雌雄银杏叶总黄酮比较和优化体系探究
银杏叶中黄酮提取技术研究进展
食品科技银杏叶中黄酮提取技术研究进展蒋迪尧1,2，吴肖肖1,2，梅秀明1,2（1.南京市产品质量监督检验院（南京市质量发展与先进技术应用研究院），江苏南京 210019；2.国家市场监管重点实验室（生物毒素分析与评价），江苏南京 210019）摘 要：黄酮是银杏中重要的一类功效成分，主要存在于银杏叶中，具有抗氧化、促进血液循环、调节血管、降低血糖以及增加血流量等作用，被广泛应用于保健食品等健康领域。
因此，研究并开发银杏叶中黄酮类功效成分的高效提取方法尤为重要。
本文梳理了当前银杏叶中黄酮成分常见的提取技术，并对各类方法进行了对比评估，旨在找到绿色高效、便捷可靠的前处理方法，为银杏叶中黄酮的提取技术改良和创新提供思路。
关键词：黄酮；银杏叶；提取Research Progress on Extraction Techniques for Flavonoidsfrom Ginkgo biloba LeavesJIANG Diyao1,2, WU Xiaoxiao1,2, MEI Xiuming1,2(1.Nanjing Institute of Product Quality Inspection (Nanjing Institute of Quality Development and AdvancedTechnology Application), Nanjing 210019, China;2.Key Laboratory of Biotoxin Analysis & Assessment for State Market Regulation, Nanjing 210019, China)Abstract: Flavonoids are an important class of functional components in Ginkgo biloba. They mainly exist in Ginkgo biloba leaves. They have the effects of anti-oxidation, promoting blood circulation, regulating blood vessels, reducing blood sugar and increasing blood flow. They are widely used in health food and other health fields. Therefore, it is particularly important to research and develop effective and efficient techniques for extraction of flavonoids from Ginkgo biloba leaves. This article summarizes common techniques for extracting flavonoids from Ginkgo biloba leaves, compares and evaluates different methods, aiming to find green, efficient, convenient and reliable pretreatment methods, to provide ideas for improving and innovating extraction techniques of flavonoids from Ginkgo biloba leaves.Keywords: flavonoids; Ginkgo biloba leaves; extraction银杏叶中的化合物组成多样且复杂，目前已知其中主要的生物活性功效成分为黄酮类化合物和银杏萜类内酯类化合物。
水提法提取银杏雄株叶片黄酮苷的研究
水提法提取银杏雄株叶片黄酮苷的研究作者：陈银银陈鹏李卫星甄真来源：《现代农业科技》2008年第18期摘要采用正交实验法，以叶片黄酮苷含量为考察指标，对水提法提取银杏雄株叶片黄酮苷的主要影响因子进行了研究。
结果表明：最适宜的提取条件为料液比1:15、提取温度80℃、超声提取时间60min，用该法提取获得的银杏雄株叶片黄酮苷的含量为0.396 8%。
关键词银杏；水提法；黄酮苷；正交设计中图分类号 Q949.64文献标识码A文章编号1007-5739（2008）18-0023-01银杏（Ginkgo biloba L.）是我国特有的孑遗植物[1]。
随着银杏叶生理活性物质及其药理作用不断深入的研究，银杏叶片显现出越来越广泛的开发利用空间。
黄酮类化合物是银杏叶中重要的生理活性物质，具有降低血清胆固醇、增加动脉血流量、改善脑血液循环、抑菌和清除有毒自由基等药理作用，同时也是制作高档保健品和化妆品的原料[2]。
因此，研究银杏叶片黄酮苷的提取优化方法具有十分重要的意义。
1材料与方法1.1试验材料选用扬州大学银杏种质资源圃银杏雄株；采集时间为2007年7月15日，采集部位为树冠外围一年生短枝基部上数3~4片叶。
每株取100张叶片，共取22株。
采摘后分枝，用清水洗净、沥干，放入烘箱12 h，80℃烘干至恒重，干燥后粉碎、混合，过60目筛，放入干燥器中室温密封保存。
1.2试验药品与仪器试验药品为槲皮素、异鼠李素、山奈酚标准品，均购自上海同田生物有限公司。
试验仪器为微型植物粉碎机烘箱、KQ-500B超声波清洗器、旋转蒸发仪、水浴锅、艾科浦实验室级专用超纯化水机、多用循环水真空泵、高效液相色谱仪（日本岛津）、紫外检测器（日本岛津）。
1.3试验设计采用正交试验法[2]，分别以水溶液的料液比、提取时间和提取温度为研究因子，每个因素取3个水平，确立因素水平表（见表1）。
1.4试验方法1.4.1EGB的制备。
提取时，取备用的混合银杏叶粉2g，以水为溶剂，平行操作条件下，超声提取2次，合并2次提取液，过滤，用石油醚萃取3次去除叶绿素等脂类物质，减压抽滤，获得银杏叶粗提物（GBE）。
从银杏叶中提取银杏黄酮甙的工艺比较及实验优化
论著 文章编号:100025404(2004)1421272203从银杏叶中提取银杏黄酮甙的工艺比较及实验优化张梦军1,覃仁辉2,聂金媛2,李志良2 (1第三军医大学医学检验系分析化学教研室,重庆400038;2重庆大学化学化工学院分析化学教研室,重庆400044) 提 要:目的 选择微波辅助提取银杏黄酮甙的最佳条件,并对银杏黄酮甙的微波辅助提取法与常用的热浸泡法进行对比研究。
方法 采用热浸泡法及微波辅助法提取银杏黄酮甙,同时对微波法进行正交和均匀实验优化,并用分光光度法测定提取干膏中的黄酮甙含量。
结果 正交和均匀实验优化获得的最佳条件下的提取率和黄酮纯度基本相当。
正交实验的最佳提取率为212.4mgΠg,纯度为61.9%;均匀实验的最佳提取率为216.2mgΠg,纯度为57.1%。
而热浸泡的提取率仅为114.6mgΠg,纯度为40.1%。
结论 微波辅助提取法的提取率和产物纯度均有显著提高,结果表明它是一种合适的提取法。
关键词:银杏黄酮甙;微波辅助提取法;均匀设计;正交设计 中图法分类号:R282.71;R284.2文献标识码:AExtraction of flavones from leaves of Ginkgo biloba L.by microw ave technique and op2 timized by experimental design and optimizationZH ANG Meng2jun1,QI N Ren2hui1,NIE Jing2yuan1,LI Zhi2liang1(1Department of Analytical Chemistry,C ollege of Medical Laborato2 ry,Third Military Medical University,Chongqing400038;2Analytical Chemistry C ollege of Chemistry and Chemical Engineering,Chongqing Univer2 sity,Chongqing400044,China) Abstract:Objective T o select the best condition for microwave2assisted extraction(M AE)of flav ones from leaves of G inkgo biloba L.and com pare this method with the m ost conventional extraction way.Methods Both mi2 crowave2assisted extraction and theat maceration were adopted for flav ones from leaves of G inkgo biloba L.,and the total content was determined by spectrophotometry.Re sults Under appropriate M AE conditions,both the recovery and purity of total flav ones obtained from the experiments by uniform design and the orthog onal design were very simi2 lar.The optimal recovery and purity by orthog onal experimental design were21214mgΠg and6119%,respectively.The optimal results by orthog onal experimental design were21612mgΠg and5711%,respectively.H owever,the re2 sults by maceration were only11416mgΠg and4011%,respectively.Conclusion M AE is a m ore suitable method for the extraction of flav ones from leaves of G inkgo biloba L.because of its higher extraction rate and purity. K ey w ords:G inkgo biloba L.flav one glycoside;microwave2assisted extraction;hom ogenousΠuniform design;orthog onal experimental design 银杏(G inkgo biloba L.)为银杏科银杏属,是侏罗纪的子遗植物[1],基本保持了1.5亿年前的生态特征,被誉为“活化石”,为我国的特产植物[2]。
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
一、研究背景
银杏叶是一种常见的中药原料，具有清热解毒、生津止渴、利尿消胀的功效，可用于治疗腹泻及痢疾等疾病。
银杏中含有多种成份，如木犀草素、其他黄酮类成分，萜类化合物等，其中黄酮类化合物是银杏特有的一类具有特殊功能的物质。
随着对中药中有效成分含量研究的深入，对银杏叶中黄酮类成分及含量测定分析方法的研究受到了众多研究者的高度重视。
二、银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究
1. 红外光谱
红外光谱是一种快速、灵敏的分析方法，可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，并对其含量进行快速测定分析，但是其准确性受到样品稳定性等因素的限制。
2. 液相色谱
液相色谱可以用来鉴定银杏叶中的黄酮类成分，也可以对其含量进行准确的测定，且具有准确度高的优点。
3. 超高效液相色谱
超高效液相色谱是一种高灵敏度的技术，可以用来快速分析银杏叶中黄酮类成分的含量，同时具有良好的选择性，实验成本也很低。
4. 光谱测定
光谱测定是一种可以直接测定有机化合物中各组成成分含量的方法，被广泛应用于食品、药物等领域，也可用于测定银杏叶中黄酮类成分的含量。
三、结论
银杏叶中黄酮类成分及含量测定方法研究目前得到越来越多学者们的重视，红外光谱、液相色谱、超高效液相色谱、光谱测定等等方法都可以用来测定和分析银杏叶中黄酮类成分的含量，而且在可行性、灵敏度、选择性、结果准确率等方面也有良好的表现。
银杏叶中黄酮化合物的研究
Ｓｔ ｉｓｏ ｈｅ Ｃｈｅ ｉａ ｎ ｔｔ ｅ ｓｏ ｎｇ ｇ ａ ｅ ｕｄ ｅ ｎ ｔ ｍ ｃ ｌＣｏ ｓｉｕ ｎｔ ｆＧｉ ｋ ｏ Ｌｅ ｖ ｓ
Ｚ ＮＧ Ｐ ｉＳ ＨＥ ｅ ， ＨＥＮＧ Ｊａ ・ｕ ， ＨＡ ， Ｅ ａ —ｅ ｉｎ ｇ ｏ Ｚ Ｏ ＹｉＰ ＮＧ Ｘｉｏ ｇ ｎ
Ａ Ｃ３ ２ １ ４ ２） Ａ Ｃ３ Ｈ １ ２ １ ３ １ ； ａ Ａ １１ （ ７ ， １ ； １１ Ｃ （ ７ ， ６ ） Ｎ Ｏ ｃ ／
化 合 物 ３ 黄 色 针 状 结 晶 ， ｐ ３２３５℃ ， ｍ ．０． ０
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（ Ｈ，， Ｈ５ ，Ｏ ７ （ Ｈ，， Ｈ７ ，．０（ Ｈ，， １ ｓＯ －） １． ９ １ ｓＯ －） ９ ６ １ ｓ
ｌ ％乙醇溶解 Ａ Ｓ Ｆ Ｏ Ｄ －８
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图 １ 溶剂 提 取 法操 作 流 程
Ｆ ｇ １ Ｐ ｏ ｅ ｓｏ ｏｖ ｎ ｘ ｒｃ ｉｎ ｉ． ｒｃ ｓ ｆ ｌｅ ｔｅ ｔａ ｔ ｓ ｏ
Ｈ－ 和 Ｈ８的质子信 号 ； ６ ８～ ． ｐ 和 ７９～ ６ 一 在 ． ７ ０ｐｍ ． ８ １ｐｍ 处 ， 出现一 个 四重 峰 （ ｄ ， 明 Ｂ环 为 ． ｐ 各 ｄ）说
化等多种生物活性 ， 且对人体无毒 、 无害、 无致死、 致
２ 提 取 与分 离
将 ５ 干燥后 的银杏叶放人搅碎机 中进行粉 ０ｇ
碎， ６ 过 ０目筛 ， 得银杏 叶粉 。按 以下 工艺 进 行提 取 ，
雌、雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究
第４６卷㊀第４期２０２２年７月南京林业大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．４６，Ｎｏ．４Ｊｕｌ．，２０２２ＤＯＩ：１０．１２３０２／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２１１２０１１㊀收稿日期Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０２１⁃１２⁃０６㊀㊀㊀㊀修回日期Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２０２２⁃０１⁃０７㊀基金项目：国家重点研发计划（２０１７ＹＦＤ０６０１３０１）；国家自然科学基金项目（３１７７０６７４）；江苏高校优势学科建设工程资助项目（ＰＡＰＤ）㊂㊀第一作者：叶威（２９０９５３９１８＠ｑｑ．ｃｏｍ）㊂∗通信作者：陈颖（ｃｈｙｎｊｆｕ＠１６３．ｃｏｍ），教授㊂㊀引文格式：叶威，李强，陈颖，等．雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０２２，４６（４）：７７－８６．ＹＥＷ，ＬＩＱ，ＣＨＥＮＹ，ｅｔａｌ．Ａｎｎｕａｌｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｉｎｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ），２０２２，４６（４）：７７－８６．ＤＯＩ：１０．１２３０２／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２１１２０１１．雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究叶㊀威，李㊀强，陈㊀颖∗，胡㊀菲，胡宇辰，吴琴霞，曹福亮（南京林业大学生物与环境学院，南方现代林业协同创新中心，江苏㊀南京㊀２１００３７）摘要：ʌ目的ɔ为了解黄酮类化合物在银杏叶片中的合成代谢规律，确定银杏合适采摘期，以及选育优良的银杏品种，探讨了雌㊁雄株和金叶（芽变品种）银杏叶片光合生理与黄酮含量的周年变化及相关性㊂ʌ方法ɔ以银杏种质资源圃的雌株㊁雄株及嫁接的金叶银杏为材料，对４ １１月银杏的光合色素㊁叶绿素荧光参数㊁黄酮成分及含量间的变化进行了研究㊂ʌ结果ɔ在整个叶片生长周年动态变化中，雄株银杏的含水量低于雌株和金叶银杏，特别是在６ ９月夏季高温时期的差异更显著；雌株银杏的含水量㊁相对叶面积㊁叶绿素含量都大于雄株与金叶银杏，特别是在５ ８月，但雄株与金叶银杏的相对叶面积增加速度较快；雌株银杏的光化学淬灭系数（ｑＰ）及非光化学淬灭系数（ＮＰＱ）高于雄株和金叶银杏，雌株具有更强的抗氧化能力㊂银杏叶中黄酮苷含量及总黄酮含量的高点分别出现在４ ５月和９月，各银杏叶总黄酮的含量依次为金叶银杏＞雄株＞雌株；雄株的叶绿素㊁类胡萝卜素与槲皮素之间，雌株的叶绿素ａ㊁类胡萝卜素与总黄酮之间都存在极显著正相关㊂金叶银杏叶色在４ ６月为金黄色，其叶绿素含量均比雄株㊁雌株银杏低，７月转绿后与雌株和雄株差异不大，其光合㊁黄酮代谢的变化更接近于雄株，且其黄酮合成的能力高于雄株及雌株㊂ʌ结论ɔ银杏叶的最佳采收期在９月，雄株和金叶银杏更适用于叶用林的培育，雌株的抗逆性高于雄株与金叶银杏，金叶银杏既有观赏价值，又有优良的经济性状，因而具有良好的开发利用前景㊂关键词：银杏；雌㊁雄株；金叶银杏；黄酮成分；周年变化；光合生理；采摘期中图分类号：Ｓ７２２；Ｑ９４５㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码：Ａ开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：文章编号：１０００－２００６（２０２２）０４－００７７－１０Ａｎｎｕａｌｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｉｎｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｓＹＥＷｅｉ，ＬＩＱｉａｎｇ，ＣＨＥＮＹｉｎｇ∗，ＨＵＦｅｉ，ＨＵＹｕｃｈｅｎ，ＷＵＱｉｎｘｉａ，ＣＡＯＦｕｌｉａｎｇ（Ｃｏ⁃ＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒｆｏｒＳｕｓｔａｉｎａｂｌｅＦｏｒｅｓｔｒｙｉｎＳｏｕｔｈｅｒｎＣｈｉｎａ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄｔｈｅＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００３７，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ʌＯｂｊｅｃｔｉｖｅɔＴｈｅａｎｎｕａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｓａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆ（ｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｂｕｄｍｕｔａｔｉｏｎ）ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄｂｒｅｅｄｉｎｇｏｆｒｏｂｕｓｔＧ．ｂｉｌｏｂａｓｐｅｃｉｅｓ，ｐｒｏｍｏｔｉｏｎｏｆｎｅｗｖａｒｉｅｔｉｅｓ，ａｎｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｓｅｅｄｌｉｎｇｓｆｏｒｈａｒｖｅｓｔｉｎｇｌｅａｖｅｓ．ʌＭｅｔｈｏｄɔＣｈａｎｇｅｓｉｎｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｉｇｍｅｎｔｓ，ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｐａｒａｍｅｔｅｒｓ，ａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｆｒｏｍＡｐｒｉｌｔｏＮｏｖｅｍｂｅｒｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｉｎｔｈｅｌｅａｖｅｓｏｆｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｒａｆｔｅｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧ．ｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｓ．ʌＲｅｓｕｌｔɔＤｕｒｉｎｇｔｈｅｅｎｔｉｒｅｙｅａｒ，ｔｈｅｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔｉｎｍａｌｅｔｒｅｅｓｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｆｅｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅｓｉｎｔｈｒｅｅＧ．ｂｉｌｏｂａｓｐｅｃｉｅｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｄｕｒｉｎｇｔｈｅｈｉｇｈ⁃ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓｕｍｍｅｒｐｅｒｉｏｄｆｒｏｍＪｕｎｅｔｏＳｅｐｔｅｍｂｅｒ．Ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔ，ｒｅｌａｔｉｖｅｌｅａｆａｒｅａａｎｄｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧ．ｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｓｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｆｒｏｍＭａｙｔｏＡｕｇｕｓｔ，ｔｈｅｉｒｒｅｌａｔｉｖｅｌｅａｆａｒｅａ南京林业大学学报（自然科学版）第４６卷ｉｎｃｒｅａｓｅｄｆａｓｔｅｒｔｈａｎｔｈｅｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｑｕｅｎｃｈｉｎｇ（ｑＰ）ａｎｄｎｏｎ⁃ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｑｕｅｎｃｈｉｎｇ（ＮＰＱ）ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｍａｌｅｏｒｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅ，ｔｈｅｍａｘｉｍｕｍｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ（Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ）ｗａｓｌｏｗｅｒｉｎｔｈｅｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｌｅａｆｔｒｅｅ．ＴｈｅａｎｎｕａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｒｅｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓｓｕｃｈａｓｑｕｅｒｃｅｔｉｎａｎｄｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｔｈｒｅｅＧ．ｂｉｌｏｂａｓｐｅｃｉｅｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｗｏｈｉｇｈｐｏｉｎｔｓ，ｏｎｅｉｎＡｐｒｉｌｔｏＭａｙａｎｄａｎｏｔｈｅｒｉｎＳｅｐｔｅｍｂｅｒ．ＴｈｅｈｉｇｈｅｓｔｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｉｎｌｅａｖｅｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎＳｅｐｔｅｍｂｅｒ，ａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｔｈｒｅｅｔｒｅｅｓｐｅｃｉｅｓｗａｓｉｎｔｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇｏｒｄｅｒ：ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆ＞ｍａｌｅ＞ｆｅｍａｌｅ．Ｔｈｅｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ，ｃａｒｏｔｅｎｅａｎｄｑｕｅｒｃｅｔｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｍａｌｅｔｒｅｅｓｗｅｒｅｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｅａｃｈｏｔｈｅｒ；ｈｏｗｅｖｅｒ，ａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌａ，ｃａｒｏｔｅｎｅ，ａｎｄｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗａｓｆｏｕｎｄｉｎｔｈｅｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓ．Ｔｈｅｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅｌｅａｖｅｓｍａｉｎｔａｉｎｅｄａｇｏｌｄｅｎｙｅｌｌｏｗｃｏｌｏｒｆｒｏｍＡｐｒｉｌｔｏＪｕｎｅｏｗｉｎｇｔｏｔｈｅｌｏｗｅｒｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｃｏｎｔｅｎｔｔｈａｎｔｈｅｉｒｍａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅｃｏｕｎｔｅｒｐａｒｔｓｄｕｒｉｎｇｔｈｉｓｐｅｒｉｏｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｉｒｌｅａｖｅｓｃｈａｎｇｅｄｆｒｏｍｙｅｌｌｏｗｔｏｇｒｅｅｎａｆｔｅｒＪｕｌｙ，ａｎｄｔｈｅｉｒｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｈａｎｇｅｓｗｅｒｅｃｌｏｓｅｒｔｏｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅｍａｌｅｔｒｅｅｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｉｎｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅｓｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｍａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓ．ʌＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎɔＴｈｅｂｅｓｔｈａｒｖｅｓｔｉｎｇｓｔａｇｅｆｏｒｇｉｎｋｇｏｌｅａｖｅｓｗａｓｉｎＳｅｐｔｅｍｂｅｒｉｎｔｈｅＮａｎｊｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ；ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅｓｅｘｈｉｂｉｔｅｄｇｒｅａｔｅｒｃｏｎｄｕｃｉｖｅｎｅｓｓｔｏｔｈｅｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｌｅａｆ⁃ｕｓｉｎｇｆｏｒｅｓｔ；ａｎｄｔｈｅｆｅｍａｌｅｔｒｅｅｓｅｘｈｉｂｉｔｅｄｈｉｇｈｅｒｓｔｒｅｓｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｈａｎｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅｓ．Ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧ．ｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｈａｓａｎｏｒｎａｍｅｎｔａｌｖａｌｕｅａｎｄｅｘｃｅｌｌｅｎｔｅｃｏｎｏｍｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｗｈｉｃｈｍａｋｅｓｉｔｗｏｒｔｈｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇａｎｄｕｔｉｌｉｚｉｎｇｖｉｇｏｒｏｕｓｌｙｉｎｔｈｅｆｕｔｕｒｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ；ｍａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅｔｒｅｅ；ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔ；ａｎｎｕａｌｖａｒｉａｔｉｏｎ，ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ；ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇｓｔａｇｅ㊀㊀银杏（Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ）叶含有黄酮和萜内酯等多种生理活性物质，对心脑血管疾病具有独特疗效，其在农业㊁加工业㊁药业等方面具有重要的地位［１］㊂银杏叶用林的培育已成为近十几年来银杏产业发展的重要内容，而高产量和高质量银杏叶与银杏的品种以及雌㊁雄株的关系密切［２］㊂银杏雌㊁雄株之间在叶片大小㊁叶形㊁色素含量㊁内源激素㊁光合特性㊁黄酮和内酯等方面都存在差异［３］㊂金叶银杏是由南京林业大学培育出的新品种［４］，其叶片在４ ５月就呈金黄色，因而具有重要的观赏价值㊂研究表明金叶银杏在５ ６月是转色的关键时期［５］，金叶银杏色素含量与叶色密切相关［６］，其呈现金黄色的原因主要是由于叶中叶绿素的减少或黄色素如类胡萝卜素的增加［７］㊂袁斌玲等［８］对金叶银杏的扦插繁殖和盐胁迫下的黄酮代谢情况进行了研究，为金叶银杏的快速繁殖和开发利用奠定了基础㊂提高叶用银杏种植园黄酮类化合物的产量可增加银杏产业的经济效益［９］㊂黄酮类化合物是植物特有的次生代谢产物，叶片黄酮的周年变化与光合色素及光合作用关系密切，而对于雌株㊁雄株和金叶银杏叶内的黄酮周年变化与光合变化之间的关系研究鲜见报道㊂本研究以普通银杏雌㊁雄株和金叶银杏嫁接树的叶片为试材，探讨银杏叶黄酮各成分的周年变化与光合色素及叶绿素荧光之间的相互关系，旨在了解黄酮类化合物在银杏叶片中的合成代谢规律，选育优良品种，确定银杏叶的合适采摘期，为银杏叶黄酮类化合物的代谢机制研究及金叶银杏资源开发利用提供依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀供试材料银杏叶采集于南京林业大学下蜀林场银杏种质资源圃（１１９ ２１ʎＥ，３２ １２ʎＮ）㊂选择相同生境下长势良好㊁无病虫害㊁管理一致，且有代表性的１０年生普通银杏雌㊁雄植株实生苗和金叶银杏嫁接植株各１０株㊂其中金叶银杏嫁接苗以湖北安陆地区芽变银杏母树上的芽为接穗，以上述普通银杏实生苗为砧木嫁接培育而成［４］㊂从４月开始，每月中旬采集３种银杏植株的叶片，直到１１月，共８次㊂其中相对叶面积的测定在４月测定４次㊂每次从植株同一高度的短枝上随机摘取大小均匀㊁叶色一致㊁无伤病的叶片㊂每种银杏每株分别采１０片，共１００片混合在一起，用冰盒立即带回实验室，洗净晾干后，其中１５片用于叶绿素荧光及叶绿素含量的测定，剩余叶片分成３组，用于含水量和黄酮等成分的测定㊂１．２㊀指标测定将洗净晾干的银杏叶称取鲜质量（ＦＷ，记为ＷＦ）后，再于１０５ħ杀青１５ｍｉｎ，然后在６５ħ烘箱内烘干至恒定质量（ＤＷ，记为ＷＤ），计算含水率㊂含水率＝（ＷＦ－ＷＤ）／ＷＦˑ１００％㊂叶绿素含量测定参照李合生［１０］方法㊂叶绿素荧光参数测定时，每种银杏分别随机取１０片叶，采用ＣＦＩｍａｇｅｒ叶绿素荧光成像系统进行叶绿素荧光参数的测定㊂叶片８７㊀第４期叶㊀威，等：雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究在暗适应３０ｍｉｎ后，测定初始荧光（Ｆｏ）㊁最大荧光（Ｆｍ）和光系统Ⅱ最大光化学效率（Ｆｖ／Ｆｍ）；叶片充分光适应后，测定有效光化学效率（Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ）㊁光化学淬灭系数（ｑＰ）和非光化学淬灭系数（ＮＰＱ），每个月测定１次㊂相对叶面积由叶绿素荧光仪测得㊂黄酮苷成分含量的测定参照文献［８］方法：总黄酮含量（ｍｇ／ｇ）＝（槲皮素含量＋山柰酚含量＋异鼠李素含量）ˑ２．５１㊂１．３㊀数据统计与分析采用Ｅｘｃｅｌ２０２０对数据进行处理，ＳＰＳＳ２１．０软件进行方差分析和多重检验㊂每个指标测定３次重复㊂２㊀结果与分析２．１㊀银杏叶含水量和叶面积年动态变化银杏１年中（４ １１月）不同时期含水率的变化情况见图１㊂各银杏叶的含水率年动态变化趋势基本一致，都表现为年初期（４月）含水率最高，后整体呈下降趋势，在４ ７月下降幅度较小，８ ９月下降加速，在１０月左右下降最快，到１１月时，银杏叶片的含水率只有３０％ ４０％㊂其中金叶银杏的含水率高于雄株，雌株与金叶银杏除了４㊁６㊁９㊁１０月，其他月份没有明显的差异，雄株的含水率从６月开始都显著低于前两者，特别是在８ ９月差异较大，９月分别比金叶银杏和雌株银杏降低了２０．０％与１６．６％㊂不同小写字母表示同一时间含水率差异显著（Ｐ＜０ ０５）㊂Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔｉｎｓａｍｅｔｉｍｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＜０ ０５）．图１㊀银杏叶含水率年动态变化Ｆｉｇ．１㊀Ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀银杏叶面积周年变化见表１㊂银杏叶片从４月上旬到４月３０日是叶面积快速生长期，４月１７日比４月１０日雌株㊁雄株㊁金叶３种银杏相对叶面积分别增加了１ ４８㊁１．６８㊁１．５８倍，４月３０日比４月１０日３种银杏的相对叶面积分别增加了２ ７２㊁３ ３６㊁４ ２７倍㊂５ ６月为次级快速生长期，生长速度比４月要低，６ １０月为缓慢生长期（平台期），１０月叶面积达到最高，１０月比４月１０日叶面积分别增加了４．１８㊁５．４３㊁５．７８倍，１１月叶面积降低（叶片干枯皱缩）㊂１０月雌株银杏的叶面积最大，雄株次之，金叶银杏最小，但金叶银杏叶面积比雌㊁雄株更早地达到平台期（在６月），雌㊁雄株在８月达到平台期㊂表１㊀银杏相对叶面积周年变化Ｔａｂｌｅ１㊀Ａｎｎｕａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｒｅｌａｔｉｖｅｌｅａｆａｒｅａｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ日期（月⁃日）ｄａｔｅ（ｍｏｎｔｈ⁃ｄａｙ）雌株ｆｅｍａｌｅ雄株ｍａｌｅ金叶银杏ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆ叶面积／ｍｍ２ｌｅａｆａｒｅａ增加倍数ｉｎｃｒｅａｓｅｆｏｌｄｓ叶面积／ｍｍ２ｌｅａｆａｒｅａ增加倍数ｉｎｃｒｅａｓｅｆｏｌｄｓ叶面积／ｍｍ２ｌｅａｆａｒｅａ增加倍数ｉｎｃｒｅａｓｅｆｏｌｄｓ０４⁃１０７２８．３ʃ３５．８ｅ１．００５５６．７ʃ２４．３ｈ１．００５１１．４ʃ６１．４ｆ１．０００４⁃１７１８０５．６ʃ２０４．８ｄ１．４８１４９０．２ʃ１０５．６ｇ１．６８１３２０．３ʃ３５．１ｅ１．５８０４⁃２４２１７７．１ʃ２１６．５ｄ１．９９２１０１．８ʃ５３１．２ｆ２．７８２０２７．３ʃ２１６．５ｄ２．９６０４⁃３０２７１１．７ʃ１２６．７ｃ２．７２２４２８．４ʃ１５７．４ｅｆ３．３６２６９３．１ʃ３０９．６ｃ４．２７０５⁃１５２７３０．５ʃ４１７．０ｃ２．７５２７６９．９ʃ３３６．３ｄｅ３．９８２６９４．３ʃ１７９．１ｃ４．２７０６⁃１５２８３７．６ʃ２０４．１ｃ２．９０２８５８．２ʃ１１９．３ｂｃｄｅ４．１３３２３４．３ʃ３４８．０ａｂｃ５．３２０７⁃１５２８７１．０ʃ１１４．２ｃ２．９４２９２２．７ʃ２５２．０ｂｃｄ４．２５３３０５．７ʃ４１１．３ａｂ５．４６０８⁃１５３０４３．７ʃ５８６．９ｂｃ３．１８３３５５．８ʃ２７２．５ａｂ５．０３３３１１．６ʃ３８７．４ａｂ５．４８０９⁃１５３５４９．６ʃ４１１．３ａｂ３．８７３４３４．３ʃ１９３．６ａ５．１７３４２１．４ʃ４７５．３ａ５．６９１０⁃１５３７７１．６ʃ３３０．４ａ４．１８３５７８．９ʃ１３０．１ａ５．４３３４６８．０ʃ４２６．２ａ５．７８１１⁃１５３４９４．７ʃ１５６．６ａ３．８０３２７７．９ʃ１４２．９ａｂｃ４．８９２７８１．７ʃ２６１．４ｂｃ４．４４㊀㊀注：增加倍数为其他月份叶面积与４月１０日叶面积相比增加的倍数；同一列中的不同小写字母表示叶面积存在显著差异（Ｐ＜０．０５）㊂ＴｈｅｍｕｌｔｉｐｌｅｏｆｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｌｅａｆａｒｅａｉｎｔｈｅｔａｂｌｅｗａｓｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｆｏｌｄｓｏｆｌｅａｆａｒｅａｓｉｎｔｈｅｏｔｈｅｒｍｏｎｔｈｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｌｅａｆａｒｅａｏｎＡｐｒｉｌ１０．Ｄｉｆｆｅｒ⁃ｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｉｎｔｈｅｔａｂｌｅｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＜０．０５）．９７南京林业大学学报（自然科学版）第４６卷２．２㊀银杏叶色及光合色素含量动态变化金叶银杏在４ ５月为金黄色，特别是５月，黄色度更深，６月开始转绿，７月转绿完成，９ １０月的叶色与雌株类似㊂从雌株和雄株的叶色变化来看，４ ６月相差不大，但在９ １０月雄株比雌株叶色转黄更早一些，甚至比金叶银杏还早（图２）㊂ａ．雌株ｆｅｍａｌｅｔｒｅｅ；ｂ．雄株ｍａｌｅｔｒｅｅ；ｃ．金叶ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆｔｒｅｅ㊂图２㊀银杏叶片颜色的周年变化Ｆｉｇ．２㊀Ｔｈｅｃｏｌｏｒｃｈａｎｇｅｓｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀从叶绿素含量［叶绿素ａ，Ｃｈｌａ；叶绿素ｂ，Ｃｈｌｂ，总叶绿素，Ｃｈｌ（ａ＋ｂ）］变化来看，３种银杏叶绿素含量从４月开始上升，６ ７月或８月Ｃｈｌａ达到高峰，然后急剧下降，９月又缓慢下降直到１１月份的低点㊂方差分析表明，同一月份各银杏之间在４ ８月光合色素含量存在显著差异（Ｐ＜０ ０５），９ １１月３种银杏的色素差异变小（图３Ａ 图图中不同小写字母表示在相同月份３种银杏存在显著差异（Ｐ＜０．０５）㊂下同㊂Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｍｏｎｔｈ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．图３㊀银杏叶中叶绿素年动态变化Ｆｉｇ．３㊀Ａｎｎｕａｌｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀在５ ９月，雌株银杏的Ｃｈｌａ和Ｃｈｌｂ及总叶绿素含量都显著高于雄株或金叶银杏的，特别是在４ ６月，金叶银杏的叶绿素含量最低，如４月雌㊁雄株叶绿素ａ分别比金叶银杏高２．２９和２．４６倍，０８㊀第４期叶㊀威，等：雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究雌㊁雄株叶绿素ｂ分别比金叶银杏高９．８３和９．０３倍，雌㊁雄株总叶绿素含量分别比金叶银杏高３．４５和３ ２０倍㊂但金叶银杏叶绿素ａ和总叶绿素含量从４月（叶绿素ｂ从５月）开始缓慢增加到６月，从６月到７月是金叶银杏色素快速增加的时期，也是金叶银杏由黄色转为绿色的关键时期，叶绿素到７月达到高点后一直维持到８月，然后快速下降到９月㊂８月Ｃｈｌａ和Ｃｈｌｂ及总叶绿素含量已经接近雄株，但仍低于雌株（图３Ａ ３Ｃ）㊂雄株与雌株银杏叶绿素含量在４月没有显著差异，在５ ８月Ｃｈｌａ和Ｃｈｌｂ和Ｃｈｌ（ａ＋ｂ）都显著低于雌株（Ｐ＜０ ０５），是两者色素含量差异最大的时间段，如在６月雌株比雄株的Ｃｈｌａ和Ｃｈｌｂ及总叶绿素含量分别高０．４７㊁１．７７㊁０．９４倍㊂９月后雌㊁雄株的色素差异变得很小（图３Ａ ３Ｃ）㊂从类胡萝卜素来（Ｃａｒ）看，在４ ５月雌株的类胡萝卜素远高于雄株和金叶银杏的，在６ ７月却相反，雌株的Ｃａｒ低于雄株和金叶的㊂而金叶银杏在６ ８月的类胡萝卜素与雄株没有显著差异，但数值普遍高于雄株（图３Ｅ）㊂从Ｃｈｌａ／Ｃｈｌｂ来看，金叶银杏的Ｃｈｌａ／Ｃｈｌｂ在整个观察期都高于雌株和雄株，特别是在４ ７月，差值较大，如５月金叶银杏的Ｃｈｌａ／Ｃｈｌｂ分别比雌株和雄株高２．３１和２．６６倍（图３Ｄ）㊂总叶绿素／类胡萝卜素［Ｃｈｌ（ａ＋ｂ）／Ｃａｒ］金叶银杏在４ ８月都低于雌株和雄株，１０月后三者差异较小㊂雄株的Ｃｈｌａ／Ｃｈｌｂ在６ ８月高于雌株（图３Ｄ），而Ｃｈｌ（ａ＋ｂ）／Ｃａｒ低于雌株（图３Ｆ）㊂２．３㊀银杏叶片叶绿素荧光参数的年动态变化４ １１月银杏叶片叶绿素荧光参数的年动态变化见图４㊂从叶绿素荧光参数的周年变化来看，银杏的Ｆｖ／Ｆｍ（最大光化学效率）为０ ７０ ０ ８４㊂在４ ７月逐渐增加，然后从７月开始又逐渐下降㊂金叶银杏与雄株㊁雌株之间（除了８月和１０月）都没有显著差异（图４Ａ）㊂从有效光化学效率（Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ）来看，雌株和雄株在４月最低，逐渐增加到６月（雌株）或７月（雄株）的高点，再逐渐下降至１１月，雄株的Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ大部分月份都高于雌株（除６月㊁１１月外），特别是在８ ９月存在显著差异；金叶银杏的Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ在４月㊁６月和７月都处于较高的水平，５月较低，７月后逐渐下降，但所有月份都高于雌㊁雄株，且与两者都存在显著差异（Ｐ＜０ ０５），如４月和６月金叶银杏比雌株分别高５１ ３％㊁４４４Ｂ）㊂图４㊀银杏叶中叶绿素荧光参数年动态变化Ｆｉｇ．４㊀Ａｎｎｕａｌｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｐａｒａｍｅｔｅｒｓｉｎｆｅｍａｌｅ，ｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀从光化学淬灭系数（ｑＰ）来看，３种银杏的ｑＰ在４月最高，然后逐渐下降，到６ ７月达到低点，然后又升高至８月，９月又有所下降，此后雌㊁雄株缓慢上升到１１月，雌㊁雄株之间在９月存在显著差１８南京林业大学学报（自然科学版）第４６卷异，其他月份差异不显著㊂而金叶银杏的ｑＰ从９月一直呈下降趋势，到１１月达到最低点，１０ １１月与雌㊁雄株存在显著差异（图４Ｃ）㊂各银杏的非光化学淬灭系数（ＮＰＱ）的年动态变化与ｑＰ的变化不一致，雌㊁雄株在４ ５月最高，然后下降到６月，此后雄株缓慢升高到１１月，而雌株在１０月有所下降，１１月又回升至近雄株的水平，在７ ９月雌株银杏的ＮＰＱ显著高于雄株（Ｐ＜０ ０５）㊂金叶银杏４月的ＮＰＱ最低，然后开始缓慢上升到９月达到最大值，１０月再次下降，１１月又有所回升，此阶段与雌株的变化相似㊂总体来讲，金叶银杏的ＮＰＱ都低于雌㊁雄株的，特别是在４ ６月，如４月雌株和雄株的ＮＰＱ分别比金叶银杏高５．０８和４ ６２倍，６ ９月的差距缩小（图４Ｄ）㊂２．４㊀３种银杏叶黄酮成分含量的年动态变化雌株银杏的槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，Ｑｕｅ）含量在５月份到最高（高于雄株和金叶），然后下降至８月，９月有所回升，后又出现下降㊂雄株银杏的槲皮素含量在４月最高，然后下降到６月，维持到１０月略有上升后１１月又下降，在７ １０月显著地高于雌株，如８月比雌株高了１０１．７％㊂金叶银杏的槲皮素含量５ ７月下降，此时都低于雌㊁雄株，如７月槲皮素含量比雌㊁雄株分别低５３．４％和９９ ３％，从７月开始上升到９月，此时与雄株含量没有显著差异，然后１０月下降，１１月有所回升（图５Ａ）㊂图５㊀银杏叶中黄酮苷和总黄酮含量的年动态变化Ｆｉｇ．５㊀Ａｎｎｕａｌｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓａｎｄｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎｍａｌｅ，ｆｅｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｔｒｅｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀雌株银杏在４月山柰酚（ｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ，Ｋａｍ）含量达到最高（此时比雄株和金叶的高），此后呈波浪形变化，在７月和９月出现峰值，在８月和１１月出现谷值㊂而雄株的山柰酚含量４ ５月稍有降低，尔后随着月份增加呈上升趋势，其中在９月达到最高峰，分别比雌株和金叶银杏高４６．９％和１９ ７％，１０ １１月稍有降低㊂金叶银杏的山柰酚含量在４ ６月下降，此时低于雌㊁雄株，从６月开始上升到８月达到高点，然后开始下降，１１月有所回升（图５Ｃ）㊂银杏叶中异鼠李素（ｉｓｏｒｈａｍｎｅｔｉｎ，Ｉｓｏ）含量随着月份增加表现也不一致㊂雌株银杏４ ６月下降，６ ８月逐渐上升，维持到１０月后又出现下降㊂雄株的异鼠李素从５月后开始上升到９月达到最大值，９月后稍有下降，１０ １１月大幅下降，９ １０月显著高于雌株，如９月雄株的异鼠李素比雌株高４６．０％㊂金叶银杏异鼠李素从４月下降到６月，然后持续上升至９月，其含量接近雄株此时的水平，９ １１月的变化同雄株一致（图５Ｂ）㊂雌株银杏的总黄酮（ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｔｏｔａｌｆａ）含量变化呈波浪形，即在６㊁８㊁１１月处于谷底，７㊁９月处于谷峰，除４ ５月高于雄株外其他月份都小于雄株，特别是在８㊁９月分别比雄株低６２．６％和３８．５％㊂雄株银杏的总黄酮含量从５月一直上升到９月的高峰，都远高于同时期的雌株和金叶（除８月外）的，此后下降至１１月㊂金叶银杏的总黄酮含量２８㊀第４期叶㊀威，等：雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究从４月开始下降至最低的６月，然后从６月持续上升至９月的最高值，９月金叶银杏的总黄酮比雄株低９ ８％，随后开始下降至１１月（图５Ｄ）㊂２．４㊀银杏叶各指标间的相关性银杏叶各指标间的相关性分析见表２㊂在整个４ １１月的周年变化中，银杏的叶绿素ａ㊁叶绿素ｂ㊁总叶绿素及类胡萝卜素之间都存在显著和极显著的正相关（除雌株的类胡萝卜素与叶绿素ｂ之间）（Ｐ＜０．０１）㊂在黄酮成分槲皮素㊁山柰酚㊁异鼠李素与总黄酮之间都存在着极显著的正相关（Ｐ＜０．０１）㊂在黄酮成分与光合色素的关系中，雌株的槲皮素与叶绿素ａ之间，雄株的槲皮素与叶绿素ａ㊁ｂ及总叶绿素间之间都存在显著的正相关（Ｐ＜０ ０５）；而雄株的山柰酚与叶绿素ａ㊁叶绿素ｂ㊁总叶绿素及类胡萝卜素之间存在极显著的负相关㊂另外，雌株的类胡萝卜素与槲皮素及总黄酮呈极显表２㊀银杏叶各指标间的相关性分析Ｔａｂｌｅ２㊀Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓａｍｏｎｇｖａｒｉｏｕｓｉｎｄｉｃａｔｏｒｓｉｎｉｎｍａｌｅ，ｆｅｍａｌｅａｎｄｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．ｔｒｅｅｓ指标ｉｎｄｉｃａｔｏｒ种类ｓｐｅｃｉｅｓ叶绿素ａＣｈｌａ叶绿素ｂＣｈｌｂ总叶绿素Ｃｈｔ（ａ＋ｂ）类胡萝卜素Ｃａｒ槲皮素Ｑｕｅ山柰酚Ｋａｍ异鼠李素Ｉｓｏ总黄酮ｔｏｔａｌｆａＦｖ／ＦｍＦｖᶄ／Ｆｍᶄ光化学淬灭系数ｑＰ非光化学淬灭系数ＮＰＱ含水率ＷＣ雌株１．００Ｃｈｌａ雄株１．００金叶１．００雌株０．８６∗∗１．００Ｃｈｌｂ雄株０．９８∗∗１．００金叶０．９８∗∗１．００雌株０．９７∗∗０．８９∗∗１．００Ｃｈｌ（ａ＋ｂ）雄株０．９９∗∗０．９９∗∗１．００金叶０．９９∗∗０．９９∗∗１．００雌株０．５１∗∗０．３１０．３５∗１．００Ｃａｒ雄株０．８４∗∗０．８０∗∗０．８３∗∗１．００金叶０．６１∗∗０．５０∗∗０．５８∗∗１．００槲皮素Ｑｕｅ雌株０．３９∗０．２９０．３００．６９∗∗１．００雄株０．３９∗０．４０∗０．３９∗０．２６１．００金叶－０．０９－０．１２－０．１０－０．３６∗１．００山柰酚Ｋａｍ雌株－０．１１－０．３８∗－０．１３０．０９０．２７１．００雄株－０．６３∗∗－０．５９∗∗－０．６２∗∗－０．５８∗∗－０．１９１．００金叶０．２６０．３７１∗０．２９－０．３２０．５９∗∗１．００异鼠李素Ｉｓｏ雌株０．２３０．０１０．１７０．１１０．１３０．６４∗∗１．００雄株－０．０８－０．０２－０．０６－０．０８０．５８∗∗０．４８∗∗１．００金叶０．０６０．１９０．１０－０．４３∗０．４２∗０．８０∗∗１．００总黄酮ｔｏｔａｌｆａ雌株０．３００．０５０．２３０．５１∗∗０．７７∗∗０．７８∗∗０．６０∗∗１．００雄株－０．２５－０．１９－０．２３－０．２７０．５０∗∗０．７３∗∗０．８９∗∗１．００金叶０．１００．２００．１３－０．４３∗０．７２∗∗０．９３∗∗０．８８∗∗１．００雌株０．３６∗０．４１∗０．４７∗∗－０．４５∗０．００－０．１２０．０４０．０３１．００Ｆｖ／Ｆｍ雄株０．３４０．４３∗０．３７∗－０．０２０．１００．１１０．３５∗０．２４１．００金叶０．５１∗∗０．５３∗∗０．５２∗∗０．４６∗－０．４１∗０．０９０．１７－０．０２１．００雌株０．３４∗０．５０∗０．５０∗－０．５７∗∗－０．２８∗∗－０．１９∗∗－０．０４－０．２０－０．８３∗∗１．００Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ雄株０．４１∗０．３６∗０．３９∗０．５７∗∗０．５０∗∗－０．６３∗∗－０．０９－０．２２－０．５２∗∗１．００金叶０．１３０．１４０．１４０．３６∗－０．６８∗∗－０．４７∗－０．２２－０．４９∗∗０．５３∗∗１．００雌株－０．１５－０．２４－０．３１０．７２∗∗０．４８∗∗０．１０－０．１００．２８－０．７４∗∗－０．９４∗∗１．００ｑＰ雄株－０．１２－０．２０－０．１５０．０５０．０９－０．４５∗－０．４５∗－０．４１∗－０．８３∗∗０．７１∗∗１．００金叶－０．０５－０．１５－０．０８－０．１３０．６４∗∗－０．０３－０．２７０．０７－０．７３∗∗－０．５０∗∗１．００雌株０．１２－０．１４－０．０３０．７８∗∗０．５４∗∗０．３９∗０．１５０．５８∗∗－０．４９∗∗－０．７２∗∗０．７５∗∗１．００ＮＰＱ雄株－０．１０－０．１８－０．１３－０．１８０．１５－０．４２∗－０．４６∗－０．３７∗－０．４６∗０．３６∗０．７５∗∗１．００金叶０．３９∗０．４３∗０．４０∗０．０５０．３１０．６９∗∗０．４７∗０．５６∗∗０．４１∗－０．５３∗∗－０．２４１．００含水率ＷＣ雌株０．７０∗∗０．４８∗∗０．６２∗∗０．７４∗∗０．７５∗∗０．４７∗∗０．５２∗∗０．８３∗∗－０．０１－０．１４０．３００．５５∗∗１．００雄株０．６５∗∗０．６２∗∗０．６４∗∗０．５７∗∗０．７０∗∗－０．７５∗∗０．００－０．１７－０．０９０．７３∗∗０．４１∗０．４７∗１．００金叶０．２８０．１３０．２４０．３７∗０．２２－０．３７∗－０．２６－０．２１－０．１００．１３０．５５∗∗－０．３１１．００㊀㊀注：∗．Ｐ＜０ ０５；∗∗．Ｐ＜０．０１㊂３８南京林业大学学报（自然科学版）第４６卷著正相关，而金叶银杏的类胡萝卜素与槲皮素㊁异鼠李素及总黄酮呈显著的负相关（Ｐ＜０ ０５）㊂黄酮成分与４个叶绿素荧光参数的关系中，雌株的总黄酮与之关系不密切（除ＮＰＱ外），但雄株的Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ与槲皮素呈显著正相关却与山柰酚呈显著负相关，金叶银杏的Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ与槲皮素㊁山柰酚和总黄酮呈显著或极显著负相关；ｑＰ与雌株和金叶银杏的槲皮素呈极显著正相关，而与雄株银杏的山柰酚㊁异鼠李素及总黄酮呈显著负相关㊂ＮＰＱ与雌株银杏的槲皮素㊁总黄酮及与金叶银杏的山柰酚和总黄酮之间存在极显著正相关（Ｐ＜０ ０１）；相反，雄株的ＮＰＱ与山柰酚和异鼠李素及总黄酮呈显著负相关（Ｐ＜０ ０５）㊂雌株银杏的含水率与光合色素㊁黄酮成分都呈极显著正相关，而雄株银杏的含水率与槲皮素㊁山柰酚呈显著负相关；金叶银杏的含水率除与类胡萝卜素㊁异鼠李素显著相关，与其他光合色素和黄酮成分关系不显著㊂３㊀讨㊀论银杏雌㊁雄株及芽变品种金叶在１年（４ １１月）的生长周期中，其叶色㊁生长及色素含量㊁叶绿素荧光参数及黄酮成分及含量都出现了不同的变化特点㊂从含水量和相对叶面积变化来看，雄株银杏叶的含水量在整个测定期都普遍低于雌株和金叶银杏的，特别是在６ １０月的夏季高温时期，雄株的含水量与雌株和金叶银杏相比呈现显著性差异㊂含水量的变化与雌株的光合色素㊁黄酮的成分都呈极显著正相关㊂Ｈｅ等［１１］研究指出，缺水状况下，雌株银杏含水量较高，生长更好，水分亏缺显著降低银杏叶绿素的含量［１２］，这与本研究的结果相一致㊂从相对叶面积的变化来看，雌株银杏的相对叶面积整体大于雄株和金叶的，这与江德安等［１３］研究结果一致，说明在南京地区，夏季正午高温（３５ ３８ħ）对雄株生长的影响高于雌株和金叶㊂在银杏生长的周年变化中，雌株银杏叶绿素含量总体上远高于雄株与金叶银杏，特别是６ ８月高温的夏季差异加大，如６月雌株总叶绿素含量比雄株高０．９４倍㊂７ ９月银杏的叶绿素ｂ出现急剧下降，比叶绿素ａ下降幅度大，这一结果与盐胁迫下小麦的叶绿素ｂ变化一致［１４］，说明在胁迫情况下，叶绿素ｂ较叶绿素ａ更易降解㊂但从银杏的类胡萝卜素和Ｃｈｌａ／Ｃｈｌｂ比值来看，雄株和金叶银杏在６ ７月有较高的类胡萝卜素，可以通过类胡萝卜素抵御７ ９月对叶绿素降解造成的伤害，总体来看７ ９月的夏季高光强㊁高温胁迫引起了银杏叶绿素特别是叶绿素ｂ的降解，但雌株的总色素高于雄株和金叶，因而比雄株和金叶抵抗能力更强一些㊂叶绿素荧光参数Ｆｖ／Ｆｍ是指植物潜在的最大光合能力，而ｑＰ反映的是ＰＳⅡ天线色素吸收的光能用于光化学电子传递的能力，ｑＰ越大ＰＳⅡ反应中心电子传递活性越强㊂参数Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ是指植物光合作用中实际光能转化为稳定化学能的能力，参数ＮＰＱ反映了以热耗散形式散发的能量，即能量转化为热能消耗的效率，是植物耐光氧化能力的指标［１４－１５］㊂本研究中，３种银杏在夏季高温情况下，雌株银杏的Ｆｖ／Ｆｍ在８月㊁Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ在７ ９月都显著低于雄株和金叶㊂相反，雌株银杏的ｑＰ在９月高于雄株，ＮＰＱ在７ ９月都高于雄株和金叶㊂这些结果与有关 南林８９５ 杨㊁梭梭（Ｈａｌｏｘｙｌｏｎａｍ⁃ｍｏｄｅｎｄｒｏｎ）及银杏在环境胁迫下的荧光参数变化的研究结果相似［１１，１６－１７］，表明在夏季的高温情况下，雌株银杏吸收的光能更多以热能耗散的形式释放，其用于热耗散的能量高于雄株和金叶，尽管雌株比雄株和金叶也有较强的ＰＳⅡ反应中心电子传递能力（ｑＰ），但体现在热耗散的能量（ＮＰＱ）更多一些，因而导致８ ９月雌株的有效光化学效率（Ｆｖᶄ／Ｆｍᶄ）低于雄株和金叶，但从抗性能力来讲，雌株可以通过增强热耗散减轻高光强的胁迫和生长抑制，因而具有比雄株和金叶更强的抗氧化能力，说明银杏在胁迫情况下，雌株较雄株有更强的抗逆性，前人研究结果也证明了这一点，雌株银杏比雄株银杏更抗衰老［１８］㊂银杏培育的主要目的之一是收获高产量和高黄酮含量的叶片，树龄㊁性别㊁环境条件㊁采收期都影响着黄酮成分和叶产量㊂前期有学者研究表明，２ ４年生的实生苗叶片黄酮含量最高，是叶用林培育的最适树龄［１９］㊂银杏叶最佳采叶期，山东地区为５ １０月［１９］，徐州地区以８月下旬采摘为宜［２０］，甘肃地区以１０ １１月较好［２１］㊂本研究中，３种银杏的槲皮素㊁山柰酚㊁异鼠李素及总黄酮含量１年中分别在４ ５月和９月达到高点，槲皮素的最高点在４ ５月，后三者的最高点都在９月，因此适宜采叶期在９月，基本与前人研究结果一致㊂在雌㊁雄株黄酮含量方面，有研究表明，徐州地区４ ５月叶片类黄酮含量雄株＞雌株，其他月份均为雌株＞雄株［２０］㊂嫁接的银杏树雌㊁雄株间叶片黄酮含量差异不显著［２２］，雌株和雄株之间的黄酮含量不存在显著差异［２３－２４］㊂但本研究中，雄株与金叶４８㊀第４期叶㊀威，等：雌㊁雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究银杏的黄酮成分在９月均高于雌株，且三者之间存在显著差异，因而雄株和金叶银杏更适合用于叶用林培育，这些结果与上述研究结果不一致，而与杨伟丽等［２１］的研究结果一致，这可能与银杏品种㊁树龄㊁环境㊁生长条件不同有关㊂邢世岩等［２５］认为雄株和雌株群体中都有优良叶用资源，但雄株内筛选出高产叶用品种的可能性更大㊂本研究中，雄株和雌株及金叶银杏在黄酮含量上出现的差异可能与光合色素及叶绿素荧光的差异有关㊂６ ８月雌株的叶绿素含量远高于雄株和金叶，光合性能也优于雄株和金叶，因而雌株更耐夏季的高温和缺水，即６ ８月雌株吸收的光能主要用于抵抗高光强等胁迫维持生长㊂黄酮等次生代谢物的产生与逆境有关，逆境条件有利于次生代谢物的合成［２６］，在６ ８月雄株和金叶的色素含量较低，光合性能下降，吸收的光能主要用于合成逆境胁迫物质包括黄酮类化合物来抵御高光强和水分胁迫㊂从叶绿素和黄酮的相关性来讲，雄株的叶绿素及类胡萝卜素与槲皮素之间存在极显著正相关，而与山柰酚呈显著负相关，与总黄酮和异鼠李素关系不密切；而雌株的类胡萝卜素与槲皮素及总黄酮，叶绿素ａ与总黄酮之间存在极显著正相关㊂可以看出类胡萝卜素与黄酮代谢关系更密切些㊂本研究中金叶银杏由于是芽变品种，嫁接后的叶色变化在４ ６月不同于雌㊁雄株，４ ６月的叶绿素含量均比雄株㊁雌株银杏低，导致金叶银杏在４ ６月的叶片呈金色，６ ７月是金叶银杏叶绿素快速增加的时期，也是金叶银杏由黄色转为绿色的关键时期，这些结果与相关研究［４－５，２７－２８］的结论一致㊂但到６月完成转色后，其光合㊁黄酮代谢的变化接近于雄株，其黄酮合成的能力高于雌株，因此金叶银杏是一个较为优良的变异品种，具有重要的研究和培育前景㊂综上所述，银杏在１年期内的生长㊁光合色素㊁叶绿素荧光及黄酮含量出现了不同的变化，从光合性能和抗逆性来讲，雌株较雄株和金叶银杏更耐夏季的高温和缺水，延迟叶片衰老，而雄株和金叶银杏黄酮含量高于雌株，在叶用方面更有价值㊂银杏叶的最佳采收期在９月㊂金叶银杏除了有重要的观赏价值，还有非常重要的经济价值，是具有开发潜力的新品种㊂参考文献（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）：［１］ＳＡＮＩＥＷＳＫＩＭ，ＤＺＩＵＲＫＡＭ，ＤＺＩＵＲＫＡＫ，ｅｔａｌ．ＭｅｔｈｙｌｊａｓｍｏｎａｔｅｉｎｄｕｃｅｓｌｅａｆｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．：ｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｌｅｖｅｌｓｏｆｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＧｒｏｗｔｈＲｅｇｕｌ，２０２０，９１（３）：３８３－３９６．ＤＯＩ：１０．１００７／ｓ１０７２５－０２０－００６１２－５．［２］陈学森，张艳敏，李健，等．叶用银杏资源评价及选优的研究［Ｊ］．园艺学报，１９９７，２４（３）：２１５－２１９．ＣＨＥＮＸＳ，ＺＨＡＮＧＹＭ，ＬＩＪ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｌｅａｆｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄｃｕｌｔｉ⁃ｖａｒｓｅｌｅｃｔｉｏｎｉｎＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ［Ｊ］．ＡｃｔａＨｏｒｔｉｃＳｉｎ，１９９７，２４（３）：２１５－２１９．［３］狄晶晶，冯凯，叶威，等．银杏雌㊁雄植株花芽分化后期及开花期间生理代谢的比较［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０２２，４６（４）：５９－６７．ＤＩＪＪ，ＦＥＮＧＫ，ＹＥＷ，ｅｔａｌ．ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｆｅｍａｌｅａｎｄｍａｌｅＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．ｔｒｅｅｓｄｕｒｉｎｇｌａｔｅｆｌｏｗｅｒｂｕｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｆｌｏｗｅｒｉｎｇ［Ｊ］．ＪｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃＥｄ），２０２２，４６（４）：５９－６７．ＤＯＩ：１０．１２３０２／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２１０１０３２．［４］王瑞敏，祝凌云，陈颖，等．金叶银杏硬枝扦插繁殖生根过程及其生根机制研究［Ｊ］．中南林业科技大学学报，２０２０，４０（５）：２８－３７．ＷＡＮＧＲＭ，ＺＨＵＬＹ，ＣＨＥＮＹ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｙｏｎｒｏｏｔｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓａｎｄｒｏｏｔｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｈａｒｄｗｏｏｄｃｕｔｔｉｎｇｓｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉ⁃ｌｏｂａ Ｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆ ［Ｊ］．ＪＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖＦｏｒＴｅｃｈｎｏｌ，２０２０，４０（５）：２８－３７．ＤＯＩ：１０．１４０６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７３－９２３ｘ．２０２０．０５．００５．［５］郁万文，曹福亮．黄叶银杏叶色发育及光合特性研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１１，３９（２５）：１５４１０－１５４１２，１５４９４．ＹＵＷＷ，ＣＡＯＦＬ．Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｎｌｅａｆｃｏｌｏｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏ［Ｊ］．ＪＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃＳｃｉ，２０１１，３９（２５）：１５４１０－１５４１２，１５４９４．ＤＯＩ：１０．１３９８９／ｊ．ｃｎｋｉ．０５１７－６６１１．２０１１．２５．２１８．［６］王改萍，张磊，姚雪冰，等．金叶银杏叶色变化特性分析［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０２０，４４（５）：４１－４８．ＷＡＮＧＧＰ，ＺＨＡＮＧＬ，ＹＡＯＸＢ，ｅｔａｌ．ＡｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｖａｒｉａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｇｏｌｄｅｎｌｅａｆＧｉｎｋｇｏ［Ｊ］．ＪＮａｎｊｉｎｇＦｏｒＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃｉＥｄ），２０２０，４４（５）：４１－４８．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２００３０４５．［７］ＬＩＷＸ，ＨＥＺＣ，ＹＡＮＧＳＢ，ｅｔａｌ．ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｌｉｂｒａｒｙｏｆｍｉＲＮＡｉｎｇｏｌｄ⁃ｃｏｌｏｕｒｅｄｍｕｔａｎｔｌｅａｖｅｓｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．［Ｊ］．ＦｏｌｉａＨｏｒｔｉｃ，２０１９，３１（１）：８１－９２．ＤＯＩ：１０．２４７８／ｆｈｏｒｔ－２０１９－０００５．［８］袁斌玲，王瑞敏，陈颖，等．ＮａＣｌ处理下茉莉酸甲酯对金叶银杏光合色素㊁抗氧化性及黄酮代谢的调控作用［Ｊ］．西北林学院学报，２０２０，３５（２）：６４－７１．ＹＵＡＮＢＬ，ＷＡＮＧＲＭ，ＣＨＥＮＹ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｍｅｔｈｙｌｊａｓｍｏｎａｔｅｏｎｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｉｇ⁃ｍｅｎｔｓ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｇｏｌｄｅｎ⁃ｌｅａｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｓｅｅｄｌｉｎｇｓｕｎｄｅｒｓａｌｉｎｉｔｙｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．ＪＮｏｒｔｈｗｅｓｔＦｏｒＵｎｉｖ，２０２０，３５（２）：６４－７１．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０２０．０２．０９．［９］ＷＵＤＭ，ＦＥＮＧＪＹ，ＬＡＩＭＬ，ｅｔａｌ．ＣｏｍｂｉｎｅｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｂｕｄａｎｄｌｅａｆｇｒｏｗｔｈｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒｉｍｐｒｏｖｅｓｌｅａｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｙｉｅｌｄｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ［Ｊ］．ＩｎｄＣｒｏｐｓＰｒｏｄ，２０２０，１５０：１１２３７９．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｉｎ⁃ｄｃｒｏｐ．２０２０．１１２３７９．［１０］李合生．植物生理生化实验原理和技术［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２０００．ＬＩＨＳ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆｐｌａｎｔｐｈｙｓｉｏ⁃ｌｏｇｉｃａｌｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＨｉｇｈｅｒＥｄｕｃａｔｉｏｎＰｒｅｓｓ，２０００．［１１］ＨＥＭ，ＳＨＩＤＷ，ＷＥＩＸＤ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｄｅｒ⁃ｒｅｌａｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎａｄａｐｔａｂｉｌｉｔｙｔｏｄｒｏｕｇｈｔｓｔｒｅｓｓｉｎｔｈｅｄｉｏｅｃｉｏｕｓｔｒｅｅＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ［Ｊ］．ＡｃｔａＰｈｙｓｉｏｌＰｌａｎｔ，２０１６，３８（５）：１－１４．ＤＯＩ：１０．１００７／ｓ１１７３８－０１６－２１４８－０．［１２］郑淼，郭毅，王丽敏．水分调亏对银杏幼苗根系生长发育和光合特性的影响［Ｊ］．山东农业大学学报（自然科学版），２０２１，５８。
银杏叶有效成分含量的影响因素
银杏叶有效成分含量的影响因素
银杏叶的有效成分受其不同来源的影响，有效成分含量差别很大。
其中影响黄酮类成分的主要因素为产地、采叶时间、树龄、雌雄、采叶部位及加工方式，影响内酯类成分的主要因素为产地、采叶时间、加工方式。
青岛三九九洲生物技术有限公司原料产地，位于全国闻名的"银杏之乡"——
山东郯城的万亩银杏林种植基地，郯城属暖、温带半湿润季风区，土壤湿润肥沃，年平均气温13.2℃，年均降水量843毫米，年均日照2425小时，无霜期206天，四季分明，气候宜人，盛产银杏。
有实验表明，银杏幼叶的总黄酮含量明显高于老树叶；雌树的6种黄铜总量高于雄树；同一棵树的同一枝条上，上部树叶的黄铜含量最高；银杏鲜叶收获后及时通风干燥、其中人工干燥的方式银杏叶质量最好。
年年康银杏叶精的原料均采用每年的6-9月采摘的3-
5年的雌树小苗叶，有效成分含量高。
且年年康银杏叶精的提取物直径在110-120纳米之间，实验表明，提取物的直径若低于该区间则很难提取出真正的黄铜成分，而高于该区间不能被人体吸收，年年康银杏叶精，采用先进的三级萃取技术，将银杏叶提取物的直径有效控制在110-
120纳米之间，保证了产品的高吸收性。
银杏是所有含有黄酮的植物中含有黄酮最多的植物，且银杏总黄酮为138种黄酮的组合，其效果明显区别于山楂、葛根中的单一黄酮。
千年典藏版：产品选用的银杏叶均采摘自500年以上的银杏树，由于树身存活的时间长，因此其树叶本身含有独特的长寿因子，年年康银杏叶精将这种特有长寿因子提取出来，与138种银杏总黄酮融合在一起，形成了有效成分浓度更高的浓缩版银杏叶精。
银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量分析
银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量分析吴竹;王秋萍;田漫漫;王黔阳;何珺【摘要】为分析银杏不同部位黄酮、内酯和银杏酸含量,采用高效液相色谱法测定其含量,研究其分布规律.结果表明:雌树不同部位中,叶的黄酮和内酯含量高于其他部位,外种皮中银杏酸含量高于其他部位;雄树不同部位中,叶的黄酮和内酯含量高于树枝,树枝的银杏酸含量高于叶.综上所述,雌雄银杏的不同部位黄酮、内酯和银杏酸的含量有一定的差异,应对其不同部位进行合理利用从而加快银杏产业进一步发展.%In order to analyse the content of flavonoids, terpene lactones and ginkgo acids in different parts of Ginkgo biloba, the content of these components were determined by the high performance liquid chromatography (HPLC).For female, the content of flavonoids and terpene lactones was higher in leaves than in other parts;and the content of ginkgo acid was higher in episperm than in other parts.For male, the content of flavonoids and terpene lactones was higher in leaves than in branches;and the content of ginkgo acid was higher in branches than in leaves.It is clear that different parts of female and those of male have different contents of flavonoids, terpene lactones and ginkgo acid.Therefore, different parts of Ginkgo biloba should be used rationally in order to accelerate the development of ginkgo industry.【期刊名称】《山地农业生物学报》【年(卷),期】2017(036)004【总页数】4页(P72-75)【关键词】银杏;黄酮;内酯;银杏酸;含量分析【作者】吴竹;王秋萍;田漫漫;王黔阳;何珺【作者单位】贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州大学药学院,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳 550025;贵州省生化工程中心,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】R284.1银杏(Ginkgo biloba L.)为银杏科、银杏属多年落叶乔木。
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雄
表 ２ 雌 雄 银 杏 叶 总 黄 酮 含 量 比 较
编 号 ｌ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １ ０
１ ． 雌 雄 银杏 叶总 黄 酮 的提 取 【 ３
３３ ＿８
３ ３３ ３６ ｌ１
３３ ３３ ．５ ．１
３３ －５
０１ ２ ０１９ ０１０ ０１ ８ ０１０ Ｏ１７ ０１８ Ｏ１７ ０１ ｌ ０１ ９ ９ ．８ ．９ ．８ ．９ ．８ ．８ ．８ ．９ ．８
吸 光 度 性 浓 度 （ ｈ Ｌ ｍｇｎ ） 含量（ ） ％ 吸 光 度
雌
Ｏ１ ８ Ｏ１ ７ ０１ ４ ０１ ６ Ｏ１ ４ ０１ ６ ０１ ５ ０１ ３ ０１７ ０１５ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ．９ ０３ ８ ０３ ６ Ｏ３ ｌ ０３ ５ Ｏ－ １ ０３ ５ ０３ ３ ０３ ０ ０３ ６ ０３ ３ ．３ ．３ －３ ．３ ３ ．３ ．３ ．３ ．３ ．３ ３
— —
—
— — —
塞 刻 度 试 管 中 ． 加 ５％亚 硝 酸 钠 溶 液 ０３ Ｌ， 先 。ｍ 摇 匀 ， 置 ６ｒｉ， 加 １ ％硝 酸 铝 溶 液 ０ ｍＬ 摇 放 ｎ再 ａ Ｏ ． ， ３ 匀 ， 放 置 ５ ｉ ， ４％氢 氧化 钠 溶 液 ４ Ｌ， 加 再 ａ ｒｎ加 ｍ 各 ６ Ｏ％乙 醇 定 容 至 １ｍＬ 放置 １ ｉ ， 波 长 ５ ０ ０ ， ５ｍ ｎ 在 １ ｌ 处 测 定各 试 管 中溶 液 的 吸 光 度 。 以 浓 度 为横 ｆ ｌ ｍ 坐 标 ， 光 度 为 纵 坐 标 ． 回归 方 程 ： 吸 得 Ｙ＝ １ ６ ５ ． １ｘ ７ ＋００ ０ ＺＯ９ ８ ． 性 关 系 良好 。 ．１ ３ Ｒ ＝ ．９ ５ ＿ 线
ｔ
３２ ．４
— —
表 １ 正 交试 验 设 计
处 理
Ｉ
２ ３ ４ ５ ６ ７
ｒ
提 取 时 间
】 １
ｌ １ ２ ２ ２ ３
一
ｐ Ｈ
Ｉ
— — —
温度
Ｉ
— —
液 料 比
Ｉ
２ ３ ｌ ２
２ ３ ２ ３ １ ３ ３ １ ２ ３
１
— —
２
１ 实 验 过程
１１ 芦 丁标 准 母 液 的制 备 ．
８ ９
３ ３
２ ３
３ ｌ
１ ２
精 确称取 干燥至恒重 的芦丁标 准品 ２ｍ ， ０ ｇ 用 ６ ％乙 醇 溶 解 并 定容 至 １ｍＬ容 量 瓶 ．摇 匀 ， ０ ０
摇 匀既 得 ２ ｇｍＥ的芦 丁 标 准 母 液 。 ｍ／ １ 芦 丁标 准 曲线 的 制 备 ． ２
酮的 含 量 。
【 键词】 关 雌雄 银 杏 叶 ； 总黄 酮 ； 交试 验 ； 取 工 艺 正 提
银 杏 为 雌 雄 异 株 ， 国 是 银 杏 的原 产 地 ， 长 期 的 演化 过 程 中形 中 在 成 了 丰 富 的雄 株 种 质 资 源 ， 此 进 行 银 杏 雄 株 和 雌 株 叶 片 总 黄 酮 含 量 因 分 析 ， 理 利 用 银 杏 种 间 资 源 意 义 重 大 。 银 杏 叶 中 黄 酮 类 化 合 物 的 对合 提取 率 直 接 决 定 银 杏 叶 的药 用 价值 ， 文 以银 杏 总黄 酮 的 提 取 率 为 指 本 标 对 银 杏 叶 提 取 物 的 提 取 和精 制 工 艺 进 行 研 究 ， 比较 雌 雄 银 杏 叶 总 黄 酮 含 量 ， 银 杏 叶 总 黄 酮 提取 体 系 优 化 。本 文 采 用 碱 提 法提 取 银 杏 叶 和 总黄 酮 。实 验 结 果 表 明 ： 性 银 杏 叶总 黄 酮 含 量 总体 上 大 于雌 性 银 杏 雄 叶总 黄 酮 的 含 量 ；雄 性 银 杏 叶 总 黄 酮 碱 提 法 的最 佳 提 取 工 艺 条 件 为 ： 提 取 时 间 ２５ ，Ｈ ｌ ， 取 温 度 ７ ℃ ， 料 比 １１ 。 结 论 ： 提 法 提 取 ．ｈ ＝ １提 ｐ Ｏ 液 ： ５ 碱 叶总 黄 酮 工 艺 简 单稳 定 、 本 较 醇 提 法 低 ， 法 合 理 可 行 ． 以运 用 大 成 方 可 规 模 工 、 化 生 产 Ｉ
科技信息
。科教前 沿０
Ｓ Ｉ Ｎ Ｅ＆Ｔ Ｃ Ｎ Ｌ ＹＩＦ Ｒ ＣＥ Ｃ Ｅ Ｈ Ｏ ＯＧ Ｎ Ｏ ＭＡＴＯ ＩＮ
２１ ０ １年
第１ ７期
雌雄银杏叶总黄酮比较和优化体系探究
陈 彪 杨兴姣
（ 溪师 范 学院 资源环 境 学院 玉
云南
玉溪
６ ３０ ） ５ １ ０
【 摘 要】 了正确使 用银 杏种 间资源 ， 为 利用碱提 法分别对雌雄银杏 叶（ 十份 ） 各 总黄酮的进行比较 ； 了筛选雄性银 杏叶最佳碱提 法提取 为 工 艺 ， 用 正 交设 计 实验 ， 察 了提 取 时 间 、Ｈ、 取 温 度 、 料 比 四 个 因素 对雄 性银 杏 叶 总 黄 酮 碱提 法 工 艺的 影 响 ， 用 分光 光 度 法 测 定 总黄 利 考 ｐ 提 液 并
性 浓度 （ ￣ Ｌ ｍ ｍ）
含量 （ ％）
０３ ８ ０ ２ ０３４ ０ ２ Ｏ３４ Ｏ １ Ｏ ２ Ｏ３９ ０ ２ ０ ２ ． ． ３ － ． １ － － ９ ３ １ ＿ｌ ． ６ ． ３ ２ ３ ２ ３ ２ ３ ３ ３
＿
— —
ｒ
— —
３２ ．８
３２ ３２ ３２ ．３ ．４ ．ｌ