性碎片丢失扫描 SIR选择离子监测 MRM多反应监测
子离子质谱图DAU
MS1
Collision
MS2
Cell
静态
扫描
用MS2质量分析器扫描指定母离子的子离子碎片，所得到的质 谱图只能是由指定母离经碰撞产生。
SIR与单四级杆仪器的SIM方式相当 对于信号强度，SIR方式更强 对于纯净基质，也许SIR的信噪比可能高于
MRM方式 对于复杂样品分析，多数情况下MRM方式
的灵敏度高于SIR方式
TIC\SIM\MRM方式的差别
信噪比（S/N）
信-信号 噪-噪音 用噪音的Standard Derivation表示 信噪比越高，表示结果的可靠性越高
X
去检测器
-
Y+
+
-
来自离子源
X
Y
RF Cycle
四级杆原理2
DC voltage U (volts)
90 80 70 60 50 40 30 20 10
0 0
Y stability boundary
X stable Y unstable
X stability boundary
X unstable Y stable
多电荷离子的MS-MS
一般都用丰度最强的质谱峰进行质谱质谱 分析，即使它是多电荷离子。
多电荷离子一般比单电荷离子需要更高的 碰撞气电压。
碎片离子可能比多电荷离子的质荷比大。
注意要保证流动相pH恒定，否则生成的多 电荷离子比例不同，造成定量误差。
X and Y stable
200
串联质谱
质谱法是在高真空状态下 将被测物质离子化，按离子的 质荷比（m/z）大小分离而实现 物质成分和结构分析的方法， 且质谱峰强度与其代表的物质 含量成正比，据此可进行定量 分析。 1
1
色谱与质谱联用技术
HPLC-MS
GC-MS
UPLC-MS
2
SFC-/MS CE-MS
2
气质联用技术
4. 在生物大分子分析中的应用 ESI是一种很温和的电离方法，特别适合分 析强极性、难挥发或热不稳定的化合物；再者， ESI能把许多电荷附着于大分子上，形成多电荷 离子，因而利用常规质荷比范围的质谱仪即可 实现大分子质量离子的测定。因此，LC-MS/MS 可实现蛋白质的快速高灵敏度鉴别和测定。 24
8
8
GC-MS仪器装置
离子阱分析器 特点：
1.单一的离子阱可实现多 级“时间上”的串联质谱 2.结构简单，价格便宜 3.灵敏度高 4.质量范围大
9
9
GC-MS仪器装置
飞行时间分析器
10 特点：1.检测离子的质荷比范围比较宽
2.灵敏度高，适合做串联质谱的二级 3.扫描速度快，适合做研究极快过程
10
14
萘普生
14
应用实例
样品处理方法：
血浆样品0.5ml在 室温解冻
2 混合溶液涡旋混 匀，上SPE柱 4 1
0.75ml水和0.1ml内标溶液(布 洛芬，1.0μg/mL)加入血浆
3
洗脱液在50℃ 氮吹蒸发
6
15
用乙腈-水(2 ml, 15/85)和3ml 正己烷洗脱
5
残留物用乙腈和MSTFA (50:50, v/v)溶解，进样
12
12
质谱定量分析
气相色谱串联质谱的应用研究进展
气相色谱串联质谱的应用研究进展一、本文概述气相色谱串联质谱（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）是一种高效、精确的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、环境、食品、医药等多个领域。
该技术结合了气相色谱的高分离效能和质谱的高灵敏度、高分辨率特点，使得复杂混合物中的组分得以有效分离和精确鉴定。
近年来，随着仪器设备的不断更新和技术的持续进步，GC-MS在诸多领域的应用研究取得了显著进展。
本文旨在综述气相色谱串联质谱的应用研究进展。
简要介绍GC-MS的基本原理和仪器结构，为后续应用研究的讨论提供基础。
然后，重点阐述GC-MS在环境分析、食品安全、药物代谢、生物标志物检测、法医学鉴定等领域的应用案例和研究进展。
通过对这些案例的深入剖析，展示GC-MS在不同领域中的实际应用价值和潜在发展空间。
展望GC-MS未来的发展趋势和应用前景，以期为该领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和启示。
二、气相色谱串联质谱的基本原理与技术特点气相色谱串联质谱（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）是一种将气相色谱（GC）与质谱（MS）相结合的分析技术，其基本原理在于利用气相色谱对复杂样品中的化合物进行高效分离，然后通过质谱对分离后的化合物进行定性和定量分析。
GC-MS技术结合了色谱和质谱的优点，具有灵敏度高、分辨率强、定性准确等特点，因此在许多领域如环境科学、食品安全、药物分析、法医鉴定等都有着广泛的应用。
GC-MS的基本原理主要包括两个部分：首先是气相色谱的分离过程，样品中的化合物在载气的带动下进入色谱柱，根据化合物在固定相和移动相之间的分配系数不同，实现化合物的分离。
接着是质谱的检测过程，分离后的化合物进入质谱仪，在离子源中被电离成离子，离子在电场和磁场的作用下发生偏转，根据离子的质荷比不同，在检测器上形成质谱图，从而实现对化合物的定性和定量分析。
气相色谱串联质谱法
气相色谱串联质谱法
气相色谱串联质谱（GC-MS）是一种在有机物质中常用的分析方法，依赖于色谱分离和质谱检测，可以快速、准确地识别出有机物质中构成它们的细微组件及其相对含量。
GC-MS可以同时进行快速分离及检测，使得分析结果更加准确可靠。
GC-MS的基本原理是将样品中的有机物质分离出来，如烃类，然后用质谱仪进行检测，以精确测定其化学特征和结构。
具体来说，主要包括3个步骤：样品预处理、气相色谱（GC）和质谱（MS）。
首先，样品经过预处理，以增强其能够与柱表面的疏水性，使有机物质能够从样品中分离出来。
然后，将样品放入气相色谱仪，有机物将被吸入柱内，经过一段时间，有机物被分开并从柱顶端吐出，通过特定的温度和加压条件来提高速度。
最后，有机物质分离出来之后就可以使用质谱仪对其进行结构测定和组成成分分析，进而求出其相对含量，完成分析任务。
GC-MS是非常有用的有机分析技术，它运用简单及高效的方式，可以快速、准确的识别出有机物质中构成它们的细微组件及含量，在化学和分析造纸、食品、石油、药物和有机合成等领域中广泛应用。
液相色谱串联质谱临床应用建议
液相色谱串联质谱临床应用建议液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）是一种高灵敏度的分析技术，广泛应用于生物、医学、药物研发等领域。
在临床应用中，LC-MS/MS主要用于生物样本（如血液、尿液等）中药物代谢产物的定量分析，以及蛋白质、肽类等生物分子的定性和定量分析。
以下是一些关于LC-MS/MS临床应用的建议：1. 样本处理：在进行LC-MS/MS分析前，需要对样本进行适当的处理，如蛋白质沉淀、液液萃取等，以去除干扰物质并提高分析的准确性。
同时，应确保样本的保存和运输条件符合规定，以避免样本变质或污染。
2. 方法验证：为确保分析结果的准确性和可靠性，应对LC-MS/MS方法进行严格的验证。
包括方法的线性范围、灵敏度、精密度、稳定性和重现性等方面的评估。
此外，还应定期进行方法的更新和优化，以适应临床需求和技术发展。
3. 质量控制：在临床应用中，质量控制是确保分析结果准确性的关键。
应建立严格的质量控制体系，包括仪器校准、试剂质量控制、样品处理过程的质量控制等，以确保分析结果的准确性和可靠性。
4. 数据分析：LC-MS/MS产生的数据量较大，因此需要进行适当的数据处理和分析。
应建立规范的数据处理流程，包括数据的导入、预处理、峰识别、定量分析等步骤，以确保数据的准确性和可靠性。
5. 临床解读：在临床解读LC-MS/MS结果时，应结合患者的病史、用药情况、临床表现等综合信息进行判断。
同时，应注意与其他临床实验室检查结果的相互印证，以提高诊断的准确性。
总之，液相色谱串联质谱在临床应用中具有广阔的前景和重要的价值。
为确保分析结果的准确性和可靠性，应重视样本处理、方法验证、质量控制、数据分析和临床解读等方面的工作。
液相色谱串联质谱法
液相色谱串联质谱法
液相色谱串联质谱（Liquid chromatography tandem mass spectrometry，
LC-MS/MS）是一种分离检测技术，被广泛应用于药物化学及药物代谢，生物医药，农药分析等领域，作为一种灵敏的高通量的鉴定和定量分析的手段。
LC-MS/MS的操作困难度略高，但技术表现却非常出色。
它的原理是将待测样
品分解成各组分，然后在液相色谱的的发射机构中排列和分离，得到分离峰后，将每个峰送入质谱计仪器中进行分子结构鉴定。
液相色谱与质谱结合起来，使得被测物质的定量和定性分析变得更加精准，得到了更高的灵敏度与精确度。
LC-MS/MS给人们的生活也带来了不少便利。
它能更有效的检测潜藏在食品中
的有害物质，甚至可以嗅出空气中的重金属物质，以确保食品和空气的安全。
此外，在医学上，LC-MS/MS也可以鉴定出血液中的分子标志物，从而帮助医生诊断乳腺癌、肝癌等，为患者提供更有效的治疗措施。
LC-MS/MS是当今药物及生物医药学研究领域最火热的概念，结合先进的检测
技术，它也为特定领域的研究提供了更大的帮助，尤其是生物和分子诊断研究实验中。
其仅占用少量的样品的前提下，在短时间内，就能最大限度提高检测效率，具有准确率高、重复性好、价格低的明显优势，这也使得它深受生命科学的欢迎。
液相色谱串联质谱原理
液相色谱串联质谱原理
液相色谱串联质谱原理是一种新的蛋白质结构分析方法，它将液相色谱和质谱技术结合在一起，使得可以精确地鉴定蛋白质结构。
液相色谱串联质谱原理是一种快速、准确的蛋白质结构分析方法，可以用来分析蛋白质的活性、交联、糖基化、加氧、翻译后修饰等特征。
液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）将液相色谱和质谱技术结合起来，这也是当今常用的蛋白质鉴定的主要技术。
其原理是将样品中的蛋白质分解成多个碎片，然后将这些碎片分别通过液相色谱技术和质谱技术进行分离、测量和鉴定。
在液相色谱技术中，样品经过处理后会以离子化形式分离，因为各种不同的离子具有不同的活性，所以它们会在柱子上分离，并以时间序列的形式释放出来。
在质谱技术中，样品经过离子化后，会按照质量-电荷比（m/z）比例进行分析，以获得离子质量谱图，从而可以鉴定出蛋白质中的碎片。
液相色谱串联质谱技术的步骤主要包括三个部分：样品处理、液相色谱分离离子化和质谱鉴定。
首先，需要对样品进行前处理，以获得蛋白质的纯化悬液。
然后，将悬液通过液相色谱系统进行处理，将蛋白质分解成
离子，并将离子分离出来。
最后，通过质谱技术对离子进行测量，以获得离子质量谱图，从而实现蛋白质的鉴定。
液相色谱串联质谱的特点是它可以快速、准确地鉴定蛋白质的结构、功能和活性，是目前最常用的蛋白质结构分析方法之一。
它可以用来分析蛋白质的活性、交联、糖基化、加氧、翻译后修饰等特征，而且它可以精确地鉴定蛋白质结构，可以提供准确的蛋白质信息。
此外，液相色谱串联质谱技术还可以用来研究蛋白质的组装、结构变化、抗性变化和活性差异等，为蛋白质结构分析提供了更为准确的数据。
液相色谱串联质谱的缺点
液相色谱-串联质谱法的缺点主要包括以下几点：
1.成本高：液相色谱-串联质谱仪器本身价格昂贵，导致整体检测成本较高。
2.操作复杂：液相色谱-串联质谱法的操作过程较为复杂，需要专业人员进行操作和维护。
3.耗时长：液相色谱-串联质谱法的检测过程相对较长，需要较长时间才能完成检测。
4.局限性：液相色谱-串联质谱法对于某些低丰度物质的分析可能存在局限性，需要更灵敏的方法进
行补充。
5.对样品要求高：液相色谱-串联质谱法要求样品具有一定的纯度和稳定性，对于复杂样品需要进行
预处理。
虽然液相色谱-串联质谱法存在一些缺点，但其优点仍使其在生物医药、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用。
高效液相色谱-串联质谱法
高效液相色谱-串联质谱法高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）是一种现代化分析技术。
它结合了高效液相色谱（HPLC）和串联质谱（MS/MS）两种分析方法，能够快速、准确、灵敏地分析复杂的混合样品中的多种化合物。
HPLC-MS/MS技术的基本原理是将样品通过高效液相色谱进行分离，然后以极高的分辨率将分离后的化合物导入串联质谱分析仪中进行质谱检测和分析。
HPLC部分能够通过改变流速、温度、化合物间隔、载气、反应物、固相分离等方法来分离样品中的成分。
MS/MS 部分则能够通过改变离子源、离子传输、离子选择和离子检测等方式检测化合物。
具体来说，HPLC-MS/MS技术的实现过程如下：需要准备一定量的样品。
样品通常是一种混合物，需要进行分离和净化。
这可以通过一系列的化学方法和生物技术实现。
将样品注入到高效液相色谱仪中进行分离。
高效液相色谱仪通过改变环境条件可以分离出复杂混合物中的单个分量，比如改变洗脱剂的浓度、PH值、离子强度来调整样品中化合物的排列顺序。
高效液相色谱仪具有高速分离和高效洗脱的特点，具有处理大量和复杂样品的能力。
接着，通过HPLC输出的流缓和制备离子源，离子源生成的离子对化合物分子进行离子化。
这个过程利用化合物分子上的R基或者H+来形成游离气态的化合物离子。
然后，将产生的离子通过串接质谱进行分析。
在离子进入串联质谱仪的离子源之前，需要将它们选择性的分离为固定质量和电荷比的离子，这可以通过一系列的电子和电场进行控制来实现。
所得到的离子被送至陷入式离子阱，通过对离子的激发和断裂等过程，形成包含多种离子片段的离子质谱图谱。
这些离子片段遵循一定的质量电荷比的规律，可以通过特征峰和离子质量比等独特的质谱性质来鉴别。
将这些片段的数据输入到质谱数据库中，与已知化合物的质谱数据进行比对。
这样，就能够得到混合物中的每个化合物的特定质谱图谱，从而通过质量分析进行结构确认和鉴定。
HPLC-MS/MS技术的优点是明显的，该技术具有高效和灵敏的特点，能够分析非常低的浓度样品成分。
串联质谱
作用因此能提供更多的结构信息所以串联质谱特别适合于复杂组分体系且干扰严重的样品中低含量组分分析测定具有比gcms和lcms等一级质谱更高的选择性和灵敏度
串联质谱及其作用
两个或更多的质谱连接在一起，称为串联质谱。最简 单的串联质谱（MS|MS）由两个质谱串联而成，其中第一 个质量分析器（MS1）将离子预分离或加能量修饰，由第 二级质量分析器（MS2）分析结果。常见的形式有串联 （多联）四级杆质谱、四级杆离子阱质谱、四级杆和磁质 谱混合式串联质谱和采用多个扇形磁铁的串联磁质谱。
作用
• （1）诱导第一级质谱产生的分子离子裂解， 有利于研究离子和母离子的关系，进而给 出该分子离子的结构信息。 • （2）从干扰严重的质谱中抽取有用数据， 大大提高质谱检测的选择性，从而能够测来自定混合物中的痕量物质。优点
• 可以避免底物分子产生的干扰，大大降低背景噪音。 • 其次，可使分子离子通过与反应气的碰撞来产生断裂。 • 因此能提供更多的结构信息，所以串联质谱特别适合于复 杂组分体系且干扰严重的样品中低含量组分分析测定，具 有比GC-MS和LC-MS等一级质谱更高的选择性和灵敏度。