溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告
溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告
溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告小组成员：周璟、胡静、左兵华、刘云飞2014年5月一、实验目的i）掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取ii）掌握紫外分光光度计的应用，以及origin软件绘图的基本操作iii）学会自主设计实验，培养团队合作精神二、实验原理⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用; 并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm （左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯一比尔定律（即A=kbc ）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）三、实验药品及仪器⑴药品：银杏叶（阴干碾碎储藏备用），芦丁，无水乙醇，亚硝酸钠，氯化铝和氢氧化钠；⑵仪器：电子天平，旋转蒸发仪，索氏提取器，uv-1800 型紫外分光光度计，研钵，比色皿，容量瓶（10ml*6,50ml*1,100ml*2 ），移液管，量筒，烧杯，玻璃棒。
四．实验步骤I）配制60%的乙醇溶液（黄酮同时具有水溶和油溶性）。
II）准确称取10g银杏叶粉末置于索氏提取器中，加入60%的乙醇溶液10ml，回流提取3h，然后用旋转蒸发仪浓缩并回收乙醇溶液，抽滤得到银杏叶黄酮粗提物。
再用60%的乙醇定容到100ml。
皿）芦丁标准液的配置：准确称取芦丁标准品0.005g,用60%的乙醇溶液加热溶解，并转移到50ml 容量瓶内用乙醇溶液定容，摇匀，得质量浓度为0.1mg/ml 的芦丁标准液。
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究
银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究银杏叶是一种常见的中药材，具有多种药理作用，其中黄酮类化合物是其主要有效成分之一。
因此，提取和制剂工艺的研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
一、黄酮类化合物的提取工艺1.溶剂提取法溶剂提取法是目前应用最广泛的提取方法之一。
常用的溶剂有乙醇、乙醚、丙酮等。
其中，乙醇提取法是最为常用的一种方法。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入乙醇中，浸泡一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
2.超声波提取法超声波提取法是一种新兴的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用超声波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
3.微波辅助提取法微波辅助提取法是一种快速高效的提取方法，其优点是提取效率高、提取时间短、操作简便。
其具体操作步骤为：将银杏叶粉末加入水中，用微波处理一定时间后，过滤得到提取液，再用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到黄酮类化合物。
二、黄酮类化合物的制剂工艺1.胶囊剂胶囊剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，填充进胶囊中，再进行封口，即可制成胶囊剂。
2.片剂片剂是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、稳定性好。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，压制成片状，再进行包衣，即可制成片剂。
3.口服液口服液是一种常见的制剂形式，其优点是服用方便、剂量准确、吸收快。
其制剂工艺为：将黄酮类化合物与辅料混合均匀，加入适量的溶剂，搅拌均匀后进行过滤、灭菌，即可制成口服液。
总之，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺研究对于银杏叶的开发和利用具有重要意义。
在提取工艺方面，溶剂提取法、超声波提取法、微波辅助提取法等均有应用；在制剂工艺方面，胶囊剂、片剂、口服液等均是常见的制剂形式。
未来，随着科技的不断进步，银杏叶中黄酮类化合物的提取和制剂工艺也将不断完善，为人们的健康保驾护航。
银杏叶中黄酮的提取分离及测定1
四、实验步骤
3、测定：
(1)标准曲线的绘制： 精确称取芦丁标准样品50.0mg，置 于50mL烧杯中，加少量70%乙醇使之完全溶解，转入50mL容 量瓶中，再用70%乙醇定容至刻度，摇匀，得1.0mg/mL的芦 丁标准溶液，再分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL芦 丁标准溶液置于 50mL 容量瓶中，按照下述方法配置显色溶液； 各 加 70 % 乙 醇 使 成 2 5mL ，然 后分别加入 5%N a N O2 溶液 1.5mL ，摇匀，放置 6min 后，再加 10%Al （ NO3 ） 3 溶液 1.5mL,摇匀，放置6min后，加NaOH溶液20mL,最后用蒸馏水 稀释至刻度（ 50mL ），摇匀，放置 15min 后，以不加芦丁的 试剂为空白，用紫外光分光光度计测定510.0nm处的吸光度。 以浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得到回 归方程。
四、实验步骤
1、粗提物： 称取干燥和粉碎的银杏叶粉末 50克，装入索氏提取器 的滤纸套袋中，在500ml圆底烧瓶内加入250ml60%乙醇， 用65-80℃水浴加热。连续提取3h左右，等叶子颜色变浅 可停止加热。待在虹吸管内冷凝液刚落下时，立即停止加 热，改成旋转蒸发器，减压蒸去溶剂即得棕黑色的银杏浸 液-液萃取法： 在500mL烧杯中，将银杏浸膏粗产物 加250mL去离子水，搅拌均匀，再将此溶液转移至分液漏 斗中，用 60mL 二氯甲烷萃取三次，取下层液，合并萃取 液。用无水NaSO4干燥。用旋转蒸发器蒸去二氯甲烷，蒸 馏剩余物为黄酮提取物。经干燥后称重，计算产率。
三、化学药品及仪器
1、化学药品 乙醇（20%、60%、70%） 二氯甲烷 无水硫酸钠 氢氧化钠溶液（0.5mol/L） 盐酸溶液（0.5mol/L） 银 杏叶粉末
银杏叶中黄酮类化合物提取研究
编号：（）字号本科生毕业设计（论文）题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究姓名：学号：班级：二〇一一年六月中国矿业大学本科生毕业设计姓名：学号：学院：材料科学与工程学院专业：材料科学与工程设计题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究专题：指导教师：职称：二O一一年六月徐州中国矿业大学毕业设计任务书学院材料科学与工程专业年级任务下达日期：2011年3月1日毕业设计日期：2011年3月1日至2011年6月15日毕业设计题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究毕业设计主要内容和要求：银杏叶中除含有黄酮类化合物外，还含有大量的蛋白质、鞣质、糖类和多酚类等水溶性物质。
黄酮类化合物在有机溶剂中溶解度较高，可以利用有机溶剂对黄酮类化合物进行提取。
研究表明，实验条件和工艺参数对于银杏中的黄酮类化合物的提取率具有显著的影响。
本论文主要研究了银杏叶黄酮类化合物的工艺参数，讨论试验结果得出最佳的提取工艺。
毕业设计任务如下：1 查阅有关国内外文献资料，了解银杏的营养价值，学习银杏中有关黄酮提取的研究现状和常用的提取方法，具体研究黄酮类化合物的有机溶剂萃取方法。
完成开题报告和毕业论文的综述部分（至少30篇文献，其中英文文献不少于5篇）。
1）了解银杏的历史，营养价值，药用价值。
2）了解银杏应用的历史，应用现状，和银杏的应用发展前景。
3）学习提取银杏中黄酮类化合物的常用方法，研究现状和前沿的研究方向。
4）研究本课题的目的和意义。
2 根据查阅文献结果，确定具体采用的实验方法，规划好实验流程做好实验设计。
购买实验所需仪器和药品，对实验结果进行分析总结，1）根据所查文献，设计实验方案，根据方案确定实验流程。
2）购买实验所需的药品和实验仪器，根据拟定的实验方案进行尝试性实验。
3）研究不同溶剂浓度，浸取温度，料液比，浸取温度对黄酮产量的影响。
4）对于通过实验得到的黄酮进行标定，得出最佳的实验方案。
3 翻译一篇与本课题密切相关的英文文献。
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
1、实验材料
银杏叶：采集于健康无病虫害的银杏树，清洗干净后晾干备用。
Hale Waihona Puke 2、提取方法将清洗晾干的银杏叶粉碎成细粉，称取一定量的细粉加入到80%乙醇溶液中， 在60℃下进行回流提取，每次提取时间为1小时，提取3次。将提取液过滤，回 收乙醇，并加入适量水稀释至适当浓度备用。
3、纯化方法
采用大孔吸附树脂法进行纯化。将备用液通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗 脱液接近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并加入适量水稀释 至适当浓度备用。
参考内容
引言
银杏叶是一种具有多种生物活性的天然植物，其提取物中含有丰富的黄酮类化 合物，如儿茶素、黄酮醇、黄烷醇等。这些化合物具有显著的抗氧化、抗炎、 抗肿瘤等生物活性。因此，研究银杏叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化性能具有 重要意义。本次演示旨在探讨银杏叶总黄酮的提取纯化方法及其抗氧化性能。
材料与方法
4、抗氧化性能测定
采用DPPH自由基清除法测定抗氧化性能。取适量纯化后的银杏叶总黄酮溶液与 等体积的DPPH溶液混合，室温下放置30分钟，在517nm处测定吸光度A1。同时 以无水乙醇为空白样品的吸光度A0进行对照。以Vc为阳性对照。根据公式：清 除率=（A0-A1）/A0×100%，计算银杏叶总黄酮对DPPH自由基的清除率。
结论
本研究成功地探索了一种高效提取纯化银杏叶总黄酮的方法，并对抗氧化性能 进行了研究。实验结果表明，采用80%乙醇回流提取和过大孔吸附树脂纯化可 以得到高纯度的银杏叶总黄酮，并且对DPPH自由基具有较强的清除作用。这一 发现为开发高效安全的抗氧化药物提供了新的思路和方法。
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银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
01 引言
03 研究目的 05 结果与讨论
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定引言银杏（Ginkgo biloba）是一种有着悠久历史的珍贵中药材，是我国特有的植物，广泛分布于我国的南北各地。
银杏叶的营养成分非常丰富，其中包含一系列的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种保健作用，对人体健康非常有益。
本文的研究目的是提取花果山银杏叶中的黄酮化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）对其进行测定。
材料与方法实验材料•花果山银杏叶•甲醇•氯仿•石油醚•水•醋酸实验方法提取黄酮类化合物1.将花果山银杏叶晾干、研磨成细粉末，过筛备用2.将10克银杏叶粉末加入250毫升甲醇中，并放置在磁力搅拌器上，加热回流2小时。
过滤，收集过滤液。
3.用氯仿提取黄酮类化合物：将收集过滤液加入等体积的水中，加入等体积的氯仿，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的氯仿提取液，重复 3 次，合并氯仿提取液。
4.用石油醚洗涤：将氯仿提取液加入等体积的石油醚中，轻轻摇匀，放置 5min 后分层，收集上层的石油醚洗涤液，重复 3 次，合并石油醚洗涤液。
5.用醋酸洗涤：将石油醚洗涤液加入等量的冷醋酸中，放置 10min ，常规少量收集悬浊液，过滤，收集上清液。
6.用旋转浓缩仪将上清液旋干，得到提取物。
HPLC测定1.将提取物溶解于甲醇中，过滤，取液层。
2.取20微升溶液，注满进样器，进样，并进行分离检测。
使用AgilentZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%醋酸水，梯度洗脱，检测波长设置为280nm，流速为1ml/min。
3.计算黄酮化合物的含量。
结果与分析通过上述实验方法，成功提取了花果山银杏叶中的黄酮类化合物，提取率为2.82%。
使用HPLC对提取物进行了测定，得到的结果如下表所示：序号黄酮化合物名称相对保留时间含量（mg/g）1 槲皮素0.38 4.952 云南柿皮素0.45 3.183 杨梅素0.51 2.794 紫草素0.63 1.535 芦丁0.83 4.026 视黄醇 1.05 0.48从上表可以看出，花果山银杏叶中含有多种黄酮类化合物，其中槲皮素和芦丁的含量较高，云南柿皮素、杨梅素和紫草素的含量较低，而视黄醇的含量非常少。
银杏叶中有效成分黄酮的研究
银杏叶中有效成分黄酮的提取研究及黄酮的检验和分析姬晨辉（内蒙古农业大学理学院内蒙古呼和浩特010018）摘要：银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采取乙醇提取总黄酮的方法，用分光光度法测定总黄酮的含量。
关键词：银杏叶总黄酮乙醇含量测定Abstract: Ginkgo biloba is our country's endemic plants, also known as maidenhair tree. Ginkgo biloba is the oldest Mesozoic relict plant Ginkgo biloba dried leaves. Ginkgo has gymnosperms living fossil. According to the "Compendium of Materia Medica" records, ginkgo fruit with convergence lung asthma, only enuresis, vaginal discharge effect. In medicine has a high value in use. Ginkgo biloba extract organic solvent extraction method, water extraction, dilute alkali or alkaline aqueous alcohol extraction, supercritical extraction, ultrasonic extraction, enzymatic and so on. This paper adopts ethanol extract flavonoids method, using spectrophotometric determination of total flavonoids.Key word s: Ginkgo biloba Flavonoids Ethanol Determination1 材料与方法1.1 试验材料银杏叶采集于自然生长的银杏树叶、75%酒精、石油醚、旋转蒸发器、丙酮、4～5碳烷基醇、醋酸酯1.2 试验方法1.2.1 银杏叶总黄酮提取率计算方法银杏叶总黄酮提取率（%）=提取液中心黄酮的重/提取所用银杏叶中总黄酮含量*100%。
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溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告
小组成员：周璟、胡静、左兵华、刘云飞
2014年5月一、实验目的
ⅰ）掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取
ⅱ）掌握紫外分光光度计的应用，以及origin软件绘图的基本操作ⅲ）学会自主设计实验，培养团队合作精神
二、实验原理
⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用；
⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm;
⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因
为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。
其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。
先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。
显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二
酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。
（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应）
三、实验药品及仪器
⑴药品：银杏叶（阴干碾碎储藏备用），芦丁，无水乙醇，亚硝酸钠，氯化铝和氢氧化钠；
⑵仪器：电子天平，旋转蒸发仪，索氏提取器，uv-1800型紫外分光光度计，研钵，比色皿，容量瓶（10ml*6,50ml*1,100ml*2），移液管，量筒，烧杯，玻璃棒。
四．实验步骤
Ⅰ）配制60%的乙醇溶液（黄酮同时具有水溶和油溶性）。
Ⅱ）准确称取10g银杏叶粉末置于索氏提取器中，加入60%的乙醇溶液10ml，回流提取3h，然后用旋转蒸发仪浓缩并回收乙醇溶液，抽滤得到银杏叶黄酮粗提物。
再用60%的乙醇定容到100ml。
Ⅲ）芦丁标准液的配置：准确称取芦丁标准品0.005g，用60%的乙醇溶液加热溶解，并转移到50ml容量瓶内用乙醇溶液定容，摇匀，得质量浓度为0.1mg/ml的芦丁标准液。
Ⅳ）分别吸取上部配制的母液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml于6只10ml容量瓶中摇匀，先加入5%的亚硝酸钠0.5ml摇匀，静置6min，再加入10%的氯化铝溶液0.31ml，摇匀，静置6min，再加入4%的氢氧化钠溶液4ml，用60%的乙醇溶液定容到10ml，放置20min。
其中，加入
0.0ml芦丁的溶液为空白参比组。
Ⅴ）在紫外分光光度计上先在比色皿上加空白溶液，调零。
将上述6组溶液分别放到比色皿中，对其扫描，观察得到的色谱图并找到其最大吸收峰，记录其波长，实际测得的波长为516nm。
Ⅵ）在紫外分光光度计上，用516nm波长扫描各组溶液并测其吸光度，对应其芦丁的质量浓度使用origin做标准曲线，并得出其线性回归方程。
Ⅶ）上组中空白参比液保留。
取银杏样品液1ml于10ml容量瓶中，按步骤Ⅴ）中配制芦丁标准液的方法配制黄酮溶液，在分光光度计最大波长516nm处测定所配制的黄酮溶液的吸光度，代入线性回归方程，算出黄酮提取液中黄酮的质量浓度。
Ⅷ）用该式计算产率：
η=（M黄酮/M样品）*100%
五．数据处理与计算
Ⅰ）将标准溶液五组吸光度—浓度的值以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，用origin软件进行线性拟合
0.01 0.4058
0.02 0.4067
0.03 0.4075
0.04 0.4084
0.05 0.4092
Ⅱ）得到的曲线为
Y:吸
光度
X ：浓度 其线性回归方程为：Y=0.40497+0.085X
线性相关系数：R=0.99979
其中Y 为吸光度，X 为质量浓度（g/l ）
Ⅲ)产率的计算
经检测，所配置的黄酮标准液吸光度为0.6197，带入得到的线性回归方程：
Y=0.40497+0.085X
解得：X=2.53(g/l)
由于配置了100ml 溶液，样品取量为10g ，易得黄酮含量为0.253g ，即25.3mg/g ，则产率为:
η=（M 黄酮/M 样品）*100%=2.53%。