IMMUNITE1000化学发光分析系统检测白细胞介素-6的性能验证
白细胞介素-6定量方法研究进展
I n s p e c t i o n/检验检测白细胞介素-6定量方法研究进展燕茹，林婧(南京市计量监督检测院，江苏南京210049)摘要：细胞介素-6 (IL-6)是一种重要的细胞因子，在机体病理和生理活动中发挥着多种作用。
因此需要高 准确度测定丨L-6的水平。
文章综述了近年来国内外IL-6不同定量方法的研究进展，包括酶联免疫法、免疫 放射法、电化学免疫法，讨论了 IL-6不同定量方法的特点，并展望了其发展趋势。
关键词：白细胞介素-6;检测方法1弓丨言白介素6 (Interleukin-6, IL-6)是一种炎症因 子，由212个氨基酸组成的糖蛋白，健康人体内一般 小于7 pg/m L,当机体受到细菌感染时，含量急剧升 高，其含量与感染程度呈正相关。
IL-6在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与 分化及在炎症反应中起重要作用。
检测IL-6有助于 评价糖尿病、心血管病、炎症性疾病和感染性疾病等。
患者IL-6的连续监测，有助于评估炎症反应的严重 程度，脓毒症及其预后情况；日本指南推荐将IL-6 用于脓毒症辅助诊断，IL-6可以作为脓毒症的早期 预警指标。
研究发现，2019-n C o V感染的患者血清中IL-6 等炎症细胞因子显著升高。
患者血清中IL-6的含量 有助于新型冠状病毒肺炎的临床分型及预测疾病严重 程度和患者预后。
《新型冠状病毒肺炎诊疗方法（试 行第七版）》将外周血炎症因子IL-6进行性上升作 为新型冠状病毒肺炎重型、危重型临床预警指标。
IL-6作为感染性疾病的早期诊断、病情评估、疗效监控和预后判断的诊断指标。
IL-6的准确测定 具有重要意义。
为准确地测定血清中IL-6的含量，提高检测结果准确性，本文对IL-6的定量方法进行 综述。
2丨L-6定量检测方法根据IL-6的检测原理及方法的不同，对IL-6的 检测分为：免疫学方法、生物学检测方法。
2.1免疫学方法免疫分析方法的原理为利用特定抗体与抗原发生 的特异性识别和结合，对待测抗体或者抗原进行分析 测定的方法。
全自动化学发光免疫分析仪Immulite2000标准操作规程完整
2.仪器不可以放置在阳光直射、空调出风口、暖风出风口或者其它热源附近。
3.使用专用的、良好接地的电源，用于仪器、打印机和计算机。
4.电源要求
仪器在出厂时设定为220VAC输入电源电压,电源电压波动不大于10％，电源频率是50Hz或者
60Hz。
5. 建议为仪器系统配置配不间断电源。
注意:加载过敏原试剂楔和试剂瓶要用图形扫描器扫描，然后加载。
4. 取出需要替换更换的试剂楔: 提起位于试剂转盘中央的楔子的窄端，向外倾斜楔子, 将楔子向试剂转盘中央滑动，直到楔子突出的卡子完全脱离试剂转盘的小缺口，此时可以容易地取出试剂楔；装载更换的新试剂楔。
5.如果试剂楔有气泡：
5.1取出试剂楔。
果。
5.1在反应杯中加入一个包被珠。
5.2样本，特定的试剂和水加入到包被珠上。
5.3反应杯运到温育圈，在37°C (98.6°F)的环境中震荡温育。
5.4清洗测试杯。
5.5加入底物，发光。
5.6光电倍增管(PMT)检测光子强度，计算结果并打印。
[免疫分析原理]
1.双抗体夹心法：双抗体夹心法使用ALP标记的抗体在检测单位中进行反应。
1.1 标记的抗体的液相试剂加到检测单位中，标记有ALP的特异性抗体(Ab※ALP)与样品中的相应抗
原反应。
1.2充分反应后形成抗体捕获－抗原－抗体ALP的复合物。
1.3 通过高速离心将游离物分离。
1.4 底物加入后，在发光区发光，根据光量子数，对应曲线，系统马上计算出抗原的浓度。
1.5 双抗体夹心法中，病人样品中的抗原浓度与光量值成正相关。如下图：
9.3 把蒸馏水喷嘴插入包被珠清洗站。
注意:试剂加样探针会自动回复原位。
白细胞介素6(IL-6)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求lztk
白细胞介素6（IL-6）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中白细胞介素6（IL-6）的含量。
1.1产品型号/规格：50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（IL-6-Cal）(选配）组成。
组成及含量如下：2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于1.5pg/mL。
2.3 准确度用IL-6国际标准品（89/548）进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4 线性在[5.0，5000.0]pg/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内，浓度为（30.0±6.0pg/mL）和（500.0±100.0pg/mL）的样品检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为（30.0±6.0pg/mL）和（500.0±100.0pg/mL）的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，定标品溯源到IL-6国际标准品（89/548）。
白介素6测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 产品技术要求新产业
2. 性能指标
2.1 外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固；试剂盒内组分（磁性微球除外）应为澄清的液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2 批内精密度
批内变异系数（CV）应≤8%。
2.3 批间精密度
批间变异系数（CV）应≤15%。
2.4 准确度
回收率应在（90.0%~110.0%）范围内。
2.5 空白限
空白限应≤0.500 pg/mL。
2.6 线性
在（1.500~5000）pg/mL浓度区间内，线性相关性系数（r）绝对值应≥0.9900。
2.7 校准品均一性
）应≤8%。
校准品均一性（CV
均一性
2.8 质控品预期结果
质控品1每次测定结果应在（28.0~52.0）pg/mL范围内，质控品2每次测定结果应在（175~325）pg/mL范围内。
2.9 质控品均一性
质控品均一性（CV
）应≤8%。
均一性。
白介素6检测标准操作程序
白介素6检测标准操作程序1检验目的本试剂盒用于体外定量测定人血清和（或）血浆中的白介素6（IL-6）。
2检验原理及方法夹心法。
测定总时长18分钟。
1.第1次孵育：30L样本、生物素化的白介素6特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原一抗体复合物。
2.第2次孵育：添加包被链霉亲合素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉亲合素的作用结合。
3.将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面，未与磁珠结合的物质通过ProCell/ProCell M被去除。
给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度；4.通过由2点校准生成的分析仪专有的校准曲线和通过试剂条码或电子条形码提供的主曲线来确定结果。
3性能特征3.1检测范围：1.5-5000pg/mL3.2精密度：根据CLSI（临床实验室标准委员会）的方案（EP5-A2），使用Elecsys 试剂、混合人血清和 CLSI(临床和实验室标准化学会)修改协议(EP5-A)规定的质控品确定精密度：每天2次重复共21天；MODULAR ANALYTICSE170分析仪的批内精密度，n=84。
所得结果如下Cobas e 411 分析仪e)可重复性=批内精密度3.3分析特异性/干扰下列物质不会对Elecsys白介素-6检测（浓度范围10-200pg/mL）造成明显的交叉反应。
4标本4.1检测标本：血清和血浆（肝素锂、肝素钠、EDTA和柠檬酸钠抗凝）是推荐使用的样本类型。
尚未验证其他抗凝剂能否适用。
4.2采集及处理：在进行离心操作前需让血清样本完全凝结（凝结时间不小于1小时）。
所有的待测样本在测试前均应进行离心操作。
顶部含脂质的离心样本，需转移澄清、无脂质的部分到新的样本管中。
在测试前，确保已去除了残余的纤维蛋白和细胞类物质。
应小心处理患者样本，避免交叉污染。
在测试前，确保患者样本、校准品、质控品均已平衡至环境温度（20-25°C）。
白介素6测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求丽珠
1.1外观
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签应清晰、准确、牢固。
1.2检出限
空白限（limit of blank，LoB）应不大于1.0pg/mL。检出限（limiБайду номын сангаас of detection，LoD）应不大于1.5pg/mL。
1.3准确度
检测准确度参考品，其测量结果的相对偏差应不超过±15%。
1.4线性
线性范围不窄于10pg/mL～4000pg/mL，线性相关系数|r|应不低于0.990。
1.5重复性
测试重复性参考品，所得结果的变异系数（CV）应不大于8%。
1.6批间差
测试重复性参考品，所得结果的批间变异系数（CV）应不大于10%。
产品名称
白介素6测定试剂盒（化学发光法）
型号、规格
3×14人份/盒
结构及组成
1、白介素6免疫反应测试筒抗白介素6结合磁微粒：抗白介素6鼠单克隆抗体（包被抗体）包被的磁微粒；抗白介素6酶标抗体：含碱性磷酸酶标记的抗白介素6鼠单克隆抗体（检测抗体）。2、测试筒支架
产品适用范围/预期用途
本产品适用于体外定量测定人血清或血浆中白介素6（Interleukin 6，IL-6）的浓度。用于炎症反应的辅助诊断。
基于系统生物学的白介素-6的建模信号转导模拟分析
作者： 齐云峰;孙添添;韩艳雪
作者机构： 吉林师范大学生命科学学院,吉林四平136000
出版物刊名： 现代交际：学术版
页码： 154-155页
年卷期： 2016年 第16期
主题词： 白介素-6 数学模拟 糖蛋白130 信号转导
摘要：白介素-6,全名白细胞介素-6,是一种多功能细胞因子,能诱导细胞增殖分化。
胞内受体和蛋白磷酸化调节在IL-6信号转导中起重大作用。
在本研究中采用系统生物学建模工具COPASI,进行IL-6的建模信号转导模拟分析。
通过扰动pp2初始浓度,发现pp2对IL-6信号转导有抑制作用呈负相关。
通过扰动gp130初始浓度,发现受体gp130与IL-6的信号转导弱正相关。
通过协同扰动受体gp130与pp2初始浓度,发现对于IL-6的信号转导来说最适宜的受体浓度为模型初始浓度,而pp2浓度升高抑制IL-6的信号转导。
IMMULITE1000全自动化学发光免疫分析仪标准操作规程
IMMULITE1000全自动化学发光免疫分析仪标准操作规程IMMULITE 1000全自动化学发光免疫分析仪标准操作程序一）DPC Immulite 1000型自动发光免疫分析仪开/关机程序1 开机1.1 打开电源开关1.2 依次打开微机主机、显示器及打印机的电源。
起始菜单显示。
1.3 确认打印机控制面板指示灯亮，打印纸充足。
1.4 仪器软件初始化1.4.1 从起始菜单按Run Immulite选项，并按下回车键。
系统显示微机与仪器建立通讯，并开始下传软件。
1.4.2 提示Turn on Report Printing? (Y/N)时选Y。
1.4.3 提示Short or Long Reports?时选S。
1.4.4 提示Enter Your Name or User ID，输入操作者姓名。
1.4.5 提示Are the Time and Date Correct?时选Y。
1.4.6 按下Go 键，仪器开始自检，当提示Remove All Tubes From LoadChain, Press Go When Completed.时，从进样链条上取走所有试管，完成后再按下GO。
2 关机(为24h开机，一般情况下不进行关机操作)2.1 中止仪器运行：仪器运行结束10min后或按3次Pause后将自动关机。
2.2 中止电脑与仪器的联接：按Log Off → Log Off System退出。
2.3 备份系统文件：从开始菜单按Backup/Restore 作备份。
2.4 清洗吸样针2.4.1 用Probwash 程序和针头清洗液清洗针头。
2.4.2 收藏针头清洗瓶。
2.4.3 按Esc回到主启动菜单并选Exit to DOS 。
2.5 清空实验材料,盖紧试剂瓶并冷藏。
2.6 关掉计算机。
(二)DPC Immulite 1000型自动发光免疫分析仪分析参数设置程序1 从Configuration 菜单选择ASSAY SETTINGS子菜单，按回车键。
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国际检验 医学杂志 ２ ０ １ ５ 年 ７月第 ３ ６卷第 １ ３期
Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ａ ｂＭｅ ｄ ， Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ６ ， Ｎ ｏ ． １ ３
・
论
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Ｉ ＭＭＵＮＩ Ｔ Ｅ １ ０ ０ ０化 学发 光分 析 系统 检 测 白细胞 介素一 ６的性 能 验证
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孙 飞， 崔 天盆 ， 赵 岚， 陈 家逸 ，， 湖 北武 汉 ４ ３ ０ ０ ３ ３ ）
摘 要 ： 目的 验证 Ｉ ＭＭＵＮＩ Ｔ Ｅ １ ０ ０ ０化 学发 光 仪 分 析 系统 定 量 检 测 白细 胞 介 素一 ６ （ Ｉ Ｌ 一 ６ ） 的性 能 。方 法 按 国 际标 准 化 组 织 （ Ｉ Ｓ ０ ） １ ５ １ ８ ９实验 室认 可的 要 求 ， 收 集血 清标 本 进 行 Ｉ Ｌ 一 ６检 测 ， 验证 Ｉ ＭＭＵＮ Ｉ ＴＥ ｌ ０ ０ ０化 学 发 光仪 分 析 系统 定 量检 测 Ｉ Ｌ － ６的精 密 度、 准确度 、 线性 范围、 临床 可报 告 范 围及 正 常参 考 区 间 ， 评估 其检 验 效 能 。结 果 高值 与 低 值 标 本 的 日 问 变异 系数 （ Ｃ Ｖ ） 分别 为 ６ ． ４ ２ 、 １ ． ９ ７ ， 批 内Ｃ Ｖ分 别 为 ３ ． ４ ｏ 、 ３ ． ８ ２ ； 标 准 品 检 测 值 相 对偏 倚 （ ｂ ｉ ａ ｓ ） 为０ ． ９ １ ； 回 归方程 ： Ｙ一 ０ ． ９ ８ ６ Ｘ一 ７ ． １ （ 一 ０ ． ９ ９ ９ ， Ｐ ＜Ｏ ． ０ ５ ） ； 稀释至 ２ ７ 倍， 回 收 率在 ９ ７ ～１ ０ ０ 之 间， 临 床 可报 告 范 围 为 ２ ～２ ７ ０ ０ ０ ｐ ｇ ／ ｍＬ ； ９ ５ 参考 区间为 ０ ～５ ． ３ ｐ ｇ ／
Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏｒ ｍａ ｎｃ ｅ ｖ ｅ ｒ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈｅ ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏｆ ｉ ｎｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋｉ ｎ － ６ ｂ ｙ ｕ ｓ ｉ ｎｇ Ｉ Ｍ Ｍ ＵＮＩ ＴＥ１ Ｏ ０ Ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｌ ｕ ｍｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ
ｍＬ 。 结 论 该 系统检 测 性 能符 合 厂 家 声 明 ， 满 足 临 床 实验 室 质 量要 求 。 关键词 ： 白 细胞 介 素一 ６ ； 化 学发 光 ； 性 能验 证 Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ ． ２ ０ １ ５ ． １ ３ ． ０ ２ ４ 文 献标 识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ （ ２ ０ １ ５ ） １ ３ － １ ８ ５ ８ ～ ０ ３