银杏叶总黄酮提取工艺
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中黄酮类化合物是其主要有效成分之一。
因此，提取和制剂工艺的研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
一、黄酮类化合物的提取工艺1.溶剂提取法溶剂提取法是目前应用最广泛的提取方法之一。
常用的溶剂有乙醇、乙醚、丙酮等。
其中，乙醇提取法是最为常用的一种方法。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入乙醇中，浸泡一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
2.超声波提取法超声波提取法是一种新兴的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用超声波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
3.微波辅助提取法微波辅助提取法是一种快速高效的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用微波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
二、黄酮类化合物的制剂工艺1.胶囊剂胶囊剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，填充进胶囊中，再进行封口，即可制成胶囊剂。
2.片剂片剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，压制成片状，再进行包衣，即可制成片剂。
3.口服液口服液是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、吸收快。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，加入适量的溶剂，搅拌均匀后进行过滤、灭菌，即可制成口服液。
总之，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
在提取工艺方面，溶剂提取法、超声波提取法、微波辅助提取法等均有应用；在制剂工艺方面，胶囊剂、片剂、口服液等均是常见的制剂形式。
未来，随着科技的不断进步，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺也将不断完善，为人们的健康保驾护航。
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
验 " 研究了浸取温度 $ 乙醇含量和固液质量比对黄酮类化合物提取率的影响 % 结果显示温 度是影响提取率的主要因素 " 最佳工艺为浸取温度 K8 Q " 乙醇的体积分数为 F8X 和固液 质量比 >YF "银杏叶中黄酮类化合物的浸出率可达到 V!U%X % 关键词 银杏叶 & 黄酮类化合物 & 乙醇 & 提取 中图分类号 5Z!%DU
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺
常规提取法的溶剂一般选用水，醇水溶液，酮 水溶液。醇酮对黄酮成分提取率相近，而水的提 取率比较低，考虑到提取物的收率，提取溶剂的 成本以及操作安全陛，使用乙醇水溶液比酮水溶 液和水更合适。
恒压滴液漏斗法
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1、向恒压滴液漏斗中加入10克银杏叶粉末。 2、向烧瓶中加入200ml70%乙醇和适量沸石。 3、冷凝回流，水浴加热，进行连续萃取。 4、恒压滴液漏斗中的银杏叶粉末逐渐变白，烧瓶中的液 体变为绿色。 5、将萃取液进行减压蒸馏，得银杏浸膏粗产物，称重， 计算产率。 6、在500ml烧杯中，将银杏浸膏粗产物加250ml去离子水， 搅拌均匀。 7、再将此溶液转移至分液漏斗（大于350ml）中，分别用 60ml二氯甲烷萃取三次。合并萃取液。 8、用无水硫酸钠干燥。用旋转蒸发器蒸去二氯甲烷，蒸 馏剩余物为黄酮提取物。经干燥后称重，计算产率。
• 2-苯基色原酮分子结 构图
黄酮类化合物的六种结构式：
黄酮类化合物的理化性质
• 黄酮类化合物除少数游离外，大多与糖结合成苷。糖基多连在C8或C6 位置上，连接的糖有单糖（葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等），双糖（槐 糖、龙胆二糖、芸香糖等）、叁糖（龙胆三糖、槐三糖等）与酰化糖 （2-乙酰葡萄糖、吗啡酰葡萄糖等） • 黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定型粉末。 • 黄酮苷元一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚 等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性 相应加大，而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、 甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等 有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性，故可溶于碱 性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。有些黄酮类化合物在紫 外光（254nm或365nm）下呈不同颜色的荧光，氨蒸汽或碳酸钠溶液处 理后荧光更为明显。多数黄酮类化合物可与铝盐、镁盐、铅盐或锆盐 生成有色的络合物。
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
响应面分析法优化银杏叶黄酮类化合物的提取工艺
工艺技术响应面分析法优化银杏叶黄酮类化合物的提取工艺伦 琦，乔镜澄*，杨江南，刘海涛，武湘姝，文 文（天津天狮学院 食品工程学院，天津 301700）摘 要：以乙醇为浸提液，利用微波萃取辅助超声法提取银杏叶中总黄酮类化合物，通过单因素试验以及响应面试验设计优化提取工艺。
结果表明，黄酮类化合物的最佳提取条件为乙醇浓度63.15%、超声时间2.65 min、液料比116∶1（mL∶g）、微波时间3.83 min，该条件下银杏叶中黄酮化合物提取量为28.36 mg·g-1。
关键词：银杏叶；黄酮；响应面分析法；工艺优化Study on Optimization of Extraction Technology by Response Surface Methodology of Flavonoids from Ginkgo biloba leaves LUN Qi, QIAO Jingcheng*, YANG Jiangnan, LIU Haitao, WU Xiangshu, WEN Wen(Food Engineering Department Tianjin Tianshi College, Tianjin 301700, China) Abstract: The total flavonoids in Ginkgo biloba leaves were extracted by microwave extraction-assisted ultrasonication using ethanol as the extracting solution, and the extraction process was optimized by single-factor test and response surface test design. The results showed that the optimum extraction conditions for flavonoids were 63.15% ethanol concentration, 2.65 min ultrasonic time, 116∶1 (mL∶g) liquid-to-material ratio and 3.83 min microwave time, and the extraction amount of flavonoids in Ginkgo biloba leaves was 28.36 mg·g-1 under these conditions.Keywords:Ginkgo Biloba leaves; flavonoid; response surface methodology; optimization银杏叶提取物复杂的化学成分中主要起药理活性作用的是黄酮类物质，其黄酮种类多达40种。
银杏叶中总黄酮提取工艺研究
０． Ｏ・
宋 ０ ． 督
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２ １２ 标 准 曲 线 的 绘 制 分 别 配 制 ６种 芦 丁 标 ．．
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准溶 液 于 ５ ０ ｎ 波 长 下 测定 吸 光 度 ， １ ｍ 乙醇 的体 积分 数为 ６ 的试 剂为空 白参 比液 ， 验 数据 见 ０ 试
表 ２ 。
分 析纯 。
１ ２ 试 验 方 法 ．
大， 而水 又将 降低水 提 液表 面 张力 ， 摇 后产 生持 振
久性 泡沫 而影 响 分离 ， 们 则 采用 不 同浓 度 的 乙 我
主要有 ：
１２ １ 总黄 酮含 量 的测 定 ． ．
醇 水 溶 液 提 取 所 测 样 品 中 的 银 杏 叶 黄 酮 。 根 据 银 杏 叶 中 主 要 活 性 成 分 黄 酮 的 特 性 ， 照 药 舆 原 有 依 的 提 取 方 法 ， 用 加 热 回 流 提 取 ， 单 因 素 试 验 的 采 在 基础 上 ， 出 影 响 因素 主要 有 ： 醇 的体 积 分数 、 得 乙 温 度 、 液 质 量 浓 度 、 取 时 问 。 采 用 Ｉ （ 正 料 提 ３） 交 表 优 化 提 取 条 件 ， 点 考 察 上述 四个 素 ， 总 重 以
仪 器 ：２ ７ １型 分 光 光 度 计 、 氏 提 取 器 、 分 索 万
之 一 电子天 平 。
１ ２ ２ 试验 设计 黄 酮类 化合 物 的提取 、 离通 ．． 分
常 以 甲醇 或 水 为 主 要 提 取 剂 ， 由 于 甲 醇 其 毒 性 但
芦 丁标 准 品 ： 化试剂 ， 海试剂 二 厂 ； 生 上 乙醇 ：
酮 含量 。
银 杏 叶 ： ０ ９年 ９月 采 于 陕 西 杨 凌 ， 龄 为 ２０ 树 ｌ ， ０ａ 每次采 收 的银 杏叶 都及 时放 人 ６ 一７ Ｏ Ｏ℃ 的 干 燥箱 中 干燥 ２ ， 粉 碎 装 人 广 口瓶 ， 处 保 ４ｈ 经 暗 存， 供提 取 、 测定 黄酮 用 。 ，
银杏叶提取黄酮及分离纯化
银杏叶提取黄酮及分离纯化组员：李佳辉、黄埔、赵超武一、实验目的1.掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取2.掌握紫外分光光度计的应用，以及相关溶液的配置3.学会自主设计实验，培养团队合作精神二、实验原理⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）目前银杏叶黄酮的提取方法主要有：溶剂提取法、超临界流体萃取法（SFE法）、高速逆流色谱技术提取法（HSCCC)微波提取法、超色波提取法、酶提取法、分子烙印技术。
因溶剂提取法操作简单，所需试剂廉价易得，故通常使用此法来进行大规模生产。
其工艺流程如下：银杏叶—→粉碎—→NaOH-60%乙醇回流提取—→离心—→过滤—→滤液收集—→二次醇提—→合并两次滤液—→树脂吸附—→脱吸—→浓缩—→干燥—→提取物由于银杏叶黄酮中的类黄酮主要为芦丁，故用芦丁为对照物绘制标准曲线，并采用分光光度法进行测定。
三．实验材料及器材1.材料酸银杏叶、芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、95％乙醇、磷酸氢二钠、磷二氢钠、D101大孔吸附树脂、盐酸2.相关溶液的配制和树脂预处理0.20mg／mL芦丁标准溶液（500mL）、5％NaNO2（500mL）、10％AI(NO3)3（500mL）、1mol／LNaOH 、0.4mol／LNaOH（500mL）、0.4mol ／L HCl(500mL)、30%乙醇（500mL）30%乙醇（1）D101树脂预处理(500g)：商品树脂均残留惰性溶剂，故使用前根据应用需要，必须进行不同深度的预处理，在提取器内，加入高于树脂层10-20厘米的乙醇浸泡3—4小时，然后放净洗涤液，为一次提取过程。
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［基金项目］ 济南市科技局高校院所自主创新计划项目（编号： 201004032）
［通 讯 作 者 ］ 李 峰 （1957－ ），男 ，山 东 安 丘 人 ，教 授 ，博 士 研 究 生 导 师，研究方向：中药质量控制研究，E－ mail：ly0123＠hotmail．com。
水平
1 2 3
表1 溶剂浓度 A
（％） 60 70 80
正交试验考察因素表
料液比 B
提取时间 C （t/h）
提取次数 D
1∶40
1
1
1∶50
2
2
1∶60
3
3
360 nm；进样量：20 μL；用高效液相色谱 法 测 定 ，以 甲醇 － 0．2％磷酸（52∶48，V/V）为流动相，在 360 nm 处 进 行 测 定 ［7］，以 槲 皮 素 的 塔 板 理 论 数 不 少 于 2 500， 测定总黄酮的含量。
第 36 卷 第 5 期 201220年12 9年月9 月
山东中医药大学学报
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM
Vol．36，No．5 第 36 S卷ep第.2051期2
银杏叶总黄酮提取工艺研究
王 心 1，李 峰 2
（1．山东中医药大学 2009 年级硕士研究生，山东 济南 250355； 2．山东中医药大学药学院，山东 济南 250355）
［摘要］ 目的：筛选银杏叶总黄酮最佳提取工艺，以银杏叶总黄酮的提取率为指标进行研究。 方法：运用正交设
计法，系统考察料液比、乙醇浓度、提取次数和提取时间 4 个因素对银杏叶总黄酮提取工艺的影响，并用高效液相
法 （HPLC）测定银杏叶总黄酮的含量。 结果：以乙醇浓度 80％，料液比 1∶50，提取 1 次，每次提取 1 h 为最佳提取条件。
峰 面 积 （A）
1600000 1400000 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000
0
0
0．1
0．2
0．3 0．4
浓 度 （ρ/μg·mL－1）
449
2012 年 9 月
山东中医药大学学报
第 36 卷第 5 期
素 回 归 方 程 为 A＝3×106C－ 98967（r＝0．9993）；异 鼠 李素回归方程为 A＝2×106C－ 52648（r＝0．9996）。 在 0．06～0．36 mg 范围内，槲皮素、山柰素、异鼠李素的 线性关系良好。 见图 1～3。
总黄酮醇苷含量 ＝（槲皮素 ＋ 山柰素 ＋ 异鼠李 素）×2．51 2．3 溶液的制备 2．3．1 银杏叶提取物的制备 将采摘的新鲜银杏叶 自然晾干，粉碎后过 40 目筛。 取银杏叶粉末 10 g 置 于 1 000 mL 圆底烧瓶中，加不同浓度乙醇加热回流 提取，过滤。 滤液浓缩，回收乙醇至无醇味，减压干 燥，即得。 2．3．2 供试品溶液的制备 将干燥后所得的粉末， 精密称取 35 mg，加甲醇 － 25％盐酸（4∶1）的混合溶液 25 mL，至水浴中恒温加热回流 30 min，迅速冷却至 室温，转移至 50 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度， 摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 2．3．3 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素 1．65 mg、 山柰素 1．57 mg、异鼠李素 1．18 mg，置于 50 mL 容量 瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度为每 1 mL 中含有 30，30，20 μg 的标准储备液。 2．4 标准曲线的 制备 精密吸取对照品溶液 100， 200，400，500，600 μL 分 别 置 于 编 号 1、2、3、4、5 号 的 1 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。 以满 样进量法精密吸取 20 μL 进样，在波长 360 nm 处测 定峰面积。 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得槲 皮 素 回 归 方 程 ：A＝4×106C－ 90933（r＝0．9996）；山 柰
结论：该方法操作简便，结果准确可靠，成本低，毒性小，适用于工业化生产。
［关键词］ 银杏叶；总黄酮；正交设计；高效液相色谱法
［中图分类号］ R284．2
［文献标识码］ A
［文章编号］ 1007－ 659X（ Nhomakorabea012）05－ 0449－ 03
银杏叶（Ginkgo biloba L．）为银杏叶科银杏叶属 植物银杏干燥的叶。 其主要成分为银杏酸、银杏内 酯 和 黄 酮 类 等 化 合 物 ，其 中 总 黄 酮 的 含 量 最 高 ［1－3］。 银杏叶中黄酮类化合物具有保护血管、防止动脉硬 化、扩张毛细血管、活化大脑等功能，用于治疗心绞 痛、冠心病、高血压、支气管等疾病。 此外，在食品工 业上也应用广泛，可用作抗氧化剂、天然添加剂和功 能性食品的原料。 其提取方法常见报道，本实验经 参 考 相 关 文 献 ［4－6］，采 用 乙 醇 为 溶 剂 ，通 过 正 交 设 计 方法，考察提取物中总黄酮的含量，以确定银杏叶的 最佳提取工艺，为含有银杏叶提取物的饲料添加剂 建立相应质量标准提供可靠依据。 1 仪器与试剂 1．1 仪器 旋转蒸发器 RE－ 52AA，SHZ－ D（Ⅲ）循环 水式真空泵，电子天平 FA2004，电热恒温水浴锅，超 声 波 清 洗 器 KQ2200 ， 减 压 干 燥 器 ，HSⅢ－ 日 立 L－ 2000 高效液相色谱仪，抽滤装置，万能粉碎机等。 1．2 试剂 银杏叶，槲皮素、山柰素、异鼠李素标准 品（中国食品药品检定研究院），无水乙醇（分析纯）、 甲醇（色谱纯、分析纯），磷酸水溶液，纯净水。 2 研究方法 2．1 研究因素及方案 参考相关文献研究结果，确 定了影响总黄酮提取率的 4 个考察因素，分别为溶 剂浓度 A、料液比 B、提取时间 C、提取次数 D，正 交试验考察因素见表 1。 考虑各种影响因素，选择 L9（34）的正交试验方案。 2．2 色 谱 及 检 测 条 件 色 谱 柱 ：Agilent ZORBAX SB－ C18；（4．6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：甲醇 － 0．2％ 磷 酸 （52/48，V/V）； 流 速 ：1．0 mL·min－1； 检 测 波 长 ：